CN108201137A - 一种氨基酸螯合物的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种氨基酸螯合物的制备方法，是通过水解大豆蛋白提取其中的氨基酸作为螯合配体，采用混合氨基酸与金属离子矿物质在稳定剂、适当的PH值、温度、溶液等电点条件下螯合反应制备螯合物，制备方法简单，螯合性好，制得的氨基酸螯合物螯合率高，与传统单一氨基酸螯合形成的化合物相比，具有更好的生理活性，能促进生物体对矿物质金属离子的吸收和利用。
Description
技术领域
本发明涉及一种氨基酸螯合物的制备方法，属于保健品加工技术领域。
背景技术
氨基酸螯合物是1个或多个氨基酸基团与金属离子发生配合反应形成的具有环状结构的化合物，它具有稳定性好、吸收率高、生物效价高、毒性小等优点，目前已经广泛地运用于生产和和活的各个方面，特别是作为一种新型的营养补充剂在药品和保健食品上应用，取得了很好的效果。
现阶段，氨基酸螯合物的制备方法，主要有化学合成法和电解-半透膜法，这两种方法存在的问题：反应慢、时间长、产物螯合率低，而且去除没有参与合成的剩余反应物较困难，因此，规模化生产较为困难。
发明内容
本发明的目的在于针对上述现有技术的不足，提供一种螯合率高、可规模化生产的氨基酸螯合物的制备方法。
为实现上述目的，本发明氨基酸螯合物的制备方法，包括以下步骤：
1)大豆蛋白预处理：将大豆蛋白液在90℃加热处理10-15min；
2)水解大豆蛋白：将经过预处理的大豆蛋白液调节至50-60℃，用0.5mol/L的NaOH溶液调节pH值为8.0-8.5，向溶液中加入3000U/gS9碱性蛋白酶恒温酶解2-3小时，酶解过程中不断搅拌，同时补充0.5mol/L的NaOH溶液以保持反应体系pH值恒定；
3)制备氨基酸混合液：水解后的溶液经沉淀、离心分离、脱盐、脱色、浓缩得到精制水解蛋白液，向水解蛋白液中补充添加甘氨酸、门冬氨酸，制成氨基酸混合液；
4)制备氨基酸螯合物：在氨基酸混合液中加入矿物质原料，搅拌均匀，加入柠檬酸调节溶液的PH值为5-6，升温至80℃，搅拌反应40-50min，反应过程中不断测定溶液的等电点，当溶液pI值达到5.3时，反应液迅速降温至10℃，恒温静置24小时以上，再将溶液迅速冷冻干燥，制得的干燥物即为氨基酸螯合物。
进一步的，在步骤3)中，脱盐采用732阳离子交换柱纯化脱盐，柱长：2000cm，柱温：常温，洗脱液：0.5mol/L氨水，洗脱速度：2mL/min。
进一步的，在步骤4)中，加入的矿物质原料选自食品级的碳酸钙、氢氧化钙、氢氧化镁、碳酸镁、碳酸锰、氧化锌、五氧化二钒、硫酸铜、硼砂中的至少一种。
本发明通过水解大豆蛋白提取其中的游离氨基酸作为螯合配体，采用混合氨基酸与金属离子矿物质在稳定剂、适当的PH值、温度、溶液等电点条件下螯合反应制备螯合物，制备方法简单，螯合性好，制得的氨基酸螯合物螯合率高，与传统单一氨基酸螯合形成的化合物相比，具有更好的生理活性，能促进生物体对矿物质金属离子的吸收和利用。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明，但并不构成对本发明的任何限制。
实施例1
1)大豆蛋白预处理：将大豆蛋白液在90℃加热处理10-15min；
2)水解大豆蛋白：将经过预处理的大豆蛋白液调节至50℃，用0.5mol/L的NaOH溶液调节pH值为8.0，向溶液中加入3000U/gS9碱性蛋白酶恒温酶解2.5小时，酶解过程中不断搅拌，同时补充0.5mol/L的NaOH溶液以保持反应体系pH值恒定；
3)制备氨基酸混合液：水解后的溶液经沉淀、离心分离、脱盐(采用732阳离子交换柱纯化脱盐，柱长：2000cm，柱温：常温，洗脱液：0.5mol/L氨水，洗脱速度：2mL/min)、脱色、浓缩得到精制水解蛋白液，向水解蛋白液中补充添加甘氨酸、门冬氨酸，制成氨基酸混合液；
4)制备氨基酸螯合物：在100mL氨基酸混合液中加入碳酸钙2.0g、碳酸镁1.23g、氧化锌0.32g，搅拌均匀，加入柠檬酸0.525g调节溶液的PH值为5.0，升温至80℃，搅拌反应40-50min，反应过程中不断测定溶液的等电点，当溶液pI值达到5.3时，反应液迅速降温至10℃，恒温静置24小时以上，再将溶液迅速冷冻干燥，制成干燥物，即得。
采用凝胶色谱法测定本实施例螯合物的螯合率，测定结果如下：
| 螯合产物名称 | 螯合率 |
| 氨基酸螯合钙 | 94％ |
| 氨基酸螯合镁 | 90％ |
| 氨基酸螯合锌 | 90％ |
实施例2
1)大豆蛋白预处理：将大豆蛋白液在90℃加热处理10-15min；
2)水解大豆蛋白：将经过预处理的大豆蛋白液调节至55℃，用0.5mol/L的NaOH溶液调节pH值为8.2，向溶液中加入3000U/gS9碱性蛋白酶恒温酶解2小时，酶解过程中不断搅拌，同时补充0.5mol/L的NaOH溶液以保持反应体系pH值恒定；
3)制备氨基酸混合液：水解后的溶液经沉淀、离心分离、脱盐(采用732阳离子交换柱纯化脱盐，柱长：2000cm，柱温：常温，洗脱液：0.5mol/L氨水，洗脱速度：2mL/min)、脱色、浓缩得到精制水解蛋白液，向水解蛋白液中补充添加甘氨酸、门冬氨酸，制成氨基酸混合液；
4)制备氨基酸螯合物：在100mL氨基酸混合液中加入氢氧化钙1.68g、碳酸锰1.37g、硫酸铜1.08g、硼砂0.96g，搅拌均匀，加入柠檬酸0.45g调节溶液的PH值为5.5，升温至80℃，搅拌反应40-50min，反应过程中不断测定溶液的等电点，当溶液pI值达到5.3时，反应液迅速降温至10℃，恒温静置24小时以上，再将溶液迅速冷冻干燥，制成干燥物，即得。
采用凝胶色谱法测定本实施例螯合物的螯合率，测定结果如下：
| 螯合产物名称 | 螯合率 |
| 氨基酸螯合钙 | 96％ |
| 氨基酸螯合锰 | 94％ |
| 氨基酸螯合铜 | 95％ |
| 氨基酸螯合硼 | 93％ |
实施例3
1)大豆蛋白预处理：将大豆蛋白液在90℃加热处理10-15min；
2)水解大豆蛋白：将经过预处理的大豆蛋白液调节至60℃，用0.5mol/L的NaOH溶液调节pH值为8.5，向溶液中加入3000U/gS9碱性蛋白酶恒温酶解3小时，酶解过程中不断搅拌，同时补充0.5mol/L的NaOH溶液以保持反应体系pH值恒定；
3)制备氨基酸混合液：水解后的溶液经沉淀、离心分离、脱盐(采用732阳离子交换柱纯化脱盐，柱长：2000cm，柱温：常温，洗脱液：0.5mol/L氨水，洗脱速度：2mL/min)、脱色、浓缩得到精制水解蛋白液，向水解蛋白液中补充添加甘氨酸、门冬氨酸，制成氨基酸混合液；
4)制备氨基酸螯合物：在100mL氨基酸混合液中加入氢氧化镁1.16g、氧化锌1.08g、五氧化二钒1.05g，搅拌均匀，加入柠檬酸0.455g调节溶液的PH值为6.0，升温至80℃，搅拌反应40-50min，反应过程中不断测定溶液的等电点，当溶液pI值达到5.3时，反应液迅速降温至10℃，恒温静置24小时以上，再将溶液迅速冷冻干燥，制成干燥物，即得。
采用凝胶色谱法测定本实施例螯合物的螯合率，测定结果如下：
| 螯合产物名称 | 螯合率 |
| 氨基酸螯合镁 | 91％ |
| 氨基酸螯合锌 | 89％ |
| 氨基酸螯合钒 | 99％ |
Claims (3)
1.一种氨基酸螯合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）大豆蛋白预处理：将大豆蛋白液在90℃加热处理10-15min；
2）水解大豆蛋白：将经过预处理的大豆蛋白液调节至50-60℃，用0.5mol/L的NaOH溶液调节pH值为8.0-8.5，向溶液中加入3000U/gS9碱性蛋白酶恒温酶解2-3小时，酶解过程中不断搅拌，同时补充0.5mol/L的NaOH溶液以保持反应体系pH值恒定；
3）制备氨基酸混合液：水解后的溶液经沉淀、离心分离、脱盐、脱色、浓缩得到精制水解蛋白液，向水解蛋白液中补充添加甘氨酸、门冬氨酸，制成氨基酸混合液；
4）制备氨基酸螯合物：在氨基酸混合液中加入矿物质原料，搅拌均匀，加入柠檬酸调节溶液的PH值为5-6，升温至80℃，搅拌反应40-50min，反应过程中不断测定溶液的等电点，当溶液pI值达到5.3时，反应液迅速降温至10℃，恒温静置24小时以上，再将溶液迅速冷冻干燥，制得的干燥物即为氨基酸螯合物。
2.根据权利要求1所述的氨基酸螯合物的制备方法，其特征在于，所述步骤3）中，脱盐采用732阳离子交换柱纯化脱盐，柱长：2000cm，柱温：常温，洗脱液：0.5mol/L氨水，洗脱速度：2mL/min。
3.根据权利要求1所述的氨基酸螯合物的制备方法，其特征在于，所述步骤4）中，加入的矿物质原料选自食品级的碳酸钙、氢氧化钙、氢氧化镁、碳酸镁、碳酸锰、氧化锌、五氧化二钒、硫酸铜、硼砂中的至少一种。
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