CN108324735B - 用于疾病治疗的胞外体制剂及其应用 - Google Patents
用于疾病治疗的胞外体制剂及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN108324735B CN108324735B CN201710049857.6A CN201710049857A CN108324735B CN 108324735 B CN108324735 B CN 108324735B CN 201710049857 A CN201710049857 A CN 201710049857A CN 108324735 B CN108324735 B CN 108324735B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- exosome
- ige
- exosomes
- formulation
- cells
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 210000001808 exosome Anatomy 0.000 title claims abstract description 80
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 title claims abstract description 33
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 23
- 201000010099 disease Diseases 0.000 title abstract description 26
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 67
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims abstract description 16
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims abstract description 11
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 36
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 36
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 21
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 21
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 15
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 claims description 13
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims description 12
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 claims description 12
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 claims description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 12
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 claims description 11
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 11
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 claims description 10
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 8
- 201000009961 allergic asthma Diseases 0.000 claims description 6
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 3
- 102000009438 IgE Receptors Human genes 0.000 abstract description 15
- 108010073816 IgE Receptors Proteins 0.000 abstract description 15
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 abstract description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 38
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 17
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 15
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 14
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 13
- 210000003651 basophil Anatomy 0.000 description 12
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 12
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 11
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 10
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 10
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 9
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 9
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 8
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 8
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 8
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 7
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 6
- 230000034994 death Effects 0.000 description 6
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 6
- 238000011160 research Methods 0.000 description 6
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 6
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 6
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 5
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 4
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 4
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 description 4
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 4
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 4
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 3
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 3
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 102000007478 beta-N-Acetylhexosaminidases Human genes 0.000 description 3
- 108010085377 beta-N-Acetylhexosaminidases Proteins 0.000 description 3
- 210000004351 coronary vessel Anatomy 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 description 3
- 108020004084 membrane receptors Proteins 0.000 description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 3
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 3
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 206010013700 Drug hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- 208000004262 Food Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- 108010002386 Interleukin-3 Proteins 0.000 description 2
- 102000000646 Interleukin-3 Human genes 0.000 description 2
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 2
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 206010034277 Pemphigoid Diseases 0.000 description 2
- 206010039085 Rhinitis allergic Diseases 0.000 description 2
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 2
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 2
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 2
- 201000010105 allergic rhinitis Diseases 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 208000000594 bullous pemphigoid Diseases 0.000 description 2
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 2
- 238000000151 deposition Methods 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 210000004700 fetal blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 235000020932 food allergy Nutrition 0.000 description 2
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 2
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 2
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000002617 leukotrienes Chemical class 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 2
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 210000005134 plasmacytoid dendritic cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000001778 pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 2
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N serotonin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCN)=CNC2=C1 QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000002636 symptomatic treatment Methods 0.000 description 2
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 2
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 description 2
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004476 Acute Coronary Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010002198 Anaphylactic reaction Diseases 0.000 description 1
- 206010002383 Angina Pectoris Diseases 0.000 description 1
- 206010002388 Angina unstable Diseases 0.000 description 1
- 241001523209 Antissa Species 0.000 description 1
- 208000027896 Aortic valve disease Diseases 0.000 description 1
- 206010060965 Arterial stenosis Diseases 0.000 description 1
- 101710165845 CD81 protein Proteins 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 1
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000317 Chymotrypsin Proteins 0.000 description 1
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 1
- 208000002330 Congenital Heart Defects Diseases 0.000 description 1
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- 206010010744 Conjunctivitis allergic Diseases 0.000 description 1
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 1
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 1
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 1
- 206010051055 Deep vein thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010012434 Dermatitis allergic Diseases 0.000 description 1
- 206010016946 Food allergy Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 1
- 102100038006 High affinity immunoglobulin epsilon receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 1
- 101710128966 High affinity immunoglobulin epsilon receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 1
- 101000669447 Homo sapiens Toll-like receptor 4 Proteins 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 206010020850 Hyperthyroidism Diseases 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N IDUR Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 108090000176 Interleukin-13 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108700011259 MicroRNAs Proteins 0.000 description 1
- 208000003250 Mixed connective tissue disease Diseases 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010029164 Nephrotic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 208000010378 Pulmonary Embolism Diseases 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 208000002200 Respiratory Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- 208000007718 Stable Angina Diseases 0.000 description 1
- 206010042434 Sudden death Diseases 0.000 description 1
- 206010043189 Telangiectasia Diseases 0.000 description 1
- 102100039360 Toll-like receptor 4 Human genes 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 108060005989 Tryptase Proteins 0.000 description 1
- 102000001400 Tryptase Human genes 0.000 description 1
- 108700030796 Tsg101 Proteins 0.000 description 1
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 1
- 208000007814 Unstable Angina Diseases 0.000 description 1
- 206010057469 Vascular stenosis Diseases 0.000 description 1
- 206010047249 Venous thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 206010000891 acute myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000010085 airway hyperresponsiveness Effects 0.000 description 1
- 210000005091 airway smooth muscle Anatomy 0.000 description 1
- 208000002205 allergic conjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- 230000009285 allergic inflammation Effects 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000000702 anti-platelet effect Effects 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 229940125715 antihistaminic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000739 antihistaminic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003200 antithyroid agent Substances 0.000 description 1
- 229940043671 antithyroid preparations Drugs 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 208000024998 atopic conjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000001815 biotherapy Methods 0.000 description 1
- 210000003969 blast cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000011529 cardiovascular cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- VZWXIQHBIQLMPN-UHFFFAOYSA-N chromane Chemical compound C1=CC=C2CCCOC2=C1 VZWXIQHBIQLMPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002376 chymotrypsin Drugs 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 208000028831 congenital heart disease Diseases 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 description 1
- 229960000265 cromoglicic acid Drugs 0.000 description 1
- IMZMKUWMOSJXDT-UHFFFAOYSA-N cromoglycic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)=CC(=O)C2=C1C=CC=C2OCC(O)COC1=CC=CC2=C1C(=O)C=C(C(O)=O)O2 IMZMKUWMOSJXDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 201000001981 dermatomyositis Diseases 0.000 description 1
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 1
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 108010042617 dinitrophenyl-human serum albumin conjugate Proteins 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 201000005311 drug allergy Diseases 0.000 description 1
- 238000011841 epidemiological investigation Methods 0.000 description 1
- 230000003090 exacerbative effect Effects 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000013022 formulation composition Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000000703 high-speed centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000012510 hollow fiber Substances 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000035990 intercellular signaling Effects 0.000 description 1
- 229940076264 interleukin-3 Drugs 0.000 description 1
- 201000004332 intermediate coronary syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 1
- 239000003973 paint Substances 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000002616 plasmapheresis Methods 0.000 description 1
- 208000005987 polymyositis Diseases 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 description 1
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 239000002089 prostaglandin antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000008458 response to injury Effects 0.000 description 1
- 208000037803 restenosis Diseases 0.000 description 1
- 208000004124 rheumatic heart disease Diseases 0.000 description 1
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 230000016160 smooth muscle contraction Effects 0.000 description 1
- 210000000329 smooth muscle myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- LNQMAGOUQKHYNT-UHFFFAOYSA-N sulfanylidenemethylidenehydrazine Chemical compound NN=C=S LNQMAGOUQKHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 208000009056 telangiectasis Diseases 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000002537 thrombolytic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000008728 vascular permeability Effects 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
- A61K9/1271—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/15—Cells of the myeloid line, e.g. granulocytes, basophils, eosinophils, neutrophils, leucocytes, monocytes, macrophages or mast cells; Myeloid precursor cells; Antigen-presenting cells, e.g. dendritic cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
- A61K9/1277—Processes for preparing; Proliposomes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0642—Granulocytes, e.g. basopils, eosinophils, neutrophils, mast cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/30—Organic components
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/30—Organic components
- C12N2500/32—Amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/70—Undefined extracts
- C12N2500/80—Undefined extracts from animals
- C12N2500/84—Undefined extracts from animals from mammals
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Virology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本发明提供了一种用于疾病治疗的胞外体制剂及其应用，具体地，本发明提供的胞外体含有非常丰富的位于表面的FcεRI蛋白，含FcεRI蛋白的胞外体竞争性的与IgE结合，从而抑制IgE与肥大细胞的结合，降低IgE与肥大细胞的结合率，达到清除血清IgE的作用，此外，本发明的含FcεRI蛋白的胞外体还可抑制肥大细胞的活化，治疗IgE介导的相关疾病。
Description
技术领域
本发明涉及生物医药领域，具体地，涉及一种用于疾病治疗的胞外体制剂及其应用。
背景技术
过敏性疾病是经典的IgE介导的疾病。世界变态反应组织(WAO)对30个国家过敏性疾病的流行病学调查显示：约22％人群受到过敏性疾病的干扰，发病人数逐年上升。其机理为：过敏原初次进入机体刺激B淋巴细胞分泌特异性IgE，后者与肥大细胞和嗜碱性粒细胞上存在的IgE高亲和力受体FcεRIα结合(FcεRI是由α、β、2个γ亚基组成的四聚体，α链的胞外端是IgE的结合区域)，过敏原再次进入机体时可结合在肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面的IgE上，导致相邻的FcεRI交联，引起肥大细胞和嗜碱性粒细胞活化，释放炎症介质(组胺、白三烯、前列腺素)、细胞因子和趋化因子等，导致血管通透性增加、毛细血管扩张、平滑肌收缩、腺体分泌增加等，引起局部或全身过敏反应症状，包括过敏性鼻炎、哮喘、结膜炎、湿疹、食物过敏、药物过敏等。
自身免疫性疾病是指机体对自身抗原发生免疫反应而导致自身组织损害所引起的疾病，该疾病累及多种器官和组织，涵盖的疾病种类多达上百种，如类风湿关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)、多发性肌炎/皮肌炎、硬皮病、干燥综合征(SS)等。随着科学家对免疫系统认识的深入、检测手段的增加以及诊断水平的提高，越来越多的自身免疫病被发现。据自身免疫病协会统计，美国约有1470-2350万自身免疫性疾病患者，高达总人口的8％，是位于心血管疾病和肿瘤之后的第三类主要疾病，近年来，由于人们生存环境和生活习惯的改变，自身免疫病发病率逐年上升。
自身抗体的产生是自身免疫病重要的特征之一。大部分自身免疫病患者体内都存在自身抗体，如SLE患者抗ds-DNA抗体阳性率超过75％，SS患者抗SSA抗体阳性率也达75％以上。这些抗体能可能通过以下途径参与自身免疫病的发生和发展：①与细胞表面受体作用，改变受体的结构或阻断受体与相应配体的结合；②形成免疫复合物，沉积在血管处引起组织损伤；③通过补体依赖的细胞毒性(CDC)、抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用(ADCC)诱导细胞裂解。
传统的观点认为，参与这些疾病的抗体多数为IgG型。近年来研究发现，IgE型的自身抗体在某些自身免疫性疾病也发挥了重要的致病作用。在SLE患者中，血清IgE型抗dsDNA自身抗体与患者的疾病严重程度相关，该抗体能激活浆细胞样树突状细胞(pDC)，使其分泌大量的IFN-γ，从而加重SLE患者损伤反应。此外，RA、CSU和大疱性类天疱疮(BP)患者中也逐渐发现IgE型抗ANA、抗dsDNA、抗BP230和BP180自身抗体，这些抗体均与疾病的发生发展密切相关。
心血管疾病又称为循环系统疾病，是一组心脏和血管疾病，包括冠心病、脑血管疾病、周围末梢动脉血管疾病、风湿性心脏病、先天性心脏病、深静脉血栓和肺栓塞等。心血管疾病是全球范围造成死亡的最主要原因，据统计2012年全球有1750万人死于心血管疾病，占全球死亡总数的31％，其中估计740万人死于冠心病，670万人死于中风。
冠心病是心血管疾病中最主要的致死类型，约占心血管疾病死亡人数中的40％以上。冠心病是冠状动脉血管发生动脉粥样硬化病变而引起血管腔狭窄或阻塞，造成心肌缺血、缺氧或坏死而导致的心脏病，包括无症状心肌缺血(隐匿性冠心病)、心绞痛、心肌梗死、缺血性心力衰竭(缺血性心脏病)和猝死5种临床类型。传统的观点认为冠心病一种单纯的脂质沉积性疾病，新的研究表明冠心病与炎症密切相关，多种炎症因子和炎症细胞(巨噬细胞、中性粒细胞、肥大细胞等)聚集在斑块处。最新的研究发现，过敏性炎症相关的分子(IgE)和细胞(肥大细胞)沉积在斑块处，参与冠心病的发生发展。冠心病患者血清IgE水平增高，斑块处的IgE及其受体FcεRI水平也增加，且IgE水平与冠心病患者的动脉狭窄程度呈正相关。进一步的研究表明，IgE能促进其高亲和力受体FcεRI与其他细胞(巨噬细胞和内皮细胞)的TLR4的相互作用，从而促进巨噬细胞释放炎症分子，诱导巨噬细胞、内皮细胞、平滑肌细胞凋亡，加速动脉粥样硬化斑块形成。
目前IgE介导的疾病主要是过敏性疾病，对于过敏性疾病的治疗手段仍以对症治疗为主，包括抗组胺药物、肥大细胞稳定剂(如色甘酸钠、色羟丙钠等)和激素类(即免疫抑制剂，如强的松、地塞米松等)药物。这些药物只能暂时缓解过敏症状，一旦停药容易复发，长期服药要考虑其毒副作用。
自身免疫病的治疗也尚缺乏理想的方法。目前的治疗策略包括抗炎(皮质激素、水杨酸制剂、合成的前列腺素抑制剂)、免疫抑制(环孢素A、FK-506)、对症治疗(I型糖尿病患者使用胰岛素、甲状腺功能亢进者用抗甲状腺药物，病情严重者采用血浆置换疗法。这些方法只能缓解疾病症状，难以根治疾病。
冠心病的治疗策略主要包括药物治疗(硝酸酯类、钙离子阻滞剂、抗血小板、抗凝药物或溶栓剂)、介入治疗和手术治疗。尽管不同的治疗手段取得了较显著的疗效，但目前的药物治疗对病变严重的心肌缺血效果有限，而介入治疗(PCI)和心脏冠脉搭桥(CABG)治疗后手术部位或冠状动脉其他部位可发生再狭窄，均不能根治冠心病。因此寻找新的治疗途径，已经成为临床研究的重要课题。
因此，本领域迫切需要开发一种可有效治疗IgE介导的相关疾病的新的治疗途径。
发明内容
本发明的目的在于提供一种可有效治疗IgE介导的相关疾病的新的治疗途径。
本发明第一方面提供了一种胞外体制剂，包括：
胞外体，所述胞外体的大小为30-100nm，所述胞外体由体外经培养的肥大细胞分泌形成的；和
药学上可接受的载体。
在另一优选例中，所述制剂中，所述胞外体的含量(v/v)为0.001-30％，较佳地0.05-15％，更佳地0.1-10％，按所述制剂的总体积计。
在另一优选例中，所述胞外体中的总蛋白的浓度为0.01-10mg/mL，较佳地0.05-5mg/mL，更佳地0.5-3.5mg/mL；最佳地1-3mg/mL。
在另一优选例中，所述制剂为液态制剂、和/或冻干粉制剂。
在另一优选例中，所述制剂的剂型包括注射剂、喷剂、和/或涂剂。
在另一优选例中，所述胞外体含有位于外表面的FcεRI蛋白。
在另一优选例中，所述肥大细胞的来源选自下组：原代肥大细胞(如骨髓来源肥大细胞、脐血来源肥大细胞、组织来源肥大细胞)、肥大细胞系(LAD-2)、嗜碱性粒细胞、嗜碱性粒细胞系(KU812)、通过转染表达FcεRIα的细胞(如多能干细胞、间充质干细胞、树突状细胞、He la细胞、293T细胞、HMC-1细胞等其他任何原代细胞及细胞系)。
在另一优选例中，所述药学上可接受的载体选自下组：磷酸盐缓冲液、生理盐水、海藻糖溶液、或其组合。
在另一优选例中，所述制剂还含有白蛋白。
在另一优选例中，所述制剂中，所述白蛋白的含量(v/v)为0.5-50％，较佳地，2.5-25％，更佳地，5-15％，以所述制剂的总体积计。
在另一优选例中，所述制剂含有0.003-1wt％，较佳地，0.015-0.5wt％，更佳地0.03-0.35wt％的胞外体，以所述制剂的总重计。
在另一优选例中，所述制剂含有0.1-10wt％，较佳地，0.5-5wt％，更佳地1-3wt％的白蛋白，以所述制剂的总重计。
在另一优选例中，所述制剂中，胞外体与白蛋白的重量比为1-10：10-1，较佳地，1-5：5-1，更佳地，1-2：2-1。
本发明第二方面提供了一种胞外体，所述胞外体含有位于外表面的FcεRI蛋白，所述胞外体的大小为30-100nm，并且所述胞外体由体外经培养的肥大细胞分泌形成，并且所述的FcεRI蛋白基本上处于未结合状态。
在另一优选例中，所述的“基本上”指≥60％、≥70％、≥80％、≥90％≥95％、≥98％或几乎100％的FcεRI蛋白处于未结合状态。
在另一优选例中，所述的“处于未结合状态”指FcεRI蛋白未与IgE形成“FcεRI蛋白-IgE”复合物。
在另一优选例中，所述肥大细胞的来源选自下组：原代肥大细胞(如骨髓来源肥大细胞、脐血来源肥大细胞、组织来源肥大细胞)、肥大细胞系(LAD-2)、嗜碱性粒细胞、嗜碱性粒细胞系(KU812)、通过转染表达FcεRIα的细胞(如多能干细胞、间充质干细胞、树突状细胞、Hela细胞、293T细胞、HMC-1细胞等其他任何原代细胞及细胞系)。
本发明第三方面提供了一种本发明第二方面所述的胞外体的用途，用于制备IgE介导的相关疾病的药物。
本发明第四方面提供了一种本发明第一方面所述制剂的用途，用于制备治疗IgE介导的相关疾病的药物。
在另一优选例中，所述IgE介导的相关疾病选自下组：过敏性疾病、自身免疫病、心血管疾病、肾病综合征、或其组合。
在另一优选例中，所述过敏性疾病选自下组：过敏性哮喘、过敏性鼻炎、过敏性皮炎、过敏性结膜炎、全身过敏反应、食物过敏、药物过敏、或其组合。
在另一优选例中，所述自身免疫疾病选自下组：系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、大疱性类天疱疹、硬皮病、混合性结缔组织病、桥本氏甲状腺炎、溃疡性结肠炎、或其组合。在另一优选例中，所述心血管疾病选自下组：急性心肌梗死、稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛、急性冠脉综合征、钙化性主动脉瓣疾病、或其组合。
在另一优选例中，所述药物还用于选自下组的一种或多种用途：
(i)中和血清游离的IgE；
(ii)抑制IgE与肥大细胞表面的FcεRI的结合；
(iii)抑制肥大细胞的活化。
在另一优选例中，所述抑制肥大细胞的活化包括降低选自下组的一种或多种指标：β-己糖苷酶释放率、组胺释放率、5-羟色胺、类胰蛋白酶、糜蛋白酶、前列腺素、白细胞三烯、细胞因子(IL-6、IL-4、IL-5)。
本发明第五方面提供了一种体外非治疗性的抑制肥大细胞的活化的方法，包括步骤：
在本发明第一方面所述的胞外体制剂或本发明第二方面所述的胞外体存在下，培养肥大细胞，从而抑制肥大细胞的活化。
在另一优选例中，所述胞外体的浓度为0.011-21000μg/mL，较佳地，0.0210-1500μg/mL，更佳地，0.250-0.6200μg/mL。
在另一优选例中，所述肥大细胞来自人或非人哺乳动物。
在另一优选例中，所述非人哺乳动物为啮齿动物或灵长目动物，较佳地包括小鼠、大鼠、豚鼠、兔和/或猴。
本发明第六方面提供了一种胞外体的制法，包括步骤：
(i)提供一体外培养体系，所述培养体系含有骨髓来源肥大细胞和适合所述细胞生长的培养基，并且所述培养体系中还含有0.1-5mmol/L的L-谷氨酰胺，0.1-5mmol/L丙酮酸钠，以及5-15％(v/v)无胞外体的胎牛血清；
(ii)在适合生长的条件下，培养1-5天，获得培养产物；和
(iii)从所述培养产物中分离本发明第二方面所述的胞外体。
在另一优选例中，在步骤(i)的培养体系中，所述骨髓来源肥大细胞的浓度为1×105-1×107个/ml。
在另一优选例中，在步骤(ii)中，在37±1℃下培养。
本发明第七方面提供了一种治疗IgE介导的相关疾病的方法，包括步骤：
向给需要治疗的对象施用本发明第一方面所述的胞外体制剂。
在另一优选例中，所述的对象包括人或非人哺乳动物。
在另一优选例中，所述的对象包括啮齿动物，如小鼠、大鼠。
在另一优选例中，所述胞外体制剂的施用量为0.01-5mg/kg，较佳地为0.1-2mg/kg，更佳地为0.2-1mg/kg体重。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
附图说明
图1显示了A.电子显微镜下显示外泌体为直径50-80nm的圆形结构；B.Westernblot显示外泌体表达外泌体特征性分子TSG101蛋白和CD81蛋白，BMMC细胞及其外泌体均表达FcεRI，而P815细胞及其外泌体均不表达FcεRI；
图2显示了exosomes剂量与BMMC相对荧光强度(rFI)的量效关系。红线表示不同浓度的P815-exosome(不表达FcεRI)与IgE预先孵育2h，再与BMMC孵育，洗涤后加入FITC标记的抗IgE抗体，流式细胞仪检测未与exosome结合的IgE量；蓝线表示不同浓度的BMMC-exosome(表达FcεRI)与IgE预先孵育2h后，再检测剩余的IgE量；绿线表示不同浓度的BMMC-exosome、IgE和BMMC同时孵育后，加入FITC标记的抗IgE抗体，检测剩余IgE量。
图3显示了BMMC-exosome对过敏性哮喘小鼠肺泡灌洗液中IgE(A图)、组胺(B图)和白细胞及其分类计数(C图)的影响。其中，a组表示未经致敏和激发的对照小鼠；b-d组小鼠经OVA致敏和激发，其中b组给予生理盐水治疗，c组给予exosome治疗一月，d组给予exosome治疗2月，e组给予exosome治疗3月
图4显示了BMMC-exosome对过敏性哮喘小鼠肺组织炎症细胞浸润的影响。小鼠肺组织经甲醛固定、石蜡包埋、切片、HE染色，a表示未经致敏和激发的对照小鼠的肺组织；b表示经生理盐水治疗的过敏小鼠的肺组织，c表示给予exosome治疗一月的过敏小鼠肺组织，d组给予exosome治疗2月的过敏小鼠肺组织，e表示给予exosome治疗3月的过敏小鼠肺组织。
具体实施方式
本发明人经过广泛而深入的研究，意外地发现，在体外特定条件下培养的肥大细胞，会分泌的特定的胞外体，所述胞外体含有非常丰富的位于表面的FcεRI蛋白，并且所述的FcεRI蛋白基本上处于未结合状态。所述的含FcεRI蛋白的胞外体可竞争性地与IgE结合，从而显著抑制IgE与肥大细胞的结合，降低IgE与肥大细胞的结合率，从而极其有效地清除血清IgE。此外，实验证明，本发明的含FcεRI蛋白的胞外体还出乎意料地抑制肥大细胞的活化，治疗IgE介导的相关疾病(如过敏性哮喘)。在此基础上，本发明人完成了本发明。
如本文所用，术语“胞外体”、“FcεRI-胞外体”可互换使用，均指由经体外培养的肥大细胞(较佳地，骨髓来源肥大细胞)分泌形成的含有位于外表面的FcεRI蛋白的胞外体。
胞外体
胞外体(外泌体或囊泡体)是由细胞分泌的膜小囊泡，其携带母细胞的某些表面分子及内容物(蛋白、RNA等)，是细胞间信号传递的重要媒介。胞外体分布广、生物活性高、免疫原性低、是其来源细胞的缩影。利用胞外体为载体传递靶分子和药物成为近几年生物治疗和疫苗研制关注的热点。
研究发现，肥大细胞来源的胞外体携带FcεRI和KIT等各种膜受体、配体、粘附分子、共刺激信号分子，及核酸分子(miRNA和microRNA)，可能是肥大细胞与其他细胞、膜蛋白相互作用的重要方式。
在本发明中，基于自体来源的肥大细胞胞外体免疫原性低特性，利用肥大细胞来源的胞外体携带的FcεRI中和血清IgE，阻断IgE与肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面的IgE高亲和力受体FcεRI结合，抑制肥大细胞活化，缓解疾病的进程，可能是治疗IgE相关疾病的一条有效途径。
胞外体制剂
本发明的胞外体制剂，含有安全有效量的胞外体以及药学上可接受的载体或赋形剂。这类载体包括(但并不限于)：盐水、缓冲液、葡萄糖、水、甘油、乙醇、粉剂、及其组合。药物制剂应与给药方式相匹配。
在一优选实施方式中，所述胞外体的大小为30-100nm，并且所述胞外体由体外经培养的肥大细胞分泌形成。
在一优选实施方式中，本发明的制剂还可含有安全有效量的白蛋白，所述白蛋白具有稳定制剂的作用。本发明人的研究表明，加入一定比例的白蛋白，可显著提高本发明FcεRI-胞外体的治疗效果和稳定性。
本发明的药物组合物可以被制成液态制剂，其制备可通过常规方法进行,液态制剂宜在无菌条件下制造。活性成分的给药量是治疗有效量，例如每天约1微克/千克体重-约50毫克/千克体重，约5微克/千克体重-约10毫克/千克体重，约10微克/千克体重-约5毫克/千克体重。此外，本发明制剂还可与其他治疗剂一起使用。
使用本发明的制剂时，是将安全有效量的药物施用于哺乳动物，其中该安全有效量通常至少约10微克/千克体重，而且在大多数情况下不超过约50毫克/千克体重，较佳地该剂量是约10微克/千克体重-约20毫克/千克体重。当然，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技能范围之内的。
FcεRI-胞外体以及制剂的制备方法
在本发明中，典型地，以表面表达FcεRI细胞(原代培养的肥大细胞、嗜碱性粒细胞、肥大细胞系、嗜碱性粒细胞系、转染表达FcεRI的其它细胞)作为胞外体的来源，通过体外培养一段时间(如1-5天，较佳地1.5-3天)后，从培养体系中分离所形成的胞外体。
在本发明中，将所述制备的FcεRI-胞外体与药学上可接受的赋形剂进行混合，就可制得本发明的制剂或药物组合物。
在本发明中，优选的制剂为液态的FcεRI-胞外体制剂。
典型地，一种胞外体制剂的制备方法包括以下步骤：
1)采用超速离心法或FibercellTM3D中空纤维细胞培养系统制备FcεRI-胞外体；
2)将白蛋白加入医学上可接受的溶剂中，其体积占比为0.5-50％；
3)再将获取的胞外体加入到医学上可接受的溶剂中，其体积占比为0.1-30％(V/V)，胞外体的含量为0.03-10mg/mL，从而获得胞外体制剂。
用途
本发明所制备的表面含未结合型FcεRIα的胞外体(FcεRI-胞外体)，可有效中和体内游离的IgE，减少IgE与肥大细胞膜受体的结合进而减少肥大细胞脱颗粒，抑制过敏反应，逐渐使肥大细胞数量和IgE受体表达减少，从而达到治疗过敏及IgE相关疾病的目的。
典型地，本发明的胞外体或含有胞外体的胞外体制剂(或相应药物)可中和体内游离的IgE，减少IgE与肥大细胞膜受体的结合进而减少肥大细胞脱颗粒，抑制过敏反应，从而达到治疗过敏及IgE相关疾病(如过敏性疾病(如过敏性哮喘)、自身免疫病、心血管疾病)的目的。
本发明的主要优点包括：
(1)本发明的FcεRI-胞外体从细胞培养上清中提取获得，易于制备、可来源于自体细胞、无免疫原性。
(2)本发明的FcεRI-胞外体中和血清游离IgE，减少IgE与FcεRI阳性的细胞结合，包括肥大细胞、嗜碱性粒细胞、巨噬细胞等，可用于IgE介导的相关疾病，包括过敏、自身免疫病、心血管疾病等。
(3)本发明首次公开了一种含有FcεRI-胞外体的胞外体制剂，其可有效的中和血清游离IgE，减少IgE与FcεRI阳性的细胞结合，从而治疗IgE介导的相关疾病。
(4)本发明首次公开了一种含有FcεRI-胞外体的胞外体制剂，其还能减少肥大细胞、嗜碱性粒细胞、树突状细胞等细胞表面的FcεRI的表达水平，减少肥大细胞的活化，从而治疗IgE介导的相关疾病。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，例如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册(New York:Cold Spring HarborLaboratory Press,1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数是重量百分比和重量份数。
除非特别说明，否则本发明说明书中所用的试剂和材料均为市售产品。
实施例1FcεRI-胞外体的制备
在本实施例中，以正常小鼠骨髓来源肥大细胞(Bone marrow-derived mastcells,BMMC)作为胞外体的来源细胞。方法如下：
从小鼠(购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司)胫骨和股骨提取骨髓细胞，经白介素3(interleukin 3,IL-3)和干细胞因子(stem cell factor,SCF)诱导4周，获得小鼠骨髓来源肥大细胞。
取胎牛血清，超高速离心(100000g离心90min)去除胞外体，从而获得除去胞外体的血清。
将小鼠骨髓来源肥大细胞与市售的1640培养液(其中补加终浓度1mmol/L谷氨酰胺、终浓度1mmol/L丙酮酸钠，并且含10％所述的除去胞外体的血清)混合，调整细胞浓度为1×106/ml，在37℃培养48小时；收集培养液，300g离心10min，保留上清，去除细胞沉淀，去细胞碎片；上清16500g离心20min，保留上清，去除细胞沉淀，去除细胞碎片及凋亡小体等成分；上清120000g离心90min，去除上清，收集沉淀，即获得胞外体，用PBS缓冲液重悬，用BCA试剂盒测蛋白浓度。
结果如图1所示。电子显微镜检测结果显示胞外体为30-100nm，总蛋白浓度为3mg/mL。此外，几乎100％的FcεRI蛋白处于未结合状态(即FcεRI蛋白为未结合型)。
实施例2FcεRI-胞外体制剂的制备
取900μL生理盐水，加入50μL 20％人白蛋白，使其终质量浓度为1％(wt/wt)；再加入50μL 4×108细胞提取的胞外体(exosome)，获得胞外体制剂。胞外体中的总蛋白的绝对量为2mg。
实施例3FcεRI-胞外体与IgE的结合能力
以BMMC(表达FcεRI)和P815细胞(不表达FcεRI)(购自ATCC)作为胞外体的来源细胞，按照实施例1和实施例2的方法制备FcεRI-胞外体(BMMC-胞外体)制剂和FcεRI(-)-胞外体(P815-胞外体)制剂。
胞外体预先与IgE孵育2h后再加入BMMC中孵育，另一组将BMMC-胞外体与IgE同时加入BMMC中孵育，各组与细胞孵育结束后，洗涤并加入异硫氰荧光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)标记的抗IgE抗体，流式细胞仪检测BMMC表面的荧光。
结果如图2所示。研究结果表明，BMMC-胞外体能抑制IgE与BMMC的结合，且随着BMMC-胞外体剂量增加，IgE与BMMC的结合率不断降低，两者呈负相关；而P815-胞外体对IgE与BMMC的结合率则无明显影响。
实施例4FcεRI-胞外体抑制IgE介导的肥大细胞活化
采用β-己糖苷酶释放和组胺释放试验检测FcεRI-胞外体对肥大细胞活化的影响。
按照实施例1和实施例2制备FcεRI-胞外体(BMMC-胞外体)制剂，将BMMC-胞外体(100μg)与IgE孵育不同时间(0.5、1、2、4h)后，加入到BMMC悬液中，37℃孵育1h致敏；洗涤后加入DNP-HSA(0.5μg/ml)激发，收集细胞上清(A)，裂解细胞沉淀并收集裂解产物，离心获取上清(B)。检测β-己糖苷酶和组胺浓度，计算其释放率，释放率＝A浓度×A体积/(A浓度×A体积+B浓度×B体积)。
结果表明，与未经BMMC-胞外体作用组相比，BMMC-胞外体作用组肥大细胞的β-己糖苷酶和组胺释放率均下降，且随着两者孵育时间增加，β-己糖苷酶和组胺释放率下降。这说明BMMC-胞外体能抑制BMMC活化。
实施例5FcεRI-胞外体减轻小鼠过敏性哮喘
按照实施例1和实施例2制备FcεRI-胞外体(BMMC-胞外体)制剂。
构建小鼠过敏性哮喘模型：于第0，7，14天予小鼠腹腔注射预先混合好的OVA(20μg)加佐剂氢氧化铝(4mg)混合液致敏，第21天开始用1％OVA溶液做雾化吸入，30min/次/天，连续吸入5天。
分组：BALB/c小鼠(购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司)随机分成5组，分别为对照组(A组)，哮喘组(B组)，治疗1月组(C组)，治疗2月组(D组)，治疗3月组(E组)。其中对照组以生理盐水致敏和激发；哮喘组以OVA致敏和激发；治疗一月组从第32天起，用1％OVA雾化吸入，30min/次/天，每周两次，每周激发前30min尾静脉注射40μg/150μL的BMMC-胞外体，总共注射4次；治疗2月组和治疗3月组处理方法同治疗1月组，不同之处在于注射次数分别为8次和12次；
各组小鼠末次激发后检测气道高反应性(Airway High Reactivity,AHR)；收集血清、肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)和肺组织，检测炎症细胞数目、炎症介质水平、肺组织病理变化。
结果如图3和图4所示。研究结果表明，BMMC-胞外体能有效改善哮喘小鼠的AHR，减少哮喘小鼠血清OVA特异性IgE(OVA-specific IgE，OVA-sIgE)水平，BALF中炎症细胞数量以及组胺和Th2细胞因子(IL-4、IL-5和IL-13)水平，增加抗炎因子(IL-10和IFN-γ)的分泌，减轻肺组织炎症细胞的浸润、黏液分泌及气道平滑肌的增生。且BMMC-胞外体抑制过敏反应的效应随着治疗时间的延长而增强。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
Claims (7)
1.一种胞外体制剂的用途，其特征在于，用于制备治疗IgE介导的相关疾病的药物，所述IgE介导的相关疾病为过敏性疾病，所述胞外体制剂包括：
胞外体，所述胞外体的大小为30-100nm，所述胞外体由体外经培养的肥大细胞分泌形成；和
药学上可接受的载体；
所述胞外体含有位于外表面的FcεRI蛋白，所述FcεRI蛋白处于未结合状态，所述制剂含有0.015-0.5wt%的胞外体，以所述制剂的总重计，所述胞外体中的总蛋白的浓度为1-3mg/mL；
所述制剂还含有白蛋白，并且含有1-3wt%的白蛋白，以所述制剂的总重计。
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述制剂含有0.03-0.35wt%的胞外体，以所述制剂的总重计。
3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述过敏性疾病为过敏性哮喘。
4.一种体外非治疗性的抑制肥大细胞的活化的方法，其特征在于，包括步骤：
在胞外体制剂存在下，培养肥大细胞，从而抑制肥大细胞的活化；
所述胞外体制剂包括：
胞外体，所述胞外体的大小为30-100nm，所述胞外体由体外经培养的肥大细胞分泌形成；和
药学上可接受的载体；
所述胞外体含有位于外表面的FcεRI蛋白，所述FcεRI蛋白处于未结合状态，所述制剂含有0.015-0.5wt%的胞外体，以所述制剂的总重计，所述胞外体中的总蛋白的浓度为1-3mg/mL；
所述制剂还含有白蛋白，并且含有1-3wt%的白蛋白，以所述制剂的总重计。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述胞外体的浓度为0.011-21000μg/mL。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述胞外体的浓度为0.0210-1500μg/mL。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述胞外体的浓度为0.250-0.6200μg/mL。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710049857.6A CN108324735B (zh) | 2017-01-20 | 2017-01-20 | 用于疾病治疗的胞外体制剂及其应用 |
| US16/479,561 US11759423B2 (en) | 2017-01-20 | 2017-12-15 | Exosome preparation for treating disease and application thereof |
| PCT/CN2017/116608 WO2018133602A1 (zh) | 2017-01-20 | 2017-12-15 | 用于疾病治疗的胞外体制剂及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710049857.6A CN108324735B (zh) | 2017-01-20 | 2017-01-20 | 用于疾病治疗的胞外体制剂及其应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN108324735A CN108324735A (zh) | 2018-07-27 |
| CN108324735B true CN108324735B (zh) | 2024-02-09 |
Family
ID=62907728
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201710049857.6A Active CN108324735B (zh) | 2017-01-20 | 2017-01-20 | 用于疾病治疗的胞外体制剂及其应用 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US11759423B2 (zh) |
| CN (1) | CN108324735B (zh) |
| WO (1) | WO2018133602A1 (zh) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108324735B (zh) * | 2017-01-20 | 2024-02-09 | 李莉 | 用于疾病治疗的胞外体制剂及其应用 |
| CN112029705B (zh) * | 2020-08-31 | 2021-10-08 | 中国医学科学院微循环研究所 | 促内皮细胞产外泌体的方法、外泌体制剂和应用 |
| CN114854688B (zh) * | 2022-04-27 | 2023-09-26 | 广州医科大学附属第一医院（广州呼吸中心） | 一种提高肥大细胞外泌体及其膜表面FcεRI的表达量的方法及其应用 |
Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1207686A (zh) * | 1995-12-18 | 1999-02-10 | 耶路撒冷希伯来语大学依苏姆研究开发公司 | 定向治疗变应性应答的Fcε－PE嵌合蛋白及制法和含有它的药物组合物 |
| CN1543476A (zh) * | 2001-08-17 | 2004-11-03 | ��˹��ŵ�� | 用于将蛋白定向到胞外体的方法和化合物 |
| CN1634582A (zh) * | 2004-11-18 | 2005-07-06 | 李莉 | 抗FcεRIα单克隆抗体Fab与雷公藤红素交联体 |
| CA2766833A1 (en) * | 2009-07-02 | 2011-01-06 | Ith Immune Therapy Holdings Ab | Exosome-based treatment of cancer |
| CN104293738A (zh) * | 2013-09-11 | 2015-01-21 | 李莉 | 一种抗人FcεRⅠα亚基单克隆抗体及其应用 |
| CN105597088A (zh) * | 2016-02-02 | 2016-05-25 | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 | 一种制剂、其制备方法及其应用 |
| CN105848662A (zh) * | 2013-11-01 | 2016-08-10 | 南克维斯特公司 | 杀肿瘤和抗微生物组合物和方法 |
| WO2018133602A1 (zh) * | 2017-01-20 | 2018-07-26 | 李莉 | 用于疾病治疗的胞外体制剂及其应用 |
| WO2022149779A1 (ko) * | 2021-01-11 | 2022-07-14 | 주식회사 엑소코바이오 | 과발현된 Fc 수용체 또는 이의 일부를 포함하는 엑소좀 및 이의 제조방법 |
| CN114854688A (zh) * | 2022-04-27 | 2022-08-05 | 广州医科大学附属第一医院（广州呼吸中心） | 一种提高肥大细胞外泌体及其膜表面FcεRI的表达量的方法及其应用 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2011034597A1 (en) * | 2009-09-17 | 2011-03-24 | Children's Medical Center Corporation | Diagnostic and therapeutic uses of soluble fc-epsilon receptor i for ige-mediated disorders |
| CN104487569A (zh) * | 2012-05-10 | 2015-04-01 | 生物材料细胞公司 | 间充质干细胞的成骨分化 |
-
2017
- 2017-01-20 CN CN201710049857.6A patent/CN108324735B/zh active Active
- 2017-12-15 US US16/479,561 patent/US11759423B2/en active Active
- 2017-12-15 WO PCT/CN2017/116608 patent/WO2018133602A1/zh active Application Filing
Patent Citations (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1207686A (zh) * | 1995-12-18 | 1999-02-10 | 耶路撒冷希伯来语大学依苏姆研究开发公司 | 定向治疗变应性应答的Fcε－PE嵌合蛋白及制法和含有它的药物组合物 |
| CN1543476A (zh) * | 2001-08-17 | 2004-11-03 | ��˹��ŵ�� | 用于将蛋白定向到胞外体的方法和化合物 |
| CN1634582A (zh) * | 2004-11-18 | 2005-07-06 | 李莉 | 抗FcεRIα单克隆抗体Fab与雷公藤红素交联体 |
| CA2766833A1 (en) * | 2009-07-02 | 2011-01-06 | Ith Immune Therapy Holdings Ab | Exosome-based treatment of cancer |
| CN102470167A (zh) * | 2009-07-02 | 2012-05-23 | Ith免疫治疗控股公司 | 基于外泌体的癌症治疗 |
| CN104293738A (zh) * | 2013-09-11 | 2015-01-21 | 李莉 | 一种抗人FcεRⅠα亚基单克隆抗体及其应用 |
| CN105848662A (zh) * | 2013-11-01 | 2016-08-10 | 南克维斯特公司 | 杀肿瘤和抗微生物组合物和方法 |
| CN105597088A (zh) * | 2016-02-02 | 2016-05-25 | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 | 一种制剂、其制备方法及其应用 |
| WO2018133602A1 (zh) * | 2017-01-20 | 2018-07-26 | 李莉 | 用于疾病治疗的胞外体制剂及其应用 |
| WO2022149779A1 (ko) * | 2021-01-11 | 2022-07-14 | 주식회사 엑소코바이오 | 과발현된 Fc 수용체 또는 이의 일부를 포함하는 엑소좀 및 이의 제조방법 |
| CN114854688A (zh) * | 2022-04-27 | 2022-08-05 | 广州医科大学附属第一医院（广州呼吸中心） | 一种提高肥大细胞外泌体及其膜表面FcεRI的表达量的方法及其应用 |
Non-Patent Citations (20)
| Title |
|---|
| CD1d expressed in mast cell surface enhances IgE production in B cells by up-regulating CD40L expression and mediator release in allergic asthma in mice;Hong GU等;《Cell Signal》;20140205;第26卷(第5期);1105-17 * |
| Exosomes in Severe Asthma: Update in Their Roles and Potential in Therapy;Mortaz E等;Biomed Res Int;doi: 10.1155/2018/2862187 * |
| FcεRⅠα亚基细胞外部分的重组表达、单克隆抗体的制备及特异性鉴定;宋晓妮;《中国学位论文全文数据库》;20090327;摘要第1、2段 * |
| Li F等.Mast Cell-Derived Exosomes Promote Th2 Cell Differentiation via OX40L-OX40 Ligation.《J Immunol Res》.2016, * |
| Mast cell synapses and exosomes: membrane contacts for information exchange;Carroll-Portillo A等;《Front Immunol》;20120315;第3卷;第2页左栏第2段、第5页右栏第1段、图3 * |
| Mast Cell-Derived Exosomes Promote Th2 Cell Differentiation via OX40L-OX40 Ligation;Li F等;《J Immunol Res》;20160315;第1页左栏第1、2段，第2页左栏第2段、右栏第3段，第3页右栏第3段，第5页右栏第1段，图2 * |
| Targeting Mast Cells and Basophils with Anti-FcεRIα Fab-Conjugated Celastrol-Loaded Micelles Suppresses Allergic Inflammation;Peng X等;《J Biomed Nanotechnol》;20151231;第11卷(第12期);2286-99 * |
| 免疫细胞和肿瘤细胞外泌体及其免疫调节作用;刘立华等;《中国免疫学杂志》;20090531;第25卷(第5期);478-481 * |
| 宋晓妮.FcεRⅠα亚基细胞外部分的重组表达、单克隆抗体的制备及特异性鉴定.《中国学位论文全文数据库》.2009,摘要第1、2段. * |
| 慢病毒介导的稳定表达人GM-CSF、IL-4的EA.hy926细胞株的建立;石晓月等;《生物技术通讯》;20110730(第04期);34-37 * |
| 抗人FcεRIα Fab-聚合物胶束-雷公藤红素诱导肥大细胞凋亡治疗过敏性疾病;彭霞;《中国优秀博硕士学位论文全文数据库(博士)医药卫生科技辑》;20170215(第02期);E065-143 * |
| 曲古菌素A对FcεRI介导的肥大细胞活化的影响;王庆辉等;《微生物学杂志》;20110315(第02期);49-52 * |
| 肥大细胞、嗜碱性粒细胞在过敏性疾病发病机制中的作用研究进展;曾晓宁等;《医学研究生学报》;20100715(第07期);98-100 * |
| 肥大细胞与炎症性疾病关系的研究进展;吴雅玲等;《医学综述》;20161020(第20期);34-37 * |
| 肥大细胞及其活化相关抗体在自身免疫病中的作用研究进展;王玉萍等;《国际免疫学杂志》;20140602;第37卷(第6期);466-470 * |
| 肥大细胞来源的外泌体结合游离IgE抑制过敏反应的实验研究;谢国钢;《中国优秀博硕士学位论文全文数据库(博士)医药卫生科技辑》;20210115(第01期);E065-79 * |
| 肥大细胞源胞外体在非小细胞癌中的作用;肖辉;《中国博士学位论文全文数据库（博士）医药卫生科技辑》;20160415(第04期);E072-15 * |
| 胞外体的表征及其功能;李飞等;《现代免疫学》;20130331;第33卷(第3期);252-256 * |
| 董劲春.过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒的临床研究指南.《标记免疫分析与临床》.2011,第18卷(第3期), * |
| 过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒的临床研究指南;董劲春;《标记免疫分析与临床》;20110909;第18卷(第3期);第213页左栏第1段 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US20200060970A1 (en) | 2020-02-27 |
| US11759423B2 (en) | 2023-09-19 |
| CN108324735A (zh) | 2018-07-27 |
| WO2018133602A1 (zh) | 2018-07-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11173182B1 (en) | Placenta-derived adherent cell exosomes and uses thereof | |
| Perico et al. | Clinical translation of mesenchymal stromal cell therapies in nephrology | |
| Abdelgawad et al. | Mesenchymal stem cell-based therapy and exosomes in COVID-19: current trends and prospects | |
| US20120148577A1 (en) | Use of high-dose, post-transplantation oxazaphosphorine drugs for reduction of transplant rejection | |
| CN108324735B (zh) | 用于疾病治疗的胞外体制剂及其应用 | |
| US20220265720A1 (en) | Methods for stem cell transplantation | |
| EP3448364B1 (en) | Targeting the innate immune system to induce long-term tolerance and to resolve macrophage accumulation in atherosclerosis | |
| Ochando et al. | The mononuclear phagocyte system in organ transplantation | |
| Li et al. | Therapeutic effect of rapamycin-loaded small extracellular vesicles derived from mesenchymal stem cells on experimental autoimmune uveitis | |
| Song et al. | Autologous stem cell transplantation for systemic lupus erythematosus: report of efficacy and safety at 7 years of follow-up in 17 patients | |
| Shaw et al. | Mesenchymal stromal cells: an antimicrobial and host-directed therapy for complex infectious diseases | |
| KR20210127510A (ko) | 트롬빈 처리 줄기세포에서 유래된 엑소좀을 포함하는 당뇨병성 피부질환 예방 또는 치료용 조성물 | |
| Adak et al. | Mesenchymal stem cell as a potential therapeutic for inflammatory bowel disease-myth or reality? | |
| Tang et al. | Mesenchymal stem cells and their small extracellular vesicles as crucial immunological efficacy for hepatic diseases | |
| US20130273011A1 (en) | Stem cells and stem cell generated nanoparticles for treatment of inflammatory conditions and acute radiation syndrome | |
| US20220362341A1 (en) | Treatment of major depressive disorder by low dose interleukin-2 | |
| Cheng et al. | Targeting metabolism as a platform for inducing allograft tolerance in the absence of long-term immunosuppression | |
| JP2023522213A (ja) | 再生非ステロイド性抗炎症組成物、その生産方法、及び使用方法 | |
| US20150283180A1 (en) | Prevention and Treatment of Transplant Rejection with Mesenchymal Stem Cells and/or TSG-6 Protein | |
| Saidi et al. | Utilization of Mesenchymal Stem Cells in Kidney Transplantation: From Bench to Bedside. | |
| Shaw et al. | Cellular therapies in solid organ allotransplantation: promise and pitfalls | |
| CN113995845B (zh) | 一种伊维菌素制剂及其制备方法和应用 | |
| CN115819600B (zh) | 一种γδT细胞制备以及在癌症中的应用 | |
| Jeyamogan et al. | CD4+ CD25+ FOXP3+ regulatory T cells: a potential “armor” to shield “transplanted allografts” in the war against ischemia reperfusion injury | |
| Reichardt et al. | The Role of Glucocorticoids in Inflammatory Diseases. Cells 2021, 10, 2921 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |