CN107966579A - 一种具有生化、酶免及化学发光快速检测系统及方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种具有生化、酶免及化学发光快速检测系统及方法,系统包括检测卡和检测仪,具有执行多种不同检测方法功能,所述检测卡设有一个以上试剂杯、样品杯、生理盐水杯、清洗剂杯和清洗水杯。所述样品杯为单孔杯或内部连通的双孔杯,双孔杯包括位于检测卡外侧的外侧杯和相对应的内侧杯,外侧杯的底部低于内侧杯的底部。所述检测仪包括控制及数据处理单元、一个吸样针及转移单元、检测盘旋转系统、检测单元、针清洗系统和检测杯废液排除单元;所述检测盘旋转系统带动检测卡高速旋转时,可将双孔杯全血的血细胞离心至外侧杯外壁,随后细胞由于比重较大沉降于外侧杯底部,内侧杯集聚血浆。系统具有对高值样本不另消耗试剂即可重测功能。
Description
技术领域
本发明涉及医疗检验领域,特别是一种具有生化、酶免及化学发光快速检测系统及方法。
背景技术
现有全自动生化分析仪与以往的生化分析仪相比已有较大进步,但使用中还存在一定的不足。比如由于仪器检测所需样本为血清,检测前需要预先将全血离心分离;检测前还需专业人员设置各项目参数,并将样本和试剂摆放至样品位和试剂位;另外各检测项目所用第一试剂和第二试剂均不相同,检测每个项目均需向不同检测杯中先添加第一试剂,再添加血清,然后添加第二试剂,各试剂瓶和检测杯占用空间较大,操作步骤较为繁琐,检测所需清洗液消耗较大,产生的废液也较多,仪器检测耗时较长,给使用者带来不便;大瓶试剂长时间敞开及检测试剂针反复取试剂,可导致试剂实际成分含量改变,影响检测结果。临床工作中部分样本含量常远高于试剂及仪器设计的检测范围,现有的生化仪在第一次检测发现样本含量过高时,需要再次采用将样本稀释后,重新用稀释后的样本,加试剂进行检测,这样的操作需要另消耗试剂和样本,且浪费时间。而现有的快速生化仪及免疫分析仪主要采用干试纸技术,虽然较为方便快速,但由于技术局限,部分项目无法检测,且干试纸技术检测结果准确性较差。目前分别在不同的仪器上进行生化检测、酶标检测或化学发光检测,尚没有一台可以快速方便,且同时具有生化、酶标及化学发光检测的分析仪。该系统也可以设计为适合环保、食品等其它领域应用的系统装置。
发明内容
发明目的:本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足,提供一种具有生化、酶免及化学发光快速检测系统及方法。
为了解决上述技术问题,本发明提供了一种具有生化、酶免及化学发光快速检测系统,包括检测卡和检测仪。所述检测卡上设有一个样品杯和一个以上试剂杯,各杯独立与其它杯互不相通,检测项目的所有试剂和样品均在该检测卡上;所述样品杯用于放置样品;所述各试剂杯分别预装各项目检测所需不同试剂,每个项目都具有一个第一试剂杯,每个项目在对应第一试剂杯中完成反应并检测;样品杯用于放置样品。
本发明中,所述检测卡上还设有第二试剂杯,分别预装各检测项目所需的第二试剂,检测时由吸样针将指定的第二试剂按照检测项目要求量及顺序转移至指定的第一试剂杯中,经混匀反应后进行光学检测。
本发明中,检测卡还设有清洗剂杯,清洗剂杯预装清洗剂,用于对吸样针内外进行清洗。
本发明中,所述检测卡还设有水杯,水杯预装蒸馏水或生理盐水,用于清洗吸样针、稀释样品或稀释检测结果超范围的反应液。当仪器不设外置清洗水瓶、泵及管路时,吸样针直接连接稀释器,需要清洗吸样针时,先至清洗剂杯吸取一定量清洗剂,至仪器废液排出位排出,之后从第一清洗水杯吸取水至废液排出位排出,再从第二清洗水杯吸取清洗水,至废液排出位排出;吸样针清洗后可以用于吸取其它试剂,或根据试剂的污染程度,设置不同的清洗次数,以及是否选用清洗剂等不同流程。吸样针进入清洗剂杯及清洗水杯时,其外部接触清洗剂及清洗水而得到清洗,多次接触得到较好清洗,吸样针内部因吸入清洗剂及清洗水,并排出而得到有效清洗。
本发明中,所述双孔杯内部连通,包括位于检测卡外侧的外侧杯和对应的内侧杯,外侧杯与内侧杯顶部平齐,外侧杯的底部低于内侧杯的底部。检测时检测卡旋转系统带动检测卡高速旋转,样品杯中血细胞离心至外侧杯外壁,停止离心后血样中离心至外侧杯外壁的细胞,由于比重较大沉降于外侧杯底部,内侧杯及外侧杯上部为血浆。
本发明中,所述检测卡上还设有空白检测杯,其中不预装任何试剂,当仪器检测的任意一个第一试剂杯最终反应液吸光度OD值大于1.6以上的预先设定值时,吸样针自动吸取生理盐水杯中的生理盐水,加入空白检测杯中,并吸取吸光度超设定OD值范围的第一试剂杯中的部分反应液,加入到该空白检测杯中,稀释混匀后重新检测,稀释倍数为0.5-20倍。仪器根据对稀释后反应液检测的吸光度,再次计算获得更准确的检测结果,而无需吸取新的样本和试剂就可以对超浓度范围的样本稀释重测。
本发明中,检测卡附有特定标识,检测仪具有自动识别该标识的识读装置,检测仪可以通过该特定标识自动识别检测卡信息,包括检测卡类型、检测项目、检测卡是否在有效期、各检测项目的加样量、加样流程、检测条件、标准曲线等参数信息。具体的是,特定标识可以是条码、二维码或芯片;将检测卡置于旋转装置时,检测卡条码自动旋转经过检测仪的检测卡识读区,或人工将检测卡条码对准检测仪识读区进行识读。
本发明中,检测卡上的样品杯为单孔杯,样品杯内预装定量溶血剂,直接对样品进行稀释和溶血,仪器吸样针直接吸取该样品杯中的稀释溶血后样品进行检测,无需离心分离血浆。
本发明中,检测卡上还有一个血红蛋白检测杯,其中预装定量试剂,检测时人工或吸样针将定量溶血样品加入血红蛋白检测杯中,全血与溶血剂稀释、溶血并混匀后,测定杯中血红蛋白含量,根据血红蛋白与红细胞含量正相关的原理,推算该血样中红细胞及血浆的比例及含量。由于不同个体全血中血浆含量不同,分离获得血浆量不同,在获得该血样的红细胞及血浆含量及总取用的全血量后,并根据总加入稀释液量,就可以更准确计算出全血样品中的血浆中各成分实际含量。
计算公式:血浆占全血的体积比=100%-(测得的血色素浓度×因子K)%,其中血色素浓度单位为g/l时,因子K≥30,其它单位时可按照相应比例计算K因子。所有的检测结果都根据加入的血浆量计算各种成份在血浆中的浓度。该方法适用于生化、酶标和化学发光检测结果分析。
本发明中,所述检测仪包括控制及数据处理单元、吸样针及转移单元、温控单元、检测单元和清洗单元;控制及数据处理单元控制仪器各单元间的协调工作,处理检测数据并计算检测结果等;检测过程中,仪器的吸样针将自动按照检测程序要求吸取、分配样本及试剂,各项目的反应及检测集中在检测卡的各第一试剂杯中完成;
吸样针及转移单元由一个吸样针、一个定量稀释器、连接管路、阀门以及电机组成,用于自样品杯中吸取样品加入到第一试剂杯中,随后吸取第二试剂杯中定量的第二试剂加入到对应的第一试剂杯中;检测单元包括光源和检测器,用于执行检测;
吸样针清洗单元包括吸样针、清洗水瓶、连接管路、阀门、稀释器、清洗池和排液泵组成,用于对吸样针内外清洗。其中吸样针清洗单元与吸样针及转移单元共用吸样针、阀门和定量稀释器。
本发明中,检测仪具有多个配套检测卡,应用不同检测卡时,仪器自动识别各检测卡类型,按照各检测卡预先设置的流程对样本进行处理并检测,自动计算并报告检测结果。
本发明中,部分检测卡的第一试剂杯与样品杯为同一结构,应用时直接将样品加入同一检测卡的各不同第一试剂杯中进行反应和处理,并在该杯中完成全部反应过程和检测,各第一试剂杯完成一个项目的检测。
本发明中,吸样针定量吸取检测卡上的样品及试剂,通过第一电机和第二电机分别控制吸样针上下及水平运动,实现样品和试剂转移,而不是通过流动的方式实现。
本发明中,搅拌混匀的方式包括空气搅拌、检测杯内置玻璃球滚动搅拌、检测盘往复旋转搅拌或快速转动急停。
本发明中,仪器还在检测杯清洗针对应位置设有磁吸引装置,用于吸取检测杯内液体前,分离杯内的免疫磁珠。
本发明中,温控单元为温育槽或温育仓,检测卡位于温育仓内,温育仓具有封闭、避光和恒温加热装置,确保检测卡工作时处于35-45℃内的某一恒温状态,如37±0.5℃。
本发明中,进行化学发光免疫项目检测时,仪器自动关闭发光光源,在按照流程处理完进行检测时,通过设置在第一试剂杯上部的检测器,对反应结束后检测杯内发光底物的发光强度进行检测,并根据检测获得的信号计算结果。
本发明中,当仪器检测反应液吸光度OD值大于1.6以上的预先设定值时,吸样针自动吸取生理盐水杯中的生理盐水,对相应试剂杯中反应液进行稀释后重新检测,稀释倍数为0.5-20倍。仪器根据稀释后的吸光度再次计算获得更准确的检测结果,无需重新吸取新的样本和试剂进行稀释重新检测。
根据不同检测方法,检测结果计算方式有所不同:
A.对于生化终点法、酶标检测法及化学发光检测法,
稀释前反应液浓度=稀释后反应液吸光度×稀释倍数×系数K1,其中K1为稀释前反应液吸光度与浓度的关系系数,K1为0.1~500间任意数值,K1值根据项目不同有差异;
B.对于生化速率法和两点法检测,
稀释前反应液浓度=稀释后反应液吸光度×稀释倍数×K2,其中K2为稀释前反应液浓度与吸光度/时间值的关系系数,K2为0.1~3000间任意数值,K2值根据项目不同有差异。在速率法检测时,由于时间控制不精确,计算获得的结果不一定非常精确,实验证明该方法获得的检测结果远远优于其他方法所获得的检测结果。
本发明公开了一种具有生化、酶免及化学发光快速检测系统及方法,其特征在于,该系统检测卡的样品杯为两个相连的双孔杯,检测卡上还设有生理盐水杯。对全血血样进行生化检测时包括下列步骤:
步骤1:取定量全血加入到双孔样品杯中;
步骤2:将检测卡放在检测仪的检测卡转动盘上,开启检测键,吸样针自生理盐水杯中吸取定量生理盐水,加入双孔样品杯中并混匀,检测卡转动盘高速旋转将样品杯中血细胞向外侧杯移动,将全血中的血细胞离心至外侧杯外壁,停止离心后血样中离心至外侧杯外壁的细胞,由于比重较大沉降于外侧杯底部,内侧杯及外侧杯上部为血浆;
步骤3:吸样针从内侧杯中吸取定量稀释的血浆,加入各第一试剂杯中,吸样针完成样品分配完成后,仪器自动将第一试剂杯中试剂与血浆混匀;
步骤4:血浆分配完成后,吸样针转移至第一清洗剂杯位,吸取定量第一清洗剂,吸样针移动至清洗池,排出吸样针内吸入的清洗剂,之后通过稀释器从清洗水瓶中抽取清洗水,清洗水经吸样针注入清洗池中,对吸样针内外进行清洗;
步骤5:吸样针吸取该项目第二试剂加入该项目对应第一试剂杯中,仪器自动混匀第一试剂杯中加入第二试剂后的液体;
步骤6:吸样针转移至第一清洗剂杯位,吸取定量第一清洗剂,吸样针移动至清洗池,排出吸样针内吸入的清洗剂,之后通过稀释器从清洗水瓶中抽取清洗水,清洗水经吸样针注入清洗池中,对吸样针内外进行清洗;
步骤7:仪器对第一试剂杯中液体进行检测,仪器旋转电机驱动带动检测卡旋转,并在需要吸取、分配样品及试剂的位置短暂停顿,检测单元在每一旋转周期中都对各第一试剂杯进行一次多波长检测,每次都记录检测结果,最后根据全部检测数据计算各杯检测项目的最终检测结果。
检测数据主要是比较各第一试剂杯原始试剂的吸光度值、第一试剂与样本混匀后的吸光度值、第一试剂与样本反应最终获得的吸光度值,以及第一试剂、样本、第二试剂反应获得的最终吸光度值,进行比较计算检测结果。在计算速率法和两点法检测结果时,需要引入检测吸光度变化与时间的相关性。由于这些检测结果的计算及方法已非常成熟,而非本发明的技术点,因此在本发明中不再详细描述。
本发明还公开了一种具有生化、酶免及化学发光快速检测系统及方法,其特征在于,该系统还具有执行酶标检测的检测卡,检测卡为单一检测项目设定两个以上的试剂杯,检测时可对一个检测项目应用两种以上试剂,且该检测卡上的第一试剂杯也承担样品杯的功能,使用时样品直接加入检测卡的各第一试剂杯中;各第一试剂杯内预先包被的第一试剂不同,所检测的项目也不同。该系统执行酶标检测时包括下列步骤:
步骤1:取定量样本分别加入到检测卡的各第一试剂杯中,该检测卡样品杯和第一试剂杯为同一结构;
步骤2:将检测卡放在检测仪的检测卡转动盘上,开启检测键;旋转电机带动检测卡间隔1分钟以上,反复往返转动一次以上,使第一试剂杯中的样品流动与杯壁上预先包被的免疫物(抗原或抗体)充分接触并结合;
步骤3:当样品与第一试剂杯内包被的免疫物充分结合后,检测杯废液排除单元将第一试剂杯中的液体全部吸出;吸样针吸取定量清洗剂加入到第一试剂杯,检测卡来回往返旋转数次,充分洗涤杯中残余样本;检测杯清洗针再次伸入第一试剂杯底,将第一试剂杯中的液体全部吸出;重复该清洗步骤2次以上;
步骤4:吸样针从第二试剂杯中吸取定量第二试剂加入到该项目第一试剂杯中,如果加入的第二试剂相同,则吸样针在各次加第二试剂间不需要清洗,而是连续吸取第二试剂,如果各检测第二试剂不同则中间需要清洗吸样针;随后旋转电机带动检测卡间隔1分钟以上,反复往返转动一次以上,使第一试剂杯中的液体流动与杯壁上结合的免疫复合物充分接触并结合,当第二试剂与第一试剂杯内的免疫复合物充分结合后,检测杯清洗针伸入第一试剂杯底,将第一试剂杯中的液体全部吸出;吸样针吸取定量清洗剂加入到第一试剂杯,检测卡来回往返旋转数次,充分洗涤杯中残余样本;检测杯清洗针再次伸入第一试剂杯底,将第一试剂杯中的液体全部吸出;重复以上步骤清洗2次以上;
步骤5:吸样针从第三试剂杯吸取第三试剂加入第一试剂杯,如果加入的第三试剂相同则不需要清洗连续吸样,如果不同则中间需要清洗吸样针,旋转电机带动检测卡反复往返旋转混匀第一试剂杯中液体;混匀后检测卡旋转一周以上,仪器检测单元对各第一试剂杯分别在此过程中进行检测记录全部检测获得的信息;
步骤6:部分检测试剂杯项目需要加入第四试剂,则吸样针自第四试剂杯中吸取一定量的第四试剂加入第一试剂杯后混匀,检测卡旋转一周以上,仪器检测单元对各第一试剂杯分别进行检测,获得最终检测结果。
步骤7:仪器自动计算出各杯的检测结果,包括扣除各杯本底值的检测结果,以及参照标准品对照比较的结果。
本发明还公开了一种具有生化、酶免及化学发光快速检测系统及方法,其特征在于,检测仪还具有磁吸引装置,且具有在第一试剂杯移动轨迹上部设有检测光信号的检测器,具备化学发光检测功能,该系统的检测卡第一试剂杯也同时承担样品杯的功能,在该系统进行化学发光检测时包括如下步骤:
步骤1:吸取定量样本分别加入到各第一试剂杯中,该检测卡样品杯和第一试剂杯为同一结构;
步骤2:将检测卡放在检测仪的检测卡转动盘上,开启检测键;检测卡转动盘带动检测卡每间隔一定时间往返旋转1次以上,使第一试剂杯中磁珠上标记的免疫物(抗原或抗体)和样品充分接触反应;
步骤3:当样品与第一试剂杯内的免疫磁珠充分结合后,磁吸引装置靠近第一试剂杯外侧,将磁珠吸引至杯侧壁,检测杯清洗针伸入第一试剂杯底,将第一试剂杯中的液体全部吸出;吸样针吸取定量清洗剂加入到第一试剂杯,磁吸引装置离开第一试剂杯,磁珠悬浮在第一试剂杯中,检测卡来回往返旋转数次,充分洗涤杯中残余样本;磁吸引装置靠近第一试剂杯外侧,将磁珠吸引至侧壁,检测杯清洗针再次伸入第一试剂杯底,将第一试剂杯中的液体全部吸出;检测卡各第一试剂杯均按照上述方式重复以上步骤清洗2次以上;
步骤4:吸样针从第二试剂杯中吸取定量第二试剂加入到该项目第一试剂杯中,磁吸引装置离开第一试剂杯,磁珠悬浮在第一试剂杯中,检测卡往返转动混匀第一试剂杯中液体;当第二试剂与第一试剂杯内的免疫复合物充分结合后,磁吸引装置靠近第一试剂杯一侧,将磁珠吸引至侧壁,检测杯清洗针伸入第一试剂杯底,将第一试剂杯中的液体全部吸出;吸样针吸取定量清洗剂加入到第一试剂杯,磁吸引装置离开第一试剂杯,磁珠悬浮在第一试剂杯中,检测卡来回往返旋转数次,充分洗涤杯中残余样本;磁吸引装置靠近第一试剂杯,将磁珠吸引至侧壁,检测杯清洗针再次伸入第一试剂杯底,将第一试剂杯中的液体全部吸出;检测卡各第一试剂杯均再次按照上述方式重复以上步骤清洗2次以上。且如果在该过程中加入的第二试剂相同则吸样针不需要清洗连续吸取和分配试剂,但如果加入的第二试剂不同则需要在吸取不同试剂前对吸样针进行清洗;
步骤5:吸样针从第三试剂杯吸取第三试剂加入第一试剂杯,孵育一段时间后将未结合的第三试剂清洗掉;如果加入的第三试剂相同则不需要清洗吸样针,连续吸取第三试剂并分配,如果第三试剂不同则需要清洗吸样针,旋转电机带动检测卡反复往返旋转混匀第一试剂杯中液体;
步骤6:检测时电机驱动检测卡匀速旋转,检测装置都对各试剂杯上方进行光信号检测,记录检测结果。加入发光底物之前先检测各杯的本底值,加入发光底物后再次检测各杯的发光信号,通过与标准品比较计算出样本的各项目检测结果。
有益效果:本发明通过使用检测仪及专用检测卡,免除参数设置及试剂摆放,可以方便快速完成检测,同时提高检测结果的精度;可完成多个生化、酶免及化学发光项目检测,还可以执行双试剂检测,并自动扣除样本空白;仪器仅有一个检测卡转动盘,装载了全部需要的试剂和样品,且所需要清洗次数减少,而且清洗确实可靠,有效减少试剂浪费和交叉污染;检测时专用检测卡放置于检测卡转动盘上,且只有一个针完成试剂和样品的吸取及分配;仪器检测卡转动盘可带动检测卡快速旋转产生离心力,自动分离全血中的血浆。本发明检测系统无须另取试剂和样品,即可快速完成超范围样本的检测,节省试剂和样本,提高效率。因此本发明的一种具有生化、酶免及化学发光快速检测系统及方法更方便、更准确、更经济、更环保,该系统也适用于食品、环保等其它领域的样品快速分析。
附图说明
图1为本发明整体结构示意图。
图2-1为本发明检测卡结构示意图,样品杯分为内侧杯和外侧杯,样品杯位于检测卡内圈;
图2-2为本发明检测卡结构示意图,样品杯分为内侧杯和外侧杯,样品杯位于检测卡外圈;
图2-3为本发明检测卡结构示意图,样品杯为单孔杯;
图3-1为散射光检测装置示意图,图3-2为透射光检测装置示意图,图3-3为透射光和散射光复合检测装置示意图;
图4为样品杯为双杯的结构示意图;
图5-1检测杯废液排除单元,其中磁吸引装置远离检测杯;图5-2检测杯废液排除单元,其中磁吸引装置靠近检测杯;
图6为仪器温育仓结构示意图。
具体实施方式
下面将结合附图和具体实施方式对本发明做进一步说明。
实施例1:
如图1、图2和图4,本实施例中,仪器设有清洗水瓶,样品针及转移单元工作原理:将检测卡放在检测仪的检测卡位,则试剂杯置于环形温育槽14内,将采血管11伸到吸样针12下,开启检测键;第一阀门18打开,第二阀门19关闭,稀释器20下拉,血样吸入稀释器,第一电机16和第二电机17分别控制吸样针上下、左右移动至样品杯1上方,稀释器上推,将样品加入样品杯中;吸样针转移至第一清洗剂杯6位,吸取定量清洗剂,而后吸样针移动至清洗池,排出吸样针内吸入的清洗剂;之后吸样针12移动至生理盐水杯4上方,吸样针吸取定量生理盐水加入样品杯中,吸样针反复抽吸数次确保样品稀释混匀;吸样针从样品杯中吸取定量稀释样品,加入到检测卡的各项目第一试剂杯10中,并用吸样针吸冲方式混匀;在每次样品分配并与第一试剂杯中试剂混匀后,吸样针转移至第一清洗剂杯6位,吸取定量清洗剂,而后吸样针移动至清洗池,排出吸样针内吸入的清洗剂;之后第一阀门18关闭,第二阀门19打开,稀释器20下拉,清洗水瓶21中清洗水进入稀释器20,之后第一阀门18打开,第二阀门19关闭,稀释器20上推,针内由稀释器20向吸样针12喷出清洗水进入清洗池内,对针内外部同时清洗,针内、外部清洗完成后,原关闭的第一泵13开始工作,将清洗池中的清洗液体排出;随后稀释器再次向吸样针喷出清洗水进入清洗池内,对针内外部同时清洗,针内、外部清洗完成后,原关闭的第一泵13再次工作,将清洗池中的清洗水排至废液收集器中;
吸样针进入其中一项目第二试剂杯8,吸取该项目第二试剂加入该项目对应第一试剂杯10中;吸样针每吸取一次第二试剂加入第一试剂杯中后,对第一试剂杯中液体进行吸冲混匀,完成后吸样针就移动至第一清洗剂杯6吸取定量清洗剂,而后移动至清洗池排掉,同时对针内外表进行清洗;部分项目吸取第二试剂并混匀后,吸样针还需移动至第二清洗剂杯7,从第二清洗剂杯吸取定量清洗剂,移动到清洗池排掉,并对针内外表进行清洗;针内由稀释器吸取清洗水进行针内部清洗,针内部清洗完成后,关闭排液泵,稀释器吸取清洗水至清洗池对针外壁进行清洗,排液泵将清洗池中清洗水排入废液收集器中;
第一试剂杯在加入样品前后都检测,在加入第二试剂混匀后也检测,各项目根据检测项目需要进行检测,记录检测结果。
实施例2:
本实施例中,与实施例1的区别在于,吸样针吸取样品加入到第一个第一试剂杯之后混匀,对该样本进行检测后,再吸取样品加入第二个第一试剂杯后混匀,并检测。
实施例3:
如图3-1~图3-3,本实施例中,光学检测装置22设置于检测卡各杯口上方,用于对第一试剂杯中试剂本底、试剂样本混合液进行化学发光检测;光源24和光学检测装置23设置于检测卡各杯位相匹配的凹槽壁两侧,用于对第一试剂杯中试剂本底、试剂和样本混合液进行透射光检测。
实施例4:
如图4和图6,本实施例中,样品杯相通,但外侧2低内侧3高;检测时将样品加入样品杯中,随后检测卡5安装在检测卡固定盘上,第四电机15可驱动检测盘旋转系统旋转,并带动其上的检测卡旋转;当检测样本为全血需要分离血浆时,检测前电机带动转盘及检测卡高速旋转,将样品杯中血细胞向外侧移动并沉入外侧杯的低处与血浆离心分离,而血浆主要分布在样品杯的内侧部分;血浆分离完成后仪器采用该样品杯内侧分离开的血浆进行检测。在样品分配、试剂分配及检测过程中,吸样针的吸取及分配与检测卡旋转相配合。检测过程中,电机匀速转动,并在吸取和分配试剂的位置暂停。
实施例5:
如图2-3,检测卡的样品杯为单孔,其中不预先加入任何试剂或稀释液,接受血清、血浆或全血直接进行检测;
实施例6:
如图2-3,检测卡的样品杯为单孔,其中预装定量具有溶血功能和稀释功能的试剂,使用时在样品杯内直接加入定量全血样本,样本加入后形成溶血样本,经混匀后进行检测。
实施例7:
如图5-1~图5-2,本实施例与实施例1的区别在于,本实施例检测仪还设有检测杯废液排除单元,包括第二泵30、连接管路、第五电机26和检测杯清洗针27;检测酶免疫项目和化学发光项目时,每次反应完成后检测杯清洗针27在第五电机26的控制下,自动将第一试剂杯中检测废液,通过第二泵30排至废液收集器29中。
实施例8:
本实施例中,检测卡还设有第三试剂杯,预装显色剂或发光底物,分别用于酶免疫和化学发光项目反应结束后,向第一试剂杯中加入第三试剂,之后对第一试剂杯液体进行检测。
实施例9:
如图5-1~5-2,本实施例检测仪在检测杯清洗针27对应位置设有磁吸引装置31,当第三电机25控制磁吸引装置31靠近第一试剂杯10时,会将免疫磁珠28吸引至第一试剂杯侧壁,之后第五电机26控制检测杯清洗针27向下移动,吸取第一试剂杯检测废液,通过第二泵30排至废液收集器29中,将第一试剂杯内的免疫磁珠分离出来;之后第五电机26控制检测杯清洗针27向上移动,第三电机25控制磁吸引装置31离开第一试剂杯。
检测化学发光项目时,仪器自动关闭发光光源,检测第一试剂杯在反应结束后,加入发光底物的发光强度。
实施例10:
如图6,整个检测卡设置在温育仓32内,检测卡上设有第一试剂杯10、第二试剂杯8、清洗剂杯6和清洗水杯9,加热装置33控制温育仓内保持恒温。
实施例11
本实施例检测卡上还有一个血红蛋白检测杯,其中预装定量溶血剂,检测时人工或吸样针将定量全血样品加入血红蛋白检测杯中,全血与溶血剂稀释、溶血并混匀后,测定杯中血红蛋白含量,根据血红蛋白与红细胞含量正相关的原理,推算该血样中红细胞及血浆的比例及含量。由于不同个体全血中血浆含量不同,分离获得血浆量不同,在获得该血样的红细胞及血浆含量及总取用的全血量后,并根据总加入稀释液量,就可以更准确计算出全血样品中的血浆中各成分实际含量。
计算公式:血浆占全血的体积比=100%-(测得的血色素浓度×因子K)%,其中血色素浓度单位为g/l时,因子K≥30,其它单位时可按照相应比例计算K因子。所有的检测结果都根据加入的血浆量计算各种成份在血浆中的浓度。该方法适用于生化、酶标和化学发光检测结果分析。
Claims (10)
1.一种具有生化、酶免及化学发光快速检测系统及方法,其特征在于,检测系统包括专用检测卡和配套专用检测仪;所述检测卡上设有一个样品杯和一个以上试剂杯,各杯独立与其它杯互不相通,检测项目的所有试剂和样品均在该检测卡上;所述样品杯用于放置样品;所述各试剂杯分别预装各项目检测所需不同试剂,每个项目都具有一个第一试剂杯,每个项目在对应第一试剂杯中完成反应并检测。
2.根据权利要求1所述的一种具有生化、酶免及化学发光快速检测系统及方法,其特征在于,所述检测卡上还设有第二试剂杯,分别预装各检测项目所需的第二试剂,检测时由吸样针将指定的第二试剂按照检测项目要求量及顺序转移至指定的第一试剂杯中,经混匀反应后进行检测。
3.根据权利要求1所述的一种具有生化、酶免及化学发光快速检测系统及方法,其特征在于,检测卡还设有清洗剂杯,清洗剂杯预装清洗剂,用于对吸样针内外进行清洗。
4.根据权利要求1所述的一种具有生化、酶免及化学发光快速检测系统及方法,其特征在于,所述样品杯为内部连通的双孔杯,包括位于检测卡外侧的外侧杯和对应的内侧杯,外侧杯与内侧杯顶部平齐,外侧杯的底部低于内侧杯的底部;检测前检测卡旋转系统带动检测卡高速旋转,样品杯中血细胞离心至外侧杯外壁,停止离心后血样中离心至外侧杯外壁的细胞由于比重较大沉降于外侧杯底部,内侧杯及外侧杯上部为血浆。
5.根据权利要求1所述的一种具有生化、酶免及化学发光快速检测系统及方法,其特征在于,所述检测仪包括控制及数据处理单元、吸样针及转移单元、温控单元、检测单元和清洗单元;控制及数据处理单元控制仪器各单元间的协调工作,处理检测数据并计算检测结果等;检测过程中,仪器的吸样针将自动按照检测程序要求吸取、分配样本及试剂;
吸样针及转移单元由一个吸样针、一个定量稀释器、连接管路、阀门以及电机组成,用于自样品杯中吸取样品加入到第一试剂杯中,随后吸取第二试剂杯中定量的第二试剂加入到对应的第一试剂杯中;检测单元包括光源和检测器,用于执行检测;
吸样针清洗单元包括吸样针、清洗水瓶、连接管路、阀门、稀释器、清洗池和排液泵组成,用于对吸样针内外清洗,其中吸样针清洗单元与吸样针及转移单元共用吸样针、阀门和定量稀释器。
6.根据权利要求1或5所述的一种具有生化、酶免及化学发光检测系统及方法,其特征在于,当仪器检测反应液吸光度OD值大于1.6以上的预先设定值时,吸样针自动吸取水杯中的蒸馏水,对相应第一试剂杯中反应液进行稀释后重新检测,稀释倍数为0.5-20倍;仪器根据稀释后重新测得的吸光度再次计算获得更准确的检测结果,无需重新吸取新的样本和试剂进行稀释重新检测。
7.根据权利要求1、4或5所述的一种具有生化、酶免及化学发光快速检测系统,其特征在于,该系统检测卡的样品杯为两个相连的双孔杯,检测卡上还设有生理盐水杯,对全血血样进行生化检测时包括下列步骤:
步骤1:取定量全血加入到双孔样品杯中;
步骤2:将检测卡放在检测仪的检测卡转动盘上,开启检测键,吸样针自生理盐水杯中吸取定量生理盐水,加入双孔样品杯中并混匀,检测卡转动盘高速旋转将样品杯中血细胞向外侧杯移动,将全血中的血细胞离心至外侧杯外壁,停止离心后血样中离心至外侧杯外壁的细胞,由于比重较大沉降于外侧杯底部,内侧杯及外侧杯上部为血浆;
步骤3:吸样针从内侧杯中吸取定量稀释的血浆,加入各第一试剂杯中,吸样针完成样品分配完成后,仪器自动将第一试剂杯中试剂与血浆混匀;
步骤4:血浆分配完成后,吸样针转移至第一清洗剂杯位,吸取定量第一清洗剂,吸样针移动至清洗池,排出吸样针内吸入的清洗剂,之后通过稀释器从清洗水瓶中抽取清洗水,清洗水经吸样针注入清洗池中,对吸样针内外进行清洗;
步骤5:吸样针吸取该项目第二试剂加入该项目对应第一试剂杯中,仪器自动混匀第一试剂杯中加入第二试剂后的液体;
步骤6:吸样针转移至第一清洗剂杯位,吸取定量第一清洗剂,吸样针移动至清洗池,排出吸样针内吸入的清洗剂,之后通过稀释器从清洗水瓶中抽取清洗水,清洗水经吸样针注入清洗池中,对吸样针内外进行清洗;
步骤7:仪器对第一试剂杯中液体进行检测,仪器旋转电机驱动带动检测卡旋转,并在需要吸取、分配样品及试剂的位置短暂停顿,检测单元在每一旋转周期中都对各第一试剂杯进行一次多波长检测,每次都记录检测结果,最后根据全部检测数据计算各杯检测项目的最终检测结果。
8.一种具有生化、酶免及化学发光快速检测系统,其特征在于,该系统还具有执行酶标检测的检测卡,检测卡为单一检测项目设定两个以上的试剂杯,检测时可对一个检测项目应用两种以上试剂,且该检测卡上的第一试剂杯也承担样品杯的功能,使用时样品直接加入检测卡的各第一试剂杯中;各第一试剂杯内预先包被的第一试剂不同,所检测的项目也不同,该系统执行酶标检测时包括下列步骤:
步骤1:取定量样本分别加入到检测卡的各第一试剂杯中,该检测卡样品杯和第一试剂杯为同一结构;
步骤2:将检测卡放在检测仪的检测卡转动盘上,开启检测键;旋转电机带动检测卡间隔1分钟以上,反复往返转动一次以上,使第一试剂杯中的样品流动与杯壁上预先包被的免疫物(抗原或抗体)充分接触并结合;
步骤3:当样品与第一试剂杯内包被的免疫物充分结合后,检测杯废液排除单元将第一试剂杯中的液体全部吸出;吸样针吸取定量清洗剂加入到第一试剂杯,检测卡来回往返旋转数次,充分洗涤杯中残余样本;检测杯清洗针再次伸入第一试剂杯底,将第一试剂杯中的液体全部吸出;重复该清洗步骤2次以上;
步骤4:吸样针从第二试剂杯中吸取定量第二试剂加入到该项目第一试剂杯中,如果加入的第二试剂相同,则吸样针在各次加第二试剂间不需要清洗,而是连续吸取第二试剂,如果各检测第二试剂不同则中间需要清洗吸样针;随后旋转电机带动检测卡间隔1分钟以上,反复往返转动一次以上,使第一试剂杯中的液体流动与杯壁上结合的免疫复合物充分接触并结合,当第二试剂与第一试剂杯内的免疫复合物充分结合后,检测杯清洗针伸入第一试剂杯底,将第一试剂杯中的液体全部吸出;吸样针吸取定量清洗剂加入到第一试剂杯,检测卡来回往返旋转数次,充分洗涤杯中残余样本;检测杯清洗针再次伸入第一试剂杯底,将第一试剂杯中的液体全部吸出;重复以上步骤清洗2次以上;
步骤5:吸样针从第三试剂杯吸取第三试剂加入第一试剂杯,如果加入的第三试剂相同则不需要清洗连续吸样,如果不同则中间需要清洗吸样针,旋转电机带动检测卡反复往返旋转混匀第一试剂杯中液体;混匀后检测卡旋转一周以上,仪器检测单元对各第一试剂杯分别在此过程中进行检测记录全部检测获得的信息;
步骤6:部分检测试剂杯项目需要加入第四试剂,则吸样针自第四试剂杯中吸取一定量的第四试剂加入第一试剂杯后混匀,检测卡旋转一周以上,仪器检测单元对各第一试剂杯分别进行检测,获得最终检测结果;
步骤7:仪器自动计算出各杯的检测结果,包括扣除各杯本底值的检测结果,以及参照标准品对照比较的结果。
9.根据权利要求1、7或8所述的一种具有生化、酶免及化学发光快速检测系统,其特征在于,检测仪还具有磁吸引装置,且具有在第一试剂杯移动轨迹上部设有检测光信号的检测器,具备化学发光检测功能,该系统的检测卡第一试剂杯也同时承担样品杯的功能,在该系统进行化学发光检测时包括如下步骤:
步骤1:吸取定量样本分别加入到各第一试剂杯中,该检测卡样品杯和第一试剂杯为同一结构;
步骤2:将检测卡放在检测仪的检测卡转动盘上,开启检测键;检测卡转动盘带动检测卡每间隔一定时间往返旋转1次以上,使第一试剂杯中磁珠上标记的免疫物(抗原或抗体)和样品充分接触反应;
步骤3:当样品与第一试剂杯内的免疫磁珠充分结合后,磁吸引装置靠近第一试剂杯外侧,将磁珠吸引至杯侧壁,检测杯清洗针伸入第一试剂杯底,将第一试剂杯中的液体全部吸出;吸样针吸取定量清洗剂加入到第一试剂杯,磁吸引装置离开第一试剂杯,磁珠悬浮在第一试剂杯中,检测卡来回往返旋转数次,充分洗涤杯中残余样本;磁吸引装置靠近第一试剂杯外侧,将磁珠吸引至侧壁,检测杯清洗针再次伸入第一试剂杯底,将第一试剂杯中的液体全部吸出;检测卡各第一试剂杯均按照上述方式重复以上步骤清洗2次以上;
步骤4:吸样针从第二试剂杯中吸取定量第二试剂加入到该项目第一试剂杯中,磁吸引装置离开第一试剂杯,磁珠悬浮在第一试剂杯中,检测卡往返转动混匀第一试剂杯中液体;当第二试剂与第一试剂杯内的免疫复合物充分结合后,磁吸引装置靠近第一试剂杯一侧,将磁珠吸引至侧壁,检测杯清洗针伸入第一试剂杯底,将第一试剂杯中的液体全部吸出;吸样针吸取定量清洗剂加入到第一试剂杯,磁吸引装置离开第一试剂杯,磁珠悬浮在第一试剂杯中,检测卡来回往返旋转数次,充分洗涤杯中残余样本;磁吸引装置靠近第一试剂杯,将磁珠吸引至侧壁,检测杯清洗针再次伸入第一试剂杯底,将第一试剂杯中的液体全部吸出;检测卡各第一试剂杯均再次按照上述方式重复以上步骤清洗2次以上;如果在该过程中加入的第二试剂相同则吸样针不需要清洗连续吸取和分配试剂,但如果加入的第二试剂不同则需要在吸取不同试剂前对吸样针进行清洗;
步骤5:吸样针从第三试剂杯吸取第三试剂加入第一试剂杯,孵育一段时间后将未结合的第三试剂清洗掉;如果加入的第三试剂相同则不需要清洗吸样针,连续吸取第三试剂并分配,如果第三试剂不同则需要清洗吸样针,旋转电机带动检测卡反复往返旋转混匀第一试剂杯中液体;
步骤6:检测时电机驱动检测卡匀速旋转,检测装置都对各试剂杯上方进行光信号检测,记录检测结果;加入发光底物之前先检测各杯的本底值,加入发光底物后再次检测各杯的发光信号,通过与标准品比较计算出样本的各项目检测结果。
10.根据权利要求1、7、8或9所述的一种具有生化、酶免及化学发光快速检测系统及方法,检测卡上还设有血红蛋白检测杯,预装定量试剂,检测时人工或吸样针将定量全血样品加入该血红蛋白检测杯中,全血与溶血剂稀释、溶血并混匀后,仪器测定杯中血红蛋白含量,根据血红蛋白与红细胞含量正相关的原理,推算该血样中红细胞及血浆的比例及含量。
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