CN107912768B - 一种驴胎盘提取物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种驴胎盘提取物及其制备方法，所述驴胎盘提取物将粉碎的驴胎盘在蛋白酶的作用下经超声酶解反应后调节其pH值，冷藏静置，精滤制得的。具体制备方法包括如下步骤：1)将干燥的驴胎盘粉碎，得驴胎盘粉；2)将所述驴胎盘粉和水混合后加入蛋白酶进行超声酶解反应，得酶解产物；3)调节所述酶解产物的pH值至4‑6，然后将所述酶解产物冷藏静置，使酶解产物分层，汲取上清液，过滤得驴胎盘提取物，密封保存。采用本发明的方法制备的驴胎盘提取物，含有一系列的生物活性物质，具有美容和抗衰老的作用。本发明制备驴胎盘提取物的方法，简单易行，生产成本低，易于实现大规模化生产。
Description
技术领域
本发明属于保健品技术领域。更具体地，涉及一种驴胎盘提取物及其制备方法。
背景技术
胎盘，是后兽类和真兽类哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官，由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。因其特殊的屏障功能与内分泌功能，自古以来就为人们所重视。人胎盘又称为“紫河车”，《本草纲目》称其具有“安神养血、补气、益精、解毒、补血”的作用，对“疲劳、消瘦、衰弱者”有奇效，“久服者，耳聪目明，须发黑，延年益寿，有夺造化之功”。近年来，人们对胎盘的研究逐步深入，已由过去单一的人胎盘研究扩展到羊、牛、猪、鹿等动物的胎盘，在加工上也由简单的烘干与水煮发展到生物萃取，使人们对胎盘有了更深入的了解。
据《日用化学工业.科技信息》报道，早在1982年，欧洲化妆品市场上就有11种动物性成分及其提取物作为营养性添加剂加入化妆品中，受到消费者欢迎。主要是利用与人体皮肤组织接近的牛、猪等动物各器官的提取物。据称，配制成的化妆品对皮肤具有保湿、细胞赋活和美容等作用。
中国专利CN106259790A公开了一种驴胎盘保健饼干及其制备方法，提供了一种营养丰富、增强体质、延年益寿、食用方便的保健饼干及其制备方法。目前，有关驴胎盘的研究报道较少，且利用率低。随着国内阿胶产业的扩大，毛驴养殖规模不断扩大，驴胎盘的合理开发利用成为一个亟待解决的问题。
发明内容
本发明的一个目的在于提供一种驴胎盘提取物；驴胎盘提取物中含有蛋白质和生物活性物质，该生物活性物质具有调节内分泌、美容和抗衰老的功效。
本发明的另一个目的在于提供一种驴胎盘提取物的制备方法。
为达到上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种驴胎盘提取物，它是将粉碎的驴胎盘在蛋白酶的作用下经超声酶解反应后调节其PH值，冷藏静置分层，精滤制得的。
一种驴胎盘提取物的制备方法，包括如下步骤：
1)将干燥的驴胎盘粉碎，得驴胎盘粉；
2)将所述驴胎盘粉和水混合后加入蛋白酶进行超声酶解反应，得酶解产物；
3)调节所述酶解产物的pH值至4-6，然后将所述酶解产物进行冷藏静置，使酶解产物分层，汲取上清液，过滤得液态的驴胎盘提取物，密封保存。
优选地，所述蛋白酶为中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、弹性蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶中的一种或多种。
优选地，在步骤1)之前，还包括：将驴胎盘进行水洗，水洗后的驴胎盘于离心机内常温下甩干1h后，再于40-60℃烘箱内烘干，使得驴胎盘的含水率为20％-25％；烘干后的驴胎盘含水率不易过高，含水率太高则驴胎盘提取物不易粉碎、过筛，影响后续的操作；含水率太低，干燥过程中大量耗电易造成能源的浪费。
优选地，所述驴胎盘粉、水和蛋白酶的质量比为1：5-10：0.5-1.5。
优选地，所述超声酶解反应的时间为0.5-4h，温度为45-55℃；优选地，超声设备的频率为30-60KHz。
本发明的超声酶解反应的时间、温度分别与超声设备的超声时间和温度相同。
适宜的超声可以促进酶解反应的进行，但是超声温度、时间、频率应控制在一定范围。这是由于温度过低或超声时间太短，酶解作用不充分；温度过高蛋白酶易失活；但是随着超声时间的延长，超声波产生的空化效应逐渐增强，使驴胎盘中蛋白质的空间结构发生变化，埋藏在蛋白质内部的活性部位暴露并与蛋白酶发生作用，降低驴胎盘提取物的产率；而且超声时间过长还会破坏驴胎盘组织的细胞，进而降低酶解产物的活性。超声频率在一定程度上的增加，使蛋白酶和底物分子的碰撞频率增大，加快酶解反应速度；但是当超声频率过大时蛋白酶分子结构容易发生变化，使酶活性降低，进而降低酶解反应的速率。
优选地，所述冷藏静置的温度为0-8℃，所述冷藏静置的时间为48-120h。
优选地，pH调节剂为乳酸、碳酸钠、碳酸氢钠、柠檬酸、苹果酸的至少一种；优选地，pH调节剂为浓度为90％-99％的L-苹果酸，这是由于L-苹果酸是一种天然酸，广泛应用于食品、医药、日化等行业。具有保鲜功效，利于人体吸收，且酸味温和适中，所以采用L-苹果酸作为pH调节剂。既能调节pH，又可以起到防腐的作用，且易于人体吸收。
优选地，步骤3)中，为了将提取物中的大分子滤掉且制备高纯度的提取物；所述过滤是指采用孔径为0.2-0.8μm的滤板进行过滤，
优选地，一种驴胎盘提取物的制备方法，包括如下步骤：
1)将驴胎盘进行水洗，将水洗后的驴胎盘于离心机内常温下甩干1h后，再于40-60℃烘箱内烘干，使得驴胎盘的含水率为20％-25％；
2)将烘干后的驴胎盘进行粉碎，过20-40目标准筛，得驴胎盘粉；
3)将所述驴胎盘粉和水混合后加入蛋白酶置于频率为30-60KHz的超声设备中于45-55℃进行超声酶解反应0.5-4h，得酶解产物；
4)采用乳酸调节所述酶解产物的pH值至4-6，然后将所述酶解产物于0-8℃之间冷藏静置48-120h，至所述酶解产物分层，汲取上清液，采用孔径为0.2-0.8μm的滤板进行过滤，得驴胎盘提取物，常温下密封保存。
本发明的酶解反应在超声波或搅拌条件下进行；优选地，酶解反应在超声波下进行，这是由于超声波可以将驴胎盘细胞破碎，有利于酶解反应的进行，生物活性物质的渗出。
结合本发明要解决的技术问题，调节Ph值的作用在于：一般情况下，采用酶解法制备某物质时，当酶解反应结束之后，需要高温对蛋白酶进行灭酶变性失活处理，在蛋白酶变性失活的同时，也容易导致部分多肽或其他活性成分发生变化。本发明在酶解反应结束之后调节PH，不仅使得蛋白酶失活，还使所得产物呈弱酸性，不仅适用于保健品，也适用于化妆品领域。因为皮肤只有在正常的pH值范围内，也就是处于弱酸性，才能使皮肤处于吸收营养的最佳状态，此时皮肤抵御外界侵蚀的能力以及弹性、光泽、水分等等，都为最佳状态。
步骤4中对于酶解产物使用冷藏静置法进行分层，低温、静置、自由沉淀，使得上清液更加澄清。相比较萃取分层而言，避免了有机溶剂的污染。
本发明的有益效果如下：
1、采用本发明的方法制备的驴胎盘提取物，含有一系列的生物活性物质，具有美容和抗衰老的作用。
2、本发明制备驴胎盘提取物的方法，简单易行，生产成本低，易于实现大规模化生产。
具体实施方式
为了更清楚地说明本发明，下面结合优选实施例对本发明做进一步的说明。本领域技术人员应当理解，下面所具体描述的内容是说明性的而非限制性的，不应以此限制本发明的保护范围。
实施例1
一种驴胎盘提取物的制备方法，具体如下：
将驴胎盘进行水洗，去除一些表面杂质，然后将水洗后的驴胎盘于离心机内常温下甩干1h后，再于40-60℃烘箱内烘干，得含水率为21％的驴胎盘；将烘干的驴胎盘采用粉碎机进行粉碎，过20目标准筛，得驴胎盘粉；将驴胎盘粉和水在混合器中混合，然后向混合器中加入蛋白酶，再将混合器置于频率为40KHz的超声设备中加热至45℃进行酶解反应0.5h，得酶解产物，其中，驴胎盘粉、水和蛋白酶的质量比为1：5：0.5将酶解产物采用浓度为90％的L-苹果酸调节其pH值为4.5，然后将酶解产物于0-8℃冷藏静置48h，至酶解产物分层，汲取上清液，采用孔径为0.4μm的滤板进行过滤，得驴胎盘提取物，常温下密封保存。
实施例2
一种驴胎盘提取物的制备方法，具体如下：
将驴胎盘进行水洗，去除一些表面杂质，然后将水洗后的驴胎盘于离心机内常温下甩干1h后，再于40-60℃烘箱内烘干，得含水率为24％的驴胎盘；将烘干的驴胎盘采用粉碎机进行粉碎，过30目标准筛，得驴胎盘粉；将驴胎盘粉和水在混合器中混合，然后向混合器中加入蛋白酶，再将混合器置于频率为40KHz的超声设备中加热至50℃进行酶解反应1h，得酶解产物，其中，驴胎盘粉、水和蛋白酶的质量比为1：6：0.8；将酶解产物采用浓度为92％的L-苹果酸调节其pH值为4.0，然后将酶解产物于0-8℃下冷藏静置72h，至酶解产物分层，汲取上清液，采用孔径为0.6μm的滤板进行过滤，得驴胎盘提取物，常温下密封保存。
实施例3
一种驴胎盘提取物的制备方法，具体如下：
将驴胎盘进行水洗，去除一些表面杂质，然后将水洗后的驴胎盘于离心机内常温下甩干1h后，再于40-60℃烘箱内烘干，得含水率为25％的驴胎盘；将烘干的驴胎盘采用粉碎机进行粉碎，过40目标准筛，得驴胎盘粉；将驴胎盘粉和水在混合器中混合，然后向混合器中加入蛋白酶，再将混合器置于频率为50KHz的超声设备中加热至40℃进行酶解反应40min，得酶解产物，其中，驴胎盘粉、水和蛋白酶的质量比为1：7：0.9；将酶解产物采用浓度为95％的L-苹果酸调节其pH值为5.0，然后将酶解产物于0-8℃下冷藏静置96h，至酶解产物分层，汲取上清液，采用孔径为0.5μm的滤板进行过滤，得驴胎盘提取物，常温下密封保存。
实施例4
将驴胎盘进行水洗，去除一些表面杂质，然后将水洗后的驴胎盘于离心机内常温下甩干1h后，再于40-60℃烘箱内烘干，得含水率为22％的驴胎盘；将烘干的驴胎盘采用粉碎机进行粉碎，过20目标准筛，得驴胎盘粉；将驴胎盘粉和水在混合器中混合，然后向混合器中加入蛋白酶，再将混合器置于频率为30KHz的超声设备中加热至46℃进行酶解反应35min，得酶解产物，其中，驴胎盘粉、水和蛋白酶的质量比为1：8：0.8；将酶解产物采用浓度为99％的L-苹果酸调节其pH值为4.8，然后将酶解产物于0-8℃下冷藏静置72h，至酶解产物分层，汲取上清液，采用孔径为0.6μm的滤板进行过滤，得驴胎盘提取物，常温下密封保存。
依据GB5009.124-2016检测胎盘提取物中氨基酸含量，结果见表1。
表1驴胎盘提取物中氨基酸含量
依据GB5009.91-2017检测胎盘提取物中微量元素含量，结果见表2。
表2驴胎盘提取物中微量元素含量
| 项目 | 结果(g/100g) | 项目 | 结果(g/100g) |
| 钾(K) | 2.823 | 铜(Cu) | 0.05 |
| 钠(Na) | 3.68 | 铁(Fe) | 0.79 |
| 钙(Ca) | 0.51 | 锌(Zn) | 0.41 |
| 镁(Mg) | 2.67 | 锰(Mn) | 0.03 |
本发明的驴胎盘提取物中除了含有上述几种氨基酸及微量元素，还含有VC、VE和抗氧化SOD酶等抗氧化活物质，其DPPH自由基清除率为60％-75％。此外，还含有表皮生长因子(EGF)及成纤维细胞生长因子(FGF)等物质，可促进细胞的新陈代谢。
显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定，对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动，这里无法对所有的实施方式予以穷举，凡是属于本发明的技术方案所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。
Claims (7)
1.一种驴胎盘提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)将干燥的驴胎盘粉碎，得驴胎盘粉；
2)将所述驴胎盘粉和水混合后加入蛋白酶进行超声酶解反应，得酶解产物；
3)调节所述酶解产物的pH值至4-6，然后将所述酶解产物冷藏静置，使酶解产物分层，汲取上清液，过滤得驴胎盘提取物，密封保存；
在步骤1)之前，还包括：将驴胎盘进行水洗，水洗后的驴胎盘于离心机内常温下甩干1h后，再于40-60℃烘箱内烘干，使得驴胎盘的含水率为20％-25％；
所述超声酶解反应的时间为0.5-4h，温度为45-55℃；优选地，超声设备的频率为30-60KHz；
所述驴胎盘提取物，是将粉碎的驴胎盘在蛋白酶的作用下经超声酶解反应后调节其pH值，再进行冷藏静置分层，精滤制得的。
2.根据权利要求1所述的一种驴胎盘提取物的制备方法，其特征在于，所述蛋白酶为中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、弹性蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的一种驴胎盘提取物的制备方法，其特征在于，所述驴胎盘粉、水和蛋白酶的质量比为1：5-10：0.5-1.5。
4.根据权利要求1所述的一种驴胎盘提取物的制备方法，其特征在于，所述冷藏静置的温度为0-8℃，所述冷藏静置的时间为48-120h。
5.根据权利要求1所述的一种驴胎盘提取物的制备方法，其特征在于，pH调节剂为乳酸、碳酸钠、碳酸氢钠、柠檬酸和苹果酸的一种或多种。
6.根据权利要求1所述的一种驴胎盘提取物的制备方法，其特征在于，步骤3)中，所述过滤是指采用孔径为0.2-0.8μm的滤板进行过滤。
7.根据权利要求1所述的一种驴胎盘提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)将驴胎盘进行水洗，将水洗后的驴胎盘于常温下甩干，使得驴胎盘的含水率为20％-25％；
2)将烘干后的驴胎盘进行粉碎，过20-40目标准筛，得驴胎盘粉；
3)将驴胎盘粉、水混和蛋白酶按质量比为1：5-10：0.5-1.5的比例混合并置于频率为30-60KHz的超声设备中于45-55℃进行超声酶解反应0.5-4h，得酶解产物；
4)采用PH调节剂调节所述酶解产物的pH值至4-6，然后将所述酶解产物于0-8℃之间下冷藏静置48-120h，至所述酶解产物分层，汲取上清液，采用孔径为0.2-0.8μm的滤板进行过滤，得驴胎盘提取物，常温下密封保存。
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