CN108403753A - 防治蓝耳病和圆环病毒的发酵中药及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供防治蓝耳病和圆环病毒的发酵中药的制备方法,包括以下步骤:(1)复合菌种固态发酵菌种的制备:所述发酵菌种为:黄芪中间根瘤菌、米曲霉菌、植物乳杆菌、嗜热链球菌和动物双歧杆菌动物亚种;将各菌种分别扩大培养;(2)发酵中药培养基的配制:发酵中药培养基由以下各组分配制而成:红糖,磷酸二氢钾,酵母膏,杜仲叶,黄芪,灵芝,羊红膻,余量为水;上述各组分重量百分比之和为100%;(3)发酵:将发酵中药培养基加热后,接种复合菌种固态发酵菌种进行厌氧发酵。本发明用复合菌种发酵复方中药,是一种高效的免疫促进剂,对动物重构免疫系统非常重要,因此使用复合菌种发酵后的中药其免疫能力提高,极大提高了中药的药效。

Description

防治蓝耳病和圆环病毒的发酵中药及其制备方法
技术领域
本发明属于兽医药技术领域,具体涉及防治蓝耳病和圆环病毒的发酵中药及其制备方法,更具体地,是利用多种菌种来发酵中药生产中药发酵物,来防治蓝耳病和圆环病毒。
背景技术
蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种急性高传染性疫病,由于PRRSV病毒容易变异,并可导致其毒力增强并引起新的流行与发病,因而表现发病急、流行广泛、致死率高、防治困难、经济损失大等特点,给我国养猪业带来严重损失。自2006年高致病性猪蓝耳病在我国暴发以来,不少猪场为了预防发病,常常使用猪蓝耳病疫苗和兽药而为人们带来较为可观的经济效益。然而,由于病毒的变异而导致疫苗作用的不稳定,给猪场带来很大风险,而使用抗生素的效果又差。
猪圆环病毒病是近年来倍受重视的一种在世界各地广泛存在的慢性疾病,是系列疾病的总称,其临床症状主要表现为进行性呼吸困难、消瘦和体表淋巴结肿大、腹泻、黄疸、贫血、死亡以及其他诸多临床症状;当与其他病原继发感染或并发感染时,症状表现更为复杂。病理特征为全身器官组织的炎性变化。该病已成为影响养猪业发展的传染病之一。圆环病毒严重破坏了猪的免疫系统,全身淋巴系统出现病变,造成免疫功能低下、继而造成机体的免疫抑制,抵抗力极弱,使条件性病原菌变为非条件性病原菌。因此一旦猪体内存在其他病毒或细菌、原虫感染,就会爆发流行,造成重大经济损失。由于严重破坏了免疫系统,导致各种疫苗接种应答效果差,接种免疫失败,并且诱发其他疾病爆发。迄今国内外尚无理想的化学药物防治措施。这两种疾病都是动物免疫力下降,继而引起继发感染,给养殖业带来巨大经济损失。
发明内容
本发明的目的旨在解决上述技术问题的不足,提供一种微生物发酵中药的技术,利用复合菌种发酵复方中药生产微生物中药制剂,用于提高动物免疫力,重建高效免疫系统,预防和治疗蓝耳病和圆环病毒。
本发明的第一个目的是提供防治蓝耳病和圆环病毒的发酵中药的制备方法,包括以下步骤:
(1)复合菌种固态发酵菌种的制备
所述复合菌种固态发酵菌种为:黄芪中间根瘤菌、米曲霉菌、植物乳杆菌、嗜热链球菌和动物双歧杆菌动物亚种;将各菌种分别扩大培养;
(2)发酵中药培养基的配制
所述发酵中药培养基由以下重量份数的各组分配制而成:红糖2~4%,磷酸二氢钾0.2~0.5%,酵母膏0.5~1%,杜仲叶10~50%,黄芪10~50%,灵芝10~50%,羊红膻10~50%,余量为水;上述各组分重量百分比之和为100%;
(3)发酵
将步骤(2)所述的发酵中药培养基加热至29-31℃后,接种步骤(1)所述的复合菌种固态发酵菌种进行厌氧发酵。
作为优选,步骤(1)中,扩大培养后,各菌种的菌落总数为:黄芪中间根瘤菌的菌落总数为2.0×103cfu/g,米曲霉菌的菌落总数为1.9×103cfu/g,植物乳杆菌的菌落总数为2.8×103cfu/g,嗜热链球菌的菌落总数为5.9×103cfu/g,动物双歧杆菌动物亚种的菌落总数为1.0×103cfu/g。
作为优选,步骤(2)中,所述发酵中药培养基的制备方法为:将杜仲叶,黄芪,灵芝和羊红膻分别切片,然后按照配比称取上述各组分,混合均匀即得。
作为优选,步骤(3)中,接种时,所述复合菌种固态发酵菌种中各菌种接种的体积百分比例为:黄芪中间根瘤菌10~40%,米曲霉菌10~40%,植物乳杆菌0~40%,嗜热链球菌0~40%,动物双歧杆菌动物亚种0~40%;作为进一步优选,所述复合菌种固态发酵菌种中各菌种接种的体积百分比例为:黄芪中间根瘤菌20%,米曲霉菌20%,植物乳杆菌20%,嗜热链球菌20%,动物双歧杆菌动物亚种20%。
作为优选,步骤(3)中,所述接种时接种量为1-2%。
作为优选,步骤(3)中,所述厌氧发酵是在温度为30℃下进行厌氧发酵,当pH值达到5.0时,即为发酵终点。
本发明的第二个目的是提供一种防治蓝耳病和圆环病毒的发酵中药,应用上述任一项的方法制备而成。
本发明的第三个目的是提供上述发酵中药在制备用于防治蓝耳病和圆环病毒的药物中的应用。
本发明的第四个目的是提供一种药物,所述药物的有效成分为权利要求7所述的发酵中药。
作为优选,所述药物还包括医学上可接受的辅料。
所述药物可以按照兽医领域常用的方法来制备,制备时可以加入医学上可接受的辅料。
本发明的有益效果是:用复合菌发酵复方中药,是一种高效的免疫促进剂,对动物重构免疫系统非常重要,因此使用复合菌种发酵后的杜仲叶、黄芪、灵芝和羊红膻复合物其免疫能力远远超过其它类产品。
具体实施方式
以下的实施例便于更好地理解本发明,但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料,如无特殊说明,均为市售。
本发明的防治蓝耳病和圆环病毒的发酵中药的制备方法为:
(1)复合菌种固态发酵菌种的制备
采用的复合菌种固态发酵菌种为:黄芪中间根瘤菌(Mesorhizobium sangaii)、米曲霉菌(Aspergillus oryzae)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)和动物双歧杆菌动物亚种(Bifidobacterium animalis subsp. Animalis)。
黄芪中间根瘤菌可以有效利用黄芪根茎中的纤维分解成多糖,大幅提高黄芪药效;米曲霉菌可以产生大量的抗菌肽,清除动物肠道内的有害菌;植物乳杆菌、嗜热链球菌和动物双歧杆菌动物亚种,这三种菌可以补充动物肠道乳酸菌的不足,提升动物的消化能力和免疫力。
上述各菌种均购自中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC),确保了各菌种的存活和质量。具体信息为:黄芪中间根瘤菌(CGMCC保藏号为1.15575)、米曲霉菌(CGMCC保藏号为 3.1358)、植物乳杆菌(CGMCC保藏号为1.568)、嗜热链球菌(CGMCC保藏号为1.3971)和动物双歧杆菌动物亚种(CGMCC保藏号为1.1852)。
各菌种的扩大培养
①将提纯后的黄芪中间根瘤菌和米曲霉菌的原菌液,分别进行培养,培养方法为:从斜面接入三角瓶中,振荡培养24小时;培养基为200重量份的土豆、20重量份的蔗糖、3重量份的磷酸二氢钾、1.5重量份的硫酸镁、20重量份的琼脂和1000重量份的水;培养温度为30℃;原菌液的接种量为4%。
②将提纯后的植物乳杆菌、嗜热链球菌和动物双歧杆菌动物亚种的原菌液,分别进行培养,培养方法为:从斜面接入克氏瓶中,温度控制30℃,培养24小时;培养基包括20重量份的葡萄糖、10重量份的蛋白胨、10重量份的牛肉膏、5重量份的酵母膏、5重量份的柠檬酸钠、2.5重量份的硫酸二氢钾、5重量份的乙酸钠、0.3重量份的七水硫酸镁、0.3重量份的四水硫酸锰、1重量份的吐温80和1000重量份的水;原菌液的接种量为4%。
扩大培养后各菌种的菌落总数为:黄芪中间根瘤菌的菌落总数为2.8×103cfu/g,米曲霉菌的菌落总数为1.6×103cfu/g,植物乳杆菌的菌落总数为2.3×103cfu/g,嗜热链球菌的菌落总数为5.3×103cfu/g,动物双歧杆菌动物亚种的菌落总数为1.5×103cfu/g。。
(2)发酵中药培养基的配制
发酵中药培养基由以下重量份数的各组分配制而成:红糖2~4%,磷酸二氢钾0.2~0.5%,酵母膏0.5~1%,杜仲叶10~50%,黄芪10~50%,灵芝10~50%,羊红膻10~50%,余量为水。
杜仲叶性味:微辛、性温;归经:入肝、肾经;功能主治:补肝肾;强筋骨;降血压;黄芪富含黄芪多糖,主要功效为补气固表,托毒排脓,利尿,生肌;灵芝具有具有补气安神、止咳平喘、延年益寿的功效;羊红膻具有温中散寒,健脾益气,养心安神,止咳祛痰之功效。这四位药共同组成的方剂具有快速提升免疫力,杀灭病毒的功效。
将杜仲叶,黄芪,灵芝和羊红膻分别切片,然后按照配比称取上述各组分,混合均匀即得,不需要调整pH值。
(3)发酵
将发酵中药培养基加热至30℃时接种步骤(1)得到的复合菌种固态发酵菌种,接种量为1-2%,采用厌氧发酵,温度30℃,发酵时间48~72小时,当pH值达到5.0时,即为发酵终点。在阳光房中晒干即可。
各菌种接种时的体积百分比例为:黄芪中间根瘤菌10~40%,米曲霉菌10~40%,植物乳杆菌0~40%,嗜热链球菌0~40%,动物双歧杆菌动物亚种0~40%。可以将各菌种混合后进行接种,也可以单一菌种逐个接种。
实施例1
本发明的防治蓝耳病和圆环病毒的发酵中药的最优制备方法为:
(1)固态复合发酵菌种的制备
采用的固态复合发酵菌种为:黄芪中间根瘤菌(Mesorhizobium sangaii)、米曲霉菌(Aspergillus oryzae)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)和动物双歧杆菌动物亚种(Bifidobacterium animalis subsp. Animalis)。
将各菌种进行扩大培养:
①将提纯后的黄芪中间根瘤菌和米曲霉菌的原菌液,分别进行培养,培养方法为:从斜面接入三角瓶中,振荡培养24小时;培养基包括200重量份的土豆、20重量份的蔗糖、3重量份的磷酸二氢钾、1.5重量份的硫酸镁、20重量份的琼脂和1000重量份的水;培养温度为30℃;原菌液的接种量为4%。
②将提纯后的植物乳杆菌、嗜热链球菌和动物双歧杆菌动物亚种的原菌液,分别进行培养,培养方法为:从斜面接入克氏瓶中,温度控制30℃,培养24小时;培养基包括20重量份的葡萄糖、10重量份的蛋白胨、10重量份的牛肉膏、5重量份的酵母膏、5重量份的柠檬酸钠、2.5重量份的硫酸二氢钾、5重量份的乙酸钠、0.3重量份的七水硫酸镁、0.3重量份的四水硫酸锰、1重量份的吐温80和1000重量份的水;原菌液的接种量为4%。
(2)发酵中药培养基的配制
发酵中药培养基由以下重量份数的各组分配制而成:红糖2%,磷酸二氢钾0.2%,酵母膏0.5%,杜仲叶15%,黄芪15%,灵芝15%,羊红膻15%,余量为水。
将杜仲叶,黄芪,灵芝和羊红膻分别切片,然后按照配比称取上述各组分, 混合均匀即得,不需要调整pH值。
(3)发酵
将发酵中药培养基加热至30℃时接种步骤(1)得到的复合菌种固态发酵菌种,接种量为1%,采用厌氧发酵,温度30℃,当pH值达到5.0时,即为发酵终点,发酵用时在48-72小时之间。在阳光房中晒干即可。
各菌种接种时的体积百分比例为:黄芪中间根瘤菌20%,米曲霉菌20%,植物乳杆菌20%,嗜热链球菌20%,动物双歧杆菌动物亚种20%。可以将各菌种混合后进行接种,也可以单一菌种逐个接种。
实施例2
本发明的防治蓝耳病和圆环病毒的发酵中药的制备方法为:
(1)固态复合发酵菌种的制备
采用的固态复合发酵菌种为:黄芪中间根瘤菌(Mesorhizobium sangaii)、米曲霉菌(Aspergillus oryzae)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)和动物双歧杆菌动物亚种(Bifidobacterium animalis subsp. Animalis)。
将各菌种进行扩大培养:
①将提纯后的黄芪中间根瘤菌和米曲霉菌的原菌液,分别进行培养,培养方法为:从斜面接入三角瓶中,振荡培养24小时;培养基包括200重量份的土豆、20重量份的蔗糖、3重量份的磷酸二氢钾、1.5重量份的硫酸镁、20重量份的琼脂和1000重量份的水;培养温度为30℃;原菌液的接种量为4%。
②将提纯后的植物乳杆菌、嗜热链球菌和动物双歧杆菌动物亚种的原菌液,分别进行培养,培养方法为:从斜面接入克氏瓶中,温度控制30℃,培养24小时;培养基包括20重量份的葡萄糖、10重量份的蛋白胨、10重量份的牛肉膏、5重量份的酵母膏、5重量份的柠檬酸钠、2.5重量份的硫酸二氢钾、5重量份的乙酸钠、0.3重量份的七水硫酸镁、0.3重量份的四水硫酸锰、1重量份的吐温80和1000重量份的水;原菌液的接种量为4%。
(2)发酵中药培养基的配制
发酵中药培养基由以下重量份数的各组分配制而成:红糖3%,磷酸二氢钾0.3%,酵母膏0.7%,杜仲叶20%,黄芪10%,灵芝10%,羊红膻10%,余量为水。
将杜仲叶,黄芪,灵芝和羊红膻分别切片,然后按照配比称取上述各组分, 混合均匀即得,不需要调整pH值。
(3)发酵
将发酵中药培养基加热至30℃时接种步骤(1)得到的复合菌种固态发酵菌种,接种量为2%,采用厌氧发酵,温度30℃,当pH值达到5.0时,即为发酵终点,发酵用时在48-72小时之间。在阳光房中晒干即可。
各菌种接种时的体积百分比例为:黄芪中间根瘤菌40%,米曲霉菌30%,植物乳杆菌10%,嗜热链球菌10%,动物双歧杆菌动物亚种10%。可以将各菌种混合后进行接种,也可以单一菌种逐个接种。
实施例3
本发明的防治蓝耳病和圆环病毒的发酵中药的制备方法为:
(1)固态复合发酵菌种的制备
采用的固态复合发酵菌种为:黄芪中间根瘤菌(Mesorhizobium sangaii)、米曲霉菌(Aspergillus oryzae)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)和动物双歧杆菌动物亚种(Bifidobacterium animalis subsp. Animalis)。
将各菌种进行扩大培养:
①将提纯后的黄芪中间根瘤菌和米曲霉菌的原菌液,分别进行培养,培养方法为:从斜面接入三角瓶中,振荡培养24小时;培养基包括200重量份的土豆、20重量份的蔗糖、3重量份的磷酸二氢钾、1.5重量份的硫酸镁、20重量份的琼脂和1000重量份的水;培养温度为30℃;原菌液的接种量为4%。
②将提纯后的植物乳杆菌、嗜热链球菌和动物双歧杆菌动物亚种的原菌液,分别进行培养,培养方法为:从斜面接入克氏瓶中,温度控制30℃,培养24小时;培养基包括20重量份的葡萄糖、10重量份的蛋白胨、10重量份的牛肉膏、5重量份的酵母膏、5重量份的柠檬酸钠、2.5重量份的硫酸二氢钾、5重量份的乙酸钠、0.3重量份的七水硫酸镁、0.3重量份的四水硫酸锰、1重量份的吐温80和1000重量份的水;原菌液的接种量为4%。
(2)发酵中药培养基的配制
发酵中药培养基由以下重量份数的各组分配制而成:红糖4%,磷酸二氢钾0.5%,酵母膏1%,杜仲叶10%,黄芪10%,灵芝10%,羊红膻10%,余量为水。
将杜仲叶,黄芪,灵芝和羊红膻分别切片,然后按照配比称取上述各组分, 混合均匀即得,不需要调整pH值。
(3)发酵
将发酵中药培养基加热至30℃时接种步骤(1)得到的复合菌种固态发酵菌种,接种量为2%,采用厌氧发酵,温度30℃,当pH值达到5.0时,即为发酵终点,发酵用时在48-72小时之间。在阳光房中晒干即可。
各菌种接种时的体积百分比例为:黄芪中间根瘤菌10%,米曲霉菌10%,植物乳杆菌40%,嗜热链球菌20%,动物双歧杆菌动物亚种20%。可以将各菌种混合后进行接种,也可以单一菌种逐个接种。
实施例4
本实施例与实施例1的不同之处在于:
发酵中药培养基由以下重量份数的各组分配制而成:红糖2.5%,磷酸二氢钾0.4%,酵母膏0.8%,杜仲叶30%,黄芪30%,灵芝15%,羊红膻10%,余量为水。
各菌种接种时的体积百分比例为:黄芪中间根瘤菌40%,米曲霉菌40%,植物乳杆菌10%,嗜热链球菌10%。
其余步骤均与实施例1相同。
实施例5
本实施例与实施例1的不同之处在于:
发酵中药培养基由以下重量份数的各组分配制而成:红糖2%,磷酸二氢钾0.3%,酵母膏0.9%,杜仲叶10%,黄芪10%,灵芝50%,羊红膻15%,余量为水。
各菌种接种时的体积百分比例为:黄芪中间根瘤菌40%,米曲霉菌20%,动物双歧杆菌动物亚种40%。
其余步骤均与实施例1相同。
实施例6
本实施例与实施例1的不同之处在于:
发酵中药培养基由以下重量份数的各组分配制而成:红糖2%,磷酸二氢钾0.5%,酵母膏0.6%,杜仲叶10%,黄芪10%,灵芝10%,羊红膻50%,余量为水。
各菌种接种时的体积百分比例为:黄芪中间根瘤菌10%,米曲霉菌10%,嗜热链球菌40%,动物双歧杆菌动物亚种40%。
其余步骤均与实施例1相同。
实施例7
本实施例与实施例1的不同之处在于:
发酵中药培养基由以下重量份数的各组分配制而成:红糖2%,磷酸二氢钾0.4%,酵母膏0.7%,杜仲叶10%,黄芪10%,灵芝30%,羊红膻30%,余量为水。
各菌种接种时的体积百分比例为:黄芪中间根瘤菌20%,米曲霉菌20%,植物乳杆菌10%,嗜热链球菌40%,动物双歧杆菌动物亚种10%。
其余步骤均与实施例1相同。
实施例8
本实施例与实施例1的不同之处在于:
发酵中药培养基由以下重量份数的各组分配制而成:红糖2.5%,磷酸二氢钾0.3%,酵母膏0.9%,杜仲叶20%,黄芪15%,灵芝30%,羊红膻10%,余量为水。
各菌种接种时的体积百分比例为:黄芪中间根瘤菌40%,米曲霉菌30%,植物乳杆菌10%,嗜热链球菌10%,动物双歧杆菌动物亚种10%。
其余步骤均与实施例1相同。
具体案例1
2017年4月,四川市绵阳市吴家镇张某养殖猪800余头,张某反映打完猪瘟疫苗后,仔猪及部分母猪出现发烧、呼吸困难、皮肤发红的症状。疑似猪瘟,该场发病后1周开始有部分仔猪死亡。发病症状:哺乳舍部分仔猪体温升高,精神沉郁,皮肤发红、潮湿,拉稀粪,母猪奶水不足;保育舍部分猪精神沉郁,拉黑色的稀粪,皮肤发红,不吃料。取保育舍 50日龄发病仔猪 1只和病死猪1只,现场剖检病猪肾未见有出血点,膀胱未见出血,肺脏有间质性肺炎,肺尖叶有明显对称性实变。经多位专家会诊,确定为蓝耳病。
取实施例1中发酵中药1000克拌料100公斤,7天后病情得到很好的控制,半月后猪场整体恢复正常。
具体案例2
2017年8月,四川省成都市某万头猪场仔猪暴发了一场疾病。560多头断奶1~2周仔猪发病,主要表现为体温升高,41~42℃,消瘦,脊骨明显突出,面部肿胀,眼球直视,可视黏膜黄疸,体表皮肤发黄,精神萎靡,运动失调,被毛粗乱,生长发育迟缓,食欲减退或废绝,呼吸困难,皮肤苍白,咳嗽,体表淋巴结特别是腹股沟淋巴结肿大。剖检变化:
送检的3头病死仔猪经剖检:患猪皮肤苍白,皮下出血;腹股沟浅淋巴结2~3倍肿大,颌下淋巴结、肠系膜淋巴结也有不同程度的肿胀,切面呈均匀的苍白色且硬度增加;肺部有灰褐色炎症和肿胀,呈弥漫性病变,比重增大,间质增宽,呈现“橡皮”样,个别猪肺泡出血;肝脏发暗,呈浅黄色或橘黄色外观;肾脏水肿,呈弥漫性出血,被膜易剥离;脾脏轻度肿大,呈肉样变化;胰腺、小肠和结肠可见肿大及坏死病变。
经专家诊断定性为圆环病毒引起的疾病,猪场根据专家建议采取相应的措施,隔离病猪,同时取实施例2中的发酵中药1000克拌料100公斤,病重的猪配合注射氟苯尼考、恩诺沙星和安乃近,除了病特别重的28头猪相继死亡,10天后病情得到逐步的控制,随后整个猪场均用实施例2中的发酵中药拌料10天预防,未发病的猪没有再发病,猪场恢复正常生产。
具体案例3
2017年5月,四川市绵阳市关帝镇王某养殖猪500余头,王某反映连续下了几天雨,仔猪及部分母猪出现发烧、呼吸困难、皮肤发红的症状。1周开始有部分仔猪死亡。经当地多位兽医会诊,确定为蓝耳病。
取实施例4中发酵中药1000克拌料100公斤,10天后病情得到很好的控制,1月后猪场整体恢复正常。
具体案例4
2016年12月,四川市广元市剑阁县赵某养殖猪4000余头,赵某反映打完疫苗后,先后有200多头猪发病,经当地一位兽医诊断为猪瘟,经半个月治疗,不见好转,相反病猪数量达到了800多头。主要表现为体温升高,41~42℃,消瘦,脊骨明显突出,面部肿胀,眼球直视,可视黏膜黄疸,体表皮肤发黄,精神萎靡,运动失调,被毛粗乱,生长发育迟缓,食欲减退或废绝,呼吸困难,皮肤苍白,咳嗽。经四川农业大学李教授诊断,确定为圆环病毒引起的疾病。
取实施例5中发酵中药2000克拌料100公斤,7天后病情得到很好的控制,半月后猪场整体恢复正常。
最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.防治蓝耳病和圆环病毒的发酵中药的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)复合菌种固态发酵菌种的制备
所述复合菌种固态发酵菌种为:黄芪中间根瘤菌、米曲霉菌、植物乳杆菌、嗜热链球菌和动物双歧杆菌动物亚种;将各菌种分别扩大培养;
(2)发酵中药培养基的配制
所述发酵中药培养基由以下重量份数的各组分配制而成:红糖2~4%,磷酸二氢钾0.2~0.5%,酵母膏0.5~1%,杜仲叶10~50%,黄芪10~50%,灵芝10~50%,羊红膻10~50%,余量为水;上述各组分重量百分比之和为100%;
(3)发酵
将步骤(2)所述的发酵中药培养基加热至29-31℃后,接种步骤(1)所述的复合菌种固态发酵菌种进行厌氧发酵。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)中,扩大培养后,各菌种的菌落总数为:黄芪中间根瘤菌的菌落总数为2.8×103cfu/g,米曲霉菌的菌落总数为1.6×103cfu/g,植物乳杆菌的菌落总数为2.3×103cfu/g,嗜热链球菌的菌落总数为5.3×103cfu/g,动物双歧杆菌动物亚种的菌落总数为1.5×103cfu/g。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(2)中,所述发酵中药培养基的制备方法为:将杜仲叶,黄芪,灵芝和羊红膻分别切片,然后按照配比称取上述各组分,混合均匀即得。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(3)中,接种时,所述复合菌种固态发酵菌种中各菌种接种的体积百分比例为:黄芪中间根瘤菌10~40%,米曲霉菌10~40%,植物乳杆菌0~40%,嗜热链球菌0~40%,动物双歧杆菌动物亚种0~40%;作为优选,所述复合菌种固态发酵菌种中各菌种接种的体积百分比例为:黄芪中间根瘤菌20%,米曲霉菌20%,植物乳杆菌20%,嗜热链球菌20%,动物双歧杆菌动物亚种20%。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(3)中,所述接种时接种量为1-2%。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(3)中,所述厌氧发酵是在温度为30℃下进行厌氧发酵,当pH值达到5.0时,即为发酵终点。
7.一种防治蓝耳病和圆环病毒的发酵中药,其特征在于:应用权利要求1-6任一项的方法制备而成。
8.权利要求7所述的发酵中药在制备用于防治蓝耳病和圆环病毒的药物中的应用。
9.一种药物,其特征在于:所述药物的有效成分为权利要求7所述的发酵中药。
10.根据权利要求7所述的药物,其特征在于:所述药物还包括医学上可接受的辅料。
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