CN108403852A - 一种虫草舞茸功能性食品及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种虫草舞茸功能性食品，包括以下重量百分比的活性成分原料：蛹虫草粉25‑35%，舞茸粉25‑35%，沙漠肉苁蓉粉10‑20%，人参粉10‑20%，枸杞粉10‑20%。本发明还提供该虫草舞茸功能性食品的其制备方法和应用。本发明的虫草舞茸功能性食品的成分简单且完全为药食同源成分，口感好，无毒副作用，可作为保健品长期服用，能够作为治疗和调理的双重保健品。本发明的虫草舞茸制品可以提高人体的免疫力，增强人体的体力，抑制肿瘤细胞活性；能有效减少化疗、放疗及手术对患者的伤害，延长患者的生存期。

Description

一种虫草舞茸功能性食品及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于功能性食品领域，尤其，属于提高患有恶性肿瘤人群的人体免疫力、体力的功能性食品，具体地，涉及一种虫草舞茸功能性食品及其制备方法和应用。

背景技术

现如今，由于环境污染、食品安全问题、不良生活习惯等等，人们似乎更容易被确诊为恶性肿瘤，如空气污染的地方，容易出现肺癌、鼻癌等等。大部分恶性肿瘤早期不存在明显症状或早期症状与普通病症相似，因此，确诊的时候基本上都是属于中期，甚至晚期，癌细胞即将发生转移或已经发生转移，这给恶性肿瘤的治疗带来了极大的困难，不少患者因此而丧生。中国科学网也曾报道：恶性肿瘤已经成为人类的"第一杀手"。

现有恶性肿瘤的治疗手段几乎都聚焦在手术治疗、放疗和化疗。手术治疗是通过外科手术将病灶部位割除，这对于已经发生转移的患者不太适用；放疗是利用一种或多种电离辐射对恶性肿瘤及一些良性病进行的治疗，放射治疗的手段是电离辐射；化疗是化学药物治疗的简称，是利用化学药物阻止癌细胞的增殖、浸润、转移，直至最终杀灭癌细胞的一种治疗方式。无论是手术治疗，还是放疗或化疗，都会对人体本身的免疫系统造成伤害，部分患者由于身体素质不强，可能经过手术治疗、放疗或者化疗后，自身身体不能承受，也会因此而丧生。

目前，没有一款用药食同源食品经过科学配伍能够辅助手术后和放化疗后的病人增强体质、提升病人体内正气、增强免疫系统功能，抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞向正常细胞转化。

发明内容

为了解决现有技术中的缺少能长期服用、用于治疗或辅助治疗恶性肿瘤患者的的药食同源食品的技术问题，本发明提供一种虫草舞茸功能性食品，该功能性食品能够辅助手术后和放化疗后的病人增强体质、提升病人体内正气、增强免疫系统功能，抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞向正常细胞转化。

为了达到以上目的，本发明采用如下技术方案：一种用于辅助治疗恶性肿瘤的虫草舞茸功能性食品，包括以下重量百分比的活性成分原料：

优选的是，虫草舞茸功能性食品，包括以下重量份的活性成分原料：

上述任一方案优选的是，所述虫草舞茸功能性食品，包括以下重量百分比的活性成分原料：

上述任一方案优选的是，所述虫草舞茸功能性食品，包括以下重量百分比的活性成分原料：

上述任一方案优选的是，所述虫草舞茸功能性食品为片剂。制作为片剂，方便保存，而且能尽可能减少有害物质，进入消化道，容易溶解、分散，从而被人体吸收。

上述任一方案优选的是，所述虫草舞茸功能性食品还包括辅料。

上述任一方案优选的是，所述辅料辅料是山梨糖醇、甘露糖醇和硬脂酸镁中任一种或几种。

本发明另一方面，提供一种上述功能性食品的制备方法，包括如下步骤：

1)将检验合格的原料蛹虫草粉、舞茸粉、沙漠肉苁蓉粉、人参粉和枸杞粉按工艺处方配比在配料车间过筛，过筛后所有物料在称量间进行称量；

2)把称量车间称量好物料传递窗传递到槽型混合车间，把物料投放到混合机里，按工艺要求设定混合时间，用不锈钢桶放出物料；

3)将混合好物料传递窗传递到压片车间进行压片。

优选的是，所述过筛的目数为80目，这样的粒度尺寸，有利于通过人体消化道吸收，不会被当做食物残渣排出体外，从而进入人体循环，提高效果。

上述任一方案优选的是，按工艺要求设定混合时间为15分钟。

上述任一方案优选的是，步骤2)中，在混合机里混合的物料还包括辅料。

上述任一方案优选的是，所述辅料是山梨糖醇、甘露糖醇和硬脂酸镁中任一种或几种。

上述任一方案优选的是，压片用的压片机压力为5.8千牛，填充量6.9mm。

上述任一方案优选的是，压片过程中设定每片净含量为1克。

上述任一方案优选的是，压片过程中每10分钟检查一次净含量，要求净含量达到1.02‐1.05克之间。

上述任一方案优选的是，所述制备方法还包括步骤4)：将压片好的养胃食品调理剂传递窗到内包车间进行包装，封口，贴标，装箱。

上述任一方案优选的是，所述制备方法还包括步骤5)：产品在化验室检测合格入库。

作为本发明的第三方面，涉及上述功能性食品在制备用于恶性肿瘤、白血病、免疫系统疾病中任一种或几种的药物上的应用。

优选的是，所述药物用作治疗和/或辅助治疗恶性肿瘤的药物。

上述任一方案优选的是，所述辅助治疗包括化疗、放疗和/或手术之后的治疗。

上述任一方案优选的是，所述恶性肿瘤为胃癌、肝癌、肺癌、直肠癌、食道癌、鼻癌、宫颈癌、乳腺癌、膀胱癌、结肠癌、前列腺癌中一种或几种。

上述任一方案优选的是，所述免疫系统疾病包括艾滋病。

本发明的有益效果在于：成分简单，且成分完全为药食同源成分，口感好，无毒副作用，可作为保健品长期服用，能够作为治疗和调理的双重保健品。本发明的虫草舞茸制品可以提高人体的免疫力，增强人体的体力，抑制肿瘤细胞活性；能有效减少化疗、放疗及手术对患者的伤害，延长患者的生存期。

附图说明

图1是按照本发明的虫草舞茸功能性食品的实施例1的MMT结果。

图2是按照本发明的虫草舞茸功能性食品的实施例2的MMT结果。

图3是按照本发明的虫草舞茸功能性食品的实施例3的MMT结果。

图4是按照本发明的虫草舞茸功能性食品的对比例1的MMT结果。

图5是按照本发明的虫草舞茸功能性食品的对比例2的MMT结果。

图6是按照本发明的虫草舞茸功能性食品的对比例3的MMT结果。

图7是按照本发明的虫草舞茸功能性食品的对比例4的MMT结果。

图8是按照本发明的虫草舞茸功能性食品的对比例5的MMT结果。

图9是按照本发明的虫草舞茸功能性食品的对比例6的MMT结果。

图10是按照本发明的虫草舞茸功能性食品的对比例7的MMT结果。

图11是按照本发明的虫草舞茸功能性食品的对比例8的MMT结果。

图12是按照本发明的虫草舞茸功能性食品的对比例9的MMT结果。

具体实施方式

为了更加清楚、正确地理解本发明的内容，下面将结合具体实施例对本发明的内容进行进一步的说明、解释。

实施例1

本实施例提供一种虫草舞茸功能性食品，其活性成分由一下重量份原料构成：蛹虫草粉2份、舞茸粉2份、肉苁蓉粉1份、人参粉1份和枸杞粉1份。

本实施例的虫草舞茸功能性食品的制备方法如下：

1)对蛹虫草粉、舞茸粉、肉苁蓉粉、人参粉和枸杞粉进行检验，检验标准按2010版中国药典标准执行；

2)将蛹虫草粉、舞茸粉、肉苁蓉粉、人参粉和枸杞粉过80目筛；

3)过筛后取所有物料的筛下物，按配方进行称量；

4)将称量好的蛹虫草粉、舞茸粉、肉苁蓉粉、人参粉和枸杞粉进行混合，然后再将活性成分和辅料按1：1的比例加入进行混合，在CH‐200混合机里进行充分混合，设定混合时间为15分钟，温度为14度，同时进行搅拌，搅拌速度为20转/分，混均后备用；

5)将混合好的物料采用ZPW‐19B压片机进行压片，且压片时的压力为4.8千牛，压片时所有物料填充量6.2mm；每片虫草舞茸功能性食品中，活性成分的净含量为0.5g；且每10分钟检查一次每片所述虫草舞茸功能性食品中活性成分和辅料的总净含量，要求每片所述虫草舞茸功能性食品中活性成分和辅料的总净含量为1g(可控制在1.02‐1.05克之间)。

所述辅料可以是山梨糖醇、甘露糖醇和硬脂酸镁中任一种或几种，当选用两种或三种的时候，各辅料的含量相同或无明显差异。

工业实施时可选择的是，将压片好的虫草舞茸功能性食品传递窗到内包车间进行包装，每瓶装60克，每瓶放一袋2克干燥剂，瓶口铝箔封口，封口完的虫草舞茸功能性食品传递到外包装车间进行贴标，装箱；并将内包传递的虫草舞茸功能性食品瓶子贴标签，标签喷码生产日期，贴好瓶签虫草舞茸功能性食品装入大箱，每箱装120瓶；产品化验室检测合格入库。

所述虫草舞茸功能性食品中各成分的作用如下：

蛹虫草的作用：

1、免疫调节。蛹虫草中的虫草素能够极大地提高了人外周血液单核细胞IL-10的分泌和IL-10mRNA的表达，它还可以提高机体单核巨噬细胞系统的吞噬功能,激活巨噬细胞产生细胞毒素直接杀伤癌细胞。虫草素可能通过其他免疫调节作用对迟发型超敏反应引起的小鼠接触性皮炎发挥明显的抑制效应。

2、抗肿瘤。研究表明，蛹虫草中的虫草素对人鼻咽癌KB细胞和人宫颈癌HeLa细胞等皆具有明显的抑制作用。虫草素对核Ploy(A)多聚酶有很强的抑制作用，从而影响mRNA的形成，继而影响蛋白质合成。研究结果表明，虫草素通过对肿瘤细胞RNA的抑制表现出抗肿瘤作用。虫草素可在肿瘤增殖过程中抑制血管新生而呈现其抗癌作用，还可以通过激发肿瘤细胞中腺嘌呤核苷A3受体。

3、抗白血病。虫草素作为一种腺苷脱氨酶抑制剂,对末端脱氧核苷酸阳性白血病细胞(TdT+)的抑制大于对末端脱氧核苷酸阴性白血病细胞(TdT-)的抑制。虫草素对TdT+的白血病细胞的凋亡诱导与提高蛋白激酶A(PK-A)活性密切相关，并且经虫草素处理L1210白血病细胞，可显著抑制RNA的甲基化。

4、虫草素具有广谱抗菌的作用，它能抑制链球菌、鼻疽杆菌、炭疽杆菌、葡萄球菌等病原菌的生长。此外，虫草素对石膏样小芽孢癣菌、羊毛状小芽孢癣菌、须疮癣菌等皮肤致病性真菌以及枯草杆菌也有抑制作用。Sugar证明了虫草素具有非常强的抗真菌活性。虫草素也具有较强的抗病毒活性。

舞茸的作用：

1、经美国、日本众多临床实验研究发现，舞茸(即灰树花)提取物--D-fration可有效激活人体免疫细胞，如NK细胞，抗毒T细胞，吞噬细胞等，从而可以达到抑制肿瘤细胞生长，诱导癌细胞凋亡的功效。

2、舞茸提取物--sx-fraction可有效控制人体血糖，修复胰岛。

3、由于富含铁、铜和维他命C，它能预防贫血、坏血病、白癜风，防止动脉硬化和脑血栓的发生。

4、它的硒和铬含量较高，有保护肝脏、胰脏，预防肝硬化和糖尿病的作用。

沙漠肉苁蓉的作用：

1、抗衰老作用

2、调整内分泌、促进代谢及强壮作用

3、免疫系统的作用

4、促进脱氧核糖核酸合成

5、改善阳痿早泄

6、润肠排毒

人参的作用：

1、人参中的人参皂苷中有抗肿瘤的作用的物质成分，人参皂苷rh2、人参皂苷rh1、人参皂苷rg3和人参皂苷rg5都有一定的抗肿瘤活性。人参皂苷Rh2是人参中抗肿瘤功效最好的成分。

2、人参对糖代谢有双向调节作用，既能使葡萄糖性的高血糖症的血糖降低，又可使胰岛素引起的低血糖症的血糖升高。

3、人参能增加肝脏代谢各物质的酶活性，使肝脏的解毒能力增强，从而增强机体对各种化学物质的耐受力。

4、人参对心肌有保护作用。

枸杞的作用：

1、很多研究表明枸杞多糖具有促进免疫、抗衰老、抗肿瘤、清除自由基、抗疲劳、抗辐射、保肝、生殖功能保护和改善等作用。

2、枸杞色素具有提高人体免疫功能、预防和抑制肿瘤及预防动脉粥样硬化等作用。

本实施例中的虫草舞茸功能性食品可以用于制备用于恶性肿瘤、白血病、免疫系统疾病中任一种或几种的药物。可以用于治疗或辅助治疗(入化疗、放疗、手术后的治疗)，用于制备治疗和/或辅助治疗恶性肿瘤，如胃癌、肝癌、肺癌、直肠癌、结肠癌、食道癌、鼻癌、宫颈癌、乳腺癌、膀胱癌、胰腺癌、前列腺癌等，也可以用于白血病化疗或放疗后等治疗，还可以用于免疫系统疾病(如艾滋病)化疗或放疗后等治疗。

实施例2

本实施例提供一种虫草舞茸功能性食品，与实施例1不同的是，其活性成分由以下重量份原料构成：蛹虫草粉1.82份、舞茸粉1.82份、肉苁蓉粉1.12份、人参粉1.12份和枸杞粉1.12份。

其制备方法与实施例1相同。

实施例3

本实施例提供一种虫草舞茸功能性食品，与实施例1不同的是，其活性成分由以下重量份原料构成：蛹虫草粉2.45份、舞茸粉2.45份、肉苁蓉粉0.7份、人参粉0.7份和枸杞粉0.7份。

其制备方法与实施例1相同。

对比例1

与实施例1不同的是，活性成分：蛹虫草粉7份，其制备方法与实施例1相同。

对比例2

与实施例1不同的是，活性成分：舞茸粉7份，其制备方法与实施例1相同。

对比例3

与实施例1不同的是，活性成分：肉苁蓉粉7份，其制备方法与实施例1相同。

对比例4

与实施例1不同的是，活性成分：人参粉7份，其制备方法与实施例1相同。

对比例5

与实施例1不同的是，活性成分：枸杞粉7份，其制备方法与实施例1相同。

对比例6

本实施例提供一种虫草舞茸功能性食品，与实施例1不同的是，其活性成分由以下重量份原料构成：蛹虫草粉1.4份、舞茸粉2.45份、肉苁蓉粉1.05份、人参粉1.05份和枸杞粉1.05份，其制备方法与实施例1相同。

对比例7

本实施例提供一种虫草舞茸功能性食品，与实施例1不同的是，其活性成分由以下重量份原料构成：蛹虫草粉2.8份、舞茸粉2.1份、肉苁蓉粉0.7份、人参粉0.7份和枸杞粉0.7份，其制备方法与实施例1相同。

对比例8

本实施例提供一种虫草舞茸功能性食品，与实施例1不同的是，其活性成分由以下重量份原料构成：蛹虫草粉2.45份、舞茸粉1.4份、肉苁蓉粉1.05份、人参粉1.05份和枸杞粉1.05份，其制备方法与实施例1相同。

对比例9

本实施例提供一种虫草舞茸功能性食品，与实施例1不同的是，其活性成分由以下重量份原料构成：蛹虫草粉2.1份、舞茸粉2.8份、肉苁蓉粉0.7份、人参粉0.7份和枸杞粉0.7份，其制备方法与实施例1相同。

试验例1：虫草舞茸功能性食品提高体力实验

依据中华人民共和国卫生部《保健食品检验与评价技术规范》对保健食品功能评价中对缓解体力疲劳功能的基本要求进行实验。

(1)受试样品

实施例1制备的虫草舞茸功能性食品，为白色片剂，每片活性成分0.5g。成人日服用量建议剂量为一日一次，每次2片(约一日0.02g/kg·bw，按60kg计)。

(2)实验动物

采用小鼠作为受试动物，雌雄各半，体重18‐22g，使用屏障级动物房饲养，饲养室温度20～25℃，湿度55～65％，光照12h/d。

(3)剂量选择

动物购回，基础饲料喂养3天，随机分组，按推荐量的5、10、20倍设低、中、高3个剂量组:0.1、0.2、0.4g/kg·BW(按活性成分计)。低、中、高剂量试液配制时，分别取实施例1的片剂2片、4片和8片溶于200ml蒸馏水中，小鼠每日均称重，按相应剂量经口灌胃一次，灌胃体积为0.2ml/10g·bw，连续30d。另设阴性对照组(蒸馏水)和阳性照组(蔗糖)。

(4)实验方法

末次给予受试物30min后，小鼠尾部负荷5％体重的铅皮，放入水深30cm，水温(25±0.5)℃的游泳箱内。记录小鼠自游泳开始至死亡的时间,为小鼠游泳时间。

(5)统计学方法

采用SPSS17.0统计软件对统计所得的具体数据进行分析，所有计量资料用均t检验，所有计量资料用均数±标准差表示，计数资料比较采用t检验，如果P<0.05，则表示结果有统计学意义。

(6)虫草舞茸功能性食品对小鼠负重游泳时间的影响

虫草舞茸功能性食品中、高剂量0.2、0.4g/kg·bw组小鼠负重游泳时间显著长于阴性对照组(P<0.05)，同时，优选剂量组较中、高剂量组的功能效果更佳，且高于阳性对照组。具体见表1。

表1实施例1的虫草舞茸功能性食品对小鼠负重游泳时间的影响

组别	剂量(g/kg·bw)	动物数(只)	负重游泳时间(s)
				阴性对照组	0	15	298.67±37.68
阳性对照组	0.2	15	430.07±21.76*
				低剂量组	0.1	15	349.53±23.98
中剂量组	0.2	15	447.27±20.65*
				高剂量组	0.4	15	452.93±21.63*

*表示与阴性组数据相比差异性显著(P＜0.05)，具有统计学意义。

(7)实施例2‐3的试验结果与实施例1制备的虫草舞茸功能性食品功效相近，无显著性差异(p>0.05)。

(8)对比例1‐9制备的样品，与阴性对照组相比，无显著性差异(P>0.05)。

综上，本实验采用雌雄各半的小鼠，该虫草舞茸功能性食品按人体推荐剂量的5、10、20倍连续灌胃30天，结果表明0.1、0.2、0.4g/kg·bw剂量组小鼠负重游泳时间显著长于阴性对照组(P<0.05)，且优于阳性对照组。依据评价标准，本发明的虫草舞茸功能性食品具有缓解体力疲劳的作用。

上述实验结果表明，本发明提供的虫草舞茸功能性食品，通过各组分之间的协同作用，能够显著缓解体力疲劳(P＜0.05)。

试验例2：虫草舞茸功能性食品对肿瘤患者化疗后免疫功能的影响

1资料与方法

1.1一般资料

选择60例2016年6月～2017年8月肿瘤患者作为研究对象，男性患者67例，女性患者33例，年龄21～73岁，平均年龄(59.6±4.3)岁。所有患者经病理组织学或细胞学检查均确诊为晚期恶性肿瘤，诊断标准参照《常见恶性肿瘤诊治规范》中的相关规定，并依据国际抗癌联盟(UICC)临床分期，治疗前所有患者的卡氏评分均≥60分，其中9例患者为胃癌，8例患者为肝癌，7例患者为肺癌，6例患者为直肠癌，6例患者为乳腺癌，4例患者为胰腺癌，4例患者为膀胱癌，3例为食道癌，2例为白血病，4例为鼻癌，2例为宫颈癌，2例为前列腺癌，3例为结肠癌。

1.2方法

所有患者随机分为12组，每组5人，分别服用实施例1～3的虫草舞茸功能性食品及对比例1～9的产品，每日早饭后一次，一次2片，连服4周。

治疗结束后对患者治疗前后的免疫功能变化和治疗效果进行观察和比较。

1.3疗效评价标准

疗效以临床症状缓解情况进行评价：治疗后疼痛消失为有效；与治疗前相比疼痛有明显减轻为显效；与治疗前相比疼痛无减轻或明显变化为无效。总有效率＝[(有效+显效)/总例数]×100％。

1.4统计学方法

采用SPSS17.0统计软件对统计所得的具体数据进行分析，所有计量资料用均t检验，所有计量资料用均数±标准差表示，计数资料比较采用t检验，如果P<0.05，则表示结果有统计学意义。

2结果

2.1 60例患者治疗前后KPS评分变化

60例患者治疗前后KPS评分变化情况见表2，由表中数据可知，实施例1‐3的虫草舞茸功能性食品均能显著提高患者的KPS评分，对比例1‐6、8的产品与治疗前相比，患者的KPS评分五明显提高，对比例7和9的产品与治疗前相比，KPS评分虽由显著提高，但效果均与实施例相似，无明显提高，但成本会更高。

表2治疗前后患者KPS评分

	治疗前	治疗后
			实施例1	76.42±12.56	88.19±10.78*
实施例2	77.38±12.09	85.76±12.43*
			实施例3	77.15±10.89	86.83±11.72*
对比例1	77.19±10.76	80.04±12.64
			对比例2	77.27±11.38	80.18±12.73
对比例3	77.18±12.31	78.57±15.36
			对比例4	77.31±11.72	78.39±11.64
对比例5	77.68±12.91	78.76±12.84
			对比例6	77.29±12.78	81.27±13.16
对比例7	77.52±13.28	88.27±10.39*
			对比例8	77.18±12.43	81.37±11.69
对比例9	77.24±11.86	88.17±13.74*

*表示与治疗前相比，P<0.05，具有显著差异。

经统计学分析，本发明的虫草舞茸功能性食品能显著提高患者的KPS评分。

2.2 60例患者治疗前后免疫功能变化情况比较分析

抽取患者外周血5ml，采用流式细胞仪分析治疗前后患者外周血中CD3、CD4、CD8及NK细胞的变化。

患者治疗前后免疫功能变化情况见表3，由表中数据可知，实施例1～3治疗后患者外周血中的CD3、CD4、CD8及NK细胞的比例与治疗前相比均有显著的提高(P<0.05)。

表3治疗前后免疫功能变化

*与治疗前比，p<0.05，具有统计学意义，显著提高。

经统计学分析，实施例1‐3的虫草舞茸功能性食品均能显著提高患者的免疫力，对比例1‐6、8的产品与治疗前相比，患者的CD3、CD4、CD8及NK细胞的比例均无明显提高，对比例7和9的产品与治疗前相比，虽然CD3、CD4、CD8和NK细胞的比例随均有显著提高，但与实施例1‐3相似，无明显提高，成本却会更高。

2.3疗效

患者连续按照每日一次，每次2片的剂量服用实施例1‐3及对比例1‐9的食品4周后，疗效结果见表4。

表4患者治疗后疗效结果

	有效	显效	无效	总有效率(％)
					实施例1	11	4	0	100
实施例2	9	6	0	100
					实施例3	10	5	0	100
对比例1	2	5	8	46.7
					对比例2	1	7	7	53.3
对比例3	0	4	11	26.7
					对比例4	2	3	10	33.3
对比例5	1	3	11	26.7
					对比例6	4	6	5	66.7
对比例7	10	5	0	100
					对比例8	5	6	4	73.3
对比例9	11	3	1	93.3

从表4可以看出，本发明的虫草舞茸功能性食品能有效减轻患者的临床疼痛症状，总有效率达到100％。

试验3：虫草舞茸功能性食品对肿瘤细胞活性的影响

采用MTT法检测肿瘤细胞与本发明的所述虫草舞茸功能性食品共培养后的存活率，进而研究本发明的虫草舞茸功能性食品对肿瘤细胞活性的影响。

肿瘤细胞：人乳腺癌细胞MCF-7、人前列腺癌细胞PC-3、肝癌细胞HEPA1-6、肺癌细胞A549、人胃癌细胞BGC-823。

实验方法

(1)虫草舞茸功能性食品不同浓度溶液配制

取实施例1‐3及对比例1‐9中的片剂分别溶于蒸馏水配置成溶液，每个片剂配制浓度为1.25mg/ml、2.5mg/ml、5mg/ml、10mg/ml和15mg/ml，备用。

(2)细胞培养

每日于倒置显微镜下观察细胞形态及生长情况。当细胞生长至覆盖培养皿90％左右时传代，吸弃培养瓶内旧培养液，加入5ml PBS(磷酸缓冲盐溶液)荡洗，弃PBS，加入胰酶1ml，轻轻摇动培养皿，使胰酶浸过所有细胞，置于培养箱内消化5min左右，将培养皿置于显微镜下观察，待细胞相互分离，细胞质回缩，胞体变圆后，立即加入培养液2ml左右，终止消化，轻轻吹打细胞成均匀细胞悬液，离心1000rpm×5min洗涤细胞，弃上清。加入5ml新鲜的完全培养液重悬细胞并移入细胞培养皿，将细胞重新置于37℃、5％CO₂的培养箱中培养。

(3)MTT法测定药物对体外培养肿瘤细胞的增殖抑制作用

(a)取处于对数生长期的肿瘤细胞，用培养基稀释至适当浓度细胞悬液,96孔板每孔加入细胞悬液135μl，使96孔板每孔细胞数约为1×10⁴个。置于37℃、5％CO₂的培养箱中培养。

(b)待细胞贴壁后，每个孔加入各浓度药物15μl，并设空白对照孔(加15μl蒸馏水)，每组设6个平行孔，震荡混匀，37℃、5％CO₂的培养箱中培养72h。

(c)弃上清，每孔加入含MTT的不完全培养基150μl，37℃、5％CO₂的培养箱中孵育4h，小心弃上清，加入150μl DMSO(二甲基亚砜)，充分振摇使甲瓒结晶溶解，用酶联免疫检测仪于490nm处测定各孔光吸收度(OD)，并以下式计算细胞存活率：

细胞存活率％＝(实验组OD值/对照组OD值)×100％，

用添加产品浓度(与配制浓度对应的添加浓度是0.125mg/ml、0.25mg/ml、0.5mg/ml、1.0mg/ml和1.5mg/ml)作为横坐标，存活率作为纵坐标，作图。实验数据以平均值±标准差表示，经统计学分析，t检验，p<0.05时，为具有显著性差异，与空白对照组相比，具有显著性，用*表示。

(4)实验结果

实施例1‐3及对比例1‐9的MTT结果如图1‐12所示。

从图1‐3中可以看出，实施例1‐3中的虫草舞茸功能性食品，在添加浓度为0.25mg/ml及更高浓度的情况下，肿瘤细胞的存活率明显低于空白对照组(P<0.05)，即说明，实施例1‐3的虫草舞茸功能性食品，能显著抑制肿瘤细胞(人乳腺癌细胞MCF-7、人前列腺癌细胞PC-3、肝癌细胞HEPA1-6、肺癌细胞A549、人胃癌细胞BGC-823)的活性。从图4‐8可以看出，单独使用某一种成分得到片剂(对比例1‐5)，相对于空白对照组，虽然肿瘤细胞的活性有所减弱，但经过统计学分析，该变化并不显著(P＞0.05)，不具有统计学意义。从图9和11可以看出，当成分含量低于本发明的范围时，虽在某个浓度下出现对某种肿瘤细胞有显著的抑制作用(p＜0.05)，但仅对其中一种肿瘤细胞呈现抑制作用，而且该显著的抑制作用在高浓度下消失(p＞0.05)。结合图10和12可以看出，当成分含量高于本发明的范围时，对肿瘤细胞的抑制作用有些许变化(增强或减弱)，但是经过统计学分析，这样的变化相对于本发明的实施例1‐3而言是不显著的(P>0.05)，不具有统计学意义，也就是这样的变化不显著，但是，这会造成成本增加。

综上，本发明的虫草舞茸功能性食品能显著提高肿瘤患者的体力、免疫力，有效减小化疗或放疗或手术对患者的伤害，能有效抑制肿瘤细胞的活性，能显著延长肿瘤患者的生存期。

需要说明的是，以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

Claims (10)

1.一种虫草舞茸功能性食品，包括以下重量百分比的活性成分原料：

蛹虫草粉 25-35%

舞茸粉 25-35%

沙漠肉苁蓉粉 10-20%

人参粉 10-20%

枸杞粉 10-20%。

2.如权利要求1所述的虫草舞茸功能性食品，其特征在于：所述虫草舞茸功能性食品，包括以下重量份的活性成分原料：

蛹虫草粉 2份

舞茸粉 2份

沙漠肉苁蓉粉 1份

人参粉 1份

枸杞粉 1份。

3.如权利要求1所述的虫草舞茸功能性食品，其特征在于：所述虫草舞茸功能性食品，包括以下重量百分比的活性成分原料：

蛹虫草粉 1.82份

舞茸粉 1.82份

沙漠肉苁蓉粉 1.12份

人参粉 1.12份

枸杞粉 1.12份。

4.如权利要求1所述的虫草舞茸功能性食品，其特征在于：所述虫草舞茸功能性食品，包括以下重量百分比的活性成分原料：

蛹虫草粉 2.45份

舞茸粉 2.45份

沙漠肉苁蓉粉 0.7份

人参粉 0.7份

枸杞粉 0.7份。

5.如权利要求1-4中任一项所述的虫草舞茸功能性食品，其特征在于：所述虫草舞茸功能性食品为片剂。

6.如权利要求5所述的虫草舞茸功能性食品，其特征在于：所述虫草舞茸功能性食品还包括辅料。

7.如权利要求6所述的虫草舞茸功能性食品，其特征在于：所述辅料辅料是山梨糖醇、甘露糖醇和硬脂酸镁中任一种或几种。

8.如权利要求1-7中任一种所述功能性食品的制备方法，包括如下步骤：

1)将检验合格的原料蛹虫草粉、舞茸粉、沙漠肉苁蓉粉、人参粉和枸杞粉按工艺处方配比在配料车间过筛，过筛后所有物料在称量间进行称量；

2)把称量车间称量好物料传递窗传递到槽型混合车间，把活性成分及辅料投放到混合机里，按工艺要求设定混合时间，用不锈钢桶放出物料；

3)将混合好物料传递窗传递到压片车间进行压片。

9.优选的是，所述过筛的目数为80目。

10.如权利要求1-7中任一项所述的虫草舞茸功能性食品在制备用于恶性肿瘤、白血病、免疫系统疾病中任一种或几种的药物上的应用。