CN108315269A - 一种尾菜促腐菌剂及其制备和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种尾菜促腐菌剂,由真菌、放线菌和细菌按CFU配比40~60﹕20~30﹕20~30混合得到,所述真菌为黑曲霉、毛头鬼伞、酿酒酵母、黄孢原毛平革菌按CFU比计1~2﹕2~4﹕1~2﹕3~6的混合物;所述放线菌为灰色链霉菌;所述细菌为枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌按CFU比1~2﹕1~2的混合物。还公开了该促腐菌剂的制备方法及其在尾菜处理中的应用,制备方法为将菌剂中的真菌、放线菌和细菌分别培养,取培养后的各菌种分别接种到各自的液体培养液中摇床培养,得到各菌种的一级培养菌种,分别接种至各自的液体培养液中摇床培养,将获得的菌液测定CFU后,按CFU进行配比混合即得到促腐菌剂。
Description
技术领域
本发明涉及促腐菌剂,具体涉及一种尾菜促腐菌剂及其制备和应用。
背景技术
近年来,蔬菜产业在促农增收中发挥了重要作用。但随着蔬菜产业规模的不断扩大,蔬菜废弃物即尾菜问题日益突出,主要是花椰菜、甘蓝、娃娃菜、大白菜等蔬菜的废弃根、茎、叶,含水量高,大量堆积在田埂、沟渠、道路,高温雨季极易腐烂变质,传播疾病。由于没有经济适用的加工工艺来处理利用蔬菜废弃物,使得大量的资源被白白浪费掉,且对环境造成非常严重的污染。蔬菜废弃物已成为污染农业生产及农村生活的一大公害。如何将蔬菜废弃物无害化处理和有效再利用,减少农村环境污染,已成为蔬菜生产中急需解决的关键问题。虽然市面上已有多种促腐菌剂产品出售,但主要适用于对秸秆、落叶、树枝等含水量较高废弃物的处理,且需要较高的处理或环境温度,因此不适用于含水量较高(通常都90%以上)的尾菜处理。
发明内容
本发明的目的是针对以上问题提供一种成本低、效果好的尾菜促腐菌剂及其制备和应用。
本发明实现其目的采用的技术方案为:
一种尾菜促腐菌剂,由真菌、放线菌和细菌按CFU配比40~60﹕20~30﹕20~30混合得到,所述真菌为黑曲霉、毛头鬼伞、酿酒酵母、黄孢原毛平革菌按CFU比计1~2﹕2~4﹕1~2﹕3~6的混合物;所述放线菌为灰色链霉菌;所述细菌为枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌按CFU比1~2﹕1~2的混合物。
一种上述的尾菜促腐菌剂的制备方法,将菌剂中的真菌、放线菌和细菌分别培养,取培养后的各菌种分别接种到各自的液体培养液中在适宜的温度下摇床培养,得到各菌种的一级培养菌种,将各菌种的一级培养菌种分别接种至各自的液体培养液中摇床培养,将获得的菌液测定CFU后,按CFU进行配比混合即得到促腐菌剂。
前述的尾菜促腐菌剂在尾菜处理中的应用。
所述应用为将所述的尾菜促腐菌剂应用在十字花科蔬菜的尾菜处理上。
所述的十字花科蔬菜为花椰菜、大白菜、甘蓝、青菜。
具体应用方法为将取上述混合菌剂与切碎后的尾菜按重量体积比1﹕400~600的比例混合,用稻壳或秆粉将混合物的含水量控制在70~80%左右,并加入待处理尾菜重量0.07~0.13%的尿素,常温下进行堆肥。
本发明的有益效果是:对十字花科蔬菜的尾菜促腐效果明显,可有效降解农田残留的尾菜,短时间之内即可将尾菜软化黑腐,避免传播植物病害,尾菜在田间软化黑腐后作为肥料还能提高土壤肥力。采用本发明的促腐菌剂进行尾菜促腐操作简单、应用广泛。
具体实施方式
实施例1制备本发明的尾菜促腐菌剂
本发明的尾菜促腐菌剂由真菌、放线菌和细菌组成,按每毫升菌落数(CFU)配比计真菌﹕放线菌﹕细菌为(40~60)﹕(20~30)﹕(20~30),其中,真菌为黑曲霉(Aspergillusniger)、毛头鬼伞(Coprinus comatus)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)的混合物,按CFU比计黑曲霉﹕毛头鬼伞﹕酿酒酵母﹕黄孢原毛平革菌为(1~2)﹕(2~4)﹕(1~2)﹕(3~6);放线菌为灰色链霉菌(Streptomyces griseus);细菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum subsp.plantarum)的混合物,按CFU比计枯草芽孢杆菌﹕植物乳杆菌为(1~2)﹕(1~2)。
一、真菌活化培养
1)使用5°Bé麦芽汁琼脂(5°Bé麦芽汁1.0L,琼脂15.0g,自然pH),28-30℃对保存的黑曲霉菌株进行划线分离培养;
2)使用综合PDA琼脂(马铃薯提取液1.0L,葡萄糖20.0g,KH2PO4 3.0g,MgSO4·7H2O1.5g,维生素B1 50mg,琼脂15.0g,pH6.0),25-27℃对保存的毛头鬼伞菌株进行划线分离培养;
3)使用5°Bé麦芽汁琼脂(5°Bé麦芽汁1.0L,琼脂15.0g,自然pH),28-30℃对保存的酿酒酵母菌株进行划线分离培养;
4)培养使用综合PDA琼脂(马铃薯提取液1.0L,葡萄糖20.0g,KH2PO4 3.0g,MgSO4·7H2O 1.5g,维生素B1微量,琼脂15.0g,pH6.0),28-32℃对保存的黄孢原毛平革菌菌株进行划线分离培养;
上述真菌活化培养48h。
二、放线菌活化培养
使用M0363培养基(酵母膏20.0g,MgSO4·7H2O 0.5g,K2HPO4 0.5g,葡萄糖10.0g,琼脂15.0g,蒸馏水1.0L,pH7.8),30℃对保存的灰色链霉菌菌株进行划线分离培养24h。
三、细菌活化培养
1)使用营养肉汁琼脂(蛋白胨5.0g,牛肉浸取物3.0g,NaCl 5.0g,琼脂15.0g,蒸馏水1.0L,pH7.0),37℃对保存的枯草芽孢杆菌菌株划线分离培养;
2)使用MRS培养基(酪蛋白胨10.0g,牛肉膏10.0g,酵母粉5.0g,葡萄糖5.0g,乙酸钠5.0g,柠檬酸二铵2.0g,Tween 801.0g,K2HPO4 2.0g,MgSO4 ·7H2O 0.2g,MnSO4·H2O0.05g,CaCO3 20.0g,琼脂15.0g,蒸馏水1.0L,pH6.8)37℃对保存的植物乳杆菌菌株进行划线分离培养。
四、制备本发明促腐菌剂
取分离培养后得到的各单克隆菌种分别接种到50ml各自相应的液体培养液中。
真菌液体培养基:葡萄糖10g、蛋白胨5g、KH2PO4 1g、MnSO4·7H2O 0.5g、三千分之一的孟加拉红100ml,蒸馏水定容至1000ml。灭菌后使用。
细菌液体培养基:胰蛋白胨17g,大豆胨3g,酵母粉6g,氯化钠5g,磷酸氢二钾2.5g,葡萄糖2.5g,蒸馏水100mL,pH 7.2-7.5。蒸馏水定容至1000ml。灭菌后使用。
放线菌液体培养基:酵母膏20.0g,MgSO4·7H2O 0.5g,K2HPO4 0.5g,葡萄糖10.0g,蒸馏水定容至1000ml。
真菌28℃摇床培养96h,放线菌30℃摇床培养48h,细菌于37℃摇床培养48h,转速真菌为150rpm,放线菌和细菌均为220rpm,由此得到各菌种的一级培养菌种。各取5ml一级培养菌种分别接种至200ml各自的液体培养液中,真菌28℃摇床培养96h,放线菌30℃摇床培养96h,细菌于37℃摇床培养96h,转速真菌为150rpm,放线菌和细菌均为220rpm。将获得的菌液测定CFU后,按CFU配比计真菌﹕放线菌﹕细菌为(40~60)﹕(20~30)﹕(20~30)混合,即可得到尾菜促腐菌剂。
按照上述方法,制备了不同的尾菜促腐菌剂样品,如表1所示:
表1本发明促腐菌剂样品
实施例2本发明促腐菌剂的应用
取实施例1制备的促腐菌剂对花椰菜、甘蓝、大白菜、青菜的尾菜进行处理。
一、采用实施例1制备的样品1处理花椰菜尾菜
样品1与切碎后的花椰菜按重量体积比1:500的比例混合,用稻壳将混合物的含水量控制在70-80%左右,并加入花椰菜重量0.1%的尿素,常温下进行堆肥。处理10天后,绝大部分尾菜即会软化黑腐,腐解结束后菌剂中菌体总数/尾菜质量比为1.9×107个菌/克尾菜。
二、采用实施例1制备的样品2处理大白菜尾菜
样品2与切碎后的大白菜按重量体积比1:400的比例混合,用稻壳将混合物的含水量控制在70-80%左右,并加入大白菜重量0.07%的尿素,常温下进行堆肥。处理10天后,绝大部分尾菜即会软化黑腐,腐解结束后菌剂中菌体总数/尾菜质量比为3.7×107个菌/克尾菜。
三、采用实施例1制备的样品3处理青菜尾菜
样品3与切碎后的青菜按重量体积比1:600的比例混合,用稻壳将混合物的含水量控制在70-80%左右,并加入青菜重量0.13%的尿素,常温下进行堆肥。处理10天后,绝大部分尾菜即会软化黑腐,腐解结束后菌剂中菌体总数/尾菜质量比为4.1×107个菌/克尾菜。
四、采用实施例1制备的样品4处理甘蓝尾菜
样品4与切碎后的甘蓝按重量体积比1:550的比例混合,用稻壳将混合物的含水量控制在70-80%左右,并加入甘蓝重量0.1%的尿素,常温下进行堆肥。处理10天后,绝大部分尾菜即会软化黑腐,腐解结束后菌剂中菌体总数/尾菜质量比为2.7×107个菌/克尾菜。
Claims (6)
1.一种尾菜促腐菌剂,其特征在于:由真菌、放线菌和细菌按CFU配比40~60﹕20~30﹕20~30混合得到,所述真菌为黑曲霉、毛头鬼伞、酿酒酵母、黄孢原毛平革菌按CFU比计1~2﹕2~4﹕1~2﹕3~6的混合物;所述放线菌为灰色链霉菌;所述细菌为枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌按CFU比1~2﹕1~2的混合物。
2.一种权利要求1所述的尾菜促腐菌剂的制备方法,其特征在于:将菌剂中的真菌、放线菌和细菌分别培养,取培养后的各菌种分别接种到各自的液体培养液中在适宜的温度下摇床培养,得到各菌种的一级培养菌种,将各菌种的一级培养菌种分别接种至各自的液体培养液中摇床培养,将获得的菌液测定CFU后,按CFU进行配比混合即得到促腐菌剂。
3.权利要求1所述的尾菜促腐菌剂在尾菜处理中的应用。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于:将所述的尾菜促腐菌剂应用在十字花科蔬菜的尾菜处理上。
5.如权利要求4所述的应用,其特征在于:所述的十字花科蔬菜为花椰菜、大白菜、甘蓝、青菜。
6.如权利要求3至5任一项所述的应用,其特征在于:具体应用方法为将取上述混合菌剂与切碎后的尾菜按重量体积比1﹕400~600的比例混合,用稻壳或秆粉将混合物的含水量控制在70~80%左右,并加入待处理尾菜重量0.07~0.13%的尿素,常温下进行堆肥。
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