CN107980484A - 一种云南松种子育苗接种印度块菌的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种云南松种子育苗接种印度块菌的方法，属于野生菌种植技术领域。首先对云南松种子进行消毒预处理备用，选择鲜印度块菌粉碎后配以无菌水得到块菌菌种液，按生荒泥土30‑50%、松树菌根土20‑30%、河沙10‑20%、蛭石20‑30%的重量比取料混合均匀并调整含水率至10‑15%得到接种基质细粉备用；然后在大棚中设置填有接种基质的苗床并用竹签在接种基质上等距均匀插出点种穴，并将预处理后的云南松种子催芽至胚芽明显伸出，再芽根向下点种入苗床接种基质的点种穴中并铺盖细松林土，而后进行苗期管理，种子出叶后每月对幼苗施块菌菌种液2‑3次，直至幼苗长成菌根树苗。具有方法可靠、接种率高、成本低等优点。

Description

一种云南松种子育苗接种印度块菌的方法

技术领域

本发明涉及一种印度块菌接种方法，尤其是一种云南松种子育苗接种印度块菌的方法，属于野生菌种植技术领域。

背景技术

印度块菌(Tuber indicum)，又名松露，俗名猪拱菌、无娘果等，被称为“国际第一名菌”。印度块菌富含17种氨基酸、8种维生素、适量的蛋白质、以及雄性酮、甾醇、鞘脂、脂肪酸、氨基酸及微量元素等50余种生理活性成分，并含有人体自身不能合成的8种氨基酸、锌、锰、铁、钙、磷、硒等必需营养素，具有增强免疫力、抗衰老、益胃、清神、止血、疗痔等药用价值，具有抗癌活性，对癌细胞有一定的抑制作用，可以激发脑细胞活力。由于野生印度块菌产量低，需要依靠人工栽培来满足日益增长的市场需求，而有效的接种方法不仅是印度块菌菌根化生产的前提，也是块菌栽培成败的关键。

云南松（Pinus yunnanensis）为松科松属常绿乔木，又称“飞松”、“青松”、“长毛松”，分布于西藏东部、四川西部及西南部、云南、贵州西部及西南部和广西西北部，是西南地区的乡土树种，也是该地区的荒山绿化造林先锋树种，多分布于海拔1000-3200米的地区，常形成大面积纯林。云南松树干可割取树脂，树根可培育茯苓，树皮可提栲胶，松针可提炼松针油，木材干馏可得多种化工产品。松脂、松节油、枝、叶、幼果、松花粉等均可药用。

目前，国内外虽有少量关于印度块菌的栽培接种技术，并一定程度地运用到人工栽培实践中，但多停留在探索阶段，技术还远不成熟。云南松作为印度块菌的宿主植物之一，在印度块菌的人工栽培中占有重要地位，但现有云南松接种技术尚不成熟，接种效果不理想，接种成功率较低，导致印度块菌栽培的成本增加、产量偏低，难以推广应用，需要研究有效的云南松印度块菌人工接种方法。

发明内容

本发明要解决的技术问题是针对现有印度块菌人工栽培中接种成功率低、成本高等不足，提出一种云南松种子育苗接种印度块菌的方法，通过宿主植物幼苗培育和营造菌种生长环境，提高印度块菌接种成功率，降低人工生块菌栽培产成本。

为解决上述技术问题，本发明提供一种云南松种子育苗接种印度块菌的方法，其具体步骤如下：

（1）种子预处理：选择相同大小规格的云南松种子，先在0.5-1%的高锰酸钾溶液中浸泡消毒1-2小时，取出用无菌水冲洗2-3次，置于培养皿中备用；

（2）制备块菌菌种液：选择成熟的鲜印度块菌，先用自来水清洗干净，然后用无菌水冲洗2-3遍后置于粉碎机中粉碎至粒度50-80目的细末状，再按1：5-10的体积比加入无菌水，得到块菌菌种液备用；

（3）制备接种基质：按生荒泥土30-50%、松树菌根土20-30%、河沙10-20%、蛭石20-30%的重量比，取干燥的生荒泥土、河沙、蛭石，粉碎至粒度小于等于4mm后与松散的松树菌根土混合均匀，再调整含水率为10-15%，得到接种基质备用；

（4）准备苗床：选择保湿、保温、排灌条件好的温室大棚，在大棚中设置苗床，苗床间留步道，然后将步骤（3）制备好的接种基质填实在苗床里，并用竹签在苗床接种基质上等距均匀插出0.2-0.3cm深的点种穴；

（5）种子催芽：将步骤（1）中预处理后的云南松种子放入40-50℃温水中浸泡1-2天，再将云南松种子捞出放在25-35℃环境下按常规方法催芽，直至云南松种子出现咧嘴而且胚芽已经伸出0.15-0.2cm；催芽过程中每天用30-40℃的温水对云南松种子喷洒一次，并保持松树种子表面不干燥；

（6）种子播种：取步骤（5）获得的胚芽已伸出的云南松种子，将其芽根向下点种入步骤（4）准备好的苗床接种基质的点种穴中，然后在上面铺盖一层细松林土并用水喷湿表土；

（7）菌根苗培育：控制温室大棚内适当的温度、湿度、光照度，不定期对苗床浇水、保持基质的表土不裂开，每月对苗圃进行1-2次松土和除草，种子发芽出土成苗后按常规方法对幼苗施配菌根肥；种子长出叶子后，每月对幼苗施步骤（2）制备的块菌菌种液2-3次，并按常规方法进行浇水、除草等苗期管理，直至幼苗长成可以移栽的树苗，即得到云南松块菌菌根树苗。

所述步骤（3）制备的接种基质的PH值为6.7-7.5，宜为微酸至中性，以利于云南松钟子的出苗、生长和菌种的生长。

所述步骤（3）中制备接种基质的松树菌根土是取自松林中伴生有印度块菌的云南松树下的表层土壤，以保证菌种接种后生长良好。松树菌根土中含有菌根菌，松类育苗不能缺少菌根菌，否则会导致接种后生长不良。

所述步骤（4）中苗床的长、宽、深分别为2-3m、1-1.5m、1-1.5m，苗床间步道宽40-50cm。

所述步骤（4）中苗床接种基质上点种穴点的密度为每平方米300-350个。

所述步骤（6）中云南松种子的播种时间宜在每年的3-4月，以提高种子的出苗率和接种的效果。

所述步骤（6）中铺盖的细松林土是普通云南松林中的表层土壤，经消毒灭菌后，粉碎至粒度2mm以下使用；所铺盖的细松林土一般厚5-10mm。

所述步骤（7）中，温室大棚内温度为25-30℃、湿度为75-85%、光照度为25000-30000lux。

本发明中接种基质的成分配比、接种时间、点种穴点的密度、温度、湿度、光照度等各参数均可根据实际需要具体确定，保证良好的接种效果即可。

本发明采用恰当组分的接种基质和特殊的接种育苗方法，通过多环节的多重菌种布施，为印度块菌菌种在松树树苗根部的宿生营造了良好的环境，大大提高了接种的成功率，降低了人工种植印度块菌的成本，可使印度块菌的接种率达到87%以上。具有方法可靠、接种率高、成本低等优点，适宜广泛推广使用。

具体实施方式

下面对本发明的具体实施方式作进一步详尽描述。实施例中未注明的技术或产品，均为现有技术或可以通过购买获得的常规产品。

实施例1：本云南松种子育苗接种印度块菌的方法，其具体步骤如下：

（1）种子预处理：选择相同大小规格的云南松种子，先在0.5%的高锰酸钾溶液中浸泡消毒2小时，取出用无菌水冲洗2次，置于培养皿中备用；

（2）制备块菌菌种液：选择成熟的鲜印度块菌，先用自来水清洗干净，然后用无菌水冲洗2遍后置于粉碎机中粉碎至粒度50目的细末状，再按1：10的体积比加入无菌水，得到块菌菌种液备用；

（3）制备接种基质：按生荒泥土30%、松树菌根土20%、河沙20%、蛭石30%的重量比，取干燥的生荒泥土、河沙、蛭石，粉碎至粒度4mm后与松散的松树菌根土混合均匀，再调整含水率为15%、PH值为7.5，得到接种基质备用；松树菌根土是取自松林中伴生有印度块菌的云南树下的表层土壤，以保证菌种接种后生长良好；

（4）准备苗床：选择保湿、保温、排灌条件好的温室大棚，在大棚中设置苗床，苗床间留步道，然后将步骤（3）制备好的接种基质填实在苗床里，并用竹签在苗床接种基质上等距均匀插出0.2cm深的点种穴；苗床的长、宽、深分别为2m、1m、1m，苗床间步道宽40cm。苗床接种基质上点种穴点的密度为每平方米300个；

（5）种子催芽：将步骤（1）中预处理后的云南松种子放入50℃温水中浸泡1天，再将云南松种子捞出放在25℃环境下按常规方法催芽，直至云南松种子出现咧嘴而且胚芽已经伸出0.15cm；催芽过程中每天用40℃的温水对云南松种子喷洒一次，并保持松树种子表面不干燥；

（6）种子播种：取步骤（5）获得的胚芽已伸出的云南松种子，将其芽根向下点种入步骤（4）准备好的苗床接种基质的点种穴中，然后在上面铺盖一层细松林土并用水喷湿表土；所铺盖的细松林土是普通云南松林中的表层土壤，经消毒灭菌后，粉碎至粒度2 mm以下使用，铺盖的细松林土厚10mm。云南松种子的播种时间在每年的3月，以提高种子的出苗率和接种的效果；

（7）菌根苗培育：控制温室大棚内温度25℃、湿度75%、光照度27000lux，不定期对苗床浇水、保持基质的表土不裂开，每月对苗圃进行1次松土和除草，种子发芽出土成苗后按常规方法对幼苗施配菌根肥；种子长出叶子后，每月对幼苗施步骤（2）制备的块菌菌种液2次，并按常规方法进行浇水、除草等苗期管理，直至幼苗长成可以移栽的树苗，即得到云南松块菌菌根树苗。

本实施例通过采用本发明方法，印度块菌的接种率为89%，种植后第7年进入收获期，印度块菌的单产由现有方法的2kg/亩提高到7kg/亩，且块菌促进了云南松的生长发育，同时云南松又有效地促进了块菌的生长发育提高植物的抗病虫害能力，可保持与稳定生态系统，促进森林植被的恢复与发育。

实施例2：本云南松种子育苗接种印度块菌的方法，其具体步骤如下：

（1）种子预处理：选择相同大小规格的云南松种子，先在1%的高锰酸钾溶液中浸泡消毒1小时，取出用无菌水冲洗3次，置于培养皿中备用；

（2）制备块菌菌种液：选择成熟的鲜印度块菌，先用自来水清洗干净，然后用无菌水冲洗3遍后置于粉碎机中粉碎至粒度80目的细末状，再按1：5的体积比加入无菌水，得到块菌菌种液备用；

（3）制备接种基质：按生荒泥土40%、松树菌根土25%、河沙15%、蛭石20%的重量比，取干燥的生荒泥土、河沙、蛭石，粉碎至粒度2mm以下后与松散的松树菌根土混合均匀，再调整含水率为10%、PH值为7.0，得到接种基质备用；松树菌根土是取自松林中伴生有印度块菌的云南树下的表层土壤，以保证菌种接种后生长良好；

（4）准备苗床：选择保湿、保温、排灌条件好的温室大棚，在大棚中设置苗床，苗床间留步道，然后将步骤（3）制备好的接种基质填实在苗床里，并用竹签在苗床接种基质上等距均匀插出0.3cm深的点种穴；苗床的长、宽、深分别为3m、1.5m、1.5m，苗床间步道宽50cm。苗床接种基质上点种穴点的密度为每平方米350个；

（5）种子催芽：将步骤（1）中预处理后的云南松种子放入40℃温水中浸泡2天，再将云南松种子捞出放在35℃环境下按常规方法催芽，直至云南松种子出现咧嘴而且胚芽已经伸出0.2cm；催芽过程中每天用30℃的温水对云南松种子喷洒一次，并保持松树种子表面不干燥；

（6）种子播种：取步骤（5）获得的胚芽已伸出的云南松种子，将其芽根向下点种入步骤（4）准备好的苗床接种基质的点种穴中，然后在上面铺盖一层细松林土并用水喷湿表土；所铺盖的细松林土是普通云南松林中的表层土壤，经消毒灭菌后，粉碎至粒度1.5 mm以下使用，铺盖的细松林土厚5mm。云南松种子的播种时宜在每年的4月，以提高种子的出苗率和接种的效果；

（7）菌根苗培育：控制温室大棚内温度30℃、湿度85%、光照度25000lux，不定期对苗床浇水、保持基质的表土不裂开，每月对苗圃进行2次松土和除草，种子发芽出土成苗后按常规方法对幼苗施配菌根肥；种子长出叶子后，每月对幼苗施步骤（2）制备的块菌菌种液3次，并按常规方法进行浇水、除草等苗期管理，直至幼苗长成可以移栽的树苗，即得到云南松块菌菌根树苗。

本实施例通过采用本发明方法，印度块菌的接种率为94%，种植后第4年进入收获期，印度块菌的单产由现有方法的2kg/亩提高到11kg/亩，且块菌促进了云南松的生长发育，同时云南松又有效地促进了块菌的生长发育提高植物的抗病虫害能力，可保持与稳定生态系统，促进森林植被的恢复与发育。

实施例3：本云南松种子育苗接种印度块菌的方法，其具体步骤如下：

（1）种子预处理：选择相同大小规格的云南松种子，先在0.8%的高锰酸钾溶液中浸泡消毒2小时，取出用无菌水冲洗3次，置于培养皿中备用；

（2）制备块菌菌种液：选择成熟的鲜印度块菌，先用自来水清洗干净，然后用无菌水冲洗3遍后置于粉碎机中粉碎至粒度60目的细末状，再按1：7的体积比加入无菌水，得到块菌菌种液备用；

（3）制备接种基质：按生荒泥土35%、松树菌根土30%、河沙10%、蛭石25%的重量比，取干燥的生荒泥土、河沙、蛭石，粉碎至粒度3mm以下后与松散的松树菌根土混合均匀，再调整含水率为12%、PH值为6.7，得到接种基质备用；松树菌根土是取自松林中伴生有印度块菌的云南树下的表层土壤，以保证菌种接种后生长良好；

（4）准备苗床：选择保湿、保温、排灌条件好的温室大棚，在大棚中设置苗床，苗床间留步道，然后将步骤（3）制备好的接种基质填实在苗床里，并用竹签在苗床接种基质上等距均匀插出0.25cm深的点种穴；苗床的长、宽、深分别为2.3m、1.2m、1.2m，苗床间步道宽45cm。苗床接种基质上点种穴点的密度为每平方米330个；

（5）种子催芽：将步骤（1）中预处理后的云南松种子放入45℃温水中浸泡1.5天，再将云南松种子捞出放在30℃环境下按常规方法催芽，直至云南松种子出现咧嘴而且胚芽已经伸出0.18cm；催芽过程中每天用35℃的温水对云南松种子喷洒一次，并保持松树种子表面不干燥；

（6）种子播种：取步骤（5）获得的胚芽已伸出的云南松种子，将其芽根向下点种入步骤（4）准备好的苗床接种基质的点种穴中，然后在上面铺盖一层细松林土并用水喷湿表土；所铺盖的细松林土是普通云南松林中的表层土壤，经消毒灭菌后，粉碎至粒度1.8mm以下使用，铺盖的细松林土厚7mm。云南松种子的播种时间在每年的4月，以提高种子的出苗率和接种的效果；

（7）菌根苗培育：控制温室大棚内温度28℃、湿度80%、光照度28000lux，不定期对苗床浇水、保持基质的表土不裂开，每月对苗圃进行1次松土和除草，种子发芽出土成苗后按常规方法对幼苗施配菌根肥；种子长出叶子后，每月对幼苗施步骤（2）制备的块菌菌种液3次，并按常规方法进行浇水、除草等苗期管理，直至幼苗长成可以移栽的树苗，即得到云南松块菌菌根树苗。

本实施例通过采用本发明方法，印度块菌的接种率为92%，种植后第5年进入收获期，印度块菌的单产由现有方法的2kg/亩提高到10kg/亩，且块菌促进了云南松的生长发育，同时云南松又有效地促进了块菌的生长发育提高植物的抗病虫害能力，可保持与稳定生态系统，促进森林植被的恢复与发育。

实施例4：本云南松种子育苗接种印度块菌的方法，其具体步骤如下：

（1）种子预处理：选择相同大小规格的云南松种子，先在0.6%的高锰酸钾溶液中浸泡消毒2小时，取出用无菌水冲洗2次，置于培养皿中备用；

（2）制备块菌菌种液：选择成熟的鲜印度块菌，先用自来水清洗干净，然后用无菌水冲洗2遍后置于粉碎机中粉碎至粒度70目的细末状，再按1：8的体积比加入无菌水，得到块菌菌种液备用；

（3）制备接种基质：按生荒泥土50%、松树菌根土20%、河沙10%、蛭石20%的重量比，取干燥的生荒泥土、河沙、蛭石，粉碎至粒度2.5mm以下后与松散的松树菌根土混合均匀，再调整含水率为13%、PH值为6.9，得到接种基质备用；松树菌根土是取自松林中伴生有印度块菌的云南树下的表层土壤，以保证菌种接种后生长良好；

（4）准备苗床：选择保湿、保温、排灌条件好的温室大棚，在大棚中设置苗床，苗床间留步道，然后将步骤（3）制备好的接种基质填实在苗床里，并用竹签在苗床接种基质上等距均匀插出0.28cm深的点种穴；苗床的长、宽、深分别为3m、1.5m、1.5m，苗床间步道宽50cm。苗床接种基质上点种穴点的密度为每平方米340个；

（5）种子催芽：将步骤（1）中预处理后的云南松种子放入45℃温水中浸泡2天，再将云南松种子捞出放在30℃环境下按常规方法催芽，直至云南松种子出现咧嘴而且胚芽已经伸出0.17cm；催芽过程中每天用35℃的温水对云南松种子喷洒一次，并保持松树种子表面不干燥；

（6）种子播种：取步骤（5）获得的胚芽已伸出的云南松种子，将其芽根向下点种入步骤（4）准备好的苗床接种基质的点种穴中，然后在上面铺盖一层细松林土并用水喷湿表土；所铺盖的细松林土是普通云南松林中的表层土壤，经消毒灭菌后，粉碎至粒度2 mm以下使用，铺盖的细松林土厚8mm。云南松种子的播种时间在每年的4月，以提高种子的出苗率和接种的效果；

（7）菌根苗培育：控制温室大棚内温度26℃、湿度78%、光照度30000lux，不定期对苗床浇水、保持基质的表土不裂开，每月对苗圃进行1次松土和除草，种子发芽出土成苗后按常规方法对幼苗施配菌根肥；种子长出叶子后，每月对幼苗施步骤（2）制备的块菌菌种液2次，并按常规方法进行浇水、除草等苗期管理，直至幼苗长成可以移栽的树苗，即得到云南松块菌菌根树苗。

本实施例通过采用本发明方法，印度块菌的接种率为87%，种植后第6年进入收获期，印度块菌的单产由现有方法的2kg/亩提高到8kg/亩，且块菌促进了云南松的生长发育，同时云南松又有效地促进了块菌的生长发育提高植物的抗病虫害能力，可保持与稳定生态系统，促进森林植被的恢复与发育。

上面对本发明的技术内容作了说明，但本发明的保护范围并不限于所述内容，在本领域的普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下对本发明的技术内容做出各种变化，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种云南松种子育苗接种印度块菌的方法，其特征在于具体步骤如下：

（1）种子预处理：选择相同大小规格的云南松种子，先在0.5-1%的高锰酸钾溶液中浸泡消毒1-2小时，取出用无菌水冲洗2-3次，置于培养皿中备用；

（2）制备块菌菌种液：选择成熟的鲜印度块菌，先用自来水清洗干净，然后用无菌水冲洗2-3遍后置于粉碎机中粉碎至粒度50-80目的细末状，再按1：5-10的体积比加入无菌水，得到块菌菌种液备用；

（3）制备接种基质：按生荒泥土30-50%、松树菌根土20-30%、河沙10-20%、蛭石20-30%的重量比，取干燥的生荒泥土、河沙、蛭石，粉碎至粒度小于等于4mm后与松散的松树菌根土混合均匀，再调整含水率为10-15%，得到接种基质备用；

（4）准备苗床：选择保湿、保温、排灌条件好的温室大棚，在大棚中设置苗床，苗床间留步道，然后将步骤（3）制备好的接种基质填实在苗床里，并用竹签在苗床接种基质上等距均匀插出0.2-0.3cm深的点种穴；

（5）种子催芽：将步骤（1）中预处理后的云南松种子放入40-50℃温水中浸泡1-2天，再将云南松种子捞出放在25-35℃环境下按常规方法催芽，直至云南松种子咧嘴而且胚芽已经伸出0.15-0.2cm；催芽过程中每天用30-40℃的温水对云南松种子喷洒1-2次，并保持云南松种子表面不干燥；

（6）种子播种：取步骤（5）获得的胚芽已伸出的云南松种子，将其芽根向下点种入步骤（4）准备好的苗床接种基质的点种穴中，然后在上面铺盖一层细松林土并用水喷湿表土；

（7）菌根苗培育：控制温室大棚内适当的温度、湿度、光照度，不定期对苗床浇水、保持基质的表土不裂开，每月对苗圃进行1-2次松土和除草，种子发芽出土成苗后按常规方法对幼苗施配菌根肥；种子长出叶子后，每月对幼苗施步骤（2）制备的块菌菌种液2-3次，并按常规方法进行苗期管理，浇水、除草，直至幼苗长成可以移栽的树苗，即得到云南松块菌菌根树苗。

2.根据权利要求1所述的云南松种子育苗接种印度块菌的方法，其特征在于：所述步骤（3）制备的接种基质的PH值为6.7-7.5，宜为微酸至中性。

3.根据权利要求1所述的云南松种子育苗接种印度块菌的方法，其特征在于：所述步骤（3）中，制备接种基质的松树菌根土是取自松林中伴生有印度块菌的云南松树下的表层土壤。

4.根据权利要求1所述的云南松种子育苗接种印度块菌的方法，其特征在于：所述步骤（4）中，苗床的长、宽、深分别为2-3m、1-1.5m、1-1.5m，苗床间的步道宽40-50cm。

5.根据权利要求1所述的云南松种子育苗接种印度块菌的方法，其特征在于：所述步骤（4）中，苗床接种基质上点种穴点的密度为每平方米300-350个。

6.根据权利要求1所述的云南松种子育苗接种印度块菌的方法，其特征在于：所述步骤（6）中，云南松种子的播种时间宜在每年的3-4月。

7.根据权利要求1所述的云南松种子育苗接种印度块菌的方法，其特征在于：所述步骤（6）中，铺盖的细松林土是普通云南松林中的表层土壤，经消毒灭菌后，粉碎至粒度2mm以下使用。

8.根据权利要求1所述的云南松种子育苗接种印度块菌的方法，其特征在于：所述步骤（6）中，铺盖的细松林土一般厚5-10mm。

9.根据权利要求1所述的云南松种子育苗接种印度块菌的方法，其特征在于：所述步骤（7）中，温室大棚内温度为25-30℃、湿度为75-85%、光照度为25000-30000lux。