CN105475067A - 一种基于共生关系的板栗印度块菌菌根苗的培育方法 - Google Patents

一种基于共生关系的板栗印度块菌菌根苗的培育方法 Download PDF

Info

Publication number
CN105475067A
CN105475067A CN201510847702.8A CN201510847702A CN105475067A CN 105475067 A CN105475067 A CN 105475067A CN 201510847702 A CN201510847702 A CN 201510847702A CN 105475067 A CN105475067 A CN 105475067A
Authority
CN
China
Prior art keywords
seedling
chinese chestnut
matrix
inoculation
water
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201510847702.8A
Other languages
English (en)
Inventor
杨彝华
李向梅
施庭有
白宏芬
刘增军
刘琼波
罗彬睿
李洪亮
杨正平
熊海宽
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Chuxiong Yi Autonomous Prefecture Forestry Science Institute
Original Assignee
Chuxiong Yi Autonomous Prefecture Forestry Science Institute
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Chuxiong Yi Autonomous Prefecture Forestry Science Institute filed Critical Chuxiong Yi Autonomous Prefecture Forestry Science Institute
Priority to CN201510847702.8A priority Critical patent/CN105475067A/zh
Publication of CN105475067A publication Critical patent/CN105475067A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G17/00—Cultivation of hops, vines, fruit trees, or like trees
    • A01G17/005—Cultivation methods
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G18/00—Cultivation of mushrooms
    • A01G18/10—Mycorrhiza; Mycorrhizal associations

Abstract

本发明公开了一种基于共生关系的板栗印度块菌菌根苗的培育方法，具体按照以下步骤实施：培育半无菌苗，制备得到板栗半无菌苗；制备接种液、配制接种基质以及准备育苗盘，进行接种处理；进行接种后管理，控制基质湿度，适当通风、透气，保持一定的温度和空气湿度；菌根的检验和移栽。本发明印度块菌菌根苗可以提高板栗造林成活率；印度块菌菌根能增加板栗根系吸收面积，促进板栗树生长发育，提高板栗产量；降低培育板栗块菌苗育苗成本；对土壤PH值适应范围6-7.5，可栽培板栗印度块菌苗的区域较广。

Description

一种基于共生关系的板栗印度块菌菌根苗的培育方法
技术领域
本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种基于共生关系的板栗印度块菌菌根苗的培育方法。
背景技术
目前全国培育板栗苗均采用常规育苗技术，苗木造林后5-7年板栗树挂果，经济收益只有地上板栗，单位面积经济效益来源单一。并且，块菌隶属于子囊菌纲(Ascomycets)块菌目(Tubrales)块菌科(Tuberaceae)块菌属(TuberF.H.Wigg)目前仅靠自然野生资源供应市场。由于块菌生长的特殊性，采挖时对菌塘及生态环境造成严重破坏，使块菌产量急剧下降，产量已远远不能满足市场需求。板栗是块菌的共生树种，为提高土地利用率，增加经济收益，把二者有机结合，改变板栗苗木培育方法，得到板栗印度块菌菌根苗，实验研究得到一套完整的育苗技术。
现已有的板栗育苗技术均为常规技术，另已有的块菌苗培育方法主要用于松科植物，主要存在以下主要问题：现有造林的板栗苗基本是没有共生菌根的普通苗，普通苗造的板栗林未来只有地上部分收益。
发明内容
本发明的目的是提供一种基于共生关系的板栗印度块菌菌根苗的培育方法，解决了现有技术中存在的板栗存储难及育苗时间长以及板栗种子处理方法费时费力的问题。
本发明所采用的技术方案是，一种基于共生关系的板栗印度块菌菌根苗的培育方法，具体按照以下步骤实施：
步骤1、培育半无菌苗，制备得到板栗半无菌苗；
步骤2、接种前准备：制备接种液、配制接种基质以及准备育苗盘；
步骤3、进行接种处理；
步骤4、进行接种后管理，控制基质湿度，适当通风、透气，保持一定的温度和空气湿度；
步骤5、菌根的检验和移栽。
进一步地，步骤1中培育半无菌苗具体为：
1.1)市场采购新鲜、成熟的印度块菌，擦净泥沙装入自封袋，置于-18℃低温冷冻储藏；并选择能与印度块菌形成菌根、产生子实体的板栗；
1.2)基质准备：将蛭石、标准为YC/T310-2009的育苗基质以体积比为1:1混合，加入适量水拌均匀，含水率约28％，即基质捏起成团，松手后散开为好；基质在121℃、110kPa的高温高压下灭菌2小时后冷却待用；
1.3)育苗盘及盆钵消毒：用5‰高锰酸钾溶液浸泡育苗盘及盆钵2小时，取出后用无菌水冲洗三次；
1.4)将板栗种子用水选法除去空瘪后放入30％双氧水中灭菌30-40分钟，捞起用无菌水冲洗后播入盛有灭菌基质的盆钵或育苗盘中，用冷却后的开水或蒸馏水浇灌，置于温室中培育，制备得到板栗半无菌苗；第二年2-4月份，当主根系长5-10cm，侧根发达后开始接种。
进一步地，步骤2中制备接种液、配制接种基质以及准备育苗盘具体为：
2.1)、果汁机用75％酒精擦拭后，用无菌水冲洗，反复3次；成熟的印度块菌用自来水洗净后，再用75％酒精擦拭干净，用无菌水冲洗，反复3次，用无菌解剖刀削去外皮，切成小块，每次称取65克；放入准备好的果汁机中加入400-500ml无菌水，开启果汁机搅拌约15-30秒，加入无菌水配制成浓度为10％的孢子悬浮液，倒入已灭菌的瓶中，密封，置4℃冰箱保存备用；
2.2)、配制接种基质：经过高压灭菌的基质中加入适量水拌匀，加石灰拌匀，PH值调到6.0-7.0之间，使基质捏起成团，松手后散开为好；
2.3)、塑胶片及育苗盘准备：将塑胶片置入双氧水中灭菌40分钟，取出用灭菌水冲洗干净备用；用5‰高锰酸钾溶液浸泡育苗盘及盆钵2小时，取出后用无菌水冲洗3次。
进一步地，步骤3中接种处理具体为：
3.1)、将配制好的基质平铺于经过灭菌的塑胶片上，取出板栗半无菌苗，根部置于基质中部，使根系充分伸展开；
3.2)、用吸管吸取10ml制备好的孢子悬浮液，淋于根上包好塑胶片，塑胶片松紧适合，使基质不会散落；
3.3)、将接种苗放入准备好的育苗盘内，浇适量的蒸馏水，置于温室内培养；注意水不能浇太多，否则会冲走块菌孢子。
进一步地，步骤4中接种后管理具体为：
4.1)、浇水：培养期间用冷开水或蒸馏水浇灌，保持基质湿润；
4.2)、温度：夏季需遮阴处理，温室内保持平均温度18.64℃，最高温度不超过32℃，最低不低于1℃；
4.3)、湿度：温室内平均湿度64％左右，最大湿度不超过96％，最小湿度不低于30％。
进一步地，步骤5中的菌根的检验和移栽具体为：苗木接种后1-2个月开始进行第一次检查，感染其他杂菌的菌根苗需立即移除，以免扩大污染；接种后6个月进行第二次检查，检验菌根量的多少，菌根少，或无菌根的需进行第二次补接种；菌根苗出栽前进行第三次检验，选择菌根发育情况，菌根发育良好，颜色鲜亮的菌根苗野外定植。
本发明的有益效果是：其一，印度块菌菌根苗可以提高板栗造林成活率；其二，印度块菌菌根能提高板栗根系吸收能力，促进板栗树生长发育；其三，板栗印度块菌菌根苗最终达到地上、地下共同收益，提高土地利用率，增加土地单位面积经济效益；其四，印度块菌对土壤PH值适应范围PH值6-7.5，可栽培板栗印度块菌苗的区域较广。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行详细说明。
本发明提供一种基于共生关系的板栗印度块菌菌根苗的培育方法，具体按照以下步骤实施：
1、培育板栗半无菌苗；
1.1、印度块菌(Tuberindicum)菌种保存：市场采购新鲜、成熟的印度块菌，擦净泥沙装入自封袋，置于-18℃低温冷冻储藏；
共生树种选择：选择能与印度块菌形成菌根、产生子实体的板栗(Castaneamollissima)；
1.2、基质准备：将蛭石、标准为YC/T310-2009的育苗基质以体积比为1:1混合，加入适量水拌均匀，含水率约28％，即基质捏起成团，松手后散开为好。基质在121℃、110kPa的高温高压下灭菌2小时后冷却待用；
1.3、育苗盘及盆钵消毒：用5‰高锰酸钾溶液浸泡2小时，取出后用无菌水冲洗三次；
1.4、将板栗种子用水选法除去空瘪后放入30％双氧水中灭菌30-40分钟，捞起用无菌水冲洗后播入盛有灭菌基质的盆钵或育苗盘中，用冷却后的开水或蒸馏水浇灌，置于温室中培育，制备得到板栗半无菌苗；第二年2-4月份，当主根系长5-10cm，侧根发达后开始接种；
2、接种前准备
2.1、材料准备：印度块菌(Tuberindicum)成熟子实体，酒精灯1盏，小刀2把，剪刀2把，塑胶片，乳胶手套10双，30倍放大镜1个；
2.2、接种液的配制：果汁机用75％酒精擦拭后，用无菌水冲洗，反复3次；成熟的块菌用自来水洗净后，再用75％酒精擦拭干净用无菌水冲洗，反复3次，用无菌解剖刀削去外皮，切成小块，每次称取65克；放入准备好的果汁机中加入400-500ml无菌水，开启果汁机搅拌约15-30秒，加入无菌水配制成浓度为10％的孢子悬浮液，倒入已灭菌的瓶中，密封，置4℃冰箱保存备用；
2.3、配制接种基质：经过灭菌的基质中加入适量水拌匀，加石灰拌匀，PH值调到6.0-7.0之间，使基质捏起成团，松手后散开为好；
2.4、塑胶片及育苗盘准备：根据育苗盘穴的大小，将塑胶片剪成适合的大小，置入双氧水中灭菌40分钟，取出用灭菌水冲洗干净备用。育苗盘消毒同1.3；
3、接种：
3.1、将配制好的基质平铺于经过灭菌的塑胶片上，取出板栗半无菌苗，根部置于基质中部，使根充分伸展开；
3.2、用吸管吸取10ml左右制备好的孢子悬浮液，淋于根上包好塑胶片，塑胶片松紧适合，使基质不会散落；
3.3、将3.2已接种的板栗半无菌苗裹紧塑胶片放入准备好的育苗盘内，浇适量的蒸馏水，置于温室内培养。注意水不能浇太多，否则会冲走块菌孢子；
4、接种后管理
接种后的管理主要是控制基质湿度，适当通风、透气，保持一定的温度和空气湿度；
4.1浇水：培养期间用冷开水或蒸馏水浇灌，保持基质湿润；
4.2温度：夏季需遮阴处理，温室内保持平均温度18.64℃左右，最高温度不超过32℃，最低不低于1℃；
4.3湿度：温室内平均湿度64％左右，最大湿度不超过96％，最小湿度不低于30％。
5、菌根检验
5.1检验器件及方式：检验时取出塑胶片包裹的菌根苗，轻轻展开塑胶片，用20倍放大镜观察菌根的发育和形态；
5.2菌根检验时间：第一次检验：苗木接种后1-2个月开始进行检查，感染其他杂菌的菌根苗需立即移除，以免扩大污染；第二次检验：接种后6个月，检验菌根量的多少，菌根少，或无菌根的需在2-4月份或7-8月份两个时间段进行第二次补接种，确保野外定植前菌根感染率达60％以上；第三次检验：菌根苗出栽前检验，检验菌根发育情况，菌根发育良好，颜色鲜亮的菌根苗于野外定植。印度块菌菌根技术育板栗苗和普通育板栗苗的对比见表1。
表1印度块菌菌根技术育板栗苗和普通育板栗苗的对比

Claims (6)

1.一种基于共生关系的板栗印度块菌菌根苗的培育方法，其特征在于，具体按照以下步骤实施：
步骤1、培育半无菌苗，制备得到板栗半无菌苗；
步骤2、接种前准备：制备接种液、配制接种基质以及准备育苗盘；
步骤3、进行接种处理；
步骤4、进行接种后管理，控制基质湿度，适当通风、透气，保持一定的温度和空气湿度；
步骤5、菌根的检验和移栽。
2.根据权利要求1所述的基于共生关系的板栗印度块菌菌根苗的培育方法，其特征在于，所述步骤1中培育半无菌苗具体为：
1.1)市场采购新鲜、成熟的印度块菌，擦净泥沙装入自封袋，置于-18℃低温冷冻储藏；并选择能与印度块菌形成菌根、产生子实体的板栗；
1.2)基质准备：将蛭石、标准为YC/T310-2009的育苗基质以体积比为1:1混合，加入适量水拌均匀，含水率约28％，即基质捏起成团，松手后散开为好；基质在121℃、110kPa的高温高压下灭菌2小时后冷却待用；
1.3)育苗盘及盆钵消毒：用5‰高锰酸钾溶液浸泡育苗盘及盆钵2小时，取出后用无菌水冲洗三次；
1.4)将板栗种子用水选法除去空瘪后放入30％双氧水中灭菌30-40分钟，捞起用无菌水冲洗后播入盛有灭菌基质的盆钵或育苗盘中，用冷却后的开水或蒸馏水浇灌，置于温室中培育，制备得到板栗半无菌苗；第二年2-4月份，当主根系长5-10cm，侧根发达后开始接种。
3.根据权利要求2所述的基于共生关系的板栗印度块菌菌根苗的培育方法，其特征在于，所述步骤2中制备接种液、配制接种基质以及准备育苗盘具体为：
2.1)、果汁机用75％酒精擦拭后，用无菌水冲洗，反复3次；成熟的印度块菌用自来水洗净后，再用75％酒精擦拭干净，用无菌水冲洗，反复3次，用无菌解剖刀削去外皮，切成小块，每次称取65克；放入准备好的果汁机中加入400-500ml无菌水，开启果汁机搅拌约15-30秒，加入无菌水配制成浓度为10％的孢子悬浮液，倒入已灭菌的瓶中，密封，置4℃冰箱保存备用；
2.2)、配制接种基质：经过高压灭菌的基质中加入适量水拌匀，加石灰拌匀，PH值调到6.0-7.0之间，使基质捏起成团，松手后散开为好；
2.3)、塑胶片及育苗盘准备：将塑胶片置入双氧水中灭菌40分钟，取出用灭菌水冲洗干净备用；用5‰高锰酸钾溶液浸泡育苗盘及盆钵2小时，取出后用无菌水冲洗3次。
4.根据权利要求3所述的基于共生关系的板栗印度块菌菌根苗的培育方法，其特征在于，所述步骤3中接种处理具体为：
3.1)、将配制好的基质平铺于经过灭菌的塑胶片上，取出板栗半无菌苗，根部置于基质中部，使根系充分伸展开；
3.2)、用吸管吸取10ml制备好的孢子悬浮液，淋于根上包好塑胶片，塑胶片松紧适合，使基质不会散落；
3.3)、将接种苗放入准备好的育苗盘内，浇适量的蒸馏水，置于温室内培养；注意水不能浇太多，否则会冲走块菌孢子。
5.根据权利要求4所述的基于共生关系的板栗印度块菌菌根苗的培育方法，其特征在于，所述步骤4中接种后管理具体为：
4.1)、浇水：培养期间用冷开水或蒸馏水浇灌，保持基质湿润；
4.2)、温度：夏季需遮阴处理，温室内保持平均温度18.64℃，最高温度不超过32℃，最低不低于1℃；
4.3)、湿度：温室内平均湿度64％，最大湿度不超过96％，最小湿度不低于30％。
6.根据权利要求5所述的基于共生关系的板栗印度块菌菌根苗的培育方法，其特征在于，所述步骤5中的菌根的检验和移栽具体为：苗木接种后1-2个月开始进行第一次检查，感染其他杂菌的菌根苗需立即移除，以免扩大污染；接种后6个月进行第二次检查，检验菌根量的多少，菌根少，或无菌根的需进行第二次补接种；菌根苗出栽前进行第三次检验，选择菌根发育情况，菌根发育良好，颜色鲜亮的菌根苗野外定植。
CN201510847702.8A 2015-11-28 2015-11-28 一种基于共生关系的板栗印度块菌菌根苗的培育方法 Pending CN105475067A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510847702.8A CN105475067A (zh) 2015-11-28 2015-11-28 一种基于共生关系的板栗印度块菌菌根苗的培育方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510847702.8A CN105475067A (zh) 2015-11-28 2015-11-28 一种基于共生关系的板栗印度块菌菌根苗的培育方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN105475067A true CN105475067A (zh) 2016-04-13

Family

ID=55662652

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510847702.8A Pending CN105475067A (zh) 2015-11-28 2015-11-28 一种基于共生关系的板栗印度块菌菌根苗的培育方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105475067A (zh)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106941930A (zh) * 2017-03-21 2017-07-14 会东县地金原松露产业发展有限公司 一种块菌的栽培方法
CN107295897A (zh) * 2017-05-12 2017-10-27 云南菌物生态科技有限公司 一种沙漠块菌与其共生树种半日花的菌根合成和种植方法
CN107980484A (zh) * 2017-11-29 2018-05-04 云南露源野生真菌研究所（有限合伙） 一种云南松种子育苗接种印度块菌的方法
CN110150013A (zh) * 2019-05-31 2019-08-23 中南林业科技大学 一种锥栗菌根化育苗的方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2007029072A (ja) * 2005-07-27 2007-02-08 Morika Iwai メシマコブ（Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓ）の檀木栽培方法
CN101595803A (zh) * 2008-06-03 2009-12-09 上海市农业科学院 一种菌根食用菌菌根苗的生产方法
CN103070013A (zh) * 2013-01-30 2013-05-01 攀枝花市林业科学技术推广站（攀枝花市林业工作总站） 一种人工接种培育夏块菌根苗的方法
CN103070014A (zh) * 2013-01-30 2013-05-01 攀枝花市林业科学技术推广站（攀枝花市林业工作总站） 一种悬浮液接种培育夏块菌根苗的方法
CN103749154A (zh) * 2014-01-13 2014-04-30 攀枝花市丰盛源农林开发有限公司 一种促进块菌菌根苗交叉感染的培养基质及其使用方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2007029072A (ja) * 2005-07-27 2007-02-08 Morika Iwai メシマコブ（Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓ）の檀木栽培方法
CN101595803A (zh) * 2008-06-03 2009-12-09 上海市农业科学院 一种菌根食用菌菌根苗的生产方法
CN103070013A (zh) * 2013-01-30 2013-05-01 攀枝花市林业科学技术推广站（攀枝花市林业工作总站） 一种人工接种培育夏块菌根苗的方法
CN103070014A (zh) * 2013-01-30 2013-05-01 攀枝花市林业科学技术推广站（攀枝花市林业工作总站） 一种悬浮液接种培育夏块菌根苗的方法
CN103749154A (zh) * 2014-01-13 2014-04-30 攀枝花市丰盛源农林开发有限公司 一种促进块菌菌根苗交叉感染的培养基质及其使用方法

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106941930A (zh) * 2017-03-21 2017-07-14 会东县地金原松露产业发展有限公司 一种块菌的栽培方法
CN107295897A (zh) * 2017-05-12 2017-10-27 云南菌物生态科技有限公司 一种沙漠块菌与其共生树种半日花的菌根合成和种植方法
CN107980484A (zh) * 2017-11-29 2018-05-04 云南露源野生真菌研究所（有限合伙） 一种云南松种子育苗接种印度块菌的方法
CN110150013A (zh) * 2019-05-31 2019-08-23 中南林业科技大学 一种锥栗菌根化育苗的方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105474992A (zh) 一种基于共生关系的板栗夏块菌菌根苗的培育方法
CN106577281B (zh) 黄花远志茎段组培高成苗率培育方法
CN103070013A (zh) 一种人工接种培育夏块菌根苗的方法
CN101116424B (zh) 高效诱导培养百合小鳞茎的方法
CN105475067A (zh) 一种基于共生关系的板栗印度块菌菌根苗的培育方法
CN105993865A (zh) 一种栓皮栎无菌苗的培育方法
CN107278851A (zh) 毛竹实生苗的培育方法
CN108260532A (zh) 一种黄精的种子组培繁育方法
CN103749154B (zh) 一种促进块菌菌根苗交叉感染的培养基质及其使用方法
CN105165627B (zh) 一种花榈木组培消毒灭菌配方和组培方法
CN105075858B (zh) 一种白及种子的液体快速繁殖方法
CN104164472B (zh) 一种茄子抗褐纹病的室内鉴定方法
CN103931495A (zh) 一种铁皮石斛组培繁育方法
CN103688856B (zh) 一种滇桂艾纳香药材的快速繁殖方法
CN103070014B (zh) 一种悬浮液接种培育夏块菌根苗的方法
CN105917913A (zh) 一种松露与麻栎培育菌根苗的方法
CN104719168B (zh) 利用间歇浸没生物反应器培育白芨种苗的方法
CN106613960B (zh) 一种海伦兜兰愈伤组织再生体系快速繁殖方法
CN106119120A (zh) 一种根肿菌接种用营养基质及其制备方法
CN105684910B (zh) 细叶石斛的组培快繁方法
CN107466863B (zh) 一种北京花楸组织培养方法
CN103283604B (zh) 百合组织培养中脱除外植体内生菌的方法
CN106665355B (zh) 一种岩笋组织培养育苗方法
CN106069780B (zh) 一种采用白及块茎进行组培育种的技术
CN109329059A (zh) 一种稻草石蒜组织培养的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20160413

RJ01 Rejection of invention patent application after publication