CN107789357A - 一种兽用复方硫酸头孢喹肟乳房注入剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种兽用复方硫酸头孢喹肟乳房注入剂，所述兽用复方硫酸头孢喹肟乳房注入剂主药包括硫酸头孢喹肟、厚朴酚，用于治疗奶牛泌乳期或干奶期乳房炎，其优势为中西药复方组分具有增加杀菌作用、消炎止痛、促进乳房血液循环，加速乳房组织修复，提高临床治疗效果等优势。

Description

一种兽用复方硫酸头孢喹肟乳房注入剂及其制备方法

技术领域

本发明属于兽用药物领域，尤其涉及一种治疗奶牛泌乳期和干奶期乳房炎疾病的的兽用复方头孢喹肟乳房注入剂及其制备方法。

背景技术

奶牛乳房炎是临床上最常见，同时也是对奶牛生产危害性最大的疾病。当前不论是发达国家还是发展中国家，都把乳房炎的防治当作重大课题加以研究。在法国、芬兰、瑞典、丹麦和英国，奶牛乳房炎的发病率分别为20％、10.9％、11.1％、21％、22％，芬兰、挪威、瑞典每年因乳房炎问题而淘汰的奶牛分别占淘汰奶牛的35％、19％、22％。我国乳房炎的发病率高于世界水平，包括隐性乳房炎在内的发病率平均为70％，每年造成高达几亿元的经济损失。由此可见，对奶牛乳房炎的控制将是一项长期而艰巨的任务。

目前，抗生素疗法仍然是国内外治疗乳房炎最常用的方法。但在实际操作过程中，基层畜牧兽医工作者长期应用大剂量抗生素进行治疗，导致耐药菌株增多，治疗效果变差，耐药菌株快速变异，截至2016年6月份对全国奶牛养殖集中地包括河北、内蒙、宁夏等在内的多个地区的的乳房炎致病菌株药敏试验结果显示，大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和链球菌等主要乳房炎致病菌对除喹诺酮及头孢类药物以外的其他抗生素均产生了不同程度的耐药性。

在2013-2016年期间，国内很多兽药生产厂家针对越来越严重的乳房炎耐药菌纷纷研发新制剂，其中包括相对敏感的头孢喹肟乳房注入剂(泌乳期/干奶期)，由于国外此类制剂批准的使用剂量为75mg/支，国内申报时也保持了与国外使用剂量一致。但75mg/支头孢喹肟有效成分在临床使用时，乳房炎治愈率在60-70％之间，对于反复发作的顽固性乳房炎治愈率均低于50％以下。低剂量多次给药均无法达到快速有效治疗的目的，如果增加给药剂量或与其他抗生素联合使用会在一定程度上提高有效率，但会增加奶中抗生素残留量，延长弃奶期，不仅给养殖户增加用药成本，还会加大弃奶损失。因此开发一种中药型复方头孢喹肟乳房注入剂，提升治疗效果，不增加弃奶期的新型乳房注入剂具有重要意义。

在长期的研究及临床试验中，我们发现将头孢喹肟与厚朴酚联合用于治疗奶牛乳房炎疾病时，具有非常显著的治疗效果，厚朴酚是一种中药提取物，体外药敏试验表明，厚朴酚对乳房炎致病菌呈现高度敏感性，并且在给药期间没有抗生素残留，同时厚朴酚具有显著的抗炎作用，与头孢喹肟联合用药后在增加杀菌效果的同时，还可改有效善重症乳房炎导致的乳房红肿胀痛等症状，促进乳房局部血液循环，起到快速恢复，降低应激反应的效果。

1硫酸头孢喹肟基本性质及抗菌机理

头孢喹肟的作用机制在于其β-内酰胺结构基团于细菌的羧肽酶、转肽酶、内肽相结合，从而抑制肽聚糖的形成，肽聚糖是细菌细胞壁的重要组成部分，这干扰了繁殖期细菌的细胞壁的形成，而细菌一旦细胞壁缺省，就破坏请渗透屏障功能，由于菌体具有较高渗透压性能，水分不断内渗，菌体发生肿胀、变性，最终破裂死亡，因而起到杀菌的作用。

作为第四代类头孢菌素，头孢喹肟分子结构不同于前面的三代头孢类菌素，它在β-内酰胺结构团的B-3上引进了季铵基侧链，与PBPs结合时，由于它在分子上由带正电荷的四价铵基，分子呈弹头样两性离子，阳极在前，而细菌外膜蛋白为阴极，两者相互作用，药物分子很快进入细菌体内，时药物在细胞质中达到很高浓度。况且两性离子化合物，也提高了对细菌周质腔的渗透能力以及与青霉素结合蛋白的结合能力，正是这种特殊的分子结构，显示了它对染色体和质粒编码的β-内酰胺高度稳定，有效防止了耐药菌的产生。

1.2厚朴酚

厚朴酚是我国中药厚朴的主要活性成分，为棕褐色至白色精细粉末，早在1930年日本山井首先从我国厚朴树皮中分离得到了厚朴酚。因其具有良好的抗菌、抗炎、抗肿瘤、肌肉松弛、降低胆固醇和抗衰老等作用，所以受到国内外众多学者的研究。

抗菌作用：厚朴酚对革兰氏阳性菌、耐酸菌均具有明显的抗菌作用，对引起奶牛乳房炎主要致病菌的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和链球菌的的MIC分别为10.0、5.0和6.3ug/mL，厚朴酚强大的抗菌作用是由于联苯环上同时存在亲水性烯丙基和亲酯的酚羟基，因而使其粘附与变异链球菌和其他革兰氏阳性菌的细胞所致，对大肠杆菌、链球菌均有很强的抑制作用，抑菌浓度在10ug/ml以内。

抗炎作用：厚朴酚可剂量依赖性的抑制淋巴细胞芽生，半数抑制浓度为7.7ug/ml，大约为脱氢皮质醇的20-100倍，还可显著抑制苦率诱导的肿胀，抑制率为23.6％。此外，厚朴酚还可以降低炎症部位周围毛细血管壁的通透性，抑制白细胞邮及其显微组织增生，对诱导型NO合成酶(INOS)有弱的抑制作用，可抑制脂多糖活化的巨噬细胞中NO产物的生成。炎性反应中，细胞膜磷脂在磷脂酶A的作用下释放花生四烯酸(AA)，AA通常有两条代谢途径；经环氧化酶(COX)作用生成前列腺和血栓素；经酯氧化酶(LO)作用生成白三烯(LT)。厚朴酚抗炎作用可能与其抑制AA的两条代谢途径有关。研究厚朴酚对AA代谢酶活性的影响，结果表明厚朴酚可以抑制AA的LO和环乳氧化酶代谢通路；另有研究也发现厚朴酚为COX和LO双重抑制剂，它可抑制A23187诱导的大鼠嗜中性粒细胞中前列腺素和LT的形成。另外，抑制溶酶体酶的释放也可能是厚朴酚抗炎作用机制之一。厚朴酚在1-100umol/L可以增加趋化三肽激活的大鼠中性粒细胞的超氧阴离子，在大于10umol/L时可以明显的抑制激活的中性粒细胞β-葡萄糖甘酸酶和溶菌酶的释放。

抗溃疡作用：厚皮酚对Shay’s幽门结扎，水浸应激性胃溃疡均有抑制作用，并对组胺所致的十二指肠痉挛有一定的抑制作用，表明中枢神经成分具有防止应激性胃功能障碍的作用。

降压、松弛血管平滑肌：低于肌松剂量的厚朴注射给药有明显的降低血压作用，这一作用不能被抗组胺药异丙嗪所对抗，能对抗K离子和Ca离子去肾上腺素引起大鼠主动脉条的收缩。

厚朴酚还具有安神、抗焦虑、抗抑郁、保护血管系统和抗肿瘤等作用。临床上主要用作抗菌、抗真菌药。

发明内容

本发明目的在于提供一种兽用复方硫酸头孢喹肟乳房注入剂及其制备方法，用于乳房灌注给药，预防奶牛泌乳期或干乳期乳房炎疾病。

本发明一方面涉及提供兽用复方硫酸头孢喹肟乳房注入剂的组方，其中主药为硫酸头孢喹肟及厚朴酚；药用辅料包括助悬剂和注射用油。

按质量百分比计，所述硫酸头孢喹肟含量为0.5-20.0％、厚朴酚0.5-50.0％；

所述药用辅料中的注射用油包括油酸乙酯、麻油、茶油、辛癸酸甘油酯、大豆油中的一种或组合，用量为0.1～99.0％。

所述药用辅料中的助悬剂包括单硬脂酸铝、双硬脂酸铝、乙基纤维素、氢化蓖麻油中的一种或组合，用量为0～5.0％。

本发明另一方面涉及提供兽用复方硫酸头孢喹肟乳房注入剂的制备方法：它包括以下步骤：

(1)称取注射用油和助悬剂混合均匀后，置于反应釜中，120℃加热搅拌40分钟，放冷至室温，得A液；

(2)取A液加入硫酸头孢喹肟和厚朴酚，搅拌均匀得到溶液B；

(3)将溶液B通过高压均质机500bar两次均质，均质过程中使药液温度控制在30℃以下，以达到分散和微粉化的目的，即得兽用复方硫酸头孢喹肟乳房注入剂。

本发明说述的兽用复方硫酸头孢喹肟乳房注入剂，其特征在于主要用于治疗奶牛泌乳期或干乳期乳房炎，用于乳房灌注给药。

本发明的有益效果：

1、中西联合用药，显著提升治疗效果。厚朴酚强大的抗菌作用是由于联苯环上同时存在亲水性烯丙基和亲酯的酚羟基，因而使其粘附与变异链球菌和其他革兰氏阳性菌的细胞所致，对大肠杆菌、链球菌均有很强的抑制作用，抑菌浓度在10ug/ml以内，头孢喹肟对乳房炎致主要病菌中的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和链球菌MIC在0.05-3.0ug/ml以内，二者联合用药，在临床效果验证试验中，显示出比单方头孢喹肟乳房注入剂的治疗有效率提高19.5％。

2、不改变药物的弃奶期，不增加养殖户因弃奶造成的经济损失。头孢喹肟以75mg乳房灌注使用时，弃奶期为24h，喹诺酮类药物的弃奶期为168h，厚朴酚与头孢喹肟的联合使用避免了养殖户为增加治疗效果将头孢喹肟与其他类抗生素联合用药延长弃奶期的风险。

3、中药类药物乳房灌注使用时无刺激性、不增加乳房炎耐药菌产生突变的风险。

4、因为厚朴酚可以降低炎症部位周围毛细血管壁的通透性，抑制白细胞邮及其显微组织增生，所以可以有效缓解乳房炎症部位的红肿胀痛、促进局部血液微循环起到消肿抗炎作用。

5、生产成本低，不增加养殖户用药成本。厚朴酚提取工艺简单易行，国内已有经诸多厂家在生产销售，纯度高，质量好，价格低低廉，与头孢喹肟联合用药，不会增加养殖户用药成本负担。

具体实施方式

实施例1：

组方：

配制方法：

(1)称取注射液用大豆油和单硬脂酸铝混合均匀后，置于反应釜中，120℃加热搅拌40分钟，放冷至室温，得A液。

(2)取A液加入硫酸头孢喹肟和厚朴酚，搅拌均匀得到溶液B。

(3)将溶液B通过高压均质机500bar两次均质，均质过程中使药液温度控制在30℃以下，以达到分散和微粉化的目的，即得兽用复方硫酸头孢喹肟乳房注入剂。

实施例2：

组方：

配制方法：

(1)称取辛癸酸甘油酯和双硬脂酸铝混合均匀后，置于反应釜中，120℃加热搅拌40分钟，放冷至室温，得A液。

(2)取A液加入硫酸头孢喹肟和厚朴酚，搅拌均匀得到溶液B。

(3)将溶液B通过高压均质机500bar两次均质，均质过程中使药液温度控制在30℃以下，以达到分散和微粉化的目的，即得兽用复方硫酸头孢喹肟乳房注入剂。

实施例3：

组方：

硫酸头孢喹肟 20％

厚朴酚 50％

茶油 加至100％

配制方法：

(1)称取茶油置于反应釜中，120℃加热搅拌40分钟，放冷至室温，得A液。

(2)取A液加入硫酸头孢喹肟和厚朴酚，搅拌均匀得到溶液B。

(3)将溶液B通过高压均质机500bar两次均质，均质过程中使药液温度控制在30℃以下，以达到分散和微粉化的目的，即得兽用复方硫酸头孢喹肟乳房注入剂。

实施例4：

组方：

配制方法：

(1)称取辛癸酸甘油酯和双硬脂酸铝混合均匀后，置于反应釜中，120℃加热搅拌40分钟，放冷至室温，得A液。

(2)取A液加入硫酸头孢喹肟和厚朴酚，搅拌均匀得到溶液B。

(3)将溶液B通过高压均质机500bar两次均质，均质过程中使药液温度控制在30℃以下，以达到分散和微粉化的目的，即得兽用复方硫酸头孢喹肟乳房注入剂。

实施例5：兽用复方头孢喹肟乳房注入剂对泌乳期奶牛乳房炎的治疗效果试验

5.1受试药物

1)受试药物 兽用复方头孢喹肟乳房注入剂，规格：10g/支(按实施例4方法配制)；推荐用药方法：泌乳期奶牛，挤奶后每个感染乳区注入10g，每日2次(早晚各1次)，连用3次。

2)对照药物(按实施例4方法配制，组方中去掉厚朴酚成分)，规格：10g/支(按实施例4方法配制)；推荐用药方法：泌乳期奶牛，挤奶后每个感染乳区注入10g，每日2次(早晚各1次)，连用3次。

5.2病例选择及分组

在规模化奶牛场随机选择确诊的48个临床乳房炎病例(只选择单乳区发病奶牛)。

将选择的48个临床乳房炎病例随机分成3个组，每组16个病例。其中1个受试药物组，1个对照药物组，一个阳性对照组。

5.3用药及观察

在挤奶环节，各病例先用消毒毛巾清洁感染乳区，挤去乳汁，再用0.15％聚维酮碘保康药液浸洗各乳头，然后进行乳头内灌注给药。灌注时将含药推注管头插入乳头，轻轻推压活塞，将药物缓缓注入乳池内，随后轻轻按摩乳区，使药物散布。受试药物组各感染乳区注入1支硫酸头孢喹肟混悬型乳房注入剂；对照药物组各感染乳区注入1支泌乳通。每日2次，连续用药3次。观察记录用药后奶牛的一般状况以及乳房的情况。阳性对照组不给药。

试验奶牛除不使用其他药物治疗乳房炎外，护理按常规进行。

5.4奶样细菌学检查

各病例在给药前及停药后第7日，分别无菌采集感染乳区的乳样进行细菌学检查。

5.5牛奶体细胞数(SBB)测定

在给药前及停药后第7日，在采集奶样进行细菌学检查的同时，采集用药奶牛感染乳区的奶样，测定牛奶的SBB。

5.6临床症状评分

综合考察给药前及停药后第7日试验奶牛的精神状态、采食饮水、粪尿排泄、乳房局部症状(肿胀、潮红发热、疼痛等)、泌乳量及乳汁性状等指标，进行临床症状评分。

5.7疗效判定

停药后第7日，综合相关检查结果，按下列标准判定药物疗效。

1)治愈 病牛精神食欲恢复正常，用药乳区红、肿、热、痛等症状消除；泌乳量明显回升，乳汁性状恢复正常，乳汁SBB＜50万个/mL；主要病原消除。

2)有效 病牛精神食欲恢复正常，用药乳区红、肿、热、痛等症状明显好转；泌乳量有回升，乳汁异常性状有恢复，乳汁SBB在50～100万个/mL之间；主要病原消除。

3)无效 病牛精神食欲状态未见恢复，用药乳区红、肿、热、痛等症状未见好转甚至更加恶化；泌乳量继续下降甚至停奶，乳汁性状仍明显异常，乳汁SBB＞100万个/mL；主要病原未见消除。

5.8实验结果

表4硫酸头孢喹肟乳房注入剂临床效果实验

5.9实验结论

从以上实验结果可以看出兽用复方硫酸头孢喹肟房注入剂的临床使用效果要显著高于单方头孢喹肟乳房注入剂产品，疗效较为显著。

Claims (4)

1.一种兽用复方硫酸头孢喹肟乳房注入剂，以质量百分比计包括硫酸头孢喹肟0.5-20.0％，厚朴酚0.5-50.0％；助悬剂0～5.0％，注射用油0.1～99.0％。

2.根据权利要求1所述的一种兽用复方硫酸头孢喹肟乳房注入剂，其特征是，注射用油选自油酸乙酯、麻油、茶油、大豆油、辛癸酸甘油酯中的一种或组合。

3.根据权利要求1所述的一种兽用复方硫酸头孢喹肟乳房注入剂，其特征是，助悬剂选自单硬脂酸铝、双硬脂酸铝、乙基纤维素中的一种或组合。

4.根据权利要求1所述的一种兽用复方硫酸头孢喹肟乳房注入剂，其特征在于，其制备方法包括以下步骤：

(1)称取注射液用油和助悬剂混合均匀后，置于反应釜中，120℃加热搅拌40分钟，放冷至室温，得A液；

(2)取A液加入硫酸头孢喹肟和厚朴酚，搅拌均匀得到溶液B；

(3)将溶液B通过高压均质机500bar两次均质，均质过程中使药液温度控制在30℃以下，以达到分散和微粉化的目的，即得兽用复方硫酸头孢喹肟乳房注入剂。