CN108272980A - 一种清热消积方剂 - Google Patents

一种清热消积方剂 Download PDF

Info

Publication number
CN108272980A
CN108272980A CN201810088886.8A CN201810088886A CN108272980A CN 108272980 A CN108272980 A CN 108272980A CN 201810088886 A CN201810088886 A CN 201810088886A CN 108272980 A CN108272980 A CN 108272980A
Authority
CN
China
Prior art keywords
radix
cell
qingre
xiaoji
recipe
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201810088886.8A
Other languages
English (en)
Inventor
潘磊
陈培丰
寿柳梅
徐微
费煜畅
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhejiang Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine
Original Assignee
Zhejiang Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhejiang Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine filed Critical Zhejiang Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine
Priority to CN201810088886.8A priority Critical patent/CN108272980A/zh
Publication of CN108272980A publication Critical patent/CN108272980A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/888—Araceae (Arum family), e.g. caladium, calla lily or skunk cabbage
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/42—Cucurbitaceae (Cucumber family)
    • A61K36/424—Gynostemma
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/42—Cucurbitaceae (Cucumber family)
    • A61K36/428—Trichosanthes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • A61K36/484—Glycyrrhiza (licorice)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/53—Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
    • A61K36/539—Scutellaria (skullcap)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/70—Polygonaceae (Buckwheat family), e.g. spineflower or dock
    • A61K36/704—Polygonum, e.g. knotweed
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/71—Ranunculaceae (Buttercup family), e.g. larkspur, hepatica, hydrastis, columbine or goldenseal
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/74—Rubiaceae (Madder family)
    • A61K36/748—Oldenlandia or Hedyotis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/896—Liliaceae (Lily family), e.g. daylily, plantain lily, Hyacinth or narcissus
    • A61K36/8966—Fritillaria, e.g. checker lily or mission bells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/899—Poaceae or Gramineae (Grass family), e.g. bamboo, corn or sugar cane
    • A61K36/8994—Coix (Job's tears)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/899—Poaceae or Gramineae (Grass family), e.g. bamboo, corn or sugar cane
    • A61K36/8998—Hordeum (barley)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/331—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using water, e.g. cold water, infusion, tea, steam distillation, decoction
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/53—Liquid-solid separation, e.g. centrifugation, sedimentation or crystallization

Abstract

本发明提供了一种清热消积方剂。该方剂由下述原料制成：蛇六谷、猫爪草、猫人参、半枝莲、白花蛇舌草、黄芩、浙贝、瓜蒌皮、虎杖根、绞股蓝、炒米仁、炒麦芽、甘草。包括以下步骤：步骤1：将上述药材混合，粉碎过筛，加入8倍量的水，于圆底烧瓶内浸泡；步骤2：加热至沸腾，维持1 h，过滤；步骤3：按上述步骤重复提取；步骤4：合并药液混匀，高速离心后取上清液；步骤5：将上清液进行浓缩，定容至相当于生药量1 g/mL；步骤6：在超净工作台内将药液经微孔滤膜除菌即得。本发明的清热消积方剂能够清热解毒、化痰消积，可用于胃癌的治疗，一定程度上抑制胃癌的生长，可减轻晚期胃癌患者的症状，提高化疗的有效率。

Description

一种清热消积方剂
技术领域
本发明涉及中医药技术领域，具体涉及一种清热消积方剂。
背景技术
胃癌是常见的恶性肿瘤，中医古籍中关于胃癌的称谓有“癥坚”、“结积”、“腹中积”、“胃反”、“反胃”、“脾积”等。至近代张锡纯在《医学衷中参西录·肠胃病门·噎隔》中提到“胃癌”一词。胃癌的病位在胃，与肝、脾、肾等脏腑关系密切。清代《景岳全书发挥》指出“膈者在胸膈胃口之间，或痰阻滞不通，食物入胃不得下达而呕出，渐至食下即吐而胃反矣”；明·龚信《古今医鉴》中曾记有“凡食下有碍，觉曲屈而下，微作痛，此必有死血”；《景岳全书》中述：“凡脾肾不足及虚弱失调之人多有积聚之病。”可见胃癌病因是由脏腑功能失调、外来邪毒、七情、饮食不节等多种因素共同作用的结果。关于胃癌的病机方面，多数医家认同胃癌本虚标实的病机，本虚则以脾虚为主，而标实可以为热毒、血瘀、痰凝、气滞等为表现。而人体内互为表里的脾与胃同居中焦，为人体的后天之本。热毒是癌症的主要病因之一，癌症患者常有邪热瘀毒蕴结体内，临床常表现为局部肿块灼热疼痛、便秘、舌苔黄腻等热毒证候。《医宗金鉴》在失荣证中记载：“失荣证，由忧思、恚怒、气郁、血逆与火凝结而成”。可见中医文献中多认为热毒不能及时清除，久留体内，血遇热形成瘀血，津液遇热则炼成痰，热与痰、瘀等相结，内蕴结毒形成热毒，热毒阻塞于经络脏腑，就形成肿瘤。清代 《医宗金鉴》 中记载“热结不散，灼伤津液，贲门干枯，则纳入水谷之道路狭隘，故食不能下，为噎塞也；幽门干枯，道路狭隘，故食入反出，为翻胃也。”从中可见热毒内蕴是形成胃癌的关键因素。如属邪热瘀毒蕴结体内而成，治疗上则如《素问· 至真要大论》指示：“治热以寒”、“热者寒之”，应采用清热解毒法，用寒凉药物消除热毒因素，即消除或降解体内毒素，控制炎症，而达泻火解毒、清热散结等作用。清热消积方由蛇六谷、猫爪草、猫人参、半枝莲、白花蛇舌草、黄芩、浙贝、瓜蒌皮等中药组成，诸药合用，发挥清热解毒、化痰散结、理气行瘀之功效，热毒痰积得除，有邪去正安之效。
目前胃癌治疗方面取得了一定进步，新辅助化疗在临床上相继开展，为胃癌化疗提供了新的选择；分子靶向精准医疗为患者提供个体化的治疗模式。但是胃癌具有起病隐匿、预后差等特点，进展期胃癌自然病程一般不到1年。手术虽为首选的治疗方法，但根治术后，Ⅲ~Ⅳ期胃癌患者5年生存率11.3%~22%，易发生远处转移。对于Ⅳ期胃癌患者，多数已失去手术机会，治疗以全身化疗为主，其总有效率达20%~58%，但中位生存期仍在6~9个月，尚未突破1年。严重的化疗毒副反应常导致病人无法顺利完成治疗。中药通过其独特的配伍与现在医学相结合，从抑癌、抗血管生成、改变肿瘤微环境、提高机体免疫力等多种途径，提高患者生活质量，延长带瘤生存时间。然而现阶段，有很多治疗胃癌的中药，但大多数具有治疗效果不佳、症状缓解率低，生存期短等特点。因此中药抗胃癌，挑战与机遇并存。
发明内容
要解决的技术问题：本发明的目的是提供一种清热消积方剂，在经过对药物组分的大量筛选、重组、尝试， 又通过大量体外实验和动物实验的研究后，提供一种清热解毒、化痰消积的药物，该药可用于胃癌的治疗，是一种有效的抗胃癌药物。
技术方案：一种清热散结方剂，由以下成分制备而成：蛇六谷15-30g、猫爪草15-30g、猫人参15-30g、半枝莲15-30g、白花蛇舌草15-60g、黄芩6-12g 、浙贝6-12g、瓜蒌皮6-15g、虎杖根9-15g、绞股蓝10-20g、炒米仁15-30g、炒麦芽10-15g、甘草2-10g。
进一步优选的，所述的一种清下泻胰方剂，由以下成分制备而成：蛇六谷15g、猫爪草15g、猫人参15g、半枝莲15g、白花蛇舌草15g、黄芩12g、浙贝12g 、瓜蒌皮15g、虎杖根15g、绞股蓝12g、炒米仁30g、炒麦芽15g、甘草9g。
上述清热消积方剂的制备方法包括以下步骤：
步骤1：将上述药材混合，粉碎过30目筛，加入8倍量的水，于圆底烧瓶内浸泡30-40min；
步骤2：加热至沸腾，维持1 h，过滤；
步骤3：按上述步骤重复提取1次；
步骤4：将2次提取的药液合并混匀，在转速20000 r/min下高速离心15 min后取上清液；
步骤5：将上清液进行浓缩，定容至相当于生药量1 g/mL；
步骤6：在超净工作台内将药液经0.22μm微孔滤膜除菌即得。
一种清热消积方剂，可制备成口服液、 颗粒剂、片剂或胶囊剂。
根据中医药史料记载，本发明所选用的中药材具有如下药理活性和功能主治：
方中蛇六谷又名魔芋，性寒味辛，软坚散结、行瘀消肿、解毒止痛。猫爪草，性微温味甘、辛，化痰散结、解毒消肿。猫人参，性凉味苦、涩，清热解毒、消肿抗癌。半枝莲，性寒味辛、苦，清热解毒、散瘀止血、利尿消肿。白花蛇舌草，性寒味苦、甘，清热解毒、利湿消肿。佐以黄芩清热燥湿，泻火解毒，浙贝清热化痰止咳，解毒散结消痈，瓜蒌皮清热解毒，利气宽胸。诸药配伍，有除热毒痰积、邪去而正安功效。
本发明所选用的中药材同时具有现代医学研究机制：
蛇六谷：目前在临床上常用来治疗胃癌、肝癌、胰腺癌、乳腺癌、恶性淋巴瘤等恶性肿瘤，蛇六谷（魔芋）的有效成分主要为魔芋葡苷聚糖以及魔芋精粉。我们前期研究发现，蛇六谷通过抑制肿瘤生长、诱导细胞周期阻滞、凋亡以及自噬等多种途径发挥抗肿瘤作用。分子机制主要与通过调控凋亡相关蛋白(包括生存素（Survivin）、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）和Bcl-2 相关蛋白 X( Bax 蛋白) )诱导细胞凋亡，显著降低HEK293和AGS细胞的抗增殖能力诱导自噬有关。蛇六谷还可通过增加G0/G1期细胞的比例，降低G2/M期的细胞比例在细胞周期分布上具有调节作用。此外，蛇六谷石油醚萃取物能明显地抑制人胃癌细胞SGC-7901增殖，且呈剂量-效应关系；蛇六谷石油醚部位提取物能明显下调Survivin蛋白、Bcl-2蛋白的表达和上调Bax蛋白、活化型半胱天冬酶-9（Cleaved-Caspase-9）蛋白的表达。
猫爪草：猫爪草皂苷及多糖是猫爪草的主要生物活性成分。猫爪草的抗肿瘤作用主要与调节体内Zn/Cu平衡、诱生肿瘤坏死因子、增强宿主的免疫功能等相关。猫爪草皂苷通过促进线粒体融合素基因（mfn2基因）的表达，进而抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖及诱导其凋亡。此外，猫爪草皂苷具有抑制人结肠癌LoVo细胞增殖和诱导凋亡作用。猫爪草多糖能增强小鼠胸腺细胞、脾脏淋巴细胞和腹腔巨噬细胞增殖能力；能增强巨噬细胞的吞噬功能，并呈剂量一效应关系；并具有一定的还原能力，具有较强的清除羟基自由基和超氧阴离子的能力。
猫人参：猫人参醇提取物能抑制细胞周期D1蛋白蛋白（CyclinDl）的表达，提高Bax、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）的表达，抑制细胞过度增殖，促进细胞调亡。猫人参醇提取物能抑制磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路相关蛋白的表达，能促进肝脏激酶B1（LKB1）的阳性表达。猫人参的活性物质科罗索酸对人体胃癌细胞SNU-601有生长抑制作用，能促使Caspase-3和APP核糖聚合酶的激活，经AMPK-mTOR通路（磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路）诱导细胞调亡，能通过抑制胶质母细胞瘤信号传导与转录激活因子3（STAT3）和核因子kB（NF-kB）活化而抑制细胞增殖，抑制巨噬细胞的M2极化。
半枝莲：半枝莲的主要活性成分为黄酮类，已有研究表明半枝莲总黄酮主要通过抑制肿瘤血管生成、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤生长与增殖等途径发挥抗肿瘤作用。黄酮类化合物可通过影响cydin/CDK，CD1表达，调节端粒酶活性，影响Rb，p53等基因表达，诱导多种肿瘤细胞周期阻滞，通过激活和上调caspase-3、调节Bax/Bcl-2表达水平和通过抑制Survivin蛋白表达，促进磷酸酶和张力蛋白同源体蛋白（PTEN蛋白）表达，调控细胞内血管内皮生长因子（VEGF）表达，并促进p21，p53表达，抑制增殖细胞核抗原（PCNA），cyclin D1和细胞周期蛋白依赖性激酶4（CDK4）表达，抑制Akt磷酸化抑制胃癌细胞增殖，诱导肿瘤细胞调亡。此外，半枝莲还可通过抑制VEGF及血管内皮生长因子受体（VEGFR）的表达，减低新生血管形成，降低实体瘤内血管密度，间接抑制肿瘤体内生长。
白花蛇舌草：白花蛇舌草中活性成分极多，具有抗肿瘤活性的主要有黄酮类、蒽醌类、有机酸类以及多糖类。黄酮类化合物具有抗肿瘤、抗氧化、清除自由基等作用。槲皮素为白花蛇舌草黄酮类化合物主要组分，现代研究表明其具有显著抗肿瘤效果。槲皮素可以调控 Bcl-2 家族蛋白（BCL-2，Bcl-xL，Mcl1，Bax，Bad，p-Bad）cytochrome C，Apaf-1，caspases，and survivin，通过上调 Bax 等促凋亡蛋白的表达，下调Bcl-2 等抗凋亡蛋白的表达，诱导肿瘤细胞凋亡。同时槲皮素可以调控细胞周期相关蛋白（p53，p21，cyclinD1），将细胞周期阻滞在 G2/M 期，且呈剂量依赖性。白花蛇舌草总黄酮对人肝癌 SMMC-7721 细胞基因表达的调控作用通过下调多种癌基因及影响肿瘤侵袭迁移等细胞因子表达，上调丝裂原活化蛋白激酶6（MAPZK6） 等抑癌基因表达，实现多靶点的作用特点。白花蛇舌草蒽醌类化合物活性成分2-羟基-3-甲基蒽醌通过作用于THP-1巨噬细胞，能够诱导THP-1 细胞凋亡。此外， 2- 羟基 -3- 甲基蒽醌作用 THP-1细胞后触发 caspase-8 的激活，调控细胞凋亡，实现抗肿瘤作用。甲基蒽醌可以诱导 MCF-7 人乳腺癌细胞凋亡，并上调细胞内钙水平，c-Jun氨基末端激酶（JNK）磷酸化和激活钙蛋白酶，释放细胞色素 C，激活caspase-4，caspase-9，caspase-7。提示甲基蒽醌可以通过 Ca2+介导 MCF-7 人乳腺癌细胞凋亡，发挥其抗肿瘤作用。白花蛇舌草中的有机酸类及多糖类化合物亦对肿瘤生长有抑制作用。有机酸类中的齐墩果酸和熊果酸具有一定的细胞毒活性，明显抑制人肺癌细胞A549、人肝癌细胞 BEL-7407 等七种肿瘤细胞株生长。多糖具有免疫调节、抗肿瘤作用，可以激活巨噬细胞、T 细胞等生物活性，作为免疫增强剂提高机体抗肿瘤免疫力。
白花蛇舌草和半枝莲皆属清热解毒类中药，在临床应用中二者常以药对形式出现。该药对可能通过对过渡金属离子的螯合，阻断脂质体过氧化链式反应以及抑制•OH形成，从而抑制或抵抗肿瘤的形成。研究发现白花蛇舌草和半枝莲微粉配伍后在抗 H22 肝癌方面，可提高抑瘤率、Bax 表达，降低 Bcl-2、PCNA 表达，调节细胞周期方面优于单用白花蛇舌草或半枝莲微粉。白花蛇舌草和半枝莲微粉配伍后协同增效作用，可能与增强荷瘤宿主免疫功能、保护免疫器官、影响肿瘤细胞的周期、抑制肿瘤细胞增殖及诱导肿瘤细胞凋亡有关。
黄芩：黄芩的主要有效成分为黄酮类化合物，主要包括黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素等，均可有效抑制肿瘤细胞的增殖。黄芩素通过抑制信号转导分子蛋白激酶B、糖原合成酶激酶3β（GSK3β）、细胞外调节蛋白激酶（ERK）、p38、NF-κB 来抑制细胞增殖，通过调节cyclin B1、cyclin D1使细胞周期阻滞。黄芩苷通过MAPK（丝裂原活化蛋白激酶）信号通路下调基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、uPA和其受体uPAR的表达，抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞的迁移、侵袭和转移。汉黄芩素能抑制血管内皮生长因子引起的 ERK、AKT和p38蛋白磷酸化，抑制胃癌裸鼠的肿瘤增殖和肿瘤血管生成。汉黄芩素可上调磷酸化蛋白激酶Cδ 和p21 的表达导致细胞在G1期被阻滞，诱导人类白血病细胞U-937粒细胞性分化。汉黄芩苷能调节ERK 和 p38信号通路，抑制mTOR 和 p70S6 激酶引发细胞自噬。
浙贝：生物碱为浙贝母的主要成分，包括贝母甲素、贝母乙素等。研究证实浙贝母和化疗药物联合应用能够显著提高化疗药物对肿瘤细胞的杀伤效果，贝母类生物碱成分在肿瘤多药耐药方面也发挥了作用，如贝母素乙逆转SGC7901/VCR 细胞株多药耐药、浙贝母碱逆转肺癌A549-DDP 细胞株多药耐药等。
瓜蒌皮：瓜蒌皮石油醚相具有抗肿瘤作用，可诱导细胞停滞在S-期而起到抑制癌细胞增殖的作用，并通过诱导细胞凋亡来抗癌细胞增殖。
虎杖根：虎杖苷和白藜芦醇为其抗肿瘤主要活性成分。研究发现，虎杖苷具有广谱的抑制肿瘤细胞增殖的作用，且虎杖苷对正常细胞的毒性较小。虎杖苷还可以抑制裸鼠移植瘤的生长。通过导致细胞周期 S期阻滞及诱导凋亡，虎杖苷发挥其抗肿瘤作用。在不显著影响细胞生长浓度的下，在体外虎杖苷可抑制肺癌和乳腺癌细胞的迁移、贴壁能力和侵袭能力，其抑制乳腺癌转移能力的机制可能与下调 N-钙黏着蛋白蛋白的表达，上调 E-链蛋白、E-钙黏着蛋白蛋白有关。另外，有研究测定了白藜芦醇甲酰胺类衍生物对人肝癌Smmc7721细胞株和胃癌SGC7901 细胞株的抗增殖活性，结果显示这类化合物对这两种肿瘤细胞均表现出良好的抗增殖活性。
绞股蓝：绞股蓝具有显著的体内外抗肿瘤作用，可显著抑制小鼠白血病L1210细胞生长，这与活性氧的产生、线粒体电位下降和DNA损伤有关。现代研究表明，绞股蓝中抗肿瘤主要活性成分是绞股蓝皂苷，其对胃癌、宫颈癌、舌癌等培养癌细胞均具有显著的细胞毒作用。有研究表明，绞股蓝皂苷对肝癌细胞Bel-7402的增殖生长有时间依赖性抑制作用，并促进其凋亡，其作用机制与DNA损伤、caspase-8的大量表达有关。研究证实绞股蓝皂苷可抑制L1210细胞增殖，其机制与活性氧产生、线粒体膜电位下降及DNA损伤等有关。
炒米仁（薏苡仁）：研究表明薏苡仁主要通过抑制肿瘤细胞的分裂增殖；诱导肿瘤细胞的凋亡；抑制肿瘤细胞的转移；抑制环氧化酶-2（COX-2）的活性；抑制肿瘤血管的形成；调节机体免疫系统功能等途径抗肿瘤。薏苡仁可通过破坏肿瘤细胞的DNA来抑制其分裂增殖，还可通过使细胞中CD44和CD133的表达水平下降来达到抑制其增殖的效果。薏苡仁中性油脂(NLEJ)可通过调控肿瘤细胞周期蛋白(p21、p27、CDK2和cyclins等)和信号传导蛋白(ATM（共济失调毛细血管扩张突变基因）、RAD50和p53等)来阻断细胞周期循环，从而抑制肿瘤的生长。薏苡仁的甲醇提取物能够呈剂量和时间依赖性地抑制细胞周期素A，从而诱导人肺癌A549细胞生长周期停滞于G1/S期之间，100μg/mL甲醇提取物的抑瘤率可达55%～65%。运用寡核苷酸基因芯片，发现薏苡仁提取物能够显著地影响细胞中基质金属蛋白酶c基因的表达，通过抑制NF-kappaB依赖的基因的转录来导致细胞基因表达的改变，从而有效地诱导肿瘤细胞的凋亡。研究表明薏苡仁甲醇提取物能显著地抑制TPA诱导的肿瘤组织中COX-2基因的表达，并呈剂量依赖性，其抑制COX-2的表达主要在转录水平。薏苡仁多糖是薏苡仁的免疫调节活性成分。有研究显示薏苡仁多糖有改善红细胞和T淋巴细胞免疫功能的作用。
炒麦芽：麦芽煎剂能轻度促进胃酸及胃蛋白酶的分泌，水煎提取的胰淀粉酶可促进消化，可改善肿瘤患者的消化道反应。
甘草：甘草酸是甘草中有效成分之一，抗肿瘤作用已为众人所知。甘草还含有160多种黄酮类成分，有研究证明甘草黄酮类成分也是甘草抗肿瘤的活性成分。其中甘草查耳酮A具有抗肿瘤促进作用。它能与佛波醇酯竞争细胞膜上受体，抑制佛波醇酯促进Pi掺入HeLa细胞磷脂之中(磷脂磷酸化)，也抑制花生四烯酸和佛波醇酯引起的小鼠耳肿，对抗以二甲苯蒽启动的、以佛波醇酯促进的小鼠皮肤乳头瘤的生成，显著抑制人胃癌HGC-27细胞增殖。
有益效果：本发明的清热消积方剂能够清热解毒，化痰消积，可用于胃癌的治疗，可诱导癌细胞发生凋亡，一定程度上抑制肿瘤细胞增殖、抗肿瘤血管生成，可减轻晚期胃癌患者的症状，提高化疗的有效率。
附图说明
图1是实施例2对荷瘤鼠肿瘤组织HIF-1α蛋白表达的影响图。
图2是实施例2对SPC-A-1细胞诱导的HUVEC细胞小管生成能力的抑制，其中：A为阳性对照组；B为阴性对照组；C为清热消积方2.5 mg/mL组；D为清热消积方5.0 mg/mL组；E为清热消积方10.0 mg/mL组；F为清热消积方20.0 mg/mL组。
具体实施方式
实施例1
一种清热散结方剂，由以下成分制备而成：蛇六谷15g、猫爪草15g、猫人参15g、半枝莲15g、白花蛇舌草15g、黄芩6g 、浙贝6g、瓜蒌皮6g、虎杖根9g、绞股蓝10g、炒米仁15g、炒麦芽10g、甘草2g。
上述清热消积方剂的制备方法包括以下步骤：
步骤1：将上述药材混合，粉碎过30目筛，加入8倍量的水，于圆底烧瓶内浸泡30 min；
步骤2：加热至沸腾，维持1 h，过滤；
步骤3：按上述步骤重复提取1次；
步骤4：将2次提取的药液合并混匀，在转速20000 r/min下高速离心15 min后取上清液；
步骤5：将上清液进行浓缩，定容至相当于生药量1 g/mL；
步骤6：在超净工作台内将药液经0.22μm微孔滤膜除菌即得。
实施例2
一种清热消积方剂，由以下成分制备而成：蛇六谷15g、猫爪草15g、猫人参15g、半枝莲15g、白花蛇舌草15g、黄芩12g、浙贝12g 、瓜蒌皮15g、虎杖根15g、绞股蓝12g、炒米仁30g、炒麦芽15g、甘草9g。
上述清热消积方剂的制备方法为：
步骤1：将上述药材混合，粉碎过30目筛，加入8倍量的水，于圆底烧瓶内浸泡30 min；
步骤2：加热至沸腾，维持1 h，过滤；
步骤3：按上述步骤重复提取1次；
步骤4：将2次提取的药液合并混匀，在转速20000 r/min下高速离心15 min后取上清液；
步骤5：将上清液进行浓缩，定容至相当于生药量1 g/mL；
步骤6：在超净工作台内将药液经0.22μm微孔滤膜除菌，得清热消积方原液，4℃冰箱保存备用，实验时将上述原液用培养液稀释后配置成所需终浓度后使用。
实验1
C57BL/6J荷瘤小鼠Lewis肺癌移植瘤模型的建立
①在无菌条件下取接种Lewis肺癌10 d的C57BL/6J荷瘤小鼠，脱颈椎处死，无菌条件下取皮下生长良好、呈鱼肉状的瘤组织，去除坏死部分，剪碎，按瘤重与生理盐水1：3制成匀浆，200目细胞筛过滤，得瘤细胞混悬液。1 500 r/min离心5 min，加生理盐水调至肿瘤细胞数约为1×107/mL。
②无菌条件下，用1 mL无菌注射器取细胞悬液0.2 mL(约含2×106个活细胞)，无
菌条件下接种于小鼠右腋窝皮下，即得荷瘤小鼠Lewis肺癌移植瘤模型。
验证清热消积方对肿瘤生长的影响
给药剂量参照人鼠给药剂量换算公式方法计算，清热消积方高、中、低3个剂量组按0.2mI/10g量胃饲中药水煎液，每周给药2次，实验期间共给药4次。免疫组化法测定HIF-1α蛋白的表达。
如图1所示清热消积方的不同剂量组均能下调HIF-1α蛋白的表达，表明清热消积方下调肿瘤组织的HIF-1α蛋白的表达可能是其抗肿瘤血管生成等作用机制之一。
实验2
根据预实验情况确定清热消积方有效抑制浓度范围，实验时将上述原液用培养液稀释后配置成所需终浓度，分别为2.5、5.0、10.0、20.0 mg/mL后使用。
划痕实验观察HUVEC细胞迁移运动
(1)条件培养液的制备：在培养瓶中，用RPMI-1640培养液培养SPC-A-1细胞。待细胞生长接近融合时收集上清液，5 000 r/min离心5 min，再经0.22μm滤菌器过滤。所得培养上清按1：1与含20％新生牛血清的RPMI-1640培养液混合，制备成HUVEC的细胞条件培养液。
(2)将对数生长期的HUVEC细胞以0.25％胰蛋白酶消化，制成细胞悬液，按1*106个/孔的密度接种到6孔板，用按上述制得的含人肺癌SPC-A-1细胞上清的条件培养液进行培养。
(3)24 h后吸弃培养液，PBS洗涤1次，用10μL Tip头沿培养板底部划“一”字形划痕。PBS洗去未贴壁细胞。用1640培养液将清热消积方药液配成终浓度为2.5、5.0、10.0 mg/mL，分别加入3个实验组，对照组加入无血清培养基及同体积PBS继续进行培养。
（4）拍照记录下0 h的划痕问距，并分别于24、48 h观测划痕间距。所得图像数据用Image ProPlus 6.0软件分析处理。在划痕每侧边缘均匀选取30个点后，取其中线代表划痕边缘，测量划痕间距，并用以下公式计算迁移率：[n h细胞迁移率=边缘距离(0 h)一边缘距离(n h)]/边缘距离(0 h)×100％。
注：*P<0.05，与对照组迁移率比较差异均有统计学意义。△P<0.05，与消热消积方2.5mg/mL组同期比较有统计学差异；▲P<0.05，与消热消积方5.0 mg/mL组同期比较有统计学差异。
如上表1所示，不同浓度的清热消积方药液对由SPC-A-1细胞上清培养的H UVEC细胞的迁移运动均有不同程度的抑制作用。在划痕后24 h，观察到对照组细胞向划痕区迁移，而各给药组则不明显；48 h后，对照组的细胞划痕区已接近融合，而各给药组的划痕仍较明显。表明清热消积方可通过抑制人肺腺癌细胞诱导的HUVEC细胞的迁移运动进而起到抗肿瘤血管形成的作用。
实验3
将上述原液用培养液稀释后配置成所需终浓度，分别为2.5、5.0、10.0、20.0 mg/mL后使用。
Transwell小室实验观察HUVEC细胞趋化效应
(1)取对数生长期的SPC-A-1细胞，以含10％新生牛血清的RPMI-1640培养液重悬细胞，调整细胞密度为1×105/mL，分别以不同终浓度(2.5、5.0、10.0、20.0 mg/mL)的清热消积方药液作用于SPC-A-1细胞。48 h后，2 000 r/min离心5 min，去除细胞碎片，取上清用于实验。(2)HUVEC细胞消化后用完全培养剂重悬，调整细胞浓度为1×106/m L，Transwell细胞培养板的上室中加入1 00μL HUVEC细胞悬液。
(3)在Transwell细胞培养下室中，分别加入上述方法获取的不同浓度清热消积方作用后SPC-A-1细胞培养上清，以未经清热消积方药液作用的上清为阳性对照，PBS为阴性对照，每组设3个复孔。放人细胞培养箱中继续培养24 h。
(4)取出Transwell小碟，用棉棒轻轻擦去膜上表面的细胞；1 0％甲醛固定30min；用PBS洗2次，每次5 min；结晶紫染色20 min，清水反复冲洗，晾干；取下聚碳酸酯膜，中性树胶封片。
(5)显微镜下(×200)计数迁移到膜下表面的细胞，每张膜随机计数5个视野，取平均数作为趋化细胞数。趋化抑制率IR(％)=(1－给药组穿膜细胞数/阳性对照组穿膜细胞数)×100％。
注：与阴性对照组比较有统计学差异，*P<0.01；与阳性对照组比较有统计学差异，△P<0.01；与消热消积方2.5 mg/mL组比较有统计学差异，▲P<0.01；与消热消积方5.0 mg/mL组比较有统计学差异，○P<0.01；与消热消积方10.0 mg/mL组比较有统计学差异，●P<0.05。
如上表2所示，经不同浓度清热消积方药液作用后的SPC-A-1细胞培养上清对HUVEC细胞的趋化细胞数目明显少于阳性对照组，表明清热消积方可能通过抑制SPC-A-1肺癌细胞分泌相关趋化因子来减弱HUVEC细胞的趋化效应，从而达到抗肺癌血管生成的目的。
实验4
将上述原液用培养液稀释后配置成所需终浓度，分别为2.5、5.0、10.0、20.0 mg/mL后使用。
Matrigel胶小管形成实验观察HUVEC细胞成管能力
(1)提前将Tip头、培养板等所有实验中将接触到Matrigel基质胶的物品，均置于﹣20℃冰箱进行预冷。然后，将Matrigel基质胶置于2~8℃冰箱中融化4~6 h。当基质胶呈液态状后，向96孔培养板中每孔加入60μL，置于37℃ 1 h成胶。
(2)用获取的不同浓度清热消积方作用后SPC-A-1细胞培养上清重悬HUVEC细胞，种入已铺胶的96孔板中，每孔3×1 04个细胞，以未经清热消积方药液作用的上清为阳性对照，PBS为阴性对照，每组设3复孔。放人细胞培养箱中继续培养24 h。
(3)取出培养板，于显微镜下(X40)观察并拍照，Image-Pro Plus软件分析形成小管的面积。
如图2所示，经不同浓度清热消积方药液作用后的SPC-A-1细胞培养上清诱导的HUVEC细胞小管形成面积明显低于阳性对照组，表明清热消积方可能是通过抑制SPC-A-1肺癌细胞分泌相关促小管形成因子，来减弱HUVEC内皮细胞的成管能力，从而最终起到抗肺癌血管生成的效果。
实施例3
一种清热散结方剂，由以下成分制备而成：蛇六谷30g、猫爪草30g、猫人参30g、半枝莲30g、白花蛇舌草60g、黄芩12g 、浙贝12g、瓜蒌皮15g、虎杖根15g、绞股蓝20g、炒米仁30g、炒麦芽15g、甘草10g。
上述清热消积方剂的制备方法包括以下步骤：
步骤1：将上述药材混合，粉碎过30目筛，加入8倍量的水，于圆底烧瓶内浸泡40 min；
步骤2：加热至沸腾，维持1 h，过滤；
步骤3：按上述步骤重复提取1次；
步骤4：将2次提取的药液合并混匀，在转速20000 r/min下高速离心15 min后取上清液；
步骤5：将上清液进行浓缩，定容至相当于生药量1 g/mL；
步骤6：在超净工作台内将药液经0.22μm微孔滤膜除菌即得。

Claims (4)

1. 一种清热消积方剂，其特征在于：由以下成分制备而成：蛇六谷15-30g、猫爪草15-30g、猫人参15-30g、半枝莲15-30g、白花蛇舌草15-60g、黄芩6-12g 、浙贝6-12g、瓜蒌皮6-15g、虎杖根9-15g、绞股蓝10-20g、炒米仁15-30g、炒麦芽10-15g、甘草2-10g。
2. 根据权利要求1所述的一种清下泻胰方剂，其特征在于：由以下成分制备而成：蛇六谷15g、猫爪草15g、猫人参15g、半枝莲15g、白花蛇舌草15g、黄芩12g、浙贝12g 、瓜蒌皮15g、虎杖根15g、绞股蓝12g、炒米仁30g、炒麦芽15g、甘草9g。
3.权利要求1至2任一项所述的一种清热消积方剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤1：将上述药材混合，粉碎过30目筛，加入8倍量的水，于圆底烧瓶内浸泡30-40min；
步骤2：加热至沸腾，维持1 h，过滤；
步骤3：按上述步骤重复提取1次；
步骤4：将2次提取的药液合并混匀，在转速20000 r/min下高速离心15 min后取上清液；
步骤5：将上清液进行浓缩，定容至相当于生药量1 g/mL；
步骤6：在超净工作台内将药液经0.22μm微孔滤膜除菌即得。
4. 根据权利要求1所述的一种清热消积方剂，其特征在于：可将药液制备成口服液、颗粒剂、片剂或胶囊剂。
CN201810088886.8A 2018-01-30 2018-01-30 一种清热消积方剂 Pending CN108272980A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810088886.8A CN108272980A (zh) 2018-01-30 2018-01-30 一种清热消积方剂

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810088886.8A CN108272980A (zh) 2018-01-30 2018-01-30 一种清热消积方剂

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108272980A true CN108272980A (zh) 2018-07-13

Family

ID=62805844

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810088886.8A Pending CN108272980A (zh) 2018-01-30 2018-01-30 一种清热消积方剂

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108272980A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117045572A (zh) * 2023-10-11 2023-11-14 北京青颜博识健康管理有限公司 一种抑制皮肤多种类型基质金属蛋白酶功能的组合物及其用途

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1788760A (zh) * 2005-10-19 2006-06-21 黄文祖 治癌胶囊及其制备方法
CN107320638A (zh) * 2017-08-12 2017-11-07 马丽 一种治疗甲状腺癌的药物

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1788760A (zh) * 2005-10-19 2006-06-21 黄文祖 治癌胶囊及其制备方法
CN107320638A (zh) * 2017-08-12 2017-11-07 马丽 一种治疗甲状腺癌的药物

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
何富乐: "《国家级名老中医周维顺恶性肿瘤治疗经验集》", 30 April 2016, 浙江大学出版社 *
潘银平等: "清热消积方对荷瘤鼠肿瘤组织HIF-1α蛋白表达的影响", 《云南中医学院学报》 *
陈培丰等: "清热消积方对人肺腺癌细胞诱导的人脐静脉内皮细胞迁移、趋化和成管能力的影响", 《中国中西医结合杂志》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117045572A (zh) * 2023-10-11 2023-11-14 北京青颜博识健康管理有限公司 一种抑制皮肤多种类型基质金属蛋白酶功能的组合物及其用途
CN117045572B (zh) * 2023-10-11 2024-01-30 北京青颜博识健康管理有限公司 一种抑制皮肤多种类型基质金属蛋白酶功能的组合物及其用途

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Miraj et al. Astragalus membranaceus: A review study of its anti-carcinoma activities
CN106390013B (zh) 一种抑制结直肠癌肝转移的复方中药组合物其制备方法与应用
CN101352557B (zh) 治疗胃癌的中药制剂及其制备方法
CN102861284B (zh) 一种治疗非小细胞肺癌的中药复方制剂及其制备方法
CN101849999B (zh) 一种治疗盆腔炎的中药组合物及其制备方法
CN101711848B (zh) 一种辅助治疗肿瘤的中药组合物
CN112569307B (zh) 一种扶正消瘤中药组合物及其制备方法与应用
CN108567820A (zh) 一种用于肿瘤治疗的中药组合物及其制备方法
CN109663116A (zh) 一种治疗化疗所致恶心呕吐的中药组合物、中药免煎颗粒剂及应用
CN105596994A (zh) 用于治疗肺癌细胞增殖的药物
CN108272980A (zh) 一种清热消积方剂
CN105663728A (zh) 一种治疗结直肠癌的中药复方制剂及其制备方法
CN103656461A (zh) 一种治疗胃癌的中药蜜丸及制备方法
CN102940808A (zh) 一种用于治疗肺癌的组方药物及制备方法
CN105535495A (zh) 一种培元固本治疗食管癌的中药组合物及制备方法
TW202206090A (zh) 黃耆醫藥組合物用於增強癌症治療之用途
CN104027447B (zh) 一种治疗癌症的中药
CN107029084A (zh) 一种治疗结直肠癌前病变的中药组合物及其药物制剂与应用
CN103768570B (zh) 一种治疗急性胆囊炎的中药组合物及其制备方法
CN105435134A (zh) 联合化疗药治疗胃癌的中药制剂
CN109731019A (zh) 一种具有化疗增效作用的组合物，包括其的药物、制备方法及应用
CN102526630B (zh) 治疗食道癌的中药、制备方法及给药方式
CN115282241B (zh) 防治结直肠癌肝转移的中药制剂及其制备方法和应用
CN106729579A (zh) 一种清下泻胰方剂
CN103191268B (zh) 一种治疗肺癌的中药组合物

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20180713