CN108295029B - 一种注射用多功能复合型水凝胶及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种注射用多功能复合型水凝胶及其制备方法，属于生物医药领域。本发明提供的这种注射用多功能复合型水凝胶是由胶原(Col)、透明质酸(HA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)以及聚乳酸‑羟基乙酸共聚物(PLGA)包裹的硫酸乙酰肝素(HS)和转化生长因子‑β(TGF‑β)复合而成的Col‑HA‑PVP‑Nanoparticles四元复合型水凝胶，它高度仿生细胞外基质(ECM)的组成和结构，具有较好的稳定性，保水率及力学性能；同时，可促进骨组织的再生和修复。

Description

一种注射用多功能复合型水凝胶及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种注射用多功能复合型水凝胶及其制备方法，属于生物医药领域。
背景技术
骨关节炎，又称退行性关节病、骨关节病，与骨质增生有密切联系，骨质增生与人体衰老密切相关，多数老人都可能伴有骨质增生，自然容易得骨关节炎。临床数据显示，45岁以下人群骨关节炎患病率仅为2％，而65岁以上人群患病率高达68％，在医生看来人到老年都患有不同程度的骨关节炎，骨关节炎严重者寿命约会缩短10～15年。
目前常用的治疗骨关节炎的药物主要包括非甾体类消炎药、糖皮质激素、粘弹性补充治疗药物、生物类缓解疾病的药物以及最新的透明质酸结合药物的凝胶缓释体系。
然而，现有的治疗骨关节炎的传统药物以及最新的可注射医用水凝胶的药物存在仿生化体系构建不足、在软骨基质中渗透性较差，抗炎作用不持久，缺乏组织修复效果以及天然高分子降解速率不可控，机械性能差等问题。
因此，开发出一种新型的仿生化、稳定性好、具有持久抗炎性和促进关节组织修复效果的可用于治疗骨关节炎的注射用多功能复合型水凝胶产品具有广阔的市场前景。
发明内容
本发明的目的在于开发出一种仿生化、稳定性好、具有持久抗炎性和促进关节组织修复效果的可用于治疗骨关节炎的注射用多功能复合型水凝胶产品。本发明提供的这种多功能复合型水凝胶高度仿生细胞外基质(ECM)的组成和结构，具有较好的稳定性，保水率及力学性能；同时，可促进骨组织的再生和修复。
本发明的技术方案如下：
本发明提供了一种注射用多功能复合型水凝胶，所述注射用多功能复合型水凝胶是由胶原(Col)、透明质酸(HA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)以及聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)包裹的硫酸乙酰肝素(HS)和转化生长因子-β(TGF-β)纳米粒子(Nanoparticles)复合而成的Col-HA-PVP-Nanoparticles四元复合型水凝胶。
本发明提供了一种注射用多功能复合型水凝胶的制备方法，具体步骤如下：
步骤1：在水中加入透明质酸(HA)和氢氧化钠(NaOH)，制成透明质酸(HA)水溶液；
步骤2：在步骤1所得的透明质酸(HA)水溶液中加入适量的交联剂以及胶原(Col)，制成Col-HA交联物；
步骤3：将步骤2所得的Col-HA交联物用水配置成Col-HA水溶液；
步骤4：在水中加入聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，溶解，制成聚乙烯吡咯烷酮(PVP)水溶液；
步骤5：将步骤3所得Col-HA水溶液和步骤4所得聚乙烯吡咯烷酮(PVP)水溶液按比例混合，制得Col-HA-PVP复合凝胶；
步骤6：制备聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米微球；
步骤7：在水中加入硫酸乙酰肝素(HS)和转化生长因子-β(TGF-β)，形成HS-TGF-β混合物；
步骤8：将步骤6所得的PLGA纳米微球放置于聚醚酰亚胺(PEI)溶液中，再浸于步骤7所得的HS-TGF-β混合物溶液中，制得包裹HS-TGF-β的PLGA纳米微球；
步骤9：将步骤8所得的包裹HS-TGF-β的PLGA纳米微球浸入步骤5所得的Col-HA-PVP复合凝胶水溶液中，制得Col-HA-PVP-Nanoparticles四元复合凝胶。
在本发明的一种实施方式中，所述水为去离子水。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤1为在去离子水中加入透明质酸(HA)和氢氧化钠(NaOH)，搅拌溶解，制成透明质酸(HA)水溶液。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤1中水、透明质酸(HA)、氢氧化钠(NaOH)的质量比为100:6:0.6。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤2为在步骤1所得的透明质酸(HA)水溶液中加入适量的交联剂以及胶原(Col)，常温下交联过夜，制成Col-HA交联物。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤2中交联剂为三偏磷酸钠(STMP)。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤2中交联剂为用水配制而成的浓度为0.25g/mL的STMP水溶液。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤2中胶原(Col)的添加量为透明质酸(HA)质量的5％。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤3为将步骤2所得的Col-HA交联物自然干燥后，用去离子水冲洗、浸泡，将多余的交联剂完全去除，用去离子水配置成Col-HA水溶液。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤3为将步骤2所得的Col-HA交联物自然干燥后，用水冲洗多遍，再用水浸泡2小时以上，将多余的交联剂去除完全，然后用水配制成质量分数为1％的Col-HA水溶液。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤4为在去离子水中加入聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，搅拌溶解，制成聚乙烯吡咯烷酮(PVP)水溶液。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤4为将水、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)按质量比4:1混合，在80℃下搅拌溶解，制成质量分数为25％聚乙烯吡咯烷酮(PVP)水溶液。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤5为将步骤3所得Col-HA水溶液和步骤4所得聚乙烯吡咯烷酮(PVP)水溶液按比例混合，静止除去气泡，冷冻干燥，制得Col-HA-PVP复合凝胶。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤5中Col-HA水溶液、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)水溶液的质量比(体积比)为1:1。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤6为采用双乳化-溶剂挥发技术制备聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米微球。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤7为在去离子水中加入硫酸乙酰肝素(HS)和转化生长因子-β(TGF-β)纳米粒子(Nanoparticles)，搅拌后孵育，形成HS-TGF-β混合物。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤7为将水、硫酸乙酰肝素(HS)、转化生长因子-β(TGF-β)按质量比(体积比)10000:5:0.01混合，搅拌20s后室温中孵育40min，形成HS-TGF-β混合物。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤8为将步骤6所得的PLGA纳米微球放置于聚醚酰亚胺(PEI)溶液中，搅拌后离心，收集后用蒸馏水洗涤，再浸于步骤7所得的HS-TGF-β混合物溶液中，不断搅拌后离心，去离子水漂洗后收集，冻干后制得包裹HS-TGF-β的PLGA纳米微球。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤8为将步骤6所得的PLGA纳米微球放置于浓度为1mg/mL聚醚酰亚胺(PEI)溶液中，PLGA纳米微球、聚醚酰亚胺(PEI)溶液的质量比为1:10，搅拌后离心，收集后用蒸馏水洗涤，再浸于步骤7所得的HS-TGF-β混合物溶液中，不断搅拌10min，经过1000rpm离心2min，用水漂洗后收集，冻干后制得包裹HS-TGF-β的PLGA纳米微球。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤9为将步骤8所得的包裹HS-TGF-β的PLGA纳米微球浸入步骤5所得的Col-HA-PVP复合凝胶水溶液中，使纳米微球分散在复合凝胶中，真空干燥，去离子水洗涤，换液后再浸泡，冻干后制得Col-HA-PVP-Nanoparticles四元复合凝胶。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤9为将步骤8所得的包裹HS-TGF-β的PLGA纳米微球浸入步骤5所得的Col-HA-PVP复合凝胶水溶液中，包裹HS-TGF-β的PLGA纳米微球、Col-HA-PVP复合凝胶水溶液的质量比为2:1，使纳米微球分散在复合凝胶中，-53℃下真空干燥12小时，用水洗涤1小时，换3次液后再浸泡3小时，冻干后制得Col-HA-PVP-Nanoparticles四元复合凝胶。
有益效果：
(1)本发明制备的Col-HA-PVP-Nanoparticles四元复合凝胶体系高度仿生细胞外基质(ECM)的组成和结构，具有较好的稳定性，保水率及力学性能。
(2)本发明中，PLGA纳米微球可通过缓控式释放HS和TGF-β，促进骨组织的再生和修复。
具体实施方式
以下通过具体实施例和对比例对本发明作进一步的具体说明，但应该理解本发明并不受这些内容所限制。
检测方法如下：
稳定性检测：
将PBS缓冲液(0.1mol/L，pH＝7.49)加在复合凝胶的表面，每24h更换PBS缓冲液，实验结束后除去PBS缓冲液，并用滤纸快速吸去残余的液体，称重。凝胶的降解时间是在除去PBS缓冲液后，计算凝胶的剩余质量。
保水性检测：
将复合凝胶在37℃恒温箱中放置96小时，每隔一段时间取出，用滤纸吸去凝胶表面的水分，用电子天平称重，保水性能按照以下公式计算：凝胶吸水达到平衡后脱水后的质量/凝胶吸水达到平衡后脱水前的质量×100％。
力学性能检测：
将凝胶切成高为3cm，直径为1.5cm的圆柱体，于万能试验机下测定凝胶在破裂时所承受的压力，即为凝胶强度。
药物的体外释放检测：
准确称取一定量的凝胶，混悬于磷酸盐缓冲液，置于玻璃离心管中，在水浴摇床中震荡，每隔1d取出离心管于4000rpm离心10min，取出全部上清液，用试剂盒测定上清液中HS和TGF-β的含量，剩余的凝胶加入全新的释放液继续在水浴摇床中震荡。
实施例1
具体步骤如下：
(1)Col-HA-PVP复合凝胶的制备
首先在10mL去离子水中加入600mgHA和60mg氢氧化钠，搅拌溶解。然后向HA水溶液中加入适量的浓度为0.25g/mL的STMP水溶液，同时加入HA质量5％的Col，常温下交联过夜。交联好的产物自然干燥后，用去离子水冲洗多遍，再用去离子水浸泡2小时以上，将多余的交联剂去除完全，配制成质量分数1％的Col-HA水溶液(A)。然后将2.5gPVP加入10mL去离子水，80℃搅拌溶解完全，配制成质量分数25％的水溶液(B)。最后将A和B溶液按体积比1:1混合，静止除去气泡，量取20mL冷冻干燥制得Col-HA-PVP复合凝胶。
(2)PLGA包裹的HS和TGF-β纳米粒子的制备
首先采用双乳化-溶剂挥发技术制备PLGA纳米微球，然后取5mgHS，1μgTGF-β加入到10mL去离子水中，搅拌20s后室温中孵育40min，形成HS-TGF-β混合物，最后将PLGA纳米微球放置于1mg/mL，质量体积百分比为0.1的聚醚酰亚胺(PEI)溶液12小时，搅拌后离心，收集后用蒸馏水洗涤，再浸于HS-TGF-β混合物溶液并不断搅拌10min，经过1000rpm离心2min，去离子水漂洗后收集，冻干后得到包裹HS-TGF-β的PLGA纳米微球。
(3)Col-HA-PVP-Nanoparticles四元复合凝胶的制备
将包裹HS-TGF-β的PLGA纳米微球浸入Col-HA-PVP复合凝胶水溶液中，两者质量比为2:1，使纳米微球分散在复合凝胶中，-53℃下真空干燥12小时，去离子水洗涤1小时，换3次液后再浸泡3小时，冻干后得到Col-HA-PVP-Nanoparticles四元复合凝胶。
(4)检测Col-HA-PVP-Nanoparticles四元复合凝胶
检测结果如下：
稳定性检测：
降解实验表明，40d后凝胶的剩余质量为将降解前的65％，说明基于该凝胶具有较高的结构稳定性。
保水性检测：
实验结果表明，凝胶含水率为95％，96小时后，含水率为72％，具有较好的保水性能。
力学性能检测：
实验结果表明，凝胶强度为20.3kPa。
药物的体外释放检测：
实验结果表明，凝胶在1d的突释率为15％，第2-20d释药稍缓慢，20-40d释药稍快，40d累积释放达91％。
对比例1
与实施例1相比，将包裹HS-TGF-β的PLGA纳米微球、Col-HA-PVP复合凝胶水溶液的质量比改为3:1。
检测结果如下：复合凝胶在1d的突释率为31％，40d累积释放达82％。可见给药初期突释率过高，有可能导致血药浓度过高造成毒副作用。
对比例2
与实施例1相比，将包裹HS-TGF-β的PLGA纳米微球、Col-HA-PVP复合凝胶水溶液的质量比改为4:1。
检测结果如下：复合凝胶在1d的突释率为33％，40d累积释放达80％。可见给药初期突释率过高，有可能导致血药浓度过高造成毒副作用。
对比例3
与实施例1相比，将包裹HS-TGF-β的PLGA纳米微球、Col-HA-PVP复合凝胶水溶液的质量比改为1:1。
检测结果如下：复合凝胶96小时后，含水率为57％，保水性能降低。凝胶强度为15.1kPa，机械强度稍差。
虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。

Claims (17)

1.一种注射用多功能复合型水凝胶，其特征在于，所述注射用多功能复合型水凝胶是由胶原Col、透明质酸HA、聚乙烯吡咯烷酮PVP以及聚乳酸-羟基乙酸共聚物PLGA包裹的硫酸乙酰肝素HS和转化生长因子-βTGF-β纳米粒子复合而成的Col-HA-PVP-Nanoparticles四元复合型水凝胶；
所述的注射用多功能复合型水凝胶的制备方法，包含如下步骤：
步骤1：在水中加入透明质酸HA和氢氧化钠NaOH，制成透明质酸HA水溶液；
步骤2：在步骤1所得的透明质酸HA水溶液中加入适量的交联剂以及胶原Col，制成Col-HA交联物；
步骤3：将步骤2所得的Col-HA交联物用水配置成Col-HA水溶液；
步骤4：在水中加入聚乙烯吡咯烷酮PVP，溶解，制成聚乙烯吡咯烷酮PVP水溶液；
步骤5：将步骤3所得Col-HA水溶液和步骤4所得聚乙烯吡咯烷酮PVP水溶液按比例混合，制得Col-HA-PVP复合凝胶；
步骤6：制备聚乳酸-羟基乙酸共聚物PLGA纳米微球；
步骤7：在水中加入硫酸乙酰肝素HS和转化生长因子-βTGF-β，形成HS-TGF-β混合物；
步骤8：将步骤6所得的PLGA纳米微球放置于聚醚酰亚胺PEI溶液中，再浸于步骤7所得的HS-TGF-β混合物溶液中，制得包裹HS-TGF-β的PLGA纳米微球；
步骤9：将步骤8所得的包裹HS-TGF-β的PLGA纳米微球浸入步骤5所得的Col-HA-PVP复合凝胶水溶液中，制得Col-HA-PVP-Nanoparticles四元复合凝胶；
其中，所述步骤9为将步骤8所得的包裹HS-TGF-β的PLGA纳米微球浸入步骤5所得的Col-HA-PVP复合凝胶水溶液中，包裹HS-TGF-β的PLGA纳米微球、Col-HA-PVP复合凝胶水溶液的质量比为2:1，使纳米微球分散在复合凝胶中，-53℃下真空干燥12小时，用水洗涤1小时，换3次液后再浸泡3小时，冻干后制得Col-HA-PVP-Nanoparticles四元复合凝胶。
2.如权利要求1所述的一种注射用多功能复合型水凝胶，其特征在于，所述步骤1中水、透明质酸HA、氢氧化钠NaOH的质量比为100:6:0.5-100:6:1。
3.如权利要求1或2所述的一种注射用多功能复合型水凝胶，其特征在于，所述步骤2中交联剂为三偏磷酸钠STMP。
4.如权利要求1或2所述的一种注射用多功能复合型水凝胶，其特征在于，所述步骤2中交联剂为用水配制而成的浓度为0.25g/mL的STMP水溶液。
5.如权利要求3所述的一种注射用多功能复合型水凝胶，其特征在于，所述步骤2中交联剂为用水配制而成的浓度为0.25g/mL的STMP水溶液。
6.如权利要求1、2、5任一所述的一种注射用多功能复合型水凝胶，其特征在于，所述步骤2中胶原Col的添加量为透明质酸HA质量的4％-6％。
7.如权利要求3所述的一种注射用多功能复合型水凝胶，其特征在于，所述步骤2中胶原Col的添加量为透明质酸HA质量的4％-6％。
8.如权利要求1、2、5任一所述的一种注射用多功能复合型水凝胶，其特征在于，所述步骤3为将步骤2所得的Col-HA交联物自然干燥后，用水冲洗多遍，再用水浸泡2小时以上，将多余的交联剂去除完全，然后用水配制成质量分数为1％的Col-HA水溶液。
9.如权利要求3所述的一种注射用多功能复合型水凝胶，其特征在于，所述步骤3为将步骤2所得的Col-HA交联物自然干燥后，用水冲洗多遍，再用水浸泡2小时以上，将多余的交联剂去除完全，然后用水配制成质量分数为1％的Col-HA水溶液。
10.如权利要求1、2、5任一所述的一种注射用多功能复合型水凝胶，其特征在于，所述步骤4为将水、聚乙烯吡咯烷酮PVP按质量比4:1混合，在80℃下搅拌溶解，制成质量分数为25％聚乙烯吡咯烷酮PVP水溶液。
11.如权利要求3所述的一种注射用多功能复合型水凝胶，其特征在于，所述步骤4为将水、聚乙烯吡咯烷酮PVP按质量比4:1混合，在80℃下搅拌溶解，制成质量分数为25％聚乙烯吡咯烷酮PVP水溶液。
12.如权利要求1、2、5任一所述的一种注射用多功能复合型水凝胶，其特征在于，所述步骤5中Col-HA水溶液、聚乙烯吡咯烷酮PVP水溶液的质量比为1:0.5-1:1.5。
13.如权利要求3所述的一种注射用多功能复合型水凝胶，其特征在于，所述步骤5中Col-HA水溶液、聚乙烯吡咯烷酮PVP水溶液的质量比为1:0.5-1:1.5。
14.如权利要求1、2、5任一所述的一种注射用多功能复合型水凝胶，其特征在于，所述步骤7为将水、硫酸乙酰肝素HS、转化生长因子-βTGF-β按质量比10000:5:0.005-10000:5：0.015混合，搅拌20s后室温中孵育40min，形成HS-TGF-β混合物。
15.如权利要求3所述的一种注射用多功能复合型水凝胶，其特征在于，所述步骤7为将水、硫酸乙酰肝素HS、转化生长因子-βTGF-β按质量比10000:5:0.005-10000:5：0.015混合，搅拌20s后室温中孵育40min，形成HS-TGF-β混合物。
16.如权利要求1、2、5任一所述的一种注射用多功能复合型水凝胶，其特征在于，所述步骤8为将步骤6所得的PLGA纳米微球放置于浓度为1mg/mL聚醚酰亚胺PEI溶液中，PLGA纳米微球、聚醚酰亚胺PEI溶液的质量比为1:9-1:11，搅拌后离心，收集后用蒸馏水洗涤，再浸于步骤7所得的HS-TGF-β混合物溶液中，不断搅拌10min，经过1000rpm离心2min，用水漂洗后收集，冻干后制得包裹HS-TGF-β的PLGA纳米微球。
17.如权利要求3所述的一种注射用多功能复合型水凝胶，其特征在于，所述步骤8为将步骤6所得的PLGA纳米微球放置于浓度为1mg/mL聚醚酰亚胺PEI溶液中，PLGA纳米微球、聚醚酰亚胺PEI溶液的质量比为1:9-1:11，搅拌后离心，收集后用蒸馏水洗涤，再浸于步骤7所得的HS-TGF-β混合物溶液中，不断搅拌10min，经过1000rpm离心2min，用水漂洗后收集，冻干后制得包裹HS-TGF-β的PLGA纳米微球。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102895699A (zh) * 2012-11-19 2013-01-30 江南大学 一种用于皮肤创伤修复的复合水凝胶敷料的制备方法
CN105126166A (zh) * 2015-09-17 2015-12-09 北京爱美客生物科技有限公司 注射用含两亲性微球的透明质酸混合凝胶及其制备方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"Swelling of Collagen-Hyaluronic Acid Co-Gels: An In Vitro Residual Stress Model";VICTOR K. LAI et al.;《Annals of Biomedical Engineering》;20160505;第44卷;第2984-2993页 *
"硫酸乙酰肝素成骨作用及成骨机制的研究进展";徐朱杰等;《中国修复重建外科杂志》;20170831;第31卷(第8期);第1016-1020页 *
"聚乙烯吡咯烷酮半互穿网络智能凝胶的合成和电场行为研究";陈尔凡等;《现代化工》;20060630;第26卷(第6期);第37-39、41页 *

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