CN108186388B - 一种祛斑护肤品及其制备方法 - Google Patents
一种祛斑护肤品及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开一种祛斑护肤品，包括如下成分：苯乙基间苯二酚、丁基间苯二酚、1‑甲基乙内酰脲‑2‑酰亚胺、丹皮酚及其衍生物和燕麦生物碱衍生物。本发明的护肤品中，苯乙基间苯二酚、丁基间苯二酚、1‑甲基乙内酰脲‑2‑酰亚胺、丹皮酚及其衍生物和燕麦生物碱衍生物的复配能有效抑制黑色素的生成，减低色素沉降。同时，丹皮酚的抗氧化能力能有效抑制苯乙基间苯二酚等成分的氧化，提高产品的稳定性。燕麦生物碱的抗炎、抗刺痛功效能有效缓解间苯二酚衍生物所带来的刺激性，实现产品对皮肤的温和无刺激。与现有祛斑产品相比，本发明的祛斑护肤品在美白祛斑方面具有更显著的效果，能从根本上去除色斑、预防色斑产生，且对皮肤温和无刺激。
Description
技术领域
本发明涉及化妆品领域，尤其涉及一种高效温和的祛斑护肤品及其制备方法。
背景技术
色斑是一种常见的色素代谢增生性损美性皮肤病，是因皮肤内色素增多而使皮肤上出现的黑色的、黄褐色的斑点。在皮肤代谢循环过程中，存在于黑色素细胞组织中的酪氨酸在酪氨酸酶、多巴色素互变酶、DHICA氧化酶作用下经多巴、多巴醌、多巴色素、二羟基吲哚等中间体逐步转变为真黑色素。当黑色素过速增长和分布不均时，就造成局部皮肤过黑及色素沉着，从而产生色斑。随着年龄的增长，皮肤出现色斑的几率明显增加，成为困扰人类皮肤的一大问题，通过防止黑色素的产生可以达到有效的美白祛斑效果。
目前，人们用来应对皮肤色斑的措施有如下几种：1.涂抹药物，通常采用纯中药膏状药物或化学药物，但往往治疗效果不理想，容易反弹，而部分有效的化学药物则具有刺激性，使用后有刺痛感，甚至会导致过敏。2.用遮光剂来遮盖色斑，但只是暂时性的遮盖，并不具备祛斑效果。3.采用机械磨削法将皮肤表层的色斑磨除，该种方法治标不治本，而且创面大、不易操作、易造成色素沉着，不能有效预防色斑的产生。
发明内容
本发明的目的在于克服上述现有技术的缺点和不足，提供一种高效温和的祛斑护肤品及其制备方法。
为达到其目的，本发明所采用的技术方案为：
一种祛斑护肤品，包括如下成分：苯乙基间苯二酚、丁基间苯二酚、1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺、丹皮酚及其衍生物和燕麦生物碱衍生物。
作为上述技术方案的优选，所述燕麦生物碱衍生物包括二氢燕麦酰基邻氨基苯甲酸。
作为上述技术方案的优选，所述丹皮酚及其衍生物包括：丹皮酚、丹皮酚卤代物、丹皮酚酯、丹皮酚磺化物和丹皮酚-β-环糊精包合物。
作为上述技术方案的优选，所述苯乙基间苯二酚在所述护肤品中的质量百分含量为0.05％～0.5％，所述丁基间苯二酚在所述护肤品中的质量百分含量为0.05％～5％，所述1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺在所述护肤品中的质量百分含量为0.05％～5％，所述丹皮酚及其衍生物在所述护肤品中的质量百分含量为0.1％～5％，所述燕麦生物碱衍生物在所述护肤品中的质量百分含量为0.05％～5％。
作为上述技术方案的优选，所述苯乙基间苯二酚在所述护肤品中的质量百分含量为0.2％～0.5％，所述丁基间苯二酚在所述护肤品中的质量百分含量为0.2％～3％，所述1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺在所述护肤品中的质量百分含量为0.2％～3％，所述丹皮酚及其衍生物在所述护肤品中的质量百分含量为2％～3％，所述燕麦生物碱衍生物在所述护肤品中的质量百分含量为0.2％～3％。。
目前，针对黑色素生成的不同阶段，有以下三大美白机理：
(1)抑制酪氨酸酶生成。抑制黑色素细胞中酪氨酸酶基因表达，即抑制酪氨酸酶的合成，使酪氨酸酶的含量下降，即可减少黑色素的形成，如维生素A。
(2)抑制酪氨酸酶活性。酪氨酸酶是黑色素形成的重要限速酶，能够催化酪氨酸氧化，逐步形成多巴和多巴醌，多巴醌在经过进一步重排、氧化、聚合形成黑色素。酪氨酸酶活性抑制机理可细分为：竞争性抑制、还原性抑制和络合性抑制。目前市场上的美白原料大多属于还原性抑制剂，容易变色，如维生素C及其衍生物、熊果苷等。
(3)抑制黑素小体的转移。黑色素由皮肤表皮层的黑色素细胞合成，通过突触转移到角质形成细胞，角质形成细胞中的黑色素含量越多，表现为皮肤颜色越沉。抑制黑色素转移到角质形成细胞，即可降低角质形成细胞黑色素含量，提亮肤色，如烟酰胺。
苯乙基间苯二酚和丁基间苯二酚在护肤品中作为一种紫外光吸收剂，能够竞争性抑制酪氨酸酶活性，主要抑制黑色素B16细胞；其抑制酪氨酸酶活性的效果为β-熊果苷的100倍、曲酸的22倍，甚至好于2％氢醌的抑制黑色素效果，而且还具有清除自由基和抗炎症等作用。
1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺为天然的氨基酸衍生物，在哺乳动物细胞内普遍存在，是一种无细胞毒性的、长期使用无副作用的温和美白祛斑原料，是强大的美白剂，同时具有抑制酪氨酸酶活性、抑制黑素小体转移的双重功能。1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺对酪氨酸酶活性的抑制属于竞争性抑制剂，而非还原性抑制，抑制效果稳定，不易变色。
丹皮酚又称牡丹酚，化学名为：2-羟基-4-甲氧基苯乙酮，是一种牡丹花根部的外皮的提取物，具有抗炎、抗氧化、美白等功效。美白功效的部分效果来自它的抗氧化功效(抑制在酪氨酸酶作用下将多巴转成黑色素过程中的氧化反应)，通过B16老鼠细胞的测试，证明丹皮酚及其衍生物具有强烈的黑色素抑制作用，强于曲酸而且没有细胞毒性。此外，丹皮酚及其衍生物能抑制细胞内O2-自由基产生，能使皮肤增白，将皮肤中的沉积色素还原退色，消淤化斑。
组胺是过敏和干燥皮肤中的致痒介质，由肥大细胞释放。燕麦生物碱衍生物能够抑制P物质诱导肥大细胞释放组胺，缓解皮肤瘙痒。另外，燕麦生物碱还能够抑制角化细胞释放IL-1-β、IL-8引起的过敏，能有效缓解间苯二酚衍生物所带来的刺激性。
本发明以苯乙基间苯二酚、丁基间苯二酚、1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺、丹皮酚及其衍生物和燕麦生物碱衍生物作为护肤品的功能成分。苯乙基间苯二酚、丁基间苯二酚、1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺、丹皮酚及其衍生物和燕麦生物碱衍生物的复配能有效抑制黑色素的生成，减低色素沉降。同时，丹皮酚的抗氧化能力能有效抑制苯乙基间苯二酚等成分的氧化，提高产品的稳定性。燕麦生物碱的抗炎、抗刺痛功效能有效缓解间苯二酚衍生物所带来的刺激性，实现产品对皮肤的温和无刺激。
一种祛斑面霜，按质量百分含量计，由如下成分组成：苯乙基间苯二酚0.05％～0.5％、丁基间苯二酚0.05％～5％、1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺0.05％～5％、丹皮酚及其衍生物0.1％～5％、燕麦生物碱衍生物0.05％～5％、硬脂酸甘油酯2.5％、鲸蜡硬脂基葡糖苷1.5％、肉豆蔻酸异丙酯5％、十六烷基磷酸酯钾盐1％、高级烷基C16-18-醇3.5％、辛酸/癸酸甘油三酯(GTCC，由辛酸/癸酸和甘油酯化而成的高纯度油脂)5％、棕榈酸异辛酯5％、二苯甲酮-3(2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮)0.4％、维生素E 0.5％、氮酮2％、汉生胶0.3％、硅酸镁铝0.25％、三甲基甘氨酸2％、尼泊金甲酯0.2％、烟酰胺2％、植酸0.28％、焦亚硫酸钠0.2％、305乳化剂(聚丙烯酰胺和脂肪醇聚氧乙烯醚的混合物)1％、香精0.2％和防腐剂G-Plus(主要成分为乙内酰脲衍生物，购买厂家：Lonza)0.25％，余量为去离子水。
作为上述技术方案的优选，所述的祛斑面霜，按质量百分含量计，由如下成分组成：苯乙基间苯二酚0.5％、丁基间苯二酚1％、1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺2％、丹皮酚及其衍生物2％、燕麦生物碱衍生物2％、硬脂酸甘油酯2.5％、鲸蜡硬脂基葡糖苷1.5％、肉豆蔻酸异丙酯5％、十六烷基磷酸酯钾盐1％、高级烷基C16-18-醇3.5％、辛酸/癸酸甘油三酯5％、棕榈酸异辛酯5％、二苯甲酮-3 0.4％、维生素E 0.5％、氮酮2％、汉生胶0.3％、硅酸镁铝0.25％、三甲基甘氨酸2％、尼泊金甲酯0.2％、烟酰胺2％、植酸0.28％、焦亚硫酸钠0.2％、305乳化剂1％、香精0.2％和防腐剂G-Plus 0.25％，余量为去离子水。
作为上述技术方案的优选，所述的祛斑面霜，按质量百分含量计，由如下成分组成：苯乙基间苯二酚0.4％、丁基间苯二酚2％、1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺2.5％、丹皮酚及其衍生物2.5％、燕麦生物碱衍生物3％、硬脂酸甘油酯2.5％、鲸蜡硬脂基葡糖苷1.5％、肉豆蔻酸异丙酯5％、十六烷基磷酸酯钾盐1％、高级烷基C16-18-醇3.5％、辛酸/癸酸甘油三酯5％、棕榈酸异辛酯5％、二苯甲酮-30.4％、维生素E 0.5％、氮酮2％、汉生胶0.3％、硅酸镁铝0.25％、三甲基甘氨酸2％、尼泊金甲酯0.2％、烟酰胺2％、植酸0.28％、焦亚硫酸钠0.2％、305乳化剂1％、香精0.2％和防腐剂G-Plus 0.25％，余量为去离子水。
作为上述技术方案的优选，所述的祛斑面霜，按质量百分含量计，由如下成分组成：苯乙基间苯二酚0.3％、丁基间苯二酚3％、1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺3％、丹皮酚及其衍生物3％、燕麦生物碱衍生物2.5％、硬脂酸甘油酯2.5％、鲸蜡硬脂基葡糖苷1.5％、肉豆蔻酸异丙酯5％、十六烷基磷酸酯钾盐1％、高级烷基C16-18-醇3.5％、辛酸/癸酸甘油三酯5％、棕榈酸异辛酯5％、二苯甲酮-3 0.4％、维生素E 0.5％、氮酮2％、汉生胶0.3％、硅酸镁铝0.25％、三甲基甘氨酸2％、尼泊金甲酯0.2％、烟酰胺2％、植酸0.28％、焦亚硫酸钠0.2％、305乳化剂1％、香精0.2％和防腐剂G-Plus 0.25％，余量为去离子水。
所述祛斑面霜的制备方法为：将除1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺、丹皮酚及其衍生物和燕麦生物碱衍生物以外的其他成分在去离子水中加热溶解，混合均匀，然后加入1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺，混合均匀，再分别加入丹皮酚及其衍生物、燕麦生物碱衍生物，混合均匀即可。
本发明的有益效果为：本发明的护肤品中，苯乙基间苯二酚、丁基间苯二酚、1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺、丹皮酚及其衍生物和燕麦生物碱衍生物的复配能有效抑制黑色素的生成，减低色素沉降。同时，丹皮酚的抗氧化能力能有效抑制苯乙基间苯二酚等成分的氧化，提高产品的稳定性。燕麦生物碱的抗炎、抗刺痛功效能有效缓解间苯二酚衍生物所带来的刺激性，实现产品对皮肤的温和无刺激。与现有祛斑产品相比，本发明的祛斑护肤品在美白祛斑方面具有更显著的效果，能从根本上去除色斑、预防色斑产生，且对皮肤温和无刺激。
具体实施方式
为更清楚地表述本发明的技术方案，下面结合具体实施例进一步说明，但不能用于限制本发明，此仅是本发明的部分实施例而已。
实施例1
本实施例1提供一种祛斑面霜，按质量百分含量计，该祛斑面霜由如下成分组成：苯乙基间苯二酚0.5％、丁基间苯二酚1％、1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺2％、丹皮酚及其衍生物2％、燕麦生物碱衍生物2％、硬脂酸甘油酯2.5％、鲸蜡硬脂基葡糖苷1.5％、肉豆蔻酸异丙酯5％、十六烷基磷酸酯钾盐1％、高级烷基C16-18-醇3.5％、辛酸/癸酸甘油三酯5％、棕榈酸异辛酯5％、二苯甲酮-3 0.4％、维生素E 0.5％、氮酮2％、汉生胶0.3％、硅酸镁铝0.25％、三甲基甘氨酸2％、尼泊金甲酯0.2％、烟酰胺2％、植酸0.28％、焦亚硫酸钠0.2％、305乳化剂1％、香精0.2％和防腐剂G-Plus 0.25％，余量为去离子水。
本实施例的燕麦生物碱衍生物为二氢燕麦酰基邻氨基苯甲酸。
本实施例的丹皮酚及其衍生物包括：丹皮酚、丹皮酚卤代物、丹皮酚酯、丹皮酚磺化物和丹皮酚-β-环糊精包合物。
该祛斑面霜的制备方法为：将除1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺、丹皮酚及其衍生物和燕麦生物碱衍生物以外的其他成分在去离子水中加热溶解到80℃，混合均匀，然后加入1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺，混合均匀，再分别加入丹皮酚及其衍生物、燕麦生物碱衍生物，混合均匀即可。
实施例2
本实施例2提供一种祛斑面霜，按质量百分含量计，该祛斑面霜由如下成分组成：苯乙基间苯二酚0.4％、丁基间苯二酚2％、1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺2.5％、丹皮酚及其衍生物2.5％、燕麦生物碱衍生物3％、硬脂酸甘油酯2.5％、鲸蜡硬脂基葡糖苷1.5％、肉豆蔻酸异丙酯5％、十六烷基磷酸酯钾盐1％、高级烷基C16-18-醇3.5％、辛酸/癸酸甘油三酯5％、棕榈酸异辛酯5％、二苯甲酮-30.4％、维生素E 0.5％、氮酮2％、汉生胶0.3％、硅酸镁铝0.25％、三甲基甘氨酸2％、尼泊金甲酯0.2％、烟酰胺2％、植酸0.28％、焦亚硫酸钠0.2％、305乳化剂(聚丙烯酰胺和脂肪醇聚氧乙烯醚的混合物)1％、香精0.2％和防腐剂G-Plus0.25％，余量为去离子水。
本实施例的燕麦生物碱衍生物为二氢燕麦酰基邻氨基苯甲酸。
本实施例的丹皮酚及其衍生物包括：丹皮酚、丹皮酚卤代物、丹皮酚酯、丹皮酚磺化物和丹皮酚-β-环糊精包合物。
该祛斑面霜的制备方法与实施例1的制备方法相同。
实施例3
本实施例3提供一种祛斑面霜，按质量百分含量计，该祛斑面霜由如下成分组成：苯乙基间苯二酚0.3％、丁基间苯二酚3％、1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺3％、丹皮酚及其衍生物3％、燕麦生物碱衍生物2.5％、硬脂酸甘油酯2.5％、鲸蜡硬脂基葡糖苷1.5％、肉豆蔻酸异丙酯5％、十六烷基磷酸酯钾盐1％、高级烷基C16-18-醇3.5％、辛酸/癸酸甘油三酯5％、棕榈酸异辛酯5％、二苯甲酮-3 0.4％、维生素E 0.5％、氮酮2％、汉生胶0.3％、硅酸镁铝0.25％、三甲基甘氨酸2％、尼泊金甲酯0.2％、烟酰胺2％、植酸0.28％、焦亚硫酸钠0.2％、305乳化剂1％、香精0.2％和防腐剂G-Plus 0.25％，余量为去离子水。
本实施例的燕麦生物碱衍生物为二氢燕麦酰基邻氨基苯甲酸。
本实施例的丹皮酚及其衍生物包括：丹皮酚、丹皮酚卤代物、丹皮酚酯、丹皮酚磺化物和丹皮酚-β-环糊精包合物。
该祛斑面霜的制备方法与实施例1的制备方法相同。
实施例4
本实施例4提供一种祛斑面霜，按质量百分含量计，该祛斑面霜由如下成分组成：苯乙基间苯二酚0.05％、丁基间苯二酚5％、1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺5％、丹皮酚及其衍生物5％、燕麦生物碱衍生物5％、硬脂酸甘油酯2.5％、鲸蜡硬脂基葡糖苷1.5％、肉豆蔻酸异丙酯5％、十六烷基磷酸酯钾盐1％、高级烷基C16-18-醇3.5％、辛酸/癸酸甘油三酯5％、棕榈酸异辛酯5％、二苯甲酮-3 0.4％、维生素E 0.5％、氮酮2％、汉生胶0.3％、硅酸镁铝0.25％、三甲基甘氨酸2％、尼泊金甲酯0.2％、烟酰胺2％、植酸0.28％、焦亚硫酸钠0.2％、305乳化剂1％、香精0.2％和防腐剂G-Plus 0.25％，余量为去离子水。
本实施例的燕麦生物碱衍生物为二氢燕麦酰基邻氨基苯甲酸。
本实施例的丹皮酚及其衍生物包括：丹皮酚、丹皮酚卤代物、丹皮酚酯、丹皮酚磺化物和丹皮酚-β-环糊精包合物。
该祛斑面霜的制备方法与实施例1的制备方法相同。
实施例5
本实施例5提供一种祛斑面霜，按质量百分含量计，该祛斑面霜由如下成分组成：苯乙基间苯二酚0.5％、丁基间苯二酚0.05％、1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺0.05％、丹皮酚及其衍生物0.1％、燕麦生物碱衍生物0.05％、硬脂酸甘油酯2.5％、鲸蜡硬脂基葡糖苷1.5％、肉豆蔻酸异丙酯5％、十六烷基磷酸酯钾盐1％、高级烷基C16-18-醇3.5％、辛酸/癸酸甘油三酯5％、棕榈酸异辛酯5％、二苯甲酮-3 0.4％、维生素E 0.5％、氮酮2％、汉生胶0.3％、硅酸镁铝0.25％、三甲基甘氨酸2％、尼泊金甲酯0.2％、烟酰胺2％、植酸0.28％、焦亚硫酸钠0.2％、305乳化剂1％、香精0.2％和防腐剂G-Plus 0.25％，余量为去离子水。
本实施例的燕麦生物碱衍生物为二氢燕麦酰基邻氨基苯甲酸。
本实施例的丹皮酚及其衍生物包括：丹皮酚、丹皮酚卤代物、丹皮酚酯、丹皮酚磺化物和丹皮酚-β-环糊精包合物。
该祛斑面霜的制备方法与实施例1的制备方法相同。
实施例6
本实施例6提供一种祛斑面霜，按质量百分含量计，该祛斑面霜由如下成分组成：苯乙基间苯二酚0.3％、丁基间苯二酚0.5％、1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺0.5％、丹皮酚及其衍生物1％、燕麦生物碱衍生物0.8％、硬脂酸甘油酯2.5％、鲸蜡硬脂基葡糖苷1.5％、肉豆蔻酸异丙酯5％、十六烷基磷酸酯钾盐1％、高级烷基C16-18-醇3.5％、辛酸/癸酸甘油三酯5％、棕榈酸异辛酯5％、二苯甲酮-30.4％、维生素E 0.5％、氮酮2％、汉生胶0.3％、硅酸镁铝0.25％、三甲基甘氨酸2％、尼泊金甲酯0.2％、烟酰胺2％、植酸0.28％、焦亚硫酸钠0.2％、305乳化剂1％、香精0.2％和防腐剂G-Plus 0.25％，余量为去离子水。
本实施例的燕麦生物碱衍生物为二氢燕麦酰基邻氨基苯甲酸。
本实施例的丹皮酚及其衍生物包括：丹皮酚、丹皮酚卤代物、丹皮酚酯、丹皮酚磺化物和丹皮酚-β-环糊精包合物。
该祛斑面霜的制备方法与实施例1的制备方法相同。
对比例1：与实施例1相比，缺少苯乙基间苯二酚和1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺。
对比例2：与实施例2相比，缺少丹皮酚及其衍生物和丁基间苯二酚。
对比例3：与实施例3相比，缺少燕麦生物碱衍生物。
实验例
一、刺激性试验
1.试验目的：以实施例1～6和对照组1～3提供的祛斑面霜作为受试物，检测其刺激性。
2.试验对象：由四川省实验动物专委会养殖场提供的皮肤无损伤的日本大耳白兔，数量45只，体重2.0～2.5kg，动物合格证号：SCXK(川)2017-8，普通级。白兔随机分组，每组5只。
3.试验方法：试验开始前，在不损伤白兔皮肤的前提下，将白兔背部脊柱两侧背毛刮掉，去毛范围各为3cm×3cm。取受试物1g涂抹在一侧皮肤上，涂抹面积为2.5cm×2.5cm，然后用二层纱布(2.5cm×2.5cm)和一层玻璃纸覆盖，再用医用胶布固定；另一侧皮肤作空白对照。敷贴4h，拿除覆盖物后1h、24h、48h和72h观察涂抹部位皮肤反应，与对照部位对比后评分。按《化妆品安全技术规范2015版》中皮肤刺激反应评分标准评分，根据1h、24h、48h和72h各观察时点的刺激反应最高积分均值，按皮肤刺激强度分级标准判定受试物对皮肤的刺激强度，共分3个档次：(皮-)：无刺激性；(皮+)：轻刺激性；(皮++)：中刺激性。结果见表1。
表1
日本大耳白兔对有刺激性的物质较人类敏感，因而可根据受试物对日本大耳白兔的刺激性试验结果来判定受试物对人类皮肤是否具有刺激性。
从表1可看出，本发明实施例1～6的祛斑面霜对日本大耳白兔的皮肤均无刺激性，而对比例3由于缺少燕麦生物碱衍生物对日本大耳白兔具有轻刺激性，说明本发明的祛斑护肤品配方温和无刺激，也说明燕麦生物碱衍生物能有效缓解刺激成分所带来的刺激性，使祛斑面霜温和无刺激。。
二、抑制黑色素的功效评价
实验材料：B16F10，DMEM培养基，胰蛋白酶，DPBS，70％酒精，NaOH，DMSO；
实验方法：
(1)将B16F10细胞消化后，利用DMEM培基分散细胞，利用Hemacytometer来计数细胞，然后利用DMEM来稀释细胞，稀释到浓度为5×104cells/ml。
(2)稀释后的细胞溶液分别接种到6well中，每一孔为2ml，即1×105cells/well。
(3)在37℃，5％CO2的培养箱中培养24小时。
(4)待测样品准备：待测样品用DMEM培基稀释，稀释后的浓度分别为：50％(该浓度通过前面的MTT测试，结果为无毒)。
(5)细胞培养24小时后，观察细胞是否完全贴壁生长，如果细胞完全贴壁生长的话，将原培基移除，用DPBS洗涤。
(6)将DPBS移除之后，分别加入前面准备好的样品。样品的溶度根据毒性测试的结果选择安全浓度100ppm(2ml/well)。
(7)样品加入之后，放入37℃，5％CO2的培养箱中培养48小时。
(8)分别收集培基和细胞，分别测试细胞外与细胞内的黑色素的含量。
(9)培基部分：13500rpm×10mins离心后，取上层清液在波长415nm处测量吸光光度。
(10)细胞部分：将B16F10细胞消化后收集起来，13500rpm×10mins离心后，移除上层清液。底部的B16F10细胞中加入0.3ml的10％DMSO，1N NaOH溶液，80℃水浴中裂解1小时。
(11)1小时后裂解液冷却至室温，13500rpm x 10mins离心后收集上层清液。
(12)利用酶标仪在波长415nm处测量上层清液的吸光光度OD。
(13)配置黑色素标样，浓度为1.0到100.0ppm，分别测试标样的吸光光度，绘制出浓度与吸光光度的线性关系图，利用该线性关系图可以得出细胞内与细胞外黑色素的含量。
实验结果如表2所示：
表2
从表2的结果可看出，实施例1～6的样品在抑制细胞产生黑色素方面具有明显优势；对比例1由于缺少苯乙基间苯二酚和1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺，其抑制细胞产生黑色素的效果不明显；对比例2由于缺少丹皮酚及其衍生物和丁基间苯二酚，其抑制细胞产生黑色素的效果也不明显；对比例3缺少燕麦生物碱衍生物，但抑制细胞产生黑色素的效果没有受到明显影响。说明苯乙基间苯二酚、丁基间苯二酚、1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺、丹皮酚及其衍生物和燕麦生物碱衍生物的复配能有效抑制黑色素的生成，减低色素沉降。
三、祛斑功效评价
选取120名患有黄褐斑、雀斑、晒斑的自愿者，均分为6组，分别试用实施例1～6的祛斑面霜。
使用方法：早晚洁面后使用，连续使用30天。
评价标准：以色斑明显减淡或消退达90％以上者为显效，色斑消退50％以上者为有效，治疗前后无变化着为无效。
试用结果：120名志愿者中，显效的105名，有效的12名，无效3名；显效率87.5％，有效率10％，无效率2.5％，总有效率97.5％。在使用过程中，所有志愿者均没有出现不适感，皮肤均未出现过敏现象。
综上，上述实验结果表明：本发明的护肤品中，苯乙基间苯二酚、丁基间苯二酚、1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺、丹皮酚及其衍生物和燕麦生物碱衍生物的复配能有效抑制黑色素的生成，减低色素沉降。与现有祛斑产品相比，本发明的祛斑护肤品在美白祛斑方面具有更显著的效果，能从根本上去除色斑、预防色斑产生，且对皮肤温和无刺激。
最后应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对其限制。尽管参照上述实施例对本发明进行了详细的说明，所属领域的普通技术人员应当理解：依然可以对本发明的具体实施方式进行修改或者等同替换，而未脱离本发明精神和范围的任何修改或者等同替换，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
Claims (9)
1.一种祛斑护肤品，其特征在于，包括如下成分：苯乙基间苯二酚、丁基间苯二酚、1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺、丹皮酚及其衍生物和燕麦生物碱衍生物；所述苯乙基间苯二酚在所述护肤品中的质量百分含量为0.05％～0.5％，所述丁基间苯二酚在所述护肤品中的质量百分含量为0.05％～5％，所述1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺在所述护肤品中的质量百分含量为0.05％～5％，所述丹皮酚及其衍生物在所述护肤品中的质量百分含量为0.1％～5％，所述燕麦生物碱衍生物在所述护肤品中的质量百分含量为0.05％～5％。
2.如权利要求1所述的祛斑护肤品，其特征在于，所述燕麦生物碱衍生物包括二氢燕麦酰基邻氨基苯甲酸。
3.如权利要求1所述的祛斑护肤品，其特征在于，所述丹皮酚及其衍生物包括：丹皮酚、丹皮酚卤代物、丹皮酚酯、丹皮酚磺化物和丹皮酚-β-环糊精包合物。
4.如权利要求1所述的祛斑护肤品，其特征在于，所述苯乙基间苯二酚在所述护肤品中的质量百分含量为0.2％～0.5％，所述丁基间苯二酚在所述护肤品中的质量百分含量为0.2％～3％，所述1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺在所述护肤品中的质量百分含量为0.2％～3％，所述丹皮酚及其衍生物在所述护肤品中的质量百分含量为2％～3％，所述燕麦生物碱衍生物在所述护肤品中的质量百分含量为0.2％～3％。
5.一种祛斑面霜，其特征在于，按质量百分含量计，由如下成分组成：苯乙基间苯二酚0.05％～0.5％、丁基间苯二酚0.05％～5％、1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺0.05％～5％、丹皮酚及其衍生物0.1％～5％、燕麦生物碱衍生物0.05％～5％、硬脂酸甘油酯2.5％、鲸蜡硬脂基葡糖苷1.5％、肉豆蔻酸异丙酯5％、十六烷基磷酸酯钾盐1％、高级烷基C16-18-醇3.5％、辛酸/癸酸甘油三酯5％、棕榈酸异辛酯5％、二苯甲酮-3 0.4％、维生素E 0.5％、氮酮2％、汉生胶0.3％、硅酸镁铝0.25％、三甲基甘氨酸2％、尼泊金甲酯0.2％、烟酰胺2％、植酸0.28％、焦亚硫酸钠0.2％、乳化剂1％、香精0.2％和防腐剂G-Plus 0.25％，余量为去离子水；所述乳化剂为聚丙烯酰胺和脂肪醇聚氧乙烯醚的混合物。
6.如权利要求5所述的祛斑面霜，其特征在于，按质量百分含量计，由如下成分组成：苯乙基间苯二酚0.5％、丁基间苯二酚1％、1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺2％、丹皮酚及其衍生物2％、燕麦生物碱衍生物2％、硬脂酸甘油酯2.5％、鲸蜡硬脂基葡糖苷1.5％、肉豆蔻酸异丙酯5％、十六烷基磷酸酯钾盐1％、高级烷基C16-18-醇3.5％、辛酸/癸酸甘油三酯5％、棕榈酸异辛酯5％、二苯甲酮-30.4％、维生素E 0.5％、氮酮2％、汉生胶0.3％、硅酸镁铝0.25％、三甲基甘氨酸2％、尼泊金甲酯0.2％、烟酰胺2％、植酸0.28％、焦亚硫酸钠0.2％、乳化剂1％、香精0.2％和防腐剂G-Plus 0.25％，余量为去离子水。
7.如权利要求5所述的祛斑面霜，其特征在于，按质量百分含量计，由如下成分组成：苯乙基间苯二酚0.4％、丁基间苯二酚2％、1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺2.5％、丹皮酚及其衍生物2.5％、燕麦生物碱衍生物3％、硬脂酸甘油酯2.5％、鲸蜡硬脂基葡糖苷1.5％、肉豆蔻酸异丙酯5％、十六烷基磷酸酯钾盐1％、高级烷基C16-18-醇3.5％、辛酸/癸酸甘油三酯5％、棕榈酸异辛酯5％、二苯甲酮-30.4％、维生素E 0.5％、氮酮2％、汉生胶0.3％、硅酸镁铝0.25％、三甲基甘氨酸2％、尼泊金甲酯0.2％、烟酰胺2％、植酸0.28％、焦亚硫酸钠0.2％、乳化剂1％、香精0.2％和防腐剂G-Plus 0.25％，余量为去离子水。
8.如权利要求5所述的祛斑面霜，其特征在于，按质量百分含量计，由如下成分组成：苯乙基间苯二酚0.3％、丁基间苯二酚3％、1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺3％、丹皮酚及其衍生物3％、燕麦生物碱衍生物2.5％、硬脂酸甘油酯2.5％、鲸蜡硬脂基葡糖苷1.5％、肉豆蔻酸异丙酯5％、十六烷基磷酸酯钾盐1％、高级烷基C16-18-醇3.5％、辛酸/癸酸甘油三酯5％、棕榈酸异辛酯5％、二苯甲酮-30.4％、维生素E 0.5％、氮酮2％、汉生胶0.3％、硅酸镁铝0.25％、三甲基甘氨酸2％、尼泊金甲酯0.2％、烟酰胺2％、植酸0.28％、焦亚硫酸钠0.2％、乳化剂1％、香精0.2％和防腐剂G-Plus 0.25％，余量为去离子水。
9.如权利要求5～8任一项所述的祛斑面霜，其特征在于，所述祛斑面霜的制备方法为：将除1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺、丹皮酚及其衍生物和燕麦生物碱衍生物以外的其他成分在去离子水中加热溶解，混合均匀，然后加入1-甲基乙内酰脲-2-酰亚胺，混合均匀，再分别加入丹皮酚及其衍生物、燕麦生物碱衍生物，混合均匀即可。
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Legal Events
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| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| GR01 | Patent grant | ||
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