CN108069939A - 含有共轭联烯酰胺结构的化合物、其制备方法、药物组合物和用途 - Google Patents

含有共轭联烯酰胺结构的化合物、其制备方法、药物组合物和用途 Download PDF

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Abstract

本发明涉及含有共轭联烯酰胺结构的化合物、其制备方法、药物组合物和用途，具体而言，涉及下面通式(I)表示的含有共轭联烯酰胺结构的化合物、其制备方法、药物组合物和在制备上皮生长因子受体(EGFR)抑制剂，或预防和/或治疗与EGFR相关的疾病，尤其是癌症，的药物中的用途。

Description

含有共轭联烯酰胺结构的化合物、其制备方法、药物组合物和 用途
技术领域
本发明涉及含有共轭联烯酰胺结构的化合物、其制备方法、药物组合物和用途，具体涉及一类下面通式(I)表示的含有共轭联烯酰胺结构的化合物、其制备方法、药物组合物和在制备上皮生长因子受体(EGFR)抑制剂，或预防和/或治疗与EGFR相关的疾病，尤其是癌症，的药物中的用途。
背景技术
羰基共轭烯烃、羰基共轭炔烃的化学结构，可以与蛋白中半胱氨酸、赖氨酸等氨基酸残基形成共价键，在非可逆小分子药物的设计研发之中得到广泛应用。含有羰基共轭烯烃的小分子药物在临床上有广泛的应用，例如下列7个被批准上市销售的药物都含有羰基共轭烯烃片段。
其中，EGFR激酶抑制剂阿法替尼(Afatinib)和奥斯替尼(Osimertinib)都被美国食品药品监督管理局批准用于治疗非小细胞肺癌。BTK激酶抑制剂依鲁替尼(Ibrutinib)也含有羰基共轭烯烃片段,它被批准用于治疗淋巴癌。5-α-还原酶抑制剂度他雄胺(Dutasteride)主要用于前列腺肿大、男性型脱发、脂溢性脱发、遗传性脱发，而5-α-还原酶抑制剂非那司提(Finasteride) 主要用于治疗良性前列腺增生，这两个抑制剂也都含有羰基共轭烯烃片段。另外Keap1-Nrf2 抑制剂富马酸二甲酯(Dimethyl fumarate)早在2013年就被批准用于治疗多发性硬化症。此外，肾小管钠、氯离子再吸收的抑制剂依他尼酸(Ethacrynic acid)是强效的利尿药。由此可见，具有羰基共轭烯烃结构的化合物具有潜在的药用价值。另外一方面，含有羰基共轭炔烃的小分子抑制剂的临床应用也在研究之中，例如BTK激酶抑制剂ACP-196，其治疗癌症和自免疫疾病类风湿关节炎的研究，已经在临床试验的后期阶段。这也说明，含有羰基共轭烯烃片段的化合物，可能具有潜在的药物价值。综上所述，含有羰基共轭烯烃或羰基共轭炔烃基团的特定化合物，可能具有与蛋白非可逆结合的能力，因而可能具有治疗疾病的潜力，例如可能被开发用来治疗非小细胞肺癌、淋巴癌白血病或其他恶性肿瘤、自免疫性疾病、前列腺良性增生、多发性硬化症，或开发成为利尿剂等。
WO 2013/014448A1、WO 2015/154039A2、WO 2015/175632A1、WO 2015/188777A1、WO 2016/025641A1、WO 2015/195228A1、WO 2016/029839A1、CN 104844580A、CN105001208A、CN 104140418A、CN 104761544A和WO 2016/054987A1报道了含有共轭烯烃酰胺或共轭炔烃酰胺结构的化合物，且部分化合物具有较高的杀死癌细胞的能力。
然而，关于含有共轭联烯酰胺结构片段的化合物的生物活性和药物学性质的研究还很少。与共轭烯烃酰胺、共轭炔烃酰胺的化学结构和性质不同，含有共轭联烯酰胺片段的小分子化合物的性质，特别是药物化学性质不为人所知。因此，含有共轭联烯酰胺结构片段的化合物的生物活性、药物学性质、治疗疾病的应用前景等各方面的性质都具有不确定性。
发明内容
技术问题
本发明要解决的问题是开发一类具有共轭联烯酰胺结构的小分子化合物。共轭联烯酰胺与共轭烯烃酰胺、共轭炔烃酰胺的化学结构和性质不同。因此，与含有共轭烯烃酰胺、或共轭炔烃酰胺结构片段的化合物不同，含有共轭联烯酰胺结构片段的化合物，其生物活性和药物学性质不为人所知，各方面的性质都具有不确定性。
技术手段
为了解决以上的问题，本发明首次合成一类含有共轭联烯酰胺结构片段的化合物。本发明研究了这类化合物在肿瘤细胞株内的活性，首次发现含有共轭联烯酰胺结构的化合物对于淋巴癌、乳腺癌、肝癌、肠癌、食道癌、肺癌和子宫颈癌等癌症细胞具有较好的致死效果。说明这一类含有共轭联烯酰胺结构的化合物具有潜在的治疗相关癌症和自免疫疾病的潜力，至此完成了本发明。
在一个方面，本发明提供了通式(I)表示的化合物或其盐：
在通式(I)中，
环A表示苯环或含氮六元杂芳环，例如吡啶环、嘧啶环、哒嗪环、吡嗪环或三嗪环；
R1选自氢(H)和取代或未取代的C1-C4烷基，优选选自氢和取代或未取代的C1-C2烷基，所述取代的取代基可以为1、2或3个，优选为1个，选自卤素、羟基、-NH2、C1-C4 烷氧基、-NH-(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-NHC(＝O)-(C1-C4烷基)、 -NHC(＝O)-(C1-C4烷氧基)和苯基，优选选自卤素、羟基、-NH2、-NH-(C1-C4烷基)、-N(C1-C4 烷基)(C1-C4烷基)和苯基；更优选地，R1选自氢、甲基和苄基；
R2和R3各自独立地选自氢和取代或未取代的C1-C4烷基，优选各自独立地选自氢和取代或未取代的C1-C2烷基，所述取代基可以为1、2或3个，优选为1个，选自卤素、羟基、 -NH2、C1-C4烷氧基、-NH-(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-NHC(＝O)-(C1-C4 烷基)和-NHC(＝O)-(C1-C4烷氧基)，优选选自卤素、羟基、-NH2、-NH-(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)；或者
R2和R3与它们连接的碳原子一起形成取代或未取代的含有0-3个选自N、O和S的杂原子的4-8元环，优选为环己环；所述取代基可以为1、2或3个，选自卤素、羟基、-NH2、 C1-C4烷氧基、(C1-C4烷基)-NH2、-NH-(C1-C4烷基)和-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)；
R4和R5各自独立地选自氢原子、卤素、-CN、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素取代的C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷氧基、-NH2、-NH-(C1-C4烷基)和-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)，优选各自独立地选自氢原子、卤素、C1-C2烷基、C1-C2烷氧基、卤素取代的C1-C2烷基、卤素取代的C1-C2烷氧基、-NH2、-NH-(C1-C2烷基)和-N(C1-C2烷基) (C1-C2烷基)，更优选各自独立地选自氢原子、氟、氯、甲基、甲氧基和三氟甲基；或者
R4和R5与连接它们的碳原子一起形成苯环或含有1-2个选自氮、氧和硫的杂原子的5-7 元芳香杂环，优选形成苯环、吡咯环和呋喃环；
R表示1-3个取代基，所述取代基各自独立地选自氢原子、卤素、-CN、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素取代的C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷氧基、-NH2、-NH-(C1-C4 烷基)、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-NHC(＝O)-(C1-C4烷基)、-NHC(＝O)-(C1-C4烷氧基)；优选各自独立地选自选自氢原子、卤素、-CN、羟基、C1-C2烷基、C1-C2烷氧基、卤素取代的C1-C2烷基、卤素取代的C1-C2烷氧基、-NH2、-NH-(C1-C2烷基)、-N(C1-C2烷基)(C1-C2 烷基)、-NHC(＝O)-(C1-C2烷基)、-NHC(＝O)-(C1-C2烷氧基)；更优选各自独立地选自选自氢原子和C1-C4烷氧基；最优选各自独立地选自选自氢原子和C1-C2烷氧基；
W表示其中，
D1、D9和D10各自独立地表示C或N；D2和D3各自独立地选自CR10、N、NR12、O 和S；D4不存在或选自CR10、N、O和S；且D1-D4、D9和D10形成的环为苯环或5-6元杂芳环且环原子中至多四个为N；
D5不存在或选自CR10、CR10R11、NR12、N、O和S；D6-D8各自独立地选自CR10、CR10R11、 N、NR12、O和S；条件是D5-D10形成的环的环原子中至少一个为C且至多四个为N；
各个R10和R11独立地选自氢原子(H)、氘原子(D)、卤素原子、-CN、炔基、乙烯基、C1-C4烷基和卤素取代的C1-C4烷基、羟基、C1-C4烷氧基、-NH2、-NH-(C1-C4烷基)、 -N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)，优选各自独立地选自氢原子、卤素原子、-CN、炔基、C1-C2 烷基、卤素取代的C1-C2烷基和C1-C2烷氧基；
R12各自独立地选自氢原子、C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷基、C1-C4烷基羰基、C1-C4烷基氨基羰基，优选各自独立地选自氢原子、C1-C2烷基；
优选地，D1-D10形成的双环的环原子由C和1-4个N组成；
优选地，D1-D10形成的双环选自苯并吡咯环、苯并吡唑环、苯并咪唑环、苯并三唑环、苯并吡啶环、吡啶并吡啶环、吡啶并吡咯环、吡啶并吡唑环、吡啶并咪唑环、吡啶并三唑环、环己烷并吡咯环、环己烷并吡唑环、氮杂环己烷并吡唑环等；
W优选选自以下基团：
R6选自以下结构: -NR16R17、-Y(CH2)pNR16R17、 -(CH2)pNR16R17和-OR18；其中
Z1、Z3、和Z6各自独立地表示O、CR13R14、NR15或
Z2、Z4、Z5和Z7各自独立地表示O、CR13R14或NR15；
各个Y独立地表示O或NR16；
Z表示CH或N；
R13和R14各自独立地表示氢原子、卤素、羟基、-NH2、炔基、-CN、C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、-NR16R17、C1-C4烷基羰基、C1-C4烷氧基羰基、C1-C4 烷基氨基羰基，优选各自独立地选自氢原子、-NR16R17、叔丁氧基羰基、C1-C2烷基和卤素取代的C1-C2烷基；优选R13和R14之一为氢；
各个R15独立地选自氢原子、C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷基、R19、R19C(＝O)-和R19C(＝O)C1-C4烷基，优选各自独立地选自氢原子、C1-C2烷基、卤素取代的C1-C2烷基、R19C(＝O)-和R19C(＝O)C1-C2烷基；
各个R19独立地选自C1-C4烷基、被卤素或-NR16R17取代的C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素取代的C1-C4烷氧基、-NR16R17、C3-C7环烷基、含有1-4个选自氮和氧原子的杂原子的4-7元杂环基；其中，所述C3-C7环烷基以及4-7元杂环基的环碳原子可以被C1-C4 烷基、卤素取代的C1-C4烷基、羟基、C1-C4烷氧基、氨基、C1-C4烷基氨基、-N(C1-C4 烷基)(C1-C4烷基)、-CN、炔基、乙烯基、C1-C4烷基羰基、C1-C4烷氧基羰基和C1-C4 烷基氨基羰基中的取代基取代，优选可以被选自卤素、C1-C2烷基、C1-C2烷氧基、C1-C2 烷基氨基、-N(C1-C2烷基)(C1-C2烷基)、卤素取代的C1-C2烷基、叔丁氧基羰基和乙酰基中的取代基取代；4-7元杂环基的环氮原子可以被选自C1-C4烷基羰基、C1-C4烷氧基羰基、 C1-C4烷基氨基羰基、C1-C4烷基和卤素取代的C1-C4烷基中的取代基取代，优选可以被选自C1-C2烷基、卤素取代的C1-C2烷基、叔丁氧基羰基和乙酰基中的取代基取代；
R16、R17和R18各自独立地选自氢原子、C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷基和C1-C4烷基羰基，优选各自独立地选自氢原子、C1-C2烷基、卤素取代的C1-C2烷基和C1-C4烷基羰基；
各个m、n、ma、na独立地表示0、1、2、3或4，且m+n、ma+na在2和4之间；各个p独立地表示1、2、3或4；
R6优选地表示以下结构:
(包括和)
(包括和)
在一个实施方式中，通式(I)的化合物选自通式(II)和(III)表示的化合物：
其中，
R、R4、R5、R6和W的定义与通式(I)中相同，
R7、R8和R9各自独立地选自氢原子、卤素、-CN、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素取代的C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷氧基、-NH2、-NH-(C1-C4烷基)、-N(C1-C4 烷基)(C1-C4烷基)、-NHC(＝O)-(C1-C4烷基)、-NHC(＝O)-(C1-C4烷氧基)；优选各自独立地选自选自氢原子、卤素、-CN、羟基、C1-C2烷基、C1-C2烷氧基、卤素取代的C1-C2烷基、卤素取代的C1-C2烷氧基、-NH2、-NH-(C1-C2烷基)、-N(C1-C2烷基)(C1-C2烷基)、 -NHC(＝O)-(C1-C2烷基)、-NHC(＝O)-(C1-C2烷氧基)；更优选各自独立地选自选自氢原子和 C1-C4烷氧基；最优选各自独立地选自选自氢原子和C1-C2烷氧基，
更优选地，R7和R9为氢原子，R8为C1-C4烷氧基，优选C1-C2烷氧基。
在一个实施方式中，通式(II)的化合物选自通式(II-1)、(II-2)和(II-3)表示的化合物：
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9的定义与通式(II)中相同。
在一个实施方式中，通式(II)的化合物选自通式(II-4)和(II-5)表示的化合物：
其中，R1、R2、R3、R4、R6和W的定义与通式(II)中相同。
在一个实施方式中，通式(III)的化合物选自通式(III-1)、(III-2)和(III-3)表示的化合物：
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9的定义与通式(III)中相同。
本发明中，卤素原子是指氟、氯、溴、碘。
本发明中，C1-C4烷基是指甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基等直链或者支链的C1-C4烷基。C1-C2烷基是指甲基、乙基。
本发明中，C1-C4烷氧基是指甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基等直链或者支链的C1-4烷氧基。C1-C2烷氧基是指甲氧基、乙氧基。
本发明中，卤素取代的C1-C4烷基是指C1-C4烷基被1或2个以上的卤素原子取代而得到的基团，例如可举出氟甲基、氯甲基、溴甲基、碘甲基、二氟甲基、三氟甲基、1-氟乙基、2-氟乙基、五氟乙基、1-氟丙基、2-氟丙基、3-氟丙基、1-氯丙基、2-氯丙基、3-氯丙基、 1-氟丁基、2-氟丁基、3-氟丁基、4-氟丁基、4,4,4-三氟丁基、4-溴丁基等。卤素取代的C1-C2 烷基的含义以此类推。
本发明中，卤素取代的C1-C4烷氧基是指C1-C4烷氧基被1或2个以上的卤素原子取代而得到的基团，例如可举出三氟甲氧基、三氯甲氧基、氯甲氧基、溴甲氧基、氟甲氧基、二氟甲氧基、二甲氧基、氟甲氧基、二氟甲氧基、二溴甲氧基、2-氟乙氧基、2,2,2-三氟乙甲氧基、2,2,2-三氯乙甲氧基、3-氯丙氧基、2-氟-3-氯丙氧基、1-氟丁氧基、2-氟丁氧基、3- 氟丁氧基、3-氯丁氧基。卤素取代的C1-C2烷氧基的含义以此类推。
本发明中，含有0-3个选自N、O和S的杂原子的4-8元环是指含有0-3个选自N、O 和S的杂原子的4-8元饱和碳环或饱和杂环，例如，可举出如环丁烷、环戊烷、环己烷、环庚烷、环辛烷、氧杂环丁烷、四氢呋喃、四氢吡喃、吡咯烷基、氧杂环庚烷、氧杂环辛烷、吖丁啶、吡咯啉、哌啶、氮杂环庚烷、氮杂环辛烷、四氢噻吩、1,4-二氮杂环庚烷、1,3- 二氮杂环庚烷、1,3-二氧环庚烷、1,4-二氧环庚烷、1,5-二氮杂环辛烷、高吗啉、1,5-氮氧杂环辛烷等的环。
C3-C7环烷基是指含有3-7个环碳原子的3-7元饱和碳环，例如，可举出环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基。
含有1-4个选自氮和氧原子的杂原子的4-7元杂环基是指含有1-4个选自N和O的杂原子的4-7元非芳香性杂环基，例如氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、吡咯烷基、氧杂环庚烷基、氧杂环辛烷基、哌啶基、吗啉基、1,4-二氮杂环庚烷基、1,3-二氮杂环庚烷基、1,3-二氧环庚烷基、1,4-二氧环庚烷基、哌啶基、高哌啶基、哌嗪基、四氢哌啶基
本发明中，含有1-2个选自N、O和S的杂原子的5-7元芳香杂环可举出吡咯、呋喃、咪唑、吡唑、吡啶、嘧啶、吡嗪、哒嗪、噻吩、噁唑、异噁唑、噻唑、异噻唑等。
本发明中，表示基团从此处连接。
[异构体]
本发明的化合物或其盐，只要没有特殊说明，还包括所有的异构体。例如，例如烷基包括直链烷基和支链烷基。进而，双键、环、稠环中的几何异构体(E型、Z型、顺式、反式)、有存在不对称碳原子等而产生的光学异构体(R,S型，α和β构型，对映体，非对映体)、具有旋光性的光学活性体(D、L、d、l型)、旋光异构体、它们的任意比例混合物、外消旋混合物均包括在发明中。另外，本发明中，也包括所有的由互变异构体产生的异构体。
本发明中，只要没有特殊说明，符号含义为本领域专业技术人员所熟悉的含义，例如表示化学键指向纸面前侧(β构型)；表示化学键指向纸面后侧(α构型)；表示化学键可以指向前侧或后侧、或它们任意比例的α和β构型的混合。
在一个实施方式中，通式(I)的化合物选自下列化合物：
上述本发明的化合物可通过公知的方法转化为相应的盐。盐优选为水溶性的。作为适当的盐，可列举出的碱金属(如钾、钠等)的盐、碱土金属(如钙、镁等)的盐、氨盐、药学上可接受的有机胺(如四甲基氨、三乙胺、甲胺、环戊胺、卞胺、苯乙胺、哌啶、单乙醇胺、二乙醇胺、三(羟甲基)氨基甲烷、赖氨酸、精氨酸、N-甲基-D-葡糖胺等)的盐、酸加成物盐 (包括无机酸盐(如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐等)和有机酸盐(如乙酸盐、三氟乙酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、草酸盐、富马酸盐、马来酸盐、苯甲酸盐、柠檬酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐、羟乙基磺酸盐、葡糖醛酸盐、葡糖酸盐等))等。
本发明的化合物及其盐也可以存在为其溶剂合物的形式。溶剂合物优选为低毒性且水溶性的，作为适当的溶剂合物。例如可列举出水、醇类(比如乙醇)的溶剂的溶剂合物，并可能存在多种晶型。
另外，本发明的化合物或其盐也可以存在为其前药的形式。前药是指能够在生物体内通过酶和/或胃酸等的反应发生，由此转化成通式(I)表示的化合物。作为通式(I)表示的化合物的前药，在通式(I)表示的化合物具有羟基时，可举出该羟基的酰化、烷基化、磷酰化、硼酰化的化合物(例如，本发明的化合物的羟基被乙酰化、棕榈酰化、丙酰化、新戊酰化、琥珀酰化、富马酰化、丙氨酰化、二甲氨基羰基化的化合物等)；通式(I)表示的化合物的羧基被酯化、酰氨化的化合物(例如，通式(I)表示的化合物的羧基被乙基酯化、异丙基酯化、苯基酯化、羟甲基酯化、二甲氨基甲基酯化、新戊酰氧基甲基酯化、乙氧羰基氧基乙基酯化、肽酯化、(5-甲基-2-氧代-1,3-二氧杂环戊基)甲基酯化、环己氧基羰基乙基酯化、甲酰氨化的化合物等)；等。这些化合物可以被公知的方法制备。另外，通式(I)表示的化合物的前药可以为水合物和非水合物的任一种。另外，通式(I)表示的化合物的前药，也可以如“广川书店，1990年刊，《医药品的开发》,第7卷，《分子设计》,第163-198页”中所描述的那样，在生理条件下变为本发明的化合物或其盐。进而，本发明的化合物或其盐也可以是同位素(例如、氘、氚、11C、13C、14C、13N、15N、15O、18O、35S、18F、36Cl、123I、125I)等标记的化合物或其盐。
上述本发明的化合物及其盐的异构体(包括光学异构体、旋光异构体、互变异构体以及它们的任意比例混合物)、溶剂合物和前药作为等同替代方式均包括在本发明中。本发明中的光学异构体不仅包括100％纯度的化合物，也可以包括小于50％的其它光学异构体。
在另一方面，本发明提供了制备上述根据本发明的化合物的方法，所述方法为下列方法之一。
方法一：化合物A1[含通式(II)、(II-1)、(II-2)、(II-3)、(II-4)和(II-5)]可以由中间体A2 和中间体A3通过缩合反应制得，如反应式1所示。缩合反应条件可以为Angew.Chem.Int. Ed.2014,53,7491-7494中报道的合成条件。基于上述反应条件做出的改造和优化以后的反应条件，也可以作为经A2和A3的缩合制备A1的反应条件。
在反应式1中，R2、R4、R5、R6、R7、R8、R9和W的定义与通式(II)中相同，R1和R3都为氢。
方法二：化合物A1可以由中间体A2和中间体A4通过缩合反应制得，如反应式2所示。缩合反应条件可以为Journal of Organic Chemistry 2002,67,6575-6578中报道的合成条件。基于上述反应条件做出的改造和优化以后的反应条件，也可以作为经A2和A4的缩合制备A1的反应条件。
在反应式2中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9和W的定义与通式(II)中相同。
方法三：化合物A1可以由中间体A2、中间体A5和一氧化碳在催化剂[例如四(三苯基磷) 钯)]作用下通过偶联反应制得，如反应式3所示。偶联反应条件可以为OrganicLetters,2009,Vol. 11,No.13,2900-2903；Journal of Organic Chemistry,2002,67,6575-6578中报道的反应条件。基于上述反应条件做出的改造和优化以后的反应条件，也可以作为制备A1的反应条件。
在反应式3中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9和W的定义与通式(II)中相同。
方法四：化合物A1可以如下制备，如反应式4所示：
(1)在催化剂作用之下，A2与氨基保护试剂反应，得到氨基被Prot基团保护的A6；
(2)在碱的作用下，A6与氯乙酰氯反应，得到A7；
(3)A7与三苯基磷反应，得到A8；
(4)A8在碱的作用下，生成Wittig试剂A9；
(5)A9和酰氯A10反应，得到A11；
(6)在催化剂作用之下，A11的氨基保护基团Prot被除去，得到A1，
在反应式4中，R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9和W的定义与通式(I)中相同， R1为氢。
以上各步的反应条件可以为Tetrahedron Letters 56(2015)3281-3284中报道的反应条件。其中碱可选自有机碱和无机碱，例如三乙基氨、二异丙基乙基氨、N-甲基吗啡啉、乙醇钠、甲醇钠、氢氧化钠、氢氧化钾、叔丁醇钠、叔丁醇钾、二异丙基氨基锂、氢化钠、氢化钾、丁基锂等。氨基的保护基团Prot可以为三苯基甲基、苄氧基甲基、甲氧基甲基、2-(三甲基硅基)乙基氧基甲基或对甲氧基苄氧基甲基等基团，氨基的保护和脱保护条件，参考Protective Groups in Organic Synthesis,Wiley,New York,1999中记载的方法，也可以在文献方法基础之上进行适当修改和优化。
基于上述反应条件做出的改造和优化以后的反应条件，也可以作为制备A1的反应条件。
本发明化合物的关键中间体A2可以包括如下所示的A2-a、A2-b和A2-c。它们可以为市售产品，或者可以采用以下几种方法之一合成。
方法一：A2的合成可以通过以下路线合成，如反应式5所示：
(1)M3和芳香胺M4在催化剂存在下发生加成反应，得到M5；所述催化剂可以为能够促进所述加成反应进行的任何催化剂，例如为对甲基苯磺酸一水合物，樟脑磺酸,甲磺酸,叔丁醇钾等；
(2)M5与具有亲核性的化合物R6-H在催化剂存在下发生加成反应得到M6；所述催化剂可以为能够促进所述加成反应进行的任何催化剂，例如为二异丙基乙基胺，三乙基胺，N-甲基吗啉等的碱；
(3)通过还原剂(例如铁粉/氯化氨，或者锌粉/醋酸，或者钯催化的氢气)还原将M6还原为A2，
在反应式5中，R4、R5、R6、R7、R8、R9和W的定义与通式(II)中相同。
中间体M3可以为市售产品，或者可以通过以下路线合成，如反应式6所示：
二氯嘧啶化合物M1和杂环硼酸化合物或者杂环硼酸频那醇酯化合物，在金属催化剂作用下，发生Suzuki偶联反应，得到M3；所述金属催化剂例如为四(三苯基磷)钯(Pd(PPh3)4), 1,1'-双(二苯膦基)二茂铁二氯化钯(II)二氯甲烷复合物(Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2)等；Suzuki偶联反应的条件可以为Chemical Reviews 1995,95(7):2457–2483以及Org.Process Res.Dev.2011, 15,1018–1026中报道的反应条件，也可以为在上述文献基础之上进行了适当优化的反应条件；
或者如反应式7所示：
二氯嘧啶化合物M1和杂环化合物M2在催化剂存在下发生加成反应，得到M3；所述催化剂可以为能够促进所述加成反应进行的任何催化剂，例如为甲基格氏试剂(MeMgCl),乙基格氏试剂(EtMgCl)，叔丁醇钾等的碱；
在反应式6和7中，R4、R5和W的定义与通式(II)中相同。
方法二：A2-a的合成可以通过以下路线合成，如反应式8所示：
(1)二氯嘧啶化合物M1与吲哚M7在MeMgCl存在下发生加成反应，然后在NaH/ 碘甲烷作用之下，甲基化吲哚的N-H，得到M8；
(2)M8和芳香胺M4在催化剂作用下发生加成反应，得到M9；所述催化剂可以为能够促进所述加成反应进行的任何催化剂，例如为对甲基苯磺酸一水合物，樟脑磺酸,甲磺酸,叔丁醇钾等；
(3)M9与具有亲核性的R6-H在催化剂作用下发生加成反应得到M10；所述催化剂可以为能够促进所述加成反应进行的任何催化剂，例如为二异丙基乙基胺，三乙基胺，N-甲基吗啉等的碱；
(4)通过还原剂(例如铁粉/氯化氨，或者锌粉/醋酸，或者钯催化的氢气)还原将M10 还原为A2-a，
在反应式8中，R4、R5、R6、R7、R8和R9的定义与通式(II)中相同。
方法三：A2-b的合成可以通过以下路线合成，如反应式9所示：
(1)二氯嘧啶化合物M1与吲哚M7在MeMgCl存在下发生加成反应，得到M11；
(2)M11和芳香胺M4在催化剂作用下发生加成反应，得到M12；所述催化剂可以为能够促进所述加成反应进行的任何催化剂，例如为对甲基苯磺酸一水合物，樟脑磺酸,甲磺酸,叔丁醇钾等；
(3)M12与具有亲核性的R6-H在催化剂作用下发生加成反应得到M13；所述催化剂可以为能够促进所述加成反应进行的任何催化剂，例如为二异丙基乙基胺，三乙基胺，N-甲基吗啉等的碱；
(4)通过还原剂(例如铁粉/氯化氨，或者锌粉/醋酸，或者钯催化的氢气)还原将M13 还原为A2-b，
在反应式9中，R4、R5、R6、R7、R8和R9的定义与通式(II)中相同。
方法四：A2-c的合成可以通过以下路线合成，如反应式10所示：
(1)二氯嘧啶化合物M1与M14发生Suzuki偶联反应，得到M15；Suzuki偶联反应的条件可以为Chemical Reviews 1995,95(7):2457–2483以及Org.Process Res.Dev.2011,15,1018–1026中的反应条件，也可以是在上述文献基础之上进行了适当优化的条件；
(2)M15和芳香胺M4在催化剂存在下发生加成反应，得到M16；所述催化剂可以为能够促进所述加成反应进行的任何催化剂，例如为对甲基苯磺酸一水合物，樟脑磺酸,甲磺酸,叔丁醇钾等；
(3)M16与具有亲核性的R6-H在催化剂存在下发生加成反应得到M17；所述催化剂可以为能够促进所述加成反应进行的任何催化剂，例如为二异丙基乙基胺，三乙基胺，N-甲基吗啉等的碱；
(4)通过还原剂(例如铁粉/氯化氨，或者锌粉/醋酸，或者钯催化的氢气)还原可以将M17还原为A2-c，
在反应式10中，R4、R5、R6、R7、R8和R9的定义与通式(II)中相同。
在另一方面，本发明提供了制备上述根据本发明的化合物的方法，所述方法还可以为下列方法之一。
方法一：化合物D1[含通式(III)、(III-1)、(III-2)和(III-3)]可以由中间体D2和中间体 A3通过缩合反应制得，如反应式11所示。缩合反应条件可以为Angew.Chem.Int.Ed.2014, 53,7491-7494中报道的合成条件。基于上述反应条件做出的改造和优化以后的反应条件，也可以作为经D2和A3的缩合制备D1的反应条件。
在反应式11中，R2、R4、R5、R6、R7、R8、R9和W的定义与通式(III)中相同，R1和R3都为氢。
方法二：化合物D1可以由中间体D2和中间体A4通过缩合反应制得，如反应式12所示。缩合反应条件可以为Journal of Organic Chemistry 2002,67,6575-6578中报道的合成条件。基于上述反应条件做出的改造和优化以后的反应条件，也可以作为经D2和A4的缩合制备D1的反应条件。
在反应式12中，R、R1、R2、R3、R4、R5、R7、R8、R9和W的定义与通式(III)中相同。
方法三：化合物D1可以由中间体D2、中间体A5和一氧化碳在催化剂[例如四(三苯基磷) 钯)]作用下通过偶联反应制得，如反应式13所示。偶联反应条件可以为OrganicLetters,2009, Vol.11,No.13,2900-2903；Journal of Organic Chemistry,2002,67,6575-6578中报道的反应条件。基于上述反应条件做出的改造和优化以后的反应条件，也可以作为制备D1的反应条件。
在反应式13中，R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9和W的定义与通式(III)中相同。
方法四：化合物D1可以如下制备，如反应式14所示：
(1)在催化剂作用之下，D2与氨基保护试剂反应，得到氨基被Prot基团保护的D3；
(2)在碱的作用下，D3与氯乙酰氯反应，得到D4；
(3)D4与三苯基磷反应，得到D5；
(4)D5在碱的作用下，生成Wittig试剂D6；
(5)D6和酰氯A10反应，得到D7；
(6)在催化剂作用之下，D7的氨基保护基团Prot被除去，得到D1，
在反应式14中，R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9和W的定义与通式(I)中相同， R1为氢。
以上各步的反应条件可以为Tetrahedron Letters 56(2015)3281-3284中报道的反应条件。其中碱可选至有机碱和无机碱，例如三乙基氨、二异丙基乙基氨、N-甲基吗啡啉、乙醇钠、甲醇钠、氢氧化钠、氢氧化钾、叔丁醇钠、叔丁醇钾、二异丙基氨基锂、氢化钠、氢化钾、丁基锂等。氨基的保护基团Prot可以为三苯基甲基、苄氧基甲基、甲氧基甲基、2-(三甲基硅基)乙基氧基甲基或对甲氧基苄氧基甲基等基团，氨基的保护和脱保护条件，参考Protective Groups in Organic Synthesis,Wiley,New York,1999中记载的方法，也可以在文献方法基础之上进行适当修改和优化。
基于上述反应条件做出的改造和优化以后的反应条件，也可以作为制备D1的反应条件。
本发明化合物的关键中间体D2可以为市售产品，或者利用与本发明合成A2、A2-a,A2-b, A2-c相同的方法，在替换部分反应试剂和起始原料的基础上，合成本发明关键中间体D2。
本发明的另一方面涉及一种药物组合物，其包含选自上述本发明的化合物和其盐中的一种或多种。所述药物组合物还可以任选包含药学上可接受的辅料，所述辅料例如可以为粘合剂、填充剂(稀释剂)、崩解剂、混悬剂、助悬剂、缓(控)释剂、冻干保护剂、包衣剂、肠溶材料、润滑剂(助流剂、抗粘剂)、甜味剂、风味剂、增塑剂、遮光剂、增溶剂、保湿剂、溶剂、渗透压调节剂、着色剂、色素、表面活性剂(乳化剂)、水溶性基质、脂溶性基质、油脂性基质、致孔剂、凝胶剂、防腐剂、缓冲剂、螯合剂、抗氧剂等。
在一个实施方式中，所述的药物组合物为上皮生长因子受体(EGFR)抑制剂。
在一个实施方式中，所述的药物组合物为与EGFR相关的疾病的预防或治疗剂。
本发明的另一方面涉及预防和/或治疗与EGFR相关的疾病的方法，所述方法包括向有此需要的对象给与治疗有效量的本发明的化合物或其盐。所述对象优选为哺乳动物，例如人。
本发明的另一方面涉及上述本发明的化合物或其盐，用于与EGFR相关的疾病的预防和/或治疗。
本发明的另一方面涉及上述本发明的化合物或其盐在制备上皮生长因子受体(EGFR)抑制剂或预防和/或治疗与EGFR相关的疾病的药物中的用途。
上述与EGFR相关的疾病例如为变应性疾病、自免疫性疾病、炎形疾病、血栓栓塞疾病、或癌症。所述癌症例如为非霍奇金淋巴癌、乳腺癌、肝癌、肠癌、食道癌、胰腺癌、肺癌或子宫颈癌。
附图说明
图1为显示本申请化合物1抑制EGFR的磷酸化的效果的图。
图2为显示本申请化合物7抑制EGFR的磷酸化的效果的图。
具体实施方式
实施例
以下，通过实施例详细描述发明，但是本发明并不限定于这些实施例。
化合物的通用纯化制备色谱条件：纯化所用仪器为岛津半制备高效液相色谱(用HPLC 代表,型号是LC-20AR)，制备柱为型号为SunFire Prep C18OBRTM 5uM。HPLC工作所用流动相为水(0.1％三氟醋酸)和乙腈(0.1％三氟醋酸)，流动相梯度为每一分钟乙腈比例增加 1％。纯化时候，起始的乙腈比例依据化合物性质作相应变化。
1H NMR代表核磁共振仪测得氢原子信号图谱氢谱。1H NMR后面紧跟的括号内，CDCl3代表溶解样品溶剂是氘代氯仿,MeOD-d4代表代表溶解样品溶剂是四氘代甲醇，DMSO-d6代表溶解样品溶剂是六氘代二甲亚砜。400MHz,代表测试所使用核磁共振仪采用的电磁波频率。
ESI-MS代表质谱仪器所使用的探头是电喷雾离子化(ESI)模式。[M+H]+＝后面的数字为物质离子化后质荷比的理论值。
CH2Cl2代表二氯甲烷，Et3N表示三乙基胺，Cbz代表苄氧羰基保护基，Boc代表叔丁氧羰基保护基,TLC表示薄层硅胶板。
本说明书中使用的化合物名称，一般根据IUPAC命名法来命名，也有根据俗称命名的。
实施例1合成N-[2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚 -3-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(1)
步骤一：合成3-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-吲哚(GB011)
在0℃和氮气保护条件下，将CH3MgCl(3M，四氢呋喃溶液，14mL，42mmol)逐滴加入到吲哚(5g,42mmol)的1,2-二氯乙烷(250mL)溶液中。将所得溶液搅拌15分钟，然后一次性添加2,4-二氯嘧啶(9.48g,64mmoL)。让所得溶液升温至室温，再搅拌16小时。通过添加甲醇(25mL)淬灭反应，然后将所得混合物进行真空浓缩，使残余物吸附到硅胶上，利用正相硅胶柱进行纯化，得到GB011(3g)，为类黄色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz): 7.18-7.27(m,2H),7.46-7.53(m,1H)，7.90(d,1H,J＝5.36Hz)，8.38-8.44(m,1H)，8.48-8.55(m, 2H),12.07(s,1H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝230.1,实验测得：230.02。
步骤二：合成3-(2-氯嘧啶-4-基)-1-甲基-1H-吲哚(GB012)
将NaH(0.419g,17.46mmol)置于单口瓶中，加入四氢呋喃。在0℃加入3-(2-氯嘧啶-4- 基)-1H-吲哚(1g,4.36mmol)。在0℃搅拌30分钟，加入碘甲烷(6.157g,43.6mmol),继续搅拌3小时。加入饱和碳酸氢钠(25mL)淬灭反应。用乙酸乙酯(100mL)萃取，有机层用水(50mL)和饱和氯化钠(50mL)洗。有机相用无水硫酸钠干燥，蒸干。残余物利用正相硅胶柱纯化，得到GB012(0.96g)，为类黄色固体。1H NMR(DMSO,400MHz):3.87(s, 3H),7.22-7.33(m,2H),7.55(d,1H,J＝7.79Hz)，7.79(d,1H,J＝5.47Hz),8.40(d,1H,J＝7.55 Hz),8.47(s,1H),8.51(d,1H,J＝5.45Hz)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝244.1，实验测得： 243.9。
步骤三：合成N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(GB17)
将GB012(0.765g,4.11mmol)和4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺(1g,4.11mmol)溶于2-戊醇(20mL)，一次性加入对甲苯磺酸一水合物(0.938g,4.93mmol)，然后升温至105℃，反应2.5小时，最后冷却到室温。抽滤，滤饼用2-戊醇(2mL)洗，干燥，得到GB17(0.95g)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):3.90(s,3H),3.97(s,3H),7.11(s,1H),7.31(t,1H,J＝7.67Hz), 7.43-7.54(m,2H),7.58(d,1H,J＝8.56Hz),8.12-8.22(m,1H),8.31(d,1H,J＝6.46Hz), 8.65-8.76(m,2H),。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝394.1，实验测得:394.1。
步骤四：合成N1-(2-(二甲基氨基乙基)-N1-甲基-5-甲氧基-N4-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基) 嘧啶-2-基]-2-硝基苯-1,4-二胺(GB018)
将GB17(1.5g,3.816mmol)、二异丙基乙基胺(1.23g,9.54mmol)和氮甲基吡咯烷酮(15 mL)混合于玻璃瓶中。向所得悬浮液加入N1,N1,N2-三甲基乙二胺(0.396g,3.816mmol)，并在140℃下加热1小时。冷却到室温，加入100mL水，搅拌，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化，得到0.9g目标物GB018。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.66(s,1H),8.40-8.28(m,3H),8.09(s,1H),7.50(d,1H,J＝8.00Hz),7.28-7.18(m,2H),7.11(t,1H,J＝7.21Hz),6.85(s,1H),3.95(s, 3H),3.86(s,3H),3.28(t,2H,J＝6.76Hz),2.84(s,3H),2.57(t,J＝6.71Hz),2.49(t,2H),2.23(s, 6H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝476.2，实验测得：476.3。
步骤五：合成N1-(2-二甲氨基乙基)-N1-甲基-5-甲氧基-N4-[4-(1-甲基吲哚-3-基)嘧啶-2-基] 苯-1,2,4-三胺(GB023)
将GB018(0.5g,1.05mmoL)、铁粉(0.234g,4.20mmoL)、氯化铵(0.233g,4.13mmoL)和混合溶剂(乙醇:水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应3小时，经TLC检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。残余物通过硅胶柱纯化，得到目标物GB023(0.35g)。1H NMR (MeOD-d4,400MHz):8.39(d,1H,J＝8.05Hz),8.20(d,1H,J＝5.60Hz),8.03(s,1H),7.989(s, 1H),7.43(d,1H,J＝8.00Hz),7.20-7.28(m,2H),7.11(d,1H,J＝5.22Hz),6.84(s,1H),3.86(s,3H),3.85(s,3H),3.31(s,3H),3.02-3.05(m,2H),2.66(s,3H),2.46-2.49(m,2H),2.27(s,6H)。
ESI-MS理论计算值[M+H]+＝446.3，实验测得：446.3。
步骤六：合成N-[2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3- 基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(1)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.091g,0.269mmol)、炔基乙酸(0.033g,0.269mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GB023(0.12g,0.269mmol)和三乙胺(0.2mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化，得到化合物1的三氟醋酸盐8mg。HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：10％；出峰时间t1/2＝22.5分钟。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.52(s,1H),8.14-8.25(m,2H),7.96 (d,1H,J＝6.95Hz),7.50(d,1H,J＝8.20Hz),7.30-7.37(m,2H),7.22-7.28(m,1H),7.06(s,1H),6.10(t,1H,J＝6.78Hz),5.40(d,2H,J＝6.52Hz),3.94(s,3H),3.91(s,3H),3.50-3.56(m,2H), 3.33-3.40(m,2H),2.91(s,6H),2.79(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝512.3，实验测得 512.2
化合物1也可以通过以下方法制得：将炔基乙酸(0.041g,0.494mmol)溶于无水二氯甲烷(10mL),向上述溶液中加入2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.148g,0.58mmol)。反应液在室温下搅拌1小时。向上述反应液中滴入GB023(0.20g,0.449mmol)和二异丙基乙基胺(0.3mL)的二氯甲烷溶液(10mL)。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化、冻干、再溶解于10mL乙腈，加入50mg无水碳酸钾，所得混合物在85℃下搅拌3小时。蒸干、粗产物直接用HPLC纯化，得到化合物1的三氟醋酸盐 40mg。
化合物1还可以通过以下方法制得：将炔基乙酸(0.020g,0.246mmol)溶于无水二氯甲烷(10mL),向上述溶液中加入2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.074g,0.248mmol)。该反应液在室温下搅拌1小时，滴入GB023(0.10g,0.225mmol)和二异丙基乙基胺(0.2mL)的二氯甲烷溶液。再在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩，得反应粗品。将该粗品置于瓶中，溶于10mL乙腈，再加入30mg无水碳酸钾。反应混合物在85℃下搅拌3小时，蒸干、粗产物直接用HPLC纯化，得到化合物1的三氟醋酸盐51mg。
实施例2合成(S)-N-[2-(四氢呋喃-3-基)氧基-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶 -2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(2)
步骤一：合成(S)-N-(2-甲氧基-4-(四氢呋喃-3-基)氧基-5-硝基)苯基-4-(1-甲基-1H-吲哚-3- 基)嘧啶-2-基胺(GB056)
将叔丁醇钾(0.366g,3.81mmol)加入N,N-二甲基甲酰胺(10mL)在0℃下搅拌，加入0.167g (1.9mmol)的(S)-(+)-3-羟基四氢呋喃，反应1小时。加入GB17(0.500g,1.27mmol)，在室温反应3小时。向所得悬浮液加入100mL水，调pH到7-8，搅拌，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化，得到0.15g目标物GB056。1H NMR(DMSO-d6,400MHz):8.77(s,1H),8.28-8.40(m,3H),8.18(s,1H),7.51(d,1H,J＝7.95Hz),7.20-7.28(m,2H),7.07-7.13(m,1H),6.93(s,1H),5.34-5.41 (m,1H),4.00(s,3H),3.93-3.98(m,1H),3.76-3.92(m,2H),3.87(s,3H),3.76-3.84(m,1H), 2.21-2.22(m,1H),2.03-2.11(m,1H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝462.2,实验测得：462.2。
步骤二：合成(S)-N1-(4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)-4-((四氢呋喃-3-基)氧基)-6-甲氧基苯-1,3-二胺(GB060)
将GB056(0.15g,0.32mmoL)、铁粉(0.072g,1.3mmoL)、氯化铵(0.07 2g,1.34mmoL)和混合溶剂(乙醇:水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应3小时，经TLC检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。残余物通过硅胶柱纯化,得到目标物GB060(0.12g)。1H NMR (CDCl3,400MHz):8.50(d,1H,J＝7.42Hz),8.32(d,1H,J＝5.42Hz),8.15(s,1H),7.79(s,1H), 7.50(s,1H),7.38-7.40(d,1H,J＝8.00Hz),7.37-7.42(m,1H),7.29-7.36(m,2H),7.02(d,1H,J＝ 5.20Hz),6.52(s,1H),4.88-4.93(m,1H),4.03-4.10(m,2H),3.90-3.96(m,2H),3.89(s,3H), 3.85(s,3H),2.11-2.29(m,2H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝432.2，实验测得:432.4。
步骤三：合成(S)-N-[2-(四氢呋喃-3-基)氧基-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶 -2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(2)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.075g,0.334mmol)、炔基乙酸(0.028g,0.334mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GB060(0.12g,0.278mmoL)和三乙胺(0.2mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化，得到化合物2的三氟醋酸盐6.1mg。HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：20％；出峰时间t1/2＝22.5分钟。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.54(s,1H),8.22-8.48(m,2H),7.85-7.95 (m,1H),7.51(d,1H,J＝8.24Hz),7.29-7.39(m,2H),7.19-7.29(m,1H),6.87(s,1H),5.97(t,1H, J＝6.56Hz),5.41(d,2H,J＝6.56Hz),5.22-5.27(m,1H),4.02-4.14(m,2H),3.91-4.02(m,2H), 3.93(s,3H),3.90(s,3H),2.30-2.41(m,1H),2.18-2.28(m,1H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝ 498.2，实验测得498.4。
实施例3合成N-[2-(4-甲基哌嗪基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(3)
步骤一：合成N-(4-(4-甲基哌嗪基)-2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶 -2-基胺(GB066)
将GB017(0.1g,0.254mmol)加入5mL N-基吡咯烷酮在室温下搅拌，加入氮甲基哌嗪 (0.025g,0.254mmol)，再加入二异丙基乙基胺(0.1mL),升温至140℃反应。反应2.5小时，降至室温。向上述反应液加入100mL水，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化，得到0.1g目标物 GB066。1H NMR(CDCl3,400MHz):9.66(s,1H),8.40(d,1H,J＝5.25Hz),8.29(s,1H),8.14-8.20 (m,1H),7.57(s,1H),7.39-7.44(m,1H),7.28-7.36(m,2H),7.20(d,1H,J＝5.29Hz),6.63(s,1H), 4.00(s,3H),3.95(s,3H),3.10-3.19(m,4H),2.62-2.72(m,4H),2.40(s,3H)。ESI-MS理论计算值 [M+H]+＝474.2，实验测得：474.1。
步骤二：合成N1-(4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)-4-(4-甲基哌嗪基)-6-甲氧基苯-1,3- 二胺(GB068)
将GB066(0.1g,0.221mmoL)、铁粉(0.047g,0.845mmoL)、氯化铵(0.052g,0.87mmoL) 和混合溶剂(乙醇:水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应6小时，经TLC检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。残余物通过硅胶柱纯化,得到目标物GB068(0.08g)。1H NMR(CDCl3,400MHz):8.47-8.54(m,1H),8.32(d,1H,J＝5.39Hz),8.18(s,1H),7.76(s,1H),7.59(s,1H),7.25-7.43(m,3H),7.00(d,1H,J＝5.32Hz),6.71(s,1H),3.84(s,6H),2.92-3.10(m, 4H),2.50-2.80(m,4H),2.41(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝444.3，实验测得:444.1。
步骤三：合成N-[2-(4-甲基哌嗪基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基) 苯基]-2,3-丁联烯酰胺(3)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.06g,0.27mmol)、炔基乙酸(0.022g,0.27mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GB068(0.08g,0.18mmoL)和三乙胺(0.1mL) 的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化，得到化合物3的三氟醋酸盐2.4mg。HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：10％；出峰时间t1/2＝17.5分钟。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.59-8.80(m,1H),8.52(s,1H),7.81-8.03 (m,1H),7.72(d,1H,J＝6.90Hz),7.28-7.35(m,1H),7.20-7.27(m,1H),7.11-7.20(m,1H), 6.99-7.04(m,1H),6.93(s,1H),6.07(t,1H,J＝6.47Hz),5.45(d,2H,J＝6.47Hz),3.84(s,3H),3.70(s,3H),3.60-3.75(m,2H),3.32-3.43(m,2H),3.18-3.27(m,4H),3.02(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝510.3，实验测得:510.2。
实施例4合成N-[2,4-二甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(4)
步骤一：合成N-(2,4-二甲氧基-5-硝基苯基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基胺 (ZYJ083)
将甲醇钠(0.3054mL,1.527mmol)加入N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，在0℃下搅拌，称取 GB17(0.20g,0.51mmol)加入，在室温反应过夜。向所得悬浮液加入100mL水，调pH到7-8，搅拌，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化，得到0.15g目标物ZYJ083。1H NMR(DMSO-d6,400MHz):8.78(s,1H),8.30-8.39(m,3H),8.17(s,1H),7.52(d,1H,J＝7.77Hz),7.21-7.27(m, 2H),7.07-7.13(m,1H),6.96(s,1H),4.02(s,3H),4.00(s,3H),3.87(s,3H)。ESI-MS理论计算值 [M+H]+＝406.2，实验测得：406.3。
步骤二：合成N1-(4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)-4,6-二甲氧基苯基-1,3-二胺(GB076)
将ZYJ083(0.15g,0.371mmoL)、铁粉(0.083g,1.48mmoL)、氯化铵(0.093g,1.55mmoL) 和混合溶剂(乙醇:水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应6小时，经TLC检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。残余物通过硅胶柱纯化,得到目标物GB076(0.12g)。1H NMR(CDCl3,400MHz):8.45-8.54(m,1H),8.21-8.34(m,1H),8.06(s,1H),7.75(s,1H),7.50(s,1H),7.24-7.41(m,3H),6.97(d,1H,J＝5.04Hz),6.54(s,1H),3.85(s,6H),3.84(s,3H)。ESI-MS 理论计算值[M+H]+＝376.2，实验测得:376.4。
步骤三：合成N-[2,4-二甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(4)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.046g,0.208mmol)、炔基乙酸(0.026g,0.32mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GB076(0.06g,0.16mmoL)和三乙胺(0.1 mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC 纯化，得到化合物4的三氟醋酸盐3.1mg。HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：10％；出峰时间t1/2＝32分钟。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.49-8.58(m,1H),7.86-7.94(m,1H), 7.50-7.55(m,1H),7.30-7.40(m,2H),7.21-7.30(m,1H),6.90(s,1H),6.03(t,1H,J＝6.60Hz), 5.37(d,2H,J＝6.60Hz),4.02(s,3H),3.95(s,3H),3.92(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝442.2，实验测得:442.3。
实施例5合成N-[2-吗啉基-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(5)
步骤一：合成N-(2-甲氧基-4-吗啉基-5-硝基苯基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基胺 (GB072)
将GB17(0.2g,0.5mmol)加入N-甲基吡咯烷酮(5mL)，在室温下搅拌，称取吗啉(0.044g, 0.5mmol)加入，取二异丙基乙基胺(0.1mL)加入，升温至140℃反应。反应2.5小时，降至室温。向上述反应液加入100mL水，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化，得到0.16g目标物GB072。1H NMR(CDCl3,400MHz):9.68(s,1H),8.40(d,1H,J＝5.32Hz),8.27(s,1H),8.17(d,1H,J＝ 7.20Hz),7.59(s,1H),7.38-7.45(m,1H),7.28-7.37(m,2H),7.21(d,1H,J＝5.31Hz),6.62(s,1H), 4.02(s,3H),3.94(s,3H),3.87-3.93(m,4H),3.05-3.14(m,4H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝ 461.2，实验测得：461.5。
步骤二：合成N1-(4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)-4-吗啉基-6-甲氧基苯-1,3-二胺 (GB081)
将GB072(0.15g,0.326mmoL)、锌粉(0.211g,3.26mmoL)、氯化铵(0.082g,1.369mmoL) 和混合溶剂(乙醇:水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应6小时，经TLC检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。残余物通过硅胶柱纯化,得到目标物GB081(0.12g)。1HNMR(CDCl3,400MHz):8.48-8.55(m,1H),8.31(d,1H,J＝5.33Hz),8.20(s,1H),7.74(s,1H),7.61(s,1H),7.27-7.40(m,3H),6.99(d,1H,J＝5.28Hz),6.69(s,1H),3.84-3.90(m,4H),3.87(s, 3H),3.83(s,3H),2.90-2.97(m,4H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝431.2，实验测得:431.4。
步骤三：合成N-[2-吗啉基-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(5)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.054g,0.24mmol)、炔基乙酸(0.031g,0.37mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GB081(0.08g,0.18mmoL)和三乙胺(0.1 mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC 纯化，得到化合物5的三氟醋酸盐5mg。HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：10％；出峰时间t1/2＝34分钟。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.59-8.69(m,1H),8.22-8.40(m,1H), 7.92-8.00(m,1H),7.53(d,1H,J＝8.46Hz),7.32-7.40(m,2H),7.21-7.28(m,1H),7.07(s,1H), 5.92(t,1H,J＝6.60Hz),5.52(d,2H,J＝6.60Hz),3.96(s,3H),3.88-3.94(m,4H),3.91(s,3H),2.96-3.01(m,4H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝497.2，实验测得497.3。
实施例6合成N-[2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(4-(吡唑并[1,5-a] 吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(6)
步骤一：合成4-(吡唑[1,5-a]并吡啶-3-基)-2-氯嘧啶(GB077)
称取吡唑[1,5-a]并吡啶-3-硼酸酯(可以参照Tetrahedron,2012年,68卷(27-28),5434-5444 页制备)(0.45g,1.85mmol)，2,4-二氯嘧啶(0.328g,2.2mmoL)和Pd(dppf)Cl2(0.096g,0.064 mmoL)。加入2M碳酸钠的水溶液(2.1mL)和1,2-二氯乙烷(16mL)，抽真空，用氮气置换。升温至80℃反应过夜。蒸干溶剂，加入100mL水和200mL二氯甲烷。分出有机相，然后将有机相进行真空浓缩，使残余物吸附到硅胶上，利用正相硅胶柱进行纯化，得到GB077 (0.6g)，为类黄色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz):8.62-8.70(m,1H),8.54-8.60(m,1H)， 8.45-8.52(m,2H)，7.43-7.54(m,2H)，6.98-7.04(m,1H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝231.0, 实验测得：231.2。
步骤二：合成N-(2-甲氧基-4-氟-5-硝基苯基)-4-(吡唑[1,5-a]并吡啶-3-基)-嘧啶-2-胺 (GB079)
将GB077(0.40g,1.73mmol)和4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺(0.322g,1.73mmol)溶于2- 戊醇(20mL)，一次性加入对甲苯磺酸一水合物(0.394g,2.0mmol)，然后升温至105℃，反应24小时，最后冷却到室温。抽滤，滤饼用2-戊醇(5mL)洗，干燥，利用正相硅胶柱进行纯化，得到GB079(0.4g)，为类黄色固体。1H NMR(DMSO,400MHz):8.97(s,1H,), 8.86-8.92(m,1H),8.77(d,1H,J＝8.27Hz),8.42-8.49(m,1H),8.36-8.42(m,1H),7.41-7.56(m, 2H),7.15-7.23(m,1H),7.07-7.12(m,2H),3.99(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝381.1，实验测得：381.2。
步骤三：合成N1-(2-(二甲基氨基乙基)-N1-甲基-N4-(4-(吡唑[1,5-a]并吡啶-3-基)-嘧啶-2- 基)-5-甲氧基-2-硝基苯-1,4-二胺(GB084)
将GB079(0.2g,0.526mmol)、二异丙基乙基胺(0.1g,0.64mmol)和N-甲基吡咯烷酮(10mL) 混合于玻璃瓶中。加入N1,N1,N2-三甲基乙二胺(0.109g,0.152mmol)并在140℃下加热2.5小时。冷却到室温，加入100mL水，搅拌，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化，得到0.2g目标物GB084。1H NMR(CDCl3,400MHz):9.02(s,1H),8.45-8.55(m,2H),8.42(s,1H),8.32(d,1H,J ＝5.42Hz),7.46(s,1H),7.34-7.43(m,1H),7.01(d,1H,J＝5.40Hz),6.87-6.93(m,1H),6.66(s, 1H),3.95(s,3H),3.21-3.31(m,2H),2.86(s,3H),2.52-2.61(m,2H),2.25(s,6H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝463.2，实验测得：463.1。
步骤四：合成N1-(2-二甲基氨基乙基)-N1-甲基-N4-[4-(吡唑[1,5-a]并吡啶-3-基)嘧啶-2- 基]-5-甲氧基-苯-1,2,4-三胺(GB085)
将GB084(0.13g,0.28mmoL)、铁粉(0.063g,1.20mmoL)、氯化铵(0.069g,1.20mmoL)和混合溶剂(乙醇:水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应6小时，经TLC检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。残余物通过硅胶柱纯化,得到目标物GB085(0.11g)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.75-8.82(m,1H),8.77(s,1H),8.49-8.57(m,1H),8.30(d,1H,J＝ 5.26Hz),8.02(s,1H),7.35-7.43(m,1H),7.28(s,1H),7.19-7.24(m,1H),7.03-7.10(m,1H), 6.77(s,1H),3.71(s,3H),2.97-3.08(m,2H),2.67-2.81(m,2H),2.60(s,3H),2.42(s,6H)。 ESI-MS理论计算值[M+H]+＝433.3，实验测得：433.2。
步骤五：合成N-[2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(4-(吡唑并[1,5-a] 吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(6)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.067g,0.30mmol)、炔基乙酸(0.038g,0.46mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GB085(0.10g,0.230mmoL)和三乙胺(0.1mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化，得到化合物6的三氟醋酸盐7.8mg。HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：10％；出峰时间t1/2＝18.5 分钟。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.82(s,1H),8.75-8.78(m,1H),8.41-8.55(m,1H),8.06-8.13(m,1H),7.88(s,1H),7.58-7.66(m,1H),7.43-7.49(m,2H),7.20-7.27(m,1H),7.07 (s,1H),6.06(t,1H,J＝6.53Hz),5.41(d,2H,J＝6.53Hz),3.94(s,3H),3.52-3.55(m,2H), 3.33-3.37(m,2H),2.91(s,6H),2.79(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝499.3，实验测得: 499.2。
实施例7合成N-[2-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(7)
步骤一：合成N-(2-甲氧基-4-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-基)-5-硝基苯基)-4-(1-甲基-1H-吲哚 -3-基)嘧啶-2-基胺(GB086)
将GB017(0.3g,0.76mmol)加入10mL N-甲基吡咯烷酮，在室温下搅拌。称取4-二甲氨基 -氮杂环己烷(0.194g,1.52mmol)加入，取0.1mL二异丙基乙基胺加入，升温至140℃反应。反应2.5小时，降至室温。向上述反应液加入100mL水，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化，得到0.3g目标物GB086。1H NMR(CDCl3,400MHz):9.66(s,1H),8.40(d,1H,J＝5.42Hz),8.31(s, 1H),8.16(d,1H,J＝7.31Hz),7.55(s,1H),7.39-7.44(m,1H),7.29-7.36(m,2H),7.21(d,1H,J＝5.17Hz),6.60(s,1H),3.99(s,3H),3.95(s,3H),3.35-3.43(m,2H),2.79-2.90(m,2H),2.27-2.41 (m,1H),2.35(s,6H),1.75-1.97(m,4H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝502.3，实验测得：502.3。
步骤二：合成N1-(4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)-4-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-基)-6-甲氧基苯-1,3-二胺(GB089)
将GB086(0.3g,0.371mmoL)、锌粉(0.778g,11.97mmoL)、氯化铵(0.141g,2.36mmoL) 和混合溶剂(乙醇:水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应6小时，经TLC检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。残余物通过硅胶柱纯化,得到目标物GB089(0.2g)。1H NMR(CDCl3,400MHz):8.51(d,1H,J＝7.00Hz),8.33(d,1H,J＝5.25Hz),8.18(s,1H),7.79(s,1H),7.58(s,1H),7.28-7.43(m,3H),7.02(d,1H,J＝5.31Hz),6.66(s,1H),3.88(s,3H),3.85 (s,3H),3.19-3.30(m,2H),2.58-2.73(m,3H),2.53(s,6H),2.04-2.14(m,2H),1.71-1.87(m,2H)。 ESI-MS理论计算值[M+H]+＝472.3，实验测得:472.0。
步骤三：合成N-[2-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(7)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.046g,0.208mmol)、炔基乙酸(0.026g,0.32mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GB089(0.06g,0.16mmoL)和三乙胺(0.1 mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC 纯化，得到化合物7的三氟醋酸盐31mg。HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：10％；出峰时间t1/2＝24分钟。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.32-8.74(m,2H),7.64-7.94(m,1H),7.57(d, 1H,J＝6.86Hz),7.15-7.26(m,2H),7.05-7.14(m,1H),6.77-6.94(m,2H),5.92(t,1H,J＝6.50Hz),5.47(d,2H,J＝6.50Hz),3.80(s,3H),3.59(s,3H),3.33-3.44(m,1H),3.05-3.20(m,2H), 2.95(s,6H),2.80-2.91(m,2H),2.17-2.30(m,2H),1.89-2.03(m,2H)。ESI-MS理论计算值 [M+H]+＝538.3，实验测得538.1。
实施例8合成N-[2-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基) 嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(8)
步骤一：合成N-(4-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)-2-甲氧基-5-硝基苯)-4-(1-甲基-1H-吲哚 -3-基)嘧啶-2-基胺(GB087)
将GB17(0.3g,0.76mmol)加入10mL N-甲基吡咯烷酮，在室温下搅拌。称取(3-二甲氨基) 氮杂环戊烷(0.285g,1.52mmol)加入，取0.1mL二异丙基乙基胺加入，升温至140℃反应。反应2.5小时，降至室温。向上述反应液加入100mL水，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化，得到0.24g目标物GB087。1H NMR(CDCl3,400MHz):9.49(s,1H),8.35(d,1H,J＝5.40Hz),8.25(s, 1H),8.11-8.17(m,1H),7.44(s,1H),7.34-7.40(m,1H),7.24-7.33(m,2H),7.14(d,1H,J＝ 5.22Hz),6.29(s,1H),3.94(s,3H),3.91(s,3H),3.50-3.61(m,1H),3.33-3.42(m,1H),3.10-3.20 (m,2H),2.73-2.85(m,1H),2.30(s,6H),2.09-2.24(m,1H),1.83-1.96(m,1H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝488.2，实验测得：488.3。
步骤二：合成N1-(4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)-4-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)-6- 甲氧基苯-1,3-二胺(GB090)
将GB087(0.23g,0.47mmoL)、锌粉(0.611g,9.4mmoL)、氯化铵(0.113g,1.88mmoL)和混合溶剂(乙醇:水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应6小时，经TLC检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。残余物通过硅胶柱纯化，得到目标物GB090(0.2g)。1H NMR(DMSO-d6,400MHz):8.38-8.47(m,1H),8.29(s,1H),8.21-8.26(m,2H),7.78(s,1H), 7.44-7.57(m,2H),7.20-7.30(m,1H),7.08-7.20(m,2H),6.70(s,1H),3.86(s,3H),3.74(s,3H), 3.22-3.43(m,2H),2.93-3.06(m,3H),2.31(s,3H),2.03-2.14(m,1H),1.77-1.90(m,1H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝458.3，实验测得:458.1。
步骤三：合成N-[2-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基) 嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(8)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.064g,0.284mmol)、炔基乙酸(0.036g,0.43mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GB090(0.1g,0.218mmoL)和三乙胺(0.1 mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC 纯化，得到化合物8的三氟醋酸盐40mg。HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：10％；出峰时间t1/2＝22分钟。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.53(s,1H),8.31-8.47(m,1H),7.91-7.98(m, 1H),7.53(d,1H,J＝8.25Hz),7.25-7.39(m,3H),6.80(s,1H),6.00(t,1H,J＝6.50Hz),5.40(d,2H,J＝6.62Hz),3.99-4.08(m,1H),3.96(s,3H),3.92(s,3H),3.58-3.65(m,2H),3.50-3.57(m, 1H),3.33-3.41(m,1H),3.00(s,6H),2.48-2.60(m,1H),2.21-2.33(m,1H)。ESI-MS理论计算值 [M+H]+＝524.3，实验测得524.1。
实施例9合成N-[2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(9)
步骤一：合成N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(ZYJ093)
将GB011(2.0g,8.73mmol)和4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺(1.624g,8.73mmol)溶于2-戊醇(35mL)，一次性加入对甲苯磺酸一水合物(1.991g,10.48mmol)，然后升温至105℃，反应2.5小时，最后冷却到室温。抽滤，滤饼用2-戊醇(5mL)洗，干燥，得到ZYJ093(1.7g)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz):12.46(s,1H),9.79(s,1H),8.77(d,1H,J＝8.02Hz),8.67(s,1H), 8.33(d,1H,J＝6.81Hz),8.13-8.23(m,1H),7.44-7.58(m,3H),7.19-7.26(m,1H),7.02-7.12(m, 1H),3.99(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝380.1,实验测得：380.0。
步骤二：合成N1-(2-(二甲基氨基乙基)-N1-甲基-5-甲氧基-N4-[4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2- 基]-2-硝基苯-1,4-二胺(ZYJ094)
将ZYJ093(0.5g,1.3mmol)、二异丙基乙基胺(0.58mL,3.3mmol)和N-甲基吡咯烷酮(15 mL)混合于玻璃瓶中。向上述悬浮液加入N1,N1,N2-三甲基乙二胺(0.27g,2.6mmol)，并在 140℃下加热2.5小时。冷却到室温，加入100mL水，搅拌，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化，得到0.36g目标物ZYJ094。1H NMR(DMSO-d6,400MHz):11.81(s,1H),8.61(s,1H),8.27-8.36 (m,2H),8.07(s,1H),7.43(d,1H,J＝8.29Hz),7.27(d,1H,J＝5.49Hz),7.13-7.18(m,1H), 7.02-7.08(m,1H),6.84(s,1H),3.95(s,3H),3.23-3.30(m,2H),3.13-3.18(m,2H),2.85(s,3H), 2.16(s,6H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝462.2,实验测得:462.2。
步骤三：合成N1-(2-(二甲氨基)乙基)-N1-甲基-N4-(4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)-5- 氧基苯-1,2,4-三胺(GB096)
将ZYJ094(0.36g,0.779mmoL)、锌粉(1.012g,15.5mmoL)、氯化铵(0.187g,3.1mmoL) 和混合溶剂(乙醇:水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应3小时，经TLC检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。残余物通过硅胶柱纯化,得到目标物GB096(0.35g)。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):11.78(s,1H),8.41(d,1H,J＝7.77Hz),8.30-8.33(m,1H),8.26 (d,1H,J＝5.39Hz),7.83(s,1H),7.57-7.68(m,1H),7.44(d,1H,J＝7.93Hz),7.23(d,1H,J＝5.60Hz),7.08-7.20(m,2H),6.84(s,1H),3.77(s,3H),3.33(s,3H),3.01-3.14(m,2H),2.72-2.89 (m,2H),2.60(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝432.3，实验测得：432.4。
步骤四：合成N-[2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(9)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.091g,0.269mmol)、炔基乙酸(0.033g,0.269mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GB096(0.12g,0.269mmoL)和三乙胺(0.2mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化，得到化合物9的三氟醋酸盐8mg。HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：10％；
出峰时间t1/2＝19.5分钟。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.49(s,1H),8.24-8.36(m,1H), 7.93-8.05(m,1H),7.49(d,1H,J＝7.68Hz),7.41(d,1H,J＝6.82Hz),7.23-7.30(m,1H), 7.15-7.23(m,1H),7.06(s,1H),6.05(t,1H,J＝6.49Hz),5.40(d,2H,J＝6.49Hz),3.94(s,3H), 3.52-3.55(m,2H),3.32-3.36(m,2H),2.90(s,6H),2.80(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝ 498.3，实验测得：498.3。
实施例10合成N-[2-(4-(叔丁基氧羰基)哌嗪-1-基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基) 嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(10)
步骤一：合成N-(4-(4-(叔丁基氧羰基)哌嗪-1-基)-2-甲氧基-5-硝基苯)-4-(1-甲基-1H-吲哚 -3-基)嘧啶-2-基胺(GB093)
将GB17(0.5g,0.76mmol)加入N-甲基吡咯烷酮(10mL)，在室温下搅拌。称取N-叔丁基氧羰基哌嗪(0.285g,1.52mmol)加入，取二异丙基乙基胺(0.3mL)加入，升温至140℃反应。反应2.5小时，降至室温。向上述反应液加入100mL水，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化，得到 0.4g目标物GB093。1H NMR(CDCl3,400MHz):9.68(s,1H),8.40(d,1H,J＝5.33Hz),8.28(s, 1H),8.15-8.19(m,1H),7.59(s,1H),7.39-7.44(m,1H),7.28-7.37(m,2H),7.21(d,1H,J＝5.41 Hz),6.60(s,1H),4.00(s,3H),3.94(s,3H),3.61-3.70(m,4H),3.00-3.11(m,4H),1.50(s,9H)。 ESI-MS理论计算值[M+H]+＝560.3，实验测得：560.5。
步骤二：合成N1-(4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)-4-((4-叔丁基氧羰基)哌嗪-1-基)-6- 甲氧基苯-1,3-二胺(GB095)
将GB093(0.4g,0.71mmoL)、锌粉(0.930g,14.31mmoL)、氯化铵(0.20g,2.8mmoL)和混合溶剂(乙醇:水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应3小时，经TLC检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。残余物通过硅胶柱纯化,得到目标物GB095(0.39g)。1H NMR(CDCl3,400MHz):8.50(d,1H,J＝7.54Hz),8.33(d,1H,J＝5.32Hz)，8.18(s,1H),7.79(s, 1H),7.63(s,1H),7.36-7.42(m,1H),7.27-7.36(m,2H),7.01(d,1H,J＝5.29Hz),6.65(s,1H), 3.88(s,3H),3.85(s,3H),3.52-3.67(m,4H),2.82-2.93(m,4H),1.50(s,9H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝530.3，实验测得：530.5。
步骤三：合成N-[2-(4-(叔丁基氧羰基)哌嗪-1-基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基) 嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(10)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.062g,0.240mmol)、炔基乙酸(0.031g,0.378mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GB095(0.12g,0.189mmoL)和三乙胺(0.2mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化，得到化合物10的三氟醋酸盐5mg。HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例： 10％；出峰时间t1/2＝39.5分钟。1H NMR(CDCl3,400MHz):8.58-8.70(m,1H),8.24-8.36(m, 1H),7.92-8.01(m,1H),7.53(d,1H,J＝8.28Hz),7.32-7.39(m,2H),7.22-7.29(m,1H),7.05(s, 1H),5.94(t,1H,J＝6.54Hz),5.51(d,2H,J＝6.54Hz),3.96(s,3H),3.90(s,3H),3.64-3.68(m,4H),2.92-2.95(m,4H),1.51(s,9H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝596.3，实验测得596.4。
实施例11合成N-[3-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基苯基]-2,3-丁联烯酰胺(11)
步骤一：合成N-(2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(GB104)
将GB012(0.5g,2.06mmol)和2-甲氧基-5-硝基苯胺(0.347g,2.06mmol)溶于2-戊醇(20 mL)，一次性加入对甲苯磺酸一水合物(0.471g,2.5mmol)，然后升温至105℃，反应2.5 小时，最后冷却到室温。抽滤，滤饼用2-戊醇(5mL)洗，干燥，得到GB104(0.37g)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝376.1，实验测得：376.2。
步骤二：合成6-甲氧基-N1-[4-(1-甲基吲哚-3-基)嘧啶-2-基]苯-1,3-二胺(GB106)
将GB104(0.37g,0.98mmoL)、锌粉(1.282g,19.73mmoL)、氯化铵(0.248g,4.14mmoL) 和混合溶剂(乙醇:水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应3小时，经TLC检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。残余物通过硅胶柱纯化,得到目标物GB106(0.34g)。1H NMR(CDCl3,400MHz):8.40(d,1H,J＝8.27Hz),8.31(d,1H,J＝5.33Hz),8.22(d,1H,J＝8.53Hz),7.80(s,1H),7.35-7.41(m,1H),7.23-7.35(m,2H),6.98-7.01(m,1H),6.37-6.43(m,1H), 6.35(s,1H),3.87(s,6H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝346.2，实验测得：346.4。
步骤三：合成N-[3-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基苯基]-2,3-丁联烯酰胺(11)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.096g,0.376mmol)、炔基乙酸(0.048g,0.579mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GB106(0.10g,0.29mmoL)和三乙胺(0.1mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化，得到化合物11的三氟醋酸盐18mg。HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：15％；出峰时间t1/2＝25分钟。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.41(s,1H),8.33-8.44(m,1H),7.91(d, 1H,J＝7.02Hz),7.69(s,1H),7.49-7.57(m,2H),7.30-7.37(m,2H),7.20-7.29(m,2H),5.95(t,1H,J＝6.60Hz),5.40(d,2H,J＝6.60Hz),3.94(s,3H),3.88(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝412.2,实验测得:412.3。
实施例12合成N-[2-(3-(二甲基氨基)环氮丁烷-1-基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3- 基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(12)
步骤一：合成N-(2-甲氧基-4-(3-(二甲基氨基)环氮丁烷-1-基)-5-硝基苯基)-4-(1-甲基-1H- 吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(GB105)
将GB17(0.2g,0.5mmol)加入N-甲基吡咯烷酮(10mL)，在室温下搅拌。称取3-(二甲基氨基)环氮丁烷(0.132g,0.76mmol)加入，取0.1mL二异丙基乙基胺加入，升温至140℃反应。反应2.5小时，降至室温。向上述反应液加入100mL水，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化，得到0.2g目标物GB105。1H NMR(CDCl3,400MHz):9.56(s,1H),8.36(d,1H,J＝5.26Hz),8.30(s, 1H),8.13(d,1H,J＝7.58Hz),7.46(s,1H),7.36-7.41(m,1H),7.24-7.32(m,2H),7.16(d,1H,J＝ 5.24Hz),6.01(s,1H),4.11-4.19(m,2H),3.96(s,3H),3.92(s,3H),3.68-3.75(m,2H),3.15-3.23(m, 1H),2.20(s,6H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝474.2，实验测得：474.4。
步骤二：合成4-(3-(二甲基氨基)环氮丁烷-1-基)-6-甲氧基-N1-[4-(1-甲基吲哚-3-基)嘧啶 -2-基]苯-1,3-二胺(GB107)
将GB105(0.20g,0.42mmoL)、锌粉(0.55g,8.4mmoL)、氯化铵(0.106g,1.77mmoL)和混合溶剂(乙醇:水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应3小时，经TLC检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。残余物通过硅胶柱纯化,得到目标物GB107(0.15g)。1H NMR (CDCl3,400MHz):8.49(d,1H,J＝7.38Hz),8.29(d,1H,J＝5.30Hz),8.05(s,1H),7.75(s,1H), 7.48(s,1H),7.33-7.40(m,1H),7.24-7.34(m,2H),6.96(d,1H,J＝5.39Hz),6.39(s,1H), 3.91-4.00(m,2H),3.86(s,3H),3.84(s,3H),3.51-3.62(m,2H),3.09-3.17(m,1H),2.21(s,6H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝444.3，实验测得:444.5。
步骤三：合成N-[2-(3-(二甲基氨基)环氮丁烷-1-基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3- 基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(12)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.074g,0.29mmol)、炔基乙酸(0.037g,0.45mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GB107(0.1g,0.16mmoL)和二异丙基乙基胺(0.1mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化，得到化合物12的三氟醋酸盐1mg。HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：10％；出峰时间t1/2＝13分钟。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝510.3，实验测得510.1。
实施例13合成N-[2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1H-吲哚-3- 基)-5-氯嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(13)
步骤一：合成3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-吲哚(GB099)
在0℃和氮气保护条件下，将CH3MgCl(3M，四氢呋喃溶液，4mL，10.79mmol)逐滴加入到吲哚(1g,5.4mmol)的四氢呋喃(6mL)溶液中。将所得溶液搅拌15分钟，然后一次性添加2,4,5-三氯嘧啶(1.28g,10.79mmoL)。让所得溶液升温至室温，再搅拌1小时。升温至60℃反应1.5小时。降到室温，加入0.7mL冰乙酸，10mL水，2mL四氢呋喃。升温至 60℃反应20分钟。加入石油醚，有大量黄色固体析出，抽滤。固体利用正相硅胶柱进行纯化，得到GB099(0.7g)，为类黄色固体。1H NMR(DMSO,400MHz):12.24(s,1H),8.69-8.75 (m,2H),8.47-8.54(m,1H),7.51-7.59(m,1H),7.22-7.32(m,2H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝ 264.1,实验测得：264.0。
步骤二：合成3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-甲基-1H-吲哚(GB102)
将NaH(0.127g,5.3mmol)置于单口瓶中，加入四氢呋喃(5mL)。在0℃加入3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-吲哚(0.35g,1.3mmol)。在0℃搅拌30分钟，加入碘甲烷(1.869g,13mmol), 继续搅拌3小时。加入饱和碳酸氢钠(25mL)淬灭反应。用乙酸乙酯(100mL)萃取，有机层用水(50mL)和饱和氯化钠(50mL)洗。有机相用无水硫酸钠干燥，蒸干。残余物利用正相硅胶柱纯化，得到GB102(0.3g)，为类黄色固体。1H NMR(DMSO,400MHz):8.75 (s,1H),8.70(s,1H),8.53(d,1H,J＝8.04Hz),7.59(d,1H,J＝7.95Hz),7.26-7.37(m,2H),3.93 (s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝278.0实验测得：278.0。
步骤三：合成N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-5-氯嘧啶-2-胺 (GB111)
将GB102(0.3g,1.07mmol)和4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺(0.20g,1.07mmol)溶于2-戊醇(20mL)，一次性加入对甲苯磺酸一水合物(0.246g,1.29mmol)，然后升温至105℃，反应48小时，最后冷却到室温。抽滤，滤饼用2-戊醇(5mL)洗，干燥，得到GB111(0.3g)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):8.34-8.43(m,2H),8.31(s,1H),7.98-8.21(m,1H),7.31-7.44(m,2H), 7.21-7.29(m,1H),6.77(d,1H,J＝12.21Hz),4.01(s,3H),3.91(s,3H)。ESI-MS理论计算值 [M+H]+＝428.1，实验测得：428.2。
步骤四：合成N1-(2-(二甲基氨基)乙基)-N1-甲基-N4-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-5-氯嘧啶 -2-基]-2-硝基5-甲氧基-苯-1,4-二胺(GB116)
将GB111(0.25g,0.58mmol)、二异丙基乙基胺(0.288g,1.45mmol)和N-甲基吡咯烷酮(15 mL)混合于玻璃瓶中。向上述悬浮液加入N1，N1，N2-三甲基乙二胺(0.126g,1.15mmol)添加到，并在140℃下加热2.5小时。冷却到室温，加入100mL水，搅拌，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化，得到0.2g目标物GB116。1H NMR(CDCl3,400MHz):9.06(s,1H),8.48(d,1H,J ＝7.96Hz),8.38(s,1H),8.22(s,1H),7.50(s,1H),7.24-7.41(m,3H),6.68(s,1H),3.98(s,3H),3.89 (s,3H),3.25-3.28(m,2H),2.88(s,3H),2.55-2.58(m,2H),2.27(s,6H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝510.2，实验测得：510.1。
步骤五：合成N1-(2-(二甲氨基)乙基)-N1-甲基-N4-(4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-5-氯嘧啶-2- 基)-5-甲氧基苯-1,2,4-三胺(GB119)
将GB116(0.2g,0.39mmoL)、铁粉(0.088g,1.57mmoL)、氯化铵(0.098g,1.26mmoL)和混合溶剂(乙醇:水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应3小时，经TLC检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。残余物通过硅胶柱纯化,得到目标物GB119(0.15g)。1HNMR (CDCl3,400MHz):8.64(d,1H,J＝8.19Hz),8.35(s,1H),8.21(s,1H),8.13(s,1H),7.67(s,1H),7.38-7.43(m,1H),7.28-7.38(m,2H),6.67(s,1H),3.90(s,3H),3.86(s,3H),3.28-3.37(m,2H), 2.99-3.07(m,2H),2.79(s,6H),2.72(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝480.2，实验测得： 480.3。
步骤六：合成N-[2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1H-吲哚-3-基)-5- 氯嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(13)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.038g,0.149mmol)、炔基乙酸(0.013g,0.156mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GB119(0.05g,0.104mmol)和二异丙基乙基胺(0.1mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化，得到化合物13的三氟醋酸盐8.5mg。HPLC纯化条件：起始乙腈/ 水比例：10％；出峰时间t1/2＝32分钟。1HNMR(MeOD-d4,400MHz,两个异构体,图谱为主要异构体):8.56-8.63(m,1H),8.51-8.56(m,1H)8.36-8.44(m,1H),8.31-8.35(m,1H),8.27-8.31 (m,1H),7.45-7.54(m,1H),7.27-7.38(m,1H),7.14-7.21(m,1H),6.95-7.05(m,1H),5.90(d,1H,J＝6.70Hz),5.36(d,2H,J＝6.70Hz),3.98(s,3H),3.93(s,3H),3.69-3.77(m,2H),3.46-3.54 (m,2H),2.87(s,6H),2.74(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝546.2，实验测得546.2。
实施例14合成N-[2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1H-吲哚-3- 基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(14)
步骤一：合成3-(2-氯-5-三氟甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚(GB112)
在0℃和氮气保护条件下，将CH3MgCl(3M，四氢呋喃溶液，11mL，32mmol)逐滴加入到吲哚(2g,17mmol)的1,2-二氯乙烷(50mL)溶液中。将所得溶液搅拌15分钟，然后一次性添加2,4-二氯嘧啶(3g,13.3mmol)。让所得溶液升温至室温，再搅拌16小时。通过添加甲醇(25mL)淬灭反应，然后将所得混合物进行真空浓缩，使残余物吸附到硅胶上，利用正相硅胶柱进行纯化，得到GB112(0.7g)，为类黄色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz):8.82 (s,1H),8.51-8.57(m,1H),7.96-8.01(m,1H),7.42-7.50(m,1H),7.32-7.40(m,2H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝298.0,实验测得：298.1。
步骤二：合成3-(2-氯-5-三氟甲基嘧啶-4-基)-1-甲基-1H-吲哚(GB114)
将NaH(0.226g,9.4mmol)置于单口瓶中，加入四氢呋喃(15mL)。在0℃加入3-(2-氯-5- 三氟甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚(0.7g,2.35mmol)。在0℃搅拌30分钟，加入碘甲烷(3.33g,23.5 mmol),继续搅拌3小时。加入饱和碳酸氢钠(25mL)淬灭反应。用乙酸乙酯(100mL) 萃取，有机层用水(50mL)和饱和氯化钠(50mL)洗。有机相用无水硫酸钠干燥，蒸干。残余物利用正相硅胶柱纯化，得到GB114(0.3g)，为类黄色固体。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝312.0，实验测得：312.0。
步骤三：合成N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-5-三氟甲基嘧啶-2- 胺(GB117)
将GB114(0.3g,0.96mmol)和4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺(0.179g,0.96mmol)溶于2- 戊醇(20mL)，一次性加入对甲苯磺酸一水合物(0.274g,1.44mmol)，然后升温至105℃，反应48小时，最后冷却到室温。抽滤，滤饼用2-戊醇(5mL)洗，干燥，得到GB117(0.2g)。1HNMR(CDCl3,400MHz):9.44(d,1H,J＝8.21Hz),8.76(s,1H),8.30(d,1H,J＝8.46Hz),7.85 (s,1H),7.72(s,1H),7.32-7.43(m,2H),6.78(d,1H,J＝11.86Hz),4.04(s,3H),3.91(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝462.1，实验测得：462.3。
步骤四：合成N1-(2-(二甲基氨基)乙基)-N1-甲基-N4-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基]-2-硝基-5-甲氧基-苯-1,4-二胺(GB121)
将GB117(0.2g,0.432mmol)、二异丙基乙基胺(0.139g,1.082mmol)和氮甲基吡咯烷酮 (10mL)混合于玻璃瓶中。向所得悬浮液加入N1,N1,N2-三甲基乙二胺(0.09g,0.86mmol)，并在140℃下加热2.5小时。冷却到室温，加入100mL水，搅拌，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化，得到0.21g目标物GB121。1H NMR(CDCl3,400MHz):9.05(s,1H),8.70(s,1H),8.29 (d,1H,J＝7.85Hz),7.66-7.76(m,2H),7.22-7.42(m,3H),6.67(s,1H),3.97(s,3H),3.88(s,3H),3.7 (t,2H,J＝7.13Hz),2.87(s,3H),2.56(t,2H,J＝7.13Hz),2.25(s,6H)。ESI-MS理论计算值 [M+H]+＝544.2，实验测得：544.0。
步骤五：合成N1-(2-(二甲氨基)乙基)-N1-甲基-N4-(4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-5-甲氧基苯-1,2,4-三胺(GB126)
将GB121(0.2g,0.36mmoL)、铁粉(0.082g,1.47mmoL)、氯化铵(0.092g,1.56mmol)和混合溶剂(乙醇:水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应3小时，经TLC检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。残余物通过硅胶柱纯化,得到目标物GB126(0.12g)。1H NMR (CDCl3,400MHz):8.60-8.69(m,1H),8.43(d,1H,J＝7.90Hz),8.13(s,1H),7.90(s,1H),7.66(s,1H),7.21-7.42(m,3H),6.69(s,1H),3.87(s,3H),3.83(s,3H),2.97(t,2H,J＝6.72Hz),2.66(s, 3H),2.45(t,2H,J＝6.72Hz),2.29(s,6H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝514.3，实验测得： 514.4。
步骤六：合成N-[2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1H-吲哚-3-基)-5- 三氟甲基嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(14)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.029g,0.11mmol)、炔基乙酸(0.012g,0.14mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GB126(0.05g,0.097mmoL)和二异丙基乙基胺(0.1mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化，得到化合物14的三氟醋酸盐10mg。HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：20％；出峰时间t1/2＝11分钟。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.63(s,1H),8.36(s,1H), 8.21-8.23(m,1H),7.86(s,1H),7.44-7.53(m,1H),7.26-7.33(m,1H),7.13-7.21(m,1H),6.96(s, 1H),5.87(t,1H,J＝6.59Hz),5.36(d,2H,J＝6.59Hz),3.98(s,3H),3.91(s,3H),3.49(t,2H,J＝5.89Hz),3.27(t,2H,J＝5.89Hz),2.85(s,6H),2.72(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝580.3，实验测得580.3。
实施例15合成N-[2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-((4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基) 氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(15)
步骤一：合成N-(3-氟-4-硝基苯基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(GB110)
将GB012(0.500g,2.06mmol)和3-氟-4-硝基苯胺(0.322g,2.06mmol)溶于2-戊醇(20 mL)，一次性加入对甲苯磺酸一水合物(0.471g,2.47mmol)，然后升温至105℃，反应48小时，最后冷却到室温。抽滤，滤饼用2-戊醇(5mL)洗，干燥，通过硅胶柱纯化得到GB110(0.460g)。1H NMR(DMSO-d6,400MHz):8.60(d,1H,J＝7.87Hz),8.47(d,1H,J＝5.49), 8.20-8.28(m,1H),7.68-7.74(m,1H),7.53-7.59(m,1H),7.44-7.49(m,1H),7.40-7.44(m,1H),7.20-7.33(m,2H),7.10(d,1H,J＝8.40Hz),3.90(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝364.1，实验测得：364.1。
步骤二：合成N1-(2-(二甲基氨基乙基)-N1-甲基-N4-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2- 基]-2-硝基苯-1,4-二胺(GB120)
将GB110(0.46g,1.267mmol)、二异丙基乙基胺(0.408g,3.1mmol)和N-甲基吡咯烷酮(15 mL)混合于玻璃瓶中。向上述悬浮液加入N1，N1，N2-三甲基乙二胺(0.263g,2.53mmol)，并在140℃下加热2.5小时。冷却到室温，加入100mL水，搅拌，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化，得到0.400g目标物GB120。1H NMR(CDCl3,400MHz):8.33-8.43(m,2H),7.91(d,1H, J＝9.04Hz),7.84(s,1H),7.70(s,1H),7.52(s,1H),7.39-7.43(m,1H),7.24-7.37(m,2H),7.14-7.19 (m,1H),7.09-7.14(m,1H),3.89(s,3H),3.28-3.35(m,2H),2.90(s,3H),2.56-2.64(m,2H),2.23 (s,6H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝446.2，实验测得：446.4。
步骤三：合成N2-(2-(二甲氨基)乙基)-N2-甲基-N4-(4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)苯 -1,2,4-三胺(GB124)
将GB120(0.40g,0.898mmoL)、铁粉(0.201g,3.5mmoL)、氯化铵(0.226g,3.77mmoL)和混合溶剂(乙醇:水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应6小时，经TLC检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。残余物通过硅胶柱纯化,得到目标物GB124(0.41g)。1H NMR (MeOD-d4,400MHz):8.33(d,1H,J＝7.84Hz),8.27(d,1H,5.27Hz),7.78(s,1H),7.15-7.38(m, 4H),7.01(s,1H),6.97(d,1H,J＝5.43Hz),6.73(d,1H,J＝8.31Hz),3.85(s,3H),3.06(t,2H,J＝6.40Hz),2.67(s,3H),2.60(t,2H,J＝6.40Hz),2.37(s,6H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝416.3，实验测得：416.3。
步骤四：合成N-[2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-((4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(15)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.032g,0.14mmol)、炔基乙酸(0.015g,0.18mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GB124(0.12g,0.269mmoL)和二异丙基乙基胺(0.1mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化，得到化合物15的三氟醋酸盐5mg。HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：20％；出峰时间t1/2＝13分钟。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.40(s,1H),8.14-8.21(m, 1H),8.00(d,1H,J＝7.05Hz),7.73(d,1H,J＝8.82Hz),7.49(d,1H,J＝8.34Hz),7.40-7.46(m, 2H),7.29-7.36(m,2H),7.13-7.20(m,1H),6.09(t,1H,J＝6.55Hz),5.45(d,2H,J＝6.55Hz), 3.92(s,3H),3.40(t,2H,J＝5.89Hz),3.22(t,2H,J＝5.89Hz),2.77(m,9H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝482.3，实验测得:482.3。
实施例16合成N-[2-(2-吗啉基乙氧基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基) 氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(16)
步骤一：合成2-甲氧基-4-(2-吗啉基乙氧基)-N-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]-5-硝基苯胺(GB137)
叔丁醇钾(0.366g,3.8mmol)和叔丁醇(15mL)混合与玻璃瓶中。0℃下向上述悬浮液加入2-吗啉乙醇(0.25g,1.9mmol)，反应1小时,在0℃下将GB17(0.5g,1.276mmol)加入上述混悬液，并在室温反应过夜。加入100mL水，搅拌，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化,得到0.2g目标物GB137。1H NMR(CDCl3,400MHz):9.60(s,1H),8.37(d,1H,J＝5.36 Hz),8.29(s,1H),8.12-8.18(m,1H),7.52(s,1H),7.37-7.42(m,1H),7.28-7.35(m,2H),7.18 (d,1H,J＝5.27Hz),6.48(s,1H),3.98(s,3H),3.93(s,3H),2.92(s,6H)。ESI-MS理论计算值 [M+H]+＝505.2,实验测得：505.3。
步骤二：合成N-2-(2-吗啉基乙氧基)-4-甲氧基-N-甲基-N-[5-(1-甲基吲哚-3-基)嘧啶-2-基] 苯-1,5-二胺(GB145)
将GB137(0.2g,0.39mmoL)、锌粉(0.515g,7.9mmoL)、氯化铵(0.095g,1.58mmoL)和混合溶剂(乙醇:水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应3小时，经TCL检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。通过硅胶柱纯化粗产品,得到目标物GB145(0.060g)。1H NMR (CDCl3,400MHz):8.47-8.52(m,1H),8.32(d,1H,J＝5.38Hz),8.14(s,1H),7.79(s,1H),7.49 (s,1H),7.36-7.42(m,1H),7.25-7.36(m,2H),7.01(d,1H,J＝5.37Hz),6.58(s,1H),4.13(t,2H,J ＝5.68Hz),3.88(s,3H),3.85(s,3H),3.73-3.79(m,4H),2.79(t,2H,J＝5.60Hz),2.57-2.65(m, 4H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝475.3,实验测得：475.4。
步骤三：合成N-[2-(2-吗啉基乙氧基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基) 氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(16)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.029g,0.11mmol)、炔基乙酸(0.012g,0.14mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GB145(0.05g,0.105mmoL)和二异丙基乙基胺(0.1mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化，得到目标化合物16的三氟醋酸盐5.4mg。HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：15％；出峰时间t1/2＝17.55分钟。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.51(s,1H), 8.22-8.41(m,1H),7.90-8.05(m,2H),7.49-7.54(m,1H),7.31-7.38(m,2H),7.21-7.29(m,1H), 6.99(s,1H),6.06(t,1H,J＝6.65Hz),5.41(d,2H,J＝6.65Hz),4.64(t,2H,J＝4.78Hz), 3.96-4.17(m,4H),3.95(s,3H),3.94(s,3H),3.71(t,2H,J＝4.92Hz)。ESI-MS理论计算值 [M+H]+＝541.3,实验测得541.4。
实施例17合成N-[2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-6氟-1H- 吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(17)
步骤一：合成3-(2-氯嘧啶-4-基)-6-氟-1H-吲哚(GB131)
在0℃和氮气保护条件下，将CH3MgCl(3M，四氢呋喃溶液，5mL，14.8mmol)逐滴加入到6-氟-吲哚(2g,14.8mmol)的1,2-二氯乙烷(27mL)溶液中。将所得溶液搅拌15分钟，然后一次性的添加2,4-二氯嘧啶(3.2g,14.8mmoL)。让所得溶液升温至室温，再搅拌16 小时。通过添加甲醇(25mL)淬灭反应，然后将该混合物进行真空浓缩，使其吸附到硅胶上。利用正相硅胶柱进行纯化初产品,得到类黄色固体GB131(0.7g)。1H NMR(DMSO-d6, 400MHz):12.11(s,1H),8.49-8.56(m,2H),8.37-8.45(m,1H)，7.91(d,1H,J＝5.61Hz)， 7.25-7.32(m,1H)，7.05-7.13(m,1H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝248.0,实验测得：248.0。
步骤二：合成3-(2-氯嘧啶-4-基)-1-甲基-6-氟-1H-吲哚(GB133)
将NaH(0.25g,10.4mmol)置于单口瓶中，加入四氢呋喃。在0℃加入3-(2-氯嘧啶-4- 基)-6-氟-1H-吲哚(0.5g,2.0mmol)。在0℃搅拌30分钟，加入碘甲烷(2.854g,20mmol),继续搅拌3小时。加入饱和的碳酸氢钠(25mL)淬灭反应。用乙酸乙酯(100mL)萃取，有机层用水(50mL)和饱和氯化钠(50mL)洗。有机相用无水硫酸钠干燥，蒸干。利用正相硅胶柱纯化，得到类黄色固体GB133(0.5g)。1H NMR(DMSO-d6,400MHz):8.52-8.56 (m,1H),8.51(s,1H),8.37-8.43(m,1H)，7.82(d,1H,J＝5.35Hz)，7.45-7.51(m,1H)，7.09-7.17 (m,1H),3.86(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝262.1,实验测得：262.0。
步骤三：合成N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(1-甲基-6-氟-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺 (GB141)
将GB133(0.4g,1.53mmol)和4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺(0.284g,1.53mmol)溶于2- 戊醇(20mL)，一次性加入对甲苯磺酸一水合物(0.348g,1.836mmol)，然后升温至105℃，反应2.5小时，最后冷却到室温。抽滤，滤饼用2-戊醇(2mL)洗，干燥，得到GB141(0.5g)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝412.1,实验测得：412.3。
步骤四：合成N1-(2-(二甲基氨基乙基)-N1-甲基-5-甲氧基-N4-[4-(1-甲基-6-氟-1H-吲哚-3- 基)嘧啶-2-基]-2-硝基苯-1,4-二胺(GB146)
将GB141(0.5g,1.21mmol)、二异丙基乙基胺(0.392g,2.5mmol)和氮甲基吡咯烷酮(15 mL)混合与玻璃瓶中。向上述悬浮液加入N1,N1,N2-三甲基乙二胺(0.253g,2mmol)添加到，并在140℃下加热1.5小时。冷却到室温，加入100mL水，搅拌，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化。得到0.36g目标物GB146。1H NMR(CDCl3,400MHz):9.49(s,1H),8.39(d, 1H,J＝5.22Hz),8.18(s,1H),8.10-8.16(m,1H),7.53(s,1H),7.12(d,1H,J＝5.27Hz), 7.01-7.09(m,2H),6.67(s,1H),3.99(s,3H),3.89(s,3H),3.29(t,2H,J＝7.16Hz),2.91(s,3H), 2.58(t,2H,J＝7.16Hz),2.27(s,6H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝494.2,实验测得：494.2。
步骤五：合成N-(2-二甲氨基乙基)-5-甲氧基-N-甲基-N-[4-(1-甲基-6-氟-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]苯-1,2,4-三胺(GB149)
将GB146(0.36g,0.73mmoL)、铁粉(0.163g,2.9mmoL)、氯化铵(0.184g,3.06mmoL)和混合溶剂(乙醇:水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应8小时，经TCL检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。通过硅胶柱纯化粗产品,得到目标物GB149(0.30g)。
1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.41-8.46(m,1H),8.31(d,1H,J＝5.28Hz),8.07(s,1H),7.74 (s,1H),7.58(s,1H),7.00-7.07(m,2H),6.96(d,1H,J＝5.32Hz),6.69(s,1H),3.84(s,3H),3.82 (s,3H),3.08(t,2H,J＝6.64Hz),2.68(s,3H),2.62(t,2H,J＝6.64Hz),2.43(s,6H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝464.3,实验测得：464.4；
步骤六：合成N-[2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-6氟-1H- 吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(17)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.091g,0.269mmol)、炔基乙酸(0.033g,0.269m mol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GB149(0.12g,0.269mmoL)和二异丙基乙基胺(0.1mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化，得到目标化合物17的三氟醋酸盐8mg。
HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：10％；出峰时间t1/2＝22.5分钟。1H NMR(MeOD-d4, 400MHz):8.49(s,1H),8.06-8.30(m,2H),7.94-8.03(m,1H),7.28-7.33(m,1H),7.22-7.28(m, 1H),7.04-7.09(m,1H),6.95-7.04(m,1H),6.09(t,1H,J＝6.54Hz),5.41(d,2H,J＝6.54Hz),3.95 (s,3H),3.87(s,3H),3.53(t,2H,J＝5.44Hz),3.35(t,2H,J＝5.44Hz),2.92(s,6H),2.79(s,3H)。 ESI-MS理论计算值[M+H]+＝512.3,实验测得512.2。
实施例18合成N-[2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-6氯-1H- 吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(18)
步骤一：合成3-(2-氯嘧啶-4-基)-6-氯-1H-吲哚(GB134)
在0℃和氮气保护条件下，将CH3MgCl(3M，四氢呋喃溶液，14mL，42mmol)逐滴加入到吲哚(5g,42mmol)的1,2-二氯乙烷(250mL)溶液中。将所得溶液搅拌15分钟，然后一次性的添加2,4-二氯嘧啶(9.48g,64mmoL)。让所得溶液升温至室温，再搅拌16小时。通过添加甲醇(25mL)淬灭反应，然后将该混合物进行真空浓缩，使其吸附到硅胶上。利用正相硅胶柱进行纯化初产品，得到类黄色固体GB134(3g)。1H NMR(DMSO-d6,400MHz): 12.17(s,1H),8.51-8.61(m,2H),8.40(d,1H,J＝8.62Hz)，7.91(d,1H,J＝5.52Hz)，7.54(m,1H,J ＝1.68Hz)，7.21-7.29(m,1H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝264.0,实验测得：263.8。
步骤二：合成3-(2-氯嘧啶-4-基)-1-甲基-6-氯-1H-吲哚(GB140)
将NaH(0.419g,17.46mmol)置于单口瓶中，加入四氢呋喃。在0℃加入3-(2-氯嘧啶-4- 基)-1H-吲哚(1g,4.36mmol)。在0℃搅拌30分钟，加入碘甲烷(6.157g,43.6mmol),继续搅拌3小时。加入饱和的碳酸氢钠(25mL)淬灭反应。用乙酸乙酯(100mL)萃取，有机层用水(50mL)和饱和氯化钠(50mL)洗。有机相用无水硫酸钠干燥，蒸干。利用正相硅胶柱纯化，得到类黄色固体GB140(0.96g)。1H NMR(DMSO,400MHz):8.54-8.56(m,1H), 8.53(s,3H),8.38(d,1H,J＝8.54Hz)，7.82(d,1H,J＝5.44Hz)，7.72(d,1H,J＝1.70Hz)， 7.26-7.31(m,1H),3.88(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝278.0,实验测得：278.1。
步骤三：合成N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(1-甲基-6-氯-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺 (GB142)
将GB140(0.765g,4.11mmol)和4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺(1g,4.11mmol)溶于2-戊醇(20mL)，一次性加入对甲苯磺酸一水合物(0.938g,4.93mmol)，然后升温至105℃，反应2.5小时，最后冷却到室温。抽滤，滤饼用2-戊醇(2mL)洗，干燥，得到GB142(0.95g)。 ESI-MS理论计算值[M+H]+＝428.1,实验测得：428.3。
步骤四：合成N1-(2-(二甲基氨基乙基)-N1-甲基-5-甲氧基-N4-[4-(1-甲基-6-氯-1H-吲哚-3- 基)嘧啶-2-基]-2-硝基苯-1,4-二胺(GB147)
将GB142(1.5g,3.816mmol)、二异丙基乙基胺(1.23g,9.54mmol)和氮甲基吡咯烷酮(15 mL)混合与玻璃瓶中。向上述悬浮液加入N1，N1，N2-三甲基乙二胺(0.396g,3.816mmol) 添加到，并在140℃下加热1小时。冷却到室温，加入100mL水，搅拌，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化。得到0.9g目标物GB147。1H NMR(CDCl3,400MHz):9.48(s,1H),8.38(d,1H,J＝5.26Hz),8.20(s,1H),8.08(d,1H,J＝8.56Hz),7.53(s,1H),7.38(d,1H,J＝1.77Hz), 7.22-7.27(m,1H),7.11(d,1H,J＝5.34Hz),6.67(s,1H),3.99(s,3H),3.90(s,3H),3.28(t,2H,J＝ 7.14Hz),2.90(s,3H),2.57(t,2H,J＝7.14Hz),2.26(s,6H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝ 510.2,实验测得：510.2。
步骤五：合成N-(2-二甲氨基乙基)-5-甲氧基-N-甲基-N-[4-(1-甲基-6-氯-吲哚-3-基)嘧啶-2- 基]苯-1,2,4-三胺(GB148)
将GB147(0.5g,1.05mmoL)、铁粉(0.234g,4.20mmoL)、氯化铵(0.233g,4.13mmoL)和混合溶剂(乙醇:水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应3小时，经TCL检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。通过硅胶柱纯化粗产品,得到目标物GB148(0.35g)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):8.40(d,1H,J＝8.66Hz),8.34(d,1H,J＝5.41Hz),8.09(s,1H), 7.76(s,1H),7.60(s,1H),7.37(d,1H,J＝1.76Hz),7.22-7.26(m,1H),6.98(d,1H,J＝5.32Hz), 6.68(s,1H),3.86(s,3H),3.84(s,3H),3.28(t,2H,J＝6.19),2.96(t,2H,J＝6.19),2.73(s,6H), 2.72(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝480.2,实验测得：480.3。
步骤六：N-[2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-6氯-1H-吲哚-3- 基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(18)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.091g,0.269mmol)、炔基乙酸(0.033g,0.269mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GB148(0.12g,0.269mmoL)和二异丙基乙基胺(0.1mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化，得到目标化合物18的三氟醋酸盐25.5mg。
HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：10％；出峰时间t1/2＝22.5分钟。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.51(s,1H),8.14-8.31(m,1H),8.00-8.14(m,2H),7.55(s,1H), 7.32-7.36(m,1H),7.17-7.23(m,1H),7.07(s,1H),6.07(t,1H,J＝6.55Hz),5.43(d,2H,J＝ 6.55Hz),3.95(s,3H),3.90(s,3H),3.51-3.56(m,2H),3.33-3.38(m,2H),2.92(s,6H),2.80(s, 3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝546.2,实验测得546.2。
实施例19合成N-[2-((2-(吗啉基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3- 基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(19)
步骤一：合成N1-(2-(2-吗啉基乙基-氨基)-N1-甲基-5-甲氧基-N4-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基) 嘧啶-2-基]-2-硝基苯-1,4-二胺(GB154)
将GB17(0.3g,0.76mmol)、二异丙基乙基胺(0.246g,1.9mmol)和氮甲基吡咯烷酮(10 mL)混合与玻璃瓶中。向上述悬浮液加入N-(甲基)-2-吗啉基乙基-1-胺(0.219g,1.52mmol) 添加到，并在140℃下加热1.5小时。冷却到室温，加入100mL水，搅拌，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化。得到0.3g目标物GB154。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝518.3,实验测得：518.3。
步骤二：合成N-(2-吗啉基乙基-氨基)-5-甲氧基-N-甲基-N-[4-(1-甲基吲哚-3-基)嘧啶-2- 基]苯-1,2,4-三胺(GB156)
将GB154(0.3g,0.58mmoL)、锌粉(0.754g,11.6mmoL)、氯化铵(0.146g,2.4mmoL)和混合溶剂(乙醇:水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应5小时，经TCL检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。通过硅胶柱纯化粗产品,得到目标物GB156(0.10g)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):8.25(d,1H,J＝7.28Hz),8.07(d,1H,J＝5.37Hz),7.91(s,1H), 7.65(s,1H),7.38(s,1H),7.13-7.19(m,1H),7.00-7.10(m,2H),6.79-6.80(m,1H),6.49(s,1H), 3.65(s,3H),3.63(s,3H),3.49-3.53(m,2H),2.75-2.83(m,2H),2.47(s,3H),2.22-2.38(m,8H)。 ESI-MS理论计算值[M+H]+＝488.3,实验测得：488.2。
步骤三：合成N-[2-((2-(吗啉基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基) 嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(19)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.0229g,1.1mmol)、炔基乙酸(0.013g,1.5mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GB156(0.12g,0.269mmol)和二异丙基乙基胺(0.1mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化，得到目标化合物19的三氟醋酸盐9.9mg。
HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：15％；出峰时间t1/2＝18.5分钟。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.51(s,1H),8.20-8.33(m,1H),7.91-8.08(m,2H),7.49-7.55(m,1H), 7.31-7.39(m,2H),7.21-7.28(m,1H),7.07(s,1H),6.11(t,1H,J＝6.60Hz),5.44(d,2H,J＝6.60Hz),4.02-4.15(m,4H),3.95(s,3H),3.94(s,3H),3.31-3.40(m,2H),3.08-3.48(m,4H),2.80 (s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝554.3,实验测得554.5。
实施例20合成N-[2-(1-甲基哌啶-3-基)氧基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶 -2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(20)
步骤一：合成2-甲氧基-4-((1-甲基哌啶-3-基)氧基)-N1-[1-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2- 基]-5-硝基苯胺(GB138)
叔丁醇钾(0.366g,3.8mmol)和叔丁醇(15mL)混合与玻璃瓶中。0℃下向上述悬浮液加入1-甲基-4-哌啶醇(0.274g,1.9mmol)，反应1小时,在0℃下将GB17(0.5g,1.276mmol)加入上述混悬液，并在室温反应过夜。加入100mL水，搅拌，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化,得到0.2g目标物GB138。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝489.2,实验测得： 489.2。
步骤二：合成2-(1-甲基哌啶-3-基)氧基)-4-甲氧基-N5-[4-(1-甲基吲哚-3-基)嘧啶-2-基]苯 -1,5-二胺(GB158)
将GB138(0.2g,0.4mmoL)、锌粉(0.532g,8.19mmoL)、氯化铵(0.098g,1.6mmoL) 和混合溶剂(乙醇:水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应8小时，经TCL检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。通过硅胶柱纯化粗产品,得到目标物GB158(0.15g)。ESI-MS 理论计算值[M+H]+＝459.3,实验测得：459.4。
步骤三：合成N-[2-(1-甲基哌啶-3-基)氧基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2- 基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(20)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.091g,0.269mmol)、炔基乙酸(0.033g,0.269mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GB158(0.12g,0.269mmoL)和二异丙基乙基胺(0.1mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化，得到目标化合物20的三氟醋酸盐3.3mg。
HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：10％；出峰时间t1/2＝22.5分钟。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝525.3,实验测得525.4。
实施例21合成N-[2-(4-甲基哌嗪-1-基-乙氧基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(21)
步骤一：合成2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基-乙氧基)-N1-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2- 基]-5-硝基苯胺(GC056)
叔丁醇钾(0.146g,1.5mmol)和叔丁醇(15mL)混合与玻璃瓶中。0℃下向上述悬浮液加入 4-甲基-哌嗪乙醇(0.109g,0.76mmol)，反应1小时,在0℃下将GB17(0.2g,0.5mmol)加入上述混悬液，并在室温反应过夜。加入100mL水，搅拌，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化，得到0.2g目标物GC056。1H NMR(DMSO-d6,400MHz):8.78(s,1H),8.25-8.39(m,2H), 8.17(s,1H)),7.51(d,1H,J＝8.21Hz),7.46(d,1H,J＝8.11Hz),7.20-7.27(m,2H),7.07-7.14(m, 2H),6.98(s,1H),4.36(t,2H,J＝5.14Hz),4.00(s,3H),3.86(s,3H),3.15(s,3H),2.59-3.10(m, 10H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝518.3,实验测得：518.3。
步骤二：合成2((4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基)-4-甲氧基-N5-[4-(1-甲基吲哚-3-基)嘧啶-2-基] 苯-1,5-二胺(GC060)
将GC056(0.2g,0.387mmoL)、锌粉(0.503g,7.75mmoL)、氯化铵(0.093g,1.55mmoL)和混合溶剂(乙醇:水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应8小时，经TCL检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。通过硅胶柱纯化粗产品,得到目标物GC060(0.15g)。1H NMR(MeOD,400MHz):8.40(s,1H),8.12-8.31(m,1H),7.96(d,1H,J＝6.89Hz),7.67(d,1H,J ＝8.17Hz),7.50(d,1H,J＝7.49Hz),7.30-7.37(m,2H),7.17-7.28(m,2H),7.08(s,1H),4.63(t, 2H,J＝5.37Hz),3.94(s,3H),3.91(s,3H),3.55-3.77(m,10H),2.99(s,3H)。
步骤三：合成N-[2-(4-甲基哌嗪-1-基-乙氧基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶 -2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(21)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.091g,0.269mmol)、炔基乙酸(0.033g,0.269mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GC060(0.12g,0.269mmoL)和二异丙基乙基胺(0.1mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化，得到目标化合物21的三氟醋酸盐1.4mg。
HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：15％；出峰时间t1/2＝15.5分钟。1H NMR (MeOD-d4,400MHz):8.56(s,1H),8.32-8.47(m,1H),8.05-8.28(m,1H)，7.89-7.99(m,1H), 7.54(d,1H,J＝8.46Hz),7.32-7.39(m,2H),7.20-7.30(m,1H),6.94(s,1H),6.01(t,1H,J＝6.68Hz),5.41(d,2H,J＝6.68Hz),4.40(t,2H,J＝5.14Hz),3.97(s,3H),3.92(s,3H),3.28-3.41(m, 4H),3.14(t,2H,J＝5.14Hz),2.98-3.16(m,4H),2.90(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝ 554.3,实验测得554.3。
实施例22合成N-[2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3- 基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(22)
步骤一：合成N-(4-氟-2-甲基-5-硝基苯基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(GC14)
将GB012(1.0g,4.11mmol)和4-氟-2-甲基-5-硝基苯胺(0.728g,4.11mmol)溶于2-戊醇(20mL)，一次性加入对甲苯磺酸一水合物(0.938g,4.93mmol)，然后升温至105℃，反应2.5小时，最后冷却到室温。抽滤，滤饼用2-戊醇(2mL)洗，干燥，得到GC14(0.6g)。 ESI-MS理论计算值[M+H]+＝378.1,实验测得：378.2。
步骤二：合成N1-(2-(二甲基氨基乙基)-N1-甲基-5-甲基-N4-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶 -2-基]-2-硝基苯-1,4-二胺(GC17)
将GC14(0.6g,1.59mmol)、二异丙基乙基胺(0.513g,3.9mmol)和氮甲基吡咯烷酮(10 mL)混合与玻璃瓶中。向上述悬浮液加入N1,N1,N2-三甲基乙二胺(0.331g,3.18mmol)添加到，并在140℃下加热1.5小时。冷却到室温，加入100mL水，搅拌，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化。得到0.6g目标物GC17。1H NMR(CDCl3,400MHz):8.95(s,1H),8.35 (d,1H,J＝5.35Hz),8.17(d,1H,J＝7.56Hz),8.08(s,1H),7.36-7.41(m,1H),7.24-7.34(m,2H), 7.15(d,1H,J＝5.35Hz),7.04(s,1H),6.85(s,1H),3.90(s,3H),3.28(t,2H,J＝7.25Hz),2.86(s, 3H),2.65(t,2H,J＝7.25Hz),2.39(s,3H),2.35(s,6H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝460.3,实验测得：460.1。
步骤三：合成N1-(2-二甲氨基乙基)-N1-甲基-5-甲基-N4-[4-(1-甲基吲哚-3-基)嘧啶-2-基] 苯-1,2,4-三胺(GC20)
将GC17(0.46g,1.00mmoL)、铁粉(0.224g,4.00mmoL)、氯化铵(0.222g,4.12mmoL)和混合溶剂(乙醇:水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应8小时，经TCL检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。通过硅胶柱纯化粗产品,得到目标物GC20(0.20g)。
1H NMR(CDCl3,400MHz):8.30(d,1H,J＝8.29Hz),8.23(d,1H,J＝5.49Hz),7.71(s,1H), 7.46(s,1H),7.14-7.35(m,3H),7.02-7.09(m,1H),6.94(d,1H,J＝5.43Hz),6.83(s,1H),3.77(s, 3H),3.14(t,2H,J＝5.99Hz),2.88(d,2H,J＝5.99Hz),2.65(s,3H),2.62(s,6H),2.19(s,3H)。 ESI-MS理论计算值[M+H]+＝430.3,实验测得：430.2。
步骤四：合成N-[2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3- 基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(22)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.044g,0.174mmol)、炔基乙酸(0.015g,0.174mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GC20(0.05g,0.116mmol)和二异丙基乙基胺(0.1mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化，得到目标化合物22的三氟醋酸盐12.3mg。
HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：15％；出峰时间t1/2＝17.5分钟。1H NMR(MeOD-d4, 400MHz):8.45(s,1H),8.01-8.22(m,1H),7.91-7.99(m,1H),7.87(s,1H),7.51(d,1H,J＝8.38 Hz),7.28-7.38(m,3H),7.10-7.20(m,1H),6.07(t,1H,J＝6.54Hz),5.40(d,1H,J＝6.54Hz), 3.93(s,3H),3.50(t,2H,J＝5.52Hz),3.35(t,2H,J＝5.52Hz),2.90(s,6H),2.79(s,3H),2.35(s, 3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝496.3,实验测得496.1。
实施例23合成N-[2-((2-(二甲基氨基)乙基)(乙基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚 -3-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(23)
步骤一：合成N1-(2-(二甲基氨基乙基)-5-甲氧基-N1-乙基-N4-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基) 嘧啶-2-基]-2-硝基苯-1,4-二胺(GC24)
将GB17(0.53g,1.348mmol)、二异丙基乙基胺(0.434g,3.3mmol)和氮甲基吡咯烷酮 (10mL)混合与玻璃瓶中。向上述悬浮液加入N,N-二甲基-N'-乙基乙二胺(0.312g,2.69mmol)添加到，并在140℃下加热1.5小时。冷却到室温，加入100mL水，搅拌，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化,得到0.48g目标物GC24。1H NMR(CDCl3,400MHz):9.51(s,1H), 8.39(d,1H,J＝5.34Hz),8.23(s,1H),8.15-8.20(m,1H),7.59(s,1H),7.38-7.43(m,1H), 7.29-7.35(m,2H),7.19(d,2H,J＝5.31Hz),6.75(s,1H),3.98(s,3H),3.94(s,3H),3.28(t,2H,J ＝7.43Hz),3.19(q,2H,J＝7.07Hz),2.51(t,2H,J＝7.10Hz),2.28(s,6H),1.12(t,3H,J＝7.10 Hz)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝490.3,实验测得：490.2。
步骤二：合成N1-(2-二甲氨基乙基)-N1-乙基-5-甲氧基-N4-[4-(1-甲基吲哚-3-基)嘧啶-2-基] 苯-1,2,4-三胺(GC27)
将GC24(0.48g,0.98mmoL)、铁粉(0.219g,3.90mmoL)、氯化铵(0.218g,4.04mmol)和混合溶剂(乙醇:水＝4:1,25mL)混合，混合物在85℃反应8小时，经TCL检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。通过硅胶柱纯化粗产品,得到目标物GC27(0.20g)。1H NMR(CDCl3,400MHz):8.42-8.49(m,1H),8.35(d,1H,J＝5.24Hz),8.18(s,1H),7.81(s,1H), 7.63(s,1H),7.35-7.42(m,1H),7.22-7.34(m,2H),7.04(d,1H,J＝5.24Hz),6.69(s,1H),3.89(s,3H),3.85(s,3H),3.20(t,2H,J＝6.53Hz),2.99(q,2H,J＝7.02Hz),2.68(t,2H,J＝6.53Hz), 2.54(s,6H),1.05(t,3H,J＝7.02Hz)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝460.3,实验测得：460.1。
步骤三：合成N-[2-((2-(二甲基氨基)乙基)(乙基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3- 基)嘧啶-2-基)氨基)苯基]-2,3-丁联烯酰胺(23)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.041g,0.163mmol)、炔基乙酸(0.013g,0.163mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GC27(0.05g,0.108mmol)和二异丙基乙基胺(0.1mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化，得到目标化合物23的三氟醋酸盐35.6mg。
HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：15％；出峰时间t1/2＝19分钟。1H NMR (MeOD-d4,400MHz):8.45(s,1H),8.07-8.30(m,2H),7.88(d,1H,J＝6.59Hz),7.43(d,1H,J＝8.01Hz),7.27-7.33(m,1H),7.17-7.25(m,2H),7.07(s,1H),6.11(t,1H,J＝6.59Hz),5.42(d, 2H,J＝6.59Hz),3.94(s,3H),3.84(s,3H),3.55(t,2H,J＝6.09Hz),3.28-3.35(m,2H),3.115(q, 2H,J＝7.81Hz),2.89(s,6H),1.09(t,3H,J＝7.05Hz)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝526.3, 实验测得526.1。
实施例24合成N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1H-吲哚-3- 基)-5-甲氧基嘧啶-2-基)氨基)苯基)-2,3-丁联烯酰胺(24)
步骤一：合成3-(2-氯-5-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-吲哚(GC34)
在0℃和氮气保护条件下，将CH3MgCl(3M，四氢呋喃溶液，4.2mL，12.6mmol)逐滴加入到吲哚(1g,8.54mmol)的1,2-二氯乙烷(20mL)溶液中。将所得溶液搅拌15分钟，然后一次性添加2,4,-二氯-5-甲氧基-嘧啶(1.28g,10.79mmoL)。让所得溶液升温至室温，反应12小时。加入3mL甲醇蒸干反应液得到黄色固体。固体利用正相硅胶柱进行纯化，得到GC34(0.2g)，为类黄色固体。1H NMR(DMSO,400MHz):8.60-8.62(m,1H),8.44-8.45 (m,1H),8.36-8.37(m,1H),7.49-7.51(m,2H),7.18-7.25(m,2H),4.07(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝260.1,实验测得：260.0。
步骤二：合成3-(2-氯-5-甲氧基嘧啶-4-基)-1-甲基-1H-吲哚(GC38)
将NaH(0.258g,10.76mmol)置于单口瓶中，加入四氢呋喃(20mL)。在0℃加入3-(2-氯-5-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-吲哚(0.700g,2.69mmol)。在0℃搅拌30分钟，加入碘甲烷(3.796 g,26.9mmol),继续搅拌3小时。加入饱和碳酸氢钠(25mL)淬灭反应。用乙酸乙酯(100 mL)萃取，有机层用水(50mL)和饱和氯化钠(50mL)洗。有机相用无水硫酸钠干燥，蒸干。残余物利用正相硅胶柱纯化，得到GC38(0.7g)，为类黄色固体。1H NMR(DMSO, 400MHz):8.61-8.66(m,1H),8.48(s,1H),8.37(s,1H),7.53-7.58(m,1H),7.22-7.33(m,2H),4.07(s,3H),3.90(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝274.1实验测得：274.2。
步骤三：合成N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-5-甲氧基-嘧啶-2- 胺(GC40)
将GC38(0.7g,2.55mmol)和4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺(0.475g,2.55mmol)溶于2-戊醇(20mL)，一次性加入对甲苯磺酸一水合物(0.582g,3.0mmol)，然后升温至105℃，反应48小时，最后冷却到室温。抽滤，滤饼用2-戊醇(10mL)洗，干燥，得到GC40(0.3g)。 ESI-MS理论计算值[M+H]+＝424.1，实验测得：424.2。
步骤四：合成N1-(2-(二甲基氨基)乙基)-N1-甲基-N4-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-5-甲氧基嘧啶-2-基]-2-硝基5-甲氧基-苯-1,4-二胺(GC48)
将GC40(0.27g,0.638mmol)、二异丙基乙基胺(0.205g,1.59mmol)和N-甲基吡咯烷酮(15 mL)混合于玻璃瓶中。向上述悬浮液加入N1，N1，N2-三甲基乙二胺(0.132g,1.27mmol)添加到，并在140℃下加热2.5小时。冷却到室温，加入100mL水，搅拌，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化，得到0.17g目标物GC48。1H NMR(CDCl3,400MHz):9.16(s,1H),8.70-8.75(m,1H),8.19(s,1H),8.14(s,1H),7.27-7.42(m,4H),6.69(s,1H),4.00(s,3H),3.99(s,3H),3.89(s, 3H),3.22-3.32(m,2H),2.88(s,3H),2.53-2.62(m,2H),2.28(s,6H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝506.3，实验测得：506.2。
步骤五：合成N1-(2-(二甲氨基)乙基)-N1-甲基-N4-(4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-5-甲氧基嘧啶-2-基)-5-甲氧基苯-1,2,4-三胺(GC49)
将GC48(0.17g,0.33mmoL)、铁粉(0.075g,1.34mmoL)、氯化铵(0.074g,1.38mmol)和混合溶剂(乙醇：水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应3小时，经TLC检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化，得到目标物GC49(0.120mg)。 HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：10％；出峰时间t1/2＝18.5分钟。1HNMR(CDCl3,400MHz): 8.63(s,1H),8.33-8.41(m,1H),7.79(s,1H),7.62(s,1H),7.47-7.53(m,1H),7.30-7.37(m,1H), 7.15-7.22(m,2H),4.03(s,3H),3.92(s,3H),3.89(s,3H),3.45-3.52(m,2H),3.38-3.45(m,2H),2.95(s,6H),2.80(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝476.3，实验测得：476.3。
步骤六：合成N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1H-吲哚-3-基)-5- 甲氧基嘧啶-2-基)氨基)苯基)-2,3-丁联烯酰胺(24)
将炔基乙酸(0.009g,0.115mmol)溶于无水二氯甲烷(10mL),加入2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.034g,0.136mmol),并在室温下搅拌1小时。滴入GC49(0.05g,0.104mmol) 和二异丙基乙基胺(0.2mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。
所得粗产物经过HPLC纯化，得到化合物24的三氟醋酸盐3.4mg。HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：15％；出峰时间t1/2＝18.5分钟。1HNMR(MeOD-d4,400MHz):8.74(s,1H),8.45-8.50(m,1H),7.85(s,1H),7.80(s,1H),7.51-7.56(m,1H),7.31-7.37(m,1H),7.18-7.24(m, 1H),7.04(s,1H),5.96(t,1H,J＝6.52Hz),5.39(d,2H,J＝6.52Hz),4.06(s,3H),3.96(s,3H), 3.93(s,3H),3.52-3.58(m,2H),3.32-3.37(m,2H),2.90(s,6H),2.81(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝542.3，实验测得542.5。
实施例25合成N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1H-吲哚-3- 基)-5-甲基嘧啶-2-基)氨基)苯基)-2,3-丁联烯酰胺(25)
步骤一：合成3-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚(GC39)
在0℃和氮气保护条件下，将CH3MgCl(3M，四氢呋喃溶液，21mL，63mmol)逐滴加入到吲哚(5g,42.7mmol)的1,2-二氯乙烷(50mL)溶液中。将所得溶液搅拌15分钟，然后一次性添加2,4,-二氯-5-甲基-嘧啶(6.96g,42.7mmol)。让所得溶液升温至室温，反应12小时。加入15mL甲醇蒸干反应液得到黄色固体。固体利用正相硅胶柱进行纯化，得到GC39 (1.42g)，为类黄色固体。1H NMR(DMSO,400MHz):12.04(s,1H),8.48-8.53(m,1H),8.47(s, 1H),8.16-8.20(m,1H),7.47-7.54(m,1H),7.16-7.27(m,2H),2.47(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝244.1,实验测得：244.0。
步骤二：合成3-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-甲基-1H-吲哚(GC45)
将NaH(0.157g,6.5mmol)置于单口瓶中，加入四氢呋喃(20mL)。在0℃加入3-(2-氯-5- 甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚(0.40g,1.63mmol)。在0℃搅拌30分钟，加入碘甲烷(2.311g,16.39 mmol),继续搅拌3小时。加入饱和碳酸氢钠(25mL)淬灭反应。用乙酸乙酯(100mL) 萃取，有机层用水(60mL)和饱和氯化钠(60mL)洗。有机相用无水硫酸钠干燥，蒸干。残余物利用正相硅胶柱纯化，得到GC45(0.47g)，为类黄色固体。1H NMR(DMSO,400MHz):8.52-8.58(m,1H),8.46(s,1H),8.24(s,1H),7.54-7.60(m,1H),7.22-7.35(m,2H),3.92(s,3H), 2.47(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝258.1实验测得：258.2。
步骤三：合成N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-5-甲基嘧啶-2-胺 (GC47)
将GC45(0.46g,1.78mmol)和4-氟-2-甲基-5-硝基苯胺(0.331g,1.78mmol)溶于2-戊醇(20mL)，一次性加入对甲苯磺酸一水合物(0.406g,2.139mmol)，然后升温至105℃，反应48小时，最后冷却到室温。抽滤，滤饼用2-戊醇(10mL)洗，干燥，得到GC47(0.3g)。 ESI-MS理论计算值[M+H]+＝408.2，实验测得：408.1。
步骤四：合成N1-(2-(二甲基氨基)乙基)-N1-甲基-N4-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-5-甲基嘧啶-2-基]-2-硝基5-甲氧基-苯-1,4-二胺(GC50)
将GC47(0.30g,0.737mmol)、二异丙基乙基胺(0.238g,1.8mmol)和N-甲基吡咯烷酮(15 mL)混合于玻璃瓶中。向上述悬浮液加入N1，N1，N2-三甲基乙二胺(0.153g,1.47mmol)添加到，并在140℃下加热2.5小时。冷却到室温，加入100mL水，搅拌，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化，得到0.3g目标物GC50。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝490.3，实验测得：490.5。
步骤五：合成N1-(2-(二甲氨基)乙基)-N1-甲基-N4-(4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-5-甲基嘧啶 -2-基)-5-甲氧基苯-1,2,4-三胺(GC52)
将GC50(0.30g,0.61mmoL)、铁粉(0.137g,2.4mmol)、氯化铵(0.135g,2.5mmol) 和混合溶剂(乙醇：水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应3小时，经TLC检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化，得到目标物GC52(0.2g)。HPLC 纯化条件：起始乙腈/水比例：10％；出峰时间t1/2＝17.5分钟。1HNMR(CDCl3,400MHz): 8.32-8.38(m,1H),8.30(s,1H),8.03(s,1H),7.61(s,1H),7.51-7.56(m,1H),7.31-7.39(m,1H), 7.15-7.22(m,2H),3.97(s,3H),3.89(s,3H),3.42-3.49(m,2H),3.36-3.41(m,2H),2.94(s,6H), 2.79(s,3H),2.52(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝460.3，实验测得：460.5。
步骤六：合成N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(1H-吲哚-3-基)-5- 甲基嘧啶-2-基)氨基)苯基)-2,3-丁联烯酰胺(25)
将炔基乙酸(0.009g,0.095mmol)溶于无水二氯甲烷(10mL)，再加入2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.029g,0.113mmol)，并在室温下搅拌1小时。向上述溶液滴入GC52(0.05g,0.087 mmol)和二异丙基乙基胺(0.2mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物经过HPLC纯化，得到化合物25的三氟醋酸盐23.5mg。HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：15％；出峰时间t1/2＝17分钟。1HNMR(MeOD-d4,400MHz):8.32-8.42(m,1H),8.21(s,1H),7.98(s,1H),7.83(s,1H),7.44-7.50(m,1H),7.29-7.36(m,1H),7.14-7.20 (m,1H),7.06(s,1H),6.05(t,1H,J＝6.59Hz),5.38(d,2H,J＝6.59Hz),3.899(s,3H),3.896(s, 3H),3.48-3.56(m,2H),3.32-3.38(m,2H),2.90(s,6H),2.79(s,3H),2.38(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝526.3，实验测得526.3。
实施例26合成N-(2-([2-(二甲基氨基)乙基](甲基)氨基)-5-([4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-基]氨基)苯基)-2,3-丁联烯酰胺(26)
步骤一：合成N-(3-硝基-4-氟苯基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-胺(GC72)
将GB012(0.50g,2.05mmol)和3-硝基-4-氟苯胺(0.353g,2.26mmol)溶于2-戊醇(20mL)，一次性加入对甲苯磺酸一水合物(0.469g,2.46mmol)，然后升温至105℃，反应24小时，最后冷却到室温。抽滤，滤饼用2-戊醇(10mL)洗，干燥，得到GC72(0.64g)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝364.2，实验测得：364.2。
步骤二：合成N1-(2-(二甲基氨基)乙基)-N1-甲基-N4-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2- 基]-2-硝基-苯-1,4-二胺(GC74)
将GC72(0.64g,1.76mmol)、二异丙基乙基胺(0.568g,4.4mmol)和N-甲基吡咯烷酮(15mL) 混合于玻璃瓶中。向上述悬浮液加入N1，N1，N2-三甲基乙二胺(0.366g,3.52mmol)，并在140℃下加热2.5小时。冷却到室温，加入100mL水，搅拌，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化，得到0.50g目标物GC74。1HNMR(CDCl3,400MHz):8.63-8.67(m,1H),8.36(d,1H,J＝2.70Hz), 8.24-8.27(m,1H),8.01(s,1H),7.38-7.45(m,2H),7.27-7.35(m,2H),7.13-7.19(m,3H),3.91 (s,3H),3.19-3.24(m,2H),2.85(s,3H),2.50-2.55(m,2H),2.26(s,6H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝ 446.2，实验测得：446.1。
步骤三：合成N1-(2-(二甲氨基)乙基)-N1-甲基-N4-(4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-基)- 苯-1,2,4-三胺(GC80)
将GC74(0.50g,1.11mmoL)、铁粉(0.25g,4.47mmoL)、氯化铵(0.253g,4.6mmoL) 和混合溶剂(乙醇：水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应8小时，经TLC检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物通过硅胶柱纯化，得到目标物GC80(320mg)。
1HNMR(MeOD-d4,400MHz):8.50(d,1H,J＝4.00Hz),8.18(d,1H,J＝2.80Hz),7.98(s,1H), 7.39-7.43(m,1H),7.15-7.31(m,3H),7.07-7.10(m,2H),7.00-7.04(m,1H),3.83(s,3H),3.19-3.24 (m,2H),3.10-3.14(m,2H),2.85(s,6H),2.67(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝416.3，实验测得：416.4。
步骤四：合成N-(2-([2-(二甲基氨基)乙基](甲基)氨基)-5-([4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-嘧啶 -2-基]氨基)苯基)-2,3-丁联烯酰胺(26)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.039g,0.15mmol)、炔基乙酸(0.011g,0.13mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GC80(0.05g,0.119mmoL)和二异丙基乙基胺(0.2mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。加入10mL 乙腈和30mg无水碳酸钾在85度下反应3小时。反应混合物蒸干，残余物过HPLC纯化，得到化合物26的三氟醋酸盐28mg。HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：15％；出峰时间 t1/2＝18分钟。1HNMR(MeOD-d4,400MHz):8.45(s,1H),8.31-8.37(m,1H),8.10-8.17(m,1H), 7.82(d,1H,J＝3.45Hz),7.37-7.46(m,2H),7.25-7.33(m,2H),7.15-7.21(m,2H),6.16(t,1H,J＝6.44Hz),5.42(d,2H,J＝6.44Hz),3.83(s,3H),3.42-3.46(m,2H),3.32-3.36(m,2H),2.91(s,6H), 2.74(s,3H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝482.3，实验测得482.3。
实施例27.合成N-(2-{[2-(二甲基氨基)乙基](甲基)氨基}-4-乙氧基-5-{[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}-苯基)-2,3-丁联烯酰胺(27)
步骤一：合成N-(4-氟-2-乙氧基-5-硝基苯基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺(GC95)
将GB012(0.35g,1.44mmol)和4-氟-2-乙氧基-5-硝基苯胺(0.288g,1.44mmol)溶于2- 戊醇(20mL)，一次性加入对甲苯磺酸一水合物(0.328g,1.72mmol)，然后升温至105℃，反应24小时，最后冷却到室温。抽滤，滤饼用2-戊醇(10mL)洗，干燥，得到GC95(0.50g)。
ESI-MS理论计算值[M+H]+＝408.2，实验测得：408.4。
步骤二：合成N1-[2-(二甲基氨基)乙基]-N1-甲基-N4-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2- 基]-2-硝基-5-乙氧基苯-1,4-二胺(GC96)
将GC95(0.55g,1.35mmol)、二异丙基乙基胺(0.435g,3.37mmol)和N-甲基吡咯烷酮(15 mL)混合于玻璃瓶中。向上述悬浮液加入N1，N1，N2-三甲基乙二胺(0.281g,2.7mmol)添加到，并在140℃下加热2.5小时。冷却到室温，加入100mL水，搅拌，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化，得到0.50g目标物GC96。1HNMR(CDCl3,400MHz):8.38-8.40(m,1H),8.31(s,1H),8.11-8.16(m,1H),7.55(s,1H),7.38-7.45(m,1H),7.27-7.35(m,2H),7.18-7.25(m,1H),6.65(s, 1H),4.21(q,2H,J＝6.95Hz),3.94(s,3H),3.24-3.30(m,2H),2.89(s,3H),2.55-2.61(m,2H),2.27 (s,6H),1.54(t,3H,J＝6.95hz)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝490.3，实验测得：490.4。
步骤三：合成N1-[2-(二甲基氨基)乙基]-N1-甲基-N4-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2- 基]-2-胺基-5-乙氧基-苯-1,4-二胺(GC98)
将GC96(0.56g,1.145mmoL)、铁粉(0.256g,4.58mmoL)、氯化铵(0.259g,4.8mmoL)和混合溶剂(乙醇：水＝1:1,25mL)混合，混合物在85℃反应8小时，经TLC检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。所得粗产物通过硅胶柱纯化，得到目标物GC98(190mg)。ESI-MS 理论计算值[M+H]+＝460.3，实验测得：460.4。
步骤四：合成N-(2-{[2-(二甲基氨基)乙基](甲基)氨基}-4-乙氧基-5-{[4-(1-甲基-1H-吲哚 -3-基)嘧啶-2-基]氨基}-苯基)-2,3-丁联烯酰胺(27)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.036g,0.14mmol)、炔基乙酸(0.010g,0.11mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GC98(0.05g,0.108mmoL)和二异丙基乙基胺(0.2mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。加入10mL 乙腈和30mg无水碳酸钾在85度下反应3小时。反应混合物蒸干，残余物过HPLC纯化，得到化合物27的三氟醋酸盐24mg。HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：15％；出峰时间 t1/2＝19.5分钟。1HNMR(MeOD-d4,400MHz):8.47(s,1H),8.05-8.23(m,1H),7.93-7.99(m, 1H),7.49-7.53(m,1H),7.30-7.37(m,2H),7.18-7.25(m,1H),7.02(s,1H),6.09(t,1H,J＝6.40Hz), 5.42(d,2H,J＝6.40Hz),4.15(t,2H,J＝7.09Hz),3.91(s,3H),3.46-3.52(m,2H),3.32-3.37(m,2H),2.90(s,6H),2.77(s,3H),1.32(t,3H,J＝7.09Hz)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝526.3，实验测得526.1。
实施例28.合成N-(2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基]-4-甲氧基-5-{[4-(1-甲基-1H-吲哚-3- 基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)-2,3-丁联烯酰胺(28)
步骤一：合成N-(2-甲氧基-4-[(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基]-5-硝基苯基)-4-(1-甲基-1H- 吲哚-3-基)嘧啶-2-基胺(GC111)
将GB17(1.0g,2.5mmol)、二异丙基乙基胺(0.82g,6.3mmol)和氮甲基吡咯烷酮(10mL) 混合与玻璃瓶中。向上述悬浮液加入1-甲基-4-(4-哌啶基)哌嗪(0.931g,5.0mmol)，并在140 ℃下加热1.5小时。冷却到室温，加入100mL水，搅拌，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化，得到1.0g目标物GC111。1H NMR(CDCl3,400MHz):8.33-8.36(m,1H),8.22(s,1H), 8.10-8.14(m,1H),7.51(s,1H),7.34-7.38(m,1H),7.24-7.31(m,2H),7.13-7.16(m,1H),6.52(s, 1H),3.94(s,3H),3.89(s,3H),3.72-3.75(m,4H),3.31-3.37(m,2H),2.75-2.83(m,2H), 2.56-2.61(m,4H),2.28-2.38(m,1H),1.87-1.94(m,2H),1.73-1.84(m,2H)。ESI-MS理论计算值 [M+H]+＝557.3,实验测得：557.3。
步骤二：合成N1-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]-4-[(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基]-6- 甲氧基苯-1,3-二胺(GC116)
将GB111(1.0g,1.79mmoL)、铁粉(0.402g,7.19mmoL)、氯化铵(0.407g,7.5mmoL)和混合溶剂(乙醇：水＝5:1,25mL)混合，混合物在85℃反应5小时，经TCL检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。通过硅胶柱纯化粗产品,得到目标物GC116(0.30g)。1H NMR(CDCl3,400MHz):8.47-8.52(m.1H),8.32(d,1H,J＝5.35Hz),8.16(s,1H),7.79(s,1H), 7.57(s,1H),7.36-7.41(m,1H),7.27-7.36(m,2H),7.02(d,1H,J＝5.27Hz),6.64(s,1H),3.88(s,3H),3.85(s,3H),3.19-3.29(m,2H),2.78-3.09(m,8H),2.57-2.72(m,3H),2.52(s,3H),1.98-2.12(m,2H),1.70-1.85(m,2H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝527.4,实验测得：527.3。
步骤三：合成N-(2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基]-4-甲氧基-5-{[4-(1-甲基-1H-吲哚-3- 基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)-2,3-丁联烯酰胺(28)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.037g,0.148mmol)、炔基乙酸(0.010g,0.125mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GC116(0.06g,0.114mmoL)和二异丙基乙基胺(0.1mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。加入10mL 乙腈和30mg无水碳酸钾在85度下反应3小时。反应混合物蒸干，残余物过HPLC纯化，得到目标化合物28的三氟醋酸盐48mg。HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：15％；出峰时间t1/2＝17分钟。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.50-8.73(m,1H),8.06-8.25(m,1H),7.88(d, 1H,J＝7.03Hz),7.46(d,1H,J＝8.27Hz),7.29-7.35(m,1H),7.17-7.26(m,2H),7.00(s,1H), 5.96(t,1H,J＝6.57Hz),5.18(d,1H,J＝6.57Hz),3.88(s,6H),3.44-3.67(m,8H),3.16-3.28(m,3H),2.96(s,3H),2.85-2.95(m,2H),2.19-2.31(m,2H),1.89-2.07(m,2H)。ESI-MS理论计算值 [M+H]+＝593.3,实验测得593.2。
实施例29.合成N-(2-(4-吗啉基哌啶-1-基)-4-甲氧基-5-{[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2- 基]氨基}苯基)-2,3-丁联烯酰胺(29)
步骤一：合成N-(2-甲氧基-4-(4-吗啉基哌啶-1-基)-5-硝基苯基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基) 嘧啶-2-基胺(GC110)
将GB17(1.0g,7.5mmol)、二异丙基乙基胺(0.820g,6.35mmol)和氮甲基吡咯烷酮(10 mL)混合与玻璃瓶中。向上述悬浮液加入4-(哌啶-4-基)吗啉(0.865g,5.0mmol)，并在140 ℃下加热1.5小时。冷却到室温，加入100mL水，搅拌，抽滤，滤饼干燥，通过硅胶柱纯化。得到0.70g目标物GC110。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝544.3,实验测得：544.2。
步骤二：合成N1-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]-4-(4-吗啉基哌啶-1-基)-6-甲氧基苯 -1,3-二胺(GC115)
将GC110(0.70g,1.2mmoL)、铁粉(0.288g,5.15mmoL)、氯化铵(0.292g,5.4mmoL)和混合溶剂(乙醇：水＝5:1,25mL)混合，混合物在85℃反应5小时，经TCL检测反应完毕，冷却至室温，加入200mL水和200mL二氯甲烷搅拌。分出有机相，有机相加无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。通过硅胶柱纯化粗产品,得到目标物GC115(0.10g)。 ESI-MS理论计算值[M+H]+＝514.3,实验测得：514.3。
步骤三：合成N-(2-(4-吗啉基哌啶-1-基)-4-甲氧基-5-{[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2- 基]氨基}苯基)-2,3-丁联烯酰胺(29)
将2-氯-1-甲基吡啶碘化物(0.064g,0.25mmol)、炔基乙酸(0.018g,0.21mmol)和无水二氯甲烷(10mL)在室温下搅拌1小时，滴入GC115(0.10g,0.19mmoL)和二异丙基乙基胺(0.1mL)的二氯甲烷溶液。在室温下反应0.5小时,在旋转蒸发仪上浓缩。加入10mL乙腈和40mg无水碳酸钾在85℃下反应3小时。反应混合物蒸干，残余物过HPLC纯化，得到目标化合物29的三氟醋酸盐20mg。HPLC纯化条件：起始乙腈/水比例：15％；出峰时间t1/2＝19.5分钟。1H NMR(MeOD-d4,400MHz):8.45-8.73(m,1H),7.84-8.10(m,1H),7.74(d, 1H,J＝6.96Hz),7.30-7.37(m,1H),7.22-7.30(m,1H),7.11-7.21(m,1H),7.00-7.09(m,1H),6.89-6.98(m,1H),5.95(t,1H,J＝6.42Hz),5.50(d,1H,J＝6.42Hz),4.07-4.19(m,2H),3.83-3.92(m,2H),3.85(s,3H),3.75(s,3H),3.53-3.65(m,2H),3.37-3.45(m,1H),3.12-3.33(m, 4H),2.82-2.94(m,2H),2.24-2.37(m,2H),1.94-2.11(m,2H)。ESI-MS理论计算值[M+H]+＝ 580.3,实验测得580.2。
实施例30-58
除了替换部分反应试剂以外，采用与上述实施例中相同的合成方法，或者本发明所列明的反应式1-29中的实验方法和条件，可以制得化合物30-58。
下面列出了化合物的结构和命名。
实验实施例1：化合物细胞活性测试方法
用100％二甲基亚砜溶解待测样品，配制20mM的化合物母液。用100％二甲基亚砜稀释化合物至实验所需的最高浓度(2.5mM或者62.5μM)。
加入5uL的化合物溶液至96孔平底透明细胞培养板中，用细胞培养基(含10％胎牛血清)稀释成所需化合物浓度梯度(44.6μM-0.0218μM或者1.116-0.544nM)，相邻孔稀释的浓度梯度为两倍。最后向各孔中加入70uL待测细胞溶液，加入的细胞密度为3000-5000细胞每孔，使每孔总体积为140uL。在实验中，除所测化合物外，设置两对照组分别是：1)加细胞和培养基，但是不加化合物对照组；2)加含有10％胎牛血清的培养基，但是无细胞无化合物组。将96孔板置于含5％二氧化碳的37℃细胞培养箱中培养4天后，每孔中加入 14uL CCK-8试剂，然后于37℃孵育2-4小时。用TECAN酶标仪读取96孔板，取在450nm 波长下的吸收值。
不同浓度化合物对细胞活性的影响用以下公式计算：[实验组吸收值-含10％胎牛血清的培养基(无细胞无化合物组)吸收值]/[加细胞不加化合物组吸收值-含10％胎牛血清的培养基(无细胞无化合物组)吸收值]×100％。
利用GraphPad Prism 6软件处理以上数据，所取IC50值为对细胞生长抑制率达50％时所对应的化合物浓度。
基于以上化合物细胞活性测试方法，测得化合物1、2和4和奥斯替尼(AZD9291)在B细胞淋巴癌Raji和Namalwa细胞株、宫颈癌Hela细胞株、肠癌HCT-116细胞株、乳腺癌 MDA-MB-231细胞株、肝癌HepG 2细胞株、食道癌NCI-N87细胞株、肺癌NCI-H1975、 NCI-H1650、A549等细胞株中的IC50值列在下表1中。
表1
基于以上化合物细胞活性测试方法，测得化合物1-11、13-23和奥斯替尼(AZD9291) 在肺癌NCI-H1975、A549和NCI-H1650细胞株、乳腺癌MDA-MB-231细胞株中IC50值列在下表2中。
表2
实验实施例2：化合物在溶媒内溶解性比较
称取适量化合物置于样品瓶中，分别加入混合液体(溶媒)IV-1(组成为5％二甲基亚砜 +10％Crempphor+85％生理盐水)、IV-2(组成为5％二甲基亚砜+95％生理盐水)、IV-3(组成为10％PEG400+3％Crempphor+87％生理盐水)，使得化合物的终浓度为5mg/mL(表3)。将装有化合物和溶解缓冲液的样品瓶，置于涡旋仪进行涡旋震荡至化合物完全溶解。依照上述相似方法，称取适量化合物置于样品瓶中，加入适量体积的混合液体PO(组成为10％PEG400+90％PBS)，使化合物的终浓度为25mg/mL。将装有化合物和溶解缓冲液的样品瓶，置于涡旋仪进行涡旋震荡至化合物完全溶解。将上述IV-1、IV-2、IV-3和PO溶液置于实验台面,室温放置,利用肉眼观察和显微镜是否有混浊及固体析出，结果列在表4中。其中DMSO表示二甲基亚砜，Saline表示生理盐水，PEG400为一种聚乙二醇溶媒，是市售药品，Sigma-Aldrich货号06855，CAS注册号为25322-68-3；Crempphor为一种溶媒，是市售药品，Sigma-Aldrich货号C5135，CAS注册号为61791-12-6；PBS表示一种磷酸盐缓冲溶液(磷酸根浓度0.0067M)，为一种溶媒，是市售药品，Hyclone货号SH30256.01。
表3：溶媒的组成和化合物最终浓度
表4：化合物在各溶媒内的溶解性。
通过表4的数据可以表明，奥斯替尼(AZD9291)在溶媒IV-1、IV-2、IV-3和PO内形成过饱和溶液,经过放置之后,化合物析出。这说明奥斯替尼在在以上溶媒内溶解度不好。然而，化合物1、2、7和8在溶媒IV-1、IV-2、IV-3和PO内形成溶液，其溶解度和溶液稳定性优于奥斯替尼(AZD9291)。化合物在溶媒内溶解性能的提高，会有助于提高化合物1、2、 7、8和相似化合物在动物体内的药代动力学性质，也有利于制备化合物1、2、7、8和相似化合物的更加优良的制剂剂型。
实验实施例3：检测化合物抑制EGFR的磷酸化
将NCI-H1975细胞经胰酶消化后均匀地铺于6孔板，培养过夜待完全贴壁后去除原培养基，再分别向6孔板每孔中加入含不同浓度化合物(分别是0nM、10nM、100nM和1000 nM)的新鲜培养基，置于37℃细胞培养箱中培养16小时。孵育结束后取出6孔板，去除含化合物的培养基后，每孔加入1mL含10ng/mL EGF的新鲜培养基37℃孵育15分钟，以不加化合物且不用EGF处理的细胞作为对照组。每孔加入100uL细胞裂解液，于冰上裂解通过以上方法处理过的细胞30分钟，13000转每分钟于4℃离心30分钟后取细胞裂解上清液。采用BCA蛋白浓度检测试剂盒测定各蛋白样品的浓度。按每孔上样20ug蛋白先进行SDS-PAGE，然后将蛋白转至硝酸纤维素膜上。用1×TBST(20mM Tris，150mM NaCl， pH 7.6，0.1％Tween-20)和5％脱脂奶粉水溶液的混合液，在室温下封闭硝酸纤维素膜，1小时后用1X TBST洗膜5×5分钟。随后，加入相应蛋白(pEGFR,EGFR和Actin)的一抗在4℃孵育过夜。次日移去一抗后，用1×TBST洗膜5×5分钟，加入相对应的二抗，并在室温孵育1小时后用1×TBST洗膜5×5分钟。最后，ECL发光试剂盒(Thermo Scientific)检测分析相应蛋白的条带。所读取图片用photoshop和power point处理得到相应的图片数据。
图1显示了本申请化合物1抑制EGFR的磷酸化的效果。图2显示了本申请化合物7抑制EGFR的磷酸化的效果。图中的“空白”表示没有加入相应化合物或EGF。
由图1可知，化合物1在100nM浓度时，可以部分抑制EGFR的磷酸化；在1000nM 浓度时候，可以大部分抑制EGFR的磷酸化。这些数据表明，化合物1具有抑制EGFR磷酸化的能力，是EGFR磷酸化的抑制剂。
由图2可知，化合物7在10nM浓度时，可以小部分抑制EGFR的磷酸化；在100nM 浓度时，可以大部分抑制EGFR的磷酸化；在1000nM浓度时候，可以完全抑制EGFR的磷酸化。这些数据表明，化合物7具有抑制EGFR磷酸化的能力，是EGFR磷酸化的抑制剂。
实验实施例4：检测化合物对激酶活性的抑制作用
用酶联免疫吸附法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测激酶磷酸化底物的能力，及化合物对激酶活性的抑制作用。
野生型EGFR(EGFR WT)和EGFR T790M/L858R突变激酶购自Eurofins公司。
抗体PY99购自Santa Cruz公司，按照说明书配制成所需溶液。辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠的IgG购自Santa Cruz公司，按照说明书配制成所需溶液。
OPD显色液购自生公生物工程(上海)股份有限公司，按照说明书配制成所需显色液。
主要实验步骤如下：
激酶反应底物Poly(Glu,Tyr)4:1用无钾离子的PBS(10mM磷酸钠缓冲液，150mMNaCl, pH 7.2-7.4)稀释成20μg/mL溶液，37℃反应12-16h包被96孔酶标板，备用。
向上述96孔板每孔加入用反应缓冲液(50mM HEPES,pH 7.4,50mM MgCl2,0.5mMMnCl2,0.2mM Na3VO4,1mM DTT)稀释的ATP溶液(ATP终浓度5μM，总体积100uL)，加入梯度稀释的化合物并使其终浓度在5000-0.01nM区间，然后加入野生型EGFR(EGFR WT)或EGFRT790M/L858R突变激酶，使激酶的终浓度为10或50nM,启动反应，并在 37℃摇床反应1小时。T-PBS洗板三次，加入100μL抗体PY99溶液于37℃摇床反应0.5 小时。T-PBS洗板后，加入100μL辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠的IgG溶液，37℃摇床反应0.5小时。再次洗板后，加入100μL 2mg/mL的OPD显色液，25℃避光反应1-10min。加入50μL 2M H2SO4终止反应，用可调波长式微孔板酶标仪SPECTRA MAX 190读数，波长为492nm。酶标仪读数对药物浓度作曲线，取吸收值达到峰值50％时候的药物浓度值表示IC50值，该值通过Graphpad拟合计算取得。
基于以上测试方法，测得化合物1-3、5-9、13、16-29和奥斯替尼(AZD9291)对野生型EGFR(EGFR WT)和EGFR T790M/L858R的IC50值列在下表5中。
表5

Claims (10)

1.下面通式(I)表示的化合物或其盐：
在通式(I)中，
环A表示苯环或含氮六元杂芳环，例如吡啶环、嘧啶环、哒嗪环、吡嗪环或三嗪环；
R1选自氢(H)和取代或未取代的C1-C4烷基，优选选自氢和取代或未取代的C1-C2烷基，所述取代的取代基可以为1、2或3个，优选为1个，选自卤素、羟基、-NH2、C1-C4烷氧基、-NH-(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-NHC(＝O)-(C1-C4烷基)、-NHC(＝O)-(C1-C4烷氧基)和苯基，优选选自卤素、羟基、-NH2、-NH-(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)和苯基；更优选地，R1选自氢、甲基和苄基；
R2和R3各自独立地选自氢和取代或未取代的C1-C4烷基，优选各自独立地选自氢和取代或未取代的C1-C2烷基，所述取代基可以为1、2或3个，优选为1个，选自卤素、羟基、-NH2、C1-C4烷氧基、-NH-(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-NHC(＝O)-(C1-C4烷基)和-NHC(＝O)-(C1-C4烷氧基)，优选选自卤素、羟基、-NH2、-NH-(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)；或者
R2和R3与它们连接的碳原子一起形成取代或未取代的含有0-3个选自N、O和S的杂原子的4-8元环，优选为环己环；所述取代基可以为1、2或3个，选自卤素、羟基、-NH2、C1-C4烷氧基、(C1-C4烷基)-NH2、-NH-(C1-C4烷基)和-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)；
R4和R5各自独立地选自氢原子、卤素、-CN、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素取代的C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷氧基、-NH2、-NH-(C1-C4烷基)和-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)，优选各自独立地选自氢原子、卤素、C1-C2烷基、C1-C2烷氧基、卤素取代的C1-C2烷基、卤素取代的C1-C2烷氧基、-NH2、-NH-(C1-C2烷基)和-N(C1-C2烷基)(C1-C2烷基)，更优选各自独立地选自氢原子、氟、氯、甲基、甲氧基和三氟甲基；或者
R4和R5与连接它们的碳原子一起形成苯环或含有1-2个选自氮、氧和硫的杂原子的5-7元芳香杂环，优选形成苯环、吡咯环和呋喃环；
R表示1-3个取代基，所述取代基各自独立地选自氢原子、卤素、-CN、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素取代的C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷氧基、-NH2、-NH-(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-NHC(＝O)-(C1-C4烷基)、-NHC(＝O)-(C1-C4烷氧基)；优选各自独立地选自选自氢原子、卤素、-CN、羟基、C1-C2烷基、C1-C2烷氧基、卤素取代的C1-C2烷基、卤素取代的C1-C2烷氧基、-NH2、-NH-(C1-C2烷基)、-N(C1-C2烷基)(C1-C2烷基)、-NHC(＝O)-(C1-C2烷基)、-NHC(＝O)-(C1-C2烷氧基)；更优选各自独立地选自选自氢原子和C1-C4烷氧基；最优选各自独立地选自选自氢原子和C1-C2烷氧基；
W表示其中，
D1、D9和D10各自独立地表示C或N；D2和D3各自独立地选自CR10、N、NR12、O和S；D4不存在或选自CR10、N、O和S；且D1-D4、D9和D10形成的环为苯环或5-6元杂芳环且环原子中至多四个为N；
D5不存在或选自CR10、CR10R11、NR12、N、O和S；D6-D8各自独立地选自CR10、CR10R11、N、NR12、O和S；条件是D5-D10形成的环的环原子中至少一个为C且至多四个为N；
各个R10和R11独立地选自氢原子(H)、氘原子(D)、卤素原子、-CN、炔基、乙烯基、C1-C4烷基和卤素取代的C1-C4烷基、羟基、C1-C4烷氧基、-NH2、-NH-(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)，优选各自独立地选自氢原子、卤素原子、-CN、炔基、C1-C2烷基、卤素取代的C1-C2烷基和C1-C2烷氧基；
R12各自独立地选自氢原子、C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷基、C1-C4烷基羰基、C1-C4烷基氨基羰基，优选各自独立地选自氢原子、C1-C2烷基；
优选地，D1-D10形成的双环的环原子由C和1-4个N组成；
优选地，D1-D10形成的双环选自苯并吡咯环、苯并吡唑环、苯并咪唑环、苯并三唑环、苯并吡啶环、吡啶并吡啶环、吡啶并吡咯环、吡啶并吡唑环、吡啶并咪唑环、吡啶并三唑环、环己烷并吡咯环、环己烷并吡唑环、氮杂环己烷并吡唑环等；
W优选选自以下基团：
R6选自以下结构: -NR16R17、-Y(CH2)pNR16R17、-(CH2)pNR16R17和-OR18；其中
Z1、Z3、和Z6各自独立地表示O、CR13R14、NR15或
Z2、Z4、Z5和Z7各自独立地表示O、CR13R14或NR15；
各个Y独立地表示O或NR16；
Z表示CH或N；
R13和R14各自独立地表示氢原子、卤素、羟基、-NH2、炔基、-CN、C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、-NR16R17、C1-C4烷基羰基、C1-C4烷氧基羰基、C1-C4烷基氨基羰基，优选各自独立地选自氢原子、-NR16R17、叔丁氧基羰基、C1-C2烷基和卤素取代的C1-C2烷基；优选R13和R14之一为氢；
各个R15独立地选自氢原子、C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷基、R19、R19C(＝O)-和R19C(＝O)C1-C4烷基，优选各自独立地选自氢原子、C1-C2烷基、卤素取代的C1-C2烷基、R19C(＝O)-和R19C(＝O)C1-C2烷基；
各个R19独立地选自C1-C4烷基、被卤素或-NR16R17取代的C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素取代的C1-C4烷氧基、-NR16R17、C3-C7环烷基、含有1-4个选自氮和氧原子的杂原子的4-7元杂环基；其中，所述C3-C7环烷基以及4-7元杂环基的环碳原子可以被C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷基、羟基、C1-C4烷氧基、氨基、C1-C4烷基氨基、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-CN、炔基、乙烯基、C1-C4烷基羰基、C1-C4烷氧基羰基和C1-C4烷基氨基羰基中的取代基取代，优选可以被选自卤素、C1-C2烷基、C1-C2烷氧基、C1-C2烷基氨基、-N(C1-C2烷基)(C1-C2烷基)、卤素取代的C1-C2烷基、叔丁氧基羰基和乙酰基中的取代基取代；4-7元杂环基的环氮原子可以被选自C1-C4烷基羰基、C1-C4烷氧基羰基、C1-C4烷基氨基羰基、C1-C4烷基和卤素取代的C1-C4烷基中的取代基取代，优选可以被选自C1-C2烷基、卤素取代的C1-C2烷基、叔丁氧基羰基和乙酰基中的取代基取代；
R16、R17和R18各自独立地选自氢原子、C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷基和C1-C4烷基羰基，优选各自独立地选自氢原子、C1-C2烷基、卤素取代的C1-C2烷基和C1-C4烷基羰基；
各个m、n、ma、na独立地表示0、1、2、3或4，且m+n、ma+na在2和4之间；各个p独立地表示1、2、3或4；
R6优选地表示以下结构:
(包括) (包括)
2.权利要求1所述的化合物或其盐，其中，通式(I)的化合物选自通式(II)和(III)表示的化合物：
其中，
R、R4、R5、R6和W的定义与通式(I)中相同，
R7、R8和R9各自独立地选自氢原子、卤素、-CN、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素取代的C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷氧基、-NH2、-NH-(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-NHC(＝O)-(C1-C4烷基)、-NHC(＝O)-(C1-C4烷氧基)；优选各自独立地选自选自氢原子、卤素、-CN、羟基、C1-C2烷基、C1-C2烷氧基、卤素取代的C1-C2烷基、卤素取代的C1-C2烷氧基、-NH2、-NH-(C1-C2烷基)、-N(C1-C2烷基)(C1-C2烷基)、-NHC(＝O)-(C1-C2烷基)、-NHC(＝O)-(C1-C2烷氧基)；更优选各自独立地选自选自氢原子和C1-C4烷氧基；最优选各自独立地选自选自氢原子和C1-C2烷氧基，
更优选地，R7和R9为氢原子，R8为C1-C4烷氧基，优选C1-C2烷氧基。
3.权利要求2所述的化合物或其盐，其中，通式(II)的化合物选自通式(II-1)、(II-2)和(II-3)表示的化合物：
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9的定义与通式(II)中相同。
4.权利要求2所述的化合物或其盐，其中，通式(II)的化合物选自通式(II-4)和(II-5)表示的化合物：
其中，R1、R2、R3、R4、R6和W的定义与通式(II)中相同。
5.权利要求2所述的化合物或其盐，其中，通式(III)的化合物选自通式(III-1)、(III-2)和(III-3)表示的化合物：
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9的定义与通式(III)中相同。
6.权利要求1所述的化合物或其盐，其中，通式(I)的化合物选自下列化合物：
7.一种药物组合物，其包含选自上述权利要求1-6中任一项所述的化合物和其盐中的一种或多种。
8.权利要求7所述的药物组合物，其中，所述的药物组合物为上皮生长因子受体(EGFR)抑制剂或与EGFR相关的疾病的预防或治疗剂。
9.选自上述权利要求1-6中任一项所述的化合物或其盐在制备上皮生长因子受体(EGFR)抑制剂，或预防和/或治疗与EGFR相关的疾病的药物中的用途。
10.权利要求9所述的用途，其中，所述与EGFR相关的疾病选自变应性疾病、自免疫性疾病、炎形疾病、血栓栓塞疾病和癌症，所述癌症例如选自非霍奇金淋巴癌、乳腺癌、肝癌、肠癌、食道癌、胰腺癌、肺癌和子宫颈癌。
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