CN108464313A - 一种植物源杀菌剂的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种植物源杀菌剂的制备方法，其具体包括以下步骤：柠檬精油提取：将脱脂柠檬皮粉中加入正己烷，浸泡，蒸馏，干燥，即得柠檬精油；苦楝素制备：将苦楝粉放入索氏提取器中，加入乙醇溶液，超声提取，提取液浓缩后萃取，蒸馏，干燥即得苦楝素；植物源杀菌剂制备：取柠檬精油、苦楝提取物、茶皂素、皂荚甙，充分混合均匀，即得植物源杀菌剂。有益效果为：本发明杀菌剂的制备方法简单可行，具有生产周期短、得率高、有效成分不易被破坏、生物活性高等优点，制得的杀菌剂能达到更好的杀菌、抗菌、抑菌的协同效果。

Description

一种植物源杀菌剂的制备方法

技术领域

本发明涉及生物农药技术领域，特别是涉及一种植物源杀菌剂的制备方法。

背景技术

我国是一个农业大国，农业一直是全民经济的主要保障，提高农业生产水平、保护农业生态环境，与发展农药行业有密切相关。农药主要是通过控制农作物的病虫害及杂草来保障着农作物的高产和稳产，是保证提高农业单产的重要物资，在农业生产中起着重要的作用。就现阶段农药的使用量可使我国的农业经济损失将近亿，居世界首位，给农作物的高产和稳产带来了种种弊端，如产生了一些抗药性强的有害生物、高毒性的残留物等等，对环境的危害相当严重。目前，科学家们已经在植物化学、微生物学等不同方面不同领域去探求并研发这种新型生物控制剂，以期缓解现代化学农药对生态环境的破坏以及对人类健康的威胁。

植物源杀菌剂就是将某些植物中具有抑菌、杀菌活性的有效成分提取出来后经过加工研制出的用于抗菌、杀菌和防病害的生物类杀菌剂。植物源杀菌剂因其有效成分来源于天然植物，在农作物病害防治中具有环境友好，对人畜安全，病害不易产生抗药性等特点，是生产无公害农产品应当优先选用的杀菌剂品种，因此也受到各国重视。近年来，国内外专家学者对植物源杀菌剂的研究热情只增不减，现在已确定植物中很多种类具有杀菌活性，其中包括豆科、菊科、卫矛科、大戟科、防己科、罂粟科、茄科、瑞香科、胡桃科、杨柳科、毛莨科、夹竹桃科、石蒜科、天南星科、伞形花科、马鞭草科、百合科、蓼科、芸香科、紫苑科、唇形科、番荔枝科、杜鹃花科、木兰科等数10种植物。植物源杀菌剂来源于自然，能在自然界中降解，具有对人、畜和害虫天敌较安全、对病原菌有多种生物活性、对天敌影响小、易降解、对病原菌不易产生抗药性等优点。因此，高效无毒的无公害植物源农药成为新型农药的发展重点。

现有技术如授权公告号为CN102940000B的中国发明专利，公开了一种植物源广谱杀菌剂，它包括以下原料，按重量百分比计：小檗碱0.5～4.5%、黄芪多糖0.5～20%、三叶青提取物0.5～20%、芦荟提取液0.5～20%，皂角0.5～20%，余量为水。本发明从纯植物中提取得到的植物提取物复合后产生植物源广谱杀菌剂，具有高效、价格低廉，对环境友好、不易产生抗药性、对人畜无害的优点。但是该杀菌剂用原料的生物活性不够，药效稍差。

发明内容

本发明的目的在于提供一种植物源杀菌剂的制备方法，该制备方法简单可行，具有生产周期短、得率高、有效成分不易被破坏、生物活性高等优点，制得的杀菌剂能达到更好的杀菌、抗菌、抑菌的协同效果。

本发明针对上述技术中提到的问题，采取的技术方案为：

一种植物源杀菌剂的制备方法的制备方法，包括柠檬精油提取、苦楝提取物制备、植物源杀菌剂制备，具体包括以下步骤：

柠檬精油提取：按料液比为1:10-15（g/mL）将脱脂柠檬皮粉中加入正己烷，在40-60℃下浸泡1-2h，再在80-90℃的条件下蒸馏至溶剂不再流出为止，然后置于恒温干燥箱中干燥20-40min，即得柠檬精油，该柠檬精油中主要含有柠檬烯和柠檬醛，具有比较广泛的生物活性，比如杀虫、抗病毒、抗肿瘤形成和抑菌等效用，尤其可以抑制孢子的游动能力、抑制菌丝生长、抑制附着孢和侵入丝的形成、对染病株的抑制和钝化作用以及提高寄主本身产生抗性；

苦楝提取物制备：按料液比为1:8-12（g/mL）向脱脂苦楝粉中加入60-80%的乙醇溶液，再然后在超声功率为70-100W、超声频率为30-40kHz的条件下提取1-2h，提取液经蒸馏浓缩，后用萃取剂萃取60-100min，萃取液经减压蒸馏，干燥即得苦楝提取物，上述乙醇溶液含有0.2-0.5mM的三乙烯二胺和0.1-0.2mM的N-甲基吗啉，三乙烯二胺和N-甲基吗啉的加入能够溶解掉苦楝细胞壁中的多糖类物质，同时也能溶解掉部分果胶质，从而提高细胞壁的通透性，从而削弱其对细胞内有效成分溶出的阻碍作用，使溶胀指数明显提高，促进了细胞溶胀，提高了有效成分的提取效率和得率，同时能够阻止醇溶性杂质或色素等大分子成分与乙醇分子结合，降低其与有效成分的竞争，提高有效成分的提取率，且不会破坏有效成分的活性，该步骤利用超声波在液体中的空化作用加速苦楝粉中有效成分的浸出，且超声波的机械振动，扩散，击碎等作用，能加速有效成分的扩散、释放，最终提高苦楝提取物的得率，得到的苦楝提取物有明显的抑菌作用，能够抑制孢子萌发，尤其对白念珠菌、新生隐球菌作用较强；

植物源杀菌剂制备：按重量份取柠檬精油3-5份、苦楝提取物10-15份、茶皂素3-6份、皂荚甙2-5份，充分混合均匀，即得植物源杀菌剂，该杀菌剂中各原料的合理配伍，能达到更好的杀菌、抗菌、抑菌的协同效果，原料取自天然植物，不含化学添加物，产品安全，无副作用，产品及产品副产物不会对人体无毒、无害、无副作用、安全性高，且不会造成环境污染，可广泛用于食品、化妆品、个人清洁用品、家居清洁用品、日化用品等领域，实现在日化行业环境消毒、设备消毒、产品防腐、防菌的不同应用。

作为优选，苦楝提取物制备步骤中苦楝粉和萃取剂的料液比为1:3-6，萃取剂为体积比为1:0.03-0.05的正丁醇和对乙酰氨基酚混合物，该萃取剂萃取效果最好，其极性跟苦楝素的极性最为接近，对苦楝素的选择性好，对乙酰氨基酚的存在可使苦楝素能更快速更充分地进入萃取相，提高了萃取率，同时利于萃取剂的回收再利用，使得苦楝素的不稳定的异构体向稳定的异构体转变，提高苦楝素的生物活性、安全性和稳定性，进而提高苦楝提取物的杀菌性能，且赋予杀菌剂一定的杀虫性，扩大药剂的使用范围。

与现有技术相比，本发明的优点在于：1）本发明制备方法简单可行，具有生产周期短、有效成分不易被破坏、生物活性高等优点，具有较大应用潜力；2）该制备方法采用的提取溶剂能够提高细胞壁的通透性，提高了苦楝素的提取效率和得率，同时能够阻止醇溶性杂质或色素等大分子成分与乙醇分子结合，降低其与苦楝素的竞争，提高苦楝素的提取率；3）该制备方法采用的萃取剂对苦楝素的选择性好，可使苦楝素能更快速更充分地进入萃取相，提高了萃取率，提高苦楝素的生物活性、安全性和稳定性，同时利于萃取剂的回收再利用；4）该制备方法得到的杀菌剂能达到更好的杀菌、抗菌、抑菌的协同效果，产品安全，无副作用，产品及产品副产物不会对人体无毒、无害、无副作用、安全性高，且不会造成环境污染，可广泛用于食品、化妆品、个人清洁用品、家居清洁用品、日化用品等领域。

具体实施例

下面通过实施例对本发明方案作进一步说明：

实施例1：

一种植物源杀菌剂的制备方法的制备方法，包括柠檬精油提取、苦楝提取物制备、植物源杀菌剂制备，具体包括以下步骤：

1）柠檬精油提取：按料液比为1:15（g/mL）将脱脂柠檬皮粉中加入正己烷，在40℃下浸泡2h，再在80℃的条件下蒸馏至溶剂不再流出为止，然后置于恒温干燥箱中干燥40min，即得柠檬精油，该柠檬精油中主要含有柠檬烯和柠檬醛，具有比较广泛的生物活性，比如杀虫、抗病毒、抗肿瘤形成和抑菌等效用，尤其可以抑制孢子的游动能力、抑制菌丝生长、抑制附着孢和侵入丝的形成、对染病株的抑制和钝化作用以及提高寄主本身产生抗性；

2）苦楝提取物制备：按料液比为1:8（g/mL）向脱脂苦楝粉中加入80%的乙醇溶液，再然后在超声功率为70W、超声频率为40kHz的条件下提取1h，提取液经蒸馏浓缩，后用萃取剂萃取100min，萃取液经减压蒸馏，干燥即得苦楝提取物，上述乙醇溶液含有0.2mM的三乙烯二胺和0.2mM的N-甲基吗啉，三乙烯二胺和N-甲基吗啉的加入能够溶解掉苦楝细胞壁中的多糖类物质，同时也能溶解掉部分果胶质，从而提高细胞壁的通透性，从而削弱其对细胞内有效成分溶出的阻碍作用，使溶胀指数明显提高，促进了细胞溶胀，提高了有效成分的提取效率和得率，同时能够阻止醇溶性杂质或色素等大分子成分与乙醇分子结合，降低其与有效成分的竞争，提高有效成分的提取率，且不会破坏有效成分的活性，该步骤利用超声波在液体中的空化作用加速苦楝粉中有效成分的浸出，且超声波的机械振动，扩散，击碎等作用，能加速有效成分的扩散、释放，最终提高苦楝提取物的得率，得到的苦楝提取物有明显的抑菌作用，能够抑制孢子萌发，尤其对白念珠菌、新生隐球菌作用较强；

3）植物源杀菌剂制备：按重量份取柠檬精油3份、苦楝提取物15份、茶皂素3份、皂荚甙5份，充分混合均匀，即得植物源杀菌剂，该杀菌剂中各原料的合理配伍，能达到更好的杀菌、抗菌、抑菌的协同效果，原料取自天然植物，不含化学添加物，产品安全，无副作用，产品及产品副产物不会对人体无毒、无害、无副作用、安全性高，且不会造成环境污染，可广泛用于食品、化妆品、个人清洁用品、家居清洁用品、日化用品等领域，实现在日化行业环境消毒、设备消毒、产品防腐、防菌的不同应用。

上述苦楝提取物制备步骤中苦楝粉和萃取剂的料液比为1:3，萃取剂为体积比为1:0.05的正丁醇和对乙酰氨基酚混合物，该萃取剂萃取效果最好，其极性跟苦楝素的极性最为接近，对苦楝素的选择性好，对乙酰氨基酚的存在可使苦楝素能更快速更充分地进入萃取相，提高了萃取率，同时利于萃取剂的回收再利用，使得苦楝素的不稳定的异构体向稳定的异构体转变，提高苦楝素的生物活性、安全性和稳定性，进而提高苦楝提取物的杀菌性能，且赋予杀菌剂一定的杀虫性，扩大药剂的使用范围。

实施例2：

一种植物源杀菌剂的制备方法的制备方法，包括柠檬精油提取、苦楝提取物制备、植物源杀菌剂制备，具体包括以下步骤：

1）柠檬精油提取：按料液比为1:10（g/mL）将脱脂柠檬皮粉中加入正己烷，在60℃下浸泡1h，再在90℃的条件下蒸馏至溶剂不再流出为止，然后置于恒温干燥箱中干燥20min，即得柠檬精油；

2）苦楝提取物制备：按料液比为1:12（g/mL）向脱脂苦楝粉中加入60%的乙醇溶液，再然后在超声功率为100W、超声频率为30kHz的条件下提取2h，提取液经蒸馏浓缩，后用萃取剂萃取60min，萃取液经减压蒸馏，干燥即得苦楝提取物，上述乙醇溶液含有0.5mM的三乙烯二胺和0.1mM的N-甲基吗啉；

3）植物源杀菌剂制备：按重量份取柠檬精油5份、苦楝提取物10份、茶皂素6份、皂荚甙2份，充分混合均匀，即得植物源杀菌剂。

上述苦楝提取物制备步骤中苦楝粉和萃取剂的料液比为1:6，萃取剂为体积比为1:0.03的正丁醇和对乙酰氨基酚混合物。

实施例3：

一种植物源杀菌剂的制备方法的制备方法，包括柠檬精油提取、苦楝提取物制备、植物源杀菌剂制备，具体包括以下步骤：

1）柠檬精油提取：按料液比为1:12（g/mL）将脱脂柠檬皮粉中加入正己烷，在50℃下浸泡1.5h，再在85℃的条件下蒸馏至溶剂不再流出为止，然后置于恒温干燥箱中干燥30min，即得柠檬精油；

2）苦楝提取物制备：按料液比为1:10（g/mL）向脱脂苦楝粉中加入70%的乙醇溶液，再然后在超声功率为80W、超声频率为35kHz的条件下提取1.5h，提取液经蒸馏浓缩，后用萃取剂萃取80min，萃取液经减压蒸馏，干燥即得苦楝提取物，上述乙醇溶液含有0.4mM的三乙烯二胺和0.15mM的N-甲基吗啉；

3）植物源杀菌剂制备：按重量份取柠檬精油4份、苦楝提取物12份、茶皂素5份、皂荚甙4份，充分混合均匀，即得植物源杀菌剂。

上述苦楝提取物制备步骤中苦楝粉和萃取剂的料液比为1:5，萃取剂为体积比为1:0.04的正丁醇和对乙酰氨基酚混合物。

本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。

以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种植物源杀菌剂的制备方法，包括柠檬精油提取、苦楝提取物制备、植物源杀菌剂制备，其特征在于：所述苦楝提取物制备步骤为：向脱脂苦楝粉中加入乙醇溶液，再然后在超声功提取，提取液经蒸馏浓缩，后用萃取剂萃取，萃取液经减压蒸馏，干燥即得苦楝提取物，所述乙醇溶液含有三乙烯二胺和N-甲基吗啉。

2.根据权利要求1所述的一种植物源杀菌剂的制备方法，其特征在于：所述乙醇溶液浓度为60-80%，所述乙醇溶液含有0.2-0.5mM的三乙烯二胺和0.1-0.2mM的N-甲基吗啉。

3.根据权利要求1所述的一种植物源杀菌剂的制备方法，其特征在于：所述苦楝粉和乙醇溶液的料液比为1:8-12（g/mL），超声功率为70-100W、超声频率为30-40kHz，提取时间为1-2h。

4.根据权利要求1所述的一种植物源杀菌剂的制备方法，其特征在于：所述萃取剂为体积比为1:0.03-0.05的正丁醇和对乙酰氨基酚混合物。

5.根据权利要求1所述的一种植物源杀菌剂的制备方法，其特征在于：所述苦楝粉和萃取剂的料液比为1:3-6，萃取60-100min。

6.根据权利要求1所述的一种植物源杀菌剂的制备方法，其特征在于：所述柠檬精油提取步骤为：按料液比为1:10-15（g/mL）将脱脂柠檬皮粉中加入正己烷，在40-60℃下浸泡1-2h，蒸馏，干燥，即得柠檬精油。

7.根据权利要求1所述的一种植物源杀菌剂的制备方法，其特征在于：所述植物源杀菌剂制备步骤为：按重量份取柠檬精油3-5份、苦楝提取物10-15份、茶皂素3-6份、皂荚甙2-5份，充分混合均匀，即得植物源杀菌剂。