CN108369233B - 基于标志物人附睾蛋白4 (he4)检测肺腺癌的复发的方法及相关用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及基于标志物人附睾蛋白4(HE4)和任选细胞角蛋白‑19片段(Cyfra21‑1)检测个体中的肺腺癌的复发的方法以及标志物在肺腺癌的复发的体外评价中的用途。

Description

基于标志物人附睾蛋白4 (HE4)检测肺腺癌的复发的方法及 相关用途
本发明涉及基于标志物人附睾蛋白4 (HE4)和任选细胞角蛋白-19片段(Cyfra21-1)检测个体中的肺腺癌的复发的方法以及标志物在肺腺癌的复发的体外评价中的用途。
肺癌是全世界最常见的癌症，其中在2012年有约180万新病例和160万新死亡。肺癌的治疗取决于癌症的特定细胞类型、其已传播多远和患者的表现状态。常见的治疗包括姑息护理、手术、化疗和放疗。肺癌的靶向疗法对于晚期肺癌的重要性日益增加。成功治疗后，需要仔细监测患者的复发。NSCLC的预后因素包括是否存在肺部症状、肿瘤大小、细胞类型(组织学)、扩散程度(分期)和至多个淋巴结的转移，以及血管侵袭。对于NSCLC，IA期疾病的完全手术切除实现最佳预后，其中五年存活率高至70％。
对切除术后的具有肺腺癌(ACL)的患者进行监控以检测复发的护理标准是高级成像，在大多数病例中，为计算机断层扫描术。迄今为止，体外测试，例如基于标志物蛋白的基于血液的测试不常用于复发的早期检测中。
已经提出细胞角蛋白19片段(Cyfra21-1)作为检测肺癌中的复发的标志物。已经在少数具有复发的患者(n = 15)中显示，Cyfra21-1水平在复发前或复发时增加。然而，患者没有通过组织学来区分，并且也没有指导临床决策的教导(例如检测复发的成像)(Niklinski等人, 1995, J Cardiovasc Surg (Torino) 36(5): 501-514)。这一发现被另一个工作组证实，所述工作组同样也使用Cyfra21-1，在小的患者组群(n = 15)中，来描述复发时Cyfra21-1水平的增加(Stieber等人, 1999, Anticancer Research 19: 2665-2668)。然而，该论文也没有区分ACL (肺腺癌)与非ACL。此外，Cyfra21-1尚未成为复发的早期诊断中的确定的监测标志物。
因此，仍然需要合适的体外测试方法，其避免或最小化对上述成像方法的需要，所述成像方法仅适用于相当大的肿瘤，其昂贵且与辐射暴露有关。
令人惊讶地，发现人附睾蛋白4(HE4)，任选地与Cyfra21-1组合，适用于复发的早期检测。如实施例和图1中所示，发现HE4略优于Cyfra21-1，并且HE4和Cyfra21-1的组合在复发的早期检测中就敏感性和曲线下面积(AUC)而言产生最好的结果。
因此，在第一个方面，本发明涉及检测个体中的肺腺癌的复发的方法，所述方法包括：
a) 在获得自个体的样品中测量标志物分子人附睾蛋白4 (HE4)的量或浓度，和
b) 通过比较步骤(a)中测定的量或浓度与对照中确定的量或浓度来检测复发，其中相对于对照增加的HE4值表明复发。
任选地，步骤(a)还包括在获得自个体的样品中测量标志物分子细胞角蛋白-19片段(CYFRA 21-1)的量或浓度，其中相对于对照增加的CYFRA 21-1值表明复发。
在第二个方面，本发明涉及检测个体中的肺腺癌的复发的方法，所述方法包括：
a) 在获得自个体的样品中测量标志物分子HE4和CYFRA 21-1的量或浓度，和
b) 通过比较步骤(a)中测定的标志物的组合值与如对照中确定的组合值来检测复发，其中相对于对照增加的组合值表明复发。
HE4编码含有高度保守的WAP (乳清酸性蛋白)结构域的蛋白(13kD)，其表明推定的丝氨酸蛋白酶抑制剂活性。在其成熟的糖基化形式，所述蛋白大约为20-25kD，并且由含有两个WFDC (乳清酸性四-二硫化物核心)结构域的单一肽组成。所述蛋白涉及精子成熟并且可能在天然免疫中具有作用，但HE4的生物学功能是未知的。有趣的是，HE4被鉴定为狗的纤维化肾脏中上调最多的基因。HE4也被报道为在小鼠的纤维化肾脏中显著上调，并且发现其在人肾移植物活检组织中的转录水平与低的估计肾小球滤过率密切相关。尽管有这些观察，但HE4在肾纤维化中的作用及其推定的丝氨酸蛋白酶活性仍未被探索。
HE4 cDNA首先分离自人附睾(Kirchhoff等人, 1991 Biol. Reprod. 45:350-357)，且HE4 cDNA后来在由卵巢癌构建的cDNA文库中以高频率检测到(Wang等人, 1999Gene 229:101; Schummer等人, 1999 Gene 238:375)。校正的HE4a序列公开于Hellstrom等人, 2003, Cane. Res. 63:3695-3700和美国专利7,270,960中。HE4a表现出与早期出版物中被称为HE4的分子的推断序列高度相似、但不同的氨基酸序列。为了本公开的目的，HE4或HE4a被认为是同义的，并且在本文中被同义地被称为HE4。HE4的氨基酸序列和校正的序列HE4a分别由Kirchhoff等人，同上和US 7,270,960中已知。
到目前为止，已经提出HE4作为预后的，但不是监测标志物。肿瘤生物标志物可以分为不同的类型。预后标志物是客观可测量且提供关于癌症疾病的可能结果的信息的临床或生物学特征。其告知患者在疾病过程期间可能做得如何好(例如，是否具有更侵袭性的疾病和短期存活等)以及所述疾病在任何时间点将可能如何表现。其旨在客观评估患者的总体结果，诸如标准治疗后癌症复发的可能性。通常，在诊断时测量和评估预后生物标志物。预后标志物的存在或不存在可用于选择患者的治疗。相比之下，监测标志物是临床或生物学特征，其提供关于癌症复发的时间点的信息，并预测或表明癌症将在何时返回，或癌症是在何时返回的。其旨在客观评估需要特定临床干预的时间点。重要的是，预后因素定义了患者或肿瘤特征对患者结果的影响，而监测因素定义了疾病复发的时间点。因此，监测标志物在治疗之后测量。可以重复测量以监视患者，例如，频繁地(至少3、4或5次)，以固定的时间间隔(例如每3或6个月)或在预定的时间点(例如从治疗起3、6或9个月或治疗后的每整年)等。
在本发明前，发现HE4表达与更差的预后相关并且是肺腺癌的可能的预后因素。(Yamashita等人, 2011, Tumor Biol. 32: 265-271; Yamashita等人, 2012, JThoracic Oncology 7(6), Suppl. 1, S44)。因此，提出HE4具有预后价值。HE4尚未被认为是监测标志物，更没有用于肺腺癌。
Cyfra21-1属于细胞角蛋白家族。细胞角蛋白是形成上皮中间丝的亚基的结构蛋白，其是细胞骨架的主要组分。迄今为止，已经鉴定了分子量范围为40至70千道尔顿(kD)的20种不同的细胞角蛋白多肽。由细胞合成的细胞角蛋白的类型也受生长和分化率的影响。由于其特定的分布模式，它们非常适合于用作肿瘤病理学中的分化标志物。CYFRA21-1是细胞角蛋白19的片段，其是上皮细胞中的细胞骨架的一部分，并且可以在上皮来源的肿瘤中以过表达的方式被发现。完整的细胞角蛋白多肽溶解性较差，但可以在血清中检测到可溶性片段(Bodenmueller等人, 1994, Int. J. Biol. Markers 9: 75-81)。CYFRA21-1是非小细胞肺癌(NSCLC)的充分确定的标志物。CYFRA21-1的主要适应症是监测非小细胞肺癌(NSCLC)的进程(Sturgeon, 2001, Clinical Chemistry 48: 1151-1159)。在初步诊断中，高CYFRA21-1血清水平指示具有非小细胞肺癌的患者中的晚期肿瘤阶段和不良预后(vander Gaast等人, 1994, Br. J. Cancer 69: 525-528)。正常或仅稍微升高的值不排除肿瘤的存在。CYFRA21-1血清水平迅速下降至正常范围内证明了成功的疗法。恒定的CYFRA21-1值或CYFRA21-1值的轻微或仅缓慢下降指示肿瘤切除不完全或多个肿瘤的存在，以及相应的治疗和预后后果。
肺癌也被称为肺癌(carcinoma of the lung)或肺癌(pulmonary carcinoma)，并且是特征在于肺组织中不受控制的细胞生长的恶性肺肿瘤。如果保持不进行治疗，则该生长可通过转移到附近组织或身体的其它部分的过程扩散到肺外。在肺中开始的，被称为原发性肺癌的大多数癌症，是源自上皮细胞的癌。肺癌的四种主要组织学类型是鳞状细胞癌、腺癌、大细胞癌和小细胞癌(SCLC)。前三种亚型通常被称为非小细胞癌(NSCLC)，并且占肺癌的大约80％。肺部肿瘤的诊断一般基于成像方法和活检样品的分析。2004年世界卫生组织(WHO)的肺部肿瘤纲要是肺癌分类的基础。这并入了许多发展，包括对肺癌异质性的认识，用于一些神经内分泌肿瘤的常规诊断的诊断性免疫组织化学染色(IHC)技术的介绍，以及识别新描述的实体诸如胎儿腺癌、囊性粘液性肿瘤和大细胞神经内分泌癌。
在2011年，代表国际肺癌研究协会(IASLC)、美国胸科学会(ATS)和欧洲呼吸学会(ERS)的多学科专家小组提议对分类系统进行重大修订。这些变化主要影响腺癌的分类及其与鳞状细胞癌的区别。肿瘤学家和病理学家对肿瘤进行分类的现行国际标准由“WHOClassification of Tumours of the Lung, Pleura, Thymus and Heart”(Travis等人,2015, WHO Classification of Tumours，第7卷，第4版)提供。在本发明的上下文中有疑问的情况下，应用上述标准。
腺癌是当代系列中最常见的肺癌类型，占肺癌病例的大约一半。腺癌发病率增加被认为是由于在1960年代引入低焦油滤嘴香烟，尽管这种因果关系未经证实。肺腺癌是在遍布全身的粘液分泌腺体中形成的肺癌类型。肺腺癌I期和II期的接受的治疗是手术切除，其中全肺叶或更大的切除优于亚肺叶切除(还参见下文)。系统纵隔淋巴结切除的行为改进了分期的准确性，并且可能具有治疗益处。这些患者中的至少50％会发展局部复发或远端转移。因此，复发的早期发现对肺腺癌具有高度相关性。
如本文所详述，本发明涉及检测复发。复发是过去的医疗病况(本发明中是肺腺癌)的再次发生。病况的体征和症状在缓解后恢复。癌症的再次发生被定义为癌症在治疗后以及癌症不能被检测到的一段时间后的恢复。同一癌症再次出现在其首次发现或非常接近的同一地方。
复发将在个体中被检测到。根据本发明的个体可以是任何人或非人动物，尤其是哺乳动物。因此，本文描述的方法和组合物适用于人和兽医疾病。显然，特别感兴趣的非人哺乳动物包括家养动物、宠物和具有商业价值(例如家养动物，诸如马)或个人价值(例如宠物，诸如狗、猫)的动物。
该方法特别优选用于人受试者，对此，通常采用包括监测复发的诊断方法。在一个特别优选的实施方案中，所述个体因此是人。替代地或另外地，所述个体被认为就肺腺癌而言被成功治疗，特别是通过切除和/或化疗。就肺腺癌而言“被成功治疗”是指治疗后的患者不再显示肺腺癌的任何医学体征和症状。然而，未检测到的癌细胞可以在治疗后留在体内，引起癌症后来恢复(称为再次发生或复发)。
“切除”是手术移除部分或全部受损器官或结构，特别是移除肿瘤。肺切除是手术移除全部或部分的肺。切除的类型将基于肿瘤位置、大小和类型，以及您在诊断前的整体健康和肺功能。在右侧，肺具有三叶，并且在左侧存在两个叶。通常，癌症手术涉及移除肺叶，称为肺叶切除术。楔形切除或分段切除术是指移除小于肺叶的肺部区域，通常是肿瘤和其周围的小区域的健康肺组织。这是用于早期癌症的治疗，并且有时用于移除疑似癌症、但尚未得到证实的一块肺。在肺叶切除术中，外科医生移除肺叶。这是对于肺癌进行的常规手术，因为这具有移除所有癌性组织并减少癌症复发的机会的最佳机会。肺切除术是移除整个肺。如果肿瘤特别大，或在肺部难以到达或中心位置，则考虑该选项。尽管肺切除术可以导致功能的显著损失，但许多人仅用一个肺就活得相当好。
“化疗”是癌症的药物治疗。其通常是系统性的，这是指它循环通过并影响您的整个身体。药物进入血液并杀死异常细胞或阻止它们分裂。它们最通常通过经由导管静脉内(IV)输注至静脉中或口服来给予。癌症的类型、分期和位置将决定您化疗的具体药物、强度和频率。其可以与手术或辐射组合。化疗可以在手术(有时伴随放疗)之前施用以尝试缩小肿瘤(新辅助疗法)，在手术(有时伴随放疗)之后施用以尝试杀死任何可能遗留的癌细胞(辅助治疗)，或作为主要治疗(有时伴随放射治疗)用于更晚期的癌症或一些健康水平不足以进行手术的患者。其通常周期地给予，具有治疗期(通常1至3天)，随后为休息期以给予身体恢复的时间。然而，一些化疗剂每天给予。周期通常持续约3至4周。化疗剂的实例包括顺铂、卡铂、紫杉醇(Taxol®)、白蛋白结合的紫杉醇(nab-紫杉醇，Abraxane®)、多西他赛(Taxotere®)、吉西他滨(Gemzar®)、长春瑞滨(Navelbine®)、伊立替康(Camptosar®)、依托泊苷(VP-16®)、长春花碱或培美曲塞(Alimta®)。最经常地，NSCLC的治疗使用2种化疗剂的组合。研究已显示，添加第三种药物并没有带来很多益处，并可能引起更多的副作用。单药化疗有时用于不能很好耐受联合化疗的人，诸如整体健康不佳或较年长的那些。如果使用组合，经常包括顺铂或卡铂加一种其他药物。有时可以使用不包括这些药物的组合，诸如吉西他滨与长春瑞滨或紫杉醇。对于患有晚期肺癌且符合某些标准的个体，也可以在治疗中添加靶向治疗药物诸如贝伐单抗(Avastin®)或西妥昔单抗(Erbitux®)。
放疗经常与化疗一起给予，并且可以在不适合手术的具有NSCLC的患者中以治愈意图使用。这种高强度放疗的形式被称为根治性放疗。该技术的细化是连续超分割加速放疗(CHART)，其中在短时间段内给予高剂量的放疗。在用于NSCLC的意图治愈的手术后，通常不应当使用术后胸部放疗。如果癌生长阻断短的支气管的区段，可以在气道内直接给予近距离放疗(局部放疗)以打开通道。与体外放射治疗相比，近距离放疗允许减少治疗时间并减少对健康护理人员的辐射暴露。然而，近距离放疗的证据少于体外放射治疗的证据。
为了检测复发，从个体获得样品。样品可以是适合于测量根据本发明的一种或多种标志物的任何样品，并且是指为了体外评估的目的而获得的生物样品。其包含可以与个体特异性地相关的材料，并且从其中可以测定、计算或推断关于个体的特异信息。样品可以全部或部分由来自患者的生物材料(例如，从肺活检样品获得的实体组织样品)构成。样品也可以是允许在样品上进行测试的方式接触患者的材料，其提供关于个体的信息(例如，支气管流体)。所述样品可以优选包含任何体液。示例性测试样品包括血液、血清、血浆、尿液、唾液和来自肺部的流体(诸如上皮衬液)，例如，通过支气管镜检或支气灌洗获得。所述样品可以从个体取得并立即使用或在测量步骤a)之前进行处理。处理可以包括纯化(例如分离，诸如离心)、浓缩、稀释、裂解细胞组分、冷冻、酸化、保存等。优选的样品是全血、血清、血浆或来自肺的上皮衬液，其中血浆、血清或全血代表最方便的样品类型。
通常，血液相关的样品是用于本发明上下文中的优选的测试样品。为此，血液可以抽取自静脉，通常取自肘部内侧或手背。具体地，在婴儿或年幼儿童中，可以使用被称为刺血针的尖锐工具以刺穿皮肤并使其流血。可以收集血液，例如至移液管中，或至载片或测试条上。因此，在本发明的一个优选实施方案中，获得自个体的样品是血液样品，特别是选自血清、血浆和全血。
在样品中，测量一种或多种标志物分子的量或浓度。用于测量标志物分子(特别是HE4和/或Cyfra21-1)的各种方法是本领域中已知的，并且可以使用这些中的任一种。
优选地，通过使用特异性结合剂，从液体样品中特异性测量一种或多种标志物。
特异性结合剂是例如标志物的受体或标志物的抗体或与标志物蛋白相关核酸互补的核酸(例如与标志物的mRNA或其相关部分互补的核酸)。优选地，在蛋白水平上测量所述一种或多种标志物分子。
作为标志物多肽的结合配偶体的蛋白的测定可以使用许多已知的用于鉴定和获得与蛋白或多肽特异性相互作用的蛋白的方法中的任一种(例如酵母双杂交筛选系统，诸如美国专利号5,283,173和美国专利号5,468,614中所述，或等同方案)进行。特异性结合剂对其相应的靶分子具有优选至少107 l/mol的亲和力。特异性结合剂对其靶分子优选地具有108 l/mol的亲和力或甚至更优选109 l/mol的亲和力。如技术人员将理解，术语特异性用于表明存在于样品中的其它生物分子不显著地结合对标志物特异性的结合剂。优选地，与除靶分子以外的生物分子结合的水平导致的结合亲和力分别为与靶分子的亲和力的仅10%或更低、更优选仅5%或更低。优选的特异性结合剂将满足以上亲和力以及特异性二者的最低标准。
优选地，特异性结合剂为与标志物(特别是HE4或Cyfra21-1)反应的抗体。术语抗体是指多克隆抗体、单克隆抗体、此类抗体的抗原结合片段、单链抗体以及包含抗体的结合结构域的基因构建体。
术语“抗体”包括多克隆抗体、单克隆抗体、其片段诸如F(ab')2和Fab片段以及任何天然存在或重组产生的结合配偶体，其为特异性结合HE4多肽的分子。可以使用仍符合以上特异性结合剂的标准的任何抗体片段。抗体通过现有技术程序产生，例如，如Tijssen(Tijssen, P., Practice and theory of enzyme immunoassays, Elsevier SciencePublishers B.V., Amsterdam (1990), 全书，特别是第43-78页)中所述。此外，技术人员应完全知晓，可用于抗体的特异性分离的基于免疫吸附剂的方法。通过这些方式，可以增强多克隆抗体的质量并由此增强其在免疫测定法中性能(Tijssen, P., 同上, 第108-115页)。
对于如本发明中所公开的成果，可使用在例如山羊中产生的多克隆抗体。然而，显然还可以使用来源于不同物种(例如，大鼠、兔或豚鼠)的多克隆抗体，以及单克隆抗体。由于单克隆抗体可以以任何所需的量和恒定特性生产，所以其代表了用于临床常规的测定法的开发中的理想工具。
对于测量，将获得自个体的样品与所讨论的标志物的特异性结合剂在适于形成结合剂标志物-复合物的条件下孵育。此类条件不必是指定的，因为技术人员在无需任何创造性努力的情况下就可以容易地鉴定此类适当的孵育条件。测量结合剂标志物-复合物的量并将其用于本发明的方法和用途中。如技术人员将理解，存在测量特异性结合剂标志物-复合物的量的许多方法，其均在相关教科书中详细描述(参见，例如，Tijssen P., 同上, 或Diamandis, E.P. 与 Christopoulos, T.K.(编撰), Immunoassay, Academic Press,Boston (1996))。
具体地，在定量(测定一种或多种标志物的量或浓度)免疫测定法中，使用一种或多种标志物(HE4和任选Cyfra21-1)的单克隆抗体。
优选地，以夹心型测定法的形式来检测标志物。在这种测定法中，在一侧上使用第一特异性结合剂以捕获所讨论的标志物，并在另一侧上使用被标记以可直接或间接检测的第二特异性结合剂(例如第二抗体)。第二特异性结合剂可以含有可检测的报道部分或标记，诸如酶、染料、放射性核素、发光基团、荧光基团或生物素等。任何报道部分或标记都可以与本文公开的方法一起使用，只要这样的信号与洗涤后保留在支持物上的结合剂的量直接相关或成正比。然后，使用对于特定可检测的报道部分或标记适当的方法，测定保持与固体支持物结合的第二结合剂的量。对于放射性基团，闪烁计数或放射自显影方法通常是适当的。可以使用各种偶联技术制备抗体酶缀合物(对于综述，参见例如Scouten, W. H.,Methods in Enzymology 135:30-65, 1987)。光谱学方法可用于检测染料(包括，例如，酶反应的比色产物)、发光基团和荧光基团。可以使用与不同的报道基团(通常是放射性或荧光基团或酶)偶联的抗生物素蛋白或链霉抗生物素蛋白检测生物素。通常可以通过添加底物(通常持续特定时间段)，随后光谱法、分光光度法或反应产物的其他分析，而检测酶报道基团。可以使用众所周知的技术，将标准品和标准添加用于测定样品中的抗原的水平。
如上所述，存在各种测量HE4的方法。用于测量HE4的市售产品包括HE4酶免疫测定法(EIA)(Fujirebio Diagnostics Inc., Goteborg, Sweden)和ARCHITECT HE4测定法(Abbott, Wiesbaden, Germany)。优选地，使用“Cobas Elecsys® HE4”(材料号：05950929190, Roche Diagnostics, Ltd, Rotkreuz, Switzerland)(其为用于定量测定HE4的电化学发光免疫测定法(ECLIA))测量HE4。
对于Cyfra21-1水平的测量，存在各种测定法。用于“CYFRA21-1”的测定法特异性测量存在于循环中的细胞角蛋白19的可溶性片段。CYFRA21-1的测量通常基于两种单克隆抗体(Bodenmueller等人, 1994, Int. J. Biol. Markers 9: 75-81)。商购可得的用于测量Cyfra21-1的产品包括Enzymum-Test CYFRA 21-1 (Boehringer Mannheim, Mannheim,Germany)、细胞角蛋白19片段(CYFRA 21-1)免疫放射测定试剂盒(Cisbo Assays,Codolet, France)、细胞角蛋白片段抗原21-1的ELISA试剂盒(Wuhan USCN Business Co.,Ltd., China)和ARCHITECT Cyfra21-1测定法(Abbott, Wiesbaden, Germany)。在来自德国Roche Diagnostics的CYFRA21-1测定法中，使用两种特异性单克隆抗体(KS 19.1和BM19.21)，并且测量具有大约30,000道尔顿的分子量的细胞角蛋白19的可溶性片段。优选地，根据制造商的说明在使用Roche产品号11820966160的Elecsys®分析仪上测量CYFRA21-1。
根据本发明，测定标志物的量或浓度以检测复发。物质的量是标准定义的量(standards-defined quantity)，其测量基本实体(诸如原子、分子、电子和其他粒子)的装配体的大小。其有时被称为化学量。国际单位系统(SI)将物质的量定义为与存在的基本实体的数量成正比。物质的量的SI单位是摩尔。其具有单位符号mol。物质的浓度是组分的量除以混合物的总体积。可以区分几种类型的数学描述：质量浓度、摩尔浓度、数量浓度和体积浓度。术语浓度可以应用于任何种类的化学混合物，但最频繁地，其是指溶液中的溶质和溶剂。摩尔(量)浓度具有变体，诸如当量浓度(normal concentration)和渗透浓度。
测量标志物的水平的步骤可以如下实施：可以使样品和任选校准物和/或对照与结合剂(其可以固定在例如固相上)在允许试剂结合标志物的条件下接触。可以通过分离步骤(例如一个或多个洗涤步骤)移除未结合的结合剂。可以添加第二试剂(例如标记的试剂)以检测结合的结合剂以允许对其进行结合和定量。可以移除未结合的第二试剂。可以(例如，基于标记)定量与标志物的量成正比的第二结合剂的量。定量可以基于校准曲线来进行，其中通过对每种校准物的测量值相比于浓度作图，而构建用于每个测定法的校准曲线。然后，可以从校准曲线读取样品中的标志物的浓度或量。
在测定标志物的量或浓度之后，将获得的值与如在对照(例如对照样品或对照组群或对照群体或对照组)中所确定的相应标志物的量或浓度进行比较。表述“将…的量或浓度与如在对照样品中所确定的量或浓度进行比较”仅用于进一步说明无论如何对于技术人员都是显而易见的内容。对照样品可以是内部的或外部的对照。在一个实施方案中，使用内部对照，即，在测试样品中以及在一个或多个其它取自同一受试者的样品中评价一种或多种标志物的水平，以测定所述一种或多种标志物的水平是否存在任何变化。在另一个实施方案中，使用外部对照。对于外部对照，将源自个体的样品中标志物的存在或量与其在已知没有给定病况(例如，肺癌或肺癌的复发)的个体或个体群体(即，“正常个体”)中的量或浓度进行比较。通常，样品的标志物水平与诊断直接或间接相关，并且该标志物水平，例如，用于测定个体是否具有或将具有复发。选择适当的对照样品/群体/组群/组以及在其中确定用于标志物的对照或参照值，在技术人员的技术能力之内。技术人员将理解，在一个实施方案中，此类对照获得自年龄匹配并且没有混杂疾病的参照群体。如技术人员同样清楚的是，在对照中确定的绝对标志物值将取决于所用的测定法。优选地，使用来自适当参照群体中的100个或更多个充分表征个体的样品，来确定对照(参照)值。还优选的是，可以选择参照群体，使其由至少20、30、50、200、500或1000个个体组成。健康个体代表优选的用于确定参照的参照群体。或者，参照群体可以用于本发明的方法中，例如，一个健康个体群体和一个已知具有复发的个体群体。
根据本发明，一种或多种标志物的量或浓度值相对于对照增加表明复发。如果值增加，则复发已经发生或即将发生。由此鉴定的个体可以进行进一步诊断或治疗方法，包括进一步血液测试、成像方法、化疗或手术。技术人员将能够根据主流国家的医疗实践选择合适的方式。
在一个实施方案中，如果所述值相对于对照或参照值达到至少110％、更优选至少120％、更优选至少130％、更优选至少140％、更优选至少150％、更优选至少160％、更优选至少170％、更优选至少180％、甚至更优选至少190％，则值增加。
或者，将如在对照组或对照群体中所测量的HE4和任选Cyfra21-1的值例如用于确定截止值或参照范围。高于此截止值或在参照范围及其上限之外的值被认为是增加的。在一个实施方案中，确定固定的截止值。选择此截止值以与目标诊断问题匹配。在一个实施方案中，将如在对照组或对照群体中所测量的HE4和任选Cyfra21-1的值用于确定参照范围。在一个优选实施方案中，如果所测量的值高于参照范围的90％百分位数，则认为HE4和任选Cyfra21-1浓度是增加的。在进一步优选的实施方案中，如果所测量的值高于参照范围的95％百分位数、96％百分位数、97％百分位数或97.5％百分位数，则认为HE4和任选Cyfra21-1的值是增加的。在本发明的情况下，截止值代表区分具有复发的个体与没有复发的个体的适当的值。
可以根据期望的灵敏度和特异性来选择合适的截止值。灵敏度和特异性是二元分类测试的性能的统计学量度，在统计学中也被称为分类函数：
灵敏度(也称为真阳性率)测量被正确鉴定为阳性的阳性的比例(例如被正确鉴定为具有所述病况的具有复发的人的百分比)。
特异性(也称为真阴性率)测量被正确鉴定为阴性的阴性的比例(例如被正确鉴定为不具有所述病况的具有复发的人的百分比)。
对于任何测试，在两个量度之间通常存在权衡。例如：在机场安全设置(其中一项是测试对安全的潜在威胁)中，可将扫描仪设置为在低风险项(像带扣和钥匙)时引发(低特异性)，以降低错过确实对航空器和机上人员构成威胁的物体的风险(高灵敏度)。这种权衡可作为接受者操作特征曲线来图示表示(见下文)。完美的预测因子会被描述为100％灵敏的(例如，所有病人都被鉴定为病态的)和100％特异性的(例如，所有健康人都没有被鉴定为病态的)；然而，在理论上，任何预测因子都将具有被称为贝叶斯误差率的最小误差界限。可以设定截止值以增加灵敏度或特异性。
在统计学中，接受者操作特性(ROC)或ROC曲线是图形图，其说明了二元分类器系统随着其区分阈值改变的性能。通过在各种阈值设置下，真阳性率(TPR)对假阳性率(FPR)的绘图，生成该曲线。如上文所详述，真阳性率也被称为灵敏度或灵敏度指数d'，在信号检测和生物医学信息学中称为“d撇(d-prime)”，或机器学习中的调用。假阳性率也被称为误警率(fall-out)，并且可以被计算为(1-特异性)。ROC曲线比较了预测二分结果的能力的值的范围内的灵敏度与特异性。曲线下面积(AUC)代表用于比较测试性能的整体准确性(Florkowski CM, 2008, Clin Biochem Rev29(Suppl 1): S83–S87)。灵敏度是测试将个体正确分类为患病的能力。测试将个体正确分类为无疾病的能力被称为特异性。公式显示于实施例1中(Fawcett T, 2006, Pattern Recognition Letters27: 861–874)。
ROC分析提供了独立于成本背景或分类分布(并且在指定成本背景或分类分布之前)，选择可能的最优模型和丢弃次优模型的工具。ROC分析以直接和自然的方式与诊断决策的成本/益处分析相关。
如果在本发明的方法中使用两种标志物，即HE4和Cyfra21-1，则可以使用HE4的量/浓度以及Cyfra21-1的量/浓度来计算组合值。将组合值与已使用相同的数学程序获得的对照样品的组合值进行比较。在一个优选实施方案中，通过样品中的标志物分子的量或浓度的加权计算来获得组合值。这意味着标志物之一被给予比另一者更高的权重。可以例如通过以下方程获得基于HE4的水平(量或浓度)([HE4])和Cyfra21.1的水平(量或浓度)([Cyfra21.1])计算的组合值C：
Figure 544369DEST_PATH_IMAGE001
其中a和b代表加权因子。优选地，已经通过分析参照群体来获得加权因子。
例如，可以用二元结果复发和无复发作为因变量以及Cyfra21-1和HE4的组合作为自变量进行逻辑回归分析。分类准确性可以通过ROC(接受者操作特征)曲线下面积(AUC)来评价，并且可以计算灵敏度和特异性。
在第三个方面，本发明涉及作为标志物分子的HE4在体外评价肺腺癌的复发中的用途，其中在获得自个体的样品中检出HE4的量或浓度与对照相比的增加，表明复发。
在第四个方面，本发明涉及作为标志物组合的HE4和CYFRA 21-1在体外评价肺腺癌的复发中的用途，其中在获得自个体的样品中检出标志物组合的组合值与对照的组合值相比的增加，表明复发。
可以进一步定义根据第三和第四个方面的用途，如对于本发明的第一和第二个方面的方法所指定的。具体地，就在本公开的第三和第四个方面中使用的术语而言，其是指在本公开的第一和第二个方面中使用的术语、实施例和具体实施方案，其也适用于本公开的第三和第四个方面。
通常，本公开不限于本文描述的特定方法、方案和试剂，因为它们可变化。进一步，本文使用的术语仅用于描述具体实施方案的目的，且不旨在限制本公开的范围。如本文和所附权利要求中所使用，单数形式“一个/种(a)”、“一个/种(an)”和“该(the)”包括复数的提及对象，除非上下文另有明确说明。类似地，单词“包含”、“含有”和“涵盖”应当进行包含性而非排他性解释。
除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语和任何缩写具有与本公开的领域中的普通技术人员通常理解的相同的含义。尽管与本文描述的方法或材料类似或等同的任何方法或材料可以用于如本文呈现的实施中，但本文描述特定方法和材料。
本公开通过以下附图和实施例进一步说明，但应当理解的是，附图和实施例仅为了说明的目的而包括，而不旨在限制本公开的范围，除非另有明确说明。
附图
图1说明了具有腺瘤NSCLC的患者的复发检测(复发：42例，无复发：639例)。其显示了在本文实施例中对于Cyfra21-1、HE4和这些标志物的组合描述的实验中获得的ROC (接受者操作特征)曲线数据的曲线下面积(AUC)分析的概述。
实施例
实施例1：在参照群体中确定对照值和任选的加权因子
实施例1描述了如何能够在合适的参考组群中获得对照值和任选的加权因子。
示例性和合适的参考组群可优选包括切除后的早期腺癌NSCLC患者，但也可以包括健康受试者。健康受试者会被视为没有复发的患者。
最佳地，对于部分NSCLC患者，观察到复发，并且在其复发检测时已知HE4和任选Cyfra21-1的浓度水平。
A) HE4作为唯一标志物：截止值的测定
可在取自参照组群的样品中测定标志物HE4的水平。可对于具有复发的患者组以及任选地对于没有复发的患者测定HE4的水平。如技术人员已知，可以测定合适的截止值，其随后可以用于评价新患者。可以考虑测试的合适的灵敏度和特异性，来选择截止值。
B) HE4和Cyfra21-1作为标志物组合：加权因子的测定
可在取自参照组群的样品中测定标志物HE4和Cyfra21-1的水平。可以使用逻辑回归模型来获得加权因子。因变量可以是在样品收集时间点时复发存在的二元指标。自变量可以是在相应时间点采集的样品中测量的Cyfra21-1和HE4的水平。
然后，可以使用回归系数作为加权因子来计算参照组群中每个患者的组合值C。
基于该组合值C，现在可以确定参照值，其随后可以用于评价新患者。基于这种参照值应当具有的期望的比例，可以在具有检测到的复发的患者或没有复发的患者上确定参照值。
如果希望以高度确定性检测新患者中的复发，则可以以大多数具有检测到的复发的患者的组合值C高于该参照值(例如90％的患者)的方式选择参照值。
然而，如果希望高度确定其组合值高于参照值的新患者确实具有复发且不是假阳性，则将以大多数(例如90％)没有复发的患者具有比参照值小的组合值C的方式选择参照值。
实施例2：NSCLC患者的组群中的生物标志物多变量分析
该分析旨在基于Cyfra21-1和HE4的血清生物标志物水平来鉴定复发患者。
分析群体包括130个早期腺癌NSCLC患者，其都经历了肿瘤的切除。定期观察患者，并且在每次随访时，记录是否发生复发并取血液样品并测量Cyfra和HE4的浓度。总共记录681次随访。在这681次随访中的42次中，检测到复发。
如实施例1中所述，建立用二元结果每次随访时的复发和无复发作为因变量和相应随访时的Cyfra21-1和HE4水平的组合作为自变量的逻辑回归分析。
基于源自逻辑回归模型的系数，对于每个患者计算组合值C。在本实施例中C的公式是：
Figure 827583DEST_PATH_IMAGE002
，其中ln()是自然对数。
随后，评估该组合值C可以如何好地区分有或没有复发的随访。分类准确性通过ROC (接受者操作特征)曲线下面积(AUC)来评价，以及报告灵敏度和特异性。
ROC (接受者操作特性)曲线是图形方法，其说明了二元分类器系统随着其区分阈值改变的性能。其比较了预测二分结果的能力的值的范围内的灵敏度与特异性。AUC呈现了比较测试性能的总体准确性(Christopher M F 2008 Clin Biochem Rev)。灵敏度是测试将个体正确分类为患病的能力。测试将个体正确分类为无疾病的能力被称为特异性。公式显示如下(Fawcett Tom 2006 Pattern Recognition Letters)。
疾病存在 疾病不存在 总计
测试阳性 真阳性(TP) 假阳性(FP) TP+FP
测试阴性 假阴性(FN) 真阴性(TN) FN+TN
总计 TP+FN TN+FP
灵敏度 = TP/(TP+FN)
特异性 = TN/(TN+FP)。
Cyfra21-1:
AUC: 77.9 %
灵敏度 (@90.0%特异性): 45.2%
特异性 (@88.1%灵敏度): 33.3%。
HE4:
AUC: 79.6 %
灵敏度 (@90.0%特异性): 52.4%, 截止值: 113.1 pmol/mL
特异性 (@88.1%灵敏度): 28.3%, 截止值: 58.8 pmol/mL。
Cyfra + HE4:
AUC: 83.6 %
灵敏度 (@90.1%特异性): 57.1%, 关于C标度的截止值: -2.279
特异性 (@88.1%灵敏度): 64.2%, 关于C标度的截止值: - 3.203。
实施例3：新患者的监测
如果希望使用HE4和任选Cyfra21-1用于监测经切除后的新患者，则可以在合适的时间点定期收集血液样品并测量每个样品中的HE4和任选Cyfra21-1的浓度。然后，对于每个样品/随访，可使用可以如实施例1中所述确定的加权因子，或者可以使用来自实施例2的这些，来计算组合的值C。如果新取的血液样品中该组合值C高于参照值，则可假设该患者具有复发。参照值可以如实施例1中所述确定，或者取自实施例2。

Claims (8)

1.标志物分子人附睾蛋白4 (HE4)的结合剂和细胞角蛋白-19片段(CYFRA 21-1)的结合剂在制备用于通过以下方法检测个体中的肺腺癌的复发的试剂中的用途，所述方法包括：
a) 在获得自所述个体的血液样品中测量标志物分子HE4和CYFRA 21-1的量或浓度，和
b) 通过比较步骤(a)中测定的标志物的组合值与如对照中确定的组合值来检测复发，其中相对于对照增加的组合值表明复发，其中所述对照是外部对照。
2.权利要求1的用途，其中通过样品中的标志物分子的量或浓度的加权计算来获得所述组合值。
3.权利要求2的用途，其中已经通过分析参照群体来获得加权因子。
4.权利要求1至3中任一项的用途，其中所述血液样品选自血清、血浆和全血。
5.权利要求1至3中任一项的用途，其中在蛋白水平上测量所述标志物分子。
6.权利要求1至3中任一项的用途，其中所述个体是人。
7.权利要求1至3中任一项的用途，其中所述个体被认为就肺腺癌而言被成功治疗。
8.权利要求7的用途，其中所述个体被认为就肺腺癌而言，通过切除和/或化疗而被成功治疗。
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Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2021261483A1 (ja) * 2020-06-23 2021-12-30 三井化学株式会社 腺癌の検出方法及び検査キット

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010061393A1 (en) * 2008-11-30 2010-06-03 Compugen Ltd. He4 variant nucleotide and amino acid sequences, and methods of use thereof
CN103180732A (zh) * 2010-08-26 2013-06-26 华盛顿大学商业中心 检测抗he4抗体的方法以及诊断和/或预后与he4表达细胞相关的病症的方法

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102812359A (zh) * 2009-11-13 2012-12-05 Bg医药公司 心肌梗死的风险因子和预测
CA2799163A1 (en) * 2011-12-18 2013-06-18 20/20 Genesystems, Inc. Methods and algorithms for aiding in the detection of cancer
US20150072890A1 (en) * 2013-09-11 2015-03-12 20/20 Gene Systems, Inc. Methods and compositions for aiding in the detection of lung cancer

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010061393A1 (en) * 2008-11-30 2010-06-03 Compugen Ltd. He4 variant nucleotide and amino acid sequences, and methods of use thereof
CN103180732A (zh) * 2010-08-26 2013-06-26 华盛顿大学商业中心 检测抗he4抗体的方法以及诊断和/或预后与he4表达细胞相关的病症的方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Diagnostic Efficiency of HE4 and CYFRA 21-1 in Patients with Lung Cancer;Erkan DIKMEN et al;《ULUSLARARASI HEMATOLOJI-ONKOLOJI DERGISI》;20150630;第25卷(第1期);摘要，第46、49页 *
Monitoring Cytokeratin Fragment 19 (CYFRA 21-1) Serum Levels for Early Prediction of Recurrence of Adenocarcinoma and Squamous Cell Carcinoma in the Lung after Surgical Resection;J.-J. Yeh et al;《Lung》;20021001;第180卷(第5期);摘要，第277页倒数第1行至第278页第6行 *
Serum level of HE4 is closely associated with pulmonary adenocarcinoma progression;Shin-ichi Yamashita et al;《Tumor Biology》;20120922;第33卷(第6期);摘要，第2367页左栏第三段 *
Shin-ichi Yamashita et al.Serum level of HE4 is closely associated with pulmonary adenocarcinoma progression.《Tumor Biology》.2012,第33卷(第6期), *

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