CN108314716B - 拟南芥AtXIW1基因在改善植物抗逆上的应用 - Google Patents

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    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
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    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
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    • C12N15/8261Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8271Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
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Abstract

本发明公开一种拟南芥AtXIW1基因在改善植物抗逆上的应用,涉及植物基因工程技术领域。本发明以拟南芥为研究材料,通过免疫共沉淀‑质谱分析的方法筛选到一个与核质转运蛋白受体互作的XIW1蛋白。对XIW1的研究表明,该基因的转录水平受干旱胁迫和外源ABA的诱导。XIW1蛋白在细胞核肌细胞质中均有表达,且其表达水平受外源ABA诱导发生改变。这表明该基因参与到ABA信号转导通路中,过表达或敲除XIW1基因能够影响植物对ABA及干旱逆境的响应。

Description

拟南芥AtXIW1基因在改善植物抗逆上的应用
技术领域
本发明涉及植物基因工程技术领域,具体涉及一种拟南芥AtXIW1基因在改善植物抗逆上的应用。
背景技术
植物在生长过程中会遭受各种各样的逆境胁迫压力,诸如干旱、盐碱、高温、低温等不利环境因素。在此情况下,植物表现为细胞失水、蛋白变性,酶活性丧失、细胞膜系统受损,从而导致其代谢过程的紊乱,直至造成植物的死亡。胁迫程度的严重与否关系到植物生长量、作物产量以及整个代谢过程的强弱。植物在漫长的进化历史过程中,形成了各种保护机制以应对不利环境影响。在分子水平上,通过对基因表达的调控来调节细胞代谢水平,逆境胁迫基因的蛋白产物积累以应对不良条件,从而提高了植物的抗逆能力,降低或修复不利条件带来的伤害;在生理生化水平上,植物通过形成胁迫应答蛋白、增加渗透调节物质如脯氨酸、增加活性氧清除酶系统的作用强度等提高其对逆境的抵抗能力;在细胞水平上,则通过改变细胞周期、细胞结构的适应性变化从而保证植物的基本生命活动(Hirayama etal.,2010)。
大量蛋白包括转录因子、蛋白激酶和各种逆境相关蛋白会参与到植物应对非生物胁迫过程(Zhu,2002;Shinozaki and Yamaguchi-Shinozaki,2007;Hu and Xiong,2014)。其中,蛋白质的核质转运(Nucleocytoplasmic trafficking)是一种很重要的响应机制。比如,一些转录因子必须进入细胞核才具有其调节功能;同样,核糖体亚基和部分蛋白需要进入细胞质才能发挥其作用。核转运受体(Nuclear transport receptor,NTR)介导的核质转运不仅是真核细胞基因复制、转录和翻译的必需环节,也是联系细胞内信号转递的重要环节(Xu and Massagué,2004;Xu and Meier,2008;
Figure BDA0001599403600000011
and Kehlenbach,2010)。近年来,越来越多的证据表明,调节蛋白质核质转运参与了真核生物的信号反应过程,包括应对激素反应、生物和非生物胁迫、以及生物节律等(Meier and Somers,2011;吕贝贝等,2012;Tamura and Hara-Nishimura,2014)。例如,拟南芥和水稻中BZR1(BrassinazoleResistant 1)的核质转运对油菜素内酯(BR)的响应(Bai et al.,2007;Ryu et al.,2007)。当BR不存在时,磷酸化的BZR1在胞质中累积;而外施BR时,去磷酸化的BZR1通过核转运受体进入细胞核,起到转录抑制的作用。这样的一种机制可使植物在不需要合成BZR1的前提下,快速响应环境和发育信号(Ryu et al.,2007)。
发明内容
为了克服现有技术的缺点与不足,本发明的目的在于提供一种拟南芥AtXIW1基因在改善植物抗逆上的应用。
本发明的目的通过下述技术方案实现:
本发明提供一种拟南芥AtXIW1基因在改善植物抗逆上的应用。
进一步的,本发明提供一种拟南芥AtXIW1基因在植物育种中的应用。
更进一步的,本发明提供一种拟南芥AtXIW1基因在培育转基因植物中的应用。
所述的植物包括但不限于拟南芥、水稻、小麦、玉米、高粱、谷子、甘蔗、棉花、番茄、苜蓿和象草;
所述的抗逆包括但不限于抗旱。
所述的拟南芥AtXIW1基因,其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。
所述的拟南芥AtXIW1基因,其序列是下列核苷酸序列之一:
1)序列表中SEQ ID NO:2所示的DNA序列;
2)与序列表中SEQ ID NO:2编码蛋白质相同的蛋白质的DNA序列;
含有拟南芥AtXIW1基因的表达载体、转基因细胞系及重组菌也属于本发明的保护范围。
所述的含有拟南芥AtXIW1基因的表达载体可用现有的植物表达载体构建;所述植物表达载体为pEarleyGate 302或pEarleyGate101。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果:
本发明以拟南芥为研究材料,通过免疫共沉淀-质谱分析的方法筛选到一个与核质转运蛋白受体互作的XIW1蛋白。对XIW1的研究表明,该基因的转录水平受干旱胁迫和外源ABA的诱导。XIW1蛋白在细胞核肌细胞质中均有表达,且其表达水平受外源ABA诱导发生改变。这表明该基因参与到ABA信号转导通路中,过表达或敲除XIW1基因能够影响植物对ABA及干旱逆境的响应。
附图说明
图1是PCR扩增full length genomic琼脂糖凝胶电泳图。
图2是PCR扩增full length CDS琼脂糖凝胶电泳图。
图3是实时荧光定量PCR扩增AtXIW1基因表达量的统计图;其中,Col-0:野生型;xiw1-1:T-DNA插入突变体;COM2-3:互补株系2-3;OE6-4:过量表达株系6-4。
图4是干旱处理复水后表型图;其中,Col-0:野生型;xiw1-1:T-DNA插入突变体;COM2-3:互补株系2-3;OE6-4:过量表达株系6-4。
图5是干旱与外源ABA处理Col-0后基因的XIW1表达情况。
图6是在含有ABA的培养基平板上表型图;其中,Col-0:野生型;xiw1-1:T-DNA插入突变体;COM2-3:互补株系2-3;OE6-4:过量表达株系6-4。
具体实施方式
下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述,但本发明的实施方式不限于此。
下面结合具体实例进一步解释本发明,实施例中所用方法如无特别说明均为常规方法。所用引物合成及测序工作由生工(上海)生物技术有限公司完成。
野生型拟南芥Col-0;拟南芥突变体xiw1-1(T-DNA插入突变体,SALK_075873)均购自Arabidopsis Biological Resource Center。
实施例1AtXIW1目的基因的获得
根据TAIR(http://www.arabidopsis.org/)网站所提供的关于该基因fulllength genomic及full length CDS序列分别设计引物,扩增全长基因组序列及其蛋白编码序列,引物序列如下:
扩增全长基因组序列引物:
AtXIW1-DNA-F:5′-CACCGTAATCGAGTGGGTGATTCTGACATCTG-3′(SEQ ID NO:4);
AtXIW1-DNA-R:5′-TTTAGCTTCTGCGGCTTTCTCACT-3′(SEQ ID NO:5)
扩增蛋白编码序列:
AtXIW1-CDS-F:5′-CACCATGGGAGCTCCGTTAGTGTGC-3′(SEQ ID NO:6)
AtXIW1-CDS-R:5′-TTTAGCTTCTGCGGCTTTCTCACT-3′(SEQ ID NO:7)
以拟南芥Col-0幼苗gDNA(genomic DNA,基因组DNA)为模板,在引物AtXIW1-DNA-F和AtXIW1-DNA-R的引导下,用常规方法扩增AtXIW1full length genomic基因。反应结束后,对PCR扩增产物进行1%的琼脂糖凝胶电泳,回收并纯化3500bp左右的DNA片段(图1),将该片段克隆到pENTR-D-TOPO载体(购自Invitrogen公司)上,获得pENTR-D-TOPO-AtXIW1-DNA载体,送生工(上海)生物技术有限公司测序,测序结果表明,该DNA片段的序列如SEQ IDNO:1所示,使用Gateway技术将该片段重组到pEarleyGate 302载体(购自Invitrogen公司)上,测序结果表明XIW1基因重组成功;获得pEarleyGate 302-AtXIW1-DNA-FLAG载体。
以拟南芥Col-0幼苗cDNA为模板,在引物AtXIW1-CDS-F和AtXIW1-CDS-R的引导下,用常规方法扩增AtXIW1full length CDS序列。反应结束后,对PCR扩增产物进行1%的琼脂糖凝胶电泳,回收并纯化1000bp左右的DNA片段(图2),将该片段克隆到pENTR-D-TOPO载体(购自Invitrogen公司)上,获得pENTR-D-TOPO-AtXIW1-CDS载体,送生工(上海)生物技术有限公司测序,测序结果表明,该DNA片段的序列如SEQ ID NO:2所示,使用Gateway技术将该片段重组到pEarleyGate101载体(购自Invitrogen公司)上,测序结果表明AtXIW1CDS序列重组成功;获得pEarleyGate101-AtXIW1-CDS-YFP载体。
实施例2遗传转化鉴定目的基因的功能
将AtXIW1full length genomic基因克隆入植物互补载体pEarleyGate 302(购自Invitrogen公司),获得pEarleyGate 302-AtXIW1-DNA-FLAG载体;将AtXIW1 full lengthCDS基因克隆入植物过量表达载体pEarleyGate101(购自Invitrogen公司),获得pEarleyGate101-AtXIW1-CDS-YFP载体。然后利用农杆菌介导的浸花法转化对应的T-DNA插入突变体xiw1-1或Col-0,配制含有转化辅助剂silwet-77(购自Biotopped公司,CAS.NO:27306-78-1,使用浓度为200μL/L)和高浓度蔗糖(50g/L)的1/2MS培养基溶液,将农杆菌稀释至OD600约为1.0,待其花序大量产生时进行浸染,3~4周后对转化植株收种子。其后在含有对应抗生素的平板上对种子进行筛选,能够健康生长的幼苗为转基因植株T1代。T1代单株收种,在含有抗生素的平板上对种子进行筛选,对出现3:1分离的,保留下来为T2代。T2代单株收种获得T3代,然后取100粒以上种子发芽后再利用抗生素进行筛选,若没有死亡则表明种子已经纯合。其中,互补载体转化突变体xiw1-1得到的纯合株系,记为互补株系2-3,简称COM2-3;过量表达载体转化Col-0得到的纯合株系,记为过量表达株系6-4,简称OE6-4。
对已经纯合的转基因植株幼苗COM2-3、OE6-4和突变体xiw1-1、野生型Col-0提取总RNA,检测总RNA浓度和完整度后再合成cDNA第一链,以拟南芥Actin2作为内参基因,加入等量的cDNA模板,在实时荧光定量PCR扩增Actin2和AtXIW1。结果表明:互补转基因植株表达量接近野生型表达量,过表达转基因植株相较野生型表达提高19倍(图3)。所用QRT-PCR引物序列如下:
ACTIN2-qRT-F:5′-GTGCTGGATTCTGGTGATGGT-3′(SEQ ID NO:8);
ACTIN2-qRT-R:5′-GTCAAGACGGAGGATGGCAT-3′(SEQ ID NO:9);
AtXIW1-qRT-F:5′-GGGACTTTTGAAGGACATAAGGG-3′(SEQ ID NO:10);
AtXIW1-qRT-R:5′-GCAATTCATCTCCTGTCAATGCA-3′(SEQ ID NO:11);
PCR扩增条件为:95℃、30sec;95℃、5sec,60℃、30sec,40个循环;60~95℃分析溶解曲线。
对获得的转基因植株进行干旱抗性分析。拟南芥种子消毒后点1/2MS培养基平板,置于4℃冰箱春化3天,之后放置于人工气候培养箱培养。培养温度为22℃,光照周期为14h/10h光暗交替,至一周后移苗入土。对土培的两周大小的拟南芥幼苗进行失水处理,大约两周后复水处理。结果如图4显示,相对于野生型植株,缺失突变体全部死亡,互补植株表现同野生型差不多,过表达植株全部存活。表明该基因在拟南芥应对干旱胁迫发挥重要功能。
对获得的转基因植株进行ABA(脱落酸)抗性分析。将Col-0、xiw1-1、COM2-3、OE6-4消毒后点1/2MS培养基平板及含0.75μM ABA的1/2MS培养基平板,置于4℃冰箱春化1天,之后放置于人工气候培养箱培养。培养温度为22℃,光照周期为14h/10h光暗交替,七天后拍照。结果如图6所示,正常1/2MS培养基平板各基因型植株萌发无明显差异(图6A),而在含0.75μM ABA的1/2MS培养基平板上(图6B),xiw1-1的萌发率要明显高于Col-0、COM2-3及OE6-4,表明突变体对ABA不敏感,互补株系COM2-3恢复了对ABA的敏感性,过表达株系OE6-4也显示了对ABA的较高敏感性。收集1/2MS培养基平板上生长10天的Col-0幼苗,对其进行脱水4h干旱和外源喷施50μM ABA的处理,荧光定量PCR检测材料中XIW1基因的表达情况,如图5所示,经过干旱处理和ABA处理后,XIW1基因表达水平上调,说明XIW1的转录表达受干旱胁迫和外源ABA诱导。
上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
序列表
<110> 华南农业大学
<120> 拟南芥AtXIW1基因在改善植物抗逆上的应用
<160> 11
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 3483
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> AtXIW1基因的全长基因组序列
<400> 1
gtaatcgagt gggtgattct gacatctgtg atcttgacgc tttaacactc tgtctgttct 60
tttcgtataa gaaagtgaca tatatataga gaggaacaat tcatctaaat taaataattt 120
attattgaaa attttaactt aatatagttt ttttgtataa tgttgtttcc tttagtcttc 180
attttttctt aagttatttc cattttaaaa aacataccaa tatgttatat tctttgctta 240
aattgcttta acctgtatct agaaaatgta atcttccata ttgttaattt cataaataaa 300
ataaattttt ttgcaagtta ttggaaaacg aagttaaaaa ttaatgctgc accaagtttg 360
tgaaatttta aaattacttg tagttggagt gggtgtagat gtttatgtgt agaaataggc 420
atgcacacac aatttaatat agtcctagtt acttatacaa aaaattcact gctgacgtga 480
tcagtaatgc actcatatat gcatatatca ctccacgtca atggcacttg cccgtgcaaa 540
tgcctttatt gtgccagaat cttcgaccgg tcaaattgcg tgtgtgtgta tatatcgaaa 600
tatatgttat caaaagagtt tgaactttga acccatatct aatacctgag taaagtttta 660
gcattctatt caaagataac atgtagtaca tactaaacaa actatatgta tcggttgtta 720
tcaggaataa taagaattgt ataatgcaat atataattaa gtggtactta tgattaatac 780
atacacatgg atggtagatc gggatttgaa aaaccaatta aaatctagct ttgaaaagga 840
ctcgagattc taaacgccgt accaagaaag ttcagattat tatttcatga tgaatcattg 900
agtcaaacac ttaagcatca tatttttaat ttcatagttt atacgttatc cacatatata 960
atattaattc cgtcgacgac agtatttata tcagaattag gacaaactac atgtatatat 1020
ttagtcaatc ttgaaattta aaaaaatgcc tttgctaaga ataaaaatta tggttaggtg 1080
aagttctcac gtaaaactat tcaatcctca cgcgattgag gagtgactga ccaaagttta 1140
tttctatagg ggcaatttaa taactattgt aaactttcaa cgtaaaaatt aattactttg 1200
aagttatggg gcaatatcat caatagtaat aaatataagc ccttactcgt aaaatacaaa 1260
aggtttattt gttttctgaa ttgagagcgt gtaactacta ccatcgtcgt ctccgcgagt 1320
tcttctctgc gtttaagcca tagataacaa accaaactaa aaaaaaaaag tttctccttt 1380
tatcattcct tctcttccct tgtataggtg tgatcctctt caaggggatt tctctggcgg 1440
gtcatacatt cgcaccgatc aaagtcggat tggtctttct taacgcaatc ttgacccgat 1500
tcaaaaaatt tctggtatcc tttttaagaa atgaaattaa ttgattcctt gtcttccaaa 1560
cgagtaaatc gactaattga ttagattttg ttcattaggg tttgttagtg aatagataag 1620
aagataaatg ggagctccgt tagtgtgcca cgggcattct cgtcccgtcg tcgatgtggc 1680
ttatagtccg gtgactccag atgggttctt tctcattagc gccagcaaag gtatgatctt 1740
cgatcgattt gtatttgact atctatgatc tttacttgga actgtgccta ttttggatta 1800
tgatttgcat agcgaatgtg ctttgacgaa tttgattttg ctgcctttta ttatatatcg 1860
tctgaagttt gatttgtggc tgatctaatg gagaaattag gatgataagt tgcatacatt 1920
gttgaactct agctgaggtt tctttgactt ttgatatttc agattcgaat ccgatgttga 1980
ggaatggaga gactggtgac tggattggga cttttgaagg acataaggga gcagtttgga 2040
gttgcagcct tgataaaaat gctattcgtg ctgcctcagc ttctgctgat ttcactgcgt 2100
atgttcttct tctttcttgt tgcgttttca agtcttttac tttaccattt agtcttgcaa 2160
tttcagtatc ctccggtgat gggttgtttg cttaaagtta taagttatgg ggaaactatg 2220
ttcctagaga aaaatggtta agtgagaata gattaatggg atttaacact atttctttgt 2280
tttcatgaca catttcagga aaatatggaa tgcattgaca ggagatgaat tgcactcctt 2340
tgaacacaag cacattgttc gtgcatgtgc cttttctgag gtaaactgta gtttcttccc 2400
aagcaaagag tgatttgatc ctgttgccaa gttttctggt ttaaggatat aatggtggga 2460
ttcactaaga ttacttgtag catttgaggg tctataatcg ttggtgtcat ttgtgttact 2520
attgtggtct taatgcataa ctatttatat tctaggacac tcaccgttta ctcactggtg 2580
gaatggagaa aatacttcgg atattcgatt tgaatcggcc agacgcacct ccaaaagaag 2640
tcgggaattc ccctggttca attagaactg tcgaatggct tcatagtgat aatacaatct 2700
taagctcttg cacagatacc ggtgacatta ggtatgccac cacgtcgttc cttgggttta 2760
gactcagtcc tttagtattc ctggtttcat tgttcttttg tgtatgtcct ctgtaggtta 2820
tgggacataa gaagtgacaa gattgttcat acattagaaa caaagtcccc agttactagt 2880
gctgaagtaa gtcaggatgg gcgatacatc actactgctg atggatctag tgttaagttt 2940
tgggacgcta aaaagtaagt taaaaatata gaaatgcatc ctcagttaca gttttatcgt 3000
ttttctttga tggttgagct ttttctcctg ctctcctagt tttggattgc tgaagagcta 3060
tgacatgcct tgcaatgttg aatcggcatc gttggaaccg aaacacggta acactttcat 3120
tgctggagga gaagatatgt gggtgcacag gtttgatttc cagactggag aagagattgg 3180
taagtttctt ttaaaaaaga atgaagtttt cattttagga acctgtgtgt atcctttaaa 3240
gccaatgtgg tgaatgtagg gtgtaacaag ggtcatcacg ggccagtgca ctgcgtgagg 3300
tatgcgccag gaggggagtc atacacctca ggctcagaag acggaacggt cagaatatgg 3360
gtggtgggtt cggtaaacca tcctgaggag agcaatctaa gcggccacgt gaagcttgtg 3420
gcagaggagg ttgtgcgtaa agctgaaagt ctccgtatca gtgagaaagc cgcagaagct 3480
aaa 3483
<210> 2
<211> 1002
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> AtXIW1基因的编码(CDS)序列
<400> 2
atgggagctc cgttagtgtg ccacgggcat tctcgtcccg tcgtcgatgt ggcttatagt 60
ccggtgactc cagatgggtt ctttctcatt agcgccagca aagattcgaa tccgatgttg 120
aggaatggag agactggtga ctggattggg acttttgaag gacataaggg agcagtttgg 180
agttgcagcc ttgataaaaa tgctattcgt gctgcctcag cttctgctga tttcactgcg 240
aaaatatgga atgcattgac aggagatgaa ttgcactcct ttgaacacaa gcacattgtt 300
cgtgcatgtg ccttttctga ggacactcac cgtttactca ctggtggaat ggagaaaata 360
cttcggatat tcgatttgaa tcggccagac gcacctccaa aagaagtcgg gaattcccct 420
ggttcaatta gaactgtcga atggcttcat agtgataata caatcttaag ctcttgcaca 480
gataccggtg acattaggtt atgggacata agaagtgaca agattgttca tacattagaa 540
acaaagtccc cagttactag tgctgaagta agtcaggatg ggcgatacat cactactgct 600
gatggatcta gtgttaagtt ttgggacgct aaaaattttg gattgctgaa gagctatgac 660
atgccttgca atgttgaatc ggcatcgttg gaaccgaaac acggtaacac tttcattgct 720
ggaggagaag atatgtgggt gcacaggttt gatttccaga ctggagaaga gattgggtgt 780
aacaagggtc atcacgggcc agtgcactgc gtgaggtatg cgccaggagg ggagtcatac 840
acctcaggct cagaagacgg aacggtcaga atatgggtgg tgggttcggt aaaccatcct 900
gaggagagca atctaagcgg ccacgtgaag cttgtggcag aggaggttgt gcgtaaagct 960
gaaagtctcc gtatcagtga gaaagccgca gaagctaaat ga 1002
<210> 3
<211> 333
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> AtXIW1的蛋白质氨基酸序列
<400> 3
Met Gly Ala Pro Leu Val Cys His Gly His Ser Arg Pro Val Val Asp
1 5 10 15
Val Ala Tyr Ser Pro Val Thr Pro Asp Gly Phe Phe Leu Ile Ser Ala
20 25 30
Ser Lys Asp Ser Asn Pro Met Leu Arg Asn Gly Glu Thr Gly Asp Trp
35 40 45
Ile Gly Thr Phe Glu Gly His Lys Gly Ala Val Trp Ser Cys Ser Leu
50 55 60
Asp Lys Asn Ala Ile Arg Ala Ala Ser Ala Ser Ala Asp Phe Thr Ala
65 70 75 80
Lys Ile Trp Asn Ala Leu Thr Gly Asp Glu Leu His Ser Phe Glu His
85 90 95
Lys His Ile Val Arg Ala Cys Ala Phe Ser Glu Asp Thr His Arg Leu
100 105 110
Leu Thr Gly Gly Met Glu Lys Ile Leu Arg Ile Phe Asp Leu Asn Arg
115 120 125
Pro Asp Ala Pro Pro Lys Glu Val Gly Asn Ser Pro Gly Ser Ile Arg
130 135 140
Thr Val Glu Trp Leu His Ser Asp Asn Thr Ile Leu Ser Ser Cys Thr
145 150 155 160
Asp Thr Gly Asp Ile Arg Leu Trp Asp Ile Arg Ser Asp Lys Ile Val
165 170 175
His Thr Leu Glu Thr Lys Ser Pro Val Thr Ser Ala Glu Val Ser Gln
180 185 190
Asp Gly Arg Tyr Ile Thr Thr Ala Asp Gly Ser Ser Val Lys Phe Trp
195 200 205
Asp Ala Lys Asn Phe Gly Leu Leu Lys Ser Tyr Asp Met Pro Cys Asn
210 215 220
Val Glu Ser Ala Ser Leu Glu Pro Lys His Gly Asn Thr Phe Ile Ala
225 230 235 240
Gly Gly Glu Asp Met Trp Val His Arg Phe Asp Phe Gln Thr Gly Glu
245 250 255
Glu Ile Gly Cys Asn Lys Gly His His Gly Pro Val His Cys Val Arg
260 265 270
Tyr Ala Pro Gly Gly Glu Ser Tyr Thr Ser Gly Ser Glu Asp Gly Thr
275 280 285
Val Arg Ile Trp Val Val Gly Ser Val Asn His Pro Glu Glu Ser Asn
290 295 300
Leu Ser Gly His Val Lys Leu Val Ala Glu Glu Val Val Arg Lys Ala
305 310 315 320
Glu Ser Leu Arg Ile Ser Glu Lys Ala Ala Glu Ala Lys
325 330
<210> 4
<211> 32
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> AtXIW1-DNA-F
<400> 4
caccgtaatc gagtgggtga ttctgacatc tg 32
<210> 5
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> AtXIW1-DNA-R
<400> 5
tttagcttct gcggctttct cact 24
<210> 6
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> AtXIW1-CDS-F
<400> 6
caccatggga gctccgttag tgtgc 25
<210> 7
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> AtXIW1-CDS-R
<400> 7
tttagcttct gcggctttct cact 24
<210> 8
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> ACTIN2-qRT-F
<400> 8
gtgctggatt ctggtgatgg t 21
<210> 9
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> ACTIN2-qRT-R
<400> 9
gtcaagacgg aggatggcat 20
<210> 10
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> AtXIW1-qRT-F
<400> 10
gggacttttg aaggacataa ggg 23
<210> 11
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> AtXIW1-qRT-R
<400> 11
gcaattcatc tcctgtcaat gca 23

Claims (5)

1.一种拟南芥AtXIW1基因在改善植物抗旱上的应用,其特征在于:
所述的拟南芥AtXIW1基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:
所述的拟南芥AtXIW1基因在植物育种中的应用。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:
所述的拟南芥AtXIW1基因在培育转基因植物中的应用。
4.根据权利要求2或3所述的应用,其特征在于:
所述的植物包括拟南芥、水稻、小麦、玉米、高粱、谷子、甘蔗、棉花、番茄、苜蓿和象草。
5.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:
所述的拟南芥AtXIW1基因,其序列是下列核苷酸序列之一:
1)序列表中SEQ ID NO:2所示的DNA序列;
2)与序列表中SEQ ID NO:2编码蛋白质相同的蛋白质的DNA序列。
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拟南芥WD40蛋白;杨红玉等;《植物生理学通讯》;20081031;第44卷(第5期);第1025-1033页 *
植物色氨酸-天冬氨酸重复序列蛋白响应逆境胁迫的调控作用;吴艳玲等;《植物生理学报》;20131120;第49卷(第11期);第1160-1167页 *
水稻ABA生物合成基因OsNCED3响应干旱胁迫;徐学中等;《作物学报》;20171027;第44卷(第1期);第24-31页 *
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