CN108387660B - 一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法 - Google Patents

一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法，包括以下步骤：将烟熏鲟鱼糜加入乙腈‑丙酮混合提取液中振荡均匀，然后加入过量氯化钠后离心，再取上清液经离心、蒸干后以2mL正己烷复溶得到提取液，再将Ti4+ ‑IMAC单分散微球悬浮在二氯甲烷中作为填料填装到固相萃取空柱中压紧制成分子印迹固相萃取柱，将固相萃取柱活化后将提取液缓慢流经柱体，然后经淋洗、抽干、洗脱后取收集液，并通过氮气吹干、定容、过滤膜后得到待测品，最后经液相色谱质谱法对待测品进行检测。本发明具有专一性强、检测精度高、检测效果好的特点。

Description

一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法
技术领域
本发明涉及一种苯并芘的检测方法，特别是一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法。
背景技术
鲟鱼是世界上最大的淡水鱼类，因其肉质鲜美肥腻，营养丰富而具有巨大的加工潜力；由于鲟鱼肉经烟熏后具有特有的颜色和香味，导致目前的厂家多采用烟熏法对鲟鱼进行加工。但鲟鱼在烟熏或烘烤时受高温影响发生裂解与热聚合等反应会形成大量的苯并芘，而3,4-苯并芘(3,4-BaP)作为一种代表性的稠环芳烃具有很强的致癌性，它能够损伤DNA，造成细胞癌变并对内脏和神经系统造成损伤。因此，为了对消费者食品安全提供保障，职能部门需要对市面上烟熏鲟鱼中的苯并芘进行准确检测。
目前对烟熏水产品中的3,4-苯并芘提取方式大多为有机溶剂液液萃取法、中性氧化铝富集净化法、无机/有机复合材料固相微萃取法等前处理方法，而检测方法主要为气相色谱质谱法(GC-MS)、高效液相色谱法(HPLC)、液相色谱质谱法(LC-MS/MS)和酶联免疫吸附法(ELISA)。但由于目前对3,4-苯并芘的提取方式无法将烟熏水产品中的小分子杂质进行去除，而这些杂质会对3,4-苯并芘在检测时形成干扰，从而导致检测设备无法对产品进行正常检测，检测效果较差。此外，现有对3,4-苯并芘的检测方法还存在着专一性不强、灵敏度低等问题，难以满足人们对食品安全的要求。
发明内容
本发明的目的在于，提供一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法。它具有专一性强、检测精度高、检测效果好的特点。
本发明的技术方案：一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法，包括以下步骤：
①将烟熏鲟鱼去骨去皮后，取肌肉组织搅碎并斩拌均匀，然后取5g烟熏鲟鱼糜加入50mL的3：2v/v乙腈-丙酮混合提取液中振荡均匀，得A品；
②将A品加入过量氯化钠后离心15分钟；然后取上清液静置30分钟后迅速冷冻离心，再取上清液，得B品；
③将B品旋转蒸发至干后以2mL正己烷复溶，取提取液，得C品；
④取500mg的Ti4+-IMAC单分散微球混合悬浮在二氯甲烷中，然后将所得混合液作为填料填装到6mL的固相萃取空柱中，压紧制成固相萃取柱，得D萃取柱；
⑤依次用5mL的二氯甲烷和正己烷活化D萃取柱后，将2mL的C品缓慢流经柱体，使C品中的3,4-BaP与D萃取柱中的填料充分结合；然后使用10mL正己烷淋洗；得E萃取柱；
⑥将E萃取柱真空负压抽干后，使用5mL的二氯甲烷将E萃取柱中的3,4-BaP洗脱，然后将收集液放置在40℃下氮气吹干，用1mL乙腈定容，过0.22μm亲水PTFE滤膜，得F品；
⑦通过液相色谱质谱法对F品进行监测，得到检测结果。
前述的一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法中，所述②的具体步骤为：将A品加入过量氯化钠，以8000r/min的转速离心15分钟；然后取上清液在-70℃中静置30分钟后，迅速在-20℃下冷冻离心，取上清液得B品。
前述的一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法中，所述③的具体步骤为：将B品在40℃下旋转蒸发至干，然后以2mL正己烷复溶后，置于4℃下保存，得C品。
前述的一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法中，当步骤⑥中的收集液提取后，继续使用5mL二氯甲烷淋洗E萃取柱多次，待E萃取柱经检测无目标物洗出后用于下次检测。
前述的一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法中，所述Ti4+-IMAC单分散微球的制备方法包括以下步骤：
一.将每1.14mL的表面活性剂Triton-X100和1.25g的聚乙烯吡咯烷酮溶于64mL乙醇中，得G品；
二.取0.58g偶氮二异丁腈溶于16mL苯乙烯单体中，然后缓慢加入G品，再加热至70℃后搅拌24小时，使混合物逐渐由透明变为乳白色，得H品；
三.将H品在室温下10,000g离心5分钟，再将沉淀物收集后用20mL乙醇清洗3次，得I品；
四.配置聚乙烯醇和十二烷基环酸钠的混合溶液，得J品，其中聚乙烯醇的浓度为1％wt/wt，十二烷基环酸钠的浓度为0.25％wt/wt；
五.取15mL的J品加入0.45g的I品，然后通过超声震荡混匀,得K品；
六.取16.6mL甲苯、6.7mL甲基丙烯酸缩水甘油酯、6.7mL三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯、0.14g偶氮二异丁腈混合后溶于150mL的J品，超声后得到乳浊液；再将乳浊液加入K品中，加热至70℃后搅拌24小时，离心后得到沉淀物，然后将沉淀物经乙醇润洗并干燥，得L品；
七.取7g的L品加入150mL乙二胺中，并在80℃下搅拌3小时，然后经离心、润洗和干燥后得到M品；
八.取7g的M品分散于100mL纯水，再加入85％v/v磷酸5.1mL、37％v/v盐酸10mL和甲醛8mL，加热至100℃后搅拌24小时，再经离心、润洗、干燥后得到N品；
九.取100mg的N品加入20mL浓度为0.09M的TiO4盐酸溶液中,其中盐酸溶液的浓度为20％v/v，并在室温下搅拌反应8小时，然后将反应产物20000g离心5分钟，再经润洗、沉淀和干燥后，得成品。
前述的一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法中，所述液相色谱质谱法中的液相色谱条件包括：液相色谱柱为Waters Acquity UPLC BEH C18，100mm*2.1mm，1.7μm；配套保护柱为VanGuard BEH C18，5mm*2.1mm，1.7μm；流动相A为甲醇，流动相B为超纯水；流速为0.6mL/min；柱温为40℃，进样量为5μL。
前述的一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法中，所述液相色谱质谱法中的液相色谱柱梯度洗脱条件包括：0～4min，70～95％A；4～6min，95％A；6～8min，95～70％A；8～10min，70％A。
前述的一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法中，所述液相色谱质谱法中的质谱测定方式：使用针泵注射器以10μL/min的流速将10μg/kg的3,4-BaP标准溶液注入离子源中，通过在大气压化学电离源中以正离子的方式电离。
前述的一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法中，所述液相色谱质谱法中的质谱条件包括：离子化电压为5500V，离子源温度为600℃，气帘气为40psi，喷雾气为50psi，碰撞气为medium。
与现有技术相比，本发明采用分子印迹固相萃取的方式对3,4-BaP进行萃取，固相萃取柱与常规使用的极性分配固相萃取柱、亲水亲脂平衡固相萃取柱相比可以避免通过有机溶剂直接提取3,4-BaP，从而防止溶液中的基质干扰物在色谱柱和质谱仪检测时造成信号噪音，具有良好的萃取效率和回收率；再结合Ti4+-IMAC单分散微球颗粒间分散性较强的特点，使以此作为填料填充的固相萃取柱具备较优的多路径效应和径向轴向扩散效应，并具有较低的固定相和流动相间的传质阻力，从而实现了对3,4-BaP的充分吸取，并避免在淋洗时造成的3,4-BaP流失，进一步提高了本发明对3,4-BaP的回收效果和检测精度；本发明还根据3,4-BaP的特性分别设置了相应的液相色谱法和质谱法的检测条件，使液相色谱法和质谱法在对收集液进行检测时具有良好的检测专一性和检测效果，并且由于3,4-BaP为弱极性化合物，在质谱法的电喷雾离子源中不易电离，信号响应较低，因此通过正离子的电离方式能够使离子对信号达到最佳，进一步提高了质谱法对3,4-BaP的检测精度和检测效果。
此外，本发明将正己烷作为固相萃取柱的淋洗液可以最大限度地提高分子印迹填料结合位点和3,4-BaP分子之间的选择性作用，并去除非特异性作用和基质干扰，使固相萃取柱在保留分子印迹对3,4-BaP吸附性能的同时将脂类等有机杂质去除，提高了固相萃取柱在淋洗后的3,4-BaP回收率；将二氯甲烷作为固相萃取柱的洗脱剂能够对填料中3,4-BaP的洗脱效果达到最佳，并与Ti4+-IMAC单分散微球、正己烷相互配合使3,4-BaP的回收率达到96.4％，从而使本发明能够在排除有机杂质对检测造成的干扰的同时最大化的提取并保留检测物中的3,4-BaP含量。所以，本发明具有专一性强、检测精度高、检测效果好的特点。
附图说明
图1是Ti4+-IMAC单分散微球的制作流程图；
图2是本发明检测50μg/kg的3,4-BaP标准样品的液相色谱图；
图3是55放大倍率下的Ti4+-IMAC单分散微球的扫描电镜图；
图4是300放大倍率下的Ti4+-IMAC单分散微球的扫描电镜图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步的说明，但并不作为对本发明限制的依据。
实施例。一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法，包括以下步骤：
①将烟熏鲟鱼去骨去皮后，取可食用的肌肉组织搅碎并斩拌均匀，然后取5g烟熏鲟鱼糜加入50mL的3：2v/v乙腈-丙酮混合提取液中振荡均匀，得A品；
②将A品加入过量氯化钠后离心15分钟；然后取上清液静置30分钟后迅速冷冻离心，再取上清液，得B品；
③将B品旋转蒸发至干后以2mL正己烷复溶，取提取液，得C品；
④取500mg的Ti4+-IMAC单分散微球混合悬浮在二氯甲烷中，然后将所得混合液作为填料填装到6mL的固相萃取空柱中，压紧制成固相萃取柱(BISPE柱)，得D萃取柱，BISPE柱在对5μg/kg～50μg/kg的3,4-BaP标准品进行萃取时，其回收率均能够达到90％～96％，相比其他固相萃取柱能够有效提高对3,4-BaP的回收率；
⑤依次用5mL的二氯甲烷和正己烷活化D萃取柱后，将2mL的C品缓慢流经柱体，使C品中的3,4-BaP与D萃取柱中的填料充分结合；然后使用10mL正己烷淋洗，去除脂类等有机杂质；得E萃取柱，将正己烷作为淋洗液能够最大限度地提高分子印迹填料结合位点和3,4-BaP分子之间的选择性作用，从而在去除非特异性作用和基质干扰的同时最大程度的减少对3,4-BaP淋洗损耗；
⑥将E萃取柱真空负压抽干后，使用5mL的二氯甲烷将E萃取柱中的3,4-BaP洗脱，然后将收集液放置在40℃下氮气吹干，用1mL乙腈定容，过0.22μm亲水性PTFE微孔过滤膜，得F品，将二氯甲烷作为洗脱剂能够有效破坏目标物与分子印迹填料结合位点间的作用，从而获得高富集因子；
⑦通过液相色谱质谱法(LC-MS/MS)对F品进行监测，得到检测结果。
所述②的具体步骤为：将A品加入过量氯化钠，以8000r/min的转速离心15分钟；然后取上清液在-70℃中静置30分钟后，迅速在-20℃下冷冻离心，取上清液得B品。
所述③的具体步骤为：将B品在40℃下旋转蒸发至干，然后以2mL正己烷复溶后，置于4℃下保存，得C品。
当步骤⑥中的收集液提取后，继续使用5mL二氯甲烷淋洗E萃取柱多次，待E萃取柱经检测无目标物洗出后可用于下次检测，按上述方式制成的固相萃取柱可重复利用20次以上。
所述Ti4+-IMAC单分散微球的制备流程如图1所示，其制备方法包括以下步骤：
一.将每1.14mL的表面活性剂Triton-X100和1.25g的聚乙烯吡咯烷酮溶于64mL乙醇中，得G品；
二.取0.58g偶氮二异丁腈(AIBN)溶于16mL苯乙烯单体中，然后缓慢加入G品，再将混合液加热至70℃后搅拌24小时，使混合物逐渐由透明变为乳白色，得H品；
三.将H品在室温下10,000g离心5分钟，再将沉淀物收集后用20mL乙醇清洗3次，得I品(聚苯乙烯单分散微球)；
四.配置165mL的聚乙烯醇(PVA)和十二烷基环酸钠(SDS)的混合溶液(PVA&SDS水溶液)，得J品，其中聚乙烯醇的浓度为1％wt/wt，十二烷基环酸钠的浓度为0.25％wt/wt；
五.取15mL的J品加入0.45g的I品，经超声震荡混匀后转移至250mL三口瓶,得K品(聚苯乙烯单分散微球悬浮液)；
六.取16.6mL甲苯、6.7mL甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)、6.7mL三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯(TMPTMA)、0.14g偶氮二异丁腈(AIBN)混合后溶于150mL的J品(PVA&SDS水溶液)，超声后得到乳浊液；再将乳浊液加入K品中，加热至70℃后搅拌24小时，离心后得到沉淀物，然后将沉淀物经乙醇润洗并干燥，得L品(poly(GMA-co-TMPTMA)单分散微球)；
七.取7g的L品加入150mL乙二胺中，并在80℃下搅拌3小时，然后经离心、润洗和干燥后得到M品(poly(GMA-co-TMPTMA-NH2)单分散微球)；
八.取7g的M品分散于100mL纯水，再加入85％v/v磷酸5.1mL、37％v/v盐酸10mL和甲醛8mL，加热至100℃后搅拌24小时，再经离心、润洗、干燥后得到N品(poly(GMA-co-TMPTMA-PO3H2)单分散微球)；
九.取100mg的N品加入20mL浓度为0.09M(mol/L)的TiO4盐酸溶液中,其中盐酸溶液的浓度为20％v/v，并在室温下搅拌反应8小时，然后将反应产物20000g离心5分钟，再经润洗、沉淀和干燥后，得成品(Ti4+-IMAC单分散微球)。
所述液相色谱质谱法中的液相色谱条件包括：液相色谱柱为Waters AcquityUPLC BEH C18，100mm*2.1mm，1.7μm；配套保护柱为VanGuard BEH C18，5mm*2.1mm，1.7μm；流动相A为甲醇，流动相B为超纯水(Milli-Q超纯水)；流速为0.6mL/min；柱温为40℃，进样量为5μL。
所述液相色谱质谱法中液相色谱柱的梯度洗脱条件包括：0～4min，70～95％A；4～6min，95％A；6～8min，95～70％A；8～10min，70％A。
所述液相色谱质谱法的质谱测定方式：使用针泵注射器以
10μL/min的流速将10μg/kg的3,4-BaP标准溶液注入离子源中，通过在大气压化学电离源(APCI)中以正离子的方式电离。
所述液相色谱质谱法的质谱条件包括：离子化电压为5500V，离子源温度(TEM)为600℃，气帘气(CUR)为40psi，喷雾气(GS1)为50psi，碰撞气(CAD)为medium；其余质谱参数如表1所示：
表1. 3,4-BaP色谱质谱参数
Figure GDA0002483814910000091
本发明通过将Ti4+-IMAC单分散微球作为原料制成的BISPE柱，如图3-4所示，Ti4+-IMAC单分散微球颗粒间分散性较强，以此填充的固相萃取柱具备较优的多路径效应和径向轴向扩散效应，较低的固定相和流动相间的传质阻力；从而能够有效富集样品中的3,4-BaP并避免样品中的大分子蛋白质，小分子脂肪和碳水化合物进入填料中对色谱柱和质谱仪的检测造成干扰，并配合二氯甲烷和正己烷将样品淋洗、洗脱后的3,4-BaP回收率达到96.4％。并且本发明还根据3,4-BaP特性设置了相应的色谱质谱参数，使离子检测时能够对信号达到最佳，从而进一步提高了对3,4-BaP的检测效果。本发明能够对烟熏鲟鱼中的3,4-BaP含量进行准确检测，保证了消费者的食品安全。如图2所示(其中纵坐标为离子检测时的信号强度)，色谱仪在扫描时可见[M+H]+分子离子峰m/z为253.2，以分子离子峰进行子离子扫描(Product ion scan，PIS)，得到丰度较高的碎片离子信息，如m/z 224.1和m/z 226.1等。再通过对各参数的设置使离子对信号达到最佳。根据2002/657/EC确证分析需要4个识别点，故选择两对分子离子对，同时设定合适的峰驻留时间确保色谱峰的采样点数为12～18点，从而得到较好的定量重复性。
实验例1：将纯度≥99％的3,4-BaP标准品以甲醇为溶剂配置形成10μg/mL的3,4-BaP标准储备液，然后将其采用空白基质溶液配制成6种质量浓度的标准工作溶液，以3,4-BaP色谱图的峰面积(y)为纵坐标，质量浓度(x，μg/kg)为横坐标绘制标准曲线，得出线性回归方程y＝3726x+1233.5，线性范围5～1000μg/kg，和相关系数0.9998。同时，采用标准添加法进行测定，分别根据3和10倍信噪比(S/N)确定被测物的方法检出限(LoD)和定量限(LoQ)。结果如表2所示，3,4-BaP的线性良好，检出限和定量限分别为0.98和3.16μg/kg，满足3,4-BaP高灵敏度检测的需要。
在空白烟熏鲟鱼样品中添加3,4-BaP标准溶液，制备成含量分别为5、10和50μg/kg的加标样品；然后按本发明的检测方法及检测条件进行精密度和回收率试验，每个添加水平做6次平行测定。结果表明，三浓度水平下3,4-BaP的日内精密度和日间精密度的相对标准偏差分别为3.26～4.77％和3.78～5.26％；3,4-BaP的方法回收率为89.7％～95.3％，RSD为2.89％～3.44％，回收率较高，符合痕量分析的要求。
表2 3,4-BaP分子印迹固相萃取/液质联用法的灵敏度、精密度和回收率
Figure GDA0002483814910000101
a单位为μg/kg
实验例2：采用本发明建立的检测方法对市售30批次烟熏鲟鱼和20批次课题组研发的烟熏鲟鱼进行检测，并对结果进行数理统计分析。结果发现50个批次烟熏鲟鱼中，共计12个样品检出3,4-BaP为阳性，检出率为24％，除了1批次烟熏鲟鱼3,4-BaP含量达21.9μg/kg以外，其余批次烟熏鲟鱼中虽有3,4-BaP阳性信号，但是低于定量限，符合国际限量标准。结果表明，本发明适用于烟熏鲟鱼中3,4-BaP的检测，相关数据能为职能部门提供相关依据和参考，进而为消费者食品安全提供保障。

Claims (8)

1.一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
①将烟熏鲟鱼去骨去皮后，取肌肉组织搅碎并斩拌均匀，然后取5g烟熏鲟鱼糜加入50mL的3：2v/v乙腈-丙酮混合提取液中振荡均匀，得A品；
②将A品加入过量氯化钠后离心15分钟；然后取上清液静置30分钟后迅速冷冻离心，再取上清液，得B品；
③将B品旋转蒸发至干后以2mL正己烷复溶，取提取液，得C品；
④取500mg的Ti4+-IMAC单分散微球混合悬浮在二氯甲烷中，然后将所得混合液作为填料填装到6mL的固相萃取空柱中，压紧制成固相萃取柱，得D萃取柱；
⑤依次用5mL的二氯甲烷和正己烷活化D萃取柱后，将2mL的C品缓慢流经柱体，使C品中的3,4-BaP与D萃取柱中的填料充分结合；然后使用10mL正己烷淋洗；得E萃取柱；
⑥将E萃取柱真空负压抽干后，使用5mL的二氯甲烷将E萃取柱中的3,4-BaP洗脱，然后将收集液放置在40℃下氮气吹干，用1mL乙腈定容，过0.22μm亲水PTFE滤膜，得F品；
⑦通过液相色谱质谱法对F品进行监测，得到检测结果；
所述Ti4+-IMAC单分散微球的制备方法包括以下步骤：
一.将每1.14mL的表面活性剂Triton-X100和1.25g的聚乙烯吡咯烷酮溶于64mL乙醇中，得G品；
二.取0.58g偶氮二异丁腈溶于16mL苯乙烯单体中，然后缓慢加入G品，再加热至70℃后搅拌24小时，使混合物逐渐由透明变为乳白色，得H品；
三.将H品在室温下10,000g离心5分钟，再将沉淀物收集后用20mL乙醇清洗3次，得I品；
四.配置聚乙烯醇和十二烷基环酸钠的混合溶液，得J品，其中聚乙烯醇的浓度为1％wt/wt，十二烷基环酸钠的浓度为0.25％wt/wt；
五.取15mL的J品加入0.45g的I品，然后通过超声震荡混匀,得K品；
六.取16.6mL甲苯、6.7mL甲基丙烯酸缩水甘油酯、6.7mL三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯、0.14g偶氮二异丁腈混合后溶于150mL的J品，超声后得到乳浊液；再将乳浊液加入K品中，加热至70℃后搅拌24小时，离心后得到沉淀物，然后将沉淀物经乙醇润洗并干燥，得L品；
七.取7g的L品加入150mL乙二胺中，并在80℃下搅拌3小时，然后经离心、润洗和干燥后得到M品；
八.取7g的M品分散于100mL纯水，再加入85％v/v磷酸5.1mL、37％v/v盐酸10mL和甲醛8mL，加热至100℃后搅拌24小时，再经离心、润洗、干燥后得到N品；
九.取100mg的N品加入20mL浓度为0.09M的TiO4盐酸溶液中,其中盐酸溶液的浓度为20％v/v，并在室温下搅拌反应8小时，然后将反应产物20000g离心5分钟，再经润洗、沉淀和干燥后，得成品。
2.根据权利要求1所述的一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法，其特征在于，所述②的具体步骤为：将A品加入过量氯化钠，以8000r/min的转速离心15分钟；然后取上清液在-70℃中静置30分钟后，迅速在-20℃下冷冻离心，取上清液得B品。
3.根据权利要求1所述的一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法，其特征在于，所述③的具体步骤为：将B品在40℃下旋转蒸发至干，然后以2mL正己烷复溶后，置于4℃下保存，得C品。
4.根据权利要求1所述的一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法，其特征在于：当步骤⑥中的收集液提取后，继续使用5mL二氯甲烷淋洗E萃取柱多次，待E萃取柱经检测无目标物洗出后可用于下次检测。
5.根据权利要求1所述的一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法，其特征在于，所述液相色谱质谱法中的液相色谱条件包括：液相色谱柱为Waters Acquity UPLC BEH C18，100mm*2.1mm，1.7μm；配套保护柱为VanGuard BEH C18，5mm*2.1mm，1.7μm；流动相A为甲醇，流动相B为超纯水；流速为0.6mL/min；柱温为40℃，进样量为5μL。
6.根据权利要求5所述的一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法，其特征在于，所述液相色谱质谱法中的液相色谱柱梯度洗脱条件包括：0～4min，70～95％A；4～6min，95％A；6～8min，95～70％A；8～10min，70％A。
7.根据权利要求1所述的一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法，其特征在于，所述液相色谱质谱法中的质谱测定方式：使用针泵注射器以10μL/min的流速将10μg/kg的3,4-BaP标准溶液注入大气压化学离子源中，以正离子的方式电离。
8.根据权利要求7所述的一种烟熏鲟鱼中苯并芘的检测方法，其特征在于，所述液相色谱质谱法中的质谱条件包括：离子化电压为5500V，离子源温度为600℃，气帘气为40psi，喷雾气为50psi，碰撞气为medium。
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