CN108003161B - 神经营养因子酪氨酸激酶受体抑制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种神经营养因子酪氨酸激酶受体抑制剂。本发明提供的酪氨酸激酶受体抑制剂具有三环母核结构，能够抑制Trk激酶的活性，可以治疗哺乳动物由Trk激酶介导的疾病。
Description
技术领域
本申请涉及一种三环化合物、其制备方法、含有该化合物的药物组合物、以及其在治疗Trk激酶介导的疾病中的用途，属于医药化学领域。
背景技术
NTRK/TRK(Tropomyosin receptor kinase)，为神经营养因子酪氨酸激酶受体，隶属于受体酪氨酸激酶家族，Trk家族主要包括3个成员，NTRK1/TrkA，NTRK2/TrkB和NTRK3/TrkC。完整的Trk激酶包括胞外区、跨膜区和胞内区三个部分。Trk激酶的胞外区与相应的配体结合之后，能够引起激酶构型变化，形成二聚体。Trk激酶胞内区发生自体磷酸化从而激活自身的激酶活性，进而进一步激活下游的信号转导通路如MAPK，AKT，PKC等，产生相应的生物学功能；其中，NGF(神经生长因子)结合TrkA，BDNF(衍生的神经营养因子)结合TrkB，以及NT3(神经营养因子3)结合TrkC。
Trk激酶在神经的发育过程中发挥重要的生理功能，包括神经元轴突的生长与功能维持、记忆的发生发展以及保护神经元免受伤害等等。同时，大量的研究表明Trk信号转导通途的活化与肿瘤的发生发展也有很强的相关性，在神经细胞瘤、前列腺癌、乳腺癌等中都发现了活化的Trk信号蛋白。近几年来多种Trk融合蛋白的发现，更显示了其促进肿瘤发生的生物学功能。最早的TPM3-TrkA融合蛋白是在结肠癌细胞中发现的，在检测的临床病人中约有1.5％的发生率。后来在不同类型的临床肿瘤病人样本如肺癌，头颈癌、乳腺癌、甲状腺癌、神经胶质瘤等中发现了不同类型的Trk融合蛋白，如CD74-NTRK1，MPRIP-NTRK1，QKI-NTRK2，ETV6-NTRK3，BTB1-NTRK3等。这些不同的NTRK融合蛋白在不需要配体结合的情况下，自身处于高度活化的激酶活性状态，因而能够持续性的磷酸化下游的信号途径，诱导细胞增殖，促进肿瘤的发生、发展。因此，近几年来，Trk融合蛋白已经成为一个有效的抗癌靶点和研究热点，例如WO2010048314、WO2012116217、WO2010033941等均公开了具有不同母核的Trk激酶抑制剂。此外，持续给药后出现的靶标突变是肿瘤产生耐药性的重要原因，近期临床上已经出现了NTRK突变的病例，如NTRK1G595R和G667C的突变(Russo M.等,CancerDiscovery,2016,6(1),36-44)、NTRK3G623R的突变(Drilon A.等,Annals of Oncology2016,27(5),920-926)，而寻找新的Trk激酶抑制剂有望解决NTRK突变引起的肿瘤耐药性问题。
发明内容
本申请涉及式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐，
其中，
X选自CR1 m、NR1 n、-O-或-S-；
W存在或不存在，W存在时选自CR2 m、NR2 n、O或S，W不存在时，X与Y通过化学单键或双键相连接；
Y选自CR3 m、NR3 n、-O-或-S-；
Z选自CR4 m、NR4 n、-O-或-S-；
m＝1或2；
n＝0或1；
R1选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、卤素或硝基；
R2选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、卤素、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、(C1-6烷酰基)氨基、二(C1-6烷酰基)氨基、(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、3-6元环烷基或3-6元杂环烷基，所述3-6元环烷基或3-6元杂环烷基任选地被一个或多个氨基、＝O、羟基、氰基、卤素、硝基、C1-6烷基或C1-6烷氧基取代；
R3选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、卤素、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、-COR5、-CONR5R6、-CH2NR5R6、(C1-6烷酰基)氨基、二(C1-6烷酰基)氨基、(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、3-6元环烷基或3-6元杂环烷基，所述C1-6烷基、3-6元环烷基或3-6元杂环烷基任选地被一个或多个＝O、羟基、氰基、卤素、硝基、C1-4烷基、C1-4烷氧基或3-6元环烷基取代；
R4选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、卤素或硝基；
R5、R6独立地选自氢、羟基、C1-6烷基或C1-6烷氧基，
或
R5、R6和与其相连接的N原子共同构成5-6元杂环烷基，所述5-6元杂环烷基任选地被一个或多个氨基、羟基、＝O、氰基、卤素或C1-6烷基取代；
R7、R8、R9、R10独立地选自氢、卤素、硝基、羟基、氨基或氰基，
或
R8和R9共同构成＝O；
R11选自5-10元芳杂环基或6-10元芳基，其中5-10元芳杂环基或6-10元芳基任选地被一个或多个卤素、硝基、羟基、氰基、C1-6烷基或C1-6烷氧基取代。
在一些实施方案中，
X选自CR1 m或NR1 n；
W存在或不存在，W存在时选自CR2 m或NR2 n，W不存在时，X与Y通过化学单键相连接；
Y选自CR3 m或NR3 n；
Z选自CR4 m或NR4 n；
m＝1或2；
n＝0或1；
R1选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘或硝基；
R2选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘、硝基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、(C1-4烷酰基)氨基、二(C1-4烷酰基)氨基、(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基、环丙基、环戊基、环己基、环氧乙烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、N-甲基吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基或四氢噻吩基，所述环丙基、环戊基、环己基、环氧乙烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、N-甲基吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基或四氢噻吩基任选地被一个或多个氨基、＝O、羟基、氰基、卤素、硝基、C1-4烷基或C1-4烷氧基取代；
R3选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘、硝基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、-COR5、-CONR5R6、-CH2NR5R6、(C1-4烷酰基)氨基、二(C1-4烷酰基)氨基、(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基、环丙基、环戊基、环己基、环氧乙烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、N-甲基吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基或四氢噻吩基，所述C1-4烷基、环丙基、环戊基、环己基、环氧乙烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、N-甲基吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基或四氢噻吩基任选地被一个或多个＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘、硝基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、环丙基、环丁基、环戊基或环己基取代；
R4选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘或硝基；
R5、R6独立地选自氢、羟基、C1-4烷基或C1-4烷氧基，
或
R5、R6和与其相连接的N原子共同构成吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、吗啉基或硫代吗啉基，所述吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、吗啉基或硫代吗啉基任选地被一个或多个氨基、羟基、＝O、氰基、氟、氯、溴、碘或C1-4烷基取代；
R7、R8、R9、R10独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、硝基、羟基、氨基或氰基，
或
R8和R9共同构成＝O；
R11选自苯基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、吡啶基、吡啶酮基或吡嗪基，其中苯基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、吡啶基、吡啶酮基或吡嗪基任选地被一个或多个氟、氯、溴、碘、硝基、羟基、氰基、C1-4烷基或C1-4烷氧基取代。
在一些实施方案中，
X选自CR1 m或NR1 n；
W存在或不存在，W存在时选自CR2 m或NR2 n，W不存在时，X与Y通过化学单键相连接；
Y选自CR3 m或NR3 n；
Z选自CR4 m或NR4 n；
m＝1或2；
n＝0或1；
R1选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘或硝基；
R2选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘、硝基、甲基、乙基、正丙基、正丁基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、正丁氧基、甲酰氨基、乙酰氨基、正丙酰氨基、正丁酰氨基、二(甲酰基)氨基、二(乙酰基)氨基、二(正丙酰基)氨基、二(正丁酰基)氨基、甲基氨基、乙基氨基、正丙基氨基、正丁基氨基、二(甲基)氨基、二(乙基)氨基、二(正丙基)氨基、二(正丁基)氨基、环丙基、环戊基、环己基、环氧乙烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、N-甲基吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基或四氢噻吩基，所述环丙基、环戊基、环己基、环氧乙烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、N-甲基吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基或四氢噻吩基任选地被一个或多个氨基、＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘、硝基、甲基、乙基、正丙基、甲氧基、乙氧基或正丙氧基取代；
R3选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘、硝基、甲基、乙基、正丙基、正丁基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、正丁氧基、-COR5、-CONR5R6、-CH2NR5R6、甲酰氨基、乙酰氨基、二(甲酰基)氨基、二(乙酰基)氨基、甲基氨基、乙基氨基、二(甲基)氨基、二(乙基)氨基、环丙基、环戊基、环己基、环氧乙烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、N-甲基吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基或四氢噻吩基，所述甲基、乙基、正丙基、正丁基、环丙基、环戊基、环己基、环氧乙烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、N-甲基吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基或四氢噻吩基任选地被一个或多个＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘、硝基、甲基、乙基、正丙基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基取代；
R4选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘或硝基；
R5、R6独立地选自氢、羟基、甲基、乙基、正丙基、正丁基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基或正丁氧基，
或
R5、R6和与其相连接的N原子共同构成吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、吗啉基或硫代吗啉基，所述吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、吗啉基或硫代吗啉基任选地被一个或多个氨基、羟基、＝O、氰基、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基、正丙基或正丁基取代；
R7、R8、R9、R10独立地选自氢、氟、氯、溴、碘或羟基，
或
R8和R9共同构成＝O；
R11选自苯基、吡啶基、吡啶酮基或吡嗪基，其中苯基、吡啶基、吡啶酮基或吡嗪基任选地被一个或多个氟、氯、溴、碘、羟基、甲氧基或乙氧基取代。
在一些实施方案中，
R1选自氢、氨基、＝O或羟基；
R2选自氢、氨基、＝O、羟基、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、甲酰氨基、乙酰氨基、二(甲酰基)氨基、二(乙酰基)氨基、甲基氨基、乙基氨基、二(甲基)氨基、二(乙基)氨基或吡咯烷基，所述吡咯烷基任选地被一个或多个羟基取代。在一些实施方案中，
X选自CR1 m或NR1 n；
W存在或不存在，W存在时选自CR2 m或NR2 n，W不存在时，X与Y通过化学单键相连接；
Y选自CR3 m或NR3 n；
Z选自CR4 m或NR4 n；
m＝1或2；
n＝0或1；
R1选自氢、氨基或＝O；
R2选自氢、氨基、＝O、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、甲酰氨基、乙酰氨基、二(甲酰基)氨基、二(乙酰基)氨基、甲基氨基、乙基氨基、二(甲基)氨基、二(乙基)氨基或吡咯烷基，所述吡咯烷基任选地被一个或多个羟基取代；
R3选自氢、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、-COR5、-CONR5R6、-CH2NR5R6、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基，所述甲基、乙基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基任选地被一个或多个羟基、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基或环己基取代；
R4选自氢、＝O、羟基、氟、氯、溴或碘；
R5、R6独立地选自氢、羟基、甲基、乙基、甲氧基或乙氧基，
或
R5、R6和与其相连接的N原子共同构成吡咯烷基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基，所述吡咯烷基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基任选地被一个或多个羟基、＝O、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基、正丙基或正丁基取代；
R7、R8、R9、R10独立地选自氢、氟、氯、溴、碘或羟基，
或
R8和R9共同构成＝O；
R11选自苯基、吡啶基、吡啶酮基或吡嗪基，其中苯基、吡啶基、吡啶酮基或吡嗪基任选地被一个或多个氟、氯、溴、碘、羟基、甲氧基或乙氧基取代。
在一些实施方案中，
X选自CR1 m或NR1 n；
W存在或不存在，W存在时选自CR2 m或NR2 n，W不存在时，X与Y通过化学单键相连接；
Y选自CR3 m或NR3 n；
Z选自CR4 m或NR4 n；
m＝1或2；
n＝0或1；
R1选自氢、氨基、＝O或羟基；
R2选自氢、氨基、＝O、羟基、氯、甲基、甲氧基、乙酰氨基、二(乙酰基)氨基、二(甲基)氨基或吡咯烷基，所述吡咯烷基任选地被一个或多个羟基取代；
R3选自氢、氯、溴、碘、甲基、乙基、-COR5、-CONR5R6、-CH2NR5R6、吡咯烷基、哌嗪基或吗啉基，所述乙基、吡咯烷基、哌嗪基或吗啉基任选地被一个或多个羟基、氟、甲基或环己基取代；
R4选自氢、＝O、羟基或氯；
R5、R6独立地选自氢、羟基、甲基、甲氧基或乙氧基，
或
R5、R6和与其相连接的N原子共同构成吡咯烷基、哌嗪基或硫代吗啉基，所述吡咯烷基、哌嗪基或硫代吗啉基任选地被一个或多个羟基、＝O、氟或甲基取代；
R7、R8、R9、R10独立地选自氢、氟或羟基，
或
R8和R9共同构成＝O；
R11选自苯基，其中苯基任选地被一个或多个氟取代。
在一些实施方案中，前述式(I)化合物具有式(II)所示的结构，
其中，
X、W、Y、Z、R8和R9如前述式(I)化合物中所定义。
在一些实施方案中，前述式(II)化合物具有式(Ⅲ)所示的结构，
其中，
X为CR1或N；
W为CR2或N；
Y为CR3；
Z为CR4或N；
R1选自氢、氨基、羟基、氰基、卤素或硝基；
R2选自氢、氨基、羟基、氰基、卤素、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、(C1-6烷酰基)氨基、二(C1-6烷酰基)氨基、(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、3-6元环烷基或3-6元杂环烷基，所述3-6元环烷基或3-6元杂环烷基任选地被一个或多个氨基、＝O、羟基、氰基、卤素、硝基、C1-6烷基或C1-6烷氧基取代；
R3选自氢、氨基、羟基、氰基、卤素、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、-COR5、-CONR5R6、-CH2NR5R6、(C1-6烷酰基)氨基、二(C1-6烷酰基)氨基、(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、3-6元环烷基或3-6元杂环烷基，所述C1-6烷基、3-6元环烷基或3-6元杂环烷基任选地被一个或多个＝O、羟基、氰基、卤素、硝基、C1-4烷基、C1-4烷氧基或3-6元环烷基取代；
R4选自氢、氨基、羟基、氰基、卤素或硝基；
R5、R6独立地选自氢、羟基、C1-6烷基或C1-6烷氧基，
或
R5、R6和与其相连接的N原子共同构成5-6元杂环烷基，所述5-6元杂环烷基任选地被一个或多个氨基、羟基、＝O、氰基、卤素或C1-6烷基取代；
R8、R9独立地选自氢、卤素、硝基、羟基、氨基或氰基，
或
R8和R9共同构成＝O。
在一些实施方案中，
R2选自氢、氨基、羟基、氯、甲基、甲氧基、乙酰氨基、二(乙酰基)氨基、二(甲基)氨基或吡咯烷基；所述吡咯烷基任选地被一个或多个羟基取代。
在一些实施方案中，
X为CR1或N；
W为CR2或N；
Y为CR3；
Z为CR4或N；
R1选自氢、羟基或氨基；
R2选自氢、氨基、羟基、氯、甲氧基、乙酰氨基、二(乙酰基)氨基、二(甲基)氨基或吡咯烷基，所述吡咯烷基任选地被一个或多个羟基取代；
R3选自氢、氟、氯、溴、碘、乙基、-COR5、-CONR5R6、-CH2NR5R6、吡咯烷基、哌嗪基或吗啉基，所述乙基、吡咯烷基、哌嗪基或吗啉基任选地被一个或多个羟基、氟、甲基或环己基取代；
R4选自氢、羟基或氯；
R5、R6独立地选自氢、羟基、甲基、甲氧基或乙氧基，
或
R5、R6和与其相连接的N原子共同构成吡咯烷基、哌嗪基或硫代吗啉基，所述吡咯烷基、哌嗪基或硫代吗啉基任选地被一个或多个羟基、＝O、氟或甲基取代；
R8、R9独立地选自氢、氟或羟基，
或
R8和R9共同构成＝O。
在一些实施方案中，前述式(Ⅲ)化合物具有式(Ⅳ)所示的结构，
其中，Z选自CH或N；R1、R2、R3、R8、R9如前述式(Ⅲ)化合物中所定义。
在一些实施方案中，前述式(II)化合物具有式(Ⅴ)所示的结构，
其中，
X为NH；
W存在或不存在，W存在时选自C(＝O)，W不存在时，X与Y通过化学单键连接；
Y选自CR3；
Z选自CR4；
R3选自氢、氨基、羟基、氰基、卤素、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、-COR5、-CONR5R6、-CH2NR5R6、(C1-6烷酰基)氨基、二(C1-6烷酰基)氨基、(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、3-6元环烷基或3-6元杂环烷基，所述C1-6烷基、3-6元环烷基或3-6元杂环烷基任选地被一个或多个＝O、羟基、氰基、卤素、硝基、C1-4烷基、C1-4烷氧基或3-6元环烷基取代；
R4选自氢、氨基、羟基、氰基、卤素或硝基；
R5、R6独立地选自氢、羟基、C1-6烷基或C1-6烷氧基，
或
R5、R6和与其相连接的N原子共同构成5-6元杂环烷基，所述5-6元杂环烷基任选地被一个或多个氨基、羟基、＝O、氰基、卤素或C1-6烷基取代；
R8、R9独立地选自氢、卤素、硝基、羟基、氨基或氰基。
在一些实施方案中，
X为NH；
W存在或不存在，W存在时选自C(＝O)，W不存在时，X与Y通过化学单键连接；
Y选自CR3；
Z选自CR4；
R3选自氢、碘、-COR5、-CONR5R6或吡咯烷基，所述吡咯烷基任选地被一个或多个羟基取代；
R4选自氢、羟基或氯；
R5、R6独立地选自氢、甲基或乙氧基，
或
R5、R6和与其相连接的N原子共同构成吡咯烷基，所述吡咯烷基任选地被一个或多个羟基取代；
R8、R9独立地选自氢、氟、氯、溴或碘。
在一些实施案中，R8、R9独立地选自氢或氟。
在一些实施方案中，本申请涉及的化合物或其药学上可接受的盐选自以下化合物：
另一方面，本申请涉及药物组合物，其包含本申请的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本申请的药物组合物还包括药学上可接受的辅料。
本申请的药物组合物可通过将本申请的化合物与适宜的药学上可接受的辅料组合而制备，例如可配制成固态、半固态、液态或气态制剂，如片剂、丸剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、膏剂、乳剂、悬浮剂、栓剂、注射剂、吸入剂、凝胶剂、微球及气溶胶等。
给予本申请化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物的典型途径包括但不限于口服、直肠、局部、吸入、肠胃外、舌下、阴道内、鼻内、眼内、腹膜内、肌内、皮下、静脉内给药。
本申请的药物组合物可以采用本领域众所周知的方法制造，如常规的混合法、溶解法、制粒法、制糖衣药丸法、磨细法、乳化法、冷冻干燥法等。
在一些实施方案中，药物组合物是口服形式。对于口服给药，可以通过将活性化合物与本领域熟知的药学上可接受的辅料混合，来配制该药物组合物。这些辅料能使本申请的化合物被配制成片剂、丸剂、锭剂、糖衣剂、胶囊剂、液体、凝胶剂、浆剂、悬浮剂等，用于对患者的口服给药。
可以通过常规的混合、填充或压片方法来制备固体口服组合物。例如，可通过下述方法获得：将所述的活性化合物与固体辅料混合，任选地碾磨所得的混合物，如果需要则加入其它合适的辅料，然后将该混合物加工成颗粒，得到了片剂或糖衣剂的核心。适合的辅料包括但不限于：粘合剂、稀释剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、甜味剂或矫味剂等。
药物组合物还可适用于肠胃外给药，如合适的单位剂型的无菌溶液剂、混悬剂或冻干产品。
另一方面，本申请涉及治疗哺乳动物由Trk酪氨酸激酶受体介导的疾病的方法，包括对需要该治疗的哺乳动物，优选人类，给予治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。
在一些实施方案中，本申请所述的式(I)化合物的所有施用方法中，每天给药的剂量为0.01到300mg/kg体重，优选为10到300mg/kg体重，更优选25到200mg/kg体重，以单独或分开剂量的形式。
另一方面，本申请涉及式(I)化合物或其药学上可接受的盐、或其药物组合物在制备预防或者治疗Trk酪氨酸激酶受体介导的疾病的药物中的用途。
定义
除非另有说明，本申请中所用的下列术语具有下列含义。一个特定的术语在没有特别定义的情况下不应该被认为是不确定的或不清楚的，而应该按照本领域普通的含义去理解。当本文中出现商品名时，意在指代其对应的商品或其活性成分。
术语“被取代”是指特定原子上的任意一个或多个氢原子被取代基取代，只要特定原子的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。当取代基为氧代(即＝O)时，意味着两个氢原子被取代，氧代不会发生在芳香基上。
术语“任选”或“任选地”是指随后描述的事件或情况可以发生或不发生，该描述包括发生所述事件或情况和不发生所述事件或情况。例如，乙基“任选”被一个或多个氟或氯取代，指乙基可以是未被取代的(CH2CH3)、单取代的(如CH2CH2F、CHClCH3)、多取代的(如CHFCH2F、CHClCHF2、CH2CHF2等)或完全被取代的(CCl2CF3、CF2CF3)。本领域技术人员可理解，对于包含一个或多个取代基的任何基团，不会引入任何在空间上不可能存在和/或不能合成的取代或取代模式。
本文中的Cm-n，是该部分具有给定范围中的整数个碳原子。例如“C1-6”是指该基团可具有1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子、4个碳原子、5个碳原子或6个碳原子。
当任何变量(例如R、m、n)在化合物的组成或结构中出现一次以上时，其在每一种情况下的定义都是独立的。因此，例如，如果一个基团被2个R所取代，则每个R都有独立的选项。再例如，当式(Ⅰ)化合物结构式中同时出现CR1 m和CR3 m时，每个m都有独立的选项。
本申请不包括任何在空间上不可能存在和/或不能合成的化合物。例如，当通式(Ⅰ)中
的Y与Z为单键连接时，Y应当是CR3 m(其中m＝2，且R3不为＝O；或m＝1，且R3为＝O)、NR3 n(其中n＝1，且R3不为＝O)、-O-、或-S-；同理，Z应当是CR4 m(其中m＝2，且R4不为＝O；或m＝1，且R4为＝O)、NR4 n(其中n＝1，且R4不为＝O)、-O-、或-S-。当Y与Z为双键连接时，Y应当是CR3 m(其中m＝1，且R3不为＝O)或NR3 n(其中n＝0)；同理，Z应当是CR4 m(其中m＝1，且R4不为＝O)或NR4 n(其中n＝0)。
当通式(Ⅰ)中，W存在时，X、W的基团选择情况类似前述Y、Z的情况。
当通式(Ⅰ)中，W不存在时，
不包括相邻的键同时为双键(即
)的情形。X、Y、Z类似前述情况作出选择。
本发明中，其它通式的类似情况作同样理解。
术语“-O-”是指氧原子两端分别通过单键与相邻的原子相连，例如，H-O-H。
术语“-S-”是指硫原子两端分别通过单键与相邻的原子相连，例如，H-S-H。
术语“＝O”是指氧原子通过一个双键与相邻的原子相连，例如，丙酮((CH3)2C＝O)中的羰基结构。
术语“羟基”指-OH基团，即羟基中的氧原子一端通过单键与H相连，另一端通过单键与另一个相邻原子相连。术语“卤”或“卤素”是指氟、氯、溴和碘。
术语“氰基”指-CN基团。
术语“氨基”指-NH2基团。
术语“硝基”指-NO2基团。
术语“烷基”是指通式为CnH2n+1的烃基。该烷基可以是直链或支链的。例如，术语“C1-6烷基”指含有1至6个碳原子的烷基(例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、新戊基、己基、2-甲基戊基等)。类似地，烷氧基、烷基氨基、二烷基氨基、烷基磺酰基和烷硫基的烷基部分(即烷基)具有上述相同定义。
术语“烷氧基”指-O-烷基。
术语“烷基氨基”指-NH-烷基。
术语“二(烷基)氨基”指-N(烷基)2。
术语“烷酰基氨基”指-NH-CO-烷基，例如，(C1-6烷酰基)氨基指-NH-CO-C1-6烷基。
术语“二(烷酰基)氨基”指-N(烷基)2，例如，二(C1-6烷酰基)氨基指-N(-CO-C1-6烷基)2。
术语“环烷基”指完全饱和的并且可以以呈单环、桥环或螺环存在的碳环。除非另有指示，该碳环通常为3至10元环。环烷基非限制性实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、降冰片基(双环[2.2.1]庚基)、双环[2.2.2]辛基、金刚烷基等。
术语“杂环烷基”是指完全饱和的并且可以以单环、双环或螺环存在的环状基团。除非另有指示，该杂环通常为含有1至3个独立地选自硫、氧和/或氮的杂原子(优选1或2个杂原子)的3至7元环。3元杂环烷基的实例包括但不限于环氧乙烷基、环硫乙烷基、环氮乙烷基，4元杂环烷基的非限制性实例包括但不限于吖丁啶基、噁丁环基、噻丁环基，5元杂环烷基的实例包括但不限于四氢呋喃基、四氢噻吩基、吡咯烷基、异噁唑烷基、噁唑烷基、异噻唑烷基、噻唑烷基、咪唑烷基、四氢吡唑基、吡咯啉基、二氢呋喃基、二氢噻吩基，6元杂环烷基的实例包括但不限于哌啶基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、吗啉基、哌嗪基、1,4-噻噁烷基、1,4-二氧六环基、硫代吗啉基、1,2-二噻烷基、1,4-二噻烷基、二氢吡啶基、四氢吡啶基、二氢吡喃基、四氢吡喃基、二氢噻喃基，7元杂环烷基的实例包括但不限于氮杂环庚烷基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基。优选为具有5或6个环原子的单环杂环烷基。
术语“芳基”是指具有共轭的π电子体系的全碳单环或稠合多环的芳香环基团。例如，芳基可以具有6-20个碳原子，6-14个碳原子或6-12个碳原子。芳基的非限制性实例包括但不限于苯基、萘基、蒽基和1,2,3,4-四氢化萘等。
术语“芳杂环基”是指单环或稠合多环体系，其中含有至少一个选自N、O、S的环原子，其余环原子为C，并且具有至少一个芳香环。优选的芳杂环基具有单个4至8元环，尤其是5至8元环，或包含6至14个，尤其是6至10个环原子的多个稠合环。芳杂环基的非限制性实例包括但不限于吡咯基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、咪唑基、噁唑基、吡唑基、吡啶基、吡啶酮基、嘧啶基、吡嗪基、喹啉基、异喹啉基、四唑基、三唑基、三嗪基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、异吲哚基等。
术语“治疗”意为将本申请所述化合物或制剂进行给药以预防、改善或消除疾病或与所述疾病相关的一个或多个症状，且包括：
(i)预防疾病或疾病状态在哺乳动物中出现，特别是当这类哺乳动物易患有该疾病状态，但尚未被诊断为已患有该疾病状态时；
(ii)抑制疾病或疾病状态，即遏制其发展；
(iii)缓解疾病或疾病状态，即使该疾病或疾病状态消退。
术语“治疗有效量”意指(i)治疗或预防特定疾病、病况或障碍，(ii)减轻、改善或消除特定疾病、病况或障碍的一种或多种症状，或(iii)预防或延迟本文中所述的特定疾病、病况或障碍的一种或多种症状发作的本申请化合物的用量。构成“治疗有效量”的本申请化合物的量取决于该化合物、疾病状态及其严重性、给药方式以及待被治疗的哺乳动物的年龄而改变，但可例行性地由本领域技术人员根据其自身的知识及本公开内容而确定。
术语“药学上可接受的”，是针对那些化合物、材料、组合物和/或剂型而言，它们在可靠的医学判断的范围之内，适用于与人类和动物的组织接触使用，而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。
术语“药学上可接受的盐”，包括但不限于式(Ⅰ)化合物与无机酸形成的酸加成盐、式(Ⅰ)化合物与有机酸形成的酸加成盐或者式(Ⅰ)化合物与酸性氨基酸形成的加成盐等。术语“药物组合物”是指一种或多种本申请的化合物或其盐与药学上可接受的辅料组成的混合物。药物组合物的目的是有利于对有机体给予本申请的化合物。
术语“药学上可接受的辅料”是指对有机体无明显刺激作用，而且不会损害该活性化合物的生物活性及性能的那些辅料。合适的辅料是本领域技术人员熟知的，例如碳水化合物、蜡、水溶性和/或水可膨胀的聚合物、亲水性或疏水性材料、明胶、油、溶剂、水等。
词语“包括(comprise)”或“包含(comprise)”及其英文变体例如comprises或comprising应理解为开放的、非排他性的意义，即“包括但不限于”。
除非另有说明，本申请中所用的缩略词，具有如下含义：
min是指分钟；
h是指小时；
DCM是指二氯甲烷；
MeOH是指甲醇；
H2O是指水；
KF·2H2O是指氟化钾二水合物；
THF是指四氢呋喃；
DMF是指N,N-二甲基甲酰胺；
DMSO是指二甲基亚砜；
PE是指石油醚；
EA是指乙酸乙酯；
DMAP是指4-二甲氨基吡啶；
TFA是指三氟乙酸；
TBDMSCl是指叔丁基二甲基氯硅烷；
NaBH4是指硼氢化钠；
NaHMDS是指六甲基二硅基胺基钠；
(BOC)2O是指二碳酸二叔丁酯；
NBS是指N-溴代琥珀酰亚胺；
NIS是指N-碘代琥珀酰亚胺；
DBU是指1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯；
DAST是指二乙胺基三氟化硫；
HATU是指O-(7-氮杂苯并三唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯；
Pd2(dba)3是指三(二亚苄基丙酮)二钯(0)；
PdCl2(dppf)是指[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)；
20％Pd/C是指含量为20％的钯碳；
DIEA是指N,N-二异丙基乙胺；
TLC是指薄层色谱；
BINAP是指2,2'-双(二苯基膦基)-1,1'-联萘；
M是指摩尔浓度单位mol/L，例如2M是指2mol/L；
N是指当量浓度，例如1N HCl是指浓度为1mol/L的盐酸；2N NaOH是指浓度为2mol/L的氢氧化钠；
Ts是指对甲基苯磺酰基；
TsCl是指对甲苯磺酰氯；
Et是指乙基；
Me是指甲基；
Ac是指乙酰基。
本申请的中间体和化合物还可以以不同的互变异构体形式存在，并且所有这样的形式包含于本申请的范围内。术语“互变异构体”或“互变异构体形式”是指可经由低能垒互变的不同能量的结构异构体。例如，质子互变异构体(也称为质子转移互变异构体)包括经由质子迁移的互变，如酮-烯醇及亚胺-烯胺异构化。质子互变异构体的具体实例是咪唑部分，其中质子可在两个环氮间迁移。价互变异构体包括通过一些成键电子的重组的互变。例示性的烯醇互变化合物如下所示，但不限于此。
本申请还包括与本文中记载的那些相同的，但一个或多个原子被原子量或质量数不同于自然中通常发现的原子量或质量数的原子置换的同位素标记的本申请化合物。可结合到本申请化合物的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、碘和氯的同位素，诸如分别为2H、3H、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、31P、32P、35S、18F、123I、125I和36Cl等。
某些同位素标记的本申请化合物(例如用3H及14C标记的那些)可用于化合物和/或底物组织分布分析中。氚化(即3H)和碳-14(即14C)同位素对于由于它们易于制备和可检测性是尤其优选的。正电子发射同位素，诸如15O、13N、11C和18F可用于正电子发射断层扫描(PET)研究以测定底物占有率。通常可以通过与公开于下文的方案和/或实施例中的那些类似的下列程序，通过同位素标记试剂取代未经同位素标记的试剂来制备同位素标记的本申请化合物。
此外，用较重同位素(诸如氘(即2H))取代可以提供某些由更高的代谢稳定性产生的治疗优点(例如增加的体内半衰期或降低的剂量需求)，并且因此在某些情形下可能是优选的，其中氘取代可以是部分或完全的，部分氘取代是指至少一个氢被至少一个氘取代。例示性的氘代化合物如下所示，但不限于此。
本申请化合物可以是不对称的，例如，具有一个或多个立体异构体。除非另有说明，所有立体异构体都包括，如对映异构体和非对映异构体。本申请的含有不对称碳原子的化合物可以以光学活性纯的形式或外消旋形式被分离出来。光学活性纯的形式可以从外消旋混合物拆分，或通过使用手性原料或手性试剂合成。立体异构体的非限制性实例包括但不限于，
本申请的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的多种合成方法来制备，包括下面列举的具体实施方式、其与其他化学合成方法的结合所形成的实施方式以及本领域技术上人员所熟知的等同替换方式，优选的实施方式包括但不限于本申请的实施例。
本申请具体实施方式的化学反应是在合适的溶剂中完成的，所述的溶剂须适合于本申请的化学变化及其所需的试剂和物料。为了获得本申请的化合物，有时需要本领域技术人员在已有实施方式的基础上对合成步骤或者反应流程进行修改或选择。
本领域合成路线规划中的一个重要考量因素是为反应性官能团(如本申请中的氨基)选择合适的保护基，例如，可参考Greene's Protective Groups in OrganicSynthesis(4th Ed).Hoboken,New Jersey:John Wiley&Sons,Inc.本申请引用的所有参考文献整体上并入本申请。
在一些实施方案中，式(Ⅲ)化合物可以通过通用路线1制备得到，
<通用路线1>
其中，
Ra选自氟或氯；
Rb选自氢或卤素；
X、R2、R8、R9如式(Ⅲ)化合物中所定义。
化合物A与水合肼环化得到化合物B，随后与化合物C1或化合物C2反应生成化合物D，经三氯氧磷氯代得化合物E，化合物E与化合物F发生亲核取代得到化合物G。
在一些实施方案中，通用路线1进一步包括化合物G经偶联反应，制备得到化合物H，
其中，
Rb选自溴；
R3选自吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基；所述吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基任选地被一个或多个羟基、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基或环己基取代；
X、R2、R8、R9如式(Ⅲ)化合物中所定义。
在一些实施方案中，式(Ⅲ)化合物可以通过通用路线2制备得到，
<通用路线2>
其中，
Rc选自氢或C1-4烷基；
Z、R5、R6、R8、R9如式(Ⅲ)化合物中所定义。
化合物I与水合肼环化得到化合物J，随后与化合物C1或化合物C2反应生成化合物K，经三氯氧磷氯代得化合物L，化合物L再与化合物F发生亲核取代得到化合物M，化合物M水解后，得到化合物N，化合物N与胺缩合得到化合物O；或者化合物M直接氨解得到化合物O。
在一些实施方案中，式(Ⅲ)化合物可以通过通用路线3制备得到，
<通用路线3>
其中，
Rd选自卤素；
Re选自C1-4烷基；
R3选自吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基，所述吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基任选地被一个或多个羟基、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基或环己基取代；
W、R5、R6、R8、R9如式(Ⅲ)化合物中所定义。
化合物P与水合肼环化得到化合物Q，随后与化合物C1或化合物C2反应生成化合物R，化合物R经三氯氧磷氯代得化合物S，化合物S与化合物F发生亲核取代得到化合物T，化合物T经偶联反应或亲核取代反应得到化合物U；化合物T也可在醇溶液中经一氧化碳插入羰基得到酯V，再经水解得到化合物W，经偶联反应得到酰胺X；或者化合物V也可直接经氨解反应得到酰胺X。
在一些实施方案中，式(Ⅲ)化合物可以通过通用路线4制备得到，
<通用路线4>
其中，
R3选自吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基；所述吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基任选地被一个或多个羟基、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基或环己基取代；
Z、R8、R9如式(Ⅲ)化合物中所定义。
化合物Y与亚硝酸钠环化得到化合物Z，经硝化/还原两步反应得到化合物AA，随后与化合物C1或化合物C2反应生成化合物AB，经三氯氧磷氯代得化合物AC，化合物AC与化合物F发生亲核取代得到化合物AD，化合物AD与胺偶联或亲核取代得到化合物AE。
在一些实施方案中，前述式(Ⅴ)化合物可以通过通用路线5制备得到，
<通用路线5>
其中，
Rf选自C1-4烷基，
R5、R6、R8、R9如式(Ⅴ)化合物中所定义。
化合物AF与化合物C1或化合物C2反应生成化合物AG，经三氯氧磷氯代得化合物AH，化合物AH与丙二酸酯反应生成化合物AJ，化合物AJ脱羧得化合物AK；化合物AJ经三氯氧磷氯代得到化合物AL-1和化合物AL-2，化合物AL-2脱卤得到化合物AM，随后将酯进行氨解或水解后缩合得到化合物AN；化合物AL-1脱卤得到化合物AO，化合物AO氨解或水解后缩合得到化合物AP。
在一些实施方案中，前述式(Ⅴ)化合物可以通过通用路线6制备得到，
<通用路线6>
其中，
Rg选自卤素；
R3选自吡咯烷基，所述吡咯烷基任选地被一个或多个羟基取代；
R8、R9如式(Ⅴ)化合物中所定义。
化合物AQ与水合肼环化得到化合物AR，随后与C1或C2反应生成化合物AS，经三氯氧磷氯代得化合物AT，化合物AT与化合物F发生亲核取代得到化合物AU，化合物AU经卤代反应得到化合物AV，随后经偶联反应得到化合物AW；化合物AU经去甲基反应得到化合物AX，化合物AX经卤代反应得化合物AY，化合物AY经偶联反应得到化合物AZ。
为清楚起见，进一步用实施例来阐述本发明，但是实施例并非限制本申请的范围。本申请所使用的所有试剂是市售的，无需进一步纯化即可使用。
具体实施方式
中间体的制备
制备例1(R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(化合物I1)
步骤A:4-氯-N-甲氧基-N-甲基丁酰胺
在0℃下，向N,O-二甲基羟胺盐酸盐(69.1g)的DCM(200mL)溶液中加入吡啶(150mL)，搅拌15min；然后向该混合物中加入4-氯丁酰氯(100g)，并在0℃下继续搅拌2h。将反应混合物用DCM稀释，将有机相用水洗涤，然后用饱和食盐水洗涤。分离有机相；无水硫酸钠干燥，过滤，并在减压下浓缩滤液，得到标题化合物粗产品(125.1g)，无需纯化，直接用于下一步。
步骤B:4-氯-1-(2,5-二氟苯基)丁-1-酮
将异丙基氯化镁的THF溶液(2M，604mL)滴加到冷却至-50℃的2-溴-1,4-二氟苯(244.7g)的THF(1L)溶液中。滴加完毕，升温至0℃并搅拌1h。将反应混合物再次冷却至-50℃。搅拌下，向该反应混合物中滴加4-氯-N-甲氧基-N-甲基丁酰胺(100g)的THF(200mL)溶液，逐渐升温至30℃并在30℃下继续搅拌3h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取。将收集的有机相用水洗涤，然后用饱和食盐水洗涤。分离有机相；无水硫酸钠干燥，过滤，并减压下浓缩滤液，残余物经硅胶柱层析纯化，得到标题化合物(101g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.59-7.55(m,1H),7.26-7.20(m,1H),7.17-7.11(m,1H),3.68-3.65(m,2H),3.20-3.16(m,2H),2.25-2.19(m,2H)。m/z＝219[M+1]+。
步骤C:(S,E)-N-(4-氯-1-(2,5-二氟苯基)亚丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
搅拌下，向4-氯-1-(2,5-二氟苯基)丁-1-酮(155.4g)和(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(129.2g)的THF(1.0L)溶液中加入钛酸四乙酯(243.2g)。将混合物在70℃下继续搅拌16h。然后将反应混合物冷却至室温，用饱和氯化铵水溶液淬灭，用乙酸乙酯稀释并过滤。将滤液用水洗涤，然后用饱和食盐水洗涤。分离有机相；无水硫酸钠干燥，过滤，减压下浓缩滤液，残余物经硅胶柱层析纯化，得到标题化合物(207g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38-6.90(m,3H),3.66-3.58(m,2H),3.44-3.22(m,1H),3.0-2.80(m,1H),2.25-2.01(m,2H),1.30(s,9H)。m/z＝322[M+1]+。
步骤D:(S)-N-(4-氯-1-(2,5-二氟苯基)丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
在-65℃下，向(S,E)-N-(4-氯-1-(2,5-二氟苯基)亚丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(177.5g)的THF(1.5L)溶液中缓慢分批加入NaBH4(18.78g)，加料过程中维持反应体系温度不超过-60℃，加料完毕后在-60℃下搅拌30min，缓慢升温至-40℃，TLC检测原料消失；反应液缓慢倒入冰水中淬灭，用乙酸乙酯萃取，得到标题化合物粗产品(173.2g)，无需纯化，直接用于下一步。
步骤E:(R)-1-((S)-叔丁基亚磺酰胺)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷和(S)-1-((S)-叔丁基亚磺酰胺)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷
在-78℃下，向(S)-N-(4-氯-1-(2,5-二氟苯基)丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(193.2g)的THF(1.8L)溶液中缓慢滴加入NaHMDS(2M)的THF溶液(343mL)，加料过程中维持反应体系温度不超过-75℃，加料完毕后在-60℃下搅拌30min，缓慢升温至室温，在室温下搅拌1h，TLC检测原料消失；用饱和氯化铵水溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，并在减压下浓缩滤液，残余物经硅胶柱层析纯化，得到(R)-1-((S)-叔丁基亚磺酰胺)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(100g)和(S)-1-((S)-叔丁基亚磺酰胺)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(59g)。
E1:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.06-6.88(m,3H),4.96(d,J＝7.2Hz,1H),3.93-3.87(m,1H),3.01-2.95(m,1H),2.30-2.24(m,1H),1.97-1.71(m,3H),1.16(s,9H)。m/z＝288[M+1]+。
E2:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.04-6.87(m,3H),5.32(d,J＝7.2Hz,1H),3.67-3.55(m,2H),2.20-2.16(m,1H),1.94-1.89(m,1H),1.82-1.74(m,2H),1.10(s,9H)。m/z＝288[M+1]+。
步骤F:(R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷
在-10℃下，向(R)-1-((S)-叔丁基亚磺酰胺)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(5.2g)固体缓慢滴加入4M HCl的1,4-二氧六环溶液(27mL)，升至室温搅拌1h，将反应混合物减压下浓缩，用NaOH溶液调制碱性，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，减压下浓缩滤液，得到标题化合物(3.3g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.31-7.26(m,1H),6.99-6.93(m,1H),6.91-6.85(m,1H),4.46(t,J＝7.6Hz,1H),4.20-3.60(m,1H),3.27-3.21(m,1H),3.15-3.10(m,1H),2.31-2.25(m,1H),2.05-1.85(m,2H),1.75-1.67(m,1H)。m/z＝184[M+1]+。
制备例2 2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(化合物I2)
步骤A:2-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
在0～5℃下，向2-吡咯烷酮(100g)和DMAP(72g)的乙腈(1.0L)溶液中加入二碳酸二叔丁酯(308g)，并在20～35℃下搅拌2h。将反应混合物在减压下浓缩，得到残渣，将其用乙酸乙酯稀释，用水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，并在减压下浓缩滤液，硅胶柱层析纯化，分离得到2-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(215.5g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.75(t,J＝7.2Hz,2H),2.52(t,J＝8.0Hz,2H),2.00(dd,J＝15.2Hz,J＝7.2Hz,2H),1.53(s,9H)。
步骤B:5-(2,5-二氟苯基)-2,3-二氢-1H吡咯-1-羧酸叔丁酯
在-40℃下，向2-溴-1,4-二氟苯(186g)的THF(1.0L)溶液中加入2.0M异丙基氯化镁的THF溶液(482mL)，并在5℃下继续搅拌1h。在-40℃下，向上述反应混合物中滴加2-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(215.5g)的THF溶液(250mL)，并在10℃下继续搅拌2h。将反应混合物用饱和氯化铵溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取，用无水硫酸钠干燥，过滤，并在减压下浓缩滤液，得到标题化合物粗产品(323.4g)，无需纯化，直接用于下一步。
步骤C:5-(2,5-二氟苯基)-3,4-二氢-2H-吡咯
在-40℃下，向5-(2,5-二氟苯基)-2,3-二氢-1H-吡咯-1-羧酸叔丁酯(318.4g)的DCM(1.0L)溶液加入TFA(421mL)，并在20～35℃下搅拌2h。将反应混合物在减压下浓缩，得到残渣，将其用乙酸乙酯稀释，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压下浓缩滤液，得到标题化合物粗产品(224.4g)，无需纯化，直接用于下一步。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.68-7.64(m,1H),7.08-7.04(m,2H),4.04-3.99(m,2H),3.02-2.97(m,2H),2.08-2.00(m,2H)。m/z＝182[M+1]+。
步骤D:2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷
向5-(2,5-二氟苯基)-3,4-二氢-2H-吡咯(224.4g)的MeOH/H2O(V/V＝4/1,2.0L)混合溶液加入NaBH4(93.82g)，并在20～35℃下搅拌2h。将反应混合物用1N HCl水溶液淬灭，并用2N NaOH水溶液碱化，用DCM萃取，无水硫酸钠干燥，减压下浓缩滤液，得到标题化合物(171.3g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.28-7.19(m,1H),6.97-6.91(m,1H),6.87-6.82(m,1H),4.39(t,J＝7.5Hz,1H),3.18-3.12(m,1H),3.04(dd,J＝14.8Hz,J＝8.0Hz,1H),2.31-2.19(m,1H),2.01-1.75(m,3H),1.65-1.58(m,1H)。m/z＝184[M+1]+。
制备例3(2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷(化合物I3)和(2S,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷(化合物I4)
步骤A：(R)-4-((叔丁基二甲基硅基)氧基)吡咯烷-2-酮
将(R)-4-羟基-2-吡咯烷酮(6.0g)溶于DMF(60mL)中，0℃下，加入TBDMSCl(9.8g)和咪唑(6.05g)，升至室温，搅拌3h。监测反应完毕，向反应体系中加入水，有固体析出，过滤，红外灯下干燥过夜，得(R)-4-((叔丁基二甲基硅基)氧基)吡咯烷-2-酮(10.7g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.45(s,1H),4.44(m,1H),3.42(m,1H),2.93(m,1H),2.40(m,1H),1.85(m,1H),0.79(s,9H),0.00(s,6H)。
步骤B：(R)-4-((叔丁基二甲基硅基)氧基)-2-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
0℃下,向(R)-4-((叔丁基二甲基硅基)氧基)吡咯烷-2-酮(10.67g)的乙腈(150mL)溶液中，加入三乙胺(8.26mL)和DMAP(3.0g)，氮气保护下滴加(Boc)2O(15mL),加完，搅拌5min，升至室温搅拌过夜。反应体系倒入水中，乙酸乙酯萃取，硅胶柱层析纯化(V/V：PE/EA＝10/1)，得(R)-4-((叔丁基二甲基硅基)氧基)-2-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(14.5g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.38-4.40(m,1H),3.86(dd,J＝11.4,5.6Hz,1H),3.62(dd,J＝11.4,3.2Hz,1H),2.71(dd,J＝15.6,5.6Hz,1H),2.48(dd,J＝3.4,5.6Hz,1H),1.56(s,9H),0.89(m,9H),0.08(m,6H)。
步骤C：((2R)-2-((叔丁基二甲基硅基)氧基)-4-(2,5-二氟苯基)-4-羟基丁基)氨基甲酸叔丁酯
将2,5-二氟溴苯(14.8g)溶于干燥后的四氢呋喃(100mL)，冷却至-78℃，加入异丙基氯化镁(2M)的THF溶液(35mL)，反应体系逐渐升至0℃，搅拌2h；然后再冷却至-78℃，向体系中加入(R)-4-((叔丁基二甲基硅基)氧基)-2-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(15.6g)四氢呋喃(50mL)溶液，再次升温至0℃，搅拌3.5h。0℃，加入甲醇，随后加入硼氢化钠(4.46g)，搅拌1h，反应完毕，加入饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取，硅胶柱层析纯化(V/V：PE/EA＝5/1)，得((2R)-2-((叔丁基二甲基硅基)氧基)-4-(2,5-二氟苯基)-4-羟基丁基)氨基甲酸叔丁酯(15.4g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.22-7.30(m,1H),6.87-6.97(m,2H),5.16-5.30(m,1H),4.79(s,1H),4.08-4.13(m,1H),3.21-3.37(m,2H),1.92-1.78(m,2H),1.45(s,9H),1.30-1.21(m,1H),0.92(s,9H),0.13(s,6H)。
步骤D：(4R)-4-((叔丁基二甲基硅基)氧基)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
将((2R)-2-((叔丁基二甲基硅基)氧基)-4-(2,5-二氟苯基)-4-羟基丁基)氨基甲酸叔丁酯(15.4g)溶于二氯甲烷中，冷却至-60℃，滴加三乙胺(14.8mL)和甲磺酰氯(3mL)，保持该温度搅拌2h，加入DBU(8mL),升至室温搅拌过夜，监测反应完毕，将反应体系倒入水中，二氯甲烷萃取(50mL×3)，有机相用饱和食盐水洗，硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩滤液，残余物经硅胶柱层析纯化(V/V：PE/EA＝25/1),得(4R)-4-((叔丁基二甲基硅基)氧基)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(11.28g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.98-7.33(m,3H),5.17-5.49(m,1H),4.50-4.55(m,1H),3.60-3.93(m,2H),2.40-2.60(m,1H),1.92-2.01(m,1H),1.30-1.21(m,9H),0.86-1.08(m,9H),0.08-0.21(m,6H)。
步骤E：(4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
将(4R)-4-((叔丁基二甲基硅基)氧基)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(11.3g)溶于适量四氢呋喃(150mL)中，室温下加入四丁基氟化铵(13.0g)，搅拌1h，监测反应完毕，将反应体系倒入冰水中，乙酸乙酯萃取(×2)，硅胶柱层析纯化(V/V：PE/EA＝3/1)，得标题化合物(6.5g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.80-7.16(m,3H),5.02-5.20(m,1H),4.43-4.51(m,1H),3.57-3.85(m,2H),2.04-2.60(m,1H),1.95-2.02(m,1H),1.58-1.72(m,1H),1.20-1.42(m,9H)。
步骤F:(2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(a)和(2S,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(b)
-78℃下，向(4R)-叔丁基-2-(2,5-二氟苯基)-4-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.0g)的二氯甲烷溶液(50mL)中，滴加DAST(0.883mL)试剂，保持该温度搅拌2h，逐渐升至室温并搅拌过夜。0℃下，加入饱和碳酸氢钠溶液淬灭，二氯甲烷萃取(×2)，有机相以饱和食盐水洗，硫酸钠干燥，硅胶柱层析纯化(V/V：PE/EA＝25/1)，得到(2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-甲酸叔丁酯a(478mg)和(2S,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-甲酸叔丁酯b(311mg)。
(2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(a)：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.91-7.00(m,3H),5.12-5.30(m,2H),4.05-4.10(m,1H),3.61-3.71(m,1H),2.71-2.75(m,1H),1.97-2.07(m,1H),1.21-1.62(m,9H)。
(2S,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(b)：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.87-7.00(m,3H),5.19-5.32(m,2H),3.70-3.96(m,2H),2.40-2.26(m,2H),1.20-1.65(m,9H)。
步骤G1:(2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷(化合物I3)
室温下，向(2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(478mg)的二氯甲烷溶液(20mL)中加入三氟乙酸(3mL)，搅拌1h，监测反应完毕，除去溶剂，向浓缩混合物中加入饱和碳酸氢钠溶液，并用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗，硫酸钠干燥，除去溶剂无需进一步纯化，即得(2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷(299mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.85-7.26(m,3H),5.20-5.35(m,1H),4.71-4.75(m,1H),3.16-3.40(m,2H),2.58-2.69(m,1H),1.66-1.83(m,2H)。
步骤G2:(2S,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷(化合物I4)
由步骤F分离出的b，经步骤G1相同操作得到(2S,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷(167mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.89-7.26(m,3H),5.20-5.35(m,1H),4.41-4.45(m,1H),3.44-3.53(m,1H),3.00-3.12(m,1H),2.57-2.65(m,1H),1.70-2.04(m,2H)。
制备例4 2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷(化合物I5)
步骤A：2-(2,5-二氟苯基)-4-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
-78℃下，向草酰氯(195mg)的二氯甲烷溶液(5mL)中，滴加DMSO(225mg)的二氯甲烷溶液(1mL)，保持该温度，反应30min，然后向反应体系中逐滴加入(4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(制备例3步骤E，115mg)的二氯甲烷溶液(3mL)，保持该温度反应1.5h，再向反应体系中滴加三乙胺(0.9mL),搅拌5min后升至室温搅拌2h，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，硅胶柱层析纯化(V/V：PE/EA＝5/1),得2-(2,5-二氟苯基)-4-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(31mg)。
1H NMR(400M Hz,CDCl3)δ7.05-6.88(m,3H),5.4(s,1H),4.06and 3.92(d,J＝19.1,2H),3.20(dd,J＝19.1,10.6Hz,1H),2.61(d,J＝19.1Hz,1H),1.42(s,9H)。
步骤B:2-(2,5-二氟苯基)-4,4-二氟吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
将2-(2,5-二氟苯基)-4-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(50mg)溶于二氯甲烷(10mL)，冷却至-78℃，向其滴加DAST(0.1mL)试剂，保持该温度反应2h，然后升至室温搅拌过夜。加入饱和碳酸氢钠淬灭，二氯甲烷萃取，硫酸钠干燥有机相，硅胶柱层析纯化(V/V：PE/EA＝15/1),得2-(2,5-二氟苯基)-4,4-二氟吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(24mg,)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.08-6.84(m,3H),5.30-5.20(m,1H),4.14-3.79(m,2H),2.98-2.76(m,1H),2.44-2.21(m,1H),1.46-1.25(m,9H)。
步骤C:2-(2,5-二氟苯基)-4,4-二氟吡咯烷
2-(2,5-二氟苯基)-4,4-二氟吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(460mg)，经与制备例3步骤G1相同操作(三氟乙酸1mL，二氯甲烷15mL)，得到化合物I5(288mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.40-7.27(m,1H),7.11-6.89(m,2H),4.77-4.60(m,1H),3.49-3.29(m,2H),2.78-2.69(m,1H),2.19-2.05(m,1H),1.79-1.98(s,1H)。
制备例5(3R)-5-(2,5-二氟苯基)-3-羟基吡咯烷(化合物I6)
(4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(2.15g)，经与制备例3步骤G1相同操作(三氟乙酸12mL,，二氯甲烷80mL)，得到化合物I6(1.21g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.23(m,1H),7.01-6.83(m,2H),4.77-4.66(t,J＝8.0Hz,0.5H),4.56-4.42(m,1H),4.37(t,J＝8.0Hz,0.5H),3.27-3.12(m,1H),3.10-3.02(m,1H),2.67-2.57(m,0.5H),2.34-2.29(0.5H),1.92-1.59(m,3H)。
制备例6 2-(2,5-二氟苯基)-吡咯烷-3-酮(化合物I7)
室温下，向2-(2,5-二氟苯基)-4-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(制备例4步骤A)(100mg)的二氯甲烷溶液(10mL)中加入三氟乙酸(1mL)，搅拌1h，减压浓缩除去溶剂，得到化合物I7，直接进行下一步反应。
实施例1 4-(2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-基)吗啉
步骤A:嘧啶并[1,2-b]吲唑-2(1H)-酮
室温下，将3-氨基吲唑(2.0g)溶于丙炔酸乙酯(20mL)溶液中，120℃下回流1h，反应液缓慢冷却至室温，析出金黄色针状晶体，过滤得到标题化合物(907mg)，直接用于下一步。
步骤B:2-氯嘧啶并[1,2-b]吲唑
室温下，将嘧啶并[1,2-b]吲唑-2(1H)-酮(900mg)溶于三氯氧磷(10mL)溶液中，向反应液中加入N,N-二甲基苯胺(1.18g)，110℃下回流1h，反应液冷却至室温，减压浓缩除去三氯氧磷，将反应混合物用乙酸乙酯稀释，将有机相用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，然后用饱和食盐水洗涤。分离有机相；用无水硫酸钠干燥，过滤，并在减压下浓缩滤液，硅胶柱层析得到标题化合物(738mg)，直接用于下一步。
步骤C:9-溴-2-氯嘧啶并[1,2-b]吲唑
0℃下，将2-氯嘧啶并[1,2-b]吲唑(300mg)溶解于冰醋酸(6mL)中，用注射器向反应液中缓慢滴加入溴素，升至室温并搅拌2h，过滤，水洗，干燥得到标题化合物粗产品(300mg)，无需纯化，直接用于下一步。
步骤D:9-溴-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑
室温下，向9-溴-2-氯嘧啶并[1,2-b]吲唑(300mg)和2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(195mg)的正丁醇(6mL)溶液中加入DIEA(0.35mL)，将反应混合物加热到160℃，并在此温度搅拌回流8h；反应完毕后，减压浓缩除去正丁醇，加入硅胶拌样，干法硅胶柱层析得到标题化合物粗产品(311mg)，无需再纯化，直接用于下一步。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.49(d,J＝7.2Hz,1H),8.13(brs,1H),7.46(d,J＝10.0Hz,2H),7.15-7.06(m,1H),7.00-6.89(m,1H),6.77-6.71(m,1H),6.42-6.18(m,1H),5.60-5.08(m,1H),4.03(brs,1H),3.85(brs,1H),2.63-2.44(m,1H),2.09-2.01(m,3H)。m/z＝429[M+1]+。
步骤E:4-(2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-基)吗啉
室温下，向9-溴-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑(50mg)和吗啉(13mg)的1,4-二氧六环(6mL)溶液中加入Pd2(dba)3(6mg)，BINAP(8mg)和叔丁醇钠(17mg)，反应液通入氮气鼓泡30min，120℃下微波反应1h，硅胶柱层析得到标题化合物(3mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.48(brs,1H),7.55(d,J＝9.6Hz,1H),7.31(d,J＝7.6Hz,2H),7.12-7.04(m,1H),6.95-6.89(m,1H),6.81-6.76(m,1H),6.23(brs,1H),5.54-5.19(m,1H),4.18-3.76(m,6H),3.17(t,J＝4.4Hz,4H),2.60-2.45(m,1H),2.17-2.04(m,3H)。m/z＝436[M+1]+。
实施例2 1-(2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-基)-3-羟基-吡咯烷
室温下，向9-溴-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑(50mg)和3-羟基吡咯烷(13mg)的1,4-二氧六环(6mL)溶液中加入Pd2(dba)3(6mg)，BINAP(8mg)和叔丁醇钠(17mg)，反应液通入氮气鼓泡30min，120℃下微波反应1h，硅胶柱层析得到标题化合物(11mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.48(brs,1H),7.54(d,J＝8.8Hz,1H),7.18-7.02(m,2H),6.92-6.89(m,2H),6.82-6.78(m,1H),6.20(brs,1H),5.35(brs,1H),4.63(brs,1H),4.05(brs,1H),3.88(brs,1H),3.72-5.56(m,2H),3.47-3.34(m,2H),2.62-2.44(m,1H),2.29-2.21(m,1H),2.17-1.94(m,5H)。m/z＝436[M+1]+。
实施例3(R)-9-溴-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑
步骤A:5-溴-1H-吲唑-3-胺
室温下，向2-氟-5-溴苯腈(5.0g)溶于乙醇(30mL)溶液中加入含量为80％的水合联氨(7.82g)，90℃下回流12h，反应液冷却至室温，减压浓缩除去乙醇，残余物用二氯甲烷进行打浆1h，过滤，二氯甲烷洗涤，干燥，得到标题化合物(5.3g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ12.50-9.38(m,1H),8.95(s,1H),7.32(d,J＝8.8Hz,1H),7.22(d,J＝8.8Hz,1H),5.45(brs,2H)。m/z＝212[M+1]+。
步骤B:9-溴嘧啶并[1,2-b]吲唑-2(1H)-酮
室温下，向5-溴-1H-吲唑-3-胺(2.0g)溶于DMF(20mL)溶液中加入碳酸铯(4.63g)和3-乙氧基丙烯酸乙酯(2.05g)，110℃下加热搅拌4h，反应液冷却至室温，减压浓缩除去DMF，加入硅胶拌样，干法硅胶柱层析得到标题化合物粗产品(560mg)，无需再纯化，直接用于下一步。
步骤C:9-溴-2-氯嘧啶并[1,2-b]吲唑
室温下，将9-溴嘧啶并[1,2-b]吲唑-2(1H)-酮(560mg)溶于三氯氧磷(10mL)溶液中，向反应液中加入N,N-二甲基苯胺(514mg)，110℃下回流1h，反应液冷却至室温，减压浓缩除去三氯氧磷，将反应混合物用乙酸乙酯稀释，将有机相用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，然后用饱和食盐水洗涤。分离有机相；用无水硫酸钠干燥并在减压下浓缩，硅胶柱层析得到标题化合物(533mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.57(d,J＝4.8Hz,1H),8.47(s,1H),7.87(d,J＝9.2Hz,1H),7.75(d,J＝9.2Hz,1H),7.42(d,J＝4.4Hz,1H)。m/z＝282[M+1]+。
步骤D:(R)-9-溴-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑
室温下，向9-溴-2-氯嘧啶并[1,2-b]吲唑(150mg)和(R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(107mg)的正丁醇(10mL)溶液中加入DIEA(0.18mL)，将反应混合物加热到160℃，并在此温度搅拌回流8h；反应完毕后，减压浓缩除去正丁醇，加入硅胶拌样，干法硅胶柱层析得到标题化合物(223mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.49(d,J＝6.8Hz,1H),8.13(brs,1H),7.48(brs,2H),7.12-7.06(m,1H),6.95-6.91(m,1H),6.77-6.73(m,1H),6.49-6.08(m,1H),5.57-5.18(m,1H),4.03(brs,1H),3.85(brs,1H),2.60-2.18(m,1H),2.15-2.05(m,3H)。m/z＝429[M+1]+。
实施例4(S)-1-(2-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-基)-3-羟基-吡咯烷
室温下，向(R)-9-溴-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑(100mg)和(S)-3-羟基吡咯烷(27mg)的1,4-二氧六环(10mL)溶液中加入Pd2(dba)3(11mg)，BINAP(15mg)和叔丁醇钠(34mg)，反应液通入氮气鼓泡30min，120℃下微波反应1h，硅胶柱层析得到标题化合物(37mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.44(d,J＝7.2Hz,1H),7.57-7.52(m,1H),7.32(d,J＝9.6Hz,1H),7.10-7.03(m,1H),6.94-6.87(m,2H),6.83-6.78(m,1H),6.20(brs,1H),5.51-5.23(m,1H),4.63(brs,1H),4.05(brs,1H),3.89(brs,1H),3.80-3.24(m,4H),2.55-2.48(m,1H),2.29-2.24(m,1H),2.18-1.99(m,4H),1.80(brs,1H)。m/z＝436[M+1]+。
实施例5(R)-9-溴-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
步骤A:3-氨基-5-溴-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶
参照实施例3中的步骤A，将2-氟-5-溴苯腈替换为2-氯-5-溴烟腈，得到标题化合物。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ12.20(s,1H),8.39(d,J＝4.8Hz,2H),5.68(brs,2H)。m/z＝213[M+1]+。
步骤B:9-溴吡啶并[2',3':3,4]吡唑[1,5-a]嘧啶-2(1H)-酮
参照实施例3中的步骤B，将5-溴-1H-吲唑-3-胺替换为3-氨基-5-溴-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶，得到标题化合物粗产品，无需纯化，直接投入下一步。
步骤C:9-溴-2-氯吡啶并[2',3':3,4]吡唑[1,5-a]嘧啶
参照实施例3中的步骤C，将9-溴嘧啶并[1,2-b]吲唑-2(1H)-酮替换为9-溴吡啶并[2',3':3,4]吡唑[1,5-a]嘧啶-2(1H)-酮，得到标题化合物。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.98(d,J＝7.6Hz,1H),8.97(s,1H),8.74(s,1H),7.36(d,J＝7.2Hz,1H)。m/z＝283[M+1]+。
步骤D:(R)-9-溴-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
参照实施例3中的步骤D，将9-溴-2-氯嘧啶并[1,2-b]吲唑替换为9-溴-2-氯吡啶并[2',3':3,4]吡唑[1,5-a]嘧啶，得到标题化合物。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.74(s,1H),8.66-8.25(m,2H),7.13-7.07(m,1H),6.94(brs,1H),6.75-6.70(m,1H),6.65-5.94(m,1H),5.63-4.85(m,1H),4.10-3.66(m,2H),2.54(m,1H),2.21-2.08(m,3H)。m/z＝430[M+1]+。
实施例6(S)-1-(2-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-基)-3-羟基-吡咯烷
参照实施例4，将(R)-9-溴-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑替换为(R)-9-溴-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶，得到标题化合物。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.53(brs,2H),7.27(brs,1H),7.10-7.05(m,1H),6.94-6.90(m,1H),6.80-6.76(m,1H),6.26(brs,1H),5.35(brs,1H),4.67(brs,1H),4.03(brs,1H),3.86(brs,1H),3.66-3.59(m,2H),3.45-3.38(m,2H),2.53(t,J＝6.0Hz,1H),2.28-2.21(m,2H),2.11(brs,4H)。m/z＝437[M+1]+。
实施例7(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
步骤A：6-氯-2-甲氧基烟腈和2-氯-6-甲氧基烟腈
冰浴搅拌下，金属钠(700mg)加入到30mL无水甲醇中，室温下搅拌一小时直至钠完全消失。室温搅拌下，将上述新制的甲醇钠溶液，经恒压漏斗缓慢滴加到2,6-二氯-3-氰基吡啶(5.0g)的甲醇(50mL)溶液中，反应1小时。减压浓缩，加入乙酸乙酯溶解残余物，滤去不溶的氯化钠沉淀，滤液浓缩得6-氯-2-甲氧基烟腈和2-氯-6-甲氧基烟腈的混合物(4.87g)，核磁氢谱结果表明6-氯-2-甲氧基烟腈和2-氯-6-甲氧基烟腈的比例为2：1，为黄色固体。
混合物中6-氯-2-甲氧基烟腈1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.79(1H,d,J＝8.4Hz),6.76(1H,d,J＝8.4Hz),4.02(3H,s)。
混合物中2-氯-6-甲氧基烟腈1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.81(1H,d,J＝8.4Hz),7.02(1H,d,J＝8.4Hz),4.08(3H,s)。
步骤B：6-甲氧基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-胺
室温搅拌下，80％水合肼溶液(1.55mL)滴加到步骤A得到的6-氯-2-甲氧基烟腈和2-氯-6-甲氧基烟腈的混合物(2.87g)的无水乙醇溶液(60mL)中，反应液回流3小时，冷却至室温，减压浓缩，残余物加入50mL水搅拌15分钟，过滤，干燥得标题化合物(840mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.69(1H,s),7.92(1H,d,J＝8.4Hz),6.36(1H,d,J＝8.4Hz),5.35(2H,brs),3.83(3H,s)。m/z＝165[M+1]+。
步骤C：8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2(1H)-酮
室温搅拌下，6-甲氧基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-胺(1.07g)和1,3-二甲基脲嘧啶(914mg)分别加入到50mL新制乙醇钠(0.84M)的乙醇溶液中。反应液回流过夜，冷却至室温，减压浓缩，加入乙酸乙酯打浆，过滤，滤饼溶于50mL水，加入4M HCl调至pH＝3-4，析出沉淀，过滤，干燥，得到标题化合物(1.16g)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.15(1H,brs),8.65(1H,d,J＝7.2Hz),8.11(1H,d,J＝8.8Hz),6.52(1H,d,J＝8.8Hz),6.26(1H,d,J＝7.2Hz),3.90(3H,s)。m/z＝217[M+1]+。
步骤D：2-氯-8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
将8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-(1H)-酮(1.10g)和N,N-二甲基苯胺(1.24g)溶于三氯氧磷(12mL)中，反应液加热回流20分钟，冷却至室温，析出固体，过滤得标题化合物(440mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.40(1H,d,J＝7.2Hz),8.45(1H,d,J＝8.8Hz),7.52(1H,d,J＝6.8Hz),6.79(1H,d,J＝8.8Hz),3.99(3H,s)。m/z＝235[M+1]+。
步骤E：(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
在封管中加入2-氯-8-甲基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶(440mg)、(R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(344mg)、DIEA(485mg)和正丁醇(10mL)，加热至160℃反应5小时。冷却至室温，析出固体，过滤，干燥，得标题化合物(483mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.42(1H,d,J＝6.8Hz),8.09(1H,brs),7.04-7.10(1H,m),6.92-6.94(1H,m),6.73-6.77(1H,m),6.48(1H,d,J＝8.8Hz),6.18(1H,brs),5.37(1H,brs),4.07(3H,s),4.01(1H,brs),3.83(1H,brs),2.52(1H,m),2.07-2.10(3H,m)。m/z＝382[M+1]+。
实施例8(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-9-碘-8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
在(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶(230mg)的DMF(4mL)溶液中加入NIS(203mg)，室温下搅拌8小时。反应液倒入水中，析出固体，过滤，干燥，得标题化合物(305mg,100％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.61(1H,brs),8.40(1H,brs),7.06-7.12(1H,m),6.93-6.95(1H,m),6.70-6.75(1H,m),6.18(1H,brs),5.31(1H,brs),4.11(3H,s),4.00(1H,brs),3.83(1H,brs),2.52(1H,m),2.08-2.11(3H,m)。m/z＝508[M+1]+。
实施例9 1-(2-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-基)-3-羟基-吡咯烷
步骤A：(R)-9-溴-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
在(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶(94mg)的乙腈(5mL)溶液中加入NBS(51mg)，室温下搅拌5小时。减压浓缩，残余物经硅胶柱层析纯化，分离得标题化合物(112mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.42(2H,brs),7.06-7.12(1H,m),6.94-7.00(1H,m),6.71-6.75(1H,m),6.20(1H,brs),5.30(1H,brs),4.14(3H,s),3.99(1H,brs),3.83(1H,brs),2.52(1H,m),2.05-2.11(3H,m)。m/z＝460[M+1]+。
步骤B：1-(2-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-基)-3-羟基-吡咯烷
(R)-9-溴-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶(50mg)，3-羟基吡咯烷(14mg)，Pd2(dba)3(10mg)，BINAP(7mg)和叔丁醇钠(15mgl)溶于5mL二氧六环，氮气鼓泡15分钟后，120℃下微波反应1小时。减压浓缩，残余物经薄板层析分离得标题化合物(9mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.44(1H,brs),7.39(1H,s),7.06-7.08(1H,m),6.92(1H,m),6.76(1H,m),6.13(1H,brs),5.35(1H,brs),4.56(1H,s),4.01-4.08(4H,m),3.84(1H,m),3.59(1H,m),3.48(1H,m),3.30-3.33(1H,m),3.16(1H,m),2.51(1H,m),2.29(1H,m),2.10(4H,m),2.01(1H,m)。m/z＝467[M+1]+。
实施例10(S)-1-(2-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-基)-3-羟基-吡咯烷
参照实施例9，用(S)-3-羟基吡咯烷代替3-羟基吡咯烷进行微波反应，得标题化合物(34mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.39(1H,d,J＝7.6Hz),7.39(1H,s),7.04-7.10(1H,m),6.90-6.94(1H,m),6.75-6.79(1H,m),6.13(1H,brs),5.35(1H,brs),4.57(1H,s),4.14(3H,s),4.01(1H,m),3.84(1H,m),3.57-3.63(1H,m),3.50(1H,dd,J＝4.8&10.4Hz),3.30(1H,d,J＝10.8Hz),3.14-3.20(1H,m),2.43-2.57(1H,m),2.26-2.31(1H,m),1.98-2.12(4H,m),1.88(1H,m).m/z＝467[M+1]+。
实施例11(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8(7H)-酮
在(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶(100mg)的醋酸(2mL)溶液中加入碘化钾(164mg)，反应在110℃下搅拌4小时。冷却至室温，加入饱和碳酸氢钠水溶液调pH至中性，乙酸乙酯萃取，浓缩，残余物经硅胶柱层析纯化得到标题化合物(92mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.68(1H,brs),8.50-8.64(1H,m),7.80(1H,brs),6.95-7.28(3H,m),6.58(1H,brs),5.87(1H,brs),5.26-5.43(1H,m),3.96(1H,brs),4.72(1H,brs),2.43(1H,m),1.88-2.01(3H,m)。m/z＝368[M+1]+。
实施例12(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-9-碘吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8(7H)-酮
(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8(7H)-酮(35mg)溶于5mL乙腈和5mL二氯甲烷的混合溶剂，室温搅拌下，加入NIS(22mg)，反应4小时，减压浓缩，经硅胶柱层析纯化得到标题化合物(38mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.79(1H,brs),8.20-8.60(2H,m),7.07-7.12(1H,m),6.94(1H,m),6.67-6.71(1H,m),6.35(0.5H,brs),5.90(0.5H,brs),5.55(0.5H,brs),5.19(0.5H,brs),3.83-4.09(2H,m),2.55(1H,m),2.08-2.11(3H,m)。m/z＝494[M+1]+。
实施例13 2-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-9-(3-羟基吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8(7H)-酮
参照实施例12，将NIS替换为NBS，得到(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-9-溴吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8(7H)-酮。
在封管中加入(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-9-溴吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8(7H)-酮(20mg)、3-羟基吡咯烷(5mg)、DIEA(12mg)和正丁醇(2mL)，加热至200℃反应20小时。冷却至室温，浓缩，残余物经硅胶柱层析(V/V：二氯甲烷/甲醇＝8/1)纯化，得到标题化合物(7mg)。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.43(1H,brs),7.57-7.64(1H,m),7.13(1H,m),6.94(1H,m),6.71(1H,m),6.62(1H,brs),5.49(1H,brs),4.23(1H,m),3.90(1H,m),3.14-3.82(5H,m),2.44(1H,m),1.96-2.22(6H,m)。m/z＝453[M+1]+。
实施例14 2-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-9-((S)-3-羟基吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8(7H)-酮
参照实施例13，将3-羟基吡咯烷替换为(S)-3-羟基吡咯烷，通过薄层层析分离得到标题化合物，收率3.5％。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.43(1H,brs),7.57-7.64(1H,m),7.13(1H,m),6.94(1H,m),6.71(1H,m),6.62(1H,brs),5.49(1H,brs),4.23(1H,m),3.90(1H,m),3.14-3.82(5H,m),2.44(1H,m),1.96-2.22(6H,m)。m/z＝453[M+1]+。
实施例15(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-9,10-二氢吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8(7H)-酮
氢化釜反应，向(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8(7H)-酮(45mg)的甲醇溶液中加入20％Pd/C(14mg)，加入完毕，氢气置换三次，氢气压力为17Pa,升温至45℃反应72h，冷却至室温，过滤并真空浓缩，经薄层层析分离得到标题化合物(1.6mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.55(s,1H),8.13(s,1H),7.07(m,1H),6.96(m,1H),6.76(m,1H),5.85(brs,1H),5.36(brs,1H),4.02-3.91(m,2H),2.98-2.96(m,2H),2.84-2.60(m,2H),2.51(m,1H),2.24-2.08(m,3H)。m/z＝370[M+1]+。
实施例16 1-(2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8-基)-3-羟基-吡咯烷
步骤A：2,8-二氯吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
三氯氧磷(0.212mLl)加入到8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2(1H)-酮(100mg,实施例7步骤C制备)的1,2-二氯乙烷溶液(8mL)中，回流过夜。冷却至室温，减压浓缩，加水稀释，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩滤液，残余物经硅胶柱层析纯化，分离得到标题化合物(60mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(1H,d,J＝7.6Hz),8.72(1H,d,J＝8.8Hz),7.77(1H,d,J＝7.2Hz),7.36(1H,d,J＝8.8Hz)。m/z＝239[M+1]+。
步骤B：8-氯-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
在封管中加入2,8-二氯吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶(50mg)、2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(34mg)、DIEA(40mg)和正丁醇(3mL)，加热至160℃反应过夜。冷却至室温，减压浓缩，硅胶柱层析分离得标题化合物(54mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.62(1H,brs),8.23(1H,brs),7.05-7.11(1H,m),6.92-6.93(2H,m),6.70-6.75(1H,m),6.33(1H,brs),5.29(1H,brs),3.99(1H,brs),3.83(1H,brs),2.55(1H,m),2.09-2.12(3H,m)。m/z＝386[M+1]+。
步骤C：1-(2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8-基)-3-羟基-吡咯烷
在封管中加入8-氯-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶(37mg)、3-羟基吡咯烷(36mg)、DIEA(41mg)和正丁醇(3mL)，加热至160℃反应过夜。冷却至室温，减压浓缩，硅胶柱层析分离得标题化合物(32mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.35(1H,d,J＝6.8Hz),7.98(1H,d,J＝8.8Hz),7.04-7.09(1H,m),6.89-6.93(1H,m),6.74-6.79(1H,m),6.32(1H,d,J＝8.8Hz),6.07(1H,brs),5.35(1H,brs),4.63(1H,s),3.99(1H,m),3.76-3.80(5H,m),2.45-2.55(1H,m),2.09-2.19(6H,m)。m/z＝437[M+1]+。
实施例17 2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸
步骤A：3-氨基-1H-咪唑-5-羧酸甲酯
室温下，将水合肼(251mg,5.02mmol)加入到3-氰基-4-氟苯甲酸甲酯(300mg)的乙醇(10mL)溶液中，反应液加热回流搅拌3小时。冷却至室温，浓缩除去溶剂得到标题化合物(320mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(1H,brs),8.49(1H,d,J＝0.8Hz),7.77(1H,dd,J＝8.8Hz,1.6Hz),7.25(1H,d,J＝8.8Hz),5.69(2H,brs),3.82(3H,s)。m/z＝192[M+1]+。
步骤B：2-氧代-1,2-二氢嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸乙酯
氮气保护下，将1N乙醇钠的乙醇溶液(40mL)溶液加入到3-氨基-1H-咪唑-5-羧酸甲酯(2.30g)的乙醇(20mL)溶液中，再加入1,3-二甲基脲嘧啶(1.86g)，反应混合物加热到90℃下搅拌20小时。冷却至室温，析出固体，过滤，并将滤饼溶于水，调pH至中性，析出游离态固体，过滤，水洗，干燥，得到标题化合物，直接投入下一步。
步骤C：2-氯嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸乙酯
将2-氧代-1,2-二氢嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸乙酯(1.00g)和N,N-二甲基苯胺(942mg)溶于三氯氧磷(10mL)中，反应液加热回流20分钟，冷却至室温，析出固体，过滤，干燥，得标题化合物(960mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.54(1H,d,J＝7.2Hz),8.76(1H,d,J＝6.0Hz),8.09(1H,dd,J＝8.8Hz,1.6Hz),7.84(1H,d,J＝6.8Hz),7.72(1H,d,J＝7.2Hz),4.34(2H,q,J＝7.2Hz),1.36(3H,t,J＝7.2Hz)。m/z＝276[M+1]+。
步骤D：2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸乙酯
在封管中加入2-氯嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸乙酯(400mg)、2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(266mg)、DIEA(375mg)和正丁醇(10mL)，加热至160℃反应5小时。冷却至室温，加入20mL乙酸乙酯稀释，过滤，滤液盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩滤液。残余物经硅胶柱层析(V/V：石油醚/乙酸乙酯＝1/2)纯化，分离得到标题化合物(378mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.83(1H,brs),8.51(1H,brs),8.06(1H,d,J＝8.8Hz),7.54(1H,d,J＝9.2Hz),7.07-7.12(1H,m),6.93-6.95(1H,m),6.73-6.78(1H,m),6.27(1H,brs),5.35(1H,brs),4.41(2H,q,J＝7.2Hz),4.07(1H,brs),3.90(1H,brs),2.55(1H,brs),2.11-2.16(3H,m),1.44(3H,t,J＝7.2Hz)。m/z＝423[M+1]+。
步骤E：2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸
在2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸乙酯(350mg)的甲醇/水(3mL/3mL)混合溶液中加入5N NaOH溶液适量，80℃下搅拌1小时。调pH至酸性，乙酸乙酯萃取，浓缩得标题化合物(272mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.23(1H,brs),8.86(1H,brs),8.22(1H,brs),7.97(1H,d,J＝8.8Hz),7.27-7.33(2H,m),7.10(1H,brs),6.95-7.00(1H,m),6.81(1H,brs),5.52(1H,brs),4.05(1H,brs),3.65(1H,brs),1.89-2.53(4H,m)。m/z＝395[M+1]+。
实施例18(2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-基)(3-羟基吡咯烷-1-基)甲酮
2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸(100mg)、3-羟基吡咯烷(22mg)、HATU(96mg)和DIEA(98mg)加入到DMF(5mL)中室温搅拌3小时。加入水，析出固体，过滤、干燥，得标题化合物(109mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.61(1H,brs),8.25(1H,brs),7.61(1H,brs),7.50(1H,brs),7.06-7.11(1H,m),6.92(1H,brs),6.73-6.79(1H,m),6.30(1H,brs),5.34(1H,brs),4.46-4.63(1H,m),3.49-4.03(6H,m),2.54(1H,brs),2.01-2.12(6H,m)。m/z＝464[M+1]+。
实施例19(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸乙酯
DIEA(479μL)和(R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(266mg)加入到2-氯嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸乙酯(400mg)的正丁醇溶液中封管中，升温至160℃，反应8h。冷却至室温后，减压浓缩，经硅胶柱层析纯化，分离得到标题化合物(349mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.84(s,1H),8.53(s,1H),8.07(d,J＝9.0Hz,1H),7.54(d,J＝9.0Hz,1H),7.18-7.07(m,1H),6.94(s,1H),6.78-6.73(m,1H),6.30(brs,1H),5.30(brs,1H),4.42(q,J＝7.0Hz,2H),4.07-3.91(m,2H),2.55(m,1H),2.13-2.11(m,3H),1.44(t,J＝7.0Hz,3H)。m/z＝423[M+1]+。
实施例20(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸
冰浴搅拌下，向(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸乙酯(100mg)的甲醇和四氢呋喃溶液中缓慢滴加氢氧化钠溶液(1.44mL,1N)，加入完毕，升至室温，反应过夜。减压蒸馏除去有机溶剂，加入适量水，用1N的盐酸溶液调pH＝4左右，用乙酸乙酯萃取，合并的有机相用饱和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩滤液，残余物经硅胶柱层析纯化，分离得到标题化合物(88mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.48(s,1H),9.00(brs,1H),8.65(s,0.5H)and 8.30(s,0.5H),7.86(d,J＝8.0Hz,1H),7.46(d,J＝8.8Hz,1H),7.30(s,1H),7.02(m,3H),5.59-5.41(m,1H),4.13-4.00(m,1H),3.95-3.68(m,1H),2.54(m,1H),2.16-1.83(m,3H)。m/z＝395[M+1]+。
实施例21(2-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-基)((S)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲酮
参照实施例18，将3-羟基吡咯烷替换为(S)-3-羟基吡咯烷，将2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸替换为(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸，得到标题化合物，收率52％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.52(s,1H),8.26(brs,1H),7.62-7.52(m,2H),7.11-7.06(m,1H),6.92(s,1H),6.77-6.73(m,1H),6.28(brs,1H),5.30(brs,1H),4.59-4.46(m,1H),4.02-3.67(m,6H),2.53(m,1H),2.11-2.01(m,6H)。m/z＝464[M+1]+。
实施例22(2-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-基)(3-氟吡咯烷-1-基)甲酮
步骤A：：N-叔丁氧羰基-3-氟吡咯烷
冰浴搅拌下，向N-叔丁氧羰基-3-羟基吡咯烷(5g)的二氯甲烷溶液中缓慢滴加DAST试剂(4.23mL,32.04mmol)，加入完毕，升温至室温，反应过夜。加入适量水猝灭反应，用二氯甲烷萃取，合并的有机相用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩滤液，残余物经硅胶柱层析纯化，分离得到标题化合物(1.18g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.22(dt,J＝52.8,3.5Hz,1H),3.80-3.33(m,4H),2.33-2.06(m,2H),1.48(s,9H)。
步骤B：3-氟吡咯烷的三氟乙酸盐
冰浴搅拌下，向N-叔丁氧羰基-3-氟吡咯烷(200mg)的二氯甲烷溶液中缓慢滴加1mL三氟乙酸，加入完毕，升至室温，反应过夜。真空浓缩得到标题化合物(196mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.37(s,1H),8.96(s,1H),5.41(d,J＝51.8Hz,1H),3.71-3.61(m,4H),2.54-2.06(m,2H)。
步骤C：(2-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-基)(3-氟吡咯烷-1-基)甲酮
参照实施例21，将(S)-3-羟基吡咯烷替换为3-氟吡咯烷三氟乙酸盐，得到标题化合物，收率84％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.61(s,1H),8.28(s,1H),7.66(s,1H),7.58(d,J＝8.8Hz,1H),7.17-7.05(m,1H),6.94(s,1H),6.78-6.75(m,1H),6.35(brs,1H),5.36-5.31(m,2H),4.15-3.88(m,6H),2.56(s,1H),2.32(m,1H),2.26-1.88(m,4H)。m/z＝466[M+1]+。
实施例23(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-N-甲氧基-N-甲基嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-甲酰胺
冰浴搅拌下，向(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸(75mg)的二氯甲烷溶液中加入1滴DMF，随后缓慢滴加草酰氯(21.2μL)，滴加完毕，在该温度下反应3h后，将该反应混合液加入到二甲羟胺盐酸盐(18.5mg)和三乙胺(38mg)的二氯甲烷溶液中，滴加完毕，室温反应4h，加入适量水猝灭反应，用二氯甲烷萃取，合并的有机相用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩滤液，残余物经硅胶柱层析纯化，分离得到标题化合物(57mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.52(brs,2H),7.80(d,J＝9.0Hz,1H),7.53(d,J＝9.0Hz,1H),7.07(d,J＝4.2Hz,1H),6.91(s,1H),6.83-6.68(m,1H),6.30(brs,1H),5.29(brs,1H),4.13-3.72(m,2H),3.59(s,3H),3.40(s,3H),2.53(m,1H),2.11-2.00(m,3H)。m/z＝438[M+1]+。
实施例24(R)-1-(2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-基)乙-1-酮
在-78℃下，用氮气保护，向(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-N-甲氧基-N-甲基嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-甲酰胺(50mg)的无水四氢呋喃溶液中缓慢滴加甲基溴化镁的四氢呋喃溶液(49μL,3M)，滴加完毕,缓慢升温至室温反应过夜。用冰浴冷却后，加入1N的盐酸猝灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并的有机相用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩滤液，残余物经薄层层析分离得到标题化合物(11mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.67-8.56(m,2H),8.09(d,J＝9.0Hz,1H),7.56(d,J＝9.2Hz,1H),7.14-7.08(m,1H),6.96(s,1H),6.80-6.75(m,1H),6.30(brs,1H),5.36(brs,1H),4.09-3.98(m,2H),2.70(s,3H),2.57(m,1H),2.17-2.06(m,3H)。m/z＝393[M+1]+。
实施例25(R)-2-(2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-基)丙-2-醇
在-78℃下，向(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸乙酯(31mg)的无水四氢呋喃溶液中缓慢滴加甲基溴化镁的四氢呋喃溶液(136μL,3M)，滴加完毕，缓慢升温至室温反应过夜。用冰浴冷却后，加入饱和氯化铵溶液猝灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并的有机相用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩滤液，残余物经薄层层析分离得到标题化合物(0.85mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.71(brs,1H),8.09(brs,1H),7.60-7.57(m,2H),7.10(s,1H),6.94(s,1H),6.78(s,1H),6.31(brs,1H),5.31(brs,1H),4.13-3.09(m,3H),2.55(m,1H),2.16-2.06(m,3H),1.68(s,6H)。m/z＝409[M+1]+。
实施例26(R)-9-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸甲酯
步骤A:5-氟-2-吡啶羧酸甲酯
冰浴搅拌下，向5-氟-2-吡啶羧酸(10g)的甲醇溶液中缓慢滴加氯化亚砜(10.3mL)，滴加完毕。移至80℃回流反应8h后，冷却至室温，经减压蒸馏除去甲醇。加入乙酸乙酯稀释，冰浴搅拌下，向反应混合液中加入饱和碳酸氢钠溶液，调pH＝8左右。用乙酸乙酯萃取，合并的有机相用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩滤液，残余物经硅胶柱层析分离得到标题化合物(9.895g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.58(d,J＝2.8Hz,1H),8.19(dd,J＝8.6,4.4Hz,1H),7.62-7.46(m,1H),4.00(s,3H)。
步骤B：5-氟-2-(甲氧基羰基)吡啶-1-氧化物
冰浴搅拌下，向5-氟-2-吡啶羧酸甲酯(9.89g)的二氯甲烷溶液中缓慢加入间氯过氧苯甲酸(16.5g)，加入完毕，缓慢升温至室温，反应过夜。加入适量水猝灭反应，用二氯甲烷萃取，合并的有机相用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，再用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩滤液，残余物经硅胶柱层析分离得到标题化合物(5.7g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.20-8.18(m,1H),7.70(dd,J＝8.6,4.4Hz,1H),7.14-7.02(m,1H),3.99(s,3H)。
步骤C：6-氰基-5-氟-2-吡啶羧酸甲酯
室温搅拌下，向5-氟-2-(甲氧基羰基)吡啶-1-氧化物(500mg)的二甲氨基甲酰氯溶液中加入三甲基氰基硅烷(307mg)，加入完毕，升温至50℃，反应16h后。将反应混合液倒入冰中，用饱和碳酸氢钠溶液将反应混合液调至弱碱性，再用乙酸乙酯萃取，合并的有机相用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩滤液，残余物经硅胶柱层析分离得到标题化合物(421mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.42(dd,J＝8.8,4.0Hz,1H),7.77(dd,J＝8.6,7.8Hz,1H),4.05(s,3H)。
步骤D：3-氨基-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-羧酸甲酯
向封管反应中，加入6-氰基-5-氟-2-吡啶羧酸甲酯(770mg)、含量为80％的水合联氨(267mg)和10mL乙醇。加入完毕，升温至90℃，反应过夜。将反应混合液经冰浴冷却后，过滤，干燥，得标题化合物(610mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.03(s,1H),7.95(d,J＝8.8Hz,1H),7.80(d,J＝8.8Hz,1H),5.65(s,2H),3.88(s,3H)。m/z＝193[M+1]+。
步骤E：9-氧代-9,10-二氢吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸甲酯
室温搅拌下，向3-氨基-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-羧酸甲酯(300mg)的DMF溶液中加入3-乙氧基丙烯酸乙酯(327μL)，随后加入碳酸铯(763mg)，加入完毕，升温至110℃，反应过夜。冷却至室温后，减压蒸馏浓缩，残余物经硅胶柱层析分离得到标题化合物(202mg)。
m/z＝245[M+1]+。
步骤F：9-氯[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸甲酯
封管反应中，向9-氧代-9,10-二氢吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸甲酯(200mg)的三氯氧磷溶液中加入N,N-二甲基苯胺(199mg)，加入完毕，升温至110℃，反应2h。冷却至室温后，减压蒸馏浓缩，残余物经硅胶柱层析分离得到标题化合物(90mg)。
m/z＝263[M+1]+。
步骤G：(R)-9-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸甲酯
封管反应中，向9-氯[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸甲酯(88mg)的正丁醇溶液中加入DIEA(111μL)和(R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(61mg)，加入完毕，升温至160℃，反应8h。冷却至室温后，减压蒸馏浓缩，残余物经硅胶柱层析分离得到标题化合物(131mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.52(s,1H),8.19(d,J＝9.0Hz,1H),7.98(d,J＝9.0Hz,1H),7.12-7.06(m,1H),6.96-6.92(m,1H),6.71-6.68(m,1H),6.32(brs,1H),5.30(brs,1H),4.22-4.04(m,5H),2.56(m,1H),2.20-1.98(m,3H)。m/z＝410[M+1]+。
实施例27(R)-9-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸
冰浴搅拌下，向(R)-9-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸甲酯(131mg)的甲醇和四氢呋喃溶液中缓慢滴加1N的氢氧化钠溶液(1.92mL)，加入完毕，反应30分钟。减压蒸馏除去有机溶剂，加入适量水，用1N的盐酸溶液调pH＝4左右，用乙酸乙酯萃取，合并的有机相用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩滤液，残余物经硅胶柱层析分离得到标题化合物(107mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.56(s,1H),8.24(d,J＝8.8Hz,1H),8.07(d,J＝9.0Hz,1H),7.15-7.11(m,1H),6.99(s,1H),6.79-6.75(m,1H),6.36(brs,1H),5.32(brs,1H),4.23-4.11(m,2H),2.62(m,1H),2.19-2.12(m,3H)。m/z＝396[M+1]+。
实施例28(9-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)(3-羟基吡咯烷-1-基)甲酮
参照实施例18，将2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸替换为(R)-9-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸(由实施例27制备)，得到标题化合物，收率90％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.51(s,1H),7.96(s,2H),7.08(s,1H),6.93(s,1H),6.79(s,1H),6.34(brs,1H),5.29(brs,1H),4.58(s,1H),4.25-3.89(m,6H),2.56(m,1H),2.18-2.09(m,5H)。m/z＝465[M+1]+。
实施例29(9-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)(3-氟吡咯烷-1-基)甲酮
参照实施例28，将3-羟基吡咯烷替换为3-氟吡咯烷的三氟乙酸盐(由实施例22步骤B制备)，得到标题化合物，收率75％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.52(s,1H),8.14-7.92(m,2H),7.08(s,1H),6.93(s,1H),6.80(s,1H),6.30(brs,1H),5.42(s,1H),5.29(s,1H),3.48-3.81(m,6H),2.58(s,1H),2.34(m,1H),2.24-2.10(m,4H)。m/z＝467[M+1]+。
实施例30(R)-9-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-N-甲基吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酰胺
封管反应中，向2mL的2M甲胺四氢呋喃溶液中加入(R)-9-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸甲酯(20mg)，升温至100℃，反应过夜。冷却至室温后，减压蒸馏浓缩，残余物经薄层层析分离得到标题化合物(12mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.44(s,1H),8.21(d,J＝9.0Hz,1H),8.01(s,1H),7.92(d,J＝9.0Hz,1H),7.07-6.94(m,1H),6.86(s,1H),6.67(s,1H),6.24(brs,1H),5.25(brs,1H),4.11-3.97(m,2H),3.00(d,J＝5.0Hz,3H),2.49(m,1H),2.14-2.05(m,3H)。m/z＝409[M+1]+。
实施例31(9-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)((S)-3-甲基哌嗪-1-基)甲酮
参照实施例28，将3-羟基吡咯烷替换为(S)-2-甲基哌嗪，得到标题化合物，收率62％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.51(s,1H),8.00(d,J＝9.4Hz,1H),7.88(d,J＝9.4Hz,1H),7.13(s,1H),6.94(s,1H),6.74(s,1H),6.28(brs,1H),5.30(brs,1H),4.75(m,2H),4.01-3.25(m,7H),2.55(m,2H),2.13-2.05(m,3H),1.62-1.58(m,3H)。m/z＝478[M+1]+。
实施例32(R)-(9-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)(1,1-二氧硫代吗啉基)甲酮
步骤A:巯基吗啉-4-甲酸叔丁酯
冰浴搅拌下，向硫代吗啉(2g)和三乙胺(3.1mL)的二氯甲烷溶液中缓慢滴加二碳酸二叔丁酯(4.23g)，加入完毕，升温至室温，反应过夜。加入适量水，用二氯甲烷萃取，合并的有机相用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩滤液得到巯基吗啉-4-甲酸叔丁酯(3.9g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.73-3.59(m,4H),2.62-2.47(m,4H),1.45(s,9H)。
步骤B:巯基吗啉-4-羧酸叔丁酯-1,1-二氧化物
冰浴搅拌下，向巯基吗啉-4-甲酸叔丁酯(2g)的二氯甲烷溶液中缓慢加入间氯过氧苯甲酸(4.4g)，加入完毕，缓慢升温至室温，反应过夜。加入适量水猝灭反应，用二氯甲烷萃取，合并的有机相用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，再用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩滤液，残余物经硅胶柱层析分离得到标题化合物(1.92g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.98-3.90(m,4H),3.04-2.95(m,4H),1.49(s,9H).
步骤C:硫代吗啉-1,1-二氧化物的三氟乙酸盐
参照实施例22中的步骤B，将N-叔丁氧羰基-3-氟吡咯烷替换为巯基吗啉-4-羧酸叔丁酯-1,1-二氧化物，得到标题化合物，收率100％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.33(brs,2H),3.61-3.53(m,4H),3.52-3.43(m,4H).
步骤D：(R)-(9-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)(1,1-二氧硫代吗啉基)甲酮
参照实施例28，将3-羟基吡咯烷替换为硫代吗啉-1,1-二氧化物的三氟乙酸盐，收率89％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.55(s,1H),8.00(d,J＝9.0Hz,1H),7.86(d,J＝9.0Hz,1H),7.17(s,1H),6.94(s,1H),6.73(s,1H),6.28(brs,0.5H)and 5.82(brs,0.5H),5.30(brs,1H),4.55-3.89(m,6H),3.52(m,2H),3.22(m,2H),2.56(m,1H),2.19-2.13(m,3H)。m/z＝513[M+1]+。
实施例33(R)-4-((9-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)甲基)硫代吗啉-1,1-二氧化物
封管反应中，向(R)-(9-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)(1,1-二氧硫代吗啉基)甲酮(10mg)的四氢呋喃溶液中加入硼烷四氢呋喃溶液(200μL,1M)，加入完毕，缓慢升温至90℃，反应过夜。加入适量水猝灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并的有机相用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩滤液，残余物经薄层层析分离得到标题化合物(0.84mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.48(s,1H),7.97(d,J＝8.8Hz,1H),7.55(d,J＝10.4Hz,1H),7.13-7.10(m,1H),6.96(s,1H),6.76(s,1H),6.32(brs,1H),5.32(brs,1H),4.27-4.23(m,2H),4.04-4.00(m,2H),3.72(m,2H),3.17-3.13(m,6H),2.58(m,1H),2.31-1.95(m,3H)。m/z＝499[M+1]+。
实施例34(R)-9-溴-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',4':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
步骤A:2-溴-5-氟异烟醛
在-70℃下，向二异丙基胺(24.64g)的THF(100mL)溶液中缓慢滴加正丁基锂(2.4M)的THF溶液(55.5mL)，加料过程中维持反应体系温度不超过-70℃，加料完毕后缓慢升温至-10℃，再次降温至-70℃；向反应体系加入2-溴-5氟吡啶(19.48g)的THF(100mL)溶液，加料过程中维持反应体系温度不超过-70℃并搅拌2h；向反应体系中缓慢滴加DMF(16.3g)，加料过程中维持反应体系温度不超过-70℃并搅拌2h；向反应体系缓慢滴加4M盐酸-二氧六环溶液(111mL)，加料过程中维持反应体系温度不超过-70℃，加料完毕后用乙酸乙酯稀释，用水洗涤，然后用饱和食盐水洗涤，分离有机相；用无水硫酸钠干燥，过滤，并在减压下浓缩滤液，残余物经硅胶柱层析纯化，得到标题化合物(20.28g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.36(s,1H),8.51(s,1H),7.86(d,J＝5.2Hz,1H)。m/z＝204[M+1]+。
步骤B:(E)-2-溴-5-氟异烟醛-肟
在0℃下，向2-溴-5-氟异烟醛(20.2g)的异丙醇(200mL)溶液中加入盐酸羟胺(27.52g)，回流搅拌2h，冷却至室温，减压浓缩除去异丙醇。将反应混合物用乙酸乙酯稀释，将有机相饱和碳酸钠水溶液洗涤，用水洗涤，然后用饱和食盐水洗涤。分离有机相；用无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩滤液，得到产品标题化合物(21.6g)，无需纯化，直接用于下一步。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ12.36(s,1H),8.48(s,1H),8.17(d,J＝4.4Hz,1H),7.81(d,J＝5.2Hz,1H)。m/z＝219[M+1]+。
步骤C:2-溴-5-氟异烟腈
在0℃下，向(E)-2-溴-5-氟异烟醛-肟(10.7g)的二氯甲烷(150mL)溶液中加入三乙胺(34mL)，搅拌10min，向反应体系加入氯化亚砜(14.6g)。温度升至室温并搅拌1h，用水淬灭反应，用二氯甲烷萃取，将有机相饱和碳酸钠水溶液洗涤，用水洗涤，然后用饱和食盐水洗涤。分离有机相；用无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩滤液，残余物经柱层析得到产品2-溴-5-氟异烟腈(8.12g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.51(s,1H),7.74(d,J＝4.4Hz,1H)。m/z＝201[M+1]+。
步骤D:3-氨基-5-溴-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶
参照实施例3中的步骤A，将2-氟-5-溴苯腈替换为2-溴-5-氟异烟腈，得到标题化合物。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.52(s,1H),7.74(s,1H),5.68(brs,2H)。m/z＝213[M+1]+。
步骤E:9-溴吡啶并[3',4':3,4]吡唑[1,5-a]嘧啶-2(1H)-酮
参照实施例3中的步骤B，将5-溴-1H-吲唑-3-胺替换为3-氨基-5-溴-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶；得到标题化合物粗产品，直接用于下一步。
步骤F:9-溴-2-氯吡啶并[3',4':3,4]吡唑[1,5-a]嘧啶
参照实施例3中的步骤C，将9-溴嘧啶并[1,2-b]吲唑-2(1H)-酮替换为9-溴吡啶并[3',4':3,4]吡唑[1,5-a]嘧啶-2(1H)-酮，得到标题化合物。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.22(s,1H),8.96(d,J＝7.2Hz,1H),8.31(s,1H),7.40(d,J＝7.6Hz,1H)。m/z＝283[M+1]+。
步骤H:(R)-9-溴-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',4':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
参照实施例3中的步骤D，将9-溴-2-氯嘧啶并[1,2-b]吲唑替换为9-溴-2-氯吡啶并[3',4':3,4]吡唑[1,5-a]嘧啶，得到标题化合物。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.97(s,1H),8.28(d,J＝5.2Hz,1H),8.15(s,1H),7.07-7.01(m,1H),6.90-6.76(m,2H),6.22(d,J＝5.2Hz,1H),6.01(brs,1H),4.61(t,J＝5.2Hz,1H),4.32-4.26(m,1H),2.65-2.60(m,1H),2.24-2.03(m,3H)。m/z＝430[M+1]+。
实施例35(S)-1-(2-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',4':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-基)-3-羟基-吡咯烷
参照实施例4，将(R)-9-溴-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑替换为(R)-9-溴-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',4':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶，得到标题化合物。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.04(s,1H),8.16(d,J＝5.2Hz,1H),7.02-6.99(m,1H),6.88-6.84(m,3H),6.12(d,J＝5.2Hz,1H),5.90(brs,1H),4.69-6.64(m,2H),4.27-4.25(m,1H),3.73-3.67(m,2H),3.63-3.59(m,2H),2.62-2.59(m,1H),2.26-2.20(m,2H),2.16-2.06(m,3H),1.78(brs,1H)。m/z＝437[M+1]+。
实施例36(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',4':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-羧酸甲酯
一氧化碳气体氛围下，向(R)-9-溴-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',4':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶(0.197g)、三乙胺(0.139g)的甲醇溶液(1.50mL)中加入PdCl2(dppf)(0.017g)。体系加热到70℃搅拌反应12小时。冷却至室温，加入水和乙酸乙酯，搅拌15分钟，经由硅藻土填料过滤，且用乙酸乙酯淋洗硅藻土填料。滤液分层，水相用乙酸乙酯萃取一次，合并乙酸乙酯相，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到黑色残余物。殘余物经硅胶柱层析纯化(V/V：二氯甲烷/甲醇＝25/1洗脱)，得到标题化合物(40mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.20(s,1H),9.01-8.43(m,2H),7.15-6.88(m,3H),6.43-6.20(m,1H),5.45-5.15(m,1H),4.20-3.80(m,5H),2.68-2.45(m,1H),2.24-2.00(m,3H)。m/z＝410[M+1]+。
实施例37(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',4':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-羧酸
室温下向含有(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',4':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-羧酸甲酯(35mg)的甲醇/水溶液(V/V＝1/10，2mL)滴加4N的氢氧化钠溶液(0.25mL)。加完室温反应1小时。反应完毕，用1N的盐酸溶液调节pH＝7左右，收集沉淀物，水洗、干燥得到标题化合物(31mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.01(s,1H),8.48-8.80(m,1H),7.17-7.08(m,1H),7.01-6.84(m,1H),6.76-6.64(m,1H),6.38(s,1H),5.78(s,1H),5.22(s,1H),4.21-3.62(m,2H),2.68-2.41(m,1H),2.24-2.01(m,3H)。m/z＝396[M+1]+。
实施例38(2-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',4':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-基)((S)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲酮
N2保护下向含有(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',4':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-羧酸(21mg)、HATU(21mg)的干燥DMF溶液(1.0mL)中滴加(S)-3-羟基吡咯烷(4.60mg)。加完室温反应12小时。反应完毕，加入水和乙酸乙酯，搅拌15分钟，滤液分层，水相用乙酸乙酯萃取一次，合并乙酸乙酯相，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到淡黄色残余物。残余物经硅胶柱进行色谱纯化(V/V：二氯甲烷/甲醇＝25/1洗脱)，得到标题化合物(8.0mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.14-8.96(m,1H),8.80-8.20(m,2H),7.15-7.01(m,1H),6.99-6.81(m,1H),6.76-6.64(m,1H),6.32(s,1H),5.70-5.20(m,1H),4.55(s,1H),4.20-3.68(m,6H),2.63-2.40(m,1H),2.21-1.96(m,6H)。m/z＝465[M+1]+。
实施例39(R)-2-氯-9-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
步骤A：5-氯-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶
冰浴搅拌下，向2-甲基-3-氨基-6-氯吡啶(10g)的乙酸溶液中缓慢滴加亚硝酸钠的水溶液(4.8g)，加入完毕，缓慢升至室温，反应过夜。冰浴搅拌下，用饱和碳酸钠溶液将反应混合的pH＝8左右，用乙酸乙酯萃取，合并的有机相用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩滤液，残余物经硅胶柱层析纯化，分离得到标题化合物(1.69g)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.55(s,1H),8.26(s,1H),8.10(d,J＝8.8Hz,1H),7.41(d,J＝8.8Hz,1H)。m/z＝154[M+1]+。
步骤B：5-氯-3-硝基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶
冰浴搅拌下，向5-氯-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶(500mg)的浓硫酸(1.7mL)溶液中缓慢滴加3.4mL浓硫酸/浓硝酸(V/V＝1/1)的混合液，加入完毕，升温至115℃，反应3h。冷却至室温，将反应混合液倒入冰中，氨水中和后，用乙酸乙酯萃取，合并的有机相用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩滤液，残余物经硅胶柱层析纯化，分离得到标题化合物(465mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.25(d,J＝8.8Hz,1H),7.44(d,J＝8.8Hz,1H),7.06(brs,1H)。
步骤C：3-氨基-5-氯-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶
冰浴搅拌下，向5-氯-3-硝基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶(465mg)的二氯甲烷/甲醇(V/V＝1/1)的溶液中加入锌粉(1.522g)，随后缓慢加入10mL饱和氯化铵溶液，加入完毕，继续反应30分钟。过滤，滤液用乙酸乙酯萃取，合并的有机相用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩滤液，残余物经硅胶柱层析纯化，分离得到标题化合物(169mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.91(s,1H),7.80(d,J＝8.8Hz,1H),7.29(d,J＝8.8Hz,1H),5.47(s,2H)。m/z＝169[M+1]+。
步骤D：2-氯吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9(10H)-酮
参照实施例26中的步骤E，将3-氨基-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-羧酸甲酯替换为3-氨基-5-氯-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶，得到标题化合物，收率61％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.93(brs,1H),8.74(d,J＝7.8Hz,1H),8.04(d,J＝9.2Hz,1H),7.37(d,J＝9.2Hz,1H),6.45(d,J＝7.8Hz,1H)。m/z＝221[M+1]+。
步骤E：2,9-二氯吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
参照实施例26中的步骤F，将9-氧代-9,10-二氢吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸甲酯替换为2-氯吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9(10H)-酮，得到标题化合物，收率62％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.87(d,J＝7.2Hz,1H),8.14(d,J＝9.0Hz,1H),7.53(d,J＝9.0Hz,1H),7.30(d,J＝7.2Hz,1H)。m/z＝239[M+1]+。
步骤F：(R)-2-氯-9-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
参照实施例26中的步骤G，将9-氯[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸甲酯替换为2,9-二氯吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶，得到标题化合物，收率100％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.43(d,J＝7.2Hz,1H),7.89(d,J＝9.0Hz,1H),7.32(d,J＝9.0Hz,1H),7.10-7.04(m,1H),6.94-6.90(m,1H),6.73-6.69(m,1H),6.27(brs,1H),5.29(brs,1H),4.28-3.73(m,2H),2.54(m,1H),2.21-1.93(m,3H)。m/z＝386[M+1]+。
实施例40(S)-1-(9-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)-3-羟基-吡咯烷
封管反应中，向(R)-2-氯-9-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶(57mg)的正丁醇溶液中加入DIEA(73μL)和(S)-3-羟基吡咯烷(26mg)，加入完毕，升温至200℃，反应10h。冷却至室温后，减压蒸馏浓缩，经硅胶柱层析纯化，分离得到标题化合物(42mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.34(d,J＝7.6Hz,1H),7.81(d,J＝9.4Hz,1H),7.10-7.06(m,1H),6.94-6.90(m,1H),6.85(d,J＝9.4Hz,1H),6.82-6.73(m,1H),6.13(s,1H),5.33(brs,1H),4.64(m,1H),4.14(m,1H),3.98(m,1H),3.89-3.66(m,4H),2.63-1.94(m,7H)。m/z＝437[M+1]+。
实施例41 9-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-2-((R)-3-氟吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
冰浴搅拌下，向(S)-1-(9-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)-3-羟基-吡咯烷(16mg)的二氯甲烷溶液中缓慢滴加DAST试剂(5.1μL)，加入完毕，继续反应4h。加入适量水猝灭反应，用二氯甲烷萃取，合并的有机相用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩滤液，残余物经薄层层析分离得到标题化合物(7mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.39(s,1H),7.85(d,J＝9.4Hz,1H),7.10-7.05(m,1H),6.94-6.90(m,1H),6.86(d,J＝9.4Hz,1H),6.80-6.75(m,1H),6.14(s,1H),5.48-5.30(m,2H),4.24-3.69(m,6H),2.66-1.95(m,6H)。m/z＝439[M+1]+。
实施例42 9-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-2-(3-氟吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
步骤A：9-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)-3-羟基-吡咯烷
参照实施例40，将(S)-3-羟基吡咯烷替换为3-羟基吡咯烷，得到标题化合物，收率100％。
m/z＝437[M+1]+。
步骤B：9-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-2-(3-氟吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
参照实施例41，将(S)-1-(9-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)-3-羟基-吡咯烷替换为9-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)-3-羟基-吡咯烷，得到标题化合物，收率20％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.41(brs,1H),7.89(brs,1H),7.11-7.05(m,1H),6.96-6.92(m,1H),6.87(d,J＝9.4Hz,1H),6.81-6.76(m,1H),6.15(s,1H),5.55-5.24(m,2H),4.25-3.70(m,6H),2.65-2.08(m,6H)。m/z＝439[M+1]+。
实施例43 9-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-2-((S)-3-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
参照实施例40，将(S)-3-羟基吡咯烷替换为(S)-2-甲基哌嗪，得到标题化合物，收率30％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.45(s,1H),7.91(d,J＝9.2Hz,1H),7.14-7.02(m,2H),6.95-6.91(m,1H),6.79(s,1H),6.21(brs,1H),5.30(brs,2H),4.46(d,J＝13.6Hz,1H),4.34(d,J＝13.8Hz,1H),4.14-4.00(m,2H),3.72-3.17(m,7H),2.66-2.32(m,2H),2.10-2.05(m,3H)。m/z＝450[M+1]+。
实施例44(R)-2-(4-环己基哌嗪-1-基)-9-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
参照实施例40，将(S)-3-羟基吡咯烷替换为1-环己基哌嗪，得到标题化合物，收率60％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.36(d,J＝7.6Hz,1H),7.84(d,J＝9.4Hz,1H),7.17-7.03(m,2H),6.95-6.91(m,1H),6.82-6.78(m,1H),6.16(s,1H),5.35(brs,1H),4.18(m,1H),4.02(m,1H),3.80-3.75(m,4H),2.81(m,4H),2.54-2.41(m,4H),2.18-1.59(m,11H)。m/z＝518[M+1]+。
实施例45(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8-胺
步骤A：(R)-8-氯-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
实验操作参考实施例16步骤B的合成，将2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷替换为(R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷，得到标题化合物，收率62％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.55(s,1H),8.24(brs,1H),7.11-7.08(m,1H),6.96-6.94(m,2H),6.75-6.73(m,1H),6.33(brs,1H),5.30(brs,1H),4.02-3.85(m,2H),2.54(m,1H),2.13-2.09(m,3H)。m/z＝386[M+1]+。
步骤B：(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8-胺
封管反应中，向(R)-8-氯-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶(35mg)的正丁醇溶液中加入2mL氨水,加入完毕，升温至160℃，反应8h。冷却至室温后，减压蒸馏浓缩，残余物经薄层层析分离得到标题化合物(28mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.42(s,1H),7.79(brs,1H),7.13-6.97(m,1H),6.89(s,1H),6.72(s,1H),6.31(d,J＝7.6Hz,1H),6.05(brs,3H),5.29(brs,1H),3.92-3.75(m,2H),2.49(m,1H),2.06-2.02(m,3H)。m/z＝367[M+1]+。
实施例46(R)-N-乙酰基-N-(2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8-基)乙酰胺
冰浴搅拌下，向(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8-胺(25mg)的二氯甲烷溶液中加入三乙胺(13.8μL)，随后缓慢滴加乙酰氯(7.3uL)，加入完毕，继续反应4h。加入适量水猝灭反应，用二氯甲烷萃取，合并的有机相用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩滤液，残余物经经薄层分析分离得到标题化合物(9mg)和(R)-N-(2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8-基)乙酰胺(14mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.65(brs,1H),8.44(brs,1H),7.11-7.07(m,1H),7.00-6.85(m,2H),6.77-6.73(m,1H),6.30(brs,1H),5.36(brs,1H),4.05-3.96(m,2H),2.54(m,1H),2.34(s,6H),2.28-2.06(m,3H)。m/z＝451[M+1]+。
实施例47(R)-N-(2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8-基)乙酰胺
冰浴搅拌下，向(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8-胺(25mg)的二氯甲烷溶液中加入三乙胺(13.8μL)，随后缓慢滴加乙酰氯(7.3μL)，加入完毕，继续反应4h。加入适量水猝灭反应，用二氯甲烷萃取，合并的有机相用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩滤液，残余物经经薄层分析分离得到标题化合物(14mg)和(R)-N-乙酰基-N-(2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8-基)乙酰胺(9mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.27(s,1H),8.54(s,1H),8.30(s,1H),8.02(s,1H),7.11-7.05(m,1H),6.94-6.92(m,1H),6.75-6.71(m,1H),6.27(brs,1H),5.32(brs,1H),4.18-3.71(m,2H),2.53(m,1H),2.26(s,3H),2.17-2.04(m,3H)。m/z＝409[M+1]+。
实施例48(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-N,N-二甲基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8-胺
由于氨水中有少量的二甲基氨的存在，因此实施例45步骤B中，薄层层析还分离到了标题化合物(4mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.54(s,1H),8.01(s,1H),7.10-7.05(m,1H),6.95-6.94(m,1H),6.79-6.75(m,1H),6.47(d,J＝9.0Hz,1H),6.11(brs,1H),5.36(brs,1H),4.00-3.84(m,2H),3.23(s,6H),2.52(m,1H),2.15-2.07(m,3H)。m/z＝395[M+1]+。
实施例49(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',4':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-胺
步骤A：2-氯-3-氟异烟腈
冰浴搅拌下，向2-氯-3-氟异烟酰胺(2.25 g)的二氯甲烷溶液中加入三乙胺(8mL)，随后缓慢滴加三氟乙酸酐(3.58 mL)，加入完毕，缓慢升至室温，继续反应10 h。加入适量水猝灭反应，用乙酸乙酯，合并的有机相用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩滤液，残余物经硅胶柱层析纯化，分离得到标题化合物(1.75 g)。
1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ8.43(d,J＝4.8 Hz,1H),7.53(dd,J＝4.8,4.2 Hz,1H)。
步骤B：3-氨基-7-氯-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶
向封管反应中，2-氯-3-氟异烟腈(1.74 g)、含量为80％的水合联氨(1 mL)和10mL乙醇。加入完毕，升温至90℃，反应过夜。将反应混合液经冰浴冷却后，过滤得标题化合物，为黄色固体(1.38 g)。
1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ7.82(d,J＝5.4 Hz,1H),7.69(d,J＝5.4 Hz,1H),5.75(s,2H)。m/z＝169[M+1]+。
步骤C：7-氯[3',4':3,4]吡唑并[1,5-a]吡啶-2(1H)-酮
实验操作参考实施例26步骤E，将3-氨基-1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-5-羧酸甲酯替换为3-氨基-7-氯-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶，得到标题化合物，收率62％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.01(m,1H),8.96(d,J＝7.6Hz,1H),7.87-7.80(m,2H),6.64(d,J＝7.8Hz,1H)。m/z＝221[M+1]+。
步骤D：2,7-二氯吡啶并[3',4':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
实验操作参考实施例26步骤F，将9-氧代-9,10-二氢吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸甲酯替换为7-氯[3',4':3,4]吡唑并[1,5-a]吡啶-2(1H)-酮，得到标题化合物，收率66％。
m/z＝239[M+1]+。
步骤E:(R)-7-氯-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
实验操作参考实施例26步骤G，将9-氯[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸甲酯替换为2,7-二氯吡啶并[3',4':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶，得到标题化合物，收率55％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.65(s,1H),7.92-7.77(m,2H),7.10-7.09(m,1H),6.94(s,1H),6.77-6.73(m,1H),6.48(brs,1H),5.30(brs,1H),4.06-3.86(m,2H),2.56(m,1H),2.17-2.13(m,3H)。m/z＝386[M+1]+。
步骤F：(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',4':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-胺
实验操作参考实施例45步骤B，将(R)-8-氯-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶替换为(R)-7-氯-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶，得到标题化合物，收率51％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.46(s,1H),7.35(s,1H),7.19-6.87(m,3H),6.82-6.68(m,1H),6.36(brs,1H),5.30(brs,1H),4.06-3.86(m,2H),3.11(brs,2H),2.54(m,1H),2.13-2.09(m,3H)。m/z＝367[M+1]+。
实施例50(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3',4':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-7(8H)-酮
由于氨水中含有水，因此实施例49步骤F中，薄层层析还分离到了标题化合物，收率34％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.94(s,1H),8.85(s,1H),7.52-6.49(m,5H),6.31(brs,1H),5.44(brs,1H),4.01-3.70(m,2H),2.53(m,1H),2.18-1.93(m,3H)。m/z＝368[M+1]+。
实施例51(R)-6-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-2-甲基吡唑并[1,5-a:3,4-d']二嘧啶-4(3H)-酮
步骤A：(Z)-3-氨基-4,4,4-三氯-2-氰基-丁烯酸乙酯
0℃向氰基乙酸乙酯(41.22g)、三氯乙腈(100g)乙醇溶液(120mL)中滴加三乙胺(2.0g)。滴加完毕，0℃反应2小时，慢慢升至室温反应30分钟。反应完毕浓缩除去溶剂，残余物用二氯甲烷溶解，经硅胶柱层析纯化且用二氯甲烷洗脱，得到标题化合物(93.0g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.20(brs,1H),6.93(brs,1H),4.30(q,J＝7.2Hz,2H),1.33(t,J＝7.2Hz,3H)。
步骤B：3,5-二氨基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
向(Z)-3-氨基-4,4,4-三氯-2-氰基-丁烯酸乙酯(92.1g)的DMF溶液(250mL)中缓慢滴加水合联氨(50g)，反应混合物加热到100℃搅拌反应1.5小时。浓缩除去溶剂，残余物用二氯甲烷打浆，然后静置过夜。抽滤收集固体，二氯甲烷淋洗、干燥，得到标题化合物(41.0g，67％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.4(brs,1H),5.35(brs,4H),4.13(q,J＝7.2Hz,2H),1.24(t,J＝7.2Hz,3H)。m/z＝171[M+1]+。
步骤C：2-氨基-5-氧代-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯
在室温向含有乙醇钠(33.2g)的乙醇溶液(500mL)中依次加入3,5-二氨基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(20.8g)、1,3-二甲基嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(17.0g)。加完升温至90℃反应12小时。反应完毕，降至室温用1N的盐酸调节体系pH＝7，收集固体、乙醇淋洗，干燥，得到标题化合物(18.4g)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.17(brs,1H),8.24(d,J＝8.0Hz,1H),5.93(s,2H),5.90(d,J＝8.0Hz,1H),4.26(q,J＝7.2Hz,2H),1.27(t,J＝7.2Hz,3H)。m/z＝223[M+1]+。
步骤D：6-氯-2-甲基吡唑并[1,5-a:3,4-d']二嘧啶-4(3H)-酮和2-氨基-5-氯吡唑[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯
室温向2-氨基-5-氧代-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(33.6g)的乙腈(500mL)溶液中加入三氯氧磷(110mL)，加热至40℃反应5小时。冷却，减压浓缩，向残余物中加入饱和碳酸氢钠水溶液和乙酸乙酯，滤液分层，水相用乙酸乙酯萃取一次，合并乙酸乙酯相，用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得到棕色油状物。残余物经硅胶柱层析纯化(V/V：乙酸乙酯/石油醚＝2/1洗脱)，得到6-氯-2-甲基吡唑并[1,5-a:3,4-d']二嘧啶-4(3H)-酮(10.0g)和2-氨基-5-氯吡唑[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(4.5g)。
6-氯-2-甲基吡唑并[1,5-a:3,4-d']二嘧啶-4(3H)-酮：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.08(s,1H),9.39(d,J＝7.2Hz,1H),7.55(d,J＝7.2Hz,1H),2.40(s,3H)。m/z＝236[M+1]+。
2-氨基-5-氯吡唑[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.29(d,J＝7.2Hz,1H),6.80(d,J＝7.2Hz,1H),5.51(brs,2H),4.43(q,J＝7.2Hz,2H),1.44(t,J＝7.2Hz,3H)。m/z＝241[M+1]+。
步骤E：(R)-6-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-2-甲基吡唑并[1,5-a:3,4-d']二嘧啶-4(3H)-酮
向6-氯-2-甲基吡唑并[1,5-a:3,4-d']二嘧啶-4(3H)-酮(121mg)、(R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(94.0mg)的正丁醇溶液(1.5mL)中加入N,N-二甲基异丙基胺(109.0mg)，160℃封管反应5小时。反应冷却至室温，减压抽滤，固体用乙醇淋洗，干燥，得到标题化合物(100mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.61-11.30(m,1H),8.87-8.60(m,1H),7.70-6.95(m,3H),6.20-5.62(m,3H),4.02(s,1H),3.82-3.45(m,1H),2.29(s,3H),2.14-1.83(m,3H)。m/z＝383[M+1]+。
实施例52 6-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a:3,4-d']二嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
步骤A:2-氨基-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯
将2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(365mg)和2-氨基-5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(400mg)加入正丁醇中，160℃封管过夜，硅胶柱层析纯化(V/V：PE/EA＝1/3),得到标题化合物(607mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.90(s,1H),7.10-6.70(m,3H),6.20-5.00(m,4H),4.23-3.40(m,4H),2.60-2.30(m,1H),2.18-1.90(m,3H),1.50-1.33(m,3H)。m/z＝388[M+1]+。
步骤B:2-氨基-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
室温下，向装有2-氨基-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(200mg)的正丁醇(6mL)溶液的铁封管中加入氨水(10mL)，在160℃回流并搅拌36h，减压浓缩，残余物经硅胶柱层析纯化，得到标题化合物(25mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.18-7.83(m,1H),7.15-6.66(m,3H),6.24-5.56(m,2H),5.52-4.70(m,4H),4.06-3.53(m,2H),2.59-2.42(m,1H),2.27-1.92(m,3H)。m/z＝359[M+1]+。
步骤C:6-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a:3,4-d']二嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
室温下，向装有2-氨基-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(20mg)的THF(8mL)溶液中加入三光气(9mg)，待其完全溶解；在100℃回流并搅拌12h，直接加入硅胶拌样，减压浓缩，硅胶柱层析纯化，得到标题化合物(6mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.36(brs,1H),10.50-10.25(m,1H),8.66-8.42(m,1H),7.39-7.00(m,2H),6.96-6.91(m,1H),6.60(brs,0.5H),6.01(brs,0.5H),5.55(brs,0.5H),5.29(t,J＝4.8Hz,0.5H),3.97(brs,1H),3.76(brs,0.5H),3.58(brs,0.5H),2.45-2.28(m,1H),2.09-1.81(m,3H)。m/z＝385[M+1]+。
实施例53 6-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-甲基吡唑并[1,5-a:3,4-d']二嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
步骤A:5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-2-(((4-硝基苯氧基)羰基)氨基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯
0℃下，向装有2-氨基-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(337mg)的THF(15mL)溶液中缓慢分批次加入含量为57％的氢化钠(74mg57％)，温度升温至室温并搅拌1h；反应体系再次降温到0℃，向反应混合物中加入对硝基苯基氯甲酸酯(264mg)，温度升至室温并搅拌2h，加水淬灭，用乙酸乙酯萃取，分离有机相；用无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩滤液，得到标题化合物粗产品，无需纯化，直接用于下一步。
步骤B:5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-2-(3-甲基脲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯
室温下，将上述步骤A所得到的5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-2-(((4-硝基苯氧基)羰基)氨基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯粗产品溶于THF(10mL)中，向反应液中加入甲基胺(4mL)，搅拌10min反应完毕，加入硅胶拌样，减压浓缩，干法硅胶柱层析纯化，得到标题化合物(281mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.91-8.63(m,1H),8.20-8.71(m,2H),7.19-6.80(m,3H),6.26(s,0.5H),5.95-5.62(m,1H),5.15(s,0.5H),4.52-3.44(m,4H),2.94(d,J＝7.2Hz,3H),2.62-2.28(m,1H),2.19-1.95(m,3H),1.57-1.42(m,2H),1.37-1.05(m,1H)。m/z＝445[M+1]+。
步骤C:6-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-3-甲基吡唑并[1,5-a:3,4-d']二嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
室温下，将钠(40mg)加入到甲醇(6mL)中，待钠完全溶解，向反应液加入5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-2-(3-甲基脲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(150mg)，反应体系升温至80℃，回流3h，加入硅胶拌样，减压浓缩，干法硅胶柱层析纯化，得到标题化合物(112mg)
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.64-11.60(m,1H),8.67-8.48(m,1H),7.41-7.02(m,2H),6.97-6.89(m,1H),6.61(brs,0.5H),6.03(brs,0.5H),5.57(brs,0.5H),5.26(brs,0.5H),3.97(brs,1H),3.77(brs,0.5H),3.56(brs,0.5H),3.11(s,3H),2.48-2.76(m,1H),2.05-1.82(m,3H)。m/z＝399[M+1]+。
实施例54 2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-10-羟基-8-氧代-7,8-二氢吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-羧酸乙酯
将2-氨基-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(300mg)，乙醇钠(2.4mL,3.10mmol)和丙二酸二乙酯(1.0mL)溶于乙醇中，90℃封管，反应三天，加入1N盐酸适量，使pH<4,乙酸乙酯萃取，硅胶柱层析(V/V：DCM/MeOH＝15/1)纯化,得标题化合物(261mg)。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.22(s,1H),7.20-6.79(m,3H),6.20-5.90(brs,1H),5.50-5.18(brs,1H),4.24(q,J＝7.2Hz,2H),4.19-3.80(m,2H),2.60-2.40(m,1H),2.13-1.90(m,3H),1.33(t,J＝7.2Hz,3H)。m/z＝456[M+1]+。
实施例55(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-10-羟基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8(7H)-酮
将2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-10-羟基-8-氧代-7,8-二氢吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-羧酸乙酯(50mg)溶于1N氢氧化钠中，100℃，反应5小时，监测反应完毕，加1N盐酸适量，使溶液pH<4，萃取(V/V：氯仿/异丙醇＝3/1，×3)，硅胶柱层析纯化，得标题化合物(13mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.06(s,1H),11.00-10.60(m,1H),8.80-8.42(m,1H),7.42-6.98(m,3H),6.20-5.80(m,1H),5.40-5.15(m,2H),4.20-3.70(m,2H),2.70-2.40(m,1H),2.20-1.83(m,3H)。m/z＝384[M+1]+。
实施例56 8,10-二氯-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-羧酸乙酯
将2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-10-羟基-8-氧代-7,8-二氢吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-羧酸乙酯(88mg)溶于乙腈中，加入苄基三乙基氯化铵(176mg)和三氯氧磷(79μL)，回流2.5h，冷却至室温，加入水，二氯甲烷萃取，饱和氯化钠洗涤，硫酸钠干燥，过滤，薄层层析(EA)，得到标题化合物(36mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.75-8.20(m,1H),7.20-6.79(m,2H),6.80-6.60and 6.20(m,2H),5.61and 5.18(m,1H),4.50-4.40(m,2H),4.19-3.80(m,2H),2.68-2.45(m,1H),2.30-2.00(m,3H),1.48-1.20(m,3H)。m/z＝492[M+1]+。
实施例57 10-氯-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-8-氧代-7,8-二氢吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-羧酸乙酯
实施例56薄层层析还分离得到标题化合物(11mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.45(s,1H),8.58-8.20(m,1H),7.20-6.81(m,2H),6.70(s,1H),6.39and 5.96(m,1H),5.60and 5.17(m,1H),4.50-4.40(m,2H),4.19-3.80(m,2H),2.68-2.42(m,1H),2.30-2.00(m,3H),1.48-1.20(m,3H)。m/z＝474[M+1]+。
实施例58 2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-羧酸乙酯
将8,10-二氯-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-羧酸乙酯(26mg)溶于四氢呋喃/水的混合溶液中(V/V：THF/H2O＝1/1),0℃下，加入锌粉(34mg)和醋酸(64mg)，升温至室温，搅拌2h，监测反应完毕，过滤加水，乙酸乙酯萃取，薄层层析(V/V：EA/DCM＝1/4),得到标题化合物(20mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.36(s,1H),9.10(s,1H),8.60(s,1H),7.15-7.02(m,1H),7.00-6.90(m,1H),6.79-6.70(m,1H),6.40-5.50(m,1H),5.40-5.10(m,1H),4.43(q,J＝6.8Hz,2H),4.19-3.60(m,2H),2.65-2.45(m,1H),2.21-2.00(m,3H),1.44(t,J＝6.8,3H)。m/z＝424[M+1]+。
实施例59(2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-基)(3-羟基吡咯烷-1-基)甲酮
将2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-羧酸乙酯(15mg),溶于甲醇中，0℃下，加入氢氧化锂(15mg)/水的悬浊液,室温搅拌过夜，监测反应完毕，加入1N盐酸适量使溶液pH<3，乙酸乙酯萃取(×2)，饱和食盐水洗，硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩滤液，得到2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-羧酸，无需进一步纯化，直接投入下一步反应。
将上一步制得的2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-羧酸(20mg)和3-羟基吡咯烷(10mg)溶于DMF中，加入HATU(20mg)和DIEA(7mg)，搅拌1h，监测反应完毕，加水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩滤液，残余物经薄层层析(V/V：MeOH/DCM＝1/20)分离得到标题化合物(10mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.00(s,1H),8.78-8.50(m,2H),7.17-7.02(m,1H),7.00-6.90(m,1H),6.79-6.70(m,1H),6.40-5.50(m,1H),5.40-5.10(m,1H),4.70-4.43(m,1H),4.19-3.50(m,6H),2.65-2.45(m,1H),2.21-2.00(m,5H)。m/z＝465[M+1]+。
实施例60(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-8-氧代-7,8-二氢吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-羧酸乙酯
参照实施例52步骤A，将2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷替换为(R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷，制备得到(R)-2-氨基-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯。然后依次参照实施例54和实施例56，薄层层析分离得到(R)-10-氯-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-8-氧代-7,8-二氢吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-羧酸乙酯。
参照实施例58，将8,10-二氯-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-羧酸乙酯替换为(R)-10-氯-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-8-氧代-7,8-二氢吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-羧酸乙酯，分离得到标题化合物(14mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.05(s,1H),8.90-8.40(m,2H),7.15-7.02(m,1H),7.00-6.90(m,1H),6.76-6.72(m,1H),6.47and 5.96(m,1H),5.67and 5.35(m,1H),4.40(q,J＝6.8Hz,2H),4.19-3.60(m,2H),2.65-2.45(m,1H),2.21-2.00(m,3H),1.44(t,J＝6.8,3H)。m/z＝440[M+1]+。
实施例61(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-N-甲基-8-氧代-7,8-二氢吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-甲酰胺
将(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-8-氧代-7,8-二氢吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-羧酸乙酯(12mg),溶于甲胺的醇溶液中，100℃封管过夜，除去溶剂，薄层层析(EA)，得到标题化合物(8mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.30and 10.5(s,1H),9.43(s,1H),9.04and 8.78(s,1H),8.60-8.25(m,1H),7.15-7.02(m,1H),7.00-6.85(m,1H),6.80-6.72(m,1H),6.42and5.96(m,1H),5.67and 5.35(m,1H),4.15-3.45(m,2H),3.00(s,3H),2.78-2.60(m,1H),2.21-2.00(m,3H)。m/z＝425[M+1]+。
实施例62(R)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-1H-吡咯并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸乙酯
步骤A：(R)-2-氨基-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯
向2-氨基-5-氯吡唑[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(300mg)、(R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷(275mg)的正丁醇溶液(2.5mL)中加入N,N-二甲基异丙基胺(324.0mg)，160℃封管反应5小时。反应冷却至室温，减压抽滤，乙醇淋洗滤饼，干燥，得到目标化合物(365mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.52-8.16(m,1H),7.41-6.82(m,3H),6.44-6.28(m,1H),5.96(s,2H),5.63-5.20(m,1H),4.24-3.86(m,3H),3.62-3.40(m,1H),2.48-2.28(m,1H),2.08-1.78(m,3H),1.38-1.01(m,3H)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.20-7.81(m,1H),7.12-6.65(m,3H),6.24-5.50(m,1H),5.45-4.98(m,3H),4.48-3.46(m,4H),2.63-2.26(m,1H),2.19-1.92(m,3H),1.53-1.05(m,3H)。m/z＝388[M+1]+。
步骤B:(R)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-胺
室温下，向装有(R)-2-氨基-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(2.0g)固体的圆底烧瓶中加入48％的硫酸(24mL)，在100℃回流并搅拌12h，反应完毕后，将反应液倒入冰水中，用氢氧化钠水溶液调制成弱碱性，用乙酸乙酯萃取，分离有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩滤液，硅胶柱层析得到标题化合物(1.354g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.89(d,J＝7.6Hz,1H),7.06-7.00(m,1H),6.93-6.87(m,1H),6.75-6.71(m,1H),5.68(brs,1H),5.46(brs,1H),5.24(brs,1H),4.22-3.63(m,4H),3.50-2.41(m,1H),2.05-1.92(m,3H)。m/z＝316[M+1]+。
步骤C:(R)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-1H-吡咯并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸乙酯
室温下，将(R)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-胺(500mg)溶于甲醇(15mL)溶液中；-10℃下，向反应液中加入含量为80％的3-溴丙酮酸乙酯(427mg)，缓慢升温至室温并搅拌1h，直接加入硅胶拌样，减压浓缩，干法硅胶柱层析纯化，分离得到标题化合物(34mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.75(brs,1H),8.35(d,J＝8.4Hz,1H),7.19(brs,1H),7.11-7.03(m,1H),6.95-6.88(m,1H),6.78-6.70(m,1H),6.01(brs,1H),5.35(brs,1H),4.38-4.28(m,2H),4.06-3.67(m,2H),2.59-2.42(m,1H),2.10-1.97(m,3H),1.36(dd,J＝14.4Hz,J＝7.2Hz,3H)。m/z＝412[M+1]+。
实施例63(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-1H-吡咯并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)((S)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲酮
步骤A:(R)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-1H-吡咯并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸
室温下，向装有(R)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-1H-吡咯并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸乙酯(60mg)固体的圆底烧瓶中加入甲醇/水(V/V＝3/1，8mL)，冷却至0℃，加入氢氧化钠(30mg)；室温搅拌8h，反应完毕后，减压浓缩除去甲醇，稀盐酸调成酸性，用乙酸乙酯萃取，分离有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩滤液，得到标题化合物粗产品，无需纯化，直接用于下一步。
步骤B:(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-1H-吡咯并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)((S)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲酮
室温下，将(R)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-1H-吡咯并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸(70mg)，(S)-3-羟基吡咯烷(18mg)和DIEA(71mg)溶解于DMF(5mL)中；0℃下，向反应混合物中加入HATU(70mg)；反应液温度升温至室温并搅拌16h，加水淬灭，用乙酸乙酯萃取，有机相用水洗涤，然后用饱和食盐水洗涤，分离有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩滤液，残余物经硅胶柱层析纯化，得到标题化合物(8mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.21-8.97(m,1H),8.32(brs,1H),7.20-6.59(m,3H),6.23-5.87(m,1H),5.44-5.06(m,1H),4.55(brs,1H),4.08-3.17(m,5H),2.62-2.38(m,1H),2.23-1.96(m,3H),1.93-1.50(m,4H)。m/z＝453[M+1]+。
实施例64(9-((2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)((S)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲酮
步骤A：9-((2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸乙酯
参照实施例26步骤A-F，将步骤A中的甲醇替换为乙醇得到5-氟-2-吡啶羧酸乙酯，随后经B-F中相同操作，经5步反应得到9-氯吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸乙酯。
封管反应中，向9-氯吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸乙酯(100mg)的正丁醇溶液中加入DIEA(119μL)和(2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷(73mg)，加入完毕，升温至160℃，反应4h。冷却至室温后，减压蒸馏浓缩，残余物经硅胶柱层析纯化，分离得到标题化合物(136mg)。
m/z＝442[M+1]+。
步骤B：9-((2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸
冰浴搅拌下，向9-((2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸乙酯(136mg)的甲醇/四氢呋喃溶液中缓慢滴加1M氢氧化钠溶液(1.8mL)，加入完毕，反应30分钟。减压蒸馏除去有机溶剂，加入适量水，用1M的盐酸溶液调pH＝4左右，用乙酸乙酯萃取，合并的有机相用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，硅胶柱层析纯化，分离得到标题化合物(100mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.56(s,1H),8.22(d,J＝9.0Hz,1H),8.05(d,J＝9.0Hz,1H),7.03(m,3H),6.37(brs,1H),5.67-5.20(m,2H),4.79(brs,1H),4.15(dd,J＝34.9,13.4Hz,1H),3.06(m,1H),2.37-2.27(m,1H)。m/z＝414[M+1]+。
步骤C：(9-((2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)((S)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲酮
冰浴搅拌下，向9-((2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羧酸(50mg)的DMF溶液中加(S)-3-羟基吡咯烷(13mg)和DIEA(60μL)，最后缓慢加入HATU(46mg)，加入完毕，室温反应过夜。加入适量水，用乙酸乙酯萃取，合并的有机相用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩滤液，残余物经硅胶柱层析纯化，分离得到标题化合物(28mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.55(d,J＝6.6Hz,1H),8.08-7.93(m,2H),7.09-8.96(m,3H),6.39(brs,1H),5.54-5.41(m,2H),4.62(m,1H),4.20-4.07(m,3H),3.93-3.86(m,2H),3.03(m,1H),2.42-2.01(m,4H)。m/z＝483[M+1]+。
实施例65(S)-1-(9-((2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)-3-羟基-吡咯烷
步骤A：2-氯-9-((2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
封管反应中，向2,9-二氯吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶(100mg)的正丁醇溶液中加入DIEA(138μL)和(2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷(84mg)，加入完毕，升温至160℃，反应5h。冷却至室温后，减压蒸馏浓缩，经硅胶柱层析纯化，分离得到标题化合物(68mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.46(d,J＝7.8Hz,1H),7.93(d,J＝9.0Hz,1H),7.35(d,J＝9.0Hz,1H),7.13-7.10(m,1H),7.00-6.89(m,2H),6.30(d,J＝7.8Hz,1H),5.60-5.32(m,2H),4.81(m,1H),4.22-4.00(m,1H),3.05(m,1H),2.29-2.19(m,1H)。m/z＝404[M+1]+。
步骤B：(S)-1-(9-((2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)-3-羟基-吡咯烷
室温搅拌下，向2-氯-9-((2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡啶并[3',2':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶(65mg)的DMSO溶液中加(S)-3-羟基吡咯烷(28mg)和KF.2H2O(76mg)，加入完毕，升温至100℃反应3h。加入适量水，用乙酸乙酯萃取，合并的有机相用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩滤液，残余物经薄层层析纯化，分离得到标题化合物(5mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.36(d,J＝7.8Hz,1H),7.81(d,J＝9.4Hz,1H),7.09-7.00(m,1H),6.96-6.90(m,2H),6.86(d,J＝9.4Hz,1H),6.12(d,J＝7.8Hz,1H),5.56-5.32(m,2H),4.86-4.59(m,2H),4.25-3.98(m,1H),3.83-3.71(m,4H),3.05-3.02(m,2H),2.21-2.12(m,3H)。m/z＝455[M+1]+。
实施例66 2-((4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-羟基吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸乙酯
参照实施例19，将(R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷替换为(3R)-5-(2,5-二氟苯基)-3-羟基吡咯烷(化合物I6)，得到标题化合物(61％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.80(s,0.5H),8.69(s,0.5H),8.51(d,J＝7.4Hz,0.5H),8.38(d,J＝7.4Hz,0.5H),8.06(d,J＝9.0Hz,1H),7.54(t,J＝8.4Hz,1H),7.13-6.79(m,3H),6.20-6.13(m,1H),5.34(m,1H),4.74(m,1H),4.42(q,J＝7.0Hz,2H),4.18-3.97(m,2H),3.04(brs,0.5H),2.85-2.68(m,1H),2.34-2.17(m,1H),1.95(brs,0.5H),1.43(t,J＝7.0Hz,3H)。m/z＝439[M+1]+。
实施例67 2-(2-(2,5-二氟苯基)-4-氧代吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸乙酯
参照实施例19，将(R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷替换为2-(2,5-二氟苯基)-吡咯烷-3-酮(化合物I7)，得到标题化合物(2％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.85(s,1H),8.70(s,1H),8.10(d,J＝9.2Hz,1H),7.60(d,J＝9.2Hz,1H),7.10-6.98(m,3H),6.49(d,J＝7.6Hz,1H),5.88(d,J＝9.8Hz,1H),4.44-4.26(m,4H),3.50-3.35(m,1H),2.94-2.74(m,1H)1.44(t,J＝7.2Hz,3H)。m/z＝437[M+1]+。
实施例68 2-(2-(2,5-二氟苯基)-4,4-二氟吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸乙酯
参照实施例19，将(R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷替换为2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷(化合物I5)，得到标题化合物(8％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.85(s,1H),8.65(d,J＝7.0Hz,1H),8.10(dd,J＝9.0,1.6Hz,1H),7.60(d,J＝9.0Hz,1H),7.22-6.86(m,3H),6.33(d,J＝7.6Hz,1H),5.58(m,1H),4.51-4.30(m,4H),3.20-3.03(m,1H),2.67-2.58(m,1H),1.46(t,J＝7.2Hz,3H)。m/z＝459[M+1]+。
实施例69 2-((4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-羟基吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸乙酯
步骤A：2-((4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(4-硝基苯甲酰氧基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸乙酯
冰浴搅拌下，向2-((4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-羟基吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸乙酯(250mg，实施例66制备)、对硝基苯甲酸(197mg)和偶氮二甲酸二异丙酯(232uL)的二氯甲烷溶液中缓慢加入三苯基膦(387mg)。然后将反应混合物升至室温反应过夜。减压蒸馏浓缩，残余物通过硅胶柱层析分离，得到标题化合物(163mg)。
m/z＝588[M+1]+。
步骤B:2-((4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-羟基吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸乙酯
冰浴搅拌下，向2-((4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(4-硝基苯甲酰氧基)吡咯烷-1-基)嘧啶并[1,2-b]吲唑-9-羧酸乙酯(160mg)甲醇溶液中缓慢滴加氢氧化钠溶液(1N,2mL)。然后将反应混合物升至室温反应1.5小时。减压蒸馏除去甲醇溶液，二氯甲烷萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏浓缩，经硅胶柱层析分离得到标题化合物(30mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.86(s,1H),8.60(s,1H),8.09(d,J＝9.0Hz,1H),7.58(d,J＝9.0Hz,1H),7.18-6.82(m,3H),6.34(s,1H),5.44(m,1H),4.80(m,1H),4.42(q,J＝7.0Hz,2H),4.14(m,2H),2.83-2.81(m,1H),2.32-2.28(m,1H)1.44(t,J＝7.0Hz,3H)。m/z＝439[M+1]+。
实施例70 2-((2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8(7H)-酮
步骤A:2-((2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)-8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
将(2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷(240mg)和2-氯-8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶(280mg，由实施例7步骤D制备)和DIEA(154mg)溶于叔丁醇中(5ml)，120℃封管反应过夜。除去溶剂，硅胶柱层析分离(PE/EA＝1/1)，得到标题化合物(277mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.4(1H,d,J＝7.6Hz),8.09(1H,brs),7.04-7.10(1H,m),6.92-6.99(2H,m),6.51(1H,d,J＝8.8Hz),6.20(1H,d,J＝5.6Hz),5.38-5.51(2H,m),4.60-4.80(1H,m),4.07(3H,s),3.99-4.10(1H,m),2.96-3.02(1H,m),2.21-2.34(1H,m)。m/z＝400[M+1]+。
步骤B:2-((2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8(7H)-酮
将2-((2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)-8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶(53mg)溶于1,4-二氧六环(1ml)，加入浓盐酸(0.25ml)，80℃反应5h，除去溶剂，薄层层析(DCM/MeOH＝20/1)，得到标题化合物(41mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.87(1H,s),8.41(1H,d,J＝8.0),7.78(1H,s),7.06-7.08(1H,m),6.91-6.95(2H,m),6.19(1H,d,J＝9.2Hz),6.02(1H,s),5.30-5.50(2H,m),4.42(1H,s),3.96-4.07(1H,m),2.90-3.10(1H,m),2.38-2.10(1H,m)。m/z＝386[M+1]+。
实施例71 2-((2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)-9-((S)-3-羟基吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8(7H)-酮
步骤A:9-溴-2-((2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)-8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶
实验操作参考实施例9中的步骤A，将(R)-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶替换为2-((2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)-8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶(220mg)，得标题化合物(180mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.43(d,J＝7.6Hz,1H),8.36(s,1H),7.11-7.06(m,1H),7.99-6.90(m,2H),6.23(s,1H),5.56-5.34(m,2H),4.58-4.33(m,1H),4.12(s,3H),4.11-3.97(m,1H),3.03-2.98(m,1H),2.31-2.04(m,1H)。m/z＝478[M+1]+。
步骤B:(S)-1-(2-((2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)-8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-基)-3-羟基-吡咯烷
实验操作参考实施例9中的步骤B，将(R)-9-溴-2-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶替换为9-溴-2-((2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)-8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶(100mg)，3-羟基吡咯烷替换为(S)-3-羟基吡咯烷(22mg)，得标题化合物(16mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.39(d,J＝7.4Hz,1H),7.36(s,1H),7.20-6.84(m,3H),6.11(d,J＝7.4Hz,1H),5.57-5.30(m,2H),4.59-4.55(m,2H),4.20-3.91(m,4H),3.62-3.49(m,2H),3.32-3.30(m,1H),3.17-3.14(m,1H),3.01-2.97(m,1H),2.29-2.19(m,2H),2.04-2.00(m,2H)。m/z＝485[M+1]+。
步骤C:2-((2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)-9-((S)-3-羟基吡咯烷-1-基)吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-8(7H)-酮
在封管中加入(S)-1-(2-((2R,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氟吡咯烷-1-基)-8-甲氧基吡啶并[2',3':3,4]吡唑并[1,5-a]嘧啶-9-基)-3-羟基-吡咯烷(16mg)和46％氢溴酸溶液(2mL)，加热至80℃反应2小时。冷却至室温，二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥，经减压蒸馏浓缩，硅胶板薄层层析(二氯甲烷/甲醇＝12:1)纯化得到标题化合物(8mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.90(s,1H),8.34(d,J＝6.8Hz,1H),7.13-6.76(m,4H),5.94(s,1H),5.53-5.24(m,2H),4.52(m,2H),4.07-3.95(m,1H),3.74-3.55(m,2H),3.52-3.38(m,1H),3.18-3.16(m,1H),3.00-2.98(m,1H),2.33-2.11(m,2H),2.04-2.02(m,1H)。m/z＝471[M+1]+。生物活性实验
1.NTRK激酶抑制活性(IC50)检测
采取匀相时间分辨荧光(HTRF)方法建立了TrkA、TrkB、TrkC的激酶活性检测平台，进行化合物活性的测定。将化合物从1mM开始用100％DMSO进行3倍的梯度稀释(共11个浓度)，每个浓度取4μL加入到96μL的反应缓冲液中(50mM HEPES，pH7.4，5mM MgCl2，1mMNaVO3，0.001％Tween-20，0.01％BSA和1mM DTT)混匀，作为4*化合物待用。使用反应缓冲液配制2*TrkA、TrkB、TrkC激酶(购买于Carna Biosciences 08-186,08-187,08-197,终浓度分别为0.5nM,、0.1nM、1nM)和4*底物混合物(ATP+TK peptide)(其中，ATP终浓度分别为40μM、50μM、20μM；TK peptide,
KinEASETM-TK,购买于Cisbio，终浓度100nM)待用。取2.5μL的4*化合物加入到384孔板(OptiPlate-384,购买于PerkinElmer)，然后加入5μL的2*TrkA、TrkB、TrkC激酶，离心混匀，再加入2.5μL的4*底物混合物，启动反应(总反应体积为10μL)。将384孔板放于孵育箱中23℃反应60分钟，然后加入5μL的Eu3+cryptate-labledanti-phosphotyrosine antibody(
KinEASETM-TK,购买于Cisbio)，5μL的Streptavidin-XL-665(
KinEASETM-TK,购买于Cisbio)停止反应。在孵育箱中孵育1小时后，在Envision(购买于PerkinElmer)上读取荧光值(320nm激发，检测665nm与620nm的发射光，二者比值为酶活性)。每个化合物分别在11个浓度下测定酶的活性，数据使用GraFit6.0软件(Erithacus Software)计算得到该化合物的IC50值。
2.JAK2激酶抑制活性(IC50)检测
采取匀相时间分辨荧光(HTRF)方法建立了JAK2的激酶活性检测平台，进行化合物活性的测定。将化合物从1mM开始用100％DMSO进行3倍的梯度稀释(共11个浓度)，每个浓度取4μL加入到96μL的反应缓冲液中(50mM HEPES，pH7.4，10mM MgCl2，1mM EDTA，0.01％Tween-20，0.005％BSA，2mM DTT)混匀，然后取2.5μL加入到384孔板(OptiPlate-384,购买于PerkinElmer)，然后加入5μL的JAK2激酶(购买于Carna，终浓度为0.05nM)，离心混匀，再加入2.5μL的ATP(终浓度为5μM)与TK peptide(
KinEASETM-TK,购买于Cisbio，终浓度100nM)混合物，启动反应(总反应体积为10μL)。将384孔板放于孵育箱中23℃反应120分钟，然后加入5μL的Eu3+cryptate-labled anti-phosphotyrosine antibody(购买于Cisbio)，5μL的Streptavidin-XL-665(
KinEASETM-TK,购买于Cisbio)停止反应。在孵育箱中孵育1小时后，在Envision(购买于PerkinElmer)上读取荧光值(320nm激发，检测665nm与620nm的发射光，二者比值为酶活性)。每个化合物分别在11个浓度下测定酶的活性，使用GraFit6.0软件(Erithacus Software)计算数据，得到该化合物的IC50值。
3.TrkAG667C激酶抑制活性(IC50)检测
TrkAG667C(Kinase domain)激酶使用pIEX-Bac-4(购买于Merck)在Sf9(购买于Invitrogen)细胞中进行表达，在AKTA Purifier(GE公司)上使用Ni柱亲和层析法进行纯化。采取匀相、时间分辨荧光(HTRF)方法建立了TrkAG667C的激酶活性检测平台，进行化合物活性的测定。将化合物从1mM开始用100％DMSO进行5倍的梯度稀释(共8个浓度)，每个浓度取4μL加入到96μL的反应缓冲液中(50mM HEPES,pH7.4，5mM MgCl2，1mM NaVO3，0.001％Tween-20，0.01％BSA，1mM DTT)混匀，作为4*化合物待用。使用反应缓冲液配制2*TrkAG667C激酶(终浓度为0.5nM)和4*底物混合物(ATP+TK peptide)(其中，ATP终浓度为15μM，TKpeptide，
KinEASETM-TK,购买于Cisbio，终浓度为100nM)待用。取2.5μL的4*化合物加入到384孔板(OptiPlate-384,购买于PerkinElmer)，然后加入5μL的2*TrkAG667C激酶，离心混匀，再加入2.5μL的4*底物混合物，启动反应(总反应体积为10μL)。将384孔板放于孵育箱中23℃反应60分钟，然后加入5μL的Eu3+cryptate-labled anti-phosphotyrosineantibody(
KinEASETM-TK,购买于Cisbio)，5μL的Streptavidin-XL-665(
KinEASETM-TK,购买于Cisbio)停止反应。在孵育箱中孵育1小时后，在Envision(购买于PerkinElmer)上读取荧光值(320nm激发，检测665nm与620nm的发射光，二者比值为酶活性)。每个化合物分别在8个浓度下测定酶的活性，数据使用GraFit6.0软件(ErithacusSoftware)计算得到该化合物的IC50值。
前述活性实验中，如无特殊指定，以下术语具有如下所示的含义：
“*”是指乘，表示倍数。
“3倍的梯度稀释”是指往1体积的原液1中加入2体积的稀释溶液，得到原液2；再取1体积的原液2，加入2体积的稀释溶液，得到原液3；以此类推，得到不同浓度的溶液。
“5倍的梯度稀释”是指往1体积的原液1中加入4体积的稀释溶液，得到原液2；再取1体积的原液2，加入4体积的稀释溶液，得到原液3；以此类推，得到不同浓度的溶液。
“终浓度”是指启动反应时整个反应体系中的浓度，是基于反应总体积的浓度。
“％”是指质量浓度分数。
“Tween-20”是指吐温20。
“BSA”是指牛血清白蛋白。
“DTT”是指二硫苏糖醇。
“EDTA”是指乙二胺四乙酸。
根据本文所述的生物学方法对上述制备的所选化合物进行分析，其结果如下：
表1化合物对TrkA激酶的抑制活性(IC50)
表2化合物对TrkA/TrkB/TrkC/JAK2激酶的抑制活性(IC50)
结果表明：相对于JAK2，实施例化合物对TrkA、TrkB和/或TrkC具有更高的选择性。
表3化合物对突变的TrkA激酶的抑制活性(IC50)
| 实施例编号 | TrkA<sup>G667C</sup> IC<sub>50</sub>(nM) |
| 13 | <1 |
| 64 | <15 |
实施例化合物对突变的TrkA也表现出了优异的活性。
Claims (36)
1.式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐，
其中，
X选自CR1 m、N或NH；
W存在或不存在，W存在时选自CR2 m、N或NH，W不存在时，X与Y通过化学单键或双键相连接；
Y选自CR3 m或NR3 n；
Z选自CR4 m、N或NH；
m＝1或2；
n＝0或1；
R1选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、卤素或硝基；
R2选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、卤素、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、(C1-6烷酰基)氨基、二(C1-6烷酰基)氨基、(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、3-6元环烷基或3-6元杂环烷基，所述3-6元环烷基或3-6元杂环烷基任选地被一个或多个氨基、＝O、羟基、氰基、卤素、硝基、C1-6烷基或C1-6烷氧基取代；
R3选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、卤素、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、-COR5、-CONR5R6、-CH2NR5R6、(C1-6烷酰基)氨基、二(C1-6烷酰基)氨基、(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、3-6元环烷基或3-6元杂环烷基，所述C1-6烷基、3-6元环烷基或3-6元杂环烷基任选地被一个或多个＝O、羟基、氰基、卤素、硝基、C1-4烷基、C1-4烷氧基或3-6元环烷基取代；
R4选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、卤素或硝基；
R5、R6独立地选自氢、羟基、C1-6烷基或C1-6烷氧基；
或
R5、R6和与其相连接的N原子共同构成5-6元杂环烷基，所述5-6元杂环烷基任选地被一个或多个氨基、羟基、＝O、氰基、卤素或C1-6烷基取代；
R7、R8、R9、R10独立地选自氢、卤素、硝基、羟基、氨基或氰基，
或
R8和R9共同构成＝O；
R11选自6元芳杂环基或苯基；其中6元芳杂环基或苯基任选地被一个或多个卤素、硝基、羟基、氰基、C1-6烷基或C1-6烷氧基取代。
2.权利要求1的化合物，其特征在于：R1选自氢、氨基、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘或硝基。
3.权利要求2的化合物，其特征在于：R1选自氢、氨基或羟基。
4.权利要求3的化合物，其特征在于：R1选自氢或氨基。
5.权利要求1的化合物，其特征在于：R2选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘、硝基、甲基、乙基、正丙基、正丁基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、正丁氧基、甲酰氨基、乙酰氨基、正丙酰氨基、正丁酰氨基、二(甲酰基)氨基、二(乙酰基)氨基、二(正丙酰基)氨基、二(正丁酰基)氨基、甲基氨基、乙基氨基、正丙基氨基、正丁基氨基、二(甲基)氨基、二(乙基)氨基、二(正丙基)氨基、二(正丁基)氨基、环丙基、环戊基、环己基、环氧乙烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基或四氢噻吩基，所述环丙基、环戊基、环己基、环氧乙烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基或四氢噻吩基任选地被一个或多个氨基、＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘、硝基、甲基、乙基、正丙基、甲氧基、乙氧基或正丙氧基取代。
6.权利要求5的化合物，其特征在于：R2选自氢、氨基、＝O、羟基、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、甲酰氨基、乙酰氨基、二(甲酰基)氨基、二(乙酰基)氨基、甲基氨基、乙基氨基、二(甲基)氨基、二(乙基)氨基或吡咯烷基，所述吡咯烷基任选地被一个或多个羟基取代。
7.权利要求6的化合物，其特征在于：R2选自氢、氨基、＝O、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、甲酰氨基、乙酰氨基、二(甲酰基)氨基、二(乙酰基)氨基、甲基氨基、乙基氨基、二(甲基)氨基、二(乙基)氨基或吡咯烷基，所述吡咯烷基任选地被一个或多个羟基取代。
8.权利要求6的化合物，其特征在于：R2选自氢、氨基、＝O、羟基、氯、甲基、甲氧基、乙酰氨基、二(乙酰基)氨基、二(甲基)氨基或吡咯烷基，所述吡咯烷基任选地被一个或多个羟基取代。
9.权利要求1的化合物，其特征在于：R3选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘、硝基、甲基、乙基、正丙基、正丁基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、正丁氧基、-COR5、-CONR5R6、-CH2NR5R6、甲酰氨基、乙酰氨基、二(甲酰基)氨基、二(乙酰基)氨基、甲基氨基、乙基氨基、二(甲基)氨基、二(乙基)氨基、环丙基、环戊基、环己基、环氧乙烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基或四氢噻吩基，所述甲基、乙基、正丙基、正丁基、环丙基、环戊基、环己基、环氧乙烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基或四氢噻吩基任选地被一个或多个＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘、硝基、甲基、乙基、正丙基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基取代。
10.权利要求9的化合物，其特征在于：R3选自氢、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、-COR5、-CONR5R6、-CH2NR5R6、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基，所述甲基、乙基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基任选地被一个或多个羟基、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基或环己基取代。
11.权利要求10的化合物，其特征在于：R3选自氢、氯、溴、碘、甲基、乙基、-COR5、-CONR5R6、-CH2NR5R6、吡咯烷基、哌嗪基或吗啉基，所述乙基、吡咯烷基、哌嗪基或吗啉基任选地被一个或多个羟基、氟、甲基或环己基取代。
12.权利要求11的化合物，其特征在于：R4选自氢、＝O、羟基、氟、氯、溴或碘。
13.权利要求12的化合物，其特征在于：R4选自氢、＝O、羟基或氯。
14.权利要求1的化合物，其特征在于：R5、R6独立地选自氢、羟基、甲基、乙基、正丙基、正丁基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基或正丁氧基，或，
R5、R6和与其相连接的N原子共同构成吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、吗啉基或硫代吗啉基，所述吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、吗啉基或硫代吗啉基任选地被一个或多个氨基、羟基、＝O、氰基、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基、正丙基或正丁基取代。
15.权利要求14的化合物，其特征在于：R5、R6独立地选自氢、羟基、甲基、乙基、甲氧基或乙氧基，或，
R5、R6和与其相连接的N原子共同构成吡咯烷基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基，所述吡咯烷基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基任选地被一个或多个羟基、＝O、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基、正丙基或正丁基取代。
16.权利要求15的化合物，其特征在于：R5、R6独立地选自氢、羟基、甲基、甲氧基或乙氧基，或，
R5、R6和与其相连接的N原子共同构成吡咯烷基、哌嗪基或硫代吗啉基，所述吡咯烷基、哌嗪基或硫代吗啉基任选地被一个或多个羟基、＝O、氟或甲基取代。
17.权利要求1的化合物，其特征在于：R7、R8、R9、R10独立地选自氢、氟、氯、溴、碘或羟基，或，
R8和R9共同构成＝O。
18.权利要求17的化合物，其特征在于：R7、R8、R9、R10独立地选自氢、氟或羟基，或，R8和R9共同构成＝O。
19.权利要求1的化合物，其特征在于：R11选自苯基、吡啶基、吡啶酮基或吡嗪基，其中苯基、吡啶基、吡啶酮基或吡嗪基任选地被一个或多个氟、氯、溴、碘、羟基、甲氧基或乙氧基取代。
20.权利要求19的化合物，其特征在于：R11选自苯基，其中苯基任选地被一个或多个氟取代。
21.权利要求1的化合物，其特征在于：
X选自CR1 m、N或NH；
W存在或不存在，W存在时选自CR2 m、N或NH，W不存在时，X与Y通过化学单键相连接；
Y选自CR3 m或NR3 n；
Z选自CR4 m、N或NH；
m＝1或2；
n＝0或1；
R1选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘或硝基；
R2选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘、硝基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、(C1-4烷酰基)氨基、二(C1-4烷酰基)氨基、(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基、环丙基、环戊基、环己基、环氧乙烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基或四氢噻吩基，所述环丙基、环戊基、环己基、环氧乙烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基或四氢噻吩基任选地被一个或多个氨基、＝O、羟基、氰基、卤素、硝基、C1-4烷基或C1-4烷氧基取代；
R3选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘、硝基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、-COR5、-CONR5R6、-CH2NR5R6、(C1-4烷酰基)氨基、二(C1-4烷酰基)氨基、(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基、环丙基、环戊基、环己基、环氧乙烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基或四氢噻吩基，所述C1-4烷基、环丙基、环戊基、环己基、环氧乙烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基或四氢噻吩基任选地被一个或多个＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘、硝基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、环丙基、环丁基、环戊基或环己基取代；
R4选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘或硝基；
R5、R6独立地选自氢、羟基、C1-4烷基或C1-4烷氧基，
或
R5、R6和与其相连接的N原子共同构成吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、吗啉基或硫代吗啉基；所述吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、吗啉基或硫代吗啉基任选地被一个或多个氨基、羟基、＝O、氰基、氟、氯、溴、碘或C1-4烷基取代；
R7、R8、R9、R10独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、硝基、羟基、氨基或氰基，或
R8和R9共同构成＝O；
R11选自苯基、吡啶基、吡啶酮基或吡嗪基，其中苯基、吡啶基、吡啶酮基或吡嗪基任选地被一个或多个氟、氯、溴、碘、硝基、羟基、氰基、C1-4烷基或C1-4烷氧基取代。
22.权利要求21的化合物，其特征在于：
X选自CR1 m、N或NH；
W存在或不存在，W存在时选自CR2 m、N或NH，W不存在时，X与Y通过化学单键相连接；
Y选自CR3 m或NR3 n；
Z选自CR4 m、N或NH；
m＝1或2；
n＝0或1；
R1选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘或硝基；
R2选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘、硝基、甲基、乙基、正丙基、正丁基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、正丁氧基、甲酰氨基、乙酰氨基、正丙酰氨基、正丁酰氨基、二(甲酰基)氨基、二(乙酰基)氨基、二(正丙酰基)氨基、二(正丁酰基)氨基、甲基氨基、乙基氨基、正丙基氨基、正丁基氨基、二(甲基)氨基、二(乙基)氨基、二(正丙基)氨基、二(正丁基)氨基、环丙基、环戊基、环己基、环氧乙烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基或四氢噻吩基，所述环丙基、环戊基、环己基、环氧乙烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基或四氢噻吩基任选地被一个或多个氨基、＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘、硝基、甲基、乙基、正丙基、甲氧基、乙氧基或正丙氧基取代；
R3选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘、硝基、甲基、乙基、正丙基、正丁基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、正丁氧基、-COR5、-CONR5R6、-CH2NR5R6、甲酰氨基、乙酰氨基、二(甲酰基)氨基、二(乙酰基)氨基、甲基氨基、乙基氨基、二(甲基)氨基、二(乙基)氨基、环丙基、环戊基、环己基、环氧乙烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基或四氢噻吩基，所述甲基、乙基、正丙基、正丁基、环丙基、环戊基、环己基、环氧乙烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基或四氢噻吩基任选地被一个或多个＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘、硝基、甲基、乙基、正丙基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基取代；
R4选自氢、氨基、＝O、羟基、氰基、氟、氯、溴、碘或硝基；
R5、R6独立地选自氢、羟基、甲基、乙基、正丙基、正丁基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基或正丁氧基，
或
R5、R6和与其相连接的N原子共同构成吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、吗啉基或硫代吗啉基，所述吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、吗啉基或硫代吗啉基任选地被一个或多个氨基、羟基、＝O、氰基、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基、正丙基或正丁基取代；
R7、R8、R9、R10独立地选自氢、氟、氯、溴、碘或羟基，
或
R8和R9共同构成＝O；
R11选自苯基、吡啶基、吡啶酮基或吡嗪基，其中苯基、吡啶基、吡啶酮基或吡嗪基任选地被一个或多个氟、氯、溴、碘、羟基、甲氧基或乙氧基取代。
23.权利要求22的化合物，其特征在于：
R1选自氢、氨基、＝O或羟基；
R2选自氢、氨基、＝O、羟基、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、甲酰氨基、乙酰氨基、二(甲酰基)氨基、二(乙酰基)氨基、甲基氨基、乙基氨基、二(甲基)氨基、二(乙基)氨基或吡咯烷基，所述吡咯烷基任选地被一个或多个羟基取代。
24.权利要求23的化合物，其特征在于：
X选自CR1 m、N或NH；
W存在或不存在，W存在时选自CR2 m、N或NH，W不存在时，X与Y通过化学单键相连接；
Y选自CR3 m或NR3 n；
Z选自CR4 m、N或NH；
m＝1或2；
n＝0或1；
R1选自氢、氨基或＝O；
R2选自氢、氨基、＝O、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、甲酰氨基、乙酰氨基、二(甲酰基)氨基、二(乙酰基)氨基、甲基氨基、乙基氨基、二(甲基)氨基、二(乙基)氨基或吡咯烷基，所述吡咯烷基任选地被一个或多个羟基取代；
R3选自氢、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、-COR5、-CONR5R6、-CH2NR5R6、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基，所述甲基、乙基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基任选地被一个或多个羟基、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基或环己基取代；
R4选自氢、＝O、羟基、氟、氯、溴或碘；
R5、R6独立地选自氢、羟基、甲基、乙基、甲氧基或乙氧基，
或
R5、R6和与其相连接的N原子共同构成吡咯烷基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基，所述吡咯烷基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基任选地被一个或多个羟基、＝O、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基、正丙基或正丁基取代；
R7、R8、R9、R10独立地选自氢、氟、氯、溴、碘或羟基，
或
R8和R9共同构成＝O；
R11选自苯基、吡啶基、吡啶酮基或吡嗪基，其中苯基、吡啶基、吡啶酮基或吡嗪基任选地被一个或多个氟、氯、溴、碘、羟基、甲氧基或乙氧基取代。
25.权利要求23的化合物，其特征在于：
X选自CR1 m、N或NH；
W存在或不存在，W存在时选自CR2 m、N或NH，W不存在时，X与Y通过化学单键相连接；
Y选自CR3 m或NR3 n；
Z选自CR4 m、N或NH；
m＝1或2；
n＝0或1；
R1选自氢、氨基、＝O或羟基；
R2选自氢、氨基、＝O、羟基、氯、甲基、甲氧基、乙酰氨基、二(乙酰基)氨基、二(甲基)氨基或吡咯烷基，所述吡咯烷基任选地被一个或多个羟基取代；
R3选自氢、氯、溴、碘、甲基、乙基、-COR5、-CONR5R6、-CH2NR5R6、吡咯烷基、哌嗪基或吗啉基，所述乙基、吡咯烷基、哌嗪基或吗啉基任选地被一个或多个羟基、氟、甲基或环己基取代；
R4选自氢、＝O、羟基或氯；
R5、R6独立地选自氢、羟基、甲基、甲氧基或乙氧基，
或
R5、R6和与其相连接的N原子共同构成吡咯烷基、哌嗪基或硫代吗啉基，所述吡咯烷基、哌嗪基或硫代吗啉基任选地被一个或多个羟基、＝O、氟或甲基取代；
R7、R8、R9、R10独立地选自氢、氟或羟基，
或
R8和R9共同构成＝O；
R11选自苯基，其中苯基任选地被一个或多个氟取代。
26.权利要求1的化合物，其特征在于，具有式(II)所示的结构，
其中，
X、W、Y、Z、R8和R9如权利要求1所定义。
27.权利要求26的化合物，其特征在于，具有式(Ⅲ)所示的结构，
其中，
X为CR1或N；
W为CR2或N；
Y为CR3；
Z为CR4或N；
R1选自氢、氨基、羟基、氰基、卤素或硝基；
R2选自氢、氨基、羟基、氰基、卤素、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、(C1-6烷酰基)氨基、二(C1-6烷酰基)氨基、(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、3-6元环烷基或3-6元杂环烷基，所述3-6元环烷基或3-6元杂环烷基任选地被一个或多个氨基、＝O、羟基、氰基、卤素、硝基、C1-6烷基或C1-6烷氧基取代；
R3选自氢、氨基、羟基、氰基、卤素、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、-COR5、-CONR5R6、-CH2NR5R6、(C1-6烷酰基)氨基、二(C1-6烷酰基)氨基、(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、3-6元环烷基或3-6元杂环烷基，所述C1-6烷基、3-6元环烷基或3-6元杂环烷基任选地被一个或多个＝O、羟基、氰基、卤素、硝基、C1-4烷基、C1-4烷氧基或3-6元环烷基取代；
R4选自氢、氨基、羟基、氰基、卤素或硝基；
R5、R6独立地选自氢、羟基、C1-6烷基或C1-6烷氧基，
或
R5、R6和与其相连接的N原子共同构成5-6元杂环烷基，所述5-6元杂环烷基任选地被一个或多个氨基、羟基、＝O、氰基、卤素或C1-6烷基取代；
R8、R9独立地选自氢、卤素、硝基、羟基、氨基或氰基，
或
R8和R9共同构成＝O。
28.权利要求27的化合物，其特征在于：
R2选自氢、氨基、羟基、氯、甲基、甲氧基、乙酰氨基、二(乙酰基)氨基、二(甲基)氨基或吡咯烷基；所述吡咯烷基任选地被一个或多个羟基取代。
29.权利要求28的化合物，其特征在于：
X为CR1或N；
W为CR2或N；
Y为CR3；
Z为CR4或N；
R1选自氢、羟基或氨基；
R2选自氢、氨基、羟基、氯、甲氧基、乙酰氨基、二(乙酰基)氨基、二(甲基)氨基或吡咯烷基，所述吡咯烷基任选地被一个或多个羟基取代；
R3选自氢、氟、氯、溴、碘、乙基、-COR5、-CONR5R6、-CH2NR5R6、吡咯烷基、哌嗪基或吗啉基，所述乙基、吡咯烷基、哌嗪基或吗啉基任选地被一个或多个羟基、氟、甲基或环己基取代；
R4选自氢、羟基或氯；
R5、R6独立地选自氢、羟基、甲基、甲氧基或乙氧基，
或
R5、R6和与其相连接的N原子共同构成吡咯烷基、哌嗪基或硫代吗啉基，所述吡咯烷基、哌嗪基或硫代吗啉基任选地被一个或多个羟基、＝O、氟或甲基取代；
R8、R9独立地选自氢、氟或羟基，
或
R8和R9共同构成＝O。
30.权利要求27的化合物，其特征在于，具有式(Ⅳ)所示的结构，
其中，Z选自CH或N；R1、R2、R3、R8、R9如权利要求27所定义。
31.权利要求26的化合物，其特征在于：具有式(Ⅴ)所示的结构，
其中，
X为NH；
W存在或不存在，W存在时选自C(＝O)，W不存在时，X与Y通过化学单键连接；
Y选自CR3；
Z选自CR4；
R3选自氢、氨基、羟基、氰基、卤素、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、-COR5、-CONR5R6、-CH2NR5R6、(C1-6烷酰基)氨基、二(C1-6烷酰基)氨基、(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、3-6元环烷基或3-6元杂环烷基，所述C1-6烷基、3-6元环烷基或3-6元杂环烷基任选地被一个或多个＝O、羟基、氰基、卤素、硝基、C1-4烷基、C1-4烷氧基或3-6元环烷基取代；
R4选自氢、氨基、羟基、氰基、卤素或硝基；
R5、R6独立地选自氢、羟基、C1-6烷基或C1-6烷氧基，
或
R5、R6和与其相连接的N原子共同构成5-6元杂环烷基，所述5-6元杂环烷基任选地被一个或多个氨基、羟基、＝O、氰基、卤素或C1-6烷基取代；
R8、R9独立地选自氢、卤素、硝基、羟基、氨基或氰基。
32.权利要求31的化合物，其特征在于：
X为NH；
W存在或不存在，W存在时选自C(＝O)，W不存在时，X与Y通过化学单键连接；
Y选自CR3；
Z选自CR4；
R3选自氢、碘、-COR5、-CONR5R6或吡咯烷基，所述吡咯烷基任选地被一个或多个羟基取代；
R4选自氢、羟基或氯；
R5、R6独立地选自氢、甲基、或乙氧基，
或
R5、R6和与其相连接的N原子共同构成吡咯烷基，所述吡咯烷基任选地被一个或多个羟基取代；
R8、R9独立地选自氢、氟、氯、溴或碘。
33.权利要求32的化合物，其特征在于：
R8、R9独立地选自氢或氟。
34.以下化合物或其药学上可接受的盐：
35.一种药物组合物，其特征在于包含权利要求1-34任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐。
36.权利要求1-34任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、或权利要求35所述的药物组合物在制备预防或者治疗Trk酪氨酸激酶受体介导的疾病的药物中的用途。
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