CN108323537B

CN108323537B - 蓬莪术植物挥发油在防治辣椒疫病中的应用

Info

Publication number: CN108323537B
Application number: CN201810261240.5A
Authority: CN
Inventors: 王碧; 徐曙; 赵兴增; 刘飞; 王奇志; 单宇; 陈雨; 印敏; 管福琴; 冯煦; 王鸣; 赵友谊; 张建华
Original assignee: Institute of Botany of CAS
Current assignee: Institute of Botany of CAS
Priority date: 2018-03-28
Filing date: 2018-03-28
Publication date: 2020-08-28
Anticipated expiration: 2038-03-28
Also published as: CN108323537A

Abstract

本发明属于植物源农药技术领域。首次以蓬莪术植物挥发油为有效成分用于防治辣椒疫病，初步研究了蓬莪术植物挥发油对辣椒疫病的控制效果。结果证明蓬莪术植物挥发油对辣椒疫霉菌丝生长、孢子产生和萌发均具有较好的抑制作用，活体条件下对辣椒疫病也表现出较好的防效，可用于辣椒疫病的防治。本发明的优点在于利用蓬莪术植物挥发油防治辣椒疫病不污染环境，不易产生抗药性，减少了化学农药使用量，低残留，对作物安全，对非靶标作物无影响。

Description

蓬莪术植物挥发油在防治辣椒疫病中的应用

技术领域

本发明属于植物源农药技术领域，具体涉及蓬莪术植物挥发油在防治辣椒疫病中的用途。

背景技术

辣椒疫病是由辣椒疫霉菌 (PhytophthoracapsiciL.) 引起的，世界范围内的一种毁灭性病害，常造成辣椒的大幅减产、甚至绝收。辣椒疫病在辣椒的苗期到成株期都可发生，且根、茎、叶、果实均可发病，发病周期短、蔓延快，是造成辣椒严重减产的重要土传性病害。在疫病高发期，3~5天即可造成辣椒全株死亡，一般造成减产20%~30%，严重的达50%以上，极大的损害了农民的收益。目前，生产上主要使用以甲霜灵为代表的酰胺类化学杀菌剂来防治辣椒疫病，但由于此类杀菌剂作用位点单一，疫霉易对其产生抗性突变，随着长期大面积的施用，抗药性问题日益凸显。因此，急需开发新型防治药剂，以缓解抗药性问题和减少农业生产损失。

莪术为姜科植物蓬莪术（Curcuma phaeocaulis Val.）、广西莪术（Curcuma Kwangsiensis S. G.Lee et C. F. Liang）、温郁金（Curcuma wenyujin Y.H. Chen et C.Ling）的干燥根茎。莪术油是从莪术的干燥根茎提取出的挥发油，也是莪术的主要化学成分之一，含有β-榄香烯、莪术醇、莪术酮、吉玛酮等多种有效成分，早期研究发现其在抗肿瘤、抗病毒临床治疗中具有重要的应用价值。经本发明人研究，发现蓬莪术挥发油对辣椒疫霉菌丝生长、孢子的产生和萌发有较好的抑制作用，活体条件下辣椒疫病也表现出较好的防效，可用于辣椒疫病的防治。目前，将蓬莪术挥发油应用于辣椒疫病防治的研究尚未有相关报道。

发明内容

本发明提供了蓬莪术植物挥发油在防治辣椒疫霉的应用。

本发明是通过以下技术方案实现：

所述的蓬莪术植物挥发油提取步骤为：将蓬莪术粉碎过筛后装于圆底烧瓶中，按1∶8~1：20的比例加蒸馏水，浸泡1 h，随后超声波处理1 h，自冷凝管上端加水使充满挥发油提取器的刻度部分，并溢出流入烧瓶时为止，再自冷凝管上端加入1 ml石油醚，将烧瓶置电热套中加热至沸，提取7 h，停止加热，放置片刻后开启提取器下端活塞，将水缓缓放出，接收挥发油于干净的小瓶中，热风挥净石油醚，即得蓬莪术挥发油。

所述应用是指将蓬莪术植物挥发油配制成喷雾剂（有效成分为蓬莪术植物挥发油），喷洒于待治理区域的植物叶片上，至药液成水滴状流下来为止。所述喷雾剂，其有效成分为蓬莪术植物挥发油，其剂型为喷雾剂。

所述应用是指用于抑制辣椒疫霉菌丝生长、孢子产生和萌发以及辣椒疫病的防治。

附图说明

以下图可作为附件材料上报。

图1：蓬莪术挥发油对辣椒离体叶片上辣椒疫病的防治效果。

具体实施方式

以下结合具体的实施例对本发明的技术方案和技术效果作进一步说明。

实施例1：蓬莪术挥发油的提取

所述蓬莪术植物挥发油提取自蓬莪术，提取步骤为：将蓬莪术粉碎过筛后装于圆底烧瓶中，按1∶12的比例加蒸馏水，浸泡1 h，随后超声波处理1 h，自冷凝管上端加水使充满挥发油提取器的刻度部分，并溢出流入烧瓶时为止，再自冷凝管上端加入1 ml石油醚，将烧瓶置电热套中加热至沸，提取7 h，停止加热，放置片刻后开启提取器下端活塞，将水缓缓放出，接收挥发油于干净的小瓶中，热风挥净石油醚，即得蓬莪术挥发油。

实施例2：有效成分为蓬莪术植物挥发油的喷雾剂的制备

（1）按实施例1提取蓬莪术挥发油；（2）喷雾剂的制备，蓬莪术挥发油与辅料洗洁精1:1混合，喷施时用水稀释100-1000倍。所述辅料一方面可以提高药剂的表面活性、溶解性和渗透性，而且容易洗净，使蓬莪术挥发油能够更好地作用于辣椒疫霉，提高防治效果。

实施例3：按实施例2配制蓬莪术挥发油对辣椒疫霉菌丝生长抑制作用

试验方法：釆用菌丝生长速率法对辣椒疫霉进行室内毒力测定。供试蓬莪术挥发油用无菌水稀释，后加入V8培养基混匀，然后使用倍比稀释法制成6个浓度梯度的V8含蓬莪术挥发油培养基平板，对照加无菌水。用直径5 mm灭菌打孔器在活化的辣椒疫霉菌落边缘打取菌饼，反接入含蓬莪术挥发油的培养基，置于25°C恒温培养箱中培养48 h，用十字交叉法测量菌落直径，求出菌落平均直径，计算供试蓬莪术挥发油对菌落生长的抑制率。每组处理3次重复。

试验结果：按实施例2配制的蓬莪术挥发油稀释浓度为100倍、200倍、400倍、600倍、800倍和1000倍，对辣椒疫霉的菌丝生长抑制率分别为100%、93.6%、76.3%、52.5%、26.3%和11.4%。结果表明，按本发明技术生产的蓬莪术挥发油对辣椒疫霉有较好的药效。

实施例4：按实施例2配制蓬莪术挥发油对辣椒疫霉孢子产生和萌发的抑制作用

试验方法：用直径5 mm灭菌打孔器在活化的辣椒疫霉菌落边缘打取菌饼，接入V8液体培养基，置于25°C恒温培养箱中培养48 h，后将V8液体培养基倒掉、无菌水清洗菌丝后，加入含6个浓度梯度蓬莪术挥发油的灭菌自来水继续过夜培养，对照加灭菌自来水。待对照组产生大量孢子囊后，转至4°C培养1 h，使游动孢子大量释放，于光学显微镜下观察并统计孢子产生情况。将对照组产生的孢子悬浮液浓度调整为1×10⁶个/ml，分别转移到含6个浓度梯度蓬莪术挥发油的V8液体培养基中，于光学显微镜下观察并统计孢子萌发情况。

试验结果：按实施例2配制的蓬莪术挥发油稀释浓度为100倍、200倍、400倍、600倍、800倍和1000倍，对辣椒疫霉的孢子产生抑制率分别为100%、100%、100%、100%、71.5%和28.3%。24 h内对辣椒疫霉的孢子萌发的抑制率分别为73.6%、56.8%、32.4%、21.5%和19.3%。

实施例5：按实施例2配制蓬莪术挥发油对辣椒疫病的防治（离体叶片）

试验方法：按实施例4的方法配制浓度为1×10⁶个/ml的孢子悬浮液，利用孢子接种法（喷洒）进行辣椒疫霉对辣椒叶片的接种，接种后24 h、36 h、48 h观察辣椒叶片的发病情况，评估蓬莪术挥发油对辣椒疫病的防治效果。将莪术植物挥发油稀释成5个浓度梯度并喷洒于健康辣椒离体叶片上，至药液成水滴状流下来为止。保护作用测定采用喷施药剂24h后接种辣椒疫霉，治疗作用测定则在接种辣椒疫霉24 h后进行喷施药剂处理。

试验结果：蓬莪术挥发油在离体叶片上对辣椒疫病具有良好的防效，治疗作用显著好于保护作用（图1）。

实施例6：按实施例2配制蓬莪术挥发油对辣椒疫病的防治（大田）

按实施例4的方法配制浓度为1×10⁶个/ml的孢子悬浮液，利用孢子接种法（喷洒）进行辣椒疫霉对辣椒植株的接种，接种后24 h、48 h、72 h观察辣椒的发病情况，评估蓬莪术挥发油对辣椒疫病的防治效果。将莪术植物挥发油稀释成5个浓度梯度并喷洒于待治理区域的辣椒植株上，至药液成水滴状流下来为止。采用喷施药剂24 h后接种辣椒疫霉。

试验结果：蓬莪术挥发油对辣椒疫病具有良好的防效（表 1）。

表1：蓬莪术挥发油对辣椒疫病的防治效果

Claims

1.蓬莪术植物挥发油在防治辣椒疫病中的应用，所述蓬莪术植物挥发油提取自蓬莪术，由以下方法提取获得：

将蓬莪术粉碎过筛后装于圆底烧瓶中，按1：8～1：20的比例加蒸馏水，浸泡1h，随后超声波处理1h，自冷凝管上端加水使充满挥发油提取器的刻度部分，并溢出流入烧瓶时为止，再自冷凝管上端加入1ml石油醚，将烧瓶置电热套中加热至沸，提取7h，停止加热，放置片刻后开启提取器下端活塞，将水缓缓放出，接收挥发油于干净的小瓶中，热风挥净石油醚，即得蓬莪术挥发油。

2.根据权利要求1所述的应用，是指将蓬莪术植物挥发油配制成喷雾剂，喷洒于待治理区域的植物叶片上，至药液成水滴状流下来为止。

3.根据权利要求1所述的应用，是指用于抑制辣椒疫霉菌丝生长、孢子产生和萌发以及辣椒疫病的防治。