CN108347915A - 一种用于成体干细胞长期保存的冻存液及其制备方法 - Google Patents

一种用于成体干细胞长期保存的冻存液及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN108347915A
CN108347915A CN201680035649.4A CN201680035649A CN108347915A CN 108347915 A CN108347915 A CN 108347915A CN 201680035649 A CN201680035649 A CN 201680035649A CN 108347915 A CN108347915 A CN 108347915A
Authority
CN
China
Prior art keywords
stock solution
frozen stock
compound
dimethyl sulfoxide
stem cell
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
CN201680035649.4A
Other languages
English (en)
Inventor
李建尧
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Publication of CN108347915A publication Critical patent/CN108347915A/zh
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02—Preservation of living parts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02—Preservation of living parts
    • A01N1/0205—Chemical aspects
    • A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids
    • A01N1/0226—Physiologically active agents, i.e. substances affecting physiological processes of cells and tissue to be preserved, e.g. anti-oxidants or nutrients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02—Preservation of living parts
    • A01N1/0205—Chemical aspects
    • A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

公开了一种用于成体干细胞长期保存的冻存液及其制备方法，冻存液含有DMEM培养基、二甲基亚砜、Knock‑out血清和化合物(I)；每100ml冻存液中，所述二甲基亚砜占冻存液的体积百分含量为8％～10％，所述Knock‑out血清占冻存液的体积百分含量为20％～40％，余量为DMEM培养基；所述化合物(I)在冻存液中的浓度为10～20ng/ml。所述冻存液使用一种结构新颖的天然产物为添加剂，以Knock‑out血清替代常规胎牛血清，提高了成体干细胞复苏后的抗凋亡、抗氧化能力，且去除外源动物源血清对细胞的影响，冻存效果好。

Description

一种用于成体干细胞长期保存的冻存液及其制备方法 技术领域
本发明属于细胞工程领域，涉及干细胞的保存，具体涉及一种用于成体干细胞长期保存的冻存液及其制备方法。
背景技术
干细胞是一类能形成和维持多种功能、构筑组织器官或生物个体的原始细胞。在个体生长发育过程中，有两类干细胞：胚胎干细胞和成体干细胞。胚胎干细胞是早期胚胎发育过程中，可形成生命个体并能传代的细胞。从受精卵分裂后形成的子代细胞，直到胚泡内的内细胞群，均具有胚胎干细胞的特性，能分离形成胚胎干细胞。成体干细胞位于分化成熟的组织器官之中，它们能够分化形成相应组织的功能细胞，构筑相应的器官。
干细胞的冻存是建立干细胞库的重要环节之一，同时也是研究者在实验中解决干细胞随着代数的增加增殖能力逐渐减弱而导致实验条件不均一问题的有效方法。目前，低温保存干细胞主要依靠抗冻液二甲基亚砜和血清的保护。而二甲基亚砜对细胞有损伤，且复苏过程中容易导致干细胞氧化损伤与分化潜能降低。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于成体干细胞长期保存的冻存液及其制备方法，冻存液使用一种结构新颖的天然产物为添加剂，以Knock-out血清替代常规胎牛血清，提高成体干细胞复苏后的抗凋亡、抗氧化能力，且去除外源动物源血清对细胞的影响。
本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
一种用于成体干细胞长期保存的冻存液，含有DMEM培养基、二甲基亚砜、Knock-out血清和如下结构所示的化合物(I)；每100ml冻存液中，所述二甲基亚砜占冻存液的体积百分含量为8％～10％，所述Knock-out血清占冻存液的体积百分含量为20％～40％，余量为DMEM培养基；所述化合物(I)在冻存液中的浓度为10～20ng/ml；
进一步地，所述的用于成体干细胞长期保存的冻存液含有DMEM培养基、二甲基亚砜、Knock-out血清和化合物(I)；每100ml冻存液中，所述二甲基亚砜占冻存液的体积百分含量为9％，所述Knock-out血清占冻存液的体积百分含量为30％，余量为DMEM培养基；所述化合物(I)在冻存液中的浓度为15ng/ml。
上述冻存液的制备方法：取配方量的DMEM培养基、二甲基亚砜、Knock-out血清和化合物(I)；先将化合物(I)溶解在二甲基亚砜中，再将DMEM培养基、Knock-out血清和溶解 有化合物(I)的二甲基亚砜混合均匀。
本发明的优点：
本发明提供的冻存液使用一种结构新颖的天然产物为添加剂，以Knock-out血清替代常规胎牛血清，提高了成体干细胞复苏后的抗凋亡、抗氧化能力，且去除外源动物源血清对细胞的影响，冻存效果好。
具体实施方式
下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
实施例1：冻存液的制备
配方：含有DMEM培养基、二甲基亚砜、Knock-out血清(Gibco，10828028，下同)和化合物(I)；每100ml冻存液中，所述二甲基亚砜占冻存液的体积百分含量为9％，所述Knock-out血清占冻存液的体积百分含量为30％，余量为DMEM培养基；所述化合物(I)在冻存液中的浓度为15ng/ml。
配制方法：取配方量的DMEM培养基、二甲基亚砜、Knock-out血清和化合物(I)；先将化合物(I)溶解在二甲基亚砜中，再将DMEM培养基、Knock-out血清和溶解有化合物(I)的二甲基亚砜混合均匀。
细胞冻存：成体干细胞经1000rpm离心10min后倒掉上清液，用含化合物(I)的冻存液重悬，装入无菌细胞冻存管中。
冻存程序：放入细胞程序性冷冻盒，-80℃放置12h后放入液氮长期保存。或4℃条件下放置30min，-20℃放置2h，-80℃放置16～18h后直接放入液氮长期保存。
细胞复苏：冻存管从液氮取出后，在37～40℃水域中迅速搅动至溶解，加入DMEM培养基，1500rpm离心10min，弃上清，置37℃、5％CO2培养箱中培养。
实施例2：冻存液的制备
配方：含有DMEM培养基、二甲基亚砜、Knock-out血清和化合物(I)；每100ml冻存液中，所述二甲基亚砜占冻存液的体积百分含量为8％，所述Knock-out血清占冻存液的体积百分含量为20％，余量为DMEM培养基；所述化合物(I)在冻存液中的浓度为10ng/ml。
配制方法：取配方量的DMEM培养基、二甲基亚砜、Knock-out血清和化合物(I)；先将化合物(I)溶解在二甲基亚砜中，再将DMEM培养基、Knock-out血清和溶解有化合物(I)的二甲基亚砜混合均匀。
细胞冻存：成体干细胞经1000rpm离心10min后倒掉上清液，用含化合物(I)的冻存液重悬，装入无菌细胞冻存管中。
冻存程序：放入细胞程序性冷冻盒，-80℃放置12h后放入液氮长期保存。或4℃条件下放置30min，-20℃放置2h，-80℃放置16～18h后直接放入液氮长期保存。
细胞复苏：冻存管从液氮取出后，在37～40℃水域中迅速搅动至溶解，加入DMEM培养基，1500rpm离心1Omin，弃上清，置37℃、5％CO2培养箱中培养。
实施例3：冻存液的制备
配方：含有DMEM培养基、二甲基亚砜、Knock-out血清和化合物(I)；每100ml冻存液 中，所述二甲基亚砜占冻存液的体积百分含量为10％，所述Knock-out血清占冻存液的体积百分含量为40％，余量为DMEM培养基；所述化合物(I)在冻存液中的浓度为20ng/ml。
配制方法：取配方量的DMEM培养基、二甲基亚砜、Knock-out血清和化合物(I)；先将化合物(I)溶解在二甲基亚砜中，再将DMEM培养基、Knock-out血清和溶解有化合物(I)的二甲基亚砜混合均匀。
细胞冻存：成体干细胞经1000rpm离心10min后倒掉上清液，用含化合物(I)的冻存液重悬，装入无菌细胞冻存管中。
冻存程序：放入细胞程序性冷冻盒，-80℃放置12h后放入液氮长期保存。或4℃条件下放置30min，-20℃放置2h，-80℃放置16～18h后直接放入液氮长期保存。
细胞复苏：冻存管从液氮取出后，在37～40℃水域中迅速搅动至溶解，加入DMEM培养基，1500rpm离心10min，弃上清，置37℃、5％CO2培养箱中培养。
实施例4：实施例1的对比实施例，不含化合物(I)
配方：含有DMEM培养基、二甲基亚砜和Knock-out血清；每100ml冻存液中，所述二甲基亚砜占冻存液的体积百分含量为9％，所述Knock-out血清占冻存液的体积百分含量为30％，余量为DMEM培养基。
配制方法：取配方量的DMEM培养基、二甲基亚砜和Knock-out血清混合均匀。
细胞冻存：成体干细胞经1000rpm离心10min后倒掉上清液，用含化合物(I)的冻存液重悬，装入无菌细胞冻存管中。
冻存程序：放入细胞程序性冷冻盒，-80℃放置12h后放入液氮长期保存。或4℃条件下放置30min，-20℃放置2h，-80℃放置16～18h后直接放入液氮长期保存。
细胞复苏：冻存管从液氮取出后，在37～40℃水域中迅速搅动至溶解，加入DMEM培养基，1500rpm离心10min，弃上清，置37℃、5％CO2培养箱中培养。
实施例5：效果实施例(以骨髓间充质干细胞为例)
分别取实施例1～4制备的冻存液，按照实施例1～4所述的冻存和复苏方法对骨髓间充质干细胞冻存3个月后再复苏，用台盼兰染色计数细胞活性率(％)，结果见下表。
冻存液配方 细胞复苏活性率(％)
实施例1 99.6±0.8
实施例2 97.8±1.2
实施例3 98.2±1.4
实施例4 70.6±1.1
试验结果表明，本发明提供的冻存液提高了成体干细胞的冻存效果，复苏后的活性率高。
实施例6：化合物(I)的制备和结构确证
制备方法：(a)将香鳞毛蕨的干燥地上部分(8kg)粉碎，用70％乙醇热回流提取(25L×3次)，合并提取液，浓缩至无醇味(3L)，依次用石油醚(3L×3次)、乙酸乙酯(3L×3次)和水饱和的正丁醇(3L×3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(351g)和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用D101型大孔树脂除杂，先用10％乙醇洗脱6个柱体积，再用75％乙醇洗脱8个柱体积，收集75％乙醇洗脱液，减压浓缩得75％乙醇洗脱 物浸膏(133g)；(c)步骤(b)中75％乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为90∶1(8个柱体积)、65∶1(8个柱体积)、30∶1(6个柱体积)、15∶1(8个柱体积)和1∶1(5个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；(d)步骤(c)中组分4(31g)用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为25∶1(8个柱体积)、15∶1(10个柱体积)和5∶1(6个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤(d)中组分2(17g)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为70％的甲醇水溶液等度洗脱，收集8-10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(I)(68mg)。
结构确证：浅黄色胶状物，HRAPCIMS显示[M+H]+为m/z 241.0825，结合核磁特征可得分子式为C15H12O3，不饱和度为10。核磁共振氢谱数据δH(ppm，CDCl3，500MHz)：H-1(3.04，m)，H-1(3.42，m)，H-2(2.73，m，2H)，H-3(5.67，t，J＝6.2Hz)，H-8(8.04，s)，H-12(8.51，s)，H-13(9.69，s)，H-14(10.42，s)，H-15(1.97，s)；核磁共振碳谱数据δC(ppm，CDCl3，125MHz)：27.6(CH2，1-C)，25.3(CH2，2-C)，117.2(CH，3-C)，128.7(C，4-C)，119.3(C，5-C)，166.2(C，6-C)，118.5(C，7-C)，123.3(CH，8-C)，130.8(C，9-C)，135.7(C，10-C)，129.4(C，11-C)，161.3(CH，12-C)，184.9(CH，13-C)，192.6(CH，14-C)，22.3(CH3，15-C)。红外波谱表明该化合物含有羰基(1729cm-1)，烯烃(1672cm-1)和芳香环(1610cm-1，1582m-1，1463cm-1)基团。13C-NMR、DEPT和HSQC谱中显示有15个碳信号，包括一个甲基δC 22.3，两个亚甲基δC 27.6、25.3，五个次甲基(两个羰基碳，两个烯烃碳与一个连氧烯烃碳)δC 117.2、123.3、161.3、184.9、192.6，以及七个季碳(七个烯烃碳)δC 128.7、119.3、166.2、118.5、130.8、135.7、129.4；以上功能结构再结合不饱和数表明该化合物为三环结构。1H-NMR谱显示一个甲基质子信号δH1.97(3H，s)，两组亚甲基质子信号δH 3.04(1H，m)、3.42(1H，m)和2.73(2H，m)，一个环内烯烃质子信号δH 5.67(1H，t，J＝6.2Hz)，一个环内连氧烯烃质子信号δH 8.51(1H，s)，一个芳烃质子信号δH 8.04(1H，s)，两个醛基质子信号δH 9.69(1H，s)与δH 10.42(1H，s)。HMBC谱中，H-13与C-7和C-12的相关性确认了一个醛基与C-11位连接，H-14与C-10和C-8的相关性表明另一个醛基连接在C-9位，H-15与C-3和C-5的相关性可知甲基与C-4相连。此外，分析HMBC谱中H-3与C-2和C-4，H-8与C-7和C-9，以及H-12与C-6和C-11的相关性，并结合1H-1HCOSY谱中H2-1/H2-2/H-3的相关性可以构建出该化合物的连接方式，进而确证该化合物的结构。综合氢谱、碳谱、HMBC谱和NOESY谱，以及文献关于相关类型核磁数据，可基本确定该化合物如下式所示，立体构型进一步通过ECD试验确定，理论值与实验值基本一致；
上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。

Claims (3)

  1. 一种用于成体干细胞长期保存的冻存液，其特征在于：含有DMEM培养基、二甲基亚砜、Knock-out血清和如下结构所示的化合物(I)；每100ml冻存液中，所述二甲基亚砜占冻存液的体积百分含量为8％～10％，所述Knock-out血清占冻存液的体积百分含量为20％～40％，余量为DMEM培养基；所述化合物(I)在冻存液中的浓度为10～20ng/ml；
  2. 根据权利要求1所述的用于成体干细胞长期保存的冻存液，其特征在于：含有DMEM培养基、二甲基亚砜、Knock-out血清和化合物(I)；每100ml冻存液中，所述二甲基亚砜占冻存液的体积百分含量为9％，所述Knock-out血清占冻存液的体积百分含量为30％，余量为DMEM培养基；所述化合物(I)在冻存液中的浓度为15ng/ml。
  3. 权利要求1或2所述的冻存液的制备方法，其特征在于：取配方量的DMEM培养基、二甲基亚砜、Knock-out血清和化合物(I)；先将化合物(I)溶解在二甲基亚砜中，再将DMEM培养基、Knock-out血清和溶解有化合物(I)的二甲基亚砜混合均匀。
CN201680035649.4A 2016-02-16 2016-09-02 一种用于成体干细胞长期保存的冻存液及其制备方法 Withdrawn CN108347915A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610087978.5A CN105532649B (zh) 2016-02-16 2016-02-16 一种用于成体干细胞长期保存的冻存液及其制备方法
PCT/CN2016/097910 WO2017140102A1 (zh) 2016-02-16 2016-09-02 一种用于成体干细胞长期保存的冻存液及其制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108347915A true CN108347915A (zh) 2018-07-31

Family

ID=55812652

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610087978.5A Expired - Fee Related CN105532649B (zh) 2016-02-16 2016-02-16 一种用于成体干细胞长期保存的冻存液及其制备方法
CN201680035649.4A Withdrawn CN108347915A (zh) 2016-02-16 2016-09-02 一种用于成体干细胞长期保存的冻存液及其制备方法

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610087978.5A Expired - Fee Related CN105532649B (zh) 2016-02-16 2016-02-16 一种用于成体干细胞长期保存的冻存液及其制备方法

Country Status (2)

Country Link
CN (2) CN105532649B (zh)
WO (1) WO2017140102A1 (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105532649B (zh) * 2016-02-16 2016-09-21 河北佑仁生物科技有限公司 一种用于成体干细胞长期保存的冻存液及其制备方法
CN113261557A (zh) * 2021-05-28 2021-08-17 广东先康达生物科技有限公司 一种干细胞冻存液及干细胞冻存方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101008002A (zh) * 2006-01-28 2007-08-01 肖磊 Activin A 用于人胚胎干细胞无滋养层细胞培养的应用
CN103081892A (zh) * 2011-10-27 2013-05-08 北京清美联创干细胞科技有限公司 一种用于长期保存成体干细胞的冻存液
CN105532649A (zh) * 2016-02-16 2016-05-04 崔长友 一种用于成体干细胞长期保存的冻存液及其制备方法
CN105753825A (zh) * 2016-03-31 2016-07-13 河南省洛正制药厂 颈康胶囊的质量控制方法
CN105777682A (zh) * 2016-03-23 2016-07-20 钱浩 一种胞磷胆碱钠的药物组合物及其防治卵巢癌的医药用途

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101897330B (zh) * 2010-08-31 2013-01-09 湖南光琇高新生命科技有限公司 一种低毒性的人胚胎干细胞玻璃化冻存液以及使用该冻存液的方法
CN102550542B (zh) * 2011-08-09 2014-06-25 臻景生物技术（上海）有限公司 用于脂肪干细胞的无血清冻存液及脂肪干细胞库的建立
KR101407355B1 (ko) * 2012-09-27 2014-06-17 (주)세포바이오 식물 유래의 재조합 인간 혈청 알부민, 지질 및 식물 단백질 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 줄기세포 또는 일차배양세포의 동결보존용 조성물
CN103070161B (zh) * 2013-01-09 2014-08-13 冯文峰 一种脂肪间充质干细胞冻存液及冻存方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101008002A (zh) * 2006-01-28 2007-08-01 肖磊 Activin A 用于人胚胎干细胞无滋养层细胞培养的应用
CN103081892A (zh) * 2011-10-27 2013-05-08 北京清美联创干细胞科技有限公司 一种用于长期保存成体干细胞的冻存液
CN105532649A (zh) * 2016-02-16 2016-05-04 崔长友 一种用于成体干细胞长期保存的冻存液及其制备方法
CN105777682A (zh) * 2016-03-23 2016-07-20 钱浩 一种胞磷胆碱钠的药物组合物及其防治卵巢癌的医药用途
CN105753825A (zh) * 2016-03-31 2016-07-13 河南省洛正制药厂 颈康胶囊的质量控制方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SAWANGJITT WITTAYALAI等: "Terpenoids from the roots of Drypetes hoaensis and their cytotoxic activities", 《PHYTOCHEMISTRY》 *

Also Published As

Publication number Publication date
WO2017140102A1 (zh) 2017-08-24
CN105532649B (zh) 2016-09-21
CN105532649A (zh) 2016-05-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105152895A (zh) 一种新的杂萜化合物及其制备方法和医药用途
WO2017220041A2 (zh) 苯扎贝特的药物组合物及其在类风湿性关节炎中的应用
CN108347915A (zh) 一种用于成体干细胞长期保存的冻存液及其制备方法
CN106083771A (zh) 卡比多巴的药物组合物及其治疗肝癌的医药用途
CN105130930A (zh) 一种牛卵母细胞体外成熟培养液及培养方法
CN106074561A (zh) 羧甲司坦的药物组合物及其对白血病的治疗作用
CN105503795A (zh) 环金合欢烷型倍半萜化合物、制备方法和医药用途
CN108586480B (zh) 含异硫氰酸酯基的青蒿素衍生物及其应用
CN105534968A (zh) 二萜化合物在制备治疗前列腺癌的药物中的应用
CN105801540A (zh) 一种盐酸卡替洛尔的药物组合物及其医药用途
CN105622629A (zh) 一种治疗前列腺癌的贝壳杉烷型二萜类化合物
CN105523937A (zh) 一种具有医药用途的二萜化合物及其制备方法
CN105461732A (zh) 一种新的二萜类化合物及其制备方法和医药用途
CN106083590A (zh) 磷酸肌酸钠的药物组合物及其在生物医药中的应用
CN105777683A (zh) 双环醇的药物组合物及其医药用途
CN106478399A (zh) 羟基蒽醌类衍生物及其应用
CN105949263A (zh) 甘氨双唑钠的药物组合物及其在生物医药中的应用
CN110204589B (zh) 青葙子有效成分、提取方法及其在制备神经保护药物方面的应用
CN105906645A (zh) 一种新的吲哚生物碱类化合物及其制备方法和医药用途
CN108641995B (zh) 一种利用树皮浸出汁提高液体菌种产量的配方及方法
CN105997981A (zh) 苯丁酸氮芥的药物组合物及其抗抑郁的医药用途
CN105622711A (zh) 一种环阿尔廷型三萜烯类化合物及其制备方法和医药用途
CN106045943A (zh) 一种格隆溴铵的药物组合物及其医药用途
CN105567778A (zh) 一种6-氨基青霉烷酸的制备方法
CN105503892A (zh) 一种新的环烯醚萜类化合物及其制备方法和医药用途

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WW01 Invention patent application withdrawn after publication

Application publication date: 20180731

WW01 Invention patent application withdrawn after publication