CN108404011A - 一种防雾霾清肺止咳中药组合物及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种防雾霾清肺止咳中药组合物，包括以下重量份的组分：满山红总黄酮10~20份、瓜蒌总皂苷10~15份、桑白皮总黄酮10~15份、瓜蒌总氨基酸5~10份、桔梗总皂苷5~10份、百部总生物碱5~10份和罗汉果总三萜苷5~10份。本发明还公开了一种防雾霾清肺止咳中药组合物的制备方法。本发明的中药组合物配方简单，成分少，副作用小，能够有效预防哮喘等呼吸道疾病，其制备方法采用无毒或毒性小的溶剂提取富集得到药用部位，便于操作，可操作性强，适合工业化生产，能够制备得到有效预防哮喘等呼吸道疾病的中药组合物。

Description

一种防雾霾清肺止咳中药组合物及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种防雾霾清肺止咳中药组合物及其制备方法，属于中药组合物技术领域。
背景技术
雾霾是人体“杀手”，它含有20多种有害物质，久而久之会威胁人们的健康，从PM10开始直至PM2.5，依次会影响老人和儿童的上呼吸道、下呼吸道，最终影响到肺部。据专家介绍，这些颗粒物吸入人体后可以进入肺泡、血液，在肺泡上沉积下来损伤肺泡和黏膜，引起肺组织的慢性纤维化，导致肺心病，加重哮喘病，引起慢性鼻咽炎、慢性支气管炎等一系列病变。随着雾霾污染越来越严重，尤其是在冬季，患上咽喉炎、肺气肿、哮喘、鼻炎、支气管炎的人群越来越多，目前哮喘等症缺乏规范性的治疗且发病阶段多，病程较长，彻底治愈较难，目前在临床上的经验是哮喘的预防重于治疗，合理的预防已被提到非常重要的位置，现有的哮喘等雾霾导致的呼吸道疾病的预防方法一般是采用中药，但是，目前记载的抗哮喘中成药多为复方制剂，药味较多、配伍的药物种类繁多，成分复杂，治疗机理难以解释，起效慢，需长期服用。故亟需一种能降低PM2.5对呼吸系统损伤的、并且可有效预防、防止哮喘等雾霾导致的呼吸道疾病的防雾霾清肺止咳中药组合物及其制备方法。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是，提供一种成分少，配方简单，副作用小，能够有效预防哮喘等呼吸道疾病的防雾霾清肺止咳中药组合物；本发明还提供了一种防雾霾清肺止咳中药组合物的制备方法，该法均采用无毒或毒性小的溶剂提取富集得到药用部位，便于操作，可操作性强，适合工业化生产，能够制备得到有效预防哮喘等呼吸道疾病的防雾霾清肺止咳中药组合物。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：
一种防雾霾清肺止咳中药组合物，包括以下重量份的组分：满山红总黄酮10~20份、瓜蒌总皂苷10~15份、桑白皮总黄酮10~15份、瓜蒌总氨基酸5~10份、桔梗总皂苷5~10份、百部总生物碱5~10份和罗汉果总三萜苷5~10份。
一种防雾霾清肺止咳中药组合物，包括以下重量份的组分：满山红总黄酮15~17份、瓜蒌总皂苷11~12份、桑白皮总黄酮12~14份、瓜蒌总氨基酸7~8份、桔梗总皂苷8~9份、百部总生物碱6~9份和罗汉果总三萜苷6~8份。
一种防雾霾清肺止咳中药组合物的制备方法，包括以下步骤：
S01，取满山红药材适量，粉碎，放入渗滤筒，加入70~80%乙醇浸泡10~15h后渗滤，渗滤液的体积为药材重量的5~8倍，渗滤速度为每1min收集5~10mL渗滤液，渗滤完成后收集渗滤液，渗滤液浓缩至药材重量的0.5~1.5倍后过聚酰胺树脂柱，水洗除杂，20%乙醇洗脱除杂，60%乙醇洗脱并收集，浓缩，干燥，得满山红总黄酮部位；
S02，取瓜蒌药材适量，热水回流提取2次，每次提取1~2h，第一次提取加入相当于药材重量10~15倍的水，第二次提取加入相当于药材重量5~8倍的水，合并水提液，浓缩至药材重量的1~2倍后，在浓缩液中加入相当于浓缩液重量1~3倍的95%乙醇，边加边搅拌，搅拌均匀后于0℃冷藏至少10h，取出，过滤，收集滤液，浓缩至无醇味后上阳离子交换树脂柱，水洗5个柱体积后用1~5%的氨水洗脱，收集氨水洗脱部位，浓缩后，干燥得瓜蒌总氨基酸部位；收集水洗部位，调中性后浓缩至瓜蒌药材的0.3~0.6倍量，上大孔吸附树脂柱，水洗除杂后，用20~30%乙醇洗脱至少6个柱体积，收集20~30%乙醇洗脱液，浓缩后，干燥，得瓜蒌总皂苷部位；
S03，取桑白皮药材适量，70~80%乙醇热回流提取至少2次，每次提取1.5~2h，提取剂的用量为药材重量的10~20倍，合并醇提液，浓缩至药液密度为1.1~1.2，过滤，滤液中加入相当于药材重量0.1~0.3倍量的聚酰胺粉末，磁力搅拌至少5h后离心，收集聚酰胺粉末，加入相当于聚酰胺粉末重量的5~7倍的有机溶剂，充分搅拌解吸附后，过滤，收集有机溶剂，浓缩，干燥，得桑白皮总黄酮部位；
S04，取桔梗药材适量，65~75℃水浸渍提取至少2次，每次水的用量为药材重量的15~25倍，提取时间为每次至少3h，合并浸渍液，浓缩至药材重量的2~4倍量后，过滤，滤液过大孔吸附树脂柱，水洗至少10个柱体积后，50~55%乙醇洗脱至少5个柱体积，收集50~55%乙醇洗脱液，浓缩，干燥，得桔梗总皂苷；
S05，取百部药材适量，50~70%乙醇热回流提取2~3次，提取液调pH为3~4，每次提取液的用量为药材重量的5~10倍，收集提取液，浓缩至药材重量的1~1.5倍后过滤，滤液调pH为10~11后，静置至少6h后过滤，得百部总生物碱部位；
S06，取罗汉果药材适量，10~30%乙醇热回流提取1~2次，每次提取2~2.5h，每次乙醇用量为药材重量的10~20倍，合并提取液，浓缩至药材重量的0.8~1.5倍后，浓缩液中加入絮凝剂絮凝后，过滤，收集滤液，滤液中加入95%乙醇醇沉，醇沉液的用量为药材重量2~3倍，醇沉至少12h，醇沉后过滤，滤液中加入活性炭，活性炭的加入量为药材重量的0.1~0.2倍量，边加边搅拌，并持续搅拌至少2h，再过滤，去除活性炭，收集滤液，滤液浓缩后，干燥，得罗汉果总三萜苷部位。
S02中的所述阳离子交换树脂柱包括001×7、001×4、D113、D001或D002。
S02中的所述大孔吸附树脂柱为强极性大孔吸附树脂，所述强极性大孔吸附树脂包括XAD-9、XAD-10、XAD-11、S-8或NKA-9。
S04中的所述大孔吸附树脂柱为弱极性大孔吸附树脂，所述弱极性大孔吸附树脂包括XAD-1、XAD-2、XAD-3、XAD-4、D4006、X-5、AB-8、D101或HPD-100。
S06中的所述絮凝剂包括聚丙烯酰胺高分子絮凝剂。
S03中的所述有机溶剂包括丙酮或氯仿。
满山红：为杜鹃花科植物兴安杜鹃Rhododendron dauricum L.的干燥叶。夏、秋二季采收，阴干。生于干燥石质山坡、山脊灌木丛中。分布于黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、河北等地。味辛、苦，性温。归肺、脾经。具有止咳祛痰的功效。用于咳嗽气喘痰多。满山红煎剂有明显镇咳作用，主要有效成分是杜鹃酮，水溶液及有效成分杜鹃素呈现显著的祛痰作用。
瓜蒌：别名：栝楼、糖瓜蒌、蒌瓜。栝楼（Trichosanthes kirilowii Maxim.），多年生攀缘型草本植物。喜生于深山峻岭、荆棘丛生的山崖石缝之中。其果实、果皮、果仁（籽）、根茎均为上好的中药材。主治：清热涤痰，宽胸散结，润燥滑肠。用于肺热咳嗽，痰浊黄稠，胸痹心痛，结胸痞满，乳痈，肺痈，肠痈肿痛，大便秘结。本品合三萜皂苷，有机酸及盐类、树脂、糖类和色素。种子含脂肪油等。所含皂苷及皮中总氨基酸有祛痰作用。
桑白皮：为桑科植物桑 (拉丁学名：Morus alba L.) 的干燥根皮。别名桑根白皮、桑根皮、桑皮、白桑皮。主产于安徽、河南、浙江、江苏、湖南等地。秋末落叶时至次春发芽前采挖根部，刮去黄棕色粗皮，纵向剖开，剥取根皮，晒干。功效为泻肺平喘，利水消肿。主治肺热咳喘和水肿。其含多种黄酮类衍生物，如桑根皮素、伞形花内酯、东莨菪素，还含有作用类似乙酰胆碱的降压成分。本品有轻度止咳作用，并能利尿。
桔梗：功效宣肺祛痰，利咽排脓。主治咳嗽痰多，咽喉肿痛，失音。其含多种皂苷，主要为桔梗皂苷，皂苷元有桔梗皂苷元，远志酸、以及少量的桔梗酸。另外还含菊糖等。桔梗有镇咳、抗炎和免疫作用，其抗炎强度与阿斯匹林相似。桔梗皂苷能增加支气管粘膜分泌使痰液稀释，易于排出。
百部：功效润肺止咳，杀虫灭虱。主治新久咳嗽，百日咳，肺痨咳嗽。其含多种生物碱，（如百部碱、百部定碱和原百部碱等），还含糖、脂类、蛋白质、琥珀酸等。百部生物碱能降低呼吸中枢兴奋性，抑制咳嗽反射，而奏止咳之效。另外百部生物碱对支气管痉挛有松驰作用。
罗汉果：功效清肺利咽，化痰止咳。主治咳喘咽痛。其主要含三萜苷类，还含大量葡萄糖、果糖等。罗汉果水提物有较明显的镇咳、祛痰作用。
本发明提供的一种防雾霾清肺止咳中药组合物，采用中药具体有效药用部位入药，配方简单，成分少，副作用小，能够有效预防哮喘等雾霾导致的呼吸道疾病；该中药组合物的制备方法采用无毒或毒性小的溶剂提取富集得到药用部位，便于操作，可操作性强，适合工业化生产。
具体实施方式
下面对本发明作更进一步的说明。
实施例1
一种防雾霾清肺止咳中药组合物，包括以下重量份的组分：满山红总黄酮10份、瓜蒌总皂苷10份、桑白皮总黄酮10份、瓜蒌总氨基酸5份、桔梗总皂苷5份、百部总生物碱5份和罗汉果总三萜苷5份。
一种防雾霾清肺止咳中药组合物的制备方法，包括以下步骤：
S01，取满山红药材适量，粉碎，放入渗滤筒，加入70%乙醇浸泡10h后渗滤，渗滤液的体积为药材重量的5倍，渗滤速度为每1min收集5mL渗滤液，渗滤完成后收集渗滤液，渗滤液浓缩至药材重量的0.5倍后过聚酰胺树脂柱，水洗除杂，20%乙醇洗脱除杂，60%乙醇洗脱并收集，浓缩，干燥，得满山红总黄酮部位；
S02，取瓜蒌药材适量，热水回流提取2次，每次提取1h，第一次提取加入相当于药材重量10倍的水，第二次提取加入相当于药材重量5倍的水，合并水提液，浓缩至药材重量的1倍后，在浓缩液中加入相当于浓缩液重量1倍的95%乙醇，边加边搅拌，搅拌均匀后于0℃冷藏至少10h，取出，过滤，收集滤液，浓缩至无醇味后上001×7阳离子交换树脂柱，水洗5个柱体积后用1%的氨水洗脱，收集氨水洗脱部位，浓缩后，干燥得瓜蒌总氨基酸部位；收集水洗部位，调中性后浓缩至瓜蒌药材的0.3倍量，上XAD-9大孔吸附树脂柱，水洗除杂后，用20%乙醇洗脱至少6个柱体积，收集20%乙醇洗脱液，浓缩后，干燥，得瓜蒌总皂苷部位；
S03，取桑白皮药材适量，70%乙醇热回流提取2次，每次提取1.5h，提取剂的用量为药材重量的10倍，合并醇提液，浓缩至药液密度为1.1，过滤，滤液中加入相当于药材重量0.1倍量的聚酰胺粉末，磁力搅拌5h后离心，收集聚酰胺粉末，加入相当于聚酰胺粉末重量的5倍的丙酮，充分搅拌解吸附后，过滤，收集丙酮，浓缩，干燥，得桑白皮总黄酮部位；
S04，取桔梗药材适量，65℃水浸渍提取2次，每次水的用量为药材重量的15倍，提取时间为每次3h，合并浸渍液，浓缩至药材重量的2倍量后，过滤，滤液过AB-8大孔吸附树脂柱，水洗至少10个柱体积后，50%乙醇洗脱至少5个柱体积，收集50%乙醇洗脱液，浓缩，干燥，得桔梗总皂苷；
S05，取百部药材适量，50%乙醇热回流提取2次，提取液调pH为3，每次提取液的用量为药材重量的5倍，收集提取液，浓缩至药材重量的1倍后过滤，滤液调pH为10后，静置6h后过滤，得百部总生物碱部位；
S06，取罗汉果药材适量，10%乙醇热回流提取1次，提取2h，乙醇用量为药材重量的10倍，收集提取液，浓缩至药材重量的0.8倍后，浓缩液中加入聚丙烯酰胺高分子絮凝剂絮凝后，过滤，收集滤液，滤液中加入95%乙醇醇沉，醇沉液的用量为药材重量2倍，醇沉12h，醇沉后过滤，滤液中加入活性炭，活性炭的加入量为药材重量的0.1倍量，边加边搅拌，并持续搅拌2h，再过滤，去除活性炭，收集滤液，滤液浓缩后，干燥，得罗汉果总三萜苷部位。
实施例2
一种防雾霾清肺止咳中药组合物，包括以下重量份的组分：满山红总黄酮20份、瓜蒌总皂苷15份、桑白皮总黄酮15份、瓜蒌总氨基酸10份、桔梗总皂苷10份、百部总生物碱10份和罗汉果总三萜苷10份。
一种防雾霾清肺止咳中药组合物的制备方法，包括以下步骤：
S01，取满山红药材适量，粉碎，放入渗滤筒，加入80%乙醇浸泡15h后渗滤，渗滤液的体积为药材重量的8倍，渗滤速度为每1min收集10mL渗滤液，渗滤完成后收集渗滤液，渗滤液浓缩至药材重量的1.5倍后过聚酰胺树脂柱，水洗除杂，20%乙醇洗脱除杂，60%乙醇洗脱4个柱体积并收集，浓缩，干燥，得满山红总黄酮部位；
S02，取瓜蒌药材适量，热水回流提取2次，每次提取2h，第一次提取加入相当于药材重量15倍的水，第二次提取加入相当于药材重量8倍的水，合并水提液，浓缩至药材重量的2倍后，在浓缩液中加入相当于浓缩液重量3倍的95%乙醇，边加边搅拌，搅拌均匀后于0℃冷藏11h，取出，过滤，收集滤液，浓缩至无醇味后上D113阳离子交换树脂柱，水洗5个柱体积后用5%的氨水洗脱5个柱体积，收集氨水洗脱部位，浓缩后，干燥得瓜蒌总氨基酸部位；收集水洗部位，调中性后浓缩至瓜蒌药材的0.6倍量，上S-8大孔吸附树脂柱，水洗除杂后，用30%乙醇洗脱7个柱体积，收集30%乙醇洗脱液，浓缩后，干燥，得瓜蒌总皂苷部位；
S03，取桑白皮药材适量，80%乙醇热回流提取2次，每次提取2h，提取剂的用量为药材重量的20倍，合并醇提液，浓缩至药液密度为1.2，过滤，滤液中加入相当于药材重量0.3倍量的聚酰胺粉末，磁力搅拌6h后离心，收集聚酰胺粉末，加入相当于聚酰胺粉末重量的7倍的氯仿，充分搅拌解吸附后，过滤，收集氯仿，浓缩，干燥，得桑白皮总黄酮部位；
S04，取桔梗药材适量，75℃水浸渍提取3次，每次水的用量为药材重量的25倍，提取时间为每次4h，合并浸渍液，浓缩至药材重量的4倍量后，过滤，滤液过HPD-100大孔吸附树脂柱，水洗12个柱体积后，55%乙醇洗脱6个柱体积，收集55%乙醇洗脱液，浓缩，干燥，得桔梗总皂苷；
S05，取百部药材适量，70%乙醇热回流提取3次，提取液调pH为4，每次提取液的用量为药材重量的10倍，收集提取液，浓缩至药材重量的1.5倍后过滤，滤液调pH为11后，静置8h后过滤，得百部总生物碱部位；
S06，取罗汉果药材适量，30%乙醇热回流提取2次，每次提取2.5h，每次乙醇用量为药材重量的20倍，合并提取液，浓缩至药材重量的1.5倍后，浓缩液中加入聚丙烯酰胺高分子絮凝剂絮凝后，过滤，收集滤液，滤液中加入95%乙醇醇沉，醇沉液的用量为药材重量3倍，醇沉16h，醇沉后过滤，滤液中加入活性炭，活性炭的加入量为药材重量的0.2倍量，边加边搅拌，并持续搅拌3h，再过滤，去除活性炭，收集滤液，滤液浓缩后，干燥，得罗汉果总三萜苷部位。
实施例3
本实施例与实施例1的区别仅在于：一种防雾霾清肺止咳中药组合物，包括以下重量份的组分：满山红总黄酮15份、瓜蒌总皂苷11份、桑白皮总黄酮12份、瓜蒌总氨基酸7份、桔梗总皂苷8份、百部总生物碱6份和罗汉果总三萜苷6份。
实施例4
本实施例与实施例1的区别仅在于：一种防雾霾清肺止咳中药组合物，包括以下重量份的组分：满山红总黄酮17份、瓜蒌总皂苷12份、桑白皮总黄酮14份、瓜蒌总氨基酸8份、桔梗总皂苷9份、百部总生物碱9份和罗汉果总三萜苷8份。
一、本发明防霾的药效学评价：
为探索雾霾伤肺的分子机制，需求雾霾伤肺的生物学指标，本发明采集大气中的PM2.5，将其调制成生理盐水颗粒物混悬液，分别作用于Wistar大鼠，研究PM2.5及本中药组合物对Wistar大鼠肺组织中的HMGB1、TNF-α和IL-6表达的影响。
1、实验材料：
实验动物：SPF级健康雄性Wistar大鼠60只，体重为200±5g，购买后在SPF级动物房适应性饲养7d，维持温度（15±2）℃，湿度70%±2%，昼夜节律交替的时间为12h。
本中药组合物灌胃溶液的制备：实施例1~4制备方法中获得的中药组合物干粉30g加入1000mL水中，配成混悬水溶液。
仪器设备：
Mini Vol PM2.5便携式PM2.5采样器；
玻璃纤维滤膜：47mm；
颗粒物实时检测仪TEOM 1400a（美国Rupprecht&Patashnik公司）；
颗粒物采样器ACCU（美国Rupprecht&Patashnik公司）；
DustTrak颗粒物观测仪（美国TSI公司）；
超声震荡器（工作频率40/59K赫兹）；
低温冷冻干燥机（背景霍尔斯生物科技有限公司）；
冷冻离心机（湘潭友诚离心机有限公司）
AniRes2005动物肺功能分析系统（北京贝兰博科技有限公司）；
显微镜（Olympus）；
微量移液器（德国Eppendorf）；
电子天平（梅特勒托利多）。
2、方法
PM2.5的采集和配制
采样地点和时间：根据南京主城区和周边高速公路的道路及交通状况信息情况，选取新街口作为本次实验PM2.5的采集点。采样时间为2017年12月～2018年01月，主要是冬季。
采样方法及记录：本发明采用Mini Vol PM2.5便携式PM2.5采样器、颗粒物实时检测仪TEOM 1400a、ACCU与PM2 .5切割器配合使用，采样滤膜均为洁净47mm玻璃纤维滤膜，用准备好的滤膜进行采样。并记录采样点附近气象参数的变化，主要有温度、相对湿度、风向、风速和降水量等，24h更换一次滤膜， 放入编好号的密封袋，后置4℃冰箱中保存，备用。
PM2.5悬液的制备：取上述滤膜采集的大气颗粒物，每张膜约含PM2.5 210mg，每张膜取其中的1/2，共用10张膜。（105mg×10＝1050mg）；
用组织剪分别把10张膜平均分成3份；毎一份膜剪成1.0cm×0.5cm大小的模块，分别装在3个500mL棕色广口瓶中；每一个棕色广口瓶中倒入250mL去离子水，将玻璃膜浸漫；将装有玻璃膜的棕色广口瓶放在超声震荡机中，30min×3次，充分震荡、洗脱颗粒物；震荡液经八层纱布过滤，并将玻璃膜所带的去离子水充分挤压过滤，取滤液；将3瓶滤液经真空干燥机干燥、蒸发，将干燥后的PM2.5用生理盐水配成所需浓度，即10mg/mL的PM2.5悬液。PM2.5悬液经高压灭菌10min，存放于4℃环境中备用，用前超声振荡5min以使颗粒物混匀。
3、PM2.5致大鼠肺损伤模型建立与分组
分组：SPF级健康雄性Wistar大鼠60只，按体重随机分为6组：正常对照组、模型对照沮、实施例1~4组，每组10只。除正常对照组外，其余各组均制作成PM2.5致肺损伤模型。
动物模型建立：各组均适应性的饲养一周。
空白对照组：分别于模型建立第8，14，20和26天经鼻腔滴入0 .9％生理盐水（0.2mL/只），其余时间正常饲养。
模型对照组：采用鼻腔滴注PM2.5悬液方法：分别于模型建立第8，14，20和26天经鼻腔滴注制备好的PM2.5悬液，40mg/kg·bw，按200g体重计算，约8mg/0.2mL /只，最后一次染毒后48小时内处死。
实施例1~4组：模型建立方法同模型对照组。
4、给药途径和方法：
空白对照组、模型对照组：自造模之日起，经口灌服0 .9％生理盐水2mL/只/d，连续3周。
实施例1~4组：自造模之日起，分别经口灌服本中药组合物灌胃溶液2ml/只/d，连续3周。
5、肺功能检测：4周后处死大鼠，收集左侧肺和一定量的肺泡灌洗液，分离大鼠肺组织，收集并提取总蛋白，以HMGB1/β-actin比值作为相对表达水平，ELISA试剂盒测定TNF-α和IL-6。
6、统计分析：所有数据均采用SPSS 20 .0统计分析软件进行统计学处理。
7、实验结果：HMGB1与机械通气相关性肺损伤、非小细胞肺癌、肺纤维化等疾病密切相关，本发明的研究结果证明：在染毒大鼠肺组织HMGB1表达方面，随着大鼠染毒，大鼠肺组织中HMGB1、TNF-α和IL-6含量均随之增加，通过给予大鼠本发明的中药组合物，大鼠肺组织中HMGB1、TNF-α和IL-6含量均显著降低，说明本发明可显著治疗PM2.5染毒大鼠。
结果见表1~3：
表1 组合物对染毒Wistar大鼠肺组织中HMGB1表达的影响（）
组别 n（只） HMGB1/β-actin
空白对照组 10 0.067±0.241
模型对照组 10 0.188±0.176△△
实施例1组 10 0.091±0.094**
实施例2组 10 0.097±0.273**
实施例3组 10 0.088±0.119**
实施例4组 10 0.092±0.296**
表1中，与空白对照组比较，△△P< 0.01；与模型对照组比较，**P< 0.01。
表2 组合物对染毒Wistar大鼠肺组织中TNF-α表达的影响（）
组别 n（只） TNF-α
空白对照组 10 200.47±23.56
模型对照组 10 297.44±47.06△△
实施例1组 10 213.12±19.82**
实施例2组 10 220.29±10.65**
实施例3组 10 209.07±39.77**
实施例4组 10 211.15±15.43**
表2中，与空白对照组比较，△△P< 0.01；与模型对照组比较，**P< 0.01。
表3 组合物对染毒Wistar大鼠肺组织中IL-6表达的影响（）
组别 n（只） IL-6
空白对照组 10 85.47±19.34
模型对照组 10 149.41±10.66△△
实施例1组 10 90.17±14.42**
实施例2组 10 86.93±25.65**
实施例3组 10 89.11±21.43**
实施例4组 10 88.46±15.49**
表3中，与空白对照组比较，△△P< 0.01；与模型对照组比较，**P< 0.01。
二、本发明治疗哮喘的药效学评价：
实验材料：
动物：SD 健康大鼠，雄性，清洁级，体重（130±10）g。
主要药品、试剂及仪器：阿斯美胶囊（日本三共株式会社）；OVA（sigma产品）；氯化乙酰胆碱（上海三爱思试剂有限公司）；磷酸组胺（上海丽珠东风生物技术有限公司）；402A超声雾化器（江苏鱼跃医疗设备有限公司）。
实验方法：
动物模型复制：SD大鼠77只，随机分成7组，即正常对照组，模型对照组，本中药组合物实施例1~4剂量组，阿斯美组。于实验第0、7天，除正常对照组给予1%氢氧化铝溶液，各组动物均以新鲜配制的致敏液（1mg/mL OVA，溶于1%氢氧化铝溶液内）作皮下注射，每鼠在两侧后足跖、腹股沟、腰、背、颈部共取10点，每点注射0.05mL，同时腹腔注射0.5mL，共计1mL。于实验第14天开始，将大鼠置于自制雾化箱（40×30×20cm3 ) 内，用超声雾化器以雾化量0.8mL /min，雾化1%OVA 生理盐水溶液15min（正常对照组雾化以生理盐水），每日1次，以激发哮喘。连续激发3w后，停止激发6d，然后激发1次，24h后处死。
本中药组合物灌胃溶液的制备：分别取实施例1~4中药组合物干粉30g加入1000mL水中，配成混悬水溶液。
给药方法：于实验第14天开始灌胃给药，每日1次，直至处死前1日。本中药组合物实施例1~4剂量组：分别按每天20mL/kg体重灌胃给予上述混悬水溶液。阿斯美组：按20mL/kg体重灌胃给予阿斯美水溶液20mg/（kg·d）。正常对照组和模型对照组：给予生理盐水。
非特异性支气管激发试验：分别于实验第27、41天进行。将配制的2%氯化乙酰胆碱和0.2%磷酸组胺等量混合，作为激发液，以雾化器（雾化量同OVA 激发时）雾化激发液60s后停止，观察10min内动物的反应，记录动物的引喘潜伏期。引喘潜伏期超过10min者，就记为10min。
结果：
各组大鼠非特异性支气管激发实验引喘潜伏期的比较：与正常对照组比较，模型对照组2次引喘潜伏期均明显缩短（P 均< 0.01）；与模型对照组比较，各给药组第1次引喘潜伏期无明显改变；第2次引喘潜伏期均明显延长（P <0.05或P <0.01）。
结果见表4：
表4 各组大鼠非特异性支气管激发试验引喘潜伏期的比较（）
组别 动物数/只 第27天引喘潜伏期（sec） 第41天引喘潜伏期（sec）
正常对照组 11 90.06±24. 16 95.17±30.68
模型对照组 11 40.16±16.38△△ 30.78±25.43△△
实施例1剂量组 11 55.17±31.38 67.24±27.75**
实施例2剂量组 11 49.61±10.49 53.84±20.66**
实施例3剂量组 11 47.83±34.17 50.14±13.09*
实施例4剂量组 11 48.02±16.58 50.76±10.02*
阿斯美组 11 47.07±30.46 56.12±20.35**
表4中，与正常对照组比较，△△P< 0.01；与模型对照组比较，*P< 0.05，**P< 0.01。
由此可见，本发明的中药组合物治疗哮喘的效果与阿斯美组相当，故本中药组合物能够有效预防哮喘等呼吸道疾病。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出：对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (8)

1.一种防雾霾清肺止咳中药组合物，其特征在于：包括以下重量份的组分：满山红总黄酮10~20份、瓜蒌总皂苷10~15份、桑白皮总黄酮10~15份、瓜蒌总氨基酸5~10份、桔梗总皂苷5~10份、百部总生物碱5~10份和罗汉果总三萜苷5~10份。
2.根据权利要求1所述的一种防雾霾清肺止咳中药组合物，其特征在于：包括以下重量份的组分：满山红总黄酮15~17份、瓜蒌总皂苷11~12份、桑白皮总黄酮12~14份、瓜蒌总氨基酸7~8份、桔梗总皂苷8~9份、百部总生物碱6~9份和罗汉果总三萜苷6~8份。
3.根据权利要求1所述的一种防雾霾清肺止咳中药组合物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
S01，取满山红药材适量，粉碎，放入渗滤筒，加入70~80%乙醇浸泡10~15h后渗滤，渗滤液的体积为药材重量的5~8倍，渗滤速度为每1min收集5~10mL渗滤液，渗滤完成后收集渗滤液，渗滤液浓缩至药材重量的0.5~1.5倍后过聚酰胺树脂柱，水洗除杂，20%乙醇洗脱除杂，60%乙醇洗脱并收集，浓缩，干燥，得满山红总黄酮部位；
S02，取瓜蒌药材适量，热水回流提取2次，每次提取1~2h，第一次提取加入相当于药材重量10~15倍的水，第二次提取加入相当于药材重量5~8倍的水，合并水提液，浓缩至药材重量的1~2倍后，在浓缩液中加入相当于浓缩液重量1~3倍的95%乙醇，边加边搅拌，搅拌均匀后于0℃冷藏至少10h，取出，过滤，收集滤液，浓缩至无醇味后上阳离子交换树脂柱，水洗5个柱体积后用1~5%的氨水洗脱，收集氨水洗脱部位，浓缩后，干燥得瓜蒌总氨基酸部位；收集水洗部位，调中性后浓缩至瓜蒌药材的0.3~0.6倍量，上大孔吸附树脂柱，水洗除杂后，用20~30%乙醇洗脱至少6个柱体积，收集20~30%乙醇洗脱液，浓缩后，干燥，得瓜蒌总皂苷部位；
S03，取桑白皮药材适量，70~80%乙醇热回流提取至少2次，每次提取1.5~2h，提取剂的用量为药材重量的10~20倍，合并醇提液，浓缩至药液密度为1.1~1.2，过滤，滤液中加入相当于药材重量0.1~0.3倍量的聚酰胺粉末，磁力搅拌至少5h后离心，收集聚酰胺粉末，加入相当于聚酰胺粉末重量的5~7倍的有机溶剂，充分搅拌解吸附后，过滤，收集有机溶剂，浓缩，干燥，得桑白皮总黄酮部位；
S04，取桔梗药材适量，65~75℃水浸渍提取至少2次，每次水的用量为药材重量的15~25倍，提取时间为每次至少3h，合并浸渍液，浓缩至药材重量的2~4倍量后，过滤，滤液过大孔吸附树脂柱，水洗至少10个柱体积后，50~55%乙醇洗脱至少5个柱体积，收集50~55%乙醇洗脱液，浓缩，干燥，得桔梗总皂苷；
S05，取百部药材适量，50~70%乙醇热回流提取2~3次，提取液调pH为3~4，每次提取液的用量为药材重量的5~10倍，收集提取液，浓缩至药材重量的1~1.5倍后过滤，滤液调pH为10~11后，静置至少6h后过滤，得百部总生物碱部位；
S06，取罗汉果药材适量，10~30%乙醇热回流提取1~2次，每次提取2~2.5h，每次乙醇用量为药材重量的10~20倍，合并提取液，浓缩至药材重量的0.8~1.5倍后，浓缩液中加入絮凝剂絮凝后，过滤，收集滤液，滤液中加入95%乙醇醇沉，醇沉液的用量为药材重量2~3倍，醇沉至少12h，醇沉后过滤，滤液中加入活性炭，活性炭的加入量为药材重量的0.1~0.2倍量，边加边搅拌，并持续搅拌至少2h，再过滤，去除活性炭，收集滤液，滤液浓缩后，干燥，得罗汉果总三萜苷部位。
4.根据权利要求3所述的一种防雾霾清肺止咳中药组合物的制备方法，其特征在于：S02中的所述阳离子交换树脂柱包括001×7、001×4、D113、D001或D002。
5.根据权利要求3所述的一种防雾霾清肺止咳中药组合物的制备方法，其特征在于：S02中的所述大孔吸附树脂柱为强极性大孔吸附树脂，所述强极性大孔吸附树脂包括XAD-9、XAD-10、XAD-11、S-8或NKA-9。
6.根据权利要求3所述的一种防雾霾清肺止咳中药组合物的制备方法，其特征在于：S04中的所述大孔吸附树脂柱为弱极性大孔吸附树脂，所述弱极性大孔吸附树脂包括XAD-1、XAD-2、XAD-3、XAD-4、D4006、X-5、AB-8、D101或HPD-100。
7.根据权利要求3所述的一种防雾霾清肺止咳中药组合物的制备方法，其特征在于：S06中的所述絮凝剂包括聚丙烯酰胺高分子絮凝剂。
8.根据权利要求3所述的一种防雾霾清肺止咳中药组合物的制备方法，其特征在于：S03中的所述有机溶剂包括丙酮或氯仿。
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