CN104920358B - 防治水稻稻瘟病的天然产物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种防治水稻稻瘟病的天然产物组合物，它由柠檬醛和甲基庚酮组成。本发明通过将柠檬醛和甲基庚酮进行复配混用，该组合对水稻稻瘟病的菌丝生长和孢子萌发的抑制都具有明显的增效作用，防治效果可达70%左右，防治效果显著，能有效降低农药的用量，不仅减小了劳动强度，节省了成本，解决滥施农药的问题。本发明简单易行，材料来源广泛，成本低廉，使用效果好。

Description

防治水稻稻瘟病的天然产物组合物

技术领域

本发明涉及农业科技领域，尤其是一种防治水稻稻瘟病的天然产物组合物。

背景技术

水稻是我国的主要粮食作物，约占全国粮食总产量的40%，稻瘟病是由稻瘟病菌[Magnaporthe grisea(Hebert)Barr]侵染引起的水稻重要世界性病害之一。目前，防治稻瘟病的有效措施主要是化学防治，但化学农药使用易产生一系列的问题，如：农药残留、环境污染、安全性、抗药性等。因此，寻找高效、安全和环保型的新型农药代替化学农药的使用是现今农药开发研究的热点，其中植物病害的生物防治因其具有药害低、不易产生抗性、生产原料广泛、使用安全放心、环境兼容性好、选择性强等优点而受到了较大的关注。从天然产物中寻求防治水稻稻瘟病的活性化合物已成为一个重要的研究课题，并以活性化合物为基础开发和研制出一种新型、安全、环保型的植物源农药对稻瘟病菌的防治、水稻的安全性具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的是：提供一种防治水稻稻瘟病的天然产物组合物，它高效的、安全，对环境友好，以克服现有技术的不足。

本发明是这样实现的：防治水稻稻瘟病的天然产物组合物，其特征在于：它由柠檬醛和甲基庚酮组成。

所述的柠檬醛和甲基庚酮的质量比为1:1。

为了进一步验证本发明的技术效果，将本发明的产品进行条件试验。

材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 供试病原菌

水稻稻瘟病病菌ZB15(Magnaporthe grisea)采自田间自然发病水稻植株上的病菌，经实验室分离、纯化、鉴定后保存备用。

供试药剂

供试药剂：柠檬醛、甲基庚酮（贵州大学作物保护研究所自制，含量均大于90%。）

1.2试验方法

1.2.1 菌丝生长速率抑制法

参照慕立义的研究方法，将供试活性化合物分别稀释成系列浓度梯度的母液，按一定比例加入到融化好的PDA培养基中，混合后倒入灭菌的培养皿中，制成系列浓度梯度的含柠檬醛培养基平板。供试的稻瘟病菌株，先在PDA培养基上，置于28℃下培养7-10 d，菌落长至培养皿边缘时，用直径为5 mm的打孔器在菌落边缘打取菌饼，然后将菌饼移到上述含药的培养基平板中央。以不加药的平板培养基为对照。每平板接种1块，每处理3次重复，28℃全黑暗培养。待对照菌丝长至培养皿直径的三分之二时，用“十”字交叉法测定各处理的菌落生长直径，每皿用十字交叉测量四次直径，计算菌丝生长速率抑制率及EC₅₀值。

1.2.2 孢子萌发抑制法

a.采用米糠培养基产孢的方法：称取20 g米糠加入到约800 mL水中，煮沸约10min，然后加入10 g蔗糖和10-15 g琼脂，琼脂融化后，定容1000 mL，再加热煮沸。将培养基分装在三角瓶中，灭菌后倒入直径90 mm的培养皿中，30-40 mL/皿，不加盖，使培养基表面水分风干(培养基表面有冷凝水会影响稻瘟病的生长)。取培养好的菌丝块，分多点接种到培养基平板上，置于28℃恒温培养箱中大约10 d，菌丝长满全皿进行产孢培养，将少许无菌水倒入培养皿中，用灭菌过的毛笔轻轻刷洗培养基表面，刷洗力度适中，太轻气生菌丝未被洗掉，产孢量少，刷的太重，平板表面的菌丝容易受伤，影响产孢量。然后置于365 nm黑光灯下12:12(L:D)、T: 28℃左右培养，48 h后，培养基表面即产生大量孢子，表现为一层青灰色的新鲜霉层，倒入少量无菌水，用毛笔轻轻刷洗霉层表面，过滤、镜检，调配成所需浓度的孢子悬浮液。

b.测定：将供试药剂配成系列浓度的稀释液，各取0.5 mL 药液至10 mL 的试管中，再加入4.5 mL 孢子悬浮液，混匀，配成含活性化合物系列浓度的孢子悬浮液，以不含药孢子悬浮液作空白对照，每处理 3 次重复，于28℃恒温黑暗培养20-24 h 后，摇匀，用滴管各吸取少量孢子悬浮液置于洁净的凹型玻片上，盖上盖玻片，在20 × 10 倍显微镜下观察孢子萌发情况，每个处理随机检查孢子 200 个左右，凡孢子芽管大于孢子的短半径时即算萌发，否则不算萌发，对照萌发率95%以上，计算孢子萌发抑制率及EC₅₀值。

共度系数(CTC)值计算

采用孙云沛法求出毒力指数、理论毒力指数、实际毒力指数及混剂的共毒系数CTC值，并据此作出综合评价，CTC>120表示增效作用，80<CTC≤120表示相加作用，CTC≤ 80表示拮抗作用。

共毒系数CTC值计算公式如下：

式中 Ax—药剂A在混剂中的百分含量；

Bx—药剂B在混剂中的百分含量。

结果与分析

根据农药生物测定技术中，两种成分混用的联合作用计算法，算出各种混合比例的共毒系数，活性化合物柠檬醛与甲基庚酮按不同比例组合对稻瘟病菌菌丝生长抑制毒力测定结果如表1所示，柠檬醛与甲基庚酮不同配比对稻瘟病菌丝生长的抑制作用存在着明显的差异。柠檬醛与甲基庚酮配比为10:1时，对菌丝生长的抑制表现为拮抗作用；配比为1:10、1:8、1:6、6:1、8:1时，对菌丝生长的抑制表现为相加作用；而配比为1:4、1:2、1:1、2:1、4:1时，对菌丝生长的抑制表现为增效作用。其中以配比为1:2的共毒系数最高，达到了178.09，增效作用最明显；而配比为1:1的共毒系数也较高，达到了169.37，增效作用明显，而且用量小，EC50值为45.41 μg/mL明显小于1:2时的EC50值（61.22 μg/mL）

活性化合物柠檬醛与甲基庚酮按不同比例组合对稻瘟病菌孢子萌发抑制毒力测定结果如表2所示，柠檬醛与甲基庚酮不同配比对稻瘟病孢子萌发的抑制作用存在着明显的差异。柠檬醛与甲基庚酮配比为1:10、1:8、1:6、4:1、6:1、8:1、10:1时，对孢子萌发的抑制表现为相加作用；而配比为1:4、1:2、1:1、2:1时，对孢子萌发的抑制表现为增效作用，其中以配比为1:1的共毒系数最高，达到了140.68，增效作用最明显，而且用量小，EC₅₀值为47.30μg/mL。

小结

本发明涉及一种用于防治水稻稻瘟病的天然产物组合，它由柠檬醛和甲基庚酮按1：1的质量比组成。这个组合在室内对稻瘟病菌菌丝生长和孢子萌发的EC₅₀值分别为45.41μg/mL和47.30 μg/mL，共毒系数CTC值分别达到了169.37和140.68，从此可看出此组合不仅用量少而且对菌丝生长和孢子萌发的抑制都具有增效作用。故可以此组合为基础，研制出一种新型的、天然的和专一防治水稻稻瘟病菌的天然产物农药制剂。由于采用了上述技术方案，与现有技术相比，本发明通过将柠檬醛和甲基庚酮进行复配混用，该组合对水稻稻瘟病的菌丝生长和孢子萌发的抑制都具有明显的增效作用，防治效果可达70%左右，防治效果显著，可用于天然产物农药开发、生产和应用，为开发和研制出一种新型农药提供一定基础，能有效降低农药的用量，不仅减小了劳动强度，节省了成本，解决滥施农药的问题。本发明简单易行，材料来源广泛，成本低廉，使用效果好。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明更具体的描述，但本发明的实施方案不限于这些实施例，实施例中所述的份数均以重量计。

本发明的实施例：称取97%柠檬醛原药10份和98%甲基庚酮原药10份，加入乳化剂农乳0202C 15份，OX-7513 15份，助溶剂15份，稳定剂0.5份，水补足，剪切1小时，即得20%柠檬醛·甲基庚酮微乳剂(ME)。

用以上所得的20% 柠檬醛·甲基庚酮ME防治水稻稻瘟病田间药效试验，试验效果汇总如下：

2014年8月在贵州黄平县旧州镇水稻试验田，该地区历年均有稻瘟病的发生，试验地水稻品种为凯香优1号，土壤肥力中上等，地势平整，灌溉条件良好，试验区的水肥管理和其他栽培条件基本一致。试验于水稻抽穗至灌浆期穗颈瘟发生时用20%柠檬醛·甲基庚酮ME800倍液喷雾，间隔7天后第二次施药，施药器械为3WBJ-16DZ多功能静电喷雾器。以6%春雷霉素可湿性粉剂(WP)800倍液为对照。

防治稻瘟病的效果见表3，20%柠檬醛·甲基庚酮ME800倍液在药后7天的防效为70.98%，药后14天有所上升，防效达到81.80%，与6%春雷霉素WP800倍液相比，防治效果相当于6%春雷霉素WP。

Claims (1)

1.一种防治水稻稻瘟病的天然产物组合物，其特征在于：它由柠檬醛和甲基庚酮组成；所述的柠檬醛和甲基庚酮的质量比为1:1。