CN111172072A - 一种防治生姜茎基腐病的微生物菌剂及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于微生物菌剂制备技术领域，尤其为一种防治生姜茎基腐病的微生物菌剂及其制备方法与应用，其中，其菌剂包括：芽孢杆菌CC09菌株发酵液12‑30％，腐殖酸钾30‑40％，黄腐酸钾30‑40％，复合微生物菌吸附剂粉料5‑10％，羧甲基纤维素0.1‑0.3％，亚甲基双萘磺酸钠(NNO)0.1‑0.3％，其中芽孢杆菌CC09菌株发酵液中，有效活菌数≥10亿/mL。经试验表明，本发明可有效防治生姜茎基腐病并促进生姜生长，极大提高生姜的产量。
Description
技术领域
本发明涉及微生物菌剂制备技术领域，尤其涉及一种防治生姜茎基腐病的微生物菌剂及其制备方法与应用。
背景技术
生姜(Zingiber officinale Roscoe)是姜科、姜属的多年生草本植物，也是重要的药食两用经济类蔬菜作物，在亚洲、非洲、南美等地区都有栽培。我国是生姜主产国之一，主产区在山东、河南、四川、云南等省份，是种植区农业经济的支柱作物，并且具有很高的出口创汇价值。但因生姜茎基腐病等的连年发生，严重影响了生姜的产量和品质，造成巨大的经济损失。
引起生姜茎基腐的原因极其复杂，已报道的病原菌有细菌青枯菌(Ralstoniasolanacearum)、欧文氏菌(Erwinia spp.)和短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus)以及真菌群结腐霉菌(Pythium myriotylum)和尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。但各地报道不一，并且时有新病原菌被发现。其中，由尖孢镰刀菌引起的茎基腐病是影响生姜产量和品质的最严重病害之一。
针对土壤和病姜均可带菌的特点，目前应用于生姜茎基腐病防治的方法主要有：(1)选择健姜，与豆科作物、粮食作物玉米、小麦或百合科葱蒜轮作；(2)用氯化苦等熏蒸土壤；(3)用噁霉灵、可杀得等化学农药浸种、灌根和喷施处理；(4)芽孢杆菌(Bacillus spp.)和类芽孢杆菌属(Peanibacillus spp.)等生防菌剂的应用。鉴于轮作难度较大，化学农药存在残留和环境污染风险，目前，人们普遍认为生防菌剂是理想的、环境友好型生姜茎基腐病防治产品。然而，当前能够有效控制生姜茎基腐病的生防菌剂产品十分有限，且防病效果不稳定，增产结果不显著。因此，急需寻找一种高效防病的微生物菌剂，用于生姜的健康栽培和增产。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有生姜茎基腐病防治技术的缺点，提出一种防治生姜茎基腐病的微生物菌剂及其制备方法与应用。
为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：
一种防治生姜茎基腐病的微生物菌剂，包括以下重量份的原料：芽孢杆菌CC09菌株发酵液12-30％，腐殖酸钾30-40％，黄腐酸钾30-40％，复合微生物菌吸附剂粉料5-10％，羧甲基纤维素0.1-0.3％，亚甲基双萘磺酸钠(NNO)0.1-0.3％。
优选的，芽孢杆菌CC09菌株发酵液中，有效活菌数≥10亿/mL。
本发明还提出了一种防治生姜茎基腐病的微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、一级种子液的制备：将菌种CC09菌株接种于含50ml改良LB培养基的200ml三角瓶中，于37℃、160rpm摇床培养12小时；
S2、二级种子液的制备：取6ml一级种子液，接种于含600ml的改良LB培养基的1L三角瓶中，于37℃、160rpm摇床培养12小时；
S3、发酵培养：取二级种子液，按5％的接种量(3.5L)接种于含70L改良LB培养基的100L发酵罐中，于37℃和150rpm发酵48h，制得芽孢杆菌CC09菌株发酵液；
S4、混合：将步骤S3中制得的芽孢杆菌CC09菌株发酵液12-30％，腐殖酸钾30-40％，黄腐酸钾30-40％，复合微生物菌吸附剂粉料5-10％，羧甲基纤维素0.1-0.3％，亚甲基双萘磺酸钠(NNO)0.1-0.3％进行混匀处理，得到微生物菌剂。
根据本发明，一种微生物菌剂的应用，用于防治生姜茎基腐病，所述S4所得到的微生物菌剂于生姜播种期使用，每亩1kg，兑水200kg，混匀后充分喷施于已摆好的姜母及其周围土壤后覆土；生姜小培土期，每亩1-1.5kg，兑水200-300kg，喷施于生姜植株茎基部，可有效防治生姜茎基腐病并促进生姜生长。
本发明可有效防治生姜茎基腐病并促进生姜生长，极大提高生姜的产量。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。
本实施例提出了一种防治生姜茎基腐病的微生物菌剂，该微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、一级种子液的制备：将菌种CC09(Bacillus sp.CC09)菌株接种于含50ml改良LB培养基的200ml三角瓶中，于37℃、160rpm摇床培养12小时；
S2、二级种子液的制备：取6ml一级种子液，接种于含600ml的改良LB培养基的1L三角瓶中，于37℃、160rpm摇床培养12小时；
S3、发酵培养：取二级种子液，按5％的接种量(3.5L)接种于含70L改良LB培养基的100L发酵罐中，于37℃和150rpm发酵48h，制得芽孢杆菌CC09菌株发酵液，测得该发酵液中有效活菌数≥10亿/mL；
S4、混合：将步骤S3中制得的芽孢杆菌CC09菌株发酵液15％，腐殖酸钾40％，黄腐酸钾35％，北京中龙创科技有限公司生产的复合微生物菌吸附剂粉料(专利号：ZL 02 123534.1)9.7％，羧甲基纤维素0.2％，亚甲基双萘磺酸钠(NNO)0.1％进行混匀处理，得到微生物菌剂，此外，测得该微生物菌剂的有效活菌数≥1.5亿/克。
在安丘市官庄镇三官庙村以及寒亭区朱里街道前巡栈村使用了本发明所述的微生物菌剂，使用时期分别于生姜播种期和和小培土期。具体的，本发明所述的防治生姜茎基腐病的微生物菌剂在生姜播种期使用时，每亩1kg，兑水200kg，混匀后充分喷施于已摆好的姜母及其周围土壤后覆土；应用于生姜小培土期，每亩用量为1.5kg，兑水200kg，喷施于生姜植株茎基部。上述两个不同时期使用本发明微生物菌剂的实验组与未使用本发明所述的微生物菌剂的对照组相比，播种期使用本发明所述的微生物菌剂对生姜茎基腐病的防治效果高达72.25％，而小培土期的防治效果为68.86％(表一)。
表一 不同时期喷洒微生物菌剂对生姜茎基腐病的防治效果
另外，无论在播种期还是在小培土期使用本发明所述的微生物菌剂(实验组)，均能显著促进生姜生长(分枝数、茎秆重、株高)，提高产量(单株姜重和亩产)。其中，播种期使用本发明所述的微生物菌剂(实验组)的生姜亩产量是未使用本发明所述的微生物菌剂(对照组)的生姜亩产量的2.28倍；小培土期使用是未使用的1.18倍(表二)。
表二 不同时期喷洒微生物菌剂的生姜生长及产量
表一和表二试验结果说明，本发明微生物菌剂不仅对生姜茎基腐病有很好的防治效果，而且具有显著的促生增产作用。另外，与小培土期使用相比，本发明微生物菌剂在播种期使用的防病增产效果更为明显。
本发明方案所公开的技术手段不仅限于上述实施方式所公开的技术手段，还包括由以上技术特征任意组合所组成的技术方案。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。
Claims (7)
1.一种防治生姜茎基腐病的微生物菌剂，其特征在于，包括以下重量份的原料：芽孢杆菌CC09菌株发酵液12-30％，腐殖酸钾30-40％，黄腐酸钾30-40％，复合微生物菌吸附剂粉料5-10％，羧甲基纤维素0.1-0.3％，亚甲基双萘磺酸钠(NNO)0.1-0.3％。
2.根据权利要求1所述的一种防治生姜茎基腐病的微生物菌剂，其特征在于，芽孢杆菌CC09菌株发酵液中，有效活菌数≥10亿/mL。
3.一种防治生姜茎基腐病的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、一级种子液的制备：将菌种CC09菌株接种于含50ml改良LB培养基的200ml三角瓶中，于37℃、160rpm摇床培养12小时；
S2、二级种子液的制备：取6ml一级种子液，接种于含600ml的改良LB培养基的1L三角瓶中，于37℃、160rpm摇床培养12小时；
S3、发酵培养：取二级种子液，按5％的接种量(3.5L)接种于含70L改良LB培养基的100L发酵罐中，于37℃和150rpm发酵48h，制得芽孢杆菌CC09菌株发酵液；
S4、混合：将步骤S3中制得的芽孢杆菌CC09菌株发酵液12-30％，腐殖酸钾30-40％，黄腐酸钾30-40％，复合微生物菌吸附剂粉料5-10％，羧甲基纤维素0.1-0.3％，亚甲基双萘磺酸钠(NNO)0.1-0.3％进行混匀处理，得到微生物菌剂。
4.根据权利要求3所述的一种防治生姜茎基腐病的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述S3中，芽孢杆菌CC09菌株发酵液中，有效活菌数≥10亿/mL。
5.一种微生物菌剂的应用，用于防治生姜茎基腐病，该微生物菌剂施用于生姜播种期或小培土期。
6.根据权利要求5所述的一种微生物菌剂的应用，其特征在于，生姜播种期使用该微生物菌剂时，每亩1kg，兑水200kg，混匀后充分喷施于已摆好的姜母及其周围土壤后覆土。
7.根据权利要求5所述的一种微生物菌剂的应用，其特征在于，生姜小培土期使用该微生物菌剂时，每亩1-1.5kg，兑水200-300kg，喷施于生姜植株茎基部。
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