CN108077655B - 一种缓解大黄鱼脂肪肝的饲料添加剂及其制备方法与应用 - Google Patents

一种缓解大黄鱼脂肪肝的饲料添加剂及其制备方法与应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种缓解大黄鱼脂肪肝的饲料添加剂及其制备方法与应用，属饲料领域。每100重量份的饲料添加剂包括0.8‑4重量份的植物提取物、0.2‑1重量份的稀土壳糖胺螯合盐、2‑10重量份的山楂粉、1‑5重量份的葛根粉、3‑15重量份的α‑硫酸锌以及1‑5重量份的亮氨酸，余量为载体。植物提取物包括黄芩提取物、紫苏籽提取物以及博落回提取物。该饲料添加剂安全无害，用量少，成本低，效果稳定。其制备方法为：将上述饲料添加剂的成分混合即可。此制备方法简单，条件可控性好。将上述饲料添加剂应用于制备大黄鱼饲料并用于饲喂大黄鱼，可有效缓解大黄鱼脂肪肝发生，提高大黄鱼的机体免疫力，改善其体色。

Description

一种缓解大黄鱼脂肪肝的饲料添加剂及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及饲料领域，且特别涉及一种缓解大黄鱼脂肪肝的饲料添加剂及其制备方法与应用。
背景技术
随着集约化养殖的发展，高脂饲料得到普遍利用，虽然高脂饲料能在短期内促使鱼类快速生长，但会导致脂肪在鱼体内尤其是肝脏内过度沉积。脂肪在鱼类肝脏内的过度沉积会诱发脂肪肝的发生。大黄鱼是我国重要的海水养殖鱼类，经济价值较高，但脂肪肝的频繁发生是大黄鱼养殖业重大难题，每年导致大量经济损失，一直困扰着广大养殖户。
肝脏是鱼类重要的腺体和消化代谢器官，对鱼类的健康生长起着不可替代的作用。养殖大黄鱼发生脂肪肝后，不仅会导致其免疫力和抗应激能力下降，导致死亡率升高，还会降低生产性能和饲料利用率，而增加养殖成本。此外，脂肪肝的发生会间接导致抗生素药物的滥用，影响食品安全性。因此，采取有效措施缓解大黄鱼脂肪肝的发生具有重要意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种缓解大黄鱼脂肪肝的饲料添加剂，该饲料添加剂安全无害，用量少，成本低，效果稳定。
本发明的第二目的在于提供一种上述饲料添加剂的制备方法，该方法简单，条件可控性好。
本发明的第三目的在于提供上述饲料添加剂在大黄鱼饲料中的应用，将其用于制备大黄鱼饲料并用于饲喂大黄鱼，可有效缓解大黄鱼脂肪肝发生，提高大黄鱼的机体免疫力，改善其体色。
本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的：
本发明提出一种缓解大黄鱼脂肪肝的饲料添加剂，每100重量份的上述饲料添加剂包括0.8-4重量份的植物提取物、0.2-1重量份的稀土壳糖胺螯合盐、2-10重量份的山楂粉、1-5重量份的葛根粉、3-15重量份的α-硫酸锌以及1-5重量份的亮氨酸，余量为载体。
植物提取物包括黄芩提取物、紫苏籽提取物以及博落回提取物。
优选地，上述植物提取物包括0.4-2重量份的黄芩提取物、0.2-1重量份的紫苏籽提取物以及0.2-1重量份的博落回提取物。
本发明还提出上述饲料添加剂的制备方法：按配比混合植物提取物、稀土壳糖胺螯合盐、山楂粉、葛根粉、α-硫酸锌、亮氨酸以及载体。
另外，本发明还提出了上述饲料添加剂在制备大黄鱼饲料中的应用，例如可按质量百分数为0.05-0.2％的比例添加于大黄鱼饲料中。
本发明较佳实施例提供的缓解大黄鱼脂肪肝的饲料添加剂及其制备方法与应用的有益效果是：
(1)饲料添加剂所选组分均安全、无有害残留，为生产绿色饲料和水产品创造了条件。
(2)各原料组分配方合理，各组分间具有协同作用，配伍使用比单一使用效果稳定。
(3)制备方法简单，条件可控性好，饲料稳定性好，具有很好的应用前景。
(4)用于饲喂大黄鱼可加强大黄鱼的脂肪代谢，降低肝脏中脂肪沉积，从而降低脂肪肝的发生。
(5)用于饲喂大黄鱼可改善大黄鱼的健康状态，减少肝脏脂质过氧化，从而提高抗病力，并可改善大黄鱼的体色。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，以下将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1为试验例5中对照组的大黄鱼的肝组织在光镜下的结构图；
图2为试验例5中高脂组的大黄鱼的肝组织在光镜下的结构图；
图3为试验例5中试验组5的大黄鱼的肝组织在光镜下的结构图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本发明实施例的缓解大黄鱼脂肪肝的饲料添加剂及其制备方法与应用进行具体说明。
本发明实施例提供的饲料添加剂，将其用于制备大黄鱼饲料，不仅可加强大黄鱼的脂肪代谢，降低肝脏中脂肪沉积，从而降低脂肪肝发生率；而且还能改善大黄鱼的健康状态，减少肝脏脂质过氧化，从而提高抗病力，并可改善大黄鱼的体色。
作为可选地，该饲料添加剂例如可以按质量百分数为0.05-0.2％添加于大黄鱼饲料中，例如可以按0.05wt％、0.1wt％和0.2wt％加入大黄鱼饲料中，优选按0.1wt％加入至大黄鱼饲料中。该添加比例下，饲料添加剂的性价比最佳。
本实施例中，每100重量份的饲料添加剂例如可以包括0.8-4重量份的植物提取物、0.2-1重量份的稀土壳糖胺螯合盐、2-10重量份的山楂粉、1-5重量份的葛根粉、3-15重量份的α-硫酸锌以及1-5重量份的亮氨酸，余量为载体。
作为可选地，上述植物提取物包括黄芩提取物、紫苏籽提取物以及博落回提取物。
具体地，上述植物提取物例如可以包括0.4-2重量份的黄芩提取物、0.2-1重量份的紫苏籽提取物以及0.2-1重量份的博落回提取物。
进一步地，每100重量份的上述饲料添加剂例如可以包括1.6-3.2重量份的植物提取物、0.4-0.8重量份的稀土壳糖胺螯合盐、4-8重量份的山楂粉、2-4重量份的葛根粉、6-12重量份的α-硫酸锌以及2-4重量份的亮氨酸，余量为载体。
此条件下，植物提取物例如可以包括0.8-1.6重量份的黄芩提取物、0.4-0.8重量份的紫苏籽提取物以及0.4-0.8重量份的博落回提取物。
更进一步地，每100重量份的上述饲料添加剂例如可以包括2.4重量份的植物提取物、0.6重量份的稀土壳糖胺螯合盐、6重量份的山楂粉、3重量份的葛根粉、9重量份的α-硫酸锌以及3重量份的亮氨酸，余量为载体。
此条件下，植物提取物例如可以包括1.2重量份的黄芩提取物、0.6重量份的紫苏籽提取物以及0.6重量份的博落回提取物。
作为可选地，上述稀土壳糖胺螯合盐包括镨壳糖胺螯合盐和/或钇壳糖胺螯合盐。
作为可选地，上述载体包括脱脂米糠和/或稻壳粉。
其中，黄芩提取物在本发明方案提供的饲料添加剂中主要起到降脂保肝的作用；紫苏籽提取物主要起到降脂以及抑制脂质氧化的作用；博落回提取物通常用于散瘀祛风以及解毒止痛，本发明实施例中其主要用于抑制脂质氧化，保护肝细胞膜，改善肝脏功能。
通过将黄芩提取物、紫苏籽提取物与博落回提取物共同作为本发明实施例中的植物提取物成分，可较仅含有其中一种或两种成分对降低大黄鱼的脂肪肝发生率明显更优。
稀土壳糖胺螯合盐为一种有类似抗生素作用的生物质材料，是利用稀土硝酸盐与壳糖胺为原料，经特殊的电化学工艺加工而成的一种新型饲料添加剂。稀土壳糖胺螯合盐中的壳糖胺可通过调节相关抗氧化防御酶系的超氧化物歧化酶等酶的活性清除机体内的部分自由基，降低机体的脂质过氧化水平，进而使机体免受脂质过氧化损伤，且稀土壳糖胺螯合盐比单一壳糖胺对自由基的清除能力更强。
通常稀土壳糖胺螯合盐仅指包括镧和铈两种稀土元素的壳糖胺螯合盐，但本发明实施例中稀土壳糖胺螯合盐的稀土元素还加入了镨和/或钇。通过加入镨和/或钇，一方面可提高稀土壳糖胺螯合盐的活性，另一方面还能在一定程度上与镧和铈竞争与壳糖胺反应时的结合位点，降低镧与铈之间的竞争程度，使镧、铈在与壳糖胺反应时更加均匀，使稀土壳糖胺螯合盐的作用效果发挥至最大程度。
山楂粉中含有的山楂黄酮可通过调节低密度脂蛋白受体转录水平和抗氧化能力，从而抑制脂质过氧化物，预防脂质代谢紊乱。其次，山楂黄酮还能够促进脂肪消化，增加胃肠消化酶的分泌，从而对胃肠功能起到一定的调节作用。
葛根粉中同时含有葛根素和葛根总黄酮，在本发明实施例中能够起到降脂的作用。
α-硫酸锌为线粒体的辅酶，有保护线粒体的功能，可降低超氧离子的产生，具有抑制脂质过氧化的功能。此外，α-硫酸锌还能有效抑制饲料的氧化霉变，确保饲料的食用安全性。
亮氨酸作为支链氨基酸，不仅可以提高生长激素的产量，帮助燃烧内脏脂肪，而且还能有效防止大黄鱼肌肉损失，促进生长。
在上述基础上，本发明实施例的饲料添加剂中的各原料之间还具有协同增效作用，例如：植物提取物与山楂粉、葛根粉、亮氨酸可协同降脂，降低大黄鱼脂肪肝的发生；黄芩提取物、博落回提取物、稀土壳糖胺螯合盐、山楂粉能够协同改善大黄鱼体色；植物提取物、稀土壳糖胺螯合盐、山楂粉、α-硫辛酸能够协同抑制脂质过氧化，降低脂肪肝的发生。此外，植物提取物、稀土壳糖胺螯合盐、山楂粉、α-硫辛酸协同作用还可缓解饲料氧化霉变，避免由于饲料的氧化霉变导致大黄鱼脂肪肝的发生。
承上所述，本发明实施例的饲料添加剂中的原料配合使用后，能够降低肝脏脂肪沉积，减少脂质过氧化以及缓解饲料氧化霉变来综合缓解大黄鱼的脂肪肝发生并改善体色。
此外，本发明实施例还提供了一种上述饲料添加剂的制备方法，也即按上述配比混合植物提取物、稀土壳糖胺螯合盐、山楂粉、葛根粉、α-硫酸锌、亮氨酸以及载体即可。
作为可选地，可将载体分为两部分，先将植物提取物与第一部分载体混合均匀，然后再按配方量逐级混合稀土壳糖胺螯合盐、山楂粉、葛根粉、α-硫酸锌、亮氨酸以及剩余的第二部分载体，从而以使各组分混合均匀。
较佳地，在混合前，可将固体原料粉碎后过200-400微米分级筛，以提高固体原料的颗粒均一性，改善饲料的可食性和口感。
较佳地，本发明实施例中的植物提取物例如可以经以下步骤得到：将黄芩提取物、博落回提取物、水与橡子粉于45-55℃的条件下混合，然后于柠檬酸溶液及葡萄糖浆的混合液中泡制3-8h，过滤，干燥后再与紫苏籽提取物混合。
其中，黄芩提取物、博落回提取物、水与橡子粉的重量比例如可以依次为2：1：20-25：4-5。
通过将黄芩提取物、博落回提取物、水与橡子粉于45-55℃的条件下混合，其一，在45-55℃的水溶液中，黄芩提取物、博落回提取物以及橡子粉的分子均能够膨胀，橡子粉通过与黄芩提取物、博落回提取物结合，可以吸附黄芩提取物及博落回提取物中所含的苦味物质；其二，橡子粉自身具有部分生物功能因子，能够抵抗、缓解、预防铅等重金属对大黄鱼的毒害，并且橡子粉还能够增强免疫功能，促进生长发育，减少胆固醇。
接着，将上述混合体系于柠檬酸溶液及葡萄糖浆的混合液中泡制3-8h，经此泡制，一方面柠檬酸溶液和葡萄糖浆能够进一步将部分黄芩提取物及博落回提取物中残留的苦味物质溶解出，另一方面，还能洗脱橡子粉吸附的苦味物质。
本发明实施例中之所以未将黄芩提取物、博落回提取物直接浸泡于柠檬酸溶液及葡萄糖浆的混合液中，其原因在于，该种操作苦味物质的浸出率较低，而橡子粉作为中间介质能够有效将黄芩提取物及博落回提取物中所含的大部分苦味物质吸附出，且吸附后的苦味物质较易溶解于柠檬酸溶液及葡萄糖浆的混合液中，能较前者方法将苦味物质除去率提高60％以上。
优选地，上述葡萄糖浆中含有葡萄糖酸-δ-内酯，葡萄糖酸-δ-内酯能够使泡制后的苦味成分形成絮状物，便于充分除去苦味物质。
进一步地，将泡制后的体系进行过滤，干燥后再与紫苏籽提取物混合，从而可充分除去植物提取物中的苦味，改善饲料添加剂的口感，提高大黄鱼的采食量，降低脂肪肝的发生率。
作为可选地，稀土壳糖胺螯合盐可经以下步骤得到：混合含镨和/或钇的稀土金属盐、壳糖胺与水，于55-65℃的条件下反应，收集沉淀物。
优选地，稀土金属盐、壳糖胺与水的重量比为0.5-1：3-5：30-40。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
将0.4重量份的黄芩提取物、0.2重量份的博落回提取物、4重量份的水与0.8重量份的橡子粉于45℃的条件下混合，然后于柠檬酸溶液及葡萄糖浆的混合液中泡制3h，过滤，干燥后再与0.2重量份的紫苏籽提取物混合，得植物提取物。
按重量比为0.5：3：30混合含镨和钇的稀土金属盐、壳糖胺与水，于55℃下反应，收集沉淀物，得稀土壳糖胺螯合盐。
将植物提取物、稀土壳糖胺螯合盐、山楂粉、葛根粉、α-硫酸锌、亮氨酸以及载体均分别进行粉碎并过200微米分级筛，然后按每100重量份的饲料添加剂含有0.8重量份的植物提取物、0.2重量份的稀土壳糖胺螯合盐、2重量份的山楂粉、1重量份的葛根粉、3重量份的α-硫酸锌以及1重量份的亮氨酸，余量为脱脂米糠的比例将各原料进行混合，得缓解大黄鱼脂肪肝的饲料添加剂。
实施例2
本实施例与实施例1的区别在于：按每100重量份的饲料添加剂含有1.6重量份的植物提取物、0.4重量份的稀土壳糖胺螯合盐、4重量份的山楂粉、2重量份的葛根粉、6重量份的α-硫酸锌以及2重量份的亮氨酸，余量为脱脂米糠的比例将各原料进行混合。
植物提取物含有0.8重量份的黄芩提取物、0.4重量份的博落回提取物以及0.4重量份的紫苏籽提取物。
实施例3
本实施例与实施例1的区别在于：按每100重量份的饲料添加剂含有2.4重量份的植物提取物、0.6重量份的稀土壳糖胺螯合盐、6重量份的山楂粉、3重量份的葛根粉、9重量份的α-硫酸锌以及3重量份的亮氨酸，余量为脱脂米糠的比例将各原料进行混合。
植物提取物含有1.2重量份的黄芩提取物、0.6重量份的博落回提取物以及0.6重量份的紫苏籽提取物。
实施例4
本实施例与实施例1的区别在于：按每100重量份的饲料添加剂含有3.2重量份的植物提取物、0.8重量份的稀土壳糖胺螯合盐、8重量份的山楂粉、4重量份的葛根粉、12重量份的α-硫酸锌以及4重量份的亮氨酸，余量为脱脂米糠的比例将各原料进行混合。
植物提取物含有1.6重量份的黄芩提取物、0.8重量份的博落回提取物以及0.8重量份的紫苏籽提取物。
实施例5
本实施例与实施例1的区别在于：按每100重量份的饲料添加剂含有4重量份的植物提取物、1重量份的稀土壳糖胺螯合盐、10重量份的山楂粉、5重量份的葛根粉、15重量份的α-硫酸锌以及5重量份的亮氨酸，余量为脱脂米糠的比例将各原料进行混合。
植物提取物含有2重量份的黄芩提取物、1重量份的博落回提取物以及1重量份的紫苏籽提取物。
实施例6
本实施例与实施例5的区别在于：稀土壳糖胺螯合盐中的稀土元素除了含有镧和铈，仅含镨。
实施例7
本实施例与实施例5的区别在于：稀土壳糖胺螯合盐中的稀土元素除了含有镧和铈，仅含钇。
实施例8
本实施例与实施例5的区别在于：载体为稻壳粉。
实施例9
本实施例与实施例5的区别在于：载体为脱脂米糠与稻壳粉的混合物。
实施例10
本实施例与实施例5的区别在于：将植物提取物、稀土壳糖胺螯合盐、山楂粉、葛根粉、α-硫酸锌、亮氨酸以及载体均分别进行粉碎并过400微米分级筛。
实施例11
本实施例与实施例5的区别在于：将植物提取物、稀土壳糖胺螯合盐、山楂粉、葛根粉、α-硫酸锌、亮氨酸以及载体均分别进行粉碎并过300微米分级筛。
实施例12
本实施例与实施例5的区别在于：将黄芩提取物、博落回提取物、水与橡子粉于55℃的条件下混合，然后于柠檬酸溶液及葡萄糖浆的混合液中泡制8h，过滤，干燥后再与紫苏籽提取物混合。
黄芩提取物、博落回提取物、水与橡子粉的重量比依次为2：1：25：5。
实施例13
本实施例与实施例5的区别在于：将黄芩提取物、博落回提取物、水与橡子粉于50℃的条件下混合，然后于柠檬酸溶液及葡萄糖浆的混合液中泡制5.5h，过滤，干燥后再与紫苏籽提取物混合。
黄芩提取物、博落回提取物、水与橡子粉的重量比依次为2：1：22.5：4.5。
实施例14
本实施例与实施例5的区别在于：稀土壳糖胺螯合盐是将稀土金属盐、壳糖胺与水的按重量比为1：5：40混合后于65℃的条件下反应，收集沉淀物而得。
实施例15
本实施例与实施例5的区别在于：稀土壳糖胺螯合盐是将稀土金属盐、壳糖胺与水的按重量比为0.75：4：35混合后于60℃的条件下反应，收集沉淀物而得。
实施例16
本实施例与实施例5的区别在于：葡萄糖浆中含有葡萄糖酸-δ-内酯。
实施例17
本实施例与实施例5的区别在于：混合过程中，将载体分为两部分，先将植物提取物与第一部分载体混合均匀，然后再按配方量逐级混合稀土壳糖胺螯合盐、山楂粉、葛根粉、α-硫酸锌、亮氨酸以及剩余的第二部分载体。
实施例18
本实施例提供一种缓解大黄鱼脂肪肝的饲料添加剂的应用，将其按质量百分数为0.05％添加于大黄鱼饲料中。
实施例19
本实施例提供一种缓解大黄鱼脂肪肝的饲料添加剂的应用，将其按质量百分数为0.1％添加于大黄鱼饲料中。
实施例20
本实施例提供一种缓解大黄鱼脂肪肝的饲料添加剂的应用，将其按质量百分数为0.2％添加于大黄鱼饲料中。
试验例1
重复实施上述实施例1-17，得到足够多的缓解大黄鱼脂肪肝的饲料添加剂。
以实施例1-5为例作为试验组1-5，采用单因子设计，将试验鱼驯化一周后，挑选体格健壮、规格整齐(均重为100±3g)的大黄鱼1400尾，随机分成7组(对照组、高脂组、试验组1-5)，每组4个重复，每个重复50尾。试验鱼于大塘28个网箱(规格为2.0m×2.0m×1.5m)中养殖。试验期间，每日投喂3次(7:30、12:30、17:30)，饱食投喂，养殖期为10周。每组饲料配方如表1所示，正常组饲料脂肪含量12wt％，高脂组和添加剂组(试验组1-5)脂肪含量18wt％。用小型颗粒机加工成粒径为5mm左右的颗粒，常温风干后置于4℃冰箱保存备用。
养殖试验结束，禁食24h。统计每一网箱中鱼的尾数并称总重。将鱼用浓度为100mg/L的MS-222(Sigma，美国)麻醉，置于冰盘上尾静脉采血，血液采集后置于预先制好的抗凝管中，3000r/min离心10min(4℃)，收集上清液，样品于-20℃冰箱冷冻保存、待测。
采血后解剖，分离出肝胰脏和腹脂称重，计算肝体比和腹脂率。取部分肝胰脏，用4℃预冷的生理盐水清洗后用滤纸吸干水分，一部分保存于预先配制好的Bouin氏固定液(配制比例：1.22％的饱和苦味酸75mL，40％福尔马林溶液25mL，冰醋酸5mL)中进行组织固定，另一部分置于-20℃冰箱保存备用。
生长性能指标的计算公式如下：
存活率(％)＝试验结束时总尾数/试验开始时总尾数×100％；
增重率(％)＝(末均重-初均重)/初均重×100％；
肝体比(％)＝肝脏重/全鱼重×100％；
腹脂率(％)＝腹腔脂肪重/全鱼重×100％。
试验结果如表2至表4所示。
表1基础日粮组成％
日粮组成 对照组 高脂组 试验组(5组)
鱼粉 40 40 40
豆粕 20 20 20
面粉 22.5 16.5 16.4
鱼油 6 12 12
小麦淀粉 6 6 6
大豆卵磷脂 1.5 1.5 1.5
维生素预混料 2 2 2
矿物质预混料 2 2 2
添加剂 0 0 0.1(分别为5组添加剂)
合计 100 100 100
注：表1中维生素预混物(mg or g/kg diet)分别含有维生素D3，5mg；维生素A醋酸酯，32mg；硫胺素，25mg；维生素B12(1％)，10mg；维生素B2，45mg；盐酸吡哆醇，20mg；维生素C，2000mg；维生素E(50％)，240mg；维生素K3，10mg；泛酸，60mg；肌醇，800mg；烟酸，200mg；叶酸，20mg；生物(2％)，60mg；胆碱，4000mg以及微晶纤维素，12.47g。
矿物质预混料(mg or g/kg diet)分别含有硫酸铜，10mg；碘酸钙，60mg；氯化钴(1％)，50mg；硫酸铁，80mg；硫酸镁，1200mg；硫酸锰，45mg；硒酸钠(1％)，20mg；硫酸锌，50mg；磷酸二氢钙，10g以及沸石粉，8.485g。
表2不同处理组存活率、增重率、腹脂率、肝体比、肝脏脂肪含量的比较
Figure BDA0001548216270000161
注：同行上标没有相同字母表示差异显著(P＜0.05)。
由表2可以看出，添加实施例1-5所提供的饲料添加剂后，试验组的大黄鱼的存活率显著高于高脂组(P＜0.05)，但与正常组无显著差异(P>0.05)。并且，试验组比高脂组的大黄鱼的增重率增加，但差异不显著；试验组比高脂组的大黄鱼的腹脂率、肝体比以及肝脏脂肪含量均明显降低(P＜0.05)，表明添加本发明实施例提供的饲料添加剂可降低大黄鱼肝脏和腹部脂肪沉积。
表3不同处理组血清生化指标比较
Figure BDA0001548216270000162
Figure BDA0001548216270000171
注：同行上标没有相同字母表示差异显著(P＜0.05)。
由表3可以看出，添加实施例1-5所提供的饲料添加剂后，试验组的大黄鱼的血浆甘油三酯和胆固醇与对高脂组相比显著降低(P＜0.05)，谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性与高脂组相比显著降低(P＜0.05)，由此表明本发明实施例提供的饲料添加剂具有降脂功效，并能减少大黄鱼肝脏损伤。并且，补体C3含量和溶菌酶的活性与高脂组相比显著增高，表明本发明实施例提供的饲料添加剂可提高大黄鱼机体免疫力。
表4不同处理组肝脏抗氧化指标比较
Figure BDA0001548216270000172
注：同行上标没有相同字母表示差异显著(P＜0.05)。
由表4可以看出，添加实施例1-5所提供的饲料添加剂后，试验组的大黄鱼的SOD水平以及MDA水平与高脂组相比均显著下降，表明本发明实施例提供的饲料添加剂可抑制脂质过氧化产生。
结合表2-表4，对比试验组1-5可以看出，无论是存活率、增重率、腹脂率、肝体比、肝脏脂肪含量，还是血清生化指标以及肝脏抗氧化指标，试验组2-4均优于试验组1-5，且试验组3的效果最佳，说明在原料种类及制备方法均相同的条件下，实施例3提供的原料配比对缓解大黄鱼脂肪肝的效果最佳。
按照上述试验例的方法对实施例6-17所得的缓解大黄鱼脂肪肝的饲料添加剂进行试验，其结果同样显示通过饲喂含有本发明实施例提供的缓解大黄鱼脂肪肝的饲料添加剂的鱼饲料(基础日粮)，可较高脂组明显提高可降低大黄鱼肝脏和腹部脂肪沉积、提高大黄鱼机体免疫力并抑制脂质过氧化产生。
此外，通过上述养殖试验，可以明显发现高脂组的大黄鱼体色偏白，偏暗淡，而通过饲喂含有本发明实施例提供的缓解大黄鱼脂肪肝的饲料添加剂的鱼饲料，试验组的大黄鱼的体色能够较高脂组的大黄鱼更加金黄，色泽更加明亮。
试验例2
采用试验例1中的试验方法，设置对照组，对照组与实施例5的区别在于稀土壳糖胺螯合盐中不含镨和钇元素，对实施例5-7以及对照组进行对比，其结果显示，实施例5-7能够较对照组明显(P＜0.05)降低大黄鱼肝脏和腹部脂肪沉积、提高大黄鱼机体免疫力并抑制脂质过氧化产生，且能使大黄鱼的体色更加金黄，色泽更加明亮，说明稀土壳糖胺螯合盐中的稀土元素含有镨和/或钇较不含镨和钇对缓解大黄鱼脂肪肝以及改善大黄鱼的体色的效果明显更优。
通过对比实施例5-7，其结果显示：含有实施例5的饲料添加剂的饲料较含有实施例6以及实施例7的饲料添加剂的饲料能够提高大黄鱼5-8％的采食量，降低大黄鱼肝脏和腹部脂肪沉积、提高大黄鱼机体免疫力并抑制脂质过氧化产生，且能使大黄鱼的体色更加金黄，色泽更加明亮。说明稀土壳糖胺螯合盐中的稀土元素同时含有镨和钇较仅含有其中一种对缓解大黄鱼脂肪肝以及改善大黄鱼的体色的效果明显更优。
试验例3
采用试验例1中的试验方法，设置对照组1-2，对照组1与实施例5的区别在于植物提取物直接由黄芩提取物、博落回提取物和紫苏籽提取物混合而得，对照组2直接将黄芩提取物和博落回提取物于柠檬酸溶液及葡萄糖浆的混合液中泡制、过滤干燥后再与紫苏籽提取物混合，对对照组1-2以及实施例5、实施例12、实施例13和实施例16进行对比。
其结果显示：实施例5、实施例12-13和实施例16均能够较对照组1-2明显(P＜0.05)提高大黄鱼的采食量(平均提高率较对照组1提高11-14％，较对照组2提高5-8％)，从而降低大黄鱼肝脏和腹部脂肪沉积、提高大黄鱼机体免疫力并抑制脂质过氧化产生，且能使大黄鱼的体色更加金黄，色泽更加明亮。由此说明将黄芩提取物、博落回提取物与橡子粉混合后再于柠檬酸溶液及葡萄糖浆的混合液中泡制能够有效去除植物提取物中所含的苦味物质，改善饲料添加剂及饲料的口感，从而提高大黄鱼的采食量，缓解大黄鱼脂肪肝并改善大黄鱼的体色。
此外，实施例16较实施例5、实施例12-13的效果更佳，说明葡萄糖浆中含有葡萄糖酸-δ-内酯能够充分提高苦味物质的去除率，从而可进一步提高饲料添加剂的作用效果。
试验例4
以实施例5为例，设置多组对照组，对照组与实施例5的区别在于对照组中的原料较实施例5中的原料更少，依次为少其中一种、其中两种、其中三种，依次类推。按照试验例1的试验方法对上述对照组及实施例5进行试验，其结果显示，含有实施例5的饲料添加剂的饲料较含有对照组的饲料添加剂的饲料对缓解大黄鱼的脂肪肝发生以及改善体色的效果均更佳，且效果显示并非简单的叠加，证明本发明实施例提供的各原料之间的确具有协同增效作用。
试验例5
将试验例1中试验期结束时的试验组5以及对照组和高脂组的大黄鱼的肝组织于光镜下观察，其结果如图1-3所示。由图1-3可以看出：对照组大黄鱼的肝细胞结构正常，细胞核位于细胞中央，细胞膜清晰可见，细胞内有少量脂滴存在，肝细胞索呈放射状排列；高脂组大黄鱼的脂肪肝组肝细胞排列不规则，细胞膜模糊，细胞核偏离中央；试验组5大黄鱼的肝细胞内脂滴略有增加，但是细胞形状等却未见异常。说明通过饲喂含有本发明实施例提供的缓解大黄鱼脂肪肝的饲料添加剂的鱼饲料，可减少大黄鱼肝细胞脂肪沉积，从而缓解脂肪肝的发生。
综上所述，本发明实施例提供的缓解大黄鱼脂肪肝的饲料添加剂安全无害，用量少，成本低，效果稳定。该饲料添加剂的制备方法简单，制备条件可控性好。将其用于制备大黄鱼饲料并用于饲喂大黄鱼，可有效缓解大黄鱼脂肪肝发生，提高大黄鱼的机体免疫力，改善其体色。
以上所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

Claims (11)

1.一种缓解大黄鱼脂肪肝的饲料添加剂，其特征在于，每100重量份的所述饲料添加剂包括0.8-4重量份的植物提取物、0.2-1重量份的稀土壳糖胺螯合盐、2-10重量份的山楂粉、1-5重量份的葛根粉、3-15重量份的α-硫酸锌以及1-5重量份的亮氨酸，余量为载体；
所述植物提取物包括0.4-2重量份的黄芩提取物、0.2-1重量份的紫苏籽提取物以及0.2-1重量份的博落回提取物；
所述稀土壳糖胺螯合盐包括镨壳糖胺螯合盐和/或钇壳糖胺螯合盐。
2.根据权利要求1所述的饲料添加剂，其特征在于，每100重量份的所述饲料添加剂包括1.6-3.2重量份的所述植物提取物、0.4-0.8重量份的所述稀土壳糖胺螯合盐、4-8重量份的所述山楂粉、2-4重量份的所述葛根粉、6-12重量份的所述α-硫酸锌以及2-4重量份的所述亮氨酸，余量为所述载体；
所述植物提取物包括0.8-1.6重量份的所述黄芩提取物、0.4-0.8重量份的所述紫苏籽提取物以及0.4-0.8重量份的所述博落回提取物。
3.根据权利要求2所述的饲料添加剂，其特征在于，每100重量份的所述饲料添加剂包括2.4重量份的所述植物提取物、0.6重量份的所述稀土壳糖胺螯合盐、6重量份的所述山楂粉、3重量份的所述葛根粉、9重量份的所述α-硫酸锌以及3重量份的所述亮氨酸，余量为所述载体；
所述植物提取物包括1.2重量份的所述黄芩提取物、0.6重量份的所述紫苏籽提取物以及0.6重量份的所述博落回提取物。
4.根据权利要求1-3任一项所述的饲料添加剂，其特征在于，所述载体包括脱脂米糠和/或稻壳粉。
5.如权利要求1-4任一项所述的饲料添加剂的制备方法，其特征在于，按配比混合所述植物提取物、所述稀土壳糖胺螯合盐、所述山楂粉、所述葛根粉、所述α-硫酸锌、所述亮氨酸以及所述载体。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述植物提取物经以下步骤得到：将所述黄芩提取物、所述博落回提取物、水与橡子粉于45-55℃的条件下混合，然后于柠檬酸溶液及葡萄糖浆的混合液中泡制3-8h，过滤，干燥后再与所述紫苏籽提取物混合。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述葡萄糖浆中含有葡萄糖酸-δ-内酯；
所述黄芩提取物、所述博落回提取物、水与所述橡子粉的重量比依次为2：1：20-25：4-5。
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述稀土壳糖胺螯合盐经以下步骤得到：混合含镨和/或钇的稀土金属盐、壳糖胺与水，于55-65℃的条件下反应，收集沉淀物。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述稀土金属盐、所述壳糖胺与水的重量比为0.5-1：3-5：30-40。
10.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，混合前，将固体原料粉碎后过200-400微米分级筛。
11.如权利要求1-4任一项所述的饲料添加剂在制备大黄鱼饲料中的应用，其特征在于，所述饲料添加剂按质量百分数为0.05-0.2%的比例添加于大黄鱼饲料中。
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