CN107846904A - 新产品 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了农业化学组合物,其包含:(a)一种或多种脂肪酸或其衍生物;和(b)真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体,或由真菌或卵菌的种产生的代谢物,所述菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或代谢物直接地或间接地(i)抑制植物病原体的生长或繁殖或(ii)杀死植物病原体。还提供了用于在地点控制真菌或卵菌的方法,用于促进植物生长的方法以及用于在地点控制线虫的方法。

Description

新产品
技术领域
本发明涉及农业化学组合物和产品,特别是用于控制真菌、卵菌或线虫或用于促进生长的农业化学组合物。本发明还涉及在地点(部位,位置,locus)控制真菌或卵菌的方法,保护植物抵抗真菌或卵菌的方法,促进植物生长的方法,以及保护植物抵抗线虫的方法。也描述了本发明组合物的用途。
背景技术
真菌可对作物造成大量损害,导致产量和品质的显著损失。卵菌是真菌样生物体,其也会损害植物和作物。杀真菌剂是通过预防或处理作物中的真菌感染来控制农业中的真菌感染的主要机制。因此杀菌剂在农业中非常重要。但是,与许多农业化学品一样,人们担心使用杀真菌剂的环境影响,特别是合成的小分子杀真菌剂。例如,一些杀真菌剂被认为会对非目标种和有益的动物如蜜蜂造成损害。越来越重视开发具有对环境降低风险的杀真菌剂。
先前已经描述了多种不同类型的剂用作杀真菌剂。实例包括海带,肉桂醛,牛奶,天然存在的油(如茶树油、肉桂精油、香茅油、霍霍巴油、印度楝树油、牛至油、迷迭香油-参见例如US6174920),脂肪酸(参见例如Liu S.等人,Mycopathologia(2008)166:93–102)和细菌(如枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)),其他真菌(如奥德曼细基格孢(Ulocladiumoudemansii),木霉属(Trichoderma)的种和使君子白粉寄生孢(Ampelomycesquisqualis)-参见例如Phytopathology,Vol 96,No.2,2006和US5190754),其他真菌的代谢物(如单甘油(Monocerin)),
寻求改进的农业化学组合物和产品,特别是环境可接受的仍具有高效力的农业化学产品。
发明内容
本发明人出人意料地发现,脂肪酸(及其衍生物)与真菌或卵菌的种或它们的代谢物的组合产生高度有效的特别是关于抗真菌活性的农业化学组合物和产品,所述种或代谢物直接地或间接地(i)抑制植物病原体的生长或繁殖或(ii)杀死植物病原体。这是意想不到的。特别是对木霉属(Trichoderma)真菌的种或代谢物观察到这种效果。尽管已知脂肪酸和真菌的种(例如木霉属的种)具有杀真菌活性,但人们可能预期真菌的种或代谢物的任何抗真菌活性被抗真菌脂肪酸的存在所抑制。然而,本发明人已经发现真菌如木霉属的种可以耐受得到农业化学组合物的脂肪酸,所述农业化学组合物利用脂肪酸(及其衍生物)与真菌或卵菌(真菌样生物体)的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子(即分生孢子、厚垣孢子(厚膜孢子,chlamydospore)、子囊孢子、游动孢子等)或菌丝体或者由真菌或卵菌的种产生的代谢物的组合效力,所述菌株、培养物、培养物滤液、孢子,菌丝体或代谢物直接地或间接地(i)抑制植物病原体的生长或繁殖或(ii)杀死植物病原体。对于脂肪酸与木霉属的种或木霉属代谢物的组合特别观察到有效的组合。
本发明提供了一种农业化学组合物,其包含:
(a)一种或多种脂肪酸或其衍生物;和
(b)真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体,或由真菌或卵菌的种产生的代谢物,所述菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或代谢物直接地或间接地(i)抑制植物病原体的生长或繁殖或(ii)杀死植物病原体。
本发明还提供了一种农业化学产品,其包含:(a)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物;和(b)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物;其中组分(a)和(b)被配制用于同时地或分开地对地点进行处理。
还提供了一种用于在地点控制真菌或卵菌的方法,该方法包括同时或顺序地用以下处理所述地点:(a)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物;和(b)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由真菌或卵菌产生的代谢物。
本发明进一步提供了用于保护植物抵抗真菌或卵菌的方法,该方法包括同时或分别用以下处理植物自身的部分或全部、植物生长源于的种子或植物生长所在的地方:(a)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物;和(b)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物。
本发明进一步提供了用于促进植物生长的方法,该方法包括同时或分别用以下处理植物自身的部分或全部、植物生长源于的种子或植物生长所在的地方:(a)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物;和(b)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物。
本发明还提供了用于在地点控制线虫的方法,该方法包括同时或顺序地用以下处理地点:(a)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物;和(b)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物。
本发明进一步提供了用于保护植物抵抗线虫的方法,该方法包括同时或分别用以下处理植物自身的部分或全部、植物生长源于的种子或植物生长所在的地方:(a)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物;和(b)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物。
本发明还提供了用于生产作物产物的工艺,该工艺包括栽培植物,其中植物自身的部分或全部、植物生长源于的种子或植物生长所在的地方同时或分别用以下处理:(a)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物;和(b)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物。
附图简述
图1显示用ABP-510(脂肪酸产品)处理后受白粉病影响的番茄叶面积的百分比。
图2显示用ABP-510处理后番茄植物上由白粉病引起的感染的严重度。
图3显示用ABP-510处理后受白粉病影响的葡萄叶区域的百分比。
图4显示用ABP-510和木霉属孢子处理后受白粉病影响的番茄叶区域的百分比。
图5显示用ABP-510和木霉属孢子处理后番茄植物上由白粉病引起的感染的严重度。
图6显示在受罗氏白绢小菌核菌影响和用ABP-510和木霉孢子处理后死亡的辣椒植物的百分比。
图7显示ABP-510对植物病原体腐霉属的种的径向生长的效应。
图8显示用ABP-510处理后受白粉病影响的番茄叶区域的百分比。
图9显示用ABP-510和木霉属的次生代谢物处理后处理对植物病原体灰葡萄孢的径向生长的效应。
图10显示用杀真菌剂ABP-510和木霉属的次生代谢物处理的番茄叶子上由灰葡萄孢引起的坏死区域大小的评估。
图11显示在与杀真菌剂ABP-510和木霉属的次生代谢物共应用(共同应用)后被灰葡萄孢侵袭的番茄叶子的百分比。HA是哈茨酸(harzianic acid)。
图12显示用杀真菌剂ABP-510和木霉属的次生代谢物处理(喷雾应用)的番茄叶上由灰葡萄孢引起的坏死区域大小的评估。
图13显示用杀真菌剂ABP-510和木霉属的次生代谢物喷洒应用后被灰葡萄孢侵袭的番茄叶的百分比。
图14显示对用杀真菌剂ABP-510和木霉属的次生代谢物(共应用)处理的西葫芦叶上由灰葡萄孢引起的坏死区域大小的评估。
图15显示用杀真菌剂ABP-510和木霉属的次生代谢物共应用处理后由灰葡萄孢侵袭的西葫芦叶的百分比。
图16显示用ABP-510和木霉属处理对植物病原体灰葡萄孢的径向生长的效应。
图17显示用ABP-510和木霉属处理对植物病原体镰刀菌属的种的径向生长的效应。
图18显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP-510组合相对于单独的ABP和单独的木霉属的种处理的番茄植物的新鲜根重量的增加。
图19显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP-510组合相对于单独的ABP和单独的木霉属的种处理的番茄植物的根长度的增加。
图20显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP-510组合相对于单独的ABP和单独的木霉属的种处理的番茄植物的干根重的增加。
图21显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP-510组合相对于单独的ABP和单独的木霉属的种处理的番茄植物的茎的鲜重的增加。
图22显示用ABP-510和木霉属处理的番茄植物的新鲜根重的变化。
图23显示用ABP-510和木霉属处理的番茄植物的干根重。
图24显示用ABP-510和木霉属处理的番茄植物的干根重的变化。
图25显示用ABP-510和木霉属处理的番茄植物的根长度的变化。
图26显示用ABP-510和木霉属处理的番茄植物的茎长的变化。
图27显示用ABP-510和木霉属处理的番茄植物的干茎重的变化。
图28显示ABP-510和木霉属的种对北方根结线虫(Meloidogyne hapla)幼虫的体外效应。
图29显示ABP-510加木霉属的种对北方根结线虫成虫存活率(如通过活线虫百分比所测量的)的体外效应。
图30显示ABP-510对由番茄北方根结线虫在番茄上产生的根结(gall)数目(每株植物的根结平均数目)的效应。
图31显示在不同处理后受到立枯丝核菌影响的死亡的莴苣植物的百分比。
图32显示在不同处理后受核盘菌属影响的死亡莴苣植物的百分比。
图33显示在不同处理后受天然存在的核盘菌属影响的莴苣植物的百分比。
图34显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP 510相对于水对照、单独的ABP和单独的木霉属的种处理的球茎甘蓝植物的周长的增加。
图35显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP-510组合相对于水对照、单独的ABP和单独的木霉属的种处理的球茎甘蓝植物的鲜重的增加。
图36显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP-510组合相对于水对照、单独的ABP-510和单独的木霉属的种处理的球茎甘蓝-整株植物的鲜重的增加。
图37显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP-510组合处理的球茎甘蓝植物的周长。
图38显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP-510组合处理的球茎甘蓝植物的茎鲜重。
图39显示用木霉属的种与不同浓度的ABP-510产品组合处理的球茎甘蓝整株植物的鲜重。
图40显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP-510组合、相对于单独的ABP和单独的木霉属的种处理的番茄植物的根鲜重的增加。
图41显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP 510组合相对于单独的ABP和单独的木霉属的种处理的番茄植物的根长的增加。
图42显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP 510组合相对于单独的ABP和单独的木霉属的种处理的番茄植物的根干重的增加。
图43显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP 510组合相对于单独的ABP和单独的木霉属的种处理的番茄植物的茎鲜重的增加。
图44显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP-510组合相对于水对照、单独的ABP-510和单独的木霉属的种处理的莴苣植物的绿色部分的周长的增加。
图45显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP-510组合相对于水对照、单独的ABP-510和单独的木霉属的种处理的莴苣叶子的鲜重的增加。
图46显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP-510组合相对于水对照、单独的ABP-510和单独的木霉属的种处理的莴苣根的鲜重的增加。
图47显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP-510组合相对于水对照、单独的ABP-510和单独的木霉属的种处理的整个莴苣植物的鲜重的增加。
图48显示用与不同浓度的产品ABP-510组合相对于水对照、单独的ABP-510和单独的木霉属的种处理的莴苣叶子的干重的增加。
图49显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP-510组合处理的莴苣植物的绿色部分的周长。
图50显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP-510组合处理的莴苣植物的根的长度。
图51显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP-510组合处理的整个莴苣植物的鲜重。
图52显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP-510组合处理的莴苣植物的根的鲜重。
图53显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP-510组合处理的莴苣植物的绿色部分的鲜重。
图54显示用木霉属的种与不同浓度的产品ABP-510组合处理的莴苣植物的绿色部分的干重。
图55显示了每种处理产生的果实总量的千克计的番茄产量。
图56显示了来自用每种处理进行处理的植物的番茄果实的平均重量。
图57显示每种处理的番茄果实总数。
如果图形包含二维条形图,则在相邻条形的每个组(或对)内,从左到右查看的单个条形的排序对应于从上到下查看的键中的排序。
发明详述
组合物
本发明提供了一种农业化学组合物,其包含:(a)一种或多种脂肪酸或其衍生物;和(b)真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体,或由真菌或卵菌的种产生的代谢物,所述菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或代谢物直接地或间接地(i)抑制植物病原体的生长或繁殖或(ii)杀死植物病原体。
典型地,组分(b)是真菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体,或由真菌的种产生的代谢物。孢子可以是分生孢子、厚孢子、子囊孢子或游动孢子。
真菌组分
真菌或卵菌的种可以选自许多不同的种,只要该种或其衍生物(即种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或代谢物)直接地或间接地(i)抑制植物病原体的生长或繁殖或(ii)杀死植物病原体。技术人员可以通过进行简单的检验,例如通过用种或其衍生物处理植物病原体,并观察对病原体的生长或繁殖或死亡的抑制来容易地鉴定哪种真菌或卵菌的种满足该要求。通常,真菌或卵菌的种或其衍生物直接地或间接地杀死植物病原体。真菌或卵菌的种一般应该是脂肪酸组分在相关情况下不阻止发挥其预期效果的种。再者,这可以通过简单的检验容易地确定,例如通过用脂肪酸处理种并监测脂肪酸对种的活性的效应。
本发明中使用真菌或卵菌组分是有利的,因为它使得以视作对环境无害的方式控制控制对作物疾病负责的真菌或卵菌的方法成为可能。
优选的真菌或卵菌的种(以及菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或其代谢物)的实例包括木霉属(Trichoderma)、镰刀菌属(Fusarium)、腐霉属(Pythium)、粘帚霉属(Gliocladium)、假丝酵母属(Candida,念珠菌属)、盾壳霉属(Coniothyrium)、白粉寄生孢属(Ampelomyces)、隐球酵母属(Cryptococcus)、轮枝菌属(Verticillium)、绿僵菌属(Metarhizium)、白僵菌属(Beauveria)、拟青霉属(Paecilomyces)或链壶菌属(Lagenidium)的种。
例如,真菌或卵菌的种(通常是真菌的种)可以是木霉属、镰刀菌属、腐霉属、粘帚霉属、假丝酵母属、盾壳霉属、白粉寄生孢属或隐球酵母属。优选地,真菌的种是木霉属的种。因此,所述组合物优选包含木霉属真菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由木霉属真菌的种产生的代谢物,所述菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或代谢物直接地或间接地(i)抑制植物病原体的生长或繁殖,或(ii)杀死植物病原体。孢子可以是分生孢子或厚垣孢子。
木霉属的种可以选自侵占木霉(Trichoderma aggressivum)、亚马逊木霉(Trichoderma amazonicum)、棘孢木霉(Trichoderma asperellum)、深绿木霉(Trichoderma atroviride)、黄绿木霉(Trichoderma aureoviride)、澳洲康宁木霉(Trichoderma austrokoningii)、短密木霉(Trichoderma brevicompactum)、雪白木霉(Trichoderma candidum)、加勒比木霉厄瓜多尔变种(Trichoderma caribbaeumvar.aequatoriale)、加勒比木霉加勒比变种(Trichoderma caribbaeumvar.caribbaeum)、低头木霉(Trichoderma catoptron)、奶油木霉(Trichodermacremeum)、陶瓷木霉(Trichoderma ceramicum)、蜡素木霉(Trichoderma cerinum)、绿孢木霉(Trichoderma chlorosporum)、色精木霉(Trichoderma chromospermum)、(Trichodermacinnamomeum)、肉桂色木霉(Trichoderma citrinoviride)、厚木霉(Trichodermacrassum)、奶油木霉(Trichoderma cremeum)、丁莉亚木霉(Trichoderma dingleyeae)、多罗西木霉(Trichoderma dorotheae)、平展木霉(Trichoderma effusum)、猬木霉(Trichoderma erinaceum)、爱莎尼亚木霉(Trichoderma estonicum)、可育木霉(Trichoderma fertile)、胶状木霉(Trichoderma gelatinosus)、加纳木霉(Trichodermaghanense)、钩状木霉(Trichoderma hamatum)、哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、水仙木霉(Trichoderma narcissi)、旋状木霉(Trichoderma helicum)、交织木霉(Trichodermaintricatum)、长枝康宁木霉(Trichoderma konilangbra)、康宁木霉(Trichodermakoningii)、拟康宁木霉(Trichoderma koningiopsis)、长枝木霉(Trichodermalongibrachiatum)、长毛木霉(Trichoderma longipile)、微孢木霉(Trichodermaminutisporum)、矩孢木霉(Trichoderma oblongisporum)、卵孢木霉(Trichodermaovalisporum)、彼得森木霉(Trichoderma petersenii)、竹生木霉(Trichodermaphyllostahydis)、洋大戟草木霉(Trichoderma piluliferum)、侧耳木霉(Trichodermapleuroticola)、平菇木霉(Trichoderma pleurotum)、多孢木霉(Trichodermapolysporum)、假康宁木霉(Trichoderma pseudokoningii)、软毛木霉(Trichodermapubescens)、李氏木霉(Trichoderma reesei)、罗杰氏木霉(Trichoderma rogersonii)、俄罗斯木霉(Trichoderma rossicum)、土星孢木霉(Trichoderma saturnisporum)、中国木霉(Trichoderma sinensis)、弯梗木霉(Trichoderma sinuosum)、森吉木霉(Trichodermasongyi)、木霉属种MA 3642、木霉属种PPRI 3559、螺旋木霉(Trichoderma spirale)、草黄木霉(Trichoderma stramineum)、硬毛木霉(Trichoderma strigosum)、子座木霉(Trichoderma stromaticum)、球座木霉(Trichoderma surrotundum)、台湾木霉(Trichoderma taiwanense)、泰国木霉(Trichoderma thailandicum)、革菌木霉(Trichoderma thelephoricolum)、可可木霉(Trichoderma theobromicola)、绒毛木霉(Trichoderma tomentosum)、毛簇木霉(Trichoderma velutinum)、绿木霉(Trichodermavirens)、绿色木霉(Trichoderma viride)和渐绿木霉(Trichoderma viridescens)。木霉属的优选的种是哈茨木霉和绿木霉。可以使用种的任何菌株。优选的菌株包括哈茨木霉T22、哈茨木霉T39、哈茨木霉M10、哈茨木霉P101和绿木霉GV41。
在一些情况下,组合物可以包含木霉属两个不同种的菌株,例如绿木霉GV41和哈茨木霉M10。
镰刀菌属的种可以选自燕麦镰刀菌(Fusarium avenaceum)、布比水杨镰刀菌(Fusarium bubigeum)、黄色镰刀菌(Fusarium culmorum)、禾谷镰刀菌(Fusariumgraminearum)、朗塞斯镰刀菌(Fusarium langsethiae)、尖孢镰刀菌(Fusariumoxysporum)、梨孢镰刀菌(Fusarium poae)、拟枝孢镰刀菌(Fusarium sporotrichioides)、三线镰刀菌(Fusarium tricinctum)、轮枝镰刀菌(Fusarium verticillioides)和枝状镰孢(Fusarium virguliforme)。
腐霉属的种可选自棘腐霉(Pythium acanthicum)、刺器腐霉(Pythiumacanthophoron)、顶生腐霉(Pythium acrogynum)、粘腐霉(Pythium adhaerens)、孤雌腐霉(Pythium amasculinum)、安鼓腐霉(Pythium anandrum)、线叶腐霉(Pythiumangustatum)、瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum)、未满器腐霉(Pythium apleroticum)、浮游腐霉(Pythium aquatile)、芒孢腐霉(Pythium aristosporum)、强雄腐霉(Pythiumarrhenomanes)、引雄腐霉(Pythium attrantheridium)、二歧腐霉(Pythium bifurcatum)、北方腐霉(Pythium boreale)、毕思曼腐霉(Pythium buismaniae)、巴特勒腐霉(Pythiumbutleri)、钟形腐霉(Pythium campanulatum)、卡纳瑞恩腐霉(Pythium canariense)、凯皮萨腐霉(Pythium capillosum)、卡波尼腐霉(Pythium carbonicum)、卡地腐霉(Pythiumcarolinianum)、链状腐霉(Pythium catenulatum)、匍丝腐霉(Pythium chamaehyphon)、康锥蔻拉(Pythium chondricola)、桔腐霉(Pythium citrinum)、色孢腐霉(Pythiumcoloratum)、菌丝状腐霉(Pythium conidiophorum)、康替瓜腐霉(Pythium contiguanum)、密码畸雄腐霉(Pythium cryptoirregulare)、葫芦科腐霉(Pythium cucurbitacearum)、筒孢腐霉(Pythium cylindrosporum)、蘣菁腐霉(Pythium cystogenes)、德巴利腐霉(Pythium debaryanum)、德里腐霉(Pythium deliense)、毁坏性腐霉(Pythiumdestruens)、异丝腐霉(Pythium diclinum)、异形腐霉(Pythium dimorphum)、无明喻腐霉(Pythium dissimile)、宽雄腐霉(Pythium dissotocum)、针棘腐霉(Pythiumechinulatum)、猬木腐霉(Pythium erinaceum)、福来文斯腐霉(Pythium flevoense)、囊形腐霉(Pythium folliculosum)、球序腐霉(Pythium glomeratum)、禾生腐霉(Pythiumgraminicola)、囊腐霉(Pythium grandisporangium)、贵阳腐霉(Pythium guiyangense)、旋雄腐霉(Pythium helicandrum)、旋柄腐霉(Pythium helicoides)、异宗结合腐霉(Pythium heterothallicum)、齿孢腐霉(Pythium hydnosporum)、海波荄姆腐霉(Pythiumhypogynum)、木蓝腐霉(Pythium indigoferae)、肿囊腐霉(Pythium inflatum)、苜蓿腐霉(Pythium insidiosum)、闻型腐霉(Pythium intermedium)、畸雌腐霉(Pythiumirregulare)、艾薇芽姆腐霉(Pythium iwayamae)、菑丝堥莥腐霉(Pythium jasmonium)、昆明腐霉(Pythium kunmingense)、莉陶锐腐霉(Pythium litorale)、长雄腐霉(Pythiumlongandrum)、长囊腐霉(Pythium longisporangium)、鲁塔瑞姆腐霉(Pythium lutarium)、大孢腐霉(Pythium macrosporum)、乳突腐霉(Pythium mamillatum)、海洋腐霉(Pythiummarinum)、袋囊腐霉(Pythium marsipium)、拟南芥与腐霉(Pythium mastophorum)、阔叶腐霉(Pythium megacarpum)、亚麻根腐霉(Pythium megalacanthum)、奇雄腐霉(Pythiummiddletonii)、小腐霉(Pythium minus)、简囊腐霉(Pythium monospermum)、山肉桂腐霉(Pythium montanum)、多孢腐霉(Pythium multisporum)、群结腐霉(Pythiummyriotylum)、长井腐霉(Pythium nagaii)、结节腐霉(Pythium nodosum)、纳恩腐霉(Pythium nunn)、肿雄腐霉(Pythium oedochilum)、奥卡诺根恩瑟腐霉(Pythiumokanoganense)、寡雄腐霉(Pythium oligandrum)、奥纳卡蒲腐霉(Pythium ornacarpum)、直生藏卵腐霉(Pythium orthogonon)、介形类腐霉(Pythium ostracodes)、粗缆腐霉(Pythium pachycaule)、粗缆腐霉(Pythium pachycaule)、褐色雪腐霉(Pythiumpaddicum)、侧雄腐霉(Pythium paroecandrum)、短小腐霉(Pythium parvum)、杀鲑气单胞腐霉(Pythium pectinolyticum)、周雄腐霉(Pythium periilum)、缠器腐霉(Pythiumperiplocum)、合欢腐霉(Pythium perniciosum)、无序腐霉(Pythium perplexum)、芦根腐霉(Pythium phragmitis)、卵塞腐霉(Pythium pleroticum,满器腐霉)、多卵腐霉(Pythiumplurisporium)、棓乐马斯塔腐霉(Pythium polymastum)、紫菜腐霉(Pythium porphyrae)、前扁平腐霉(Pythium prolatum)、层出腐霉(Pythium proliferatum)、绚丽腐霉(Pythiumpulchrum)、琵瑞蒌柏腐霉(Pythium pyrilobum)、蒙栎盘腐霉(Pythium quercum)、辐射腐霉(Pythium radiosum)、分枝状腐霉(Pythium ramificatum)、规则腐霉(Pythiumregulare)、稻根腐霉(Pythium rhizo-oryzae)、根甘蔗腐霉(Pythium rhizosaccharum)、荛斯綽蒂菲腐霉(Pythium rostratifingens)、喙腐霉(Pythium rostratum)、角柄腐霉(Pythium salpingophorum)、硬腐霉(Pythium scleroteichum)、塞尼泰腐霉(Pythiumsegnitium)、针腐霉(Pythium spiculum)、刺腐霉(Pythium spinosum)、华丽腐霉(Pythiumsplendens)、斯特林腐霉(Pythium sterilum)、密集腐霉(Pythium stipitatum)、沟腐霉(Pythium sulcatum)、细枝腐霉(Pythium sylvaticum)、土栖腐霉(Pythium terrestris)、簇囊腐霉(Pythium torulosum)、嗜管腐霉(Pythium tracheiphilum)、终极腐霉(Pythiumultimum)、终极腐霉原变种(Pythium ultimum var.ultimum)、弯柱腐霉(Pythiumuncinulatum)、波状腐霉(Pythium undulatum)、范特腐霉(Pythium vanterpoolii)、钟器腐霉(Pythium vexans)、葡萄腐霉(Pythium viniferum)、紫菜腐霉(Pythium violae)、卷旋腐霉(Pythium volutum)、姜腐霉(Pythium zingiberis)和生姜腐霉(Pythiumzingiberum)。
粘帚霉属的种可以选自链孢粘帚霉(Gliocladium catenulatum)、绿色粘帚霉(Gliocladium virens)、青霉状粘帚霉(Gliocladium penicilloides)、粉红粘帚霉(Gliocladium roseum)和融粘帚霉(Gliocladium deliquescens)。
假丝酵母属的种可以选自白色假丝酵母(Candida albicans,白念珠菌)、艾斯卡乐菲假丝酵母(Candida ascalaphidarum)、暗牧菲克假丝酵母(Candida amphixiae)、南极假丝酵母(Candida antarctica)、耐银假丝酵母(Candida argentea)、大西洋假丝酵母(Candida atlantica)、大气假丝酵母(Candida atmosphaerica)、蟑螂假丝酵母(Candidablattae)、凤梨假丝酵母(Candida bromeliacearum)、嗜果实假丝酵母(Candidacarpophila)、卡瓦哈尔假丝酵母(Candida carvajalis)、天牛假丝酵母(Candidacerambycidarum)、果生假丝酵母(Candida chauliodes)、延胡索假丝酵母(Candidacorydali)、多西假丝酵母(Candida dosseyi)、杜氏假丝酵母(Candida dubliniensis)、Candida ergatensis、果实假丝酵母(Candida fructus)、光滑假丝酵母(Candidaglabrata)、发酵假丝酵母(Candida fermentati)、吉利蒙假丝酵母(Candidaguilliermondii)、吉利蒙假丝酵母(Candida haemulonii)、昆虫门假丝酵母(Candidainsectamens)、昆虫假丝酵母(Candida insectorum)、中型假丝酵母(Candidaintermedia)、杰弗里西假丝酵母(Candida jeffresii)、乳酒假丝酵母(Candida kefyr)、煤油假丝酵母(Candida keroseneae)、克鲁斯氏假丝酵母(Candida krusei,克柔氏假丝酵母)、葡萄牙假丝酵母(Candida lusitaniae)、莱克苏菲拉假丝酵母(Candidalyxosophila)、麦芽糖假丝酵母(Candida maltosa)、海生假丝酵母(Candida marina)、膜醭假丝酵母(Candida membranifaciens)、梅林假丝酵母(Candida milleri)、蒙奇假丝酵母(Candida mogii)、橄榄假丝酵母(Candida oleophila)、俄勒冈假丝酵母(Candidaoregonensis)、近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis)、近平滑假丝酵母(Candidaquercitrusa)、皱褶假丝酵母(Candida rugosa)、清酒假丝酵母(Candida sake)、近平滑假丝酵母(Candida shehatea)、泰姆诺珂假丝酵母(Candida temnochilae)、纤维假丝酵母(Candida tenuis)、蛾假丝酵母(Candida theae)、忍耐假丝酵母(Candida tolerans)、热带假丝酵母(Candida tropicalis)、土屋假丝酵母(Candida tsuchiyae)、中难假丝酵母(Candida sinolaborantium)、大豆假丝酵母(Candida sojae)、萨卜哈释假丝酵母(Candidasubhashii)、维斯假丝酵母(Candida viswanathii)、产朊假丝酵母(Candida utilis)、阿坝塔苯斯假丝酵母(Candida ubatubensis)和增普琳假丝酵母(Candida zemplinina)。
盾壳霉属的种可以选自阿拉伯盾壳霉(Coniothyrium acaciae)、蛇葡萄旋花盾壳霉(Coniothyrium ampelopsidis-hederaceae)、竹盾壳霉(Coniothyrium bambusicola)、巴图门斯盾壳霉(Coniothyrium batumense)、博益纳姆盾壳霉(Coniothyriumboydeanum)、簇密盾壳霉(Coniothyrium caespitulosum)、丛生盾壳霉(Coniothyriumcarpaticum)、赛米西盾壳霉(Coniothyrium celmisiae)、欧洲朴树盾壳霉(Coniothyriumceltidis-australis)、谷盾壳霉(Coniothyrium cerealis)、直威灵仙盾壳霉(Coniothyrium clematidis-rectae)、咖啡盾壳霉(Coniothyrium coffeae)、同心盾壳霉(Coniothyrium concentricum)、科尼古拉盾壳霉(Coniothyrium conicola)、锥状盾壳霉(Coniothyrium conoideum)、球果盾壳霉(Coniothyrium conorum)、克瑞平尼娜姆盾壳霉(Coniothyrium crepinianum)、柏盾壳霉(Coniothyrium cupressacearum)、基多尼亚盾壳霉(Coniothyrium cydoniae)、分散沙隆盾壳霉(Coniothyrium dispersellum)、龙血树盾壳霉(Coniothyrium dracaenae)、木贼盾壳霉(Coniothyrium equiseti)、费拉里斯安纳姆盾壳霉(Coniothyrium ferrarisianum)、河生盾壳霉(Coniothyrium fluviatile)、秦皮盾壳霉(Coniothyrium fraxini)、杰尼斯榙盾壳霉(Coniothyrium genistae)、集球盾壳霉(Coniothyrium glomerulatum)、丰利柯西盾壳霉(Coniothyrium henriquesii)、藓盾壳霉(Coniothyrium ilicinum)、苦丁茶盾壳霉(Coniothyrium ilicis)、英丝缇帷姆盾壳霉(Coniothyrium insitivum)、茉莉盾壳霉(Coniothyrium jasmini)、刺柏盾壳霉(Coniothyrium juniperi)、桉盾壳霉(Coniothyrium kallangurense)、薰衣草盾壳霉(Coniothyrium lavandulae)、豆盾壳霉(Coniothyrium leguminum)、木素盾壳霉(Coniothyrium lignorum)、奥本思盾壳霉(Coniothyrium obiones)、橄榄色盾壳霉(Coniothyrium olivaceum)、仙人掌盾壳霉(Coniothyrium opuntiae)、象甲盾壳霉(Coniothyrium palmarum)、帕米克拉盾壳霉(Coniothyrium palmicola)、帕尔米棕榈盾壳霉(Coniothyrium palmigenum)、新西兰麻盾壳霉(C.phormii)、普拉塔尼盾壳霉(Coniothyrium platani)、杨细盾壳霉(Coniothyrium populinum)、普沙麻盾壳霉(Coniothyrium psammae)、葡特蒂斯盾壳霉(Coniothyrium pteridis)、栎盾壳霉(Coniothyrium quercinum)、满山红盾壳霉(Coniothyrium rhododendri)、蔷薇盾壳霉(Coniothyrium rosarum)、金雀花盾壳霉(Coniothyrium sarothamni)、斯拉浦东尼斯盾壳霉(Coniothyrium slaptoniense)、球子盾壳霉(Coniothyrium sphaerospermum)、拓麻瑞西斯盾壳霉(Coniothyrium tamaricis)、榻麻栎硒盾壳霉(Coniothyrium tamarisci)、泰里科拉盾壳霉(Coniothyrium terricola)、尔梅姆盾壳霉(Coniothyrium ulmeum)和温氏盾壳霉(Coniothyrium wernsdorffiae)
白粉寄生孢属的种可以选自使君子白粉寄生孢(Ampelomyces quisqualis)。
隐球酵母属的种可以是罗伦隐球酵母(Cryptococcus laurentii)、白色隐球酵母(Cryptococcus albidus)、新型隐球酵母(Cryptococcus neoformans)、格特隐球酵母(Cryptococcus gattii)、指甲隐球酵母(Cryptococcus uniguttulatus)、阿德琳丝隐球酵母(Cryptococcus adeliensis)、艾睿丝隐球酵母(Cryptococcus aerius)、艾欧芘都丝米丽斯隐球酵母(Cryptococcus albidosimilis)、南极隐球酵母(Cryptococcusantarcticus)、水生隐球酵母(Cryptococcus aquaticusm)、黑隐球酵母(Cryptococcusater)、不丹隐球酵母(Cryptococcus bhutanensis)、康缫莘隐球酵母(Cryptococcusconsortionis)、弯曲隐球酵母(Cryptococcus curvatus)、粪产碱杆隐球酵母(Cryptococcus phenolicus)、皮肤隐球酵母(Cryptococcus skinneri)、地生隐球酵母(Cryptococcus terreus)和维释尼克芪隐球酵母(Cryptococcus vishniacci)。
在一些情况下,可以使用真菌或卵菌的菌株。在一些情况下,可以使用真菌或卵菌的培养物。在一些情况下,可以使用真菌或卵菌的培养物滤液。在一些情况下,可以使用真菌或卵菌的孢子(例如分生孢子、厚垣孢子、子囊孢子或游动孢子)。在一些情况下,可以使用真菌或卵菌的菌丝体。在一些情况下,可以使用真菌或卵菌的孢子与培养物滤液的组合。
真菌的种可以是例如木霉属的种,为哈茨木霉或绿木霉,可选地其中哈茨木霉的菌株是T22、T39、M10或P101,优选P101,或者绿木霉的菌株是GV41。例如,组合物可以包含哈茨木霉菌株M10菌株的孢子或绿木霉菌株GV41的孢子。
已经发现,上述真菌的次生代谢物与脂肪酸组分组合可以是特别有效的。可以对于这种组合观察到协同改进。通常,组合物包含由木霉属的种产生的次生代谢物。次生代谢物是由真菌或卵菌产生但不直接和不仅仅参与真菌或卵菌的中心生长、发育或繁殖的那些种。因此,次生代谢物的去除不一定导致真菌或卵菌立即死亡。次生代谢物可能由真菌或卵菌分泌,以帮助防御其他的种。通过在含水液体中培养真菌或卵菌并用有机溶剂例如乙酸乙酯提取次生代谢物可以获得真菌或卵菌的种的次生代谢物。然后可以蒸发提取物,并通过色谱分离所得固体。
典型地,当使用次生代谢物时,组合物包含由木霉属的种产生的次生代谢物,所述次生代谢物选自哈茨酸、脱甲基哈茨酸、高哈茨酸、6-正戊基-6H-吡喃-2-酮、疏水蛋白(hydrophobin)、帕克巴辛(pachybasin)、大黄酚、大黄素、1,3,6,8-四羟基蒽醌、1-乙酰基-2,4,5,7-四羟基蒽醌、呫吨酮、1-羟基-3-甲基蒽醌、1,8-二羟基-3-甲基蒽醌和下式的化合物:
优选地,组合物包含哈茨酸。组合物可以包含选自灰黄霉素、脱氯灰黄霉素、聚乙烯吡咯烷酮(aspyrone)、青霉酸、去氢青霉酸、梅毒素和苦味毒素(A、B、C或D)的次生代谢物。
菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或代谢物直接地或间接地(i)抑制生长或繁殖或(ii)杀死的植物病原体可以是任何植物病原体。因此,植物病原体可以是真菌、卵菌、细菌或线虫。典型地,植物病原体是真菌、卵菌或细菌。
真菌或卵菌植物病原体的实例是葡萄孢属(Botrytis)、链格孢属(Alternaria)、丝核菌属(Rhizoctonia)、核盘菌属(Sclerotinia)、镰刀菌属(Fusarium)、腐霉属(Pythium)、钩丝壳属(Uncinula)、内丝白粉菌属(Leveillula)、小菌核属(Sclerotium)、根串珠霉属(Thielaviopsis)、轮枝孢属(Verticillium)、稻痕菌属(Magnaporthe)、黑粉菌属(Ustilago)、层锈菌属(Phakospora)、柄锈菌属(Puccinia)、刺盘孢属(Colletotrichum)、疫霉属(Phytophthora)和蜜环菌属(Armillaria)的种和白粉菌。
通常植物病原体是葡萄孢属、链格孢属、丝核菌属、核盘菌属、镰刀菌属、腐霉属、钩丝壳属、内丝白粉菌属、疫霉属和小菌核属的真菌或卵菌的种。例如,植物病原体通常是选自以下的真菌或卵菌:灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)、葡萄钩丝壳菌(Uncinula necator)、鞑靼内丝白粉菌(Leveillula taurica)、终极腐霉菌(Pythium ultimum)、齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)、核盘菌(Sclerotiniasclerothium)、稻瘟菌(Magnaporthe oryzae)、禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)、布氏禾谷白粉菌(Blumeria graminis)、禾生球腔菌(Mycosphaerella graminicola)、玉米黑粉菌(Ustilago maydis)、亚麻栅锈菌(Melampsora lini)、致病疫霉(Phytophthorainfestans)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)和番茄尖孢镰刀菌(尖孢镰刀菌番茄专化型,Fusarium oxysporum lycopersici)。
线虫植物病原体的实例包括刺线虫属(Belonolaimus)、球胞囊线虫属(Globodera)、长针线虫属(Longidorus)、剑线虫属(Xiphenema)、轮线虫属(Criconemoides)、毛刺属(Trichodorus)、肾状线虫属(Rotylenchulus)、螺旋属(Helicotylenus)、小垫刃属(Tylenchulus)、短体线虫属(Pratylenchus)、穿孔线虫属(Radopholus)、根结线虫属(Meloidogyne)、异皮线虫属(Heterodera)、穿孔线虫属(Radopholus)、伪根瘤线虫属(Naccobus)、伞滑刃属(Bursaphelenchus)、茎线虫属(Ditylenchus)、茎线虫属、粒线虫属(Anguina)或滑刃属(Aphelenchoides)的线虫种。
线虫病原体的实例包括孢囊线虫,例如马铃薯金线虫(Globoderarostochiensis,金色球胞囊线虫)、禾谷胞囊线虫(Heterodera avenae)、香蕉穿孔线虫(Radopholus similis)、草地短体线虫(Pratylenchus pratensis)、多带螺旋线虫(Helicotylenchus multicinctus)、细刺线虫(Belonolaimus gracilis)、半穿刺线虫(Tylenchulus semipenetrans)、肾状肾形线虫(Rotylenchulus reniformis)、克瑞斯通茂蒂斯线虫(Cristonemoides similis)、强壮盘旋线虫(Robustnchus robustus)、纤弱鞘线虫(Hemicycliophora gracilis)和原始毛刺线虫(Trichodorus primitivus);根结线虫例如南方根结线虫(Meloidogyne incognita);剑线虫,如变尾剑线虫(Xiphinemadiversicaudatum)、细长长针线虫(Longidorus elongates)、纽带线虫(Hoplolaimuscoronatus)、里氏滑刃线虫(Aphelenchoides ritzema-bosi)、贝西滑刃线虫(Aphelenchoides besseyi);以及小线虫例如起绒草茎线虫(Ditylenchus dipsaci)。
在一些情况下,给定种可以是根据本发明使用的杀真菌剂,而在其他情况下,它可以是病原体。通常,根据本发明使用的组分(b)不同于植物病原体。
脂肪酸组分
本发明的组合物包含一种或多种脂肪酸或其衍生物。脂肪酸是式RCO2H的化合物,其中R是脂族烃基。通常R是长链脂族烃基。R可以是具有3至29个碳的饱和或不饱和脂族烃基(即C4-30脂肪酸)。典型地,R是具有3至27个碳原子的直链的饱和或不饱和的脂族烃基,例如直链的C3-27烷烃基团或直链的C3-27烯烃基团。R通常是具有11至21个碳原子的直链的饱和或不饱和的脂族烃基,例如直链的C11-21烷烃基团或直链的C11-21烯烃基团。不饱和脂族烃基通常含有1至4个双键,例如1或2个双键。
脂肪酸的衍生物包括脂肪酸的盐、酯和酰胺。通常,如本文所用,脂肪酸的衍生物是脂肪酸的盐或酯。
脂肪酸的酯通常是脂肪酸与醇(如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、乙-1,2-二醇、丙-1,3-二醇和丙-1,2,3-三醇(甘油))的酯。脂肪酸的衍生物可以是脂肪酸的盐或脂肪酸的甲酯(即RCO2Me)。
脂肪酸的盐通常是脂肪酸的金属盐。通常,一种或多种脂肪酸或其衍生物是脂肪酸的一种或多种金属盐。金属盐通常是碱金属盐。脂肪酸的碱金属盐包括脂肪酸的锂盐、钠盐、钾盐和铷盐。因此该组合物可以包含一种或多种脂肪酸或其钠盐或钾盐。例如,组分(a)可以是脂肪酸的一种或多种钠盐或钾盐。这种盐可以通过使一种或多种脂肪酸与包含所需金属阳离子的碱反应来形成,例如通过使一种或多种脂肪酸与氢氧化钠或氢氧化钾反应。
一种或多种脂肪酸或其衍生物通常选自:选自丁酸(C4)、戊酸(C5)、己酸(C6)、庚酸(C7)、辛酸(C8)、壬酸(C9)、癸酸(C10)、十一酸(C11)、月桂酸(C12)、十三烷酸(C13)、肉豆蔻酸(C14)、十五酸(C15)、棕榈酸(C16)、十七酸(C17)、硬脂酸(C18)、十九酸(C17)、花生酸(C20)、二十一酸(C21)、山嵛酸(C22)、二十三酸(C23)、二十四酸(C24)、二十五酸(C25)、蜡酸(C26)、二十七酸(C27)、二十八酸(C28)的饱和酸及它们的衍生物;和选自α-亚麻酸(C18:3)、十八碳四烯酸(C18:4)、二十碳五烯酸(C20:5)、二十二碳六烯酸(C22:6)、亚油酸(C18:2)、γ-亚麻酸(C18:3)、双高-γ-亚麻酸(C20:3)、花生四烯酸(C20:4)、肾上腺酸(C22:4)、棕榈油酸(C16:1)、异油酸(C18:1)、二十烯酸(C20:1)、油酸(C18:1)、反油酸(Ctrans-18:1)、巨头鲸鱼酸(C20:1)、芥酸(C22:1)、神经酸(C24:1)、二十碳三烯酸(20:3)的不饱和酸及它们的衍生物。
如本文所用,符号CM:N脂肪酸(其中M和N是整数)表示脂肪酸包含M个碳原子和N个双键。N个双键可以在任何位置(顺式或反式构型),尽管两个双键通常不相邻(即键合到同一个碳原子上)。因此,C18:0(或简称为C18)仅覆盖十八酸(硬脂酸),且C18:1包括具有18个碳和一个双键的所有脂肪酸,如油酸((Z)-十八碳-9-烯酸)和异油酸((E)-十八碳烯-11-烯酸)。
优选地,所述一种或多种脂肪酸或其衍生物选自不饱和以及饱和的C12-24脂肪酸及其盐或酯。一种或多种脂肪酸或其衍生物可选自不饱和以及饱和的C14-22脂肪酸、或不饱和以及饱和的C16-20脂肪酸及它们的盐或酯。
通常,一种或多种脂肪酸或其衍生物包含选自C16:0脂肪酸、C16:1脂肪酸、C18:0脂肪酸、C18:1脂肪酸、C18:2脂肪酸和C18:3脂肪酸的两种或更多种脂肪酸或其盐(例如钾盐或钠盐)。
例如,一种或多种脂肪酸可包含以下比例的以下脂肪酸:
1至10重量%的C16脂肪酸;
0至5重量%的C16:1脂肪酸;
60至94重量%的C18:1脂肪酸;和
5至20重量%的C18:2脂肪酸。
通常,一种或多种脂肪酸包含以下比例的以下脂肪酸:
3至7重量%的C16脂肪酸;
0至4重量%的C16:1脂肪酸;
70至89重量%的C18:1脂肪酸;和
8至18重量%的C18:2脂肪酸。
以重量%计的脂肪酸的量是相对于组合物中脂肪酸的总量。
一种或多种脂肪酸或其衍生物可以包含:
量为1至10重量%的C16脂肪酸的钠盐或钾盐;
量为0至5重量%的C16:1脂肪酸的钠盐或钾盐;
量为60至94重量%的C18:1脂肪酸的钠盐或钾盐;和
量为5至20重量%的C18:2脂肪酸的钠盐或钾盐。
特别地,一种或多种脂肪酸或其衍生物可以包含亚油酸(C18:2)、γ-亚麻酸(C18:3)、棕榈油酸(C16:1)、异油酸(C18:1)、二十烯酸(C20:1)、油酸(C18:1)、反油酸(Ctrans-18:1)及它们的衍生物中的一种或多种。
优选地,一种或多种脂肪酸或其衍生物包含油酸或其盐。一种或多种脂肪酸或其衍生物通常包含大于或等于70重量%的油酸或其盐,例如油酸的钾盐(油酸钾)。
根据本发明的组合物通常包含脂肪酸的一种或多种金属盐,脂肪酸的一种或多种金属盐可通过包括以下的工艺获得:
(i)提供有机油;
(ii)水解有机油中的甘油三酯;
(iii)从所水解的有机油中提取脂肪酸;和
(iv)形成所提取的脂肪酸的金属盐。
有机油是源自植物或动物的油或脂肪,且可以包含甘油三酯、脂质和脂肪酸。源自植物的油的实例包括苹果籽油、摩洛哥坚果油、椰子油、菜籽油、芥花油、玉米油、棉籽油、葡萄籽油、榛子油、澳大利亚坚果油(macadamia oil)、芥子油、皂厂杂油、橄榄油、棕榈核仁油、花生油、罂粟籽油、南瓜籽油、盏金花油(ramtil oil)、米糠油、红花油、大豆油、芝麻油、向日葵油、罗望子油、茶籽油和核桃油。来源于动物的油的实例包括源自动物提取的脂肪。优选地,有机油为橄榄油。
水解有机油中的甘油三酯通常包括用含水酸例如含水硫酸处理有机油。处理的有机油可以被加热。
从所水解的有机油中提取脂肪酸可以通过本领域技术人员熟知的任何合适的方法进行,例如蒸发、溶剂萃取、液-液萃取或色谱。
形成所提取的脂肪酸的金属盐可以通过技术人员熟知的任何合适的方法完成。典型地,这包括用包含金属的碱(例如金属氢氧化物诸如KOH或NaOH)处理脂肪酸。金属通常是碱金属,例如Li、Na、K或Rb,或碱土金属,例如Mg、Ca、Sr或Ba。
在一些情况下,脂肪酸衍生物可以简单地由包含脂肪酸的组合物开始形成。因此,可以通过提供一种或多种脂肪酸并形成所提取的脂肪酸的金属盐来生产脂肪酸组分。
因此,通常脂肪酸或其衍生物是脂肪酸的碱金属盐,优选脂肪酸的钾盐。
在本发明中使用脂肪酸作为活性剂可能是有利的,因为脂肪酸通常是可生物降解的并且被非目标物类良好耐受。
除了组分(a)和(b)之外,组合物通常还包含溶剂,该溶液通常是水。
一种或多种脂肪酸或其衍生物的总量通常为0.01至10体积%,或0.1至5体积%。例如,脂肪酸组分的浓度可以是0.5至30ml/L或1至20ml/L。优选地,脂肪酸组分的浓度为3至15ml/L,例如5至10ml/L。
如果真菌或卵菌组分包含孢子,则孢子浓度通常为105至109个孢子/ml。孢子浓度可以是106至108个孢子/ml。孢子浓度可以是105至107个孢子/ml。如果组合物包含菌丝体,则菌丝体的浓度通常为106至108ml-1
如果组合物包含代谢物,则代谢物的浓度通常为10-6至10-3M。例如,代谢物的浓度可以为5.0×10-6M至10-4M。
在上面给出的浓度,组合物通常是适合应用于植物的形式。组合物当然也可以以适于储存或运输的形式呈现。在这种情况下,浓度通常要高得多。例如,脂肪酸组分的浓度可以大于100ml/L或大于500ml/L。孢子浓度可以为109至1011ml-1
如果组合物包含培养物滤液,这可以通过以下方法生产。将真菌或卵菌的孢子悬浮液接种在合适的培养基中并温育24至92小时,可选地同时摇动。然后过滤出孢子生物质,洗涤并转移到无碳源的盐培养基中。然后温育该培养物1-10天,并通过离心分离培养物滤液。
例如,为了获得培养物滤液,将木霉属孢子悬浮液接种在PDB(100ml,于500ml无菌培养基中的107孢子/ml)并在定轨摇床(150rpm)上在25℃下温育48-72小时。过滤木霉属生物质,用无菌水洗涤,并转移到(如果未指定)用真菌病原体生物质或冻干蘑菇改良的没有任何碳源的盐培养基中。将培养物温育4-7天,然后通过离心(400rpm进行5分钟)分离培养物滤液。
组合物通常包含一种或多种脂肪酸和哈茨酸的钾盐。根据本发明的组合物的实例包括:
(a)浓度为5至10ml/L的油酸钾;和
(b)浓度为10-6M至10-4M的哈茨酸。
根据本发明的组合物的另一实例包括:
(a)选自不饱和及饱和的C16-20脂肪酸的脂肪酸的浓度为2至12ml/L的一种或多种盐;和
(b)浓度为105-107个孢子/ml的木霉属的种的真菌的孢子,优选其中孢子是哈茨木霉M10菌株的孢子或绿木霉GV41菌株的孢子。
本发明的组合物可以通过任何合适的方法制备。这通常包括以所需比例混合组分(a)和组分(b)。
本发明提供了农业化学产品,其包含:(a)一种或多种脂肪酸或其衍生物;和(b)真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物,所述菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或代谢物直接地或间接地(i)抑制植物病原体的生长或繁殖或(ii)杀死植物病原体,其中组分(a)和(b)被配制用于同时地或单独地对地点进行处理。一种或多种脂肪酸或其衍生物可以如本文所限定。真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物可以如本文所限定。
使用组合物的方法
本发明提供了用于在地点控制真菌或卵菌的方法,该方法包括同时或顺序地用以下处理地点:(a)一种或多种脂肪酸或其衍生物;和(b)真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物,所述菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或代谢物直接地或间接地(i)抑制植物病原体的生长或繁殖,或(ii)杀死植物病原体。
本发明还提供了保护植物抵抗真菌或卵菌的方法,所述方法包括同时或分别用以下处理植物自身的部分或全部、植物生长源于的种子或植物生长所在的地方:(a)一种或多种脂肪酸或其衍生物;和(b)真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物,所述菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或代谢物直接地或间接地(i)抑制植物病原体的生长或繁殖或(ii)杀死植物病原体。
可以被处理或控制的真菌或卵菌通常是葡萄孢属(Botrytis)、链格孢属(Alternaria)、丝核菌属(Rhizoctonia)、核盘菌属(Sclerotinia)、镰刀菌属(Fusarium)、腐霉属(Pythium)、钩丝壳属(Uncinula)、内丝白粉菌属(Leveillula)、小菌核属(Sclerotium)、根串珠霉属(Thielaviopsis)、轮枝孢属(Verticillium)、稻痕菌属(Magnaporthe)、黑粉菌属(Ustilago)、层锈菌属(Phakospora)、柄锈菌属(Puccinia)、刺盘孢属(Colletotrichum)、疫霉属(Phytophthora)和蜜环菌属(Armillaria)的种和白粉菌。通常真菌或卵菌是葡萄孢属、链格孢属、丝核菌属、核盘菌属、镰刀菌属、腐霉属、钩丝壳属、内丝白粉菌属、疫霉属和小菌核属的一个或多个种。例如,真菌可以选自灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、葡萄钩丝壳菌(Uncinulanecator)、鞑靼内丝白粉菌(Leveillula taurica)、终极腐霉菌(Pythium ultimum)、齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)、稻瘟菌(Magnaporthe oryzae)、禾谷镰刀菌(Fusariumgraminearum)、布氏禾谷白粉菌(Blumeria graminis)、禾生球腔菌(Mycosphaerellagraminicola)、玉米黑粉菌(Ustilagomaydis)、亚麻栅锈菌(Melampsora lini)、致病疫霉(Phytophthora infestans)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)和番茄尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum lycopersici)。
控制真菌或卵菌或保护植物抵抗真菌或卵菌的方法可进一步包括在处理之前鉴定植物或地点上的真菌或卵菌的存在。这可以通过分析植物样品或通过观察植物中的症状来完成。
本发明还提供了用于促进植物生长的方法,该方法包括包括同时或分别用以下处理植物自身的部分或全部、植物生长源于的种子或植物生长所在的地方:(a)一种或多种脂肪酸或其衍生物;和(b)真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物,所述菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或代谢物直接地或间接地(i)抑制植物病原体的生长或繁殖或(ii)杀死植物病原体。
本发明还提供了一种用于在地点控制线虫的方法,该方法包括同时或顺序地用以下方法处理该地点:(a)一种或多种脂肪酸或其衍生物;和(b)真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物,所述菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或代谢物直接地或间接地(i)抑制植物病原体的生长或繁殖或(ii)杀死植物病原体。
本发明还提供了一种保护植物抵抗线虫的方法,该方法包括同时或分别用以下处理植物自身的部分或全部,植物生长源于的种子或植物生长所在的地方:(a)一种或多种脂肪酸或其衍生物;和(b)真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物,所述菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或代谢物直接地或间接地(i)抑制植物病原体的生长或繁殖或(ii)杀死植物病原体。
为保护植物所控制或抵抗的线虫典型地为刺线虫属(Belonolaimus)、球胞囊线虫属(Globodera)、长针线虫属(Longidorus)、剑线虫属(Xiphenema)、轮线虫属(Criconemoides)、毛刺属(Trichodorus)、肾状线虫属(Rotylenchulus)、螺旋属(Helicotylenus)、小垫刃属(Tylenchulus)、短体线虫属(Pratylenchus)、穿孔线虫属(Radopholus)、根结线虫属(Meloidogyne)、异皮线虫属(Heterodera)、穿孔线虫属(Radopholus)、伪根瘤线虫属(Naccobus)、伞滑刃属(Bursaphelenchus)、茎线虫属(Ditylenchus)、茎线虫属、粒线虫属(Anguina)或滑刃属(Aphelenchoides)的线虫种。例如,线虫可以是孢囊线虫,例如马铃薯金线虫(Globodera rostochiensis,金色球胞囊线虫)、禾谷胞囊线虫(Heterodera avenae)、香蕉穿孔线虫(Radopholus similis)、草地短体线虫(Pratylenchus pratensis)、多带螺旋线虫(Helicotylenchus multicinctus)、细刺线虫(Belonolaimus gracilis)、半穿刺线虫(Tylenchulus semipenetrans)、肾状肾形线虫(Rotylenchulus reniformis)、克瑞斯通茂蒂斯线虫(Cristonemoides similis)、强壮盘旋线虫(Rotylenchus robustus)、纤弱鞘线虫(Hemicycliophora gracilis)和原始毛刺线虫(Trichodorus primitivus);根结线虫例如南方根结线虫(Meloidogyne incognita)或北方根结线虫(Meloidogyne hapla);剑线虫,如变尾剑线虫(Xiphinemadiversicaudatum)、细长长针线虫(Longidorus elongates)、纽带线虫(Hoplolaimuscoronatus)、里氏滑刃线虫(Aphelenchoides ritzema-bosi)、贝西滑刃线虫(Aphelenchoides besseyi);或小线虫例如起绒草茎线虫(Ditylenchus dipsaci)。
在本发明的方法中,组分(a)和(b)可以如本文进一步限定。该方法可以进一步包括用已知的杀真菌剂处理地点或植物。例如,地点的植物也可以用已知的杀真菌剂同时或顺序地处理。
应用于植物或地点的组合物可进一步包含载体、乳化剂、悬浮剂、分散剂、渗透剂、润湿剂、增稠剂、表面活性剂或稳定剂。载体可以是液体或固体载体。固体载体可选自淀粉、糖、纤维素粉、环糊精、木炭、大豆粉、小麦粉、谷壳、木粉、滑石、高岭土、膨润土、碳酸钙、硫酸钙、碳酸氢钠、沸石、硅藻土、白碳、粘土、氧化铝、二氧化硅和木质素。液体载体可选自水、大豆油、棉油、玉米油、菜籽油、芥花油、向日葵油、乙醇、乙二醇、丙酮、甲基乙基酮、二恶烷、THF、煤油、灯油、液体石蜡、二甲苯、环己烷、氯仿、氯苯、二甲基甲酰胺、乙酸乙酯和N-甲基吡咯烷酮。
应用的频率可以是任何合适的频率,如技术人员所熟知的。处理可能只发生一次。典型地,以每1天一次至每30天一次(例如每3天一次至每10天一次)的频率处理地点、植物自身的部分或全部、植物生长源于的种子或植物生长所在的地方,持续7天至100天的时间段。在某些情况下,地点/植物可以每天处理一次或两次。
通常,将地点、植物自身的部分或全部、植物生长源于的种子或植物生长所在的地方用包含如本文所限定的组分(a)和(b)两者的组合物处理。
所需组合物的量可以随着方法而变化。典型地,用10L/公顷至10000L/公顷的组合物处理地点、植物自身的部分或全部、植物生长源自的种子或植物生长所在的地方。通常使用50L/公顷至2000L/公顷的组合物。如果组合物以更浓缩的形式使用,那么每公顷的体积将相应地减少,反之亦然。
本发明还提供了如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物在控制真菌的方法中的用途,其中在所述方法中将一种或多种脂肪酸或其衍生物与本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由本文所限定的真菌或卵菌的种产生的代谢物组合使用。
本发明还提供了包含如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物的组合物在用于控制真菌或卵菌的方法中的用途,其中在所述方法中,菌株、培养物、培养物滤液、孢子或代谢物与本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物组合使用。
在本发明的方法中,植物通常是作物植物。作物的实例包括谷类作物、豆类/豆科作物、油料作物、饲料作物、纤维作物、块根作物、块茎作物、糖料作物、淀粉作物、渣作物、香料作物、蔬菜作物、绿肥作物和药用作物。作物植物的实例包括水稻、蜀黍、小麦、玉米、大麦、小米、珍珠粟(bajara,御谷)、绿豆、黑豆、大豆、豌豆、豇豆、花生、芥末、向日葵、芝麻、亚麻籽、菲克勒(fickler)、干草、青贮、高粱、象草、羊草(guinea grass,几内亚草)、埃及车轴草(berseem,亚历山大三叶草)、棉花、蒸汽(steam)、黄麻、洋麻、太阳麻、亚麻、马铃薯、甜菜、胡萝卜、芜菁、象草、山药、甘蔗、甜菜、木薯、甘薯、烟草、薄荷、除虫菊、姜、大蒜、辣椒、孜然洋葱、香菜、小豆蔻、胡椒、姜黄、菠菜、薄荷、茄子、番茄、秋葵和太阳麻。
植物通常是蔬菜或水果植物,例如茄科蔬菜植物或葫芦科蔬菜植物。可以用本发明的方法处理的植物的实例包括那些生产以下的植物:西兰花、花椰菜、朝鲜蓟、刺山柑、散叶甘蓝、羽衣甘蓝、菠菜、芸芥(Eruca sativa,芝麻菜)、甜菜绿(beet green)、白菜、莙荙菜、菜心、芜菁绿、菊苣、莴苣、芥菜、豆瓣菜、蒜韭菜(garlic chive)、韭葱、球芽甘蓝、球茎甘蓝、高良姜、生姜、芹菜、大黄、刺菜蓟、中国芹菜、芦笋、竹笋、马铃薯、菊芋(Jerusalemartichoke,洋姜)、红薯、芋头、山药、大豆、绿豆、苜蓿、胡萝卜、欧洲萝卜、甜菜、萝卜、大头菜(rutabaga,芜菁甘蓝,油菜)、芜菁、牛蒡、洋葱、青葱、大蒜、番茄、黄瓜、南瓜属植物果实(squash)、西葫芦、南瓜、辣椒、茄子、黏果酸浆(tomatillos,墨西哥绿番茄)、佛手瓜、秋葵、面包果、鳄梨、玉米、青豆、糖荚豌豆、苹果、葡萄、甜瓜、辣椒、西葫芦和草莓。
通常,所述地点是选自番茄植物、葡萄植物、西葫芦植物、辣椒植物、豆科植物、甜瓜植物和草莓植物的植物。
本发明还提供了用于生产作物产品的工艺,该工艺包括栽培植物,其中植物自身的部分或全部、植物生长源于的种子或植物生长所在的地方同时或分别用以下处理:(a)一种或多种脂肪酸或其衍生物;和(b)真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物,所述菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或代谢物直接地或间接地(i)抑制植物病原体的生长或繁殖或(ii)杀死植物病原体。
在本发明的一些方面中,优选将某些作物中的特定病原体作为目标。
在一种优选的实施方案中,待处理的植物或地点是小粒谷物,并且病原体是铁锈菌(柄锈菌目(Pucciniales)的真菌)、白粉菌、针壳孢属(Septoria)、丝核菌属、腐霉属或镰刀菌属。
在另一优选的实施方案中,待处理的植物或地点是水果和蔬菜植物,并且病原体是白粉菌、丝核菌属、腐霉属、镰刀菌属、疫霉属、链格孢属、霜霉菌(例如霜霉属(Peronospora)真菌)、葡萄孢属或核盘菌属。
在另一优选的实施方案中,待处理的植物或地点是葡萄植物,并且病原体是白粉菌、霜霉菌(例如霜霉属真菌)、葡萄孢属或核盘菌属。
在另一优选的实施方案中,待处理的植物或地点是梨果实植物,并且病原体是白粉菌或疮痂病菌(例如黑星菌属(Venturia)真菌)。
在另一优选的实施方案中,待处理的植物或地点是马铃薯植物,并且病原体是疫霉属(晚疫病)或链格孢属(早疫病)。
在另一优选的实施方案中,待处理的植物或地点是大豆植物,并且病原体是腐霉属、镰刀菌属、疫霉属或大豆锈菌(例如,层锈菌属(Phakopsora)真菌)。
在另一优选的实施方案中,待处理的植物或地点是水稻植物,并且病原体是丝核菌属或稻瘟病菌(例如稻痕菌属(Magnaporthe)真菌)。
本发明还提供了(i)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物以改善(ii)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物在地点控制真菌或卵菌的效果的用途。
本发明还提供了(i)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物以改善(ii)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物保护植物抵抗真菌或卵菌的效果的用途。
本发明还提供了(i)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物以改善(ii)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物在促进植物生长的效果的用途。
本发明还提供了(i)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物以改善(ii)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物在地点控制线虫的效果的用途。
本发明还提供了(i)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物以改善(ii)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物在保护植物抵抗线虫的效果的用途。
本发明还提供了(ii)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物以改善(i)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物在地点控制真菌或卵菌的效果的用途。
本发明还提供了(ii)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物以改善(i)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物在保护植物抵抗真菌或卵菌的效果的用途。
本发明还提供了(ii)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由所述真菌或卵菌的种产生的代谢物以改善(i)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物在促进植物生长的效果的用途。
本发明还提供了(ii)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物以改善(i)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物在地点控制线虫的效果的用途。
本发明还提供了(ii)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物用于改善(i)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物在保护植物抵抗线虫的效果的用途。
本发明还提供了一种使用(i)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物以改善(ii)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物在地点控制真菌或卵菌的效果的方法。
本发明还提供了一种使用(i)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物以改善(ii)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物在保护植物抵抗真菌或卵菌的效果的方法。
本发明还提供了一种使用(i)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物以改善(ii)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物在促进植物生长的效果的方法。
本发明还提供了一种使用(i)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物以改善(ii)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物在地点控制线虫的效果的方法。
本发明还提供了一种使用(i)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物以改善(ii)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物在保护植物抵抗线虫的效果的方法。
本发明还提供了一种使用(ii)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物以改善(i)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物在地点控制真菌或卵菌的效果的方法。
本发明还提供了一种使用(ii)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物以改善(i)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物在保护植物抵抗真菌或卵菌的效果的方法。
本发明还提供了一种使用(ii)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物以改善(i)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物在促进植物生长的效果的方法。
本发明还提供了一种使用(ii)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物以改善(i)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物在地点控制线虫的效果的方法。
本发明还提供了一种使用(ii)如本文所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物以改善(i)如本文所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物在保护植物抵抗线虫的效果的方法。
在以下实施例中描述了本发明的其他实施方式。
实施例
脂肪酸衍生物的产生
通过以下方法制备脂肪酸的盐衍生物。这种脂肪酸盐衍生物在本文被称为ABP-510。ABP-510通过如下方式而获得:在反应器中混合在油水解之后源自橄榄油的脂肪酸(C14-C18)的选择,借此将甘油从脂肪酸中分离出来并且对脂肪酸进行分馏以获得要求的规格。使脂肪酸在温度可控的共混容器中与这样数量的氢氧化钾和水反应以生产液体脂肪酸盐,直到发生组分溶解,并产生液体,当以在实地使用的推荐的应用率在水中稀释时将容易形成真溶液。
实施例1-真菌的控制
实施例1.1-评价ABP-510的杀真菌活性的体内生物控制测定
材料和方法
在番茄和葡萄植物上进行检验。将番茄栽培变种圣马尔扎诺(San Marzano)的种子播种在装有无菌土壤的14厘米直径的盆中。将葡萄植物(桑娇维塞(Sangiovese)栽培变种)的扦插物(cutting)种植在装有无菌土壤的14厘米直径的盆中。所有的检验都在温室进行。使用产品ABP-510作为四种不同浓度(10、20、30和40ml/L)的喷雾溶液,并将其有效性与富力库(Folicur)(广泛用于抗白粉菌的化学杀真菌剂)进行比较。将ABP-510和富力库(用作阳性对照)喷洒在10株植物上,通过在10株植物上仅喷洒水来获得阴性对照(表1)。
ABP-510和富力库的处理(表2)在出现第一个白粉病症状时开始,并且以7天的间隔重,总共5次应用。
每7天记录一次感染叶子的数目监测疾病发展。根据目视评估量表(表3),还对番茄植物评估侵袭强度(感染的严重度)。
结果
非常有利的环境条件允许白粉病在番茄和葡萄上强烈扩散。ABP-510在早期和晚期都很好地控制了疾病。在番茄植物上(图1),以40、30或20ml/L使用的ABP-510甚至比化学杀真菌剂富力库(FOLICUR)对白粉病发展控制得更好。
感染严重度的测定(图2)表明以40、30或20ml/L使用的ABP-510强烈降低了疾病的毒力和发展,其效力高于此富力库(FOLICUR),而以10ml/L使用的ABP-510具有类似于富力库(FOLICUR)的效力。
对任何ABP-510检验浓度没有发现植物毒性效应。
一般来说,在葡萄植物上进行的实验显示了与番茄植物所获得的相似的疾病控制水平。非常有利的环境条件意味着白粉病发展很快(即在15天中,对照叶子的整个表面被定植)。无论如何,ABP-510处理(40、30或20ml/L)的效力与富力库(FOLICUR)的处理相当,而ABP-51010ml/L的效果略低于富力库(FOLICUR),但即便如此当与未处理的对照相比时有效控制白粉病发展(图3)。
有趣的是,注意到ABP-510(40-30-20ml/L)的植物毒性作用较小,当ABP-510以10ml/L应用时,没有获得植物毒性效应。
实施例1.2-评价ABP-510和木霉属对白粉病的组合应用的效果的体内测定
ABP-510与木霉属的种的组合已经在番茄植物上进行了针对白粉病的检验。
材料和方法
在番茄植物上进行检验。将番茄栽培变种圣马尔扎诺的种子播种在装有无菌土壤的14厘米直径的盆中。所有的检验都在温室中进行。产品ABP-510以三种不同浓度(10、5和3ml/L)使用,并通过在ABP-510产品中稀释哈茨木霉孢子悬浮液至终浓度为107个孢子ml-1获得组合的溶液。将组合的溶液喷洒在10株植物上。每种对照也喷洒在10株植物上。对照是:a)仅哈茨木霉至终浓度为107个孢子ml-1;b)仅三种不同浓度(10、5和3ml/L)的ABP-510;c)仅水(表4和5)。
每7天记录感染叶子的数目监测疾病发展。还根据视觉评估量表(表3)评估了侵袭强度(感染的严重度)。
结果
使用ABP-510(10或5ml/L)单独和与哈茨木霉(107个孢子ml-1)组合处理很好地控制了疾病的发展。用组合(ABP-510+哈茨木霉)的处理在控制疾病发展方面特别有效,特别是在晚期(图4)。
感染严重度的分析表明,通过使用5或3ml/L的ABP-510与哈茨木霉(107个孢子ml-1)的组合的处理和通过使用10ml/L的ABP-510单独或与哈茨木霉组合的处理,很好地控制疾病的发展,大大减少疾病的毒力和发展(图5-参见在t=0-1°处理的结果;t=7天-2°处理;t=14天-3°处理;t=21天-4°处理;以及t=28天-5°处理的疾病的严重度)。
实施例1.3-评价ABP-510与木霉属抵抗齐整小核菌的单一和组合应用的效应的体内测定
对土源病原体齐整小核菌的生物控制测定
为了评价产品针对土源植物病原真菌的杀真菌活性,评估了产品的单一应用和与哈茨木霉组合应用对辣椒植物上由土源病原体齐整小核菌引起的疾病发展的效应。
材料和方法
将两周龄的辣椒植物移栽到装有感染了齐整小核菌的土壤的14厘米直径的盆中。真菌病原体齐整小核菌生长约15天。菌丝体生物质是在衬有Miracloth(神奇滤布)的Buchner隧道(tunnel,大棚)中真空采收的。将所有液体基质除去,并称重半干燥的真菌生物质。将称重的真菌生物质加入水中并在Waring搅拌机中均化直至获得均匀的真菌悬浮液。将土壤与真菌悬浮液混合至每kg无菌土壤的5g生物质的浓度。
移栽到受感染的土壤中两天后,用50ml的单一和组合溶液(木霉属+ABP-510)浇灌植物。每周进行三次连续的应用。
通过仅用水浸湿土壤来获得阴性对照。每组处理由16株植物组成(表6)。所有的检验都是在控制温度下在温室中进行。
ABP-510以三种不同浓度使用:10、5和3ml/L。通过在产品中稀释哈茨木霉孢子悬浮液得到终浓度为107个孢子ml-1,得到组合的溶液(表6和7)。
每7天监测疾病发展,记录在土壤水平或土壤水平以下的茎上出现明显深棕色病变的萎凋植物的数目或由于广泛的较下部茎腐烂而死亡。
结果
初步结果(图6)表明,通过在三种测试浓度下用杀真菌剂ABP-510处理减少齐整小核菌感染的发展。
关于产品ABP-510与哈茨木霉相互作用的评估,组合处理5ml/L ABP-510+木霉属看起来显然是协同的。在这种情况下,如图6所示,疾病被完全阻断。
结果还显示在三种检验浓度下的杀真菌剂ABP-510不抑制木霉属的生物控制活性。
实施例1.4-评价ABP-510的杀真菌活性的体外生物控制测定
评估ABP-510针对植物病原性真菌灰葡萄孢、链格孢属的种、立枯丝核菌、核盘菌属的种、镰刀菌属的种、腐霉属的种的杀真菌活性。本领域常用的一些最常见的杀真菌剂被用作阳性对照:Ortiva(Singenta,嘧菌酯(Azoxystrobin));富力库(Bayer,戊唑醇(Tebuconazole));五氯硝基苯(Fungiclor)(Bayer,硝胺(Dicloran));Enovit(Sipcam,甲基硫菌灵(Tiofanate methyl))。
材料和方法
通过在固体PDA中包含浓度从2.5ml/L到40ml/L变化的ABP-510,进行测定。考虑到相应数据表中报道的应用剂量,分别向PDA固体培养基加入Ortiva、富力库、五氯硝基苯和Enovit。将直径0.5cm的不同病原体的琼脂圆盘置于PDA平板的中心。作为阴性对照,我们考虑了在未处理的PDA平板上生长的病原体。每种处理包括三个重复,将平板在25℃温育,并且每天记录植物病原真菌的径向生长持续七天。
结果
结果显示ABP-510当以2.5到5-10ml/L施用时能够显著降低检验的植物病原真菌的生长。ABP-510(30-40ml/L)完全抑制所有病原菌的生长。特别是,当在20ml/L下应用ABP-510时,腐霉属的种和立枯丝核菌的生长被完全抑制。链格孢属的种从2.5ml/L的剂量开始显著减少。在40ml/L浓度下未被完全抑制的唯一病原体是镰刀菌属的种。ABP-510对植物病原体腐霉属的种的径向生长的效应显示在图7中。
实施例1.5-评价ABP-510的杀真菌活性的体内生物控制测定
对ABP-510控制葡萄和番茄白粉病的致病因子葡萄钩丝壳菌和鞑靼内丝白粉菌的天然感染的发展和扩散的能力进行了体内检验。
材料和方法
对番茄和葡萄植物进行检验。将番茄栽培变种圣马尔扎诺的种子播种在装有无菌土壤的14厘米直径的盆中。将葡萄植物(栽培变种桑娇维塞(Sangiovese))的扦插物种植在装有无菌土壤的14厘米直径的盆中。所有的检验都在温室进行。产品ABP-510作为三种不同浓度(20、30和40ml/L)的喷雾溶液使用,并将其有效性与富力库(广泛用于抗白粉菌的化学杀真菌剂)进行比较。将ABP-510和富力库(用作阳性对照)喷洒在10株植物上,通过在10株植物上仅喷洒水来获得阴性对照(表8)。
用ABP-510和富力库的处理(表9)在出现第一个白粉病症状时开始并且以7天的间隔重复,总共5次应用。
每7天记录一次感染叶子的数目监测疾病发展。根据目视评估量表(表11),还评估了侵袭强度(感染的严重度)。
结果
环境条件有利于天然发生的白粉病发展。数据分析表明,三种检验浓度下的产品ABP-510在番茄和葡萄二者上产生了有效的白粉病控制。一般而言,杀真菌剂ABP-510在阻断疾病的非常早的阶段并阻止其进一步发展方面显示出极好的效力。特别是在番茄的情况下,所获得的结果显示,在40和30ml/L的浓度下的处理控制疾病发展同富力库一样好。图8显示了在每种处理后受白粉病影响的番茄叶区域的百分比。
实施例1.6-通过添加木霉属的种的次生代谢物来改善ABP-510产品的杀真菌活性
关于木霉属直接控制真菌植物病原体的能力已经对木霉属的次生代谢物进行研究。一般来说,直接使用由真菌生物控制种产生的抗微生物化合物,而不是整个“活的”生物体,不仅在工业和农业应用中是有利的,而且可能更符合公众意见,因为这些生物产物不复制和传播。这里我们报告了对这些分子的“现有技术”的综合描述,然后分析了观察到的对植物/真菌病原体相互作用的主要效应。
哈茨酸
哈茨酸是由在澳大利亚分离的哈茨木霉菌株产生的特特拉姆酸(tetramic acid)衍生物。该化合物显示出对畸雌腐霉、核盘菌和立枯丝核菌的体外抗菌活性。在低浓度时还在油菜幼苗上观察到植物生长促进作用。此外,这种化合物结合必需的金属,如Fe3+
6-n-戊基-6H-吡喃-2-酮(6PP)
6PP是研究得最多的木霉属抗菌化合物之一,由几个种大量产生(深绿木霉菌株P101每升液体培养物产生高达72mg的6PP)。它是在体外和体内都对植物病原体显示直接作用的一种挥发性化合物。
疏水蛋白(HYTRA1)
从哈茨木霉的培养物滤液中纯化出2型疏水蛋白。它在植物中充当防御响应的诱导剂,并且在拮抗性真菌与植物的相互作用过程中起重要作用。
实施例1.7-体外生物控制测定
材料和方法
将次生代谢物以对于HA和6PP为1×10-5M和1×10-6M;对于HYTRA1为1×10-6M和1×10-7M的浓度各自加入基质,而ABP-510以7.5ml/L的浓度使用。针对植物病原真菌灰葡萄孢、镰刀菌属的种和终极腐霉菌进行体外检验。
结果
结果表明,代谢物HA和HYTRA1的加入导致ABP-510对病原体灰葡萄孢的控制活性显著提高。处理对植物病原体灰葡萄孢的径向生长的效应如图9所示。
实施例1.8-评价通过木霉代谢物的加入来改善ABP-510活性的体内生物控制测定
进行针对叶面病原体灰葡萄孢的体内检验,以评估通过添加由木霉属的种产生的以下特定次生代谢产物对产品ABP-510的杀真菌活性的改善:哈茨酸(HA)和疏水蛋白1(HYTRA1)。
材料和方法
对番茄和西葫芦植物进行检验。将番茄(栽培变种圣马尔扎诺)和西葫芦的种子播种在装有无菌土壤的14cm直径的盆中。
将植物在18/15℃(日/夜)、70%相对湿度的温室中温育。光周期为12小时/光和12夜/黑暗。接种灰葡萄孢后,培养温度降低至15/10℃,且相对湿度增加90-100%,以建立病原体发展的最佳条件。
对番茄植物的体内试验(表13)涉及两种不同的处理:(i)应用加有各代谢物的产品ABP-510和同时将病原体接种在叶上(共同应用);(ii)在病原体接种前5小时在叶上喷洒加有代谢物的产品。
产品ABP-510以两种不同浓度(10ml/L和7.5ml/L)使用。向7.5ml/L ABP浓度加入次生代谢物。在共同应用处理中,将杀真菌剂以10μl的滴应用于由五个小叶组成的每片叶子。在喷雾处理中,将10ml杀真菌剂喷洒在每株植物的叶上。
在西葫芦植物上(表14),杀真菌剂ABP-510+次生代谢物以7.5ml/L的浓度使用,并且仅作为共同应用处理进行。在阴性对照处理中,叶子用无菌去离子水处理。将灰葡萄孢孢子悬浮液(106个孢子ml-1)以10-μl/滴应用到每片叶子上。将受感染的植物在10-15℃的温室中在90-100%湿度下温育直至在阴性对照植物上出现第一次坏死。
在真菌应用后72小时开始监测杀真菌剂应用的效果,在真菌应用后72小时在用作对照的植物的感染叶上观察到坏死组织的明显斑点。监测感染发展多于7天,记录感染叶子的数目和坏死区域的大小。
结果
结果表明,在对番茄和西葫芦植物的共同应用处理中加入代谢物哈茨酸导致ABP-510产品在番茄和西葫芦植物上抵抗叶面病原体灰葡萄孢的杀真菌活性的显著改善。
一般来说,结果表明,以7.5ml/L应用的杀真菌剂ABP-510的处理与阴性对照(单独的灰葡萄孢)相比产生了坏死区域的重要减少,并且减少了显示症状的叶子的数目。在番茄的情况下(图10至13),与单独的杀真菌剂处理相比,用7.5mg/l浓度的ABP-510杀真菌剂与哈茨酸共处理引起病原体生长显著降低。特别是ABP-510(7.5ml/L)+哈茨酸处理能够在初始阶段以及当以10ml/L单独应用杀真菌剂时阻断感染。
喷洒处理在控制病原体灰葡萄孢上不如共同应用处理有效,并且加入木霉属次生代谢物后,记录到ABP-510产品的杀真菌活性没有改善。
在西葫芦植物(图14和15)上获得的结果显示,浓度的ABP-510(7.5ml/L)+哈茨酸的处理完全抑制疾病症状的发展。
实施例1.9-评价同时应用木霉属的种和ABP-510的潜在协同作用的新的体外检验
材料和方法
通过在固体PDA中包括浓度为5和7ml/L的ABP-510进行这些竞争测定。将直径0.5cm的两种不同病原体(灰葡萄孢和镰刀菌属)和木霉属的种的琼脂圆盘置于PDA平板的两个相对端。作为阴性对照,我们考虑了在未处理的PDA平板上和在没有木霉属的种的处理的PDA平板上生长的病原体。每种处理由三次重复组成。将平板在25℃温育,并且每天记录植物病原真菌的径向生长持续七天。
结果
结果显示(图16和17)加入木霉属的种可以改善ABP-510抵抗所检验的病原体的控制。
实施例1.10-单独或与木霉属组合的ABP-510对由立枯丝核菌在莴苣植物上引起的疾病发展的效应的确定.
目的:确定ABP-510单独或与两种属于两个不同种(绿木霉GV41和哈茨木霉M10)的木霉属菌株组合对由土源病原体立枯丝核菌在莴苣植物上引起的疾病的发展的效应。
应用于植物的处理列于下表14a中。
实验设计和描述:所有植物在同一工作台上放置在一起。有16种不同的处理和每种处理有8株植物,给出总数128株植物。表14a中列出了剂量。
盆装介质:合成的商用袋装土壤“Green Habitat”,意大利佛罗伦萨,Valcoforts.r.l。将土壤在120℃高压蒸汽灭菌一小时。
处理:将2周龄的莴苣植物移栽到装有受立枯丝核菌侵染的土壤的10cm直径的盆中。
在受侵染土壤中移栽两天后,将植物用10ml的单一和组合溶液(M10+Gv41+ABP510;M10+ABP 510;GV41+ABP510)浇灌。每周进行三次连续的应用。
通过仅用水浇灌土壤获得了阴性对照。每组处理由8株植物组成。所有的检验都是在受控温度下在温室中进行的。没有应用额外的化学品。
检验的持续时间:处理后4周。
接种技术:两周龄的莴苣植物用于本实验。在自然温度和光照条件下,将植物在温室中温育以建立病原体发展的最佳条件。
以三种不同浓度使用杀真菌剂ABP-510:10、5和3ml/L,通过在产品中稀释木霉属的种的孢子的悬浮液获得106个孢子ml-1的终浓度,获得组合的溶液。将莴苣植物在受侵染的土壤中移栽两天后用50ml的单一和组合的溶液(木霉属+ABP510)洗涤。每周进行三次连续的应用。通过仅用水浸湿土壤来获得阴性对照。
使真菌病原体立枯丝核种植生长在PDB中约15天。菌丝体生物质是在衬有Miracloth的Buchner隧道中真空采收的。将所有液体基质除去,并称重半干燥的真菌生物质。将称重的真菌生物质加入水中并在Waring搅拌机中均化直至获得均匀的真菌悬浮液。将土壤与真菌悬浮液混合,使浓度为每kg无菌土壤5g生物质。
数据收集和评估
疾病效力:每7天监测疾病发展,记录在土壤水平或只在土壤水平以下的茎上出现明显深棕色病变的萎凋植物的数目或由于广泛的较下部茎腐烂而死亡。
结果总结
初步结果(图31,对于每种检验,从左至右处理1至处理4)表明通过在三种检验浓度下用杀真菌剂ABP 510处理稍微降低了丝核菌感染的发展。特别是死亡植物的百分比相比于水对照减少了25%。
关于产品ABP-510与木霉属的种协同相互作用的评估,初步结果表明,单独或混合应用ABP-510与两种木霉属菌株与单独应用该产品相比总是具有协同相互作用。一般而言,产品ABP-510与单菌株M10或GV41组合的应用比两种菌株的混合更好。另外,与M10的组合是更好的,可能是由于该菌株控制丝核菌属的能力比菌株GV41更强。
在剂量效应方面,ABP-510和哈茨木霉M10之间的组合似乎更有效;事实上,5ml/l+M10保护植物免受丝核菌属的侵袭,像相同的处理10ml/l+M10+GV41和10ml/l+GV41一样(这些差异可以通过菌株对杀真菌剂的不同敏感性给出。
实施例1.11-单独或与木霉属组合的ABP-510对莴苣植物上由核盘菌引起的疾病发展的效应的确定.
目的:确定产品杀真菌剂ABP-510单独或与属于两个不同种的三种木霉属菌株(哈茨木霉T22、哈茨木霉M10、绿木霉GV41)组合应用的效应对莴苣植物上由土源性病原体核盘菌引起的疾病发展。
应用于植物的处理示于下表14b中。
实验设计和描述:所有植物在同一工作台上放置在一起。有16种不同的处理和每种处理有8株植物,给出总数128株植物。表14b中显示了剂量。没有额外的化学品被应用。
盆装介质:合成的商用袋装土壤(通用泥炭藓)“Green Habitat”,意大利佛罗伦萨,Valcofort s.r.l。将土壤在120℃高压蒸汽灭菌一小时。
处理:将2周龄的莴苣植物移栽到装有受核盘菌属的种侵染的土壤的10cm直径的盆中。
在受侵染土壤中移栽两天后,将植物用10ml的单一和组合溶液(M10+Gv41+ABP510;M10+ABP 510;GV41+ABP510)浇灌。每周进行三次连续的应用。
通过仅用水浇灌土壤获得了阴性对照。每组处理由8株植物组成。所有的检验都是在受控温度下在温室中进行的。
检验的持续时间:处理后4周。
接种技术:两周龄的莴苣植物用于本实验。在自然温度和光照条件下,将植物在温室中温育以建立病原体发展的最佳条件。
以三种不同浓度使用杀真菌剂ABP-510:10、5和3ml/L,并通过在产品中稀释木霉属的种的孢子的悬浮液获得106个孢子ml-1的终浓度,获得组合的溶液。将莴苣植物在受侵染的土壤中移栽两天后用50ml的单一和组合的溶液(木霉属+ABP510)洗涤。每周进行三次连续的应用。通过仅用水浸湿土壤来获得阴性对照。
真菌病原体核盘菌属在PDB中生长约15天。菌丝体生物质是在衬有Miraclot的布氏(Buchner)隧道中真空采收的。将所有液体基质除去,并称重半干燥的真菌生物质。将称重的真菌生物质加入水中并在Waring搅拌机中均化直至获得均匀的真菌悬浮液。将土壤与真菌悬浮液混合,至每kg无菌土壤5g生物质的浓度。
数据收集和评估
疾病效力:每7天监测疾病发展,记录受侵袭的植物的数目
结果总结
初步结果(图32)表明通过在三种检验浓度下用杀真菌剂ABP 510处理稍微降低了核盘菌属的种感染的发展。特别是对于处理ABP 5ml/l,死亡植物的百分比相比于水对照显著减少。
关于该产品与木霉属的种协同相互作用的评估,初步结果表明,与绿木霉Gv41和哈茨木霉T22一起应用与单一应用相比总是具有协同相互作用。另外,与M10的组合效率更低。
在剂量效应方面,ABP-510和哈茨木霉M10之间的组合似乎更有效;事实上,与其他处理相比,3ml/l+T22更好地保护植物免受核盘菌属的攻击(这些差异可以通过菌株对杀真菌剂的不同敏感性给出)。
实施例1.12-单独或与木霉属组合的ABP-510对莴苣植物上天然发生的核盘菌属引起的疾病发展的效应的确定
目的:确定产品杀真菌剂ABP-510单独或与属于两个不同种(绿木霉GV41和哈茨木霉M10)的两种木霉属菌株应用植物对田间莴苣植物自然发生的核盘菌属疾病的发展的效应。
应用于植物的处理列于下表14c中。
实验设计和描述:将16种处理中的每一种应用于20株植物,给出总数320株植物。表14c中显示了剂量。没有额外的化学品被应用于植物。
盆装介质:合成的商用袋装土壤(通用泥炭藓)“Green Habitat”,意大利佛罗伦萨,Valcofort s.r.l。将土壤在120℃高压蒸汽灭菌一小时。
处理:在聚苯乙烯盒中播种三周后,将莴苣幼苗用5ml的单一的和组合的溶液(M10+Gv41+ABP510;M10+ABP 510;GV41+ABP510)。随后的应用是在七天后进行的。随后将植物移栽到塑料大棚(plastic tunnel)下的土壤中并用50ml的单一和组合溶液洗涤。通过仅用水浸湿土壤来获得阴性对照。通过用50ml的单一和组合的溶液浸湿土壤,每15天重复处理持续两个月。
检验的持续时间:在塑料大棚下的土壤中移栽8周后。
接种技术:将四周龄的莴苣植物移栽在塑料大棚下的田间。
以三种不同浓度使用杀真菌剂ABP-510:10、5和3ml/L,并通过在产品中稀释木霉属的种的孢子的悬浮液获得106个孢子ml-1的终浓度,获得组合的溶液。将莴苣植物在田间移栽两天后用50ml的单一和组合的溶液(ABP510+木霉属)洗涤。每15天一次进行四次连续的应用持续两个月。通过仅用水浸湿土壤来获得阴性对照。
致病性感染是由于病原体核盘菌属的种和灰葡萄孢自然感染在田间的莴苣植物而引起的。
数据收集和评估
疾病效力:通过记录被侵袭的植物的数目,移栽(移栽14-10;28/10;11/11;25/11;10/12;收获17/12)后两个月每15天一次监测疾病发展。
结果总结
在田间移栽后4周,核盘菌属疾病首次出现,移栽后5-6周疾病发病率大幅度上升。
得到的结果如图33所示,并且显示,在10ml/L浓度下的处理与水对照相比控制该疾病的发展。以5和3ml/L使用的ABP-510处理中,与10ml/L处理相比,控制感染的效果稍差。
关于产品与木霉属的种协同相互作用的评估,结果显示,具有两种木霉属菌株的3ml ABP的处理与在所测试的三种浓度下单独应用产品相比总是具有协同相互作用。一般而言,产品与单一菌株M10或GV41相组合的应用与两种菌株的混合相比更好。
实施例2-生长促进
实施例2.1-用于评价产品ABP-510与木霉属的种的组合应用的植物生长促进效应的体内测定
检验了产品ABP-510与属于两个不同种的以下三种木霉属菌株的组合应用的生长促进效应(增加的茎或根长,鲜重/干重):绿木霉GV41;和哈茨木霉T22和M10。
材料和方法
在番茄植物上进行检验。将2周龄的番茄植物移栽到装有无菌土壤的14cm直径的盆中,并用30ml的组合溶液(T22+ABP-510;M10+ABP-510;或GV41+ABP-510)洗涤。通过用混合物浸湿土壤每周进行四次另外的应用。
通过仅用水浸湿土壤获得阴性对照。每组处理包括10株植物(表15和16)。所有的检验都在受控温度下的温室中进行。移栽后30天收集结果。
ABP-510以三种不同浓度:10、5和3ml/L使用。通过在ABP-510产品中稀释木霉属孢子的悬浮液从而获得107个孢子ml-1的终浓度,获得组合的溶液。
结果
初步结果(图18至21)表明,哈茨木霉T22的植物生长促进不受ABP-510抑制。
ABP-510和哈茨木霉M10的组合是有效的。实际上,10ml/L+M10使木霉属的植物根促进效果提高了约40%。
添加真菌后,ABP-510产品在促进生长方面的表现普遍提高。
实施例2.2-用于评价产品ABP 510和木霉属的种的组合应用的植物生长促进效应的体内测定
检验了产品ABP-510与以下三种属于两个不同种的木霉属菌株的组合应用的生长促进作用(增加的茎或根长度,鲜重/干重):绿木霉GV41和哈茨木霉T22和M10。
材料和方法
在番茄植物上进行检验。将2周龄的番茄植物移栽到装有无菌土壤的14cm直径的盆中,并用30ml的组合溶液(T22+ABP-510;M10+ABP-510;GV41+ABP-510)洗涤。通过用混合物浸湿土壤每周进行多于四次应用。
通过仅用水浸湿土壤获得阴性对照。每组处理包括10株植物(表17和18)。所有的检验都是在受控温度下的温室中进行的。在移栽后30天收集结果。
ABP-510以三种不同的浓度:10、5和3ml/L使用,并且通过在产品中稀释木霉属孢子的悬浮液从而获得107个孢子ml-1的终浓度,获得组合的溶液。
结果
检验结果见图22至27。ABP-510和哈茨木霉M10的组合特别有效:10ml/L+M10提高了木霉属的植物根系促进效应约40%。哈茨木霉GV41的加入增强了植物根系的促进作用。
实施例2.3-产品ABP 510和木霉属的种的组合应用对球茎甘蓝植物的植物生长促进效应
目的:确定产品ABP-510与以下属于木霉属两个不同种的两株菌株的同时应用对球茎甘蓝植物(栽培变种沃尔图诺(Volturno))在改善植物生产力和作物品质方面的效应:绿木霉GV41和哈茨木霉M10。
应用于植物的处理列于下表18a中。
实验设计和描述:每种处理包括随机区组中的20株植物。有16种处理,且植物总数为320。按照表18a中的指示应用剂量。没有额外的化学品被应用到植物。
盆装介质:合成的商用袋装土壤(通用泥炭藓)“Green Habitat”,意大利佛罗伦萨,Valcofort s.r.l。
处理:在聚苯乙烯盒中播种三周后,将球茎甘蓝幼苗用5ml的单一和组合的溶液(M10+Gv41+ABP510;M10+ABP 510;GV41+ABP510)洗涤。随后的应用是在七天后进行的。随后将植物移栽到旷地的土壤中,并用50ml的单一溶液和组合溶液洗涤。通过仅用水浸湿土壤来获得阴性对照。通过用50ml的单一和组合的溶液浸湿土壤,每15天一次重复处理持续四个月。
检验持续时间:在塑料大棚下的土壤中移栽后12周
接种技术:将四周龄的球茎甘蓝植物移栽到旷地土壤中。
杀真菌剂ABP-510以三种不同的浓度:10、5和3ml/L使用,通过在产品中稀释木霉属的种的孢子的悬浮液获得106个孢子ml-1的终浓度,获得组合的溶液。在田间移栽后,用50ml的单一和组合的溶液(ABP510+木霉属)洗涤球茎甘蓝植物。每15天一次进行八次连续应用持续四个月。通过仅用水浸湿土壤来获得阴性对照。
数据收集和评估
植物生产力和作物品质的改善:在田间移栽四个月后,通过确定用木霉属的种与不同浓度的产品ABP 510组合处理相比于单独的木霉属的种处理和单独的ABP 510处理的球茎甘蓝植物(在绿色部分(茎)周长,茎和根的鲜重上的)百分比增加来评价绿色部分的周长、根的长度、绿色部分和根的鲜重和干重。
结果总结
初步结果(图34至39)显示在所有检验浓度下的ABP-510与哈茨木霉M10的组合似乎在促进生长方面更有效。与单一应用(仅产品和仅木霉属)相比,这种处理似乎也显然是协同的。
具体地,组合ABP 510 10ml/l+M10和ABP 510 5ml/l+M10的应用导致与单独应用的产品相比,茎的周长增加大约为20%。与单独使用的产品相比,鲜重也增加了20%。
结果还表明,在三种测试浓度下的杀真菌剂ABP 510对球茎甘蓝植物的生长促进没有影响。
实施例2.4-产品ABP 510和木霉属植物的组合应用对番茄植物的植物生长促进效应
目的:确定产品杀真菌剂ABP-510与以下属于木霉属两个不同种的三株木霉属菌株的组合应用在对番茄植物(番茄(Solanum lycopersicum)栽培变种圣马尔扎诺(SanMarzano))生长促进方面的效应:绿木霉GV41和哈茨木霉T22和M10。
应用于植物的处理列于下表18b中。
实验设计和描述:所有植物在同一工作台上放置在一起。有16种不同的处理,每种被应用到10株植物,给出总数160株植物。表18b中显示了每次处理的剂量。没有额外的化学品被应用。
盆装介质:合成的商用袋装土壤(通用泥炭藓)“Green Habitat”,意大利佛罗伦萨,Valcofort s.r.l。将土壤在120℃高压蒸汽灭菌一小时。
处理:将在聚苯乙烯盒中播种两周后发芽的番茄幼苗移栽到装有无菌土壤的14cm直径的盆中,并用50ml的单一和组合的溶液(M10+Gv41+ABP510;M10+ABP 510;GV41+ABP510)洗涤。每周进行四次应用。
通过仅用水浸湿土壤获得阴性对照
检验的持续时间:移栽后4周。
接种技术:将两周龄的植物番茄栽培变种圣马尔扎诺移栽到装有无菌土壤的14厘米直径的盆中。将植物在受控温度下的温室中温育。
以三种不同浓度使用杀真菌剂ABP-510:10、5和3ml/L,并通过在产品中稀释木霉属的种的孢子悬浮液获得106个孢子ml-1的终浓度,获得组合的溶液。番茄植物,在无菌土壤中移栽后,用50ml的单一和组合的溶液(ABP510+木霉属)浇灌。每周进行三次连续的应用。通过仅用水浸湿土壤获得阴性对照。
数据收集和评估
生长促进效应:在四个月处理后,通过评价用木霉属的种与不同浓度的产品ABP510组合处理相比于单独的木霉属的种处理和单独的ABP 510处理的番茄植物(在茎和根的长度以及鲜重和干重上的)百分比增加来确定植物的茎和根的长度以及鲜重和干重。
结果总结
结果(图40至43)显示在所有测试浓度下的ABP-510与哈茨木霉M10的组合似乎在促进生长方面更有效。与单一应用(仅产品ABP-510和仅木霉属)相比,这种处理也显然是协同的。
具体地,组合ABP 510 5ml/l+M10和ABP 510 3ml/l+M10的组合的应用导致与单独应用的产品相比茎和根的长度和以及鲜重和干重的增加。
实施例2.5-产品ABP 510和木霉属的种的组合应用对莴苣植物的植物生长促进效应
目的:确定产品ABP-510与以下属于木霉属两个不同种的两株菌株的组合应用在对莴苣植物(栽培变种)潘尼洛普(Penelope)在改善植物生产力和作物品质方面的效应:绿木霉GV41和哈茨木霉M10。
应用于植物的处理在下面的表18c中给出。
实验设计与描述:16种处理种的每一种应用到随机区组中的20株植物,总数为320株植物。在表18c中指示剂量。没有额外的化学品被应用。
盆装介质:合成的商用袋装土壤(通用泥炭藓)“Green Habitat”,意大利佛罗伦萨,Valcofort s.r.l。将土壤在120℃高压蒸汽灭菌1小时。
处理:在聚苯乙烯盒中播种三周后,用5ml的单一和组合的溶液(M10+Gv41+ABP510;M10+ABP 510;GV41+ABP510)洗涤莴苣幼苗。随后的应用是在七天后进行的。随后将植物在塑料大棚下移栽到土壤中并用50ml的单一溶液和组合溶液洗涤。通过仅用水浸湿土壤来获得阴性对照。通过用50ml的单一溶液和组合溶液浸湿土壤,每15天一次重复处理(表1)持续两个月。
检验持续时间:在塑料大棚下的土壤中移栽后8周。
接种技术:将四周龄的莴苣植物移栽在塑料大棚下的田间。
杀真菌剂ABP-510以三种不同浓度10、5和3ml/L使用,并通过在产品中稀释木霉属的种的孢子的悬浮液获得106个孢子ml-1的终浓度,获得组合的溶液。莴苣植物在田间移栽后,用50ml的单一和组合的溶液(ABP510+木霉属)洗涤。每15天进行四次连续应用持续两个月。通过仅用水浸湿土壤来获得阴性对照。
数据收集与评估
植物生产力和作物品质的改善:在田间移栽两个月后,通过确定用木霉属的种与不同浓度的产品ABP 510组合处理相比于单独的木霉属的种处理和单独的ABP 510处理的莴苣植物(在绿色部分的周长,根的长度,绿色部分和根的鲜重和干重上的)百分比增加来评价绿色部分的周长、根的长度、绿色部分和根的鲜重和干重。
结果总结
结果(图44至54)显示浓度为3ml/l的ABP-510与哈茨木霉M10的组合似乎在生长促进方面更有效。与单一应用(仅产品和仅木霉属)相比,这种处理看起来显然是协同的。
特别是与单独使用的产品相比,该组合的应用导致绿色部分的周长增加约10%。而且整株鲜重比单独应用的产品增加了30%,其中绿色部分和根的鲜重分别增加了10%和30%。关于绿色部分的干重比单独应用的产品增加了50%。
实施例2.6-产品ABP-510与木霉属的种的组合应用对番茄植物(栽培变种罗德琳达F1(vv.Rodelinda F1))的植物生长促进效应.
目的:确定产品ABP-510与以下属于木霉属两个不同种的两株菌株的组合应用在对番茄植物(栽培变种罗德琳达F1)在改善植物生产力和作物品质方面的效应:绿木霉GV41和哈茨木霉M10。
应用于植物的处理在下面的表18d中给出。
实验设计和描述:16种处理中的每一种应用于随机区组中的6株植物,给出总计96株植物。应用的剂量如上表18d所示。没有额外的化学物质被应用。
盆装介质:合成的商用袋装土壤(通用泥炭藓)“Green Habitat”,意大利佛罗伦萨,Valcofort s.r.l。
处理:在聚苯乙烯箱子中播种后十天,发芽的蕃茄幼苗用5ml的单一和组合的溶液(M10+Gv41+ABP510;M10+ABP 510;GV41+ABP510)洗涤。每周进行三次连续的应用。随后将植物移栽到24cm直径的盆中并用50ml的单一溶液和组合溶液洗涤。通过用50ml的单一和组合的溶液浸湿土壤,以15天的间隔重复处理持续四个月。
检验持续时间:在塑料大棚下的土壤中移栽后12周
接种技术:将四周龄的番茄植物移栽到装有土壤的24cm直径的盆中。
杀真菌剂ABP-510以三种不同浓度10、5和3ml/L使用,并通过在产品中稀释木霉属的种的孢子的悬浮液获得106个孢子ml-1的终浓度,获得组合的溶液。在田间移栽后,用50ml的单一和组合的溶液(ABP510+木霉属)洗涤番茄植物。每15天进行八次连续应用持续四个月。通过仅用水浸湿土壤来获得阴性对照。
数据收集和评价
植物生产力和作物品质的改善:移栽到24cm直径的盆中四个月后,对于用单一和组合溶液(ABP-510+木霉属)的处理,测量总平均果实重量产量(kg/处理),测量每组植物的果实总数。
结果总结
结果(图55至57)显示,对于ABP-510 3ml/L处理发生了按每种处理kg番茄果实计的最高的产量。事实上,这种处理获得了番茄果实的最高生产量(按每种处理的总kg计),与水对照相比,总产量增加了约22%,而成熟红果实的百分比为约94%,且每个果实的平均重量为35g。
对于浓度为5和10ml/l的ABP-510的处理,与水对照相比生产率降低了约40%。
对于用ABP与木霉属的种的混合物进行的处理,最好的组合是M10+ABP-510 10ml/L。这种处理导致总产量(按每种处理的总kg计)增加,其中90%的成熟红色果实的平均重量为每个果实38g。
实施例3-线虫对照
实施例3.1-体外检验
将北方根结线虫幼虫在受控条件下培养在番茄植物上,并且将植物连根拔起以收集卵块。将卵块保持在用于孵化第二阶段幼虫的培养箱中在25±1℃的含有少量水的小尺寸(4cm)培养皿中。
为了进行体外检验,使用二十四孔ELISA板进行ABP和木霉属的种的体外杀线虫生物测定。对于ABP,将具有灭菌蒸馏水的处理溶液应用在孔上以达到最终的指定浓度,随后以50个线虫/孔悬浮线虫。对于木霉属(作为活的分生孢子应用),用1/5的PDB(150μl/孔)、灭菌的蒸馏水(200μl),200μl中的木霉属分生孢子悬浮液(10到7)填充孔,然后加入50μl的线虫幼虫悬浮液。实验在无菌条件下进行,并且在整个实验持续期间,将ELISA板盖上盖子。包含PDB的平板在25±1℃下保持三天,其他在室温下。通过计数固定的或显示细长形状(死线虫)的样本以不同的时间间隔在显微镜下进行线虫死亡率的定量。
为了体内检验,将二十天龄的番茄(栽培变种圣马尔扎诺(cv s marzano nano))幼苗根浸入含有各种有效成分的根据本发明的溶液(真菌孢子溶液在107)30分钟,然后移栽到土壤/盆中(每盆含有1:2土壤和珍珠岩的100克无菌混合物)。每种处理包括每个地块至少10株植物,具有四个重复,并以完全随机化设计排列。移栽后,将一ml剩余的有效成分溶液在每株植物周围浸湿。幼苗移栽十八至24小时后,将17日龄孵化的线虫J2以2500J2/盆的速率接种到接近植物根部。在线虫接种第3周后开始,对植物每天浇水,并每周用MS培养基营养物浸湿。测量每株植物的枝的长度、根长、枝和根的鲜重、每株植物的根结数、叶绿素含量以及枝和根的干重。
检验的溶液包含以下中的一种或两种:(i)哈茨木霉的孢子和(ii)浓度为0.5%或0.1%的ABP-510。包含(i)和(ii)的溶液是根据本发明的溶液。图28显示了通过线虫死亡率测量的ABP-510和木霉属的种对北方根结线虫幼虫体外效应。图29显示了ABP-510加上木霉属的种对北方根结线虫成虫存活率(如通过活线虫的百分比测量的)的体外效应。图30显示了ABP-510对在番茄上由北方根结线虫产生的根结数目(每株植物的平均根结数)的效应。

Claims (37)

1.一种农业化学组合物,其包含:
(a)一种或多种脂肪酸或其衍生物;和
(b)真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体,或由真菌或卵菌的种产生的代谢物,所述菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或代谢物直接地或间接地(i)抑制植物病原体的生长或繁殖或(ii)杀死植物病原体。
2.根据权利要求1所述的组合物,其中,真菌的种是木霉属(Trichoderma)的种。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的组合物,其中,所述一种或多种脂肪酸或其衍生物选自不饱和C12-24脂肪酸和饱和C12-24脂肪酸及它们的盐或酯。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的组合物,其中,所述一种或多种脂肪酸或其衍生物包含选自以下中的两种或更多种脂肪酸:C16:0脂肪酸、C16:1脂肪酸、C18:0脂肪酸、C18:1脂肪酸、C18:2脂肪酸和C18:3脂肪酸,或它们的盐。
5.根据前述权利要求中任一项所述的组合物,其中,所述一种或多种脂肪酸或其衍生物包含油酸或其盐。
6.根据前述权利要求中任一项所述的组合物,其中,所述一种或多种脂肪酸或其衍生物包含脂肪酸的一种或多种金属盐,所述脂肪酸的一种或多种金属盐能通过包括以下的工艺获得:
(i)提供有机油,优选橄榄油;
(ii)水解有机油中的甘油三酯;
(iii)从水解的有机油中提取脂肪酸;和
(iv)形成提取的脂肪酸的金属盐。
7.根据前述权利要求中任一项所述的组合物,其中,所述脂肪酸或其衍生物是脂肪酸的碱金属盐,优选脂肪酸的钾盐。
8.根据前述权利要求中任一项所述的组合物,其中,所述真菌的种是木霉属的种,为哈茨木霉(T.harzianum)或绿木霉(T.virens),可选地其中哈茨木霉的菌株是T22、T39、M10或P101,优选P101,或者绿木霉的菌株是GV41。
9.根据前述权利要求中任一项所述的组合物,其中,所述组合物包含由木霉属的种产生的次生代谢物。
10.根据前述权利要求中任一项所述的组合物,其中,所述组合物包含由木霉属的种产生的次生代谢物,所述次生代谢物选自哈茨酸、脱甲基哈茨酸、高哈茨酸、6-正戊基-6H-吡喃-2-酮、疏水蛋白、帕克巴辛(pachybasin)、大黄酚、大黄素、1,3,6,8-四羟基蒽醌、1-乙酰基-2,4,5,7-四羟基蒽醌、呫吨酮、1-羟基-3-甲基蒽醌、1,8-二羟基-3-甲基蒽醌和下式的化合物:
11.根据前述权利要求中任一项所述的组合物,其中,所述组合物包含哈茨酸。
12.根据前述权利要求中任一项所述的组合物,其中:
(a)所述一种或多种脂肪酸或其衍生物的总量为0.1至5体积%;和/或
(b)孢子浓度为105至109孢子/ml;和/或
(c)所述代谢物浓度为10-3至10-6M。
13.一种农业化学产品,其包含:
(a)如权利要求1和3至7中任一项所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物;和
(b)如权利要求1、2和8至11中任一项所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物;
其中组分(a)和(b)被配制用于同时地或分开地对地点进行处理。
14.一种用于在地点控制真菌或卵菌的方法,所述方法包括同时或顺序地用以下处理所述地点:
(a)如权利要求1和3至7中任一项所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物;和
(b)如权利要求1、2和8至11中任一项所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物。
15.一种保护植物抵抗真菌或卵菌的方法,所述方法包括同时或分别用以下处理所述植物自身的部分或全部、所述植物生长源于的种子或所述植物生长所在的地方:
(a)一种或多种如权利要求1和3至7中任一项所限定的脂肪酸或其衍生物;和
(b)如权利要求1、2和8至11中任一项所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物。
16.一种用于促进植物生长的方法,所述方法包括同时或分别用以下处理所述植物自身的部分或全部、所述植物生长源于的种子或所述植物生长所在的地方:
(a)一种或多种如权利要求1和3至7中任一项所限定的脂肪酸或其衍生物;和
(b)如权利要求1、2和8至11中任一项所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由真菌或卵菌的种所产生的代谢物。
17.一种用于在地点控制线虫的方法,所述方法包括同时或顺序地用以下处理地点:
(a)如权利要求1和3至7中任一项所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物;和
(b)如权利要求1、2和8至11中任一项所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或者由真菌或卵菌的种产生的代谢物。
18.一种保护植物抵抗线虫的方法,所述方法包括同时或分别用以下处理所述植物自身的部分或全部、所述植物生长源于的种子或所述植物生长所在的地方:
(a)如权利要求1和3至7中任一项所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物;和
(b)如权利要求1、2和8至11中任一项所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物。
19.根据权利要求14至18中任一项所述的方法,其中,所述地点、所述植物自身的部分或全部、所述植物生长源于的种子或所述植物生长所在的地方以每3天一次到每20天一次的频率被处理7天到100天的时间段。
20.根据权利要求14至19中任一项所述的方法,其中,将所述地点、所述植物自身的部分或全部、所述植物生长源于的种子或所述植物生长所在的地方用根据权利要求1至12中任一项所述的组合物来处理。
21.根据权利要求20所述的方法,其中,所述地点、所述植物自身的部分或全部、所述植物生长源于的种子或所述植物生长所在的地方用50L/公顷至2000L/公顷的组合物来处理。
22.如权利要求1和3至7中任一项所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物在用于控制真菌或卵菌的方法中的用途,其中,在所述方法中,将所述一种或多种脂肪酸或其衍生物与如权利要求1、2和8至11中任一项所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物组合使用。
23.如权利要求1、2和8至11中任一项所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由真菌或卵菌产生的代谢物在用于控制真菌或卵菌的方法中的用途,其中,在所述方法中,将所述菌株、培养物、培养物滤液、孢子或代谢物与如权利要求1和3至7中任一项所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物组合使用。
24.根据权利要求14、15、22和23中任一项所述的方法,其中,待控制的真菌或卵菌选自葡萄孢属的种(Botrytis sp.)、链格孢属的种(Alternaria sp.)、丝核菌属的种(Rhizoctonia sp.)、核盘菌属的种(Sclerotinia sp.)、镰刀菌属的种(Fusarium sp.)、腐霉属的种(Pythium sp.)、钩丝壳属的种(Uncinula sp.)、内丝白粉菌属的种(Leveillulasp.)、小菌核属的种(Sclerotium sp.)、疫霉属的种(Phytophthora sp.)和白粉菌。
25.根据权利要求24所述的方法,其中,待控制的真菌或卵菌选自灰葡萄孢(Botrytiscinerea)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、葡萄钩丝壳菌(Uncinula necator)、鞑靼内丝白粉菌(Leveillula taurica)、终极腐霉菌(Pythium ultimum)、齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)和番茄尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum lycopersici)。
26.根据权利要求14所述的方法,其中,所述地点是选自番茄植物、葡萄植物、西葫芦植物、辣椒植物、豆科植物、甜瓜植物和草莓植物的植物,或根据权利要求15至21中任一项所述的方法,其中,所述植物选自番茄植物、葡萄植物、西葫芦植物、辣椒植物、豆科植物、甜瓜植物和草莓植物。
27.一种用于生产作物产品的工艺,所述工艺包括栽培植物,其中所述植物自身的部分或全部、植物生长源于的种子或植物生长所在的地方被同时或分别用以下处理:
(a)如权利要求1和3至7中任一项所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物;和
(b)如权利要求1、2和8至11中任一项所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子或菌丝体或由所述真菌或卵菌的种产生的代谢物。
28.一种使用(i)如权利要求1和3至7中任一项所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物以改善(ii)如权利要求1、2和8至11中任一项所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物在地点控制真菌或卵菌的效果的方法。
29.一种使用(i)如权利要求1和3至7中任一项所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物以改善(ii)如权利要求1、2和8至11中任一项所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物在保护植物抵抗真菌或卵菌中的效果的方法。
30.一种使用(i)如权利要求1和3至7中任一项所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物以改善(ii)如权利要求1、2和8至11中任一项所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物在促进植物生长中的效果的方法。
31.一种使用(i)如权利要求1和3至7中任一项所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物以改善(ii)如权利要求1、2和8至11中任一项所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物在地点控制线虫的效果的方法。
32.一种使用(i)如权利要求1和3至7中任一项所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物以改善(ii)如权利要求1、2和8至11中任一项所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物在保护植物抵抗线虫中的效果的方法。
33.一种使用(ii)如权利要求1、2和8至11中任一项所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物以改善(i)如权利要求1和3至7中任一项所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物在地点控制真菌或卵菌的效果的方法。
34.一种使用(ii)如权利要求1、2和8至11中任一项所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物以改善(i)如权利要求1和3至7中任一项所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物在保护植物抵抗真菌或卵菌中的效果的方法。
35.一种使用(ii)如权利要求1、2和8至11中任一项所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物以改善(i)如权利要求1和3至7中任一项所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物在促进植物生长中的效果的方法。
36.一种使用(ii)如权利要求1、2和8至11中任一项所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物以改善(i)如权利要求1和3至7中任一项所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物在地点控制线虫的效果的方法。
37.一种使用(ii)如权利要求1、2和8至11中任一项所限定的真菌或卵菌的种的菌株、培养物、培养物滤液、孢子、菌丝体或由真菌或卵菌的种产生的代谢物以改善(i)如权利要求1和3至7中任一项所限定的一种或多种脂肪酸或其衍生物在保护植物抵抗线虫中的效果的方法。
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