CN107837289A - 一种用于治疗奶牛乳房炎症与痈肿的药物及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种用于治疗奶牛乳房炎症与痈肿的药物及其制备方法，本发明的用于治疗奶牛乳房炎症与痈肿的药物由下述重量份的各成分制备而成:常山总生物碱提取物5‑20份；液态辅料：蓖麻油10‑30份、薄荷油10‑30份；固态辅料：白凡士林10‑30份、黄蜡10‑20份、冰片1‑10份；防腐剂：新洁尔灭1‑5份。本发明的用于治疗奶牛乳房炎症与痈肿的药物具有抑菌消炎、消肿拔毒功效，药物稳定性好，且绿色安全、疗效好，可有效避免抗生素残留。

Description

一种用于治疗奶牛乳房炎症与痈肿的药物及其制备方法
技术领域
本发明涉及兽药技术领域，具体涉及一种用于治疗奶牛乳房炎症与痈肿的药物及其制备方法。
背景技术
奶牛乳房炎是奶牛乳腺受到物理、化学、微生物的刺激所产生的一种炎症反应，是影响世界奶牛业发展的最主要疾病之一。我国因顽固性奶牛乳房炎、坏死乳区而淘汰的病牛约占淘汰病牛总数的50％左右。其次，奶牛乳房痈肿在临床型奶牛乳房炎和隐性乳房炎阶段都有发生，细菌入侵和乳汁淤积是两个主要致病因素。常见致病菌如无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、停乳链球菌为主要的发病诱因，这些病原菌通常存在于奶牛体表和环境中。由于奶牛在挤奶后，乳头括约肌暂时处于松弛状态，乳头管开放15分钟左右，此时，致病菌很容易侵入乳头导管或乳头皮肤破裂处，进而沿淋巴管蔓延至乳腺小叶间及腺小叶的脂肪和纤维组织中，引发乳房炎或急性乳痈。其次，因乳腺管阻塞、乳管本身炎症而导致乳汁未能及时排空，造成乳汁淤积，为入侵细菌创造繁殖条件，成为细菌很好的培养基而引起发病。如未能及时治疗，或治疗不当，炎症即向乳腺实质以外的脂肪和纤维组织扩散，导致急性乳房炎。若炎症局限，组织坏死、液化，大小不等的感染灶相互融合，形成乳房脓肿。
奶牛乳房炎症及痈肿的防治目前以抗菌消炎、改善环境、增强动物机体的抵抗力为主，早期可采用青霉素+1％～2％普鲁卡因，溶于等渗盐水中，在肿块周围封闭注射，或全身应用抗生素。一般为防治严重感染及败血症，临床用药往往还需根据细菌培养及药敏选用抗生素。然而，长期使用抗生素通过乳房局部或全身给药进行防治，无法彻底根治奶牛乳房痈肿。因此，选择对病原微生物敏感、特异性高、抑菌效果强、稳定性好的新型药物显得尤为重要，是今后奶牛业健康发展的一个重要研发方向。
综上，奶牛乳房炎症及痈肿在养殖场发生、波及的范围较广，若得不到及时治疗和有效预防，易发展成急性临床型乳房炎，并加大治疗难度、增加治疗成本，加之奶品质下降、废弃，奶牛场损失更为严重。临床上采用抗生素治疗该病的后果，主要是耐药菌株的不断增加严重影响治疗效果，以及抗生素残留问题。因此，研制相对的安全、绿色、疗效好、可有效降低抗生素残留的药物成为国内外防治该病的主攻方向。在我国传统中兽医理论、现代药理学及药效学研究指导下，筛选抗菌强度高、清热凉血解毒的有效中药有效成分并将其制备为适于兽医临床应用的制剂，用于该病防治，可有效避免奶牛乳房痈肿治疗用药中抗生素滥用的现状，降低其在牛奶中的残留机率，对奶牛健康养殖具有深远意义。
发明内容
基于上述现有技术的现状，本发明提供一种用于治疗奶牛乳房炎症与痈肿的药物及其制备方法，其中本发明的用于治疗奶牛乳房炎症与痈肿的药物具有很好的抑菌消炎、解热止痛、消肿拔毒之功效，且绿色安全，可有效减少抗生素的残留。
具体地，本发明提供一种用于治疗奶牛乳房炎症与痈肿的药物，其由下述重量份的各成分制备而成：
常山总生物碱提取物5-20份；
液态辅料：蓖麻油10-30份、薄荷油10-30份；
固态辅料：白凡士林10-30份、黄蜡10-20份、冰片1-10份；
防腐剂：新洁尔灭1-5份。
另外，本发明的用于治疗奶牛乳房炎症与痈肿的药物，优选由下述重量份的各成分制备而成：
常山总生物碱提取物15份；
液态辅料：蓖麻油15份、薄荷油12份；
固态辅料：白凡士林15份、黄蜡10份、冰片3g份；
防腐剂：新洁尔灭2份。
此外，所述冰片粉研细过120目筛。
此外，所述药物为乳膏剂。
本发明还提供一种如上所述用于治疗奶牛乳房炎症与痈肿的药物的制备方法，其包括下述步骤：
(1)将作为固态辅料的白凡士林、黄蜡通过水浴加热熔化后温度下降至50-60℃水浴保温；
(2)另取作为液态辅料的蓖麻油、薄荷油、以及常山总生物碱提取物，加入上述熔化后水浴保温的固态辅料中，边添加边沿同一方向搅拌，混溶均匀；
(3)温度下降到20-30℃，在搅拌状态下，再加入冰片粉和防腐剂新洁尔灭；
(4)冷凝，分装，灭菌，得到药物乳膏剂。
其中，如上所述的常山总生物碱提取物可以通过下述方法制备，但不限于该方法：
(1)取常山干燥根1000重量份，粉碎，过120目筛，加入体积百分比50％～90％乙醇水溶液(百分比优选70％)，回流提取2次(第一次加入3-9倍重量乙醇水溶液回流1.0-3.0h，第二次加入5-8倍重量乙醇水溶液回流1.0-2.0h，并优选第一次加入7倍重量乙醇水溶液回流2.0h，第二次加入6倍重量乙醇水溶液回流1.5h)，过滤，提取液减压浓缩、回收乙醇(0.09Mpa、50℃～60℃的条件下真空减压浓缩)(优选为0.09Mpa、50℃条件下)。
(2)提取液中加入2％的盐酸调pH值至2-3，乙醚洗涤3次除杂质，得酸性浓缩液，再加入固体碳酸钠调pH值至9-10，三氯甲烷萃取3次，即得常山总生物碱提取物。
中药常山为虎耳草科植物常山(Dichroa febrifuga Lour.)的干燥根，味苦辛，性寒，具有杀虫截疟祛痰、解热止血消炎、促进伤口愈合等功效，其中主要有效成分为常山总生物碱。临床多用于疟疾和鸡球虫病的治疗，未见其在奶牛养殖方面的研究与应用。中药体外抑菌试验研究结果证实，常山粗提物对奶牛乳房炎常见致病菌具有良好的抑菌效果，尤其对链球菌属的无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌、化脓性链球菌和芽孢杆菌属的枯草芽孢杆菌表现出较强的抑菌效果，对金黄色葡萄球菌亦具有中等强度的抑菌效果。因此结合奶牛乳房炎症的病理生理特点和中兽医辩证理论，利用具有我国特色和优势的中草药资源，研制有效成分含量高、用量小、效果显著、低副作用可用于防治奶牛乳房炎的中药制剂，符合生产的迫切需求。
本发明采用中药常山总生物碱提取物作为有效成分制备适于临床应用的乳膏制剂，具有很好的抑菌消炎、解热止痛、消肿拔毒之功效。其中，中药常山总生物碱提取物对奶牛乳房炎常见致病菌具有较好的抑菌效果，尤其对链球菌属的无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌、化脓性链球菌表现出较强的抑菌效果，对常见肠杆菌及金黄色葡萄球菌亦具有中等强度的抑菌作用。同时，由于利用我国优势的中药资源研制药物制剂，有利于奶制品的安全。
此外，固态辅料采用化学性质稳定的凡士林、黄蜡作为主要赋形基质，可提高药物硬度，并在乳头形成一层油性保护膜，阻隔乳头与外界的接触，保护乳头不被牧场环境的污水沾染及冻伤，其滋润效果还可防止奶牛乳头干裂，具有较好的防护、保湿效果。液态辅料除用于调节软膏稠度，其中所加的蓖麻油(Castor Oil)为蓖麻种子榨取精制而得，性味：甘，辛、平，归肺、大肠经，为消肿拔毒止痒、泻下导滞之药，主拔毒泻火消肿、解毒散瘀止痛，减轻炎性渗出。薄荷油(Mint Oil)性味：辛，凉，无毒，清热止痛止痒，可使肿毒內消，皮肤穿透性较好。冰片：宜散郁热火毒，通经透肉，消散结肿，外用能解毒消炎、清热消肿、以助血行，能引药气入内，促进药物渗透吸收。防腐剂新洁尔灭的加入使得乳膏剂不易发生酸败变质。可以说本发明的药物是一种对奶牛乳房炎重要致病菌敏感、特异性高、抑菌效果强、稳定性好且安全绿色、疗效好的药物制剂。
本发明提供的一种用于治疗奶牛乳房炎症及痈肿的药物，选材方便、有效成分含量高，可将提取及制剂一体化生产，所生产产品性质稳定且质量可控，成本相对较低，易于形成规模化生产。作为一种有效治疗奶牛乳房炎症及痈肿的药物，其研制是在结合中兽医理论指导及现代药理学研究基础上完成，效果确切，无残留及毒副作用，无需休药期，可用于奶牛泌乳期，符合国家兽药开发的产业政策和乳汁食品安全的要求，有助于促进兽用中草药产业的健康有续发展，益于我国奶牛健康养殖的发展。
附图说明
图1是常山乙素、甲素混标的HPLC图谱。
图2是实施例3常山总生物碱1批次的HPLC图谱。
图3是实施例3常山总生物碱的2批次HPLC图谱。
图4是实施例3常山总生物碱的3批次HPLC图谱。
图5是总生物碱提取物薄层色谱(TCL)图。
具体实施方式
下面结合附图及实施例详细介绍本发明技术方案，但本发明并不受此限定。
实施例1
一种治疗奶牛乳房炎症与痈肿的药物，包括以下重量份各组分：常山总生物碱提取物5g，蓖麻油10g，薄荷油10g，白凡士林10g，黄蜡10g，冰片1g，新洁尔灭1g。
其中，常山总生物碱提取物的制备方法：取常山干燥根1000g，粉碎，过120目，加入体积百分比50％乙醇水溶液，回流提取2次(第一次加入3倍量回流3.0h，第二次加入5倍量，回流2.0h)，过滤，提取液减压浓缩、回收乙醇(在0.09MPa和50℃的条件下真空减压浓缩)。提取液加入2％的盐酸调pH值至2-3，乙醚洗涤3次除杂质，得酸性滤液(浓缩液)。再加入固体碳酸钠调pH值至9-10，三氯甲烷萃取3次，减压回收三氯甲烷，即得常山总生物碱提取物。备用。
药物制备方法：按照上述组分配比，将配方量的固态基质白凡士林、液体石蜡，水浴加热熔化，待温度下降，50℃水浴保温；另取配方量的液态基质蓖麻油、薄荷油及常山总生物碱提取物，加入上述水浴保温、熔化的固体辅料中，边添加边沿同一方向搅拌，混溶均匀；待温度下降到20℃，在搅拌状态下，再加入配方量的研细过120目筛的冰片粉和防腐剂新洁尔灭；冷凝，分装，灭菌，得到药物组合物乳膏剂。
实施例2
一种治疗奶牛乳房炎症与痈肿的药物，包括以下重量份各组分：常山总生物碱提取物20g，蓖麻油30g，薄荷油30g，白凡士林30g，黄蜡20g，冰片10g，新洁尔灭5g。
其中，常山总生物碱提取物的制备方法：取常山干燥根1000g，粉碎，过120目，加入体积百分比90％乙醇水溶液，回流提取2次(第一次加入9倍量回流1.0h，第二次加入8倍量，回流1.0h)，过滤，提取液减压浓缩、回收乙醇(在0.09MPa、60℃的条件下真空减压浓缩)。提取液加入2％的盐酸调pH值至2-3，乙醚洗涤3次除杂质，得酸性滤液(浓缩液)。再加入固体碳酸钠调pH值至9-10，三氯甲烷萃取3次，减压回收三氯甲烷，即得常山总生物碱提取物。备用。
药物制备方法：按照上述组分配比，将配方量的固态基质白凡士林、液体石蜡，水浴加热熔化，待温度下降，60℃水浴保温；另取配方量的液态基质蓖麻油、薄荷油及常山总生物碱提取物，加入上述水浴保温、熔化的固体辅料中，边添加边沿同一方向搅拌，混溶均匀；待温度下降到30℃，在搅拌状态下，再加入配方量的研细过120目筛的冰片粉和防腐剂新洁尔灭；冷凝，分装，灭菌，得到药物组合物乳膏剂。
实施例3
一种治疗奶牛乳房炎症与痈肿的药物，包括以下重量份各组分：常山总生物碱提取物10g，蓖麻油15g，薄荷油20g，白凡士林20g，黄蜡10g，冰片8g，新洁尔灭4g。
其中，常山总生物碱提取物的制备方法：取常山干燥根1000g，粉碎，过120目，加入体积百分比70％乙醇水溶液，回流提取2次(第一次加入7倍量回流2.0h，第二次加入6倍量，回流1.5h)，过滤，提取液减压浓缩、回收乙醇(在0.09MPa和50℃的条件下真空减压浓缩)。提取液加入2％的盐酸调pH值至2-3，乙醚洗涤3次除杂质，得酸性滤液(浓缩液)。再加入固体碳酸钠调pH值至9-10，三氯甲烷萃取3次，减压回收三氯甲烷，即得常山总生物碱提取物。备用。
药物制备方法同实施例1。
实施例4
一种治疗奶牛乳房炎症与痈肿的药物，包括以下重量份各组分：常山总生物碱提取物10g，蓖麻油20g，薄荷油15g，白凡士林15g，黄蜡15g，冰片5g，新洁尔灭3g。其中，常山总生物碱的提取制备同实施例3，药物制备方法同实施例1。
实施例5
一种治疗奶牛乳房炎症与痈肿的药物，包括以下重量份各组分：常山总生物碱提取物15g，蓖麻油15g，薄荷油12g，白凡士林15g，黄蜡10g，冰片3g，新洁尔灭2g。其中，常山总生物碱的提取制备同实施例3，药物制备方法同实施例3。
实施例6(常山总生物碱含量测定)
1.色谱条件
色谱柱：SB-C18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm，配套安捷伦1290型液相色谱仪)、XTerra@MS C18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm，配套沃特斯2695型液相色谱仪)和AmethystC18-H色谱柱(4.6mm×150mm，5μm，配套岛津SPD-10A型液相色谱仪)。
流动相：乙腈－0.3％冰醋酸(30﹕70)，三乙胺调pH值至5.2-6.2。流速：1.0mL/min；检测波长：265nm；柱温：25℃；进样量：10μL。理论塔板数按常山乙素和常山甲素峰计算应不低于5000。乙腈为色谱纯，水为娃哈哈纯净水，冰醋酸、三乙胺等化学试剂均为国产分析纯。
2.系统适用性试验及样品的测定
2.1样品溶液的制备：分别精密称取常山总生物碱提取物0.1g(实施例3的3批次样品)，置10mL容量瓶中，加50％甲醇溶解并定容至10mL，混匀，经微孔滤膜(0.22μm)过滤，备用。
2.2标准溶液的制备：分别精密称取常山乙素标准对照品和常山甲素标准对照品各10mg，分别置于10mL容量瓶中，加50％甲醇溶解，定容至10mL，摇匀，微孔滤膜(0.22μm)过滤，即得1.0mg/mL标准品原液。原液继续用流动相稀释，得到终浓度20μg/mL的常山乙素和常山甲素混合标准品，备用。
常山乙素标准对照品和常山甲素标准对照品，纯度为98％以上，均购自中国兽医药品监察所。
2.3分别精密吸取标准品溶液和供试品溶液10μL，注入3种不同类型的高效液相色谱仪，测定，记录色谱图。
3.试验结果
结果显示，三种液相检测所得3个批次的常山总生物碱提取物中，常山乙素和常山甲素的含量基本上一致，常山总生物碱中常山乙素和常山甲素的总含量均在1.5mg/g左右。试验所用高效液相检测条件精密度和重复性较好，可以用来检测常山原药材及其提取物中常山总生物碱的含量。其次，所用高效液相色谱条件，对于以上三种液相和色谱柱的系统适用性较好，常山乙素和常山甲素的峰型较好，与附近杂质分离度较好(见图1-4)。
实施例7常山总生物碱体外抑菌作用的研究
1供试药物与菌株
供试药物：常山总生物碱提取物，由中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业部兽用药物创制重点实验室制备提供。供试菌株：无乳链球菌、乳房链球菌为本实验室从乳房炎患牛乳汁中分离鉴定的优势菌株。停乳链球菌[ATCC 35666]、化脓性链球菌[ATCC19615]、金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]、大肠埃希菌[CMCC(B)44102]、变形杆菌[CMCC(B)49027]、绿脓杆菌[CICC 10419]，分别购自中国普通微生物菌种保藏管理中心和中国工业微生物菌种保藏与管理中心，具有ATCC官方授权。
2试验方法
MIC的测定：按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的肉汤稀释法，测定实验菌株的最小抑菌浓度MIC值(minimal inhibitory concentration,MIC)。
采用微量稀释法(microdilution)进行，稀释液为MH肉汤。
MIC板制备：
将倍比稀释后不同浓度的抗菌药物溶液分别加到灭菌的96孔聚苯乙烯板中，第1至第10孔加药液，每孔100μL。冰冻干燥后密封，－20℃以下保存备用。
对照组第1孔只加入100μL药液、不加MH肉汤和细菌，为药液对照。对照组的第11孔只加入100μL MH肉汤，不加药液和细菌，为空白对照。药物组第11孔不加药作为生长对照(加MH肉汤，链球菌属采用加2％犊牛血清的MH肉汤)。MIC板第1孔至第10孔药物浓度分别为100、50、25、12.5、6.25、3.13、1.56、0.78、0.39、0.195mg/mL。
接种物制备：
将培养的新鲜菌液，按10倍稀释法，用0.9％无菌生理盐水溶液，制备浓度相当于0.5麦氏标准比浊管的供试菌悬液。再经MH肉汤1:10稀释至含菌量为1×107CFU/mL。向每孔中加10μL，密封后，置35℃普通空气孵箱中(湿盒)，孵育16-20h判断结果。链球菌属的孵育时间为20-24h。
结果判断
以在小孔内完全抑制细菌生长的最低药物浓度为MIC。当阳性对照孔(即不含药物)内细菌明显生长试验才有意义。当微量肉汤稀释法出现单一的跳孔时，应记录抑制细菌生长的最高药物浓度。如出现多处跳孔，则不应报告结果，需重复试验。
3结果
常山总生物碱提取物对奶牛乳房炎常见致病菌的最小抑菌浓度(MIC)试验结果见下表：
4结论
微量肉汤稀释法结果表明，中药常山的总生物碱提取物对奶牛乳房炎常见致病菌表现出不同的抑菌效果。其中，对链球菌属的重要病原菌及金黄色葡萄球菌表现出较好的抑菌效果，MIC值均小于/等于12.5mg/mL，并对停乳链球菌的抑制作用最强，MIC值为6.25mg/mL。对常见肠杆菌具有中等强度的抑菌作用，MIC值介于25mg/mL～50mg/mL之间。试验为常山总生物碱提取物的药物研发将提供数据参考。
实施例8药物的稳定性试验
通过常山原料药(干燥根)及其乳膏制剂的稳定性研究，确定了本发明的储藏方法和有效期。本发明配方中所用中药材均为《中国兽药典》2015年版收载品种，对几个不同生产批次的乳膏制剂留样，按兽药典规定的方法(离心试验、加速试验及耐热耐冷试验)进行稳定性检查。
结果表明，1年以内的制剂未见分层破乳、油水分离、霉变、酸败以及色泽的变化。总生物碱提取物经TLC检定，依然能检测到常山所含的标识性成分(见图5)，其中，“1”为乙素标准品、“2”为甲素标准品、“3-8”为不同批次常山总生物碱提取物，且具有较好的重复性及稳定性。试验表明本发明制剂具有良好的稳定性，药物成品性状稳定，质量符合要求。因此，常温密闭存放，有效期可确定为2年。
实施例10药物安全性试验
1刺激性试验
选皮肤无破损的家兔10只，随机分为2组(即完整皮肤膏剂组和破损皮肤膏剂组)，每组5只。采用同体自身左右对比，左侧脱毛区涂抹制备的本发明的药物乳膏剂1.0g，涂抹后覆盖硫酸纸，用无刺激性胶布固定，右侧脱毛区涂抹生理盐水作阴性对照。每日2次，连续用药3d。给受试药物24h后，用温水去除残留受试药物，于去除受试药物24h、48h、72h后肉眼观察，记录涂药处有无红斑和水肿等情况，按评分标准记分及强度标准判断刺激强度。两组操作相同。
试验结果显示，乳膏剂对家兔完整皮肤、破损皮肤均未诱发明显的红斑和水肿反应，刺激强度的平均值小于0.50分。可判定其属于无刺激物质。
2过敏性试验
选皮肤无破损的家兔10只，随机分为2组(1#乳膏剂组与2#阳性对照组)，每组5只。采用同体自身左右对比。每日2次，连续用药3d。于每次给予受试物6h后，用温水去除残留受试物，肉眼观察、记录涂药处有无红斑和水肿等过敏反应情况。
1#组家兔：左侧脱毛区涂抹乳膏剂1.0g，并用纱布和无刺激性胶布进行固定。右侧脱毛区涂抹生理盐水作为阴性对照。
2#组家兔：左侧脱毛区菌涂致敏原2,4-二硝基氯苯0.2mL(1.0％浓度)，并用纱布和无刺激性胶布进行固定。右侧去毛区均涂抹生理盐水作为阴性对照。
激发接触：于末次给予受试物致敏后第14d，再次脱毛，24h进行激发接触，操作同上。6h后去除受试药物即刻观察，然后于24h、48h、72h观察皮肤有无过敏阳性反应情况(阳性反应：即皮肤出现红斑或水肿，不论程度轻重)，计算致敏反应发生率(致敏率)，同时注意观察动物是否有哮喘、站立不稳等全身性过敏反应。按评分标准记分及强度标准判断刺激强度。
结果表明：整个试验过程中，乳膏剂组家兔皮肤未出现红肿、水肿以及全身过敏反应症状，致敏率均为0，判定该制剂均属于弱致敏物。而涂抹致敏原2,4-二硝基氯苯的家兔在激发给药6h后，即出现重度红斑、水肿情况，致敏率为100％。两组试验结果差异及其显著。
实施例10奶牛乳房炎的临床治疗及安全性评价
奶牛临床型乳房炎及隐性乳房炎多发于高温多雨、闷热潮湿的夏秋季，本次试验先后选择兰州市周边范围奶牛场临床发病及LMT检测阳性的患病牛进行治疗。其中，临床型乳房炎患牛12头，发病乳区共计25个(其中2头患病奶牛均有2个乳区出现炎症)，隐性乳房炎患病奶牛20头，发病乳区共计24个(其中4头患牛均有2个乳区出现炎症)。将患病奶牛及其患病乳区随机分为如下2组。
乳膏剂治疗组：(1)临床型：6头患牛，7个患病乳区
(2)隐性：10头患牛，12个患病乳区
氨苄西林钠对照组：(1)临床型：6头患牛，7个患病乳区
(2)隐性：10头患牛，12个患病乳区
试验药品：所用乳膏剂为本发明的实施例5和实施例4中的药物组合物乳膏剂。对照药：注射用氨苄西林钠(2g/支，郑州百瑞动物药业有限公司)。奶牛乳房炎诊断液(LMT诊断液)，由中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所中兽医研究室制备。
用药方法及治疗方案：用药前用温水清洗病牛患病乳区，用干净毛巾擦干，挤尽奶，于患病奶牛红肿和发硬的乳头、乳头基部及乳区部位，涂抹制备的乳膏制剂约20mL，2次/d，1个疗程5d。对照药品氨苄西林钠，按照说明书方法使用即可。
治疗痊愈的判定标准：眼观乳区部位的临床红肿热痛症状消失，硬化部位软化恢复正常，乳汁分泌及色泽正常，现场LMT诊断为阴性结果。治疗有效的判定标准：乳汁正常、产奶量恢复，红肿发硬症状及精神状态明显好转，乳汁LMT程度减轻。
试验结果：
(1)涂抹治疗期间，患病乳区皮肤未见皮肤过敏现象，对乳头及乳区无刺激性，临床使用安全性较高。
(2)乳膏剂治疗1-2个疗程后，患病乳区红、肿、热、痛及硬症的典型临床症状明显减轻，消肿快，乳头部伤口痊愈。
(3)对于隐性乳房炎患病奶牛，治疗初期即可明显减轻LMT程度，回奶迅速，奶产量逐渐提高，治疗结束后患牛乳汁LMT均为阴性，乳汁菌检结果为阴性，发硬乳区部位明显好转软化，乳膏剂临床无需休药期，其治疗效果优于氨苄西林钠治疗组(抗生素治疗需要15天左右的休药期)。
(4)对于临床急性发病的患病奶牛，治疗初期乳膏剂较氨苄西林钠见效慢，治疗过程相对较长，1个疗程后，可见患病乳区的典型临床症状明显减轻，治疗结束后乳汁分泌正常，乳汁体细胞数恢复正常，菌检结果为阴性，乳区有效率及治愈率与氨苄西林钠相当，两组差异不显著。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种用于治疗奶牛乳房炎症与痈肿的药物，其特征在于，由下述重量份的各成分制备而成：
常山总生物碱提取物5-20份；
液态辅料：蓖麻油10-30份、薄荷油10-30份；
固态辅料：白凡士林10-30份、黄蜡10-20份、冰片1-10份；
防腐剂：新洁尔灭1-5份。
2.根据权利要求1所述的用于治疗奶牛乳房炎症与痈肿的药物，其特征在于，由下述重量份的各成分制备而成:
常山总生物碱提取物15份；
液态辅料：蓖麻油15份、薄荷油12份；
固态辅料：白凡士林15份、黄蜡10份、冰片3份；
防腐剂：新洁尔灭2份。
3.根据权利要求1或2所述的用于治疗奶牛乳房炎症与痈肿的药物，其特征在于，所述冰片粉研细过120目筛。
4.根据权利要求1或2所述的用于治疗奶牛乳房炎症与痈肿的药物，其特征在于，所述药物为乳膏剂。
5.一种如权利要求1-4中任意一项所述用于治疗奶牛乳房炎症与痈肿的药物的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：
(1)将作为固态辅料的白凡士林、黄蜡通过水浴加热熔化后温度下降至50-60℃水浴保温；
(2)另取作为液态辅料的蓖麻油、薄荷油、以及常山总生物碱提取物，加入上述熔化后水浴保温的固态辅料中，边添加边沿同一方向搅拌，混溶均匀；
(3)温度下降到20-30℃，在搅拌状态下，再加入冰片粉和防腐剂新洁尔灭；
(4)冷凝，分装，灭菌，得到药物乳膏剂。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113855740A (zh) * 2021-11-05 2021-12-31 吉林大学 一种用于治疗奶牛乳腺炎的外用膏剂的制备及应用方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102100709A (zh) * 2009-12-16 2011-06-22 青岛康地恩药业有限公司 一种常山提取物的制备工艺
WO2013018069A1 (en) * 2011-08-04 2013-02-07 Actelion Pharmaceuticals Ltd Combination of antimalarial agents
CN103948674A (zh) * 2014-05-04 2014-07-30 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 一种奶牛专用护乳膏及其制备方法和应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102100709A (zh) * 2009-12-16 2011-06-22 青岛康地恩药业有限公司 一种常山提取物的制备工艺
WO2013018069A1 (en) * 2011-08-04 2013-02-07 Actelion Pharmaceuticals Ltd Combination of antimalarial agents
CN103948674A (zh) * 2014-05-04 2014-07-30 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 一种奶牛专用护乳膏及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
林宁: "《生物药剂学与药物动力学》", 31 March 2011, 中国中医药出版社 *
王玲等: ""中药常山散的体外抑菌作用研究"", 《中国畜牧兽医》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113855740A (zh) * 2021-11-05 2021-12-31 吉林大学 一种用于治疗奶牛乳腺炎的外用膏剂的制备及应用方法

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