CN107893042A - 有机物腐熟剂、制备方法及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及生物技术领域,具体而言,提供了一种有机物腐熟剂、制备方法及其应用。该有机物腐熟剂主要由地衣芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、AC酵母菌、木霉菌和链霉菌制成,各菌种互利共生,综合发挥各菌种的作用,能有效解决秸秆等有机物快速处理的问题,可合理利用资源,补充和平衡土壤养分,改良土壤,减轻农民劳动强度,减少环境污染。另外,上述各菌种的抗病能力强,能在恶劣的环境中长期存活,且对枯萎病和黄萎病等有十分良好的防治效果。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域,具体而言,涉及一种有机物腐熟剂、制备方法及其应用。
背景技术
秸秆是农业成品收获后剩余的田间闲置副产物,其主要化学成分为纤维素、半纤维素和木质素。我国秸秆种类多,数目庞大,大部分来源于谷类植物水稻、小麦和玉米的秸秆。
目前,农作物秸秆的处理和综合利用是全社会普遍关注的问题,也是制约农业高效、持续发展的一大难题。随着农业生产力水平的提高,农作物产量成倍增长,秸秆产量也大幅度增长,而农民大多采取乱堆乱放,随意焚烧等处理方式,这样既浪费资源,又污染环境。秸秆中富含有机质、氮、磷、钾等营养元素,通过秸秆还田,既能将这些元素施入土壤,成为植物生长所需的养分,同时还可提高土壤有机质含量、改善土壤理化状态、增加土壤肥力。利用秸秆腐熟剂能解决秸秆快速处理问题,可合理利用资源,补充和平衡土壤养分,改良土壤,减轻农民劳动强度,降低环境污染,同时对提高资源利用和耕地利用效率、促进农民增产增收、实现农业可持续发展也具有重要意义。因此,在还田过程中添加腐熟剂是解决这一问题的有效方法。
有鉴于此,特提出本发明。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种有机物腐熟剂,该有机物腐熟剂能够解决秸秆等有机物快速处理问题,可合理利用资源,补充和平衡土壤养分,改良土壤,减轻农民劳动强度,减少环境污染。
本发明的第二目的在于提供一种有机物腐熟剂的制备方法,该方法工艺简单,将各菌种和任选地硅藻土混合均匀即可,制备得到的有机物腐熟剂能有效解决秸秆等有机物快速处理的问题,可合理利用资源,补充和平衡土壤养分,改良土壤,减轻农民劳动强度,减少环境污染。
本发明的第三目的在于提供一种上述有机物腐熟剂在秸秆处理中的应用,能快速处理秸秆,使秸秆中的各种营养元素释放到土壤中,还可提高土壤有机质含量、改善土壤理化状态、增加土壤肥力,从而实现废弃资源的有效利用、促进农业可持续发展。
为了实现本发明的上述目的,特采用以下技术方案:
第一方面,本发明提供了一种有机物腐熟剂,主要由以下菌种制备而成:地衣芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、AC酵母菌、木霉菌和链霉菌。
作为进一步优选的技术方案,地衣芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、AC酵母菌、木霉菌和链霉菌的质量比为2-2.5:2-2.5:1-2:1-2:1-2。
作为进一步优选的技术方案,地衣芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、AC酵母菌、木霉菌和链霉菌的质量比为2-2.4:2.1-2.5:1-1.8:1-1.8:1-1.8。
作为进一步优选的技术方案,地衣芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、AC酵母菌、木霉菌和链霉菌的质量比为2-2.2:2.2-2.5:1-1.6:1-1.6:1-1.6。
作为进一步优选的技术方案,所述木霉菌为拟康氏木霉菌;
优选地,所述链霉菌为天青链霉菌。
作为进一步优选的技术方案,所述有机腐熟剂还包括硅藻土。
作为进一步优选的技术方案,硅藻土与总菌种的质量比为2-4:1,优选为2.4-3.6:1。
第二方面,本发明提供了一种上述有机物腐熟剂的制备方法,将地衣芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、AC酵母菌、木霉菌、链霉菌和任选地硅藻土混合均匀即可。
作为进一步优选的技术方案,地衣芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、AC酵母菌、木霉菌或链霉菌均各自独立地首先经过发酵培养、分离和干燥得到地衣芽胞杆菌原粉、枯草芽孢杆菌原粉、AC酵母菌原粉、木霉菌原粉或链霉菌原粉,然后再与其余物料混合。
第三方面,本发明提供了一种上述有机物腐熟剂在秸秆处理中的应用。
与现有技术相比,本发明的有益效果为:
本发明提供的有机物腐熟剂主要由地衣芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、AC酵母菌、木霉菌和链霉菌制成,各菌种互利共生,综合发挥各菌种的作用,能有效解决秸秆等有机物快速处理的问题,可合理利用资源,补充和平衡土壤养分,改良土壤,减轻农民劳动强度,减少环境污染。另外,上述各菌种的抗病能力强,能在恶劣的环境中长期存活,且对枯萎病和黄萎病等有十分良好的防治效果。
通过优化各菌种的质量比,经过各菌种的合理搭配,进一步发挥各菌种的协同配合作用,使其对秸秆等有机物的腐熟作用更加显著和快速,能够更好的对土壤进行改良。
本发明提供的有机物腐熟剂的制备方法工艺简单,将各菌种和任选地硅藻土混合均匀即可,制备得到的有机物腐熟剂能有效解决秸秆等有机物快速处理的问题,可合理利用资源,补充和平衡土壤养分,改良土壤,减轻农民劳动强度,减少环境污染。另外,上述各菌种的抗病能力强,能在恶劣的环境中长期存活,且对枯萎病和黄萎病等有十分良好的防治效果。优选将各菌种经发酵培养、分离和干燥得到各菌种的原粉,以此增加各菌种的数量,降低生产成本,同时提高活菌数量,进一步提高有机物腐熟剂的腐熟效果。
将上述有机物腐熟剂应用于秸秆处理中,能快速处理秸秆,使秸秆中的各种营养元素释放到土壤中,还可提高土壤有机质含量、改善土壤理化状态、增加土壤肥力,从而实现废弃资源的有效利用、促进农业可持续发展。
附图说明
图1为添加腐熟剂与未添加腐熟剂对秸秆处理后的温度变化图。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述,但是本领域技术人员将会理解,下列实施例仅用于说明本发明,而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。
第一方面,在至少一个实施例中提供了一种有机物腐熟剂,主要由以下菌种制备而成:地衣芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、AC酵母菌、木霉菌和链霉菌。
上述有机物腐熟剂主要由地衣芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、AC酵母菌、木霉菌和链霉菌制成,各菌种互利共生,综合发挥各菌种的作用,能有效解决秸秆等有机物快速处理的问题,可合理利用资源,补充和平衡土壤养分,改良土壤,减轻农民劳动强度,减少环境污染。另外,上述各菌种的抗病能力强,能在恶劣的环境中长期存活,且对枯萎病和黄萎病等有十分良好的防治效果。
地衣芽孢杆菌是一种在土壤中常见的革兰氏阳性嗜热细菌,它以孢子形式存在,从而抵抗恶劣的环境;在良好环境下,可以以生长态存在。该细菌可调整菌群失调达到治疗目的,可促使机体产生抗菌活性物质、杀灭致病菌;能产生抗活性物质,并具有独特的生物夺氧作用机制,能抑制致病菌的生长繁殖;它代谢产生的纤维素酶可以有效的酶解秸秆及部分有机物中的纤维素。
枯草芽孢杆菌是芽孢杆菌属的一种,是一种革兰氏阳性菌,它可以与多种菌种混配,在农业生产中运用广泛,它可利用蛋白质、多种糖及淀粉,分解色氨酸形成吲哚,也可有效分解纤维素,是处理生活垃圾及农作物秸秆的重要条件。
酵母菌是一种单细胞真菌,并非系统演化分类的单元,是一种肉眼看不见的微小单细胞微生物,能将糖发酵成酒精和二氧化碳,分布于整个自然界,是一种典型的兼性厌氧微生物,在有氧和无氧条件下都能够存活,是一种天然发酵剂。而本发明中的AC(ActifloreCerevisiae)酵母菌(又称活性酵母菌)可以更快、更有效的作用于发酵物,使其有机物快速分解,以达到快速分解生活垃圾及农作物秸秆的目的。
木霉菌是近年来研究较为广泛的一种生防菌,它对植物具有很好的防病、促生作用。木霉菌属于半知菌亚门,从梗孢目,木霉属,主要存在于朽木、枯枝落叶、土壤有机肥、植物残体和空气中,其菌丝成熟期很短,对病原菌具有拮抗作用。木霉菌优选为拟康氏木霉菌,拟康氏木霉菌属于木霉菌的一种,同样具有木霉菌的特性。
菌种中存在枯草芽孢杆菌和木霉菌的情况下,添加链霉菌(优选天青链霉菌)可有效加快秸秆前期腐烂的速度、加速秸秆质量减少和减小拉断秸秆所需的拉力。链霉菌已知有500多种,按链霉菌属各个种的气生菌丝、孢子丝和孢子的颜色,基内菌丝的颜色及其产生色素的颜色,以及孢子丝是否会吸水自溶等特征,可分为12个类群:白孢类群,如白色链霉菌;黄色类群,如黄色长孢链霉菌;粉红孢类群,如弗氏链霉菌;淡紫灰类群,如淡紫灰链霉菌;青色类群,如青色链霉菌、天青链霉菌;烬灰类群,如烬灰链霉菌;绿色类群,如绿色链霉菌;蓝色类群,如天蓝色链霉菌等。
上述各菌种优选取自实验室已保存菌株,无杂菌污染,制备方便,且应用效果显著。
在一种优选的实施方式中,地衣芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、AC酵母菌、木霉菌和链霉菌的质量比为2-2.5:2-2.5:1-2:1-2:1-2。上述质量比典型但非限制性地为2:2:1:1:1、2:2.5:1:1:1、2.5:2.5:1:1:1.5、2:2:1:1:1.5、2:2.2:1.5:1.5:1.5、2:2.5:2:2:2、2.3:2:1:1:1、2.3:2.2:1.5:1.5:1.5、2.3:2.5:2:2:2、2.5:1:1:1、2.5:2.2:1.5:1.5:1.5或2.5:2.5:2:2:2等。通过优化各菌种的质量比,经过各菌种的合理搭配,进一步发挥各菌种的协同配合作用,使其对秸秆等有机物的腐熟作用更加显著和快速,能够更好的对土壤进行改良。
在一种优选的实施方式中,地衣芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、AC酵母菌、木霉菌和链霉菌的质量比为2-2.4:2.1-2.5:1-1.8:1-1.8:1-1.8。
在一种优选的实施方式中,地衣芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、AC酵母菌、木霉菌和链霉菌的质量比为2-2.2:2.2-2.5:1-1.6:1-1.6:1-1.6。
通过进一步优选各菌种的质量比,使各菌种的比例更加合理,进一步提高有机腐熟剂的腐熟效果,并实现对秸秆等有机物的更加快速的处理。
在一种优选的实施方式中,所述有机腐熟剂还包括硅藻土。硅藻土的化学成分主要是SiO2,含有少量的Al2O3、Fe2O3、CaO、MgO等和有机质。硅藻土在电子显微镜下可以观察到特殊多孔的构造。有机腐熟剂中增加硅藻土从而使各菌种与硅藻土混合,提高有机腐熟剂在实际施用时(如播撒时)的均匀性。
在一种优选的实施方式中,硅藻土与总菌种的质量比为2-4:1,优选为2.4-3.6:1。上述质量比典型但非限制性地为2:1、2.2:1、2.4:1、2.6:1、2.8:1、3:1、3.2:1、3.4:1、3.6:1、3.8:1或4:1。应当理解的是,上述总菌种是指包括地衣芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、AC酵母菌、木霉菌和链霉菌的所有有机物腐熟剂中的菌种。
上述有机物腐熟剂包括但不限于颗粒状、粉状或液状。
第二方面,在至少一个实施例中提供了一种上述有机物腐熟剂的制备方法,将地衣芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、AC酵母菌、木霉菌、链霉菌和任选地硅藻土混合均匀即可。
上述有机物腐熟剂的制备方法工艺简单,将各菌种和任选地硅藻土混合均匀即可,制备得到的有机物腐熟剂能有效解决秸秆等有机物快速处理的问题,可合理利用资源,补充和平衡土壤养分,改良土壤,减轻农民劳动强度,减少环境污染。另外,上述各菌种的抗病能力强,能在恶劣的环境中长期存活,且对枯萎病和黄萎病等有十分良好的防治效果。
在一种优选的实施方式中,地衣芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、AC酵母菌、木霉菌或链霉菌均各自独立地首先经过发酵培养、分离和干燥得到地衣芽胞杆菌原粉、枯草芽孢杆菌原粉、AC酵母菌原粉、木霉菌原粉或链霉菌原粉,然后再与其余物料混合。优选将各菌种经发酵培养、分离和干燥得到各菌种的原粉,以此增加各菌种的数量,降低生产成本,同时提高活菌数量,进一步提高有机物腐熟剂的腐熟效果。
需要说明的是,上述“其余物料”是指除经过发酵培养、分离和干燥得到地衣芽胞杆菌原粉、枯草芽孢杆菌原粉、AC酵母菌原粉、木霉菌原粉或链霉菌原粉的其余菌种或硅藻土。
优选地,地衣芽胞杆菌原粉的制备方法包括以下步骤:
(a)将实验室保存的地衣芽孢杆菌在无菌的环境中接种到茄型瓶上,在29-34℃下培养40-48小时,检查无杂菌后留作发酵罐接种;
(b)制备发酵培养基:发酵罐内培养基物料按照每升水需用葡萄糖15-25g、蛋白胨10-20g、氯化钠3-8g、牛肉膏3-8g和琼脂15-25g的配比进行配置,使其溶入水中,送入发酵罐内;
(c)接种:将步骤(a)过程中取得的无杂菌茄型瓶若干个,按照每立方培养基接种2-4个茄型瓶菌种计,无菌操作接入到已经灭菌的发酵罐中;
(d)发酵培养:将发酵罐在温度29-34℃、220-280r/min的转速下搅拌培养,培养6-10小时后,开始取样镜检,8-24小时每2小时取样检查一次,24-36小时每1小时检查一次,确保无杂菌,当芽孢形成率达到90%-95%以上时培养完成;
(e)离心分离:将发酵完成的发酵液通过离心分离机进行5-6倍浓缩,成为浓缩发酵液;
(f)调配喷雾干燥:将步骤(e)过程中取得的浓缩发酵液打入调配罐内,加入浓缩发酵液重量30-40%的轻质碳酸钙搅拌均匀,然后将其通过喷雾干燥塔进行干燥,进风口温度控制在180-200℃,出风口温度控制在70-78℃,保持喷出的地衣芽孢杆菌原粉的水分重量百分比含量在6-8%之间;
(g)地衣芽孢杆菌原粉处理备存待用:将喷雾干燥塔塔底和旋风口处的地衣芽孢杆菌原粉进行混合,混合均匀后密封保存备用。
优选地,枯草芽孢杆菌原粉的制备方法包括以下步骤:
(a)将实验室保存的枯草芽孢杆菌在无菌的环境中接种到茄型瓶上,在30-40℃下培养24-36小时,检查无杂菌后留作发酵罐接种;
(b)制备发酵培养基:发酵罐内培养基物料按照每升水需用葡萄糖15-25g、蛋白胨10-20g、氯化钠3-8g、牛肉膏3-8g和琼脂15-25g的配比进行配置,使其溶入水中,送入发酵罐内;
(c)接种:将步骤(a)过程中取得的无杂菌茄型瓶若干个,按照每立方培养基接种2-4个茄型瓶菌种计,无菌操作接入到已经灭菌的发酵罐中;
(d)发酵培养:将发酵罐在温度30-40℃、220-280r/min的转速下搅拌培养,培养6-10小时后,开始取样镜检,8-24小时每2小时取样检查一次,24-36小时每1小时检查一次,确保无杂菌,当芽孢形成率达到90%-95%以上时培养完成;
(e)离心分离:将发酵完成的发酵液通过离心分离机进行5-6倍浓缩,成为浓缩发酵液;
(f)调配喷雾干燥:将步骤(e)过程中取得的浓缩发酵液打入调配罐内,加入浓缩发酵液重量30-40%的轻质碳酸钙搅拌均匀,然后将其通过喷雾干燥塔进行干燥,进风口温度控制在180-200℃,出风口温度控制在70-78℃,保持喷出的枯草芽孢杆菌原粉的水分重量百分比含量在6-8%之间;
(g)枯草芽孢杆菌原粉处理备存待用:将喷雾干燥塔塔底和旋风口处的枯草芽孢杆菌原粉进行混合,混合均匀后密封保存备用。
优选地,AC酵母菌原粉的制备方法包括以下步骤:
(a)将实验室保存的AC酵母菌在无菌的环境中接种到试管斜面上,在30-38℃下培养40-48小时后再转入茄型瓶培养24-36小时,检查无杂菌后留作发酵罐接种;
(b)制备发酵培养基:发酵罐内培养基物料按照每升水需用白砂糖5-10g、酵母粉0.5-1.0g、蛋白胨0.5-1.0g、豆粕粉5-15g和磷酸二氢钾0.5-1.0g的配比进行配置,使其溶入水中,送入发酵罐内;
(c)灭菌冷却:向发酵罐内通入蒸气,开启搅拌,待罐内培养基物料温度达到115-125℃时,保温25-35分钟,灭菌完成后关闭蒸气,开启冷却系统使培养基物料的温度降至30-38℃;
(d)接种:将步骤(a)过程中取得的无杂菌茄型瓶若干个,按照每立方培养基接种3-5个茄型瓶菌种计,按无菌操作方法接入步骤(c)中取得的发酵罐;
(e)发酵培养:将33-37℃无菌空气通入步骤(d)过程中取得的发酵罐内,为菌种培养提供氧气,培养6-10小时后,开始取样镜检,8-24小时每2小时取样检查一次,24-36小时每1小时检查一次,确保无杂菌,当酵母出芽稳定后培养完成;
(f)离心分离:把步骤(e)过程中取得的发酵液通入离心分离机进行5-6倍浓缩;
(g)调配喷雾干燥:将步骤(f)过程中取得的浓缩发酵液打入调配罐内,加入浓缩发酵液重量30-40%的轻质碳酸钙搅拌均匀,将搅拌均匀的发酵液通过喷雾干燥塔进行干燥,进风口温度控制在180-200℃,出风口温度控制在70-78℃,保持喷出的地衣芽孢杆菌原粉的水分重量百分比含量在5-7%之间;
(h)AC酿酒酵母原粉处理备存待用:将喷雾塔塔底和旋风口处的AC酿酒酵母原粉进行混合,混合均匀后密封保存备用。
优选地,木霉菌原粉的制备方法包括以下步骤:
(a)将实验室保存的木霉菌在无菌的环境中接种到茄型瓶上,在25-32℃下培养36-48小时,检查无杂菌后留作发酵罐接种;
(b)制备发酵培养基:发酵罐内培养基物料按照每升水需用草粉55-65g、硫酸铵20-30g、磷酸二氢钾3-5g、硫酸镁1-3g、氯化钙0.2-0.4g、琼脂10-20g的配比进行配置,60-100℃加热熔化,送入发酵罐内;
(c)接种:将步骤(a)过程中取得的无杂菌茄型瓶若干个,按照每立方培养基接种2-4个茄型瓶菌种计,无菌操作接入到已经灭菌的发酵罐中;
(d)发酵培养:将发酵罐在温度25-32℃、220-280r/min的转速下搅拌培养,培养6-10小时后,开始取样镜检,8-24小时每2小时取样检查一次,24-36小时每1小时检查一次,确保无杂菌,当芽孢形成率达到90%-95%以上时培养完成;
(e)离心分离:将发酵完成的发酵液通过离心分离机进行5-6倍浓缩,成为浓缩发酵液;
(f)调配喷雾干燥:将步骤(e)过程中取得的浓缩发酵液打入调配罐内,加入浓缩发酵液重量30-40%的轻质碳酸钙搅拌均匀,然后将其通过喷雾干燥塔进行干燥,进风口温度控制在180-200℃,出风口温度控制在70-78℃,保持喷出的木霉菌原粉的水分重量百分比含量在6-8%之间;
(g)木霉菌原粉处理备存待用:将喷雾干燥塔塔底和旋风口处的木霉菌原粉进行混合,混合均匀后密封保存备用。
优选地,链霉菌原粉的制备方法包括以下步骤:
(a)将实验室保存的链霉菌在无菌的环境中接种到茄型瓶上,在30-40℃下培养48-72小时,检查无杂菌后留作发酵罐接种;
(b)制备发酵培养基:发酵罐内培养基物料按照每升水需用葡萄糖5-15g、胰蛋白胨5-15g、氯化钠3-8g、酵母抽提物3-8g的配比进行配置,使其溶入水中,送入发酵罐内;
(c)接种:将步骤(a)过程中取得的无杂菌茄型瓶若干个,按照每立方培养基接种2-4个茄型瓶菌种计,无菌操作接入到已经灭菌的发酵罐中;
(d)发酵培养:将发酵罐在温度30-40℃、220-280r/min的转速下搅拌培养,培养6-10小时后,开始取样镜检,8-24小时每2小时取样检查一次,24-36小时每1小时检查一次,确保无杂菌,当芽孢形成率达到90%-95%以上时培养完成;
(e)离心分离:将发酵完成的发酵液通过离心分离机进行5-6倍浓缩,成为浓缩发酵液;
(f)调配喷雾干燥:将步骤(e)过程中取得的浓缩发酵液打入调配罐内,加入浓缩发酵液重量30-40%的轻质碳酸钙搅拌均匀,然后将其通过喷雾干燥塔进行干燥,进风口温度控制在180-200℃,出风口温度控制在70-78℃,保持喷出的链霉菌原粉的水分重量百分比含量在6-8%之间;
(g)链霉菌原粉处理备存待用:将喷雾干燥塔塔底和旋风口处的链霉菌原粉进行混合,混合均匀后密封保存备用。
上述优选各菌种原粉的制备方法工艺简洁、价格低廉、发酵产量高、活菌数量高、酶活力旺盛、产品稳定。
第三方面,在至少一个实施例中提供了一种上述有机物腐熟剂在秸秆处理中的应用。将上述有机物腐熟剂应用于秸秆处理中,能快速处理秸秆,使秸秆中的各种营养元素释放到土壤中,还可提高土壤有机质含量、改善土壤理化状态、增加土壤肥力,从而实现废弃资源的有效利用、促进农业可持续发展。
下面结合实施例和对比例对本发明做进一步详细的说明。
实施例1
本实施例所述的有机物腐熟剂的菌种组成为:地衣芽孢杆菌:枯草芽孢杆菌:AC酵母菌:拟康氏木霉菌:天青链霉菌=2:2.5:1:1:1。
腐熟剂行业标准:
测定项目 | 单位 | 检测结果 |
总菌数 | 亿/克 | ≥0.5 |
纤维素酶活 | U/g | ≥30 |
蛋白酶活 | U/g | ≥15 |
类大肠菌群数 | 个/克 | 不得检出 |
蛔虫死亡率 | % | 不得检出蛔虫卵 |
本实施例制备的腐熟剂的各项指标:
表1腐熟剂的各项指标
从表1中可以看出本实施例制备出的有机物腐熟剂符合行业标准。
实施例2
本实施例所述的有机物腐熟剂的菌种组成为:地衣芽孢杆菌:枯草芽孢杆菌:AC酵母菌:拟康氏木霉菌:天青链霉菌=2.5:2.5:1:1:1.5。
本实施例制备的腐熟剂的各项指标:
表2腐熟剂的各项指标
测定项目 | 单位 | 检测结果 |
地衣芽孢杆菌 | 亿/克 | 2.1 |
枯草芽孢杆菌 | 亿/克 | 1.5 |
AC酿酒酵母 | 亿/克 | 1.1 |
拟康氏木霉菌 | 亿/克 | 0.4 |
天青链霉菌 | 亿/克 | 0.5 |
总菌数 | 亿/克 | 5.6 |
纤维素酶活 | U/g | 40.3 |
蛋白酶活 | U/g | 19.5 |
类大肠菌群数 | 个/克 | 未检出 |
蛔虫死亡率 | % | 未检测出蛔虫卵 |
从表2中可以看出本实施例制备出的有机物腐熟剂符合行业标准。
实施例3
本实施例所述的有机物腐熟剂的菌种组成为:地衣芽孢杆菌:枯草芽孢杆菌:AC酵母菌:拟康氏木霉菌:天青链霉菌=2.5:2.5:1:1:1.5。
本实施例的腐熟剂的各项指标:
表3腐熟剂的各项指标
测定项目 | 单位 | 检测结果 |
地衣芽孢杆菌 | 亿/克 | 1.6 |
枯草芽孢杆菌 | 亿/克 | 1.5 |
AC酿酒酵母 | 亿/克 | 1.2 |
拟康氏木霉菌 | 亿/克 | 0.4 |
天青链霉菌 | 亿/克 | 0.9 |
总菌数 | 亿/克 | 5.6 |
纤维素酶活 | U/g | 34.6 |
蛋白酶活 | U/g | 17.5 |
类大肠菌群数 | 个/克 | 未检出 |
蛔虫死亡率 | % | 未检测出蛔虫卵 |
从表3中可以看出本实施例制备出的有机物腐熟剂符合行业标准。
注:实施例1-3中各菌种的比例均为质量比。
实施例1-3的有机物腐熟剂的制备方法如下:
1.制备地衣芽孢杆菌原粉:
(a)将实验室保存的地衣芽孢杆菌在无菌的环境中接种到准备好的茄型瓶上,在29-34℃下培养40-48小时,检查无杂菌后留作发酵罐接种;
(b)制备发酵培养基:发酵罐内培养基物料按照每升水需用葡萄糖20g、蛋白胨15g、氯化钠5g、牛肉膏5g和琼脂20g的配比进行配置,使其溶入水中,送入发酵罐内;
(c)接种:将步骤(a)过程中取得的无杂菌茄型瓶若干个,按照每立方培养基接种3个茄型瓶菌种计,无菌操作接入到已经灭菌的发酵罐中;
(d)发酵培养:将发酵罐在温度29-34℃、250r/min的转速下搅拌培养,培养8小时后,开始取样镜检,8-24小时每2小时取样检查一次,24-36小时每1小时检查一次,确保无杂菌,当芽孢形成率达到90%-95%上时培养完成;
(e)离心分离:将发酵完成的发酵液通过离心分离机进行5-6倍浓缩,成为浓缩发酵液;
(f)调配喷雾干燥:将步骤(e)过程中取得的浓缩发酵液打入调配罐内,加入浓缩发酵液重量30-40%的轻质碳酸钙搅拌均匀,然后将其通过喷雾干燥塔进行干燥,进风口温度控制在180-200℃,出风口温度控制在70-78℃,保持喷出的地衣芽孢杆菌原粉的水分重量百分比含量在6-8%之间;
(g)地衣芽孢杆菌原粉处理备存待用:将喷雾干燥塔塔底和旋风口处的地衣芽孢杆菌原粉进行混合,混合均匀后密封保存备用;
2.制备枯草芽孢杆菌原粉:
(a)将实验室保存的枯草芽孢杆菌菌种在无菌的环境中接种到准备好的茄型瓶上,在30-40℃下培养24-36小时,检查无杂菌后留作发酵罐接种;
(b)制备发酵培养基:发酵罐内培养基物料按照每升水需用葡萄糖20g、蛋白胨15g、氯化钠5g、牛肉膏5g和琼脂20g的配比进行配置,使其溶入水中,送入发酵罐内;
(c)接种:将步骤(a)过程中取得的无杂菌茄型瓶若干个,按照每立方培养基接种3个茄型瓶菌种计,无菌操作接入到已经灭菌的发酵罐中;
(d)发酵培养:将发酵罐在温度30-40℃、250r/min的转速下搅拌培养,培养8小时后,开始取样镜检,8-24小时每2小时取样检查一次,24-36小时每1小时检查一次,确保无杂菌,当芽孢形成率达到90%-95%上时培养完成;
(e)离心分离:将发酵完成的发酵液通过离心分离机进行5-6倍浓缩,成为浓缩发酵液;
(f)调配喷雾干燥:将步骤(e)过程中取得的浓缩发酵液打入调配罐内,加入浓缩发酵液重量30-40%的轻质碳酸钙搅拌均匀,然后将其通过喷雾干燥塔进行干燥,进风口温度控制在180-200℃,出风口温度控制在70-78℃,保持喷出的地衣芽孢杆菌原粉的水分重量百分比含量在6-8%之间;
(g)枯草芽孢杆菌原粉处理备存待用:将喷雾干燥塔塔底和旋风口处的枯草芽孢杆菌原粉进行混合,混合均匀后密封保存备用;
3.制备AC酿酒酵母原粉:
(a)将实验室保存的AC酿酒酵母菌种在无菌的环境中接入到试管斜面上,将温度控制在30-38℃,培养40-48小时再转入茄型瓶培养24-36小时,检查确认无杂菌后用作发酵罐接种;
(b)制备培养基物料:发酵罐内培养基物料按照每升水需用白砂糖7g、酵母粉0.8g、蛋白胨0.8g、豆粕粉10g和磷酸二氢钾0.5g的配比进行配置,使其溶入水中,送入发酵罐内;
(c)灭菌冷却:向发酵罐内通入蒸气,开启搅拌,待罐内培养基物料温度达到120℃时,保温30分钟,灭菌完成后关闭蒸气,开启冷却系统使培养基物料的温度降至30-38℃;
(d)接种:取步骤(a)过程中得到的盛装AC酿酒酵母菌经检查无杂菌的茄型瓶若干个,依发酵罐内培养基物料,按每立方米培养基物料拌种4个茄型瓶菌种计,按无菌操作方法接入步骤(c)中取得的发酵罐;
(e)发酵培养:将33-37℃无菌空气通入步骤(d)过程中取得的发酵罐内,为菌种培养提供氧气,培养8小时后,开始取样镜检,8-24小时每2小时取样检查一次,24-36小时每1小时检查一次,确保无杂菌,当酵母出芽稳定后培养完成;
(f)离心分离:把步骤(e)过程中取得的发酵液通入离心分离机进行5-6倍浓缩;
(g)调配喷雾干燥:将步骤(f)过程中取得的浓缩发酵液打入调配罐内,加入浓缩发酵液重量30-40%的轻质碳酸钙搅拌均匀,将搅拌均匀的发酵液通过喷雾干燥塔进行干燥,进风口温度控制在180-200℃,出风口温度控制在70-78℃,保持喷出的地衣芽孢杆菌原粉的水分重量百分比含量在5-7%之间;
(h)AC酿酒酵母原粉处理备存待用:将喷雾塔塔底和旋风口处的AC酿酒酵母原粉进行混合,混合均匀后密封保存备用;
4.制备拟康氏木霉菌原粉:
(a)将实验室保存的拟康氏木霉菌在无菌的环境中接种到准备好的茄型瓶上,在25-32℃下培养36-48小时,检查无杂菌后留作发酵罐接种;
(b)制备发酵培养基:发酵罐内培养基物料按照每升水需用草粉60g、硫酸铵25g、磷酸二氢钾4g、硫酸镁2g、氯化钙0.3g、琼脂15g的配比进行配置,60-100℃加热熔化,送入发酵罐内;
(c)接种:将步骤(a)过程中取得的无杂菌茄型瓶若干个,按照每立方培养基接种3个茄型瓶菌种计,无菌操作接入到已经灭菌的发酵罐中;
(d)发酵培养:将发酵罐在温度25-32℃、250r/min的转速下搅拌培养,培养8小时后,开始取样镜检,8-24小时每2小时取样检查一次,24-36小时每1小时检查一次,确保无杂菌,当芽孢形成率达到90%-95%上时培养完成;
(e)离心分离:将发酵完成的发酵液通过离心分离机进行5-6倍浓缩,成为浓缩发酵液;
(f)调配喷雾干燥:将步骤(e)过程中取得的浓缩发酵液打入调配罐内,然后将其通过喷雾干燥塔进行干燥,进风口温度控制在180-200℃,出风口温度控制在70-78℃,保持喷出的地衣芽孢杆菌原粉的水分重量百分比含量在5-6%之间;
(g)拟康氏木霉菌原粉处理备存待用:将喷雾干燥塔塔底和旋风口处的拟康氏木霉菌原粉进行混合,混合均匀后密封保存备用;
5.制备天青链霉菌原粉:
(a)将实验室保存的天青链霉菌在无菌的环境中接种到准备好的茄型瓶上,在30-40℃下培养48-72小时,检查无杂菌后留作发酵罐接种;
(b)制备发酵培养基:发酵罐内培养基物料按照每升水需用葡萄糖10g、胰蛋白胨10g、氯化钠5g、酵母抽提物5g的配比进行配置,使其溶入水中,送入发酵罐内;
(c)接种:将步骤(a)过程中取得的无杂菌茄型瓶若干个,按照每立方培养基接种3个茄型瓶菌种计,无菌操作接入到已经灭菌的发酵罐中;
(d)发酵培养:将发酵罐在温度30-40℃、250r/min的转速下搅拌培养,培养8小时后,开始取样镜检,8-24小时每2小时取样检查一次,24-36小时每1小时检查一次,确保无杂菌,当芽孢形成率达到90%-95%上时培养完成;
(e)离心分离:将发酵完成的发酵液通过离心分离机进行5-6倍浓缩,成为浓缩发酵液;
(f)调配喷雾干燥:将步骤(e)过程中取得的浓缩发酵液打入调配罐内,加入浓缩发酵液重量30-40%的轻质碳酸钙搅拌均匀,然后将其通过喷雾干燥塔进行干燥,进风口温度控制在180-200℃,出风口温度控制在70-78℃,保持喷出的地衣芽孢杆菌原粉的水分重量百分比含量在6-7%之间;
(g)天青链霉菌原粉处理备存待用:将喷雾干燥塔塔底和旋风口处的天青链霉菌原粉进行混合,混合均匀后密封保存备用;
制备腐熟剂:将上述各步骤取得的地衣芽孢杆菌原粉、枯草芽孢杆菌原粉、AC酿酒酵母原粉、拟康氏木霉菌原粉、天青链霉菌原粉按本次实施例配比混合均匀得到混合菌,然后将混合菌与硅藻土按1:3的质量比进行混合均匀得到腐熟剂。
实施例1-3的有机物腐熟剂的使用方法:按照物料2-3%的比例添加有机物腐熟剂,混匀,使物料水分保持在65%-70%,覆膜进行堆腐;将秸秆平铺田块表面,每亩均匀撒入有机物料腐熟剂,将秸秆翻耕入土发酵。
本发明实施例1-3制备的腐熟剂对秸秆堆腐的效果实验:
试验方法:选取上述任意实施例制备的腐熟剂喷洒在堆料表面,将堆料翻耕入土发酵。最后观察秸秆颜色、气味、软化程度等腐解情况。试验结果如下表所示。
表4添加腐熟剂与未添加腐熟剂对秸秆感官的影响
从表4可以看出:添加腐熟剂的秸秆颜色最先变黑,最先达到腐烂程度,而未添加腐熟剂的秸秆在各项感官程度中均表现缓慢。
表5添加腐熟剂与未添加腐熟剂对土壤养分的影响
从表5可以看出:未添加腐熟剂前后养分差别不大,但添加腐熟剂后,土壤中各成分均有所提高。
另外,从图1中可以看出,未添加腐熟剂对秸秆处理后秸秆最高温度为59℃,最高温度出现的时间为第21天;添加本发明的有机物腐熟剂对秸秆处理后秸秆最高温度为67℃,最高温度出现的时间为第15天。由此说明,本发明提供的有机物腐熟剂不但腐熟效果好,而且分解秸秆的时间短。
该实验证明:通过本发明生产的有机物腐熟剂有较好的腐熟效果,且分解秸秆时间短。秸秆使用有机物料腐熟剂腐熟后还田,能提高作物产量,改善品质,并对改良土壤理化性状有一定效果。
对比例1
本对比例所述的有机物腐熟剂的菌种组成为:地衣芽孢杆菌:枯草芽孢杆菌:AC酵母菌:天青链霉菌=2:2.5:1:1。
对比例2
本对比例所述的有机物腐熟剂的菌种组成为:地衣芽孢杆菌:枯草芽孢杆菌:AC酵母菌:拟康氏木霉菌=2:2.5:1:1。
对比例3
本对比例所述的有机物腐熟剂的菌种组成为:苏云金芽孢杆菌:枯草芽孢杆菌:AC酵母菌:拟康氏木霉菌:天青链霉菌=2:2.5:1:1:1。
对比例1-3中的有机物腐熟剂的使用方法与实施例1-3的使用方法相同,同时采用对比例1-3的腐熟剂对秸秆堆腐进行实验,试验方法与实施例1-3的实验方法相同。结果发现:对比例1-3中的腐熟剂对秸秆的腐熟效果并不明显,秸秆腐熟速度缓慢,添加腐熟剂后土壤中各营养成分差别不大。
尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明,然而应意识到,在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此,这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。
Claims (10)
1.一种有机物腐熟剂,其特征在于,主要由以下菌种制备而成:地衣芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、AC酵母菌、木霉菌和链霉菌。
2.根据权利要求1所述的有机物腐熟剂,其特征在于,地衣芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、AC酵母菌、木霉菌和链霉菌的质量比为2-2.5:2-2.5:1-2:1-2:1-2。
3.根据权利要求1所述的有机物腐熟剂,其特征在于,地衣芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、AC酵母菌、木霉菌和链霉菌的质量比为2-2.4:2.1-2.5:1-1.8:1-1.8:1-1.8。
4.根据权利要求1所述的有机物腐熟剂,其特征在于,地衣芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、AC酵母菌、木霉菌和链霉菌的质量比为2-2.2:2.2-2.5:1-1.6:1-1.6:1-1.6。
5.根据权利要求1-4任一项所述的有机物腐熟剂,其特征在于,所述木霉菌为拟康氏木霉菌;
优选地,所述链霉菌为天青链霉菌。
6.根据权利要求1-4任一项所述的有机物腐熟剂,其特征在于,所述有机腐熟剂还包括硅藻土。
7.根据权利要求6所述的有机物腐熟剂,其特征在于,硅藻土与总菌种的质量比为2-4:1,优选为2.4-3.6:1。
8.权利要求1-7任一项所述的有机物腐熟剂的制备方法,其特征在于,将地衣芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、AC酵母菌、木霉菌、链霉菌和任选地硅藻土混合均匀即可。
9.根据权利要求8所述的有机物腐熟剂的制备方法,其特征在于,地衣芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、AC酵母菌、木霉菌或链霉菌均各自独立地首先经过发酵培养、分离和干燥得到地衣芽胞杆菌原粉、枯草芽孢杆菌原粉、AC酵母菌原粉、木霉菌原粉或链霉菌原粉,然后再与其余物料混合。
10.权利要求1-7任一项所述的有机物腐熟剂在秸秆处理中的应用。
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