CN108272858A - 一种提高夏枯草药材品质的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种提高夏枯草药材品质的方法，步骤如下：a、取夏枯草药材；b、紫外光下照射，辐射强度120μW cm‑2照射120min，即可。本发明还提供了上述方法获得的夏枯草药材。本发明方法，能够显著提高夏枯草药材的黄酮含量及有机酸含量，显著增强其抗氧化能力，进而提高夏枯草药材的品质，开发应用前景良好。

Description

一种提高夏枯草药材品质的方法
技术领域
本发明属于中药材栽培技术领域，具体涉及一种对夏枯草进行UV-B辐射以提高其药材品质的方法。
背景技术
夏枯草Prunella vulgaris Linn为唇形科夏枯草属多年生草本植物，以干燥果穗入药，是我国常用中药材，历版《中国药典》收录。夏枯草味辛、苦，寒，归肝、胆经，具有清肝泻火，明目，消肿散结等功效。夏枯草具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗氧化、降血压等活性，在临床上广泛应用，常用于治疗乳腺炎、甲状腺肿大，抑制发热，消肿，加速伤口愈合等，应用前景广阔。
夏枯草果穗中主要含有黄酮、有机酸等有效成分，有机酸类主要成分为迷迭香酸。这些成分与夏枯草的药理作用有明显的相关性，其含量直接影响药材的品种。《中国药典》(2015版)中要求的夏枯草药材质量标准为：迷迭香酸(C18H16O8)含量不得少于0.20％。
目前对夏枯草药材的品质把控多集中在优良品种选择及栽培方法改进，未见通过采收后紫外线照射以提高其药材品质的报道。
发明内容
为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种对储藏期夏枯草药材进行UV-B辐射以提高其药材品质的方法。
本发明提供了一种提高夏枯草药材品质的方法，步骤如下：
a、取夏枯草药材；
b、紫外光下照射，辐射强度120μW cm-2照射120min，即可。
其中，步骤a中，所述夏枯草药材为夏枯草植物的成熟期果穗。
其中，所述果穗的采收时间为：6月中旬。
其中，所述果穗为干燥果穗。
其中，步骤a中，所述干燥的方法为：70℃下12小时。
其中，步骤b中，照射时，所述紫外光为波长为280-320nm的紫外光。
其中，步骤b中，照射时，距离干燥样品20cm高度。
其中，所述提高夏枯草药材品质是指提高了夏枯草药材的黄酮含量、迷迭香酸含量、异迷迭香酸含量及抗氧化能力。
本发明还提供了上述方法获得的夏枯草药材。
其中，它的迷迭香酸含量为0.24％w/w。
本发明通过特定的紫外线照射方法，能够显著提高夏枯草药材的黄酮含量及有机酸迷迭香酸和异迷迭香酸苷的含量，显著增强其抗氧化能力，进而提高夏枯草药材的品质，有利于夏枯草药材资源的开发利用。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施方式
下面以实施例作进一步说明，但本发明不局限于这些实施例。
本发明所用的实验试剂与仪器如下：
JJ124BC万分之一分析天平(上海仁沃实业发展有限公司)；HH-4数显恒温水浴锅(常州智博瑞仪器制造有限公司)；752紫外-可见分光光度计(上海菁华科技仪器有限公司)；电热鼓风干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司)；GF02100g多功能粉碎机(上海霸辉工具有限公司)；KH2200DB型数控超声波清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司)；RV10DS96旋转蒸发仪(IKA)；SHZ-D(III)循环水式真空泵(巩义市予华仪器有限责任公司)；RS-1型真空泵(上海博尔康真空电子有限公司)；C18色谱柱(250mm×4.6mm)(Uranus)；Dionex UltiMate3000色谱仪(Thermo)。
迷迭香酸(纯度≥98％，批号：151203)、芦丁(纯度≥98％，批号：151023)、咖啡酸(纯度≥98％，批号：151103)、金丝桃苷(纯度≥97％，批号：16081504)购自成都普菲德生物技术有限公司；异迷迭香酸苷(纯度≥98％，批号：Y035170426)购自成都瑞芬思生物科技有限公司；ABTS(2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐)购自xiya公司；Trolox(6-羟基-2,5,7,8-四甲基色烷-2-羧酸)购自博美公司；乙醇，亚硝酸钠，硝酸铝，氢氧化钠，磷酸二氢钠等为成都市金山化学试剂有限公司生产；甲醇为色谱纯，购自天津市科密欧化学试剂有限公司。
实施例1本发明提高夏枯草药材品质的方法
方法如下：
1、采种：收集的夏枯草Prunella vulgaris Linn种子进行筛选，选择饱满、无病虫害、均匀的种子并密封保存于阴凉干燥处；
2、种子处理：种子用25-30℃的水浸泡2小时，以提高发芽率达到95％；
3、播种：于当年11月中下旬播种于试验田(相对湿度40～60％、光照7000lux、昼夜温度25/12℃)，并进行正常的水肥管理，定期除草，播种10～15天后开始出苗；植株生长1个月之后适当间苗；
4、样品采收：6月中旬，采收成熟期果穗100株；在70℃干燥12小时后，用UV-B辐射处理。
5、UV-B处理：UV-B(280-320nm)荧光灯管悬于干燥样品上方20cm处，辐射强度120μW cm-2照射120min，在暗室进行照射以去除外界干扰。
以下通过试验例具体说明本发明的有益效果：
试验例1本发明UV-B辐射对夏枯草品质的考察
一、实验方法
方法如下：
1、采种：收集的夏枯草Prunella vulgaris Linn种子进行筛选，选择饱满、无病虫害、均匀的种子并密封保存于阴凉干燥处；
2、种子处理：种子用25-30℃的水浸泡2小时，以提高发芽率达到95％；
3、播种：于当年11月中下旬播种于试验田(相对湿度40～60％、光照7000lux、昼夜温度25/12℃)，并进行正常的水肥管理，定期除草，播种10～15天后开始出苗；植株生长1个月之后适当间苗；
4、样品采收：6月中旬，采收成熟期果穗100株；在70℃干燥12小时；
5、UV-B处理：UV-B(280-320nm)荧光灯管悬于干燥样品上方上方20cm处，辐射强度120μW cm-2照射120min，在暗室进行照射以去除外界干扰；以未接受照射的干燥样品为对照组。
在UV-B辐射后，夏枯草果穗样品打粉，过60目筛子，备用。
6、活性成分含量测定：用752紫外-可见分光光度计法测定总黄酮含量，高效液相色谱法测定咖啡酸、异迷迭香酸苷、迷迭香酸和金丝桃苷的含量；
测定方法如下：
标准曲线绘制：精密称取咖啡酸对照品2.3mg，迷迭香酸对照品4.5mg，异迷迭香酸苷对照品2.5mg，金丝桃苷对照品2.0mg，甲醇溶解并定容至10mL，摇匀，得含咖啡酸0.23mg·mL-1，迷迭香酸0.45mg·mL-1，异迷迭香酸苷0.25mg·mL-1，金丝桃苷0.20mg·mL-1对照品混合液。色谱柱：Uranus C18柱(250mm×4.6mm)；流动相：甲醇：0.2％的磷酸二氢钠梯度洗脱：0-20min，20％-40％甲醇，20-35min，40％-70％甲醇，35-45min，70％-90％甲醇，45-60min，90％-20％甲醇；流速：0.8mL·min-1；检测波长：325/360nm；柱温：30℃。精密吸取咖啡酸、迷迭香酸、异迷迭香酸苷和金丝桃苷对照品混合液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0μL进样，以含量(mg)为横坐标(X)，峰面积为纵坐标(Y)，绘制标准曲线，咖啡酸回归方程：Y＝64479X-2.1998，R2＝1；迷迭香酸回归方程：Y＝39260X-1.7247，R2＝1；异迷迭香酸苷回归方程：Y＝25976X-0.0501，R2＝0.9985；金丝桃苷回归方程：Y＝28455X-0.9085，R2＝1。
供试样品制备：精密称取夏枯草果穗干燥粉末2g，置于锥形瓶内，加入80％甲醇15mL，50℃，100W超声提取35min，抽滤，重复两次并合并滤液，浓缩并定容至6mL，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，作为供试液。
7、体外抗氧化能力：
制备夏枯草醇提物：取1g辐射或未经辐射的对照夏枯草果穗粉末，加入30mL 70％乙醇，70℃，100w，超声提取30min，过滤，重复提取三次，合并滤液，定容至100mL。
用752紫外-可见分光光度计法测定夏枯草醇提物的总抗氧化能力(TEAC)；
8、数据处理：试验数据用Microsoft Excel 2016进行初步处理，再用SPSS13.0软件进行分析。
二、实验结果
1、活性成分含量比较
见表1。
表1对照组和120μW cm-2UV-B照射处理120min后夏枯草主要活性成分含量的影响
组别 总黄酮 咖啡酸 迷迭香酸 异迷迭香酸苷
对照组 4.54±0.14b 0.0163±0.0007a 0.21±0.00a 0.22±0.00b
UV-B组别 4.92±0.13a 0.0161±0.0001a 0.24±0.00b 0.29±0.00a
测定值表示为平均值±标准差(n＝3)。小写字母a、b为方差分析p＜0.05差异显著性。字母标表表示纵向比较差异显著性。
如表1所示，与对照组相比，120μW cm-2UV-B辐射后，夏枯草成熟期果穗的总黄酮、迷迭香酸及异迷迭香酸苷含量均显著提高，果穗咖啡酸含量变化不大。
因此，本发明辐射方法可大大提高夏枯草果穗的黄酮、有机酸有效成分，从而显著提高夏枯草药材的品质。
2、夏枯草醇提物的体外抗氧化能力(TEAC)比较
见表2。
表2对照组和120μW cm-2UV-B照射处理120min后的夏枯草醇提物总抗氧化能力
(TEAC)(mmol/l trolox)
测定值表示为平均值±标准差(n＝3)。小写字母a、b为方差分析p＜0.05差异显著性。字母标表表示纵向比较差异显著性。
如表2所示，对照组和120μW cm-2UV-B辐射组成熟期果穗TEAC值分别为0.80、1.00，说明UV-B辐射使总抗氧化能力显著增强。
综上，本发明辐射方法可大大提高夏枯草果穗的有效成分含量，并提高其抗氧化能力，从而显著提高夏枯草药材的品质。
试验例2本发明UV-B辐射参数的筛选
辐射材料为成熟期果穗：
1、在辐射时间均为120min时，筛选了不同辐射强度下，相关活性成分含量。测定结果如下：
可见，当采用不同强度的UV-B照射时，夏枯草的活性成分变化较大，其中，当辐射强度为120μW cm-2时，夏枯草果穗的迷迭香酸及异迷迭香酸苷含量最高，与对照相比，含量均有显著提高；而且咖啡酸含量保持稳定。当辐射强度增大或降低时，迷迭香酸及异迷迭香酸苷含量增加有限，甚至会显著下降，而且咖啡酸含量均有不同程度的降低。
综上，本发明通过选择特定的紫外线照射方法，显著提高了夏枯草药材的黄酮含量及有机酸迷迭香酸和异迷迭香酸苷的含量，显著增强其抗氧化能力，进而提高夏枯草药材的品质，有利于夏枯草药材资源的开发利用。

Claims (10)

1.一种提高夏枯草药材品质的方法，其特征在于：步骤如下：
a、取夏枯草药材；
b、紫外光下照射，辐射强度120μW cm-2照射120min，即可。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤a中，所述夏枯草药材为夏枯草植物的成熟期果穗。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述果穗的采收时间为：6月中旬。
4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于：所述果穗为干燥果穗。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：步骤a中，所述干燥的方法为：70℃下12小时。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤b中，照射时，所述紫外光为波长为280-320nm的紫外光。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤b中，照射时，距离干燥样品20cm高度。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述提高夏枯草药材品质是指提高了夏枯草药材的黄酮含量、迷迭香酸含量、异迷迭香酸含量及抗氧化能力。
9.权利要求1-8任意一项方法获得的夏枯草药材。
10.根据权利要求9所述的药材，其特征在于：它的迷迭香酸含量为0.24％w/w。
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