CN108403822A - 复方胃痛胶囊的有效成分在制备抗肿瘤药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种复方胃痛胶囊的有效成分在制备抗肿瘤药物中的应用。发明人发现已知的苗药复方胃痛胶囊对多种肿瘤细胞具有良好的抑制作用,为老药的新用途提供理论基础,为开发复方胃痛胶囊的抗癌作用提供了新思路。而且复方胃痛胶囊是已上市的苗药,能直接应用于人体而不再需要进行临床安全评估,具有很好的应用前景。本发明材料来源广泛,成本低廉,使用效果理想。
Description
技术领域
本发明涉及一种药物研究技术领域,尤其是一种复方胃痛胶囊的有效成分在制备抗肿瘤药物中的应用。
背景技术
苗药复方胃痛胶囊,由贵州万胜药业有限责任公司生产制造。胶囊剂,内容物为棕褐色的颗粒及粉末;气微香,味苦、涩。其有效成分包括五香血藤、九月生、徐长卿、吴茱萸、金果榄、拳参。中医行气活血,散寒止痛。用于寒凝气滞血瘀所致的胃脘刺痛,嗳气吞酸,食欲不振;浅表性胃炎以及胃、十二指肠溃疡。苗医旭嘎怡沓痂,替笨挡象;江苟给赖拿,精嘎瑶粘拿,江给苟,扎嘎,蒙杠抡,布兜江苟及,江苟给考巧。
发明内容
本发明的目的在于,发现了复方胃痛胶囊的有效成分在制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明的技术方案:复方胃痛胶囊的有效成分在制备抗肿瘤药物中的应用。
将复方胃痛胶囊的有效成分制成片剂、注射剂、胶囊剂、口服液或滴丸剂。
所述的有效成分包括五香血藤、九月生、徐长卿、吴茱萸、金果榄及拳参。
由于采用上述技术方案,本发明的优点在于:发明人发现已知的苗药复方胃痛胶囊对多种肿瘤细胞具有良好的抑制作用,为老药的新用途提供理论基础,为开发苗药复方胃痛胶囊的抗癌作用提供了新思路。而且复方胃痛胶囊是已上市的苗药,能直接应用于人体而不再需要进行临床安全评估,具有很好的应用前景。本发明材料来源广泛,成本低廉,使用效果理想。
附图说明
附图1为20μg/mL的苗药复方胃痛胶囊对对PC3、PC12、BPH、MDA、WM9、K562、HEL细胞生长的抑制作用;
附图2为不同浓度梯度的苗药复方胃痛胶囊(120μg/mL、80μg/mL、40μg/mL、20μg/mL、10μg/mL)对PC3、PC12、BPH、WM9、MDA、细胞生长的抑制作用;
附图3为苗药复方胃痛胶囊对小鼠体内接种癌细胞的存活率的影响。
附表1为附图2中不同浓度梯度的苗药复方胃痛胶囊(120μg/mL、80μg/mL、40μg/mL、20μg/mL、10μg/mL)对PC3、PC12、BPH、WM9、MDA、细胞生长的抑制率。
具体实施方式
本发明的实施例:复方胃痛胶囊的有效成分在制备抗肿瘤药物中的应用。
苗药复方胃痛胶囊MTT法抗癌活性检测
细胞及其它试剂
前列腺癌细胞株PC3、前列腺增生细胞BPH、人体乳腺癌细胞株MDA、白血病细胞株K562、黑色素瘤细胞株WM9人红白细胞白血病细胞HEL、大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞PC12均为贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室保存。DMEM培养基及胰酶购于Hycone公司,胎牛血清(FBS)购于浙江天杭生物科技有限公司,四甲基偶氮哩盐(MTT)购于Solarbio Life Science公司,二甲基亚飒(DMSO)及青链霉素混合液购于北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司,FITC.Annexin.V.Apoptosis Detection Kite I购于BD Bioscence公司。苗药复方胃痛胶囊由贵州万胜药业有限责任公司提供。
体外抗肿瘤活性检测
MTT溶液配制:称取MTT粉末0.2g,加入灭菌的PBS 40ml,60℃溶解,0.22μm过滤膜过滤除菌,4℃保存备用。
从液氮罐取出前列腺癌细胞株PC3、人体乳腺癌细胞株MDA、白血病细胞株K562、黑色素瘤细胞株WM9人红白细胞白血病细胞HEL、前列腺增生细胞BPH、大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞PC12复苏培养。
分别取对数生长期的细胞,以2×104个/mL密度接种96孔培养板中,每孔190μL,悬浮细胞4h加药,贴壁细胞8h后加药。首先检测20μg/mL的复方胃痛胶囊对七种癌细胞生长的抑制作用。每孔加药10μL,37℃、5%CO2培养箱中培养48h,加MTT溶液20μL(避光操作),置入CO2培养箱中继续培养4h,离心(1500rpm,8min),弃去上清液,每孔加150μL DMSO,放入摇床摇晃(10min,180rpm,25℃),用酶标仪波长490nm下测OD值(悬浮细胞570nm测定),计算抑制率。抑制率根据下面公式计算
根据初筛的结果检测不同浓度的复方胃痛胶囊(120μg/mL、80μg/mL、40μg/mL、20μg/mL、10μg/mL、0μg/mL)对MDA、BPH、PC3、PC12、WM9五种细胞的生长抑制作用,每个细胞每组5个平行。
研究结果表明苗药复方胃痛胶囊对BPH、PC3、PC12均有较好的生长抑制作用,其抑制率分别为14.82%、12.51%1、8.03%。对WM9和HEL的抑制率分别为4.22%和6.17%。对K562的抑制率为-7.13%,也就是能促进K562的生长。(图1)
进一步通过浓度梯度的形式研究苗药复方胃痛胶囊对各细胞的最佳作用浓度。由图2可看出,苗药复方胃痛胶囊对BPH,PC-12,PC-3均有较好的抑制率,其抑制率分别为68.14%,54.46%,44.47%。苗药复方胃痛胶囊在120μg/mL时对WM9和MDA的抑制率分别为31.6%和38.56%。由以上数据可看出,苗药复方胃痛胶囊可作为抗前列腺癌、乳腺癌、黑色素瘤的潜在药物。将苗药复方胃痛胶囊的有效成分按照上述实验数据制备成片剂、注射剂、胶囊剂、口服液或滴丸剂。
体内抗肿瘤活性检测
SCID小鼠购买于上海斯莱克实验动物有限责任公司,实验动物房喂养。分别收集对数增长期的PC3细胞和PC12细胞,生理盐水洗一次,配制成1×107个/mL的细胞悬液。使用1mL注射器,配合4号针头,每只小鼠注射0.2mL细胞悬液,PC3细胞和PC12细胞各注射100只小鼠。复方胃痛胶囊使用芝麻油溶解,配制成50μg/L溶液,小鼠腹腔注射当天开始给小鼠灌胃。一日一次,每次0.2mL。使用芝麻油作为对照组。小鼠一直培养三个月,期间统计死亡的小鼠。如图3所示,注射PC3细胞和PC12细胞而没有灌胃复方胃痛胶囊的实验组小鼠在70多天和90多天时全部死亡,而灌胃复方胃痛胶囊的实验组小鼠存活率则保持在80%左右。这说明复方胃痛胶囊对小鼠体内成瘤具有抑制作用,能够明显增加接种肿瘤细胞的SCID小鼠的存活率。
表1苗药复方胃痛胶囊浓度梯度抗肿瘤抑制率
Claims (3)
1.一种苗药复方胃痛胶囊的有效成分在制备抗肿瘤药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的苗药复方胃痛胶囊的有效成分在制备抗肿瘤药物中的应用,其特征在于:将所述的有效成分制备成片剂、注射剂、胶囊剂、口服液或滴丸剂。
3.根据权利要求2所述的苗药复方胃痛胶囊的有效成分在制备抗肿瘤药物中的应用,其特征在于:所述的有效成分包括五香血藤、九月生、徐长卿、吴茱萸、金果榄及拳参。
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