CN108008135B - 一种载脂蛋白b测定试剂盒 - Google Patents
一种载脂蛋白b测定试剂盒 Download PDFInfo
- Publication number
- CN108008135B CN108008135B CN201711182760.9A CN201711182760A CN108008135B CN 108008135 B CN108008135 B CN 108008135B CN 201711182760 A CN201711182760 A CN 201711182760A CN 108008135 B CN108008135 B CN 108008135B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- apolipoprotein
- kit
- reagent
- stabilizer
- trehalose
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/32—Cardiovascular disorders
- G01N2800/324—Coronary artery diseases, e.g. angina pectoris, myocardial infarction
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明公开了一种载脂蛋白B测定试剂盒,其包含有所述的复合稳定剂。这种复合稳定剂含有牛血清白蛋白、丙三醇、Triton X‑100、海藻糖、液体生物防腐剂Proclin300。本发明涉及到的载脂蛋白B测定试剂盒,其保存时间比较长,提高测试稳定性、准确性、精密度较常规的产品效果好。该试剂盒成本低廉,配制简单,适合大规模应用。
Description
技术领域
本发明涉及体外诊断领域,特别是涉及一种用于载脂蛋白B测定试剂盒。
背景技术
载脂蛋白(英语:Apolipoproteins)指那些结合到脂类上的蛋白质(脂溶性物质,如脂肪与胆固醇),他们结合在一起就形成了脂蛋白,后者载着脂类穿梭于淋巴系统与循环系统。载脂蛋白B存在于低密度脂蛋白的表面,细胞识别和摄取LDL主要通过识别载脂蛋白B实现。所以,载脂蛋白B增多时,即使LDL水平正常,也可使冠心病发病率增高。人血清中载脂蛋白B与其相应抗体反应,形成抗原-抗体复合物,该复合物的浊度与样本中载脂蛋白B的含量成正比,从而测定载脂蛋白B的含量。与载脂蛋白B结合的抗体作为一种蛋白质容易失活、降解,直接影响载脂蛋白B测定的结果致使载脂蛋白B测定试剂盒缺乏稳定性,保存时间短,直接影响临床使用。
目前关于载脂蛋白B测定试剂稳定性的报道非常有限。专利CN 203178297U提供了一种血清载脂蛋白B测定试剂盒;包括盒体、盒盖和试剂瓶,但未涉及试剂成分和配比,未对试剂盒的稳定性进行说明;CN 1957255A提供一种检测apo B-48的方法,但主要应用范围为平板酶联乳胶聚集法,未加入任何稳定剂,未对试剂盒的稳定性进行说明。因此,研究一种配制简单、成本低廉、针对载脂蛋白B测定试剂盒有稳定效果的复合稳定剂,具有相当的市场价值。
发明内容
本发明的目的在于公开一种用于载脂蛋白B测定试剂盒。
本发明所采取的技术方案是:
一种复合稳定剂,稳定剂含有牛血清白蛋白、丙三醇、Triton X-100、海藻糖、液体生物防腐剂Proclin300。
优选的,稳定剂中含有:1~5%牛血清白蛋白、1~2%丙三醇、1~1.5%Triton X-100、1~2.5%海藻糖、0.1~0.2%液体生物防腐剂Proclin300。
优选的,稳定剂中牛血清白蛋白含量为10g/L、丙三醇含量为10g/L、Triton X-100含量为10g/L、海藻糖含量为15g/L、液体生物防腐剂Proclin300含量为2g/L。
复合稳定剂在载脂蛋白B测定试剂盒中的应用。
一种载脂蛋白B测定试剂盒,试剂盒中含有上述复合稳定剂。
优选的,试剂盒中还含有试剂1和试剂2,其中试剂1中的成分是Trisbase 2.0g/L、盐酸0.6g/L、氯化钠7.20g/L、PEG-4000 1g/L、山梨酸钾1g/L;试剂2的成分是Trisbase2.0g/L、盐酸0.6g/L、APOB抗体5.0g/L、山梨酸钾1g/L。
本发明的有益效果是:本发明涉及到的载脂蛋白B测定试剂盒,其保存时间比较长,提高测试稳定性、准确性、精密度较常规的产品效果好。该试剂盒成本低廉,配制简单,适合大规模应用。
具体实施方式
实施例1
按照下述配方配制用于载脂蛋白B试剂盒的复合稳定剂:10g/L牛血清白蛋白、10g/L丙三醇、10g/L Triton X-100、15g/L海藻糖、2g/L液体生物防腐剂Proclin300。
试验用载脂蛋白B测定试剂盒,由试剂1和试剂2组成:
试剂1:Trisbase 2.0g/L、盐酸0.6g/L、氯化钠7.20g/L、PEG-4000 1g/L、山梨酸钾1g/L;
试剂2:Trisbase 2.0g/L、盐酸0.6g/L、APOB抗体5.0g/L、山梨酸钾1g/L。
试验方法及结果:
1)稳定性、准确性、精密度
将复合稳定剂,按2%(v/v)的量加入载脂蛋白B测定试剂盒中(试剂1和试剂2均按此量添加),与不添加复合稳定剂的载脂蛋白B测定试剂盒分别测定样本中载脂蛋白B含量。本试验以英国朗道脂类质控水平1(质控1)和脂类质控水平3(质控3)为样本,标准品为英国朗道载脂蛋白A1&B校准品,采用日立7020型全自动生化分析仪进行检测,设一个空白测试、两个样本测试(空白测试以生理盐水代替样本)。样本与试剂1和试剂2的比例为2μL:250μL:50μL,设定的主波长为340nm、副波长为700nm,样本与试剂1混匀后,37℃孵育5min,读取各管吸光度A1,加入试剂2混匀后反应5min,读取吸光度A2,每管的吸光度变化Λ,A=A2-A1,扣除试剂空白后计算出样本、标准品的吸光度变化值Λ,然后根自动计算出样本中载脂蛋白B含量。质控1中载脂蛋白B靶值为88.8mg/dL,质控3中载脂蛋白B的靶值为160mg/dL,允许偏差范围在±18%。
根据以上测定方法,以同批次同瓶装的质控1、质控3作为检测样本,分别用添加2%(V/V)复合稳定剂的载脂蛋白B测定试剂盒和不添加复合稳定剂的载脂蛋白B测定试剂盒进行检测,每7天检测一次,检测周期57天,计算得到测定质控结果的相对偏差(CV)、标准偏差(SD)、相对标准偏差(CV)和有效期天数,相对偏差、相对标准偏差这两项可反映测定结果的稳定性。
测定结果有效期天数试验结果数据详见下表。
由上表数据可知,未加入复合稳定剂的载脂蛋白B测定试剂盒与加入2%复合稳定剂的试剂盒相比,其检测结果相对偏差、相对标准偏差分别明显偏高。说明没有加入复合稳定剂的载脂蛋白B测定试剂盒很不稳定,有效期天数只能维持8-15天左右。加入2%复合稳定剂的载脂蛋白B测定试剂盒在整个测试周期中,准确度均在允许偏差范围内,精密度CV小于4%,说明该测定试剂盒在57天内能保持良好的稳定性、准确性、精密度。由此可见,添加了2%复合稳定剂的载脂蛋白B测定试剂盒在测试稳定性、准确度、精密度方面表现更为优异,复合稳定剂对其有明显的稳定效果,可有效延长载脂蛋白B测定试剂盒的保存期限。
2)使用量比对试验
将复合稳定剂按照1%(v/v)、2%(v/v)、3%(v/v)的比例分别加入载脂蛋白B测定试剂盒中(试剂1和试剂2均按同样量添加),进行样本中载脂蛋白B含量的测定。按本发明稳定性试验的测定方法测定,计算得到测定质控结果的相对偏差(CV)、标准偏差(SD)、相对标准偏差(CV)和有效期天数,相对偏差、相对标准偏差这两项可反映测定结果的稳定性。结果见下表。
由上表数据可知,复合稳定剂的三种不同加入量对载脂蛋白B测定试剂盒的稳定作用均有所增强,从不同程度地延长试剂盒的保存期限和提高试剂盒的测试稳定性、准确度、精密度。加入1%复合稳定剂的试剂盒作用最弱,有效期天数约29天;加入3%复合稳定剂的试剂盒相对偏差、相对标准偏差较加入2%复合稳定剂的试剂盒低,说明3%复合稳定剂的加入量不是最优选;2%复合稳定剂添加量的试剂盒的相对偏差、相对标准偏差最小,说明加入2%复合稳定剂的载脂蛋白B测定试剂盒测试稳定性、准确性、精密度最好,在试剂盒开瓶后57天左右还能保持良好的测试性能。因此,2%可定为复合稳定剂在载脂蛋白B测定试剂盒中的最佳使用量。
实施例2
按照下述配方配制用于载脂蛋白B试剂盒的复合稳定剂:50g/L牛血清白蛋白、20g/L丙三醇、15g/L Triton X-100、25g/L海藻糖、2g/L液体生物防腐剂Proclin300。
按照实施例1的方法进行稳定性、准确性、精密度试验,结果如下:
实施例3
按照下述配方配制用于载脂蛋白B试剂盒的复合稳定剂:10g/L牛血清白蛋白、10g/L丙三醇、10g/L Triton X-100、10g/L海藻糖、1g/L液体生物防腐剂Proclin300。
按照实施例1的方法进行稳定性、准确性、精密度试验,结果如下:
从以上数据和分析结果可以得到,载脂蛋白B测定试剂盒加入本发明所述复合稳定剂后,能延长试剂盒的保存时间,有效提高测试稳定性、准确性、精密度,且最适加入体积比大约为2%。该复合稳定剂成本低廉,配制简单,值得进一步推广使用。
Claims (3)
1.一种复合稳定剂在制备载脂蛋白B测定试剂盒中的应用,其特征在于:所述稳定剂由1~5%牛血清白蛋白、1~2%丙三醇、1~1.5%Triton X-100、1~2.5%海藻糖和0.1~0.2%液体生物防腐剂Proclin300组成,所述稳定剂在载脂蛋白B测定试剂盒中的添加量(v/v)为2%或3%;所述试剂盒中还含有试剂1和试剂2,其中试剂1中的成分是Trisbase2.0g/L、盐酸0.6g/L、氯化钠7.20g/L、PEG-4000 1g/L、山梨酸钾1g/L;试剂2的成分是Trisbase 2.0g/L、盐酸0.6g/L、APOB抗体5.0g/L、山梨酸钾1g/L。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,稳定剂中牛血清白蛋白含量为10g/L、丙三醇含量为10g/L、Triton X-100含量为10g/L、海藻糖含量为15g/L、液体生物防腐剂Proclin300含量为2g/L。
3.一种载脂蛋白B测定试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中添加有2%或3%(v/v)的复合稳定剂,所述复合稳定剂由以下组分组成:1~5%牛血清白蛋白、1~2%丙三醇、1~1.5%Triton X-100、1~2.5%海藻糖、0.1~0.2%液体生物防腐剂Proclin300;所述试剂盒中还含有试剂1和试剂2,其中试剂1中的成分是Trisbase 2.0g/L、盐酸0.6g/L、氯化钠7.20g/L、PEG-4000 1g/L、山梨酸钾1g/L;试剂2的成分是Trisbase 2.0g/L、盐酸0.6g/L、APOB抗体5.0g/L、山梨酸钾1g/L。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201711182760.9A CN108008135B (zh) | 2017-11-23 | 2017-11-23 | 一种载脂蛋白b测定试剂盒 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201711182760.9A CN108008135B (zh) | 2017-11-23 | 2017-11-23 | 一种载脂蛋白b测定试剂盒 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN108008135A CN108008135A (zh) | 2018-05-08 |
CN108008135B true CN108008135B (zh) | 2020-09-25 |
Family
ID=62053588
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201711182760.9A Active CN108008135B (zh) | 2017-11-23 | 2017-11-23 | 一种载脂蛋白b测定试剂盒 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN108008135B (zh) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111157744A (zh) * | 2020-01-17 | 2020-05-15 | 上海高踪医疗器械科技有限公司 | 一种载脂蛋白b检测试剂盒 |
CN111426845B (zh) * | 2020-04-07 | 2021-06-15 | 中拓生物有限公司 | 一种血清载脂蛋白b测定试剂盒及其制备方法和应用 |
CN113267621B (zh) * | 2021-05-14 | 2021-12-17 | 北京金诺百泰生物技术有限公司 | 一种elisa试剂盒包被板用稳定剂及其制备方法、试剂盒包被板、试剂盒 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0264458A (ja) * | 1988-08-31 | 1990-03-05 | Nippon Shoji Kk | 血清アポbの定量法 |
US5180679A (en) * | 1987-10-08 | 1993-01-19 | Behringwerke Aktiengesellschaft | Diagnostic agent and a method for the determination of apolipoprotein b |
CN104049085A (zh) * | 2013-03-13 | 2014-09-17 | 苏州德沃生物技术有限公司 | 一种crp胶乳增强免疫比浊测定试剂及其试剂盒及应用 |
CN104807990A (zh) * | 2015-05-12 | 2015-07-29 | 骏实生物科技(上海)有限公司 | 一种用于抗原抗体反应体外诊断试剂的热稳定剂 |
CN105628914A (zh) * | 2016-02-04 | 2016-06-01 | 广州科方生物技术有限公司 | 一种能使吖啶酯抗原抗体结合物稳定的稀释液及其制备方法 |
CN105717292A (zh) * | 2016-02-01 | 2016-06-29 | 杭州惟新生物技术有限公司 | 脂蛋白磷脂酶a2检测试剂盒 |
-
2017
- 2017-11-23 CN CN201711182760.9A patent/CN108008135B/zh active Active
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5180679A (en) * | 1987-10-08 | 1993-01-19 | Behringwerke Aktiengesellschaft | Diagnostic agent and a method for the determination of apolipoprotein b |
JPH0264458A (ja) * | 1988-08-31 | 1990-03-05 | Nippon Shoji Kk | 血清アポbの定量法 |
CN104049085A (zh) * | 2013-03-13 | 2014-09-17 | 苏州德沃生物技术有限公司 | 一种crp胶乳增强免疫比浊测定试剂及其试剂盒及应用 |
CN104807990A (zh) * | 2015-05-12 | 2015-07-29 | 骏实生物科技(上海)有限公司 | 一种用于抗原抗体反应体外诊断试剂的热稳定剂 |
CN105717292A (zh) * | 2016-02-01 | 2016-06-29 | 杭州惟新生物技术有限公司 | 脂蛋白磷脂酶a2检测试剂盒 |
CN105628914A (zh) * | 2016-02-04 | 2016-06-01 | 广州科方生物技术有限公司 | 一种能使吖啶酯抗原抗体结合物稳定的稀释液及其制备方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
载脂蛋白A1、B免疫比浊法试剂盒的评价;石凌波 等;《上海医学检验杂志》;19991231;第14卷(第1期);第27页左栏 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN108008135A (zh) | 2018-05-08 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN102628864B (zh) | 胶乳增强免疫比浊法测定血清或尿液中心脏型脂肪酸结合蛋白的试剂盒 | |
Iwata et al. | New micro-turbidimetric method for determination of protein in cerebrospinal fluid and urine. | |
John | Haemoglobin A1c: analysis and standardisation | |
CN103134934B (zh) | 可以同时检测尿液和血清样本中视黄醇结合蛋白的试剂盒 | |
Smith et al. | Method-specific differences in plasma fibroblast growth factor 23 measurement using four commercial ELISAs | |
CN108008135B (zh) | 一种载脂蛋白b测定试剂盒 | |
CN102621332B (zh) | 基于胶乳粒子包被视黄醇结合蛋白检测试剂盒 | |
CN111057150B (zh) | 一种乳胶微球及其应用以及糖化血红蛋白检测试剂盒 | |
CN106383116A (zh) | 一种检测高密度脂蛋白胆固醇的试剂盒 | |
Westgard et al. | Determination of serum albumin with the" SMA 12/60" by a bromcresol green dye-binding method | |
US6309887B1 (en) | Filter paper treatment for improved diagnostic assays | |
CN104198730B (zh) | 一种载脂蛋白e检测试剂盒 | |
CN109725162A (zh) | 一种完全均相测定胰岛素的检测试剂盒及其方法 | |
CN112014572A (zh) | 一种用于检测kl-6的乳胶颗粒制备方法及其应用 | |
CN106442355A (zh) | 心型脂肪酸结合蛋白的测定试剂及其制备方法 | |
CN105911297B (zh) | 胶乳增强免疫比浊法检测心型脂肪酸结合蛋白的试剂盒 | |
CN114112957B (zh) | 一种脂联素测定试剂盒及其应用 | |
CN115561450A (zh) | 用于检测触珠蛋白含量的试剂盒 | |
CN115128282A (zh) | 一种纤维连接蛋白的检测试剂盒及其检测方法 | |
CN111487407A (zh) | 一种s100b蛋白的检测试剂盒及其使用方法 | |
CN107860930A (zh) | 一种心型脂肪酸结合蛋白的免疫比浊检测试剂和方法 | |
Tanebe et al. | Rapid and sensitive method for erythropoietin determination in serum | |
CN107607724B (zh) | 一种用于补体c3测定试剂盒的复合稳定剂及其应用 | |
CN107976537B (zh) | 一种用于前白蛋白测定试剂盒的稳定剂及其制备方法 | |
Nolan et al. | Continuous-flow enzyme immunoassay for thyroxine in serum. |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |