CN107823122B - 一种结核菌素微针贴片及其制备方法和应用 - Google Patents

一种结核菌素微针贴片及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN107823122B
CN107823122B CN201711084669.3A CN201711084669A CN107823122B CN 107823122 B CN107823122 B CN 107823122B CN 201711084669 A CN201711084669 A CN 201711084669A CN 107823122 B CN107823122 B CN 107823122B
Authority
CN
China
Prior art keywords
microneedle
tuberculin
raw material
template
patch
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201711084669.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN107823122A (zh
Inventor
陈凡
周菁
吴雨薇
朱荣生
贺丹
薛云
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hubei University
Original Assignee
Hubei University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hubei University filed Critical Hubei University
Priority to CN201711084669.3A priority Critical patent/CN107823122B/zh
Publication of CN107823122A publication Critical patent/CN107823122A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107823122B publication Critical patent/CN107823122B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A61K9/0021—Intradermal administration, e.g. through microneedle arrays, needleless injectors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B10/00—Other methods or instruments for diagnosis, e.g. instruments for taking a cell sample, for biopsy, for vaccination diagnosis; Sex determination; Ovulation-period determination; Throat striking implements
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/42—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/0004—Screening or testing of compounds for diagnosis of disorders, assessment of conditions, e.g. renal clearance, gastric emptying, testing for diabetes, allergy, rheuma, pancreas functions
    • A61K49/0006—Skin tests, e.g. intradermal testing, test strips, delayed hypersensitivity
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M37/00—Other apparatus for introducing media into the body; Percutany, i.e. introducing medicines into the body by diffusion through the skin
    • A61M37/0015—Other apparatus for introducing media into the body; Percutany, i.e. introducing medicines into the body by diffusion through the skin by using microneedles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M37/00—Other apparatus for introducing media into the body; Percutany, i.e. introducing medicines into the body by diffusion through the skin
    • A61M37/0015—Other apparatus for introducing media into the body; Percutany, i.e. introducing medicines into the body by diffusion through the skin by using microneedles
    • A61M2037/0053—Methods for producing microneedles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M37/00—Other apparatus for introducing media into the body; Percutany, i.e. introducing medicines into the body by diffusion through the skin
    • A61M37/0015—Other apparatus for introducing media into the body; Percutany, i.e. introducing medicines into the body by diffusion through the skin by using microneedles
    • A61M2037/0061—Methods for using microneedles

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Anesthesiology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Media Introduction/Drainage Providing Device (AREA)

Abstract

本发明公开了一种结核菌素微针贴片及其制备方法和应用。所述一种结核菌素微针贴片是在微针模板中加入由结核菌素、可降解材料和无菌水混合配制而成的微针原料溶液，其中结核菌素的浓度为20‑200IU/ml，可降解材料的质量百分比为10～20％，离心处理后，去掉微针针孔上部分的原料，再加入浓度5％～10％的可降解材料溶液，再次离心处理，并置于烘箱中烘干，脱模后形成。可将其粘附在胶带上，直接通过胶带粘贴到皮肤上用于取代传统的注射器皮内接种，所述微针贴片的结核菌素总含量为0.05IU。其接种操作简单方便，无需专业人士，药物用量少，避免了注射皮试易产生的不良皮肤反应。

Description

一种结核菌素微针贴片及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于医疗领域，具体涉及一种结核菌素微针贴片及其制备方法及 应用，该微针贴片可以取代传统的注射器皮内接种方法，并且无皮肤不良 反应，结果判读简单，并可区分BCG免疫接种者。
背景技术
结核病是当前危害最大的细菌性传染病，全世界有三分之一的人受到感 染，其中5％～10％在一生中会发生临床疾病。2016年世界结核病报道显示， 新发病例约1040万，死亡150万左右。目前诊断结核痰病的“金标准”仍 然是涂片镜检和结核菌培养的方法，局限性在于痰涂片镜检的检出率较低， 培养的方法的时间太长。而现在国际上流行的检测方法：PCR和IFN-γ释 放实验，检测费用较高，且需要特殊检测设备，且可能出现假阳性结果，难以在发展中国家推广。辅助检测有X-射线透视，但常会受到非结核肺病 的影响，使其特异性较低。血清学检测方法理论上十分适合推广，但针对 结核菌的抗体虽多，特异性和敏感性都较低。目前临床上常规的免疫学诊 断方法是结核菌素皮试(TST)，用注射器将结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)注 入前臂皮内，24～72h观察结果，通过测量皮肤红肿的大小进行判断，这种 方法虽然简单，但皮试后副作用大，且难以区别活动性结核病人、潜伏感 染者和卡介苗免疫者。除此之外，现有TST采用的是皮内注射方式，PPD 制剂需要在4℃保存，每只PPD制剂为1ml，每次接种量为100ul/每人，需 要专业操作者精确计量，并且经常有因为接种者数量不足而产生的浪费。 因此，开发新的特异性和敏感性均较高的诊断方法，建立快速准确的检测 方法，是结核病防治的一个紧迫的任务。
发明内容
本发明的目的是在于提供一种结核菌素微针贴片的制备及其应用，该 结核菌素微针贴片，该微针贴片是将结核核菌素(PPD)与可降解材料混合 后制备，用于将PPD投递入皮内，其接种简单，无需专业人员操作，也无 生物废料产生，可以克服注射皮试PPD易产生红肿、水泡、瘙痒等不良反 应。
本发明提供的技术方案为：所述一种结核菌素微针贴片，包括微 针阵列和阵列基座，其特征在于：所述微针阵列的原料是由结核菌素、 可降解材料和无菌水混合配制而成的微针原料溶液，其中结核菌素的 浓度为20-200IU/ml，可降解材料的质量百分比为10～20％；所述阵列基 座的原料是由粉末状可降解材料溶于无菌水配制而成的浓度为 5％～10％的可降解材料溶液。
本发明较优的技术方案：所述微针阵列的每根微针为圆锥形或类似 圆柱形，其底面直径为200～500um，高500～1000um。
本发明较优的技术方案：所述可降解材料为粉末状玻尿酸、胶原蛋白 粉、壳聚糖、聚乙交酯-丙交酯(PGLA)中的任意一种和几种。
本发明较优的技术方案：所述微针贴片还包括粘贴胶带，其粘贴胶带 置于阵列基座的底部。
本发明较优的技术方案：所述微针贴片的微针阵列是由16根微针组成， 其微针阵列中的结核菌素的浓度为100IU/ml，每根微针为圆锥形或类似 圆锥形，其高度为1000um，底部直径为350um，其每贴微针贴片的结 核菌素总含量为0.05IU。
本发明提供的一种结核菌素微针贴片的制备方法，其特征在于具体 步骤如下：
(1)使用无菌水将粉末状结核菌素溶解，构成结核菌素浓度为 100IU/ml的无菌水溶液；
(2)在步骤(1)中的结核菌素浓度为20-200IU/ml的无菌水溶液中 加入可降解材料，并使可降解材料的终浓度为10～20％，并将其置于 0～4℃条件下颠倒混匀2～4天，配制成微针原料溶液；其中所述可降解 材料为粉末状玻尿酸、胶原蛋白粉、壳聚糖、聚乙交酯-丙交酯中的任意一 种；
(3)取步骤(2)中的可降解材料溶于无菌水中，配制成可降解材料浓 度为5％-10％的基座原料溶液；
(4)取步骤(2)中混合好的微针原料溶液置于微针模板中，并置于离 心机中旋转离心至微针原料溶液填满微针模板，然后将微针模板以上的部 分的微针原料溶液移除，保留模板针孔部分的原料溶液，并向微针模板加 入步骤(3)中配制好的可降解材料浓度为5％～10％的基座原料溶液，继 续置入离心机中离心至阵列基座原料溶液平整覆盖微针表面；
(5)将步骤(4)中的模板取出放入20-25℃烘箱中烘干后脱模， 便形成所述结核菌素微针贴片，其微针贴片中每根微针为圆锥形或类 似圆柱形，其底面直径为200～500um，高500～1000um；每个微针的 底部形成厚度为的微针基座。
本发明较优的技术方案：所述步骤(1)中粉末状结核菌素是将浓度 为20IU/ml商品化的结核菌素纯蛋白衍生物注射液置于-80℃条件下冷 冻过夜，然后将其置于-40℃的真空冷冻干燥机内，抽干浓缩至其成为 粉状。
本发明较优的技术方案：在步骤(4)中所述微针模板为PDMS(聚二 甲基硅氧烷)材质制备的微针模板，其微针针孔的高度为500～1000um，孔 口直径为为200～500um；加入微针原料溶液后的第一次离心条件为：首 先在3000～4000rpm/min的条件下离心8～15min，然后将模板水平旋转 180度，再置于3000～4000rpm/min条件下水平离心8～15min，使微针原料溶液填满微针模板；加入基座原料溶液后的第二次离心条件为： 先在1000～2000rpm/min的条件下离心8～15min，再将模板水平旋转 180度，再在1000～2000rpm/min的条件下离心8～15min，使基座原料 溶液平整覆盖微针表面。
本发明提供的一种结核菌素微针贴片的应用，其特征在于：将上 述微针贴片粘附在胶带上，直接通过胶带粘贴到皮肤上用于取代传统 的注射器皮内接种，所述微针贴片的结核菌素总含量为0.05IU。
本发明较优的技术方案：所述结核菌素微针贴片的微针数量为16 针，每根微针为圆锥形，其高度为1000um，底部直径为350um，PPD 的投入剂量为0.05IU。
本发明与现有技术相比，所述微针具有以下优点：
(1)本发明中PPD微针贴片使用的药量更少，以64根微针贴片为例， 微针为圆锥体，底面直径350μm，锥体高1000μm，PPD含量为100IU/ml， 所以微针贴片总体积可以计算如下：
V总＝64×1/3×πr2×1000um r＝350/2um＝175um
V总≈2ul
每贴微针PPD剂量(64针)＝100IU/ml×V微针＝0.2IU
常规注射PPD剂量＝20IU/ml×100ul＝2IU
相比传统针注射皮试而言，微针贴片所含PPD剂量仅为1/10，而实际操 作中只需要16针微针贴片即可测出过敏反应，因而微针贴片皮试所携带的 PPD剂量只为传统PPD皮试的1/40即可。
(2)常规TST皮试需要将针头准确穿入皮下，需要专业人员在专业机构 操作，而微针贴片皮试可以自助测试，不需要辅助工具，任何地方都可进 行；此外注射器造成的疼痛会使受试者产生抵触情绪，产生的红肿硬块可 持续一月左右，阳性者皮肤瘙痒甚至溃烂，BCG免疫者也会有皮肤过敏反 应，而微针贴片皮试技术解决了传统针头皮试对皮肤的损害，阳性反应产 生的红肿在1周左右即可消退，BCG免疫者无反应，减少皮试后针孔部位 的感染风险；此外，相比常规注射皮试，微针贴片皮试无生物废料产生。
本发明技术操作简单，免疫接种时不需专业人员操作，且无生物废料 产生，微针只需极少量的PPD便可检测出阳性结果，受试者可自助操作， 并且结果判定简单，并排除了BCG接种的干扰投入剂量少，既保证了结果 观察，又避免了皮肤的不良反应。
说明书附图
图1本发明所述微针贴片的结构示意图；
图1-1是实施例1中制备的微针贴片实物图；
图2是实施例1中制备的微针贴片在显微镜下的观察微针阵列；
图3-1是实施例2加入SRB染料后制备的微针贴片；
图3-2是实施例2中的染色微针贴片压入小鼠皮肤后效果图；
图4-1是实施例3中PPD微针贴片压入皮肤之前的显微镜观察状态图；
图4-2是实施例3中PPD微针贴片压入皮肤15min后取出来显微镜观 察状态图；
图4-3是实施例3中PPD微针贴片压入皮肤30min后取出来显微镜观 察状态图；
图4-4是实施例3中PPD微针贴片压入皮肤1h后取出来显微镜观察状 态图；
图5微针在常温在保存时间测定线性图。
具体实施方式
下面结合实施例和附图对本发明作进一步说明。
如图1所示，本发明所述的一种结核菌素微针贴片，包括微针阵列 1和阵列基座2，其特征在于：所述微针阵列1的原料是由结核菌素 (PPD)、可降解材料和无菌水混合配制而成的微针原料溶液，其中结 核菌素的浓度为100IU/ml，可降解材料的质量百分比为10～20％；所述 阵列基座2的原料是由粉末状可降解材料溶于无菌水配制而成的浓度 为5％～10％的可降解材料溶液；所述可降解材料为粉末状玻尿酸、胶原 蛋白粉、壳聚糖、聚乙交酯-丙交酯(PGLA)中的任意一种。如图1和图2 所示，所述微针阵列的每根微针为圆锥形或类似圆柱形，其底面直径 为200～500um，高500～1000um；其最佳高度为1000um，底部直径为 350um。
如图1和图1-1所示，所述微针贴片在使用时，其微针阵列是由16～64 根微针组成，且每贴微针贴片的结核菌素(PPD)最佳含量为0.05IU，高于 0.05IU也可以，将微针贴片通过其阵列基座2粘贴到底部的胶带3上， 然后通过胶带3将其直接粘贴到皮肤上，并将带有PPD的微针压入皮 肤中用于结核菌素皮试检测，将其压入人体手臂皮肤中，皮肤红肿在2～5mm即为活动性结核病患者或潜伏感染者。
下面结合实施例对本发明中的技术方案进一步说明。
实施例1：一种结核菌素微针贴片的制备方法，具体步骤如下：
(1)在无菌操作台上，将购买的5支商品化结核菌素纯蛋白衍生物(PPD) 注射液(20IU/1ml/安瓿)转移到灭菌后的EP(7ml)中，置于-80℃冰箱中过夜 冷冻；打开冷冻好的EP管盖后用封口膜封口，用针头在封口膜上扎小孔， 然后将其置于-40℃真空冷冻干燥机内，抽干直至其成为粉状；
(2)用1ml无菌水将步骤(1)中的粉状PPD溶解，则浓缩后PPD规 格为100IU/ml；
(3)称量150mg粉状玻尿酸(HA)，加入到浓缩的PPD中，制成浓度 为15％的PPD-HA混合溶液，置于4℃摇匀3天；
(4)另取100mg HA于1ml无菌水中混合均匀，制备10％的基座原 料溶液备用；
(5)取出50ul步骤(3)中所制的PPD-HA混合溶液，置于微针PDMS 模板中，在3000rpm/min水平离心10min后，将模板水平旋转180度，3000rpm/min水平离心10min，使混合物填满微针模板；将表面得混合物移 除，加入10％的步骤(4)中配制的HA基座原料溶液，在1500rpm/min 离心10min，再将模板水平旋转180度，1500rpm/min继续水平离心10min，使10％的HA基座原料溶液平整覆盖微针表面；
(6)将模板取出放入25℃烘箱中烘干，脱模后形成所述结核菌素微针 贴片，并将结核菌素微针贴片粘附在胶带上，制备呈可粘贴到皮肤上的PPD 蛋白衍生物皮试微针贴片，具体如图1-1所示；所制备微针贴片有64根微 针，将其放在显微镜下观察，如图2所示，每根微针为圆锥体，底面直径 350μm，锥体高1000μm。
可以通过以下公式计算出实施例1中微针贴片总体积：
V总＝64×1/3×πr2×1000um r＝350/2um＝175um
V总≈2ul
每贴微针PPD剂量(64针)＝100IU/ml×V微针＝0.2IU
实施例2：采用PPD微针贴片进行透皮试验，具体步骤如下：
1、按实施例1的方法先制作可用于观察结果的染色微针，其具体 制备过程中，在步骤(3)中将2mg罗丹明B染料(SRB)加入到浓度为 15％的PPD-HA混合溶液中，置于4℃混匀，然后制备成染色的微针贴 片(如图3-1)所示；
2、取一只昆明小鼠，腹腔注射100l的盐酸利多卡因注射液，麻 醉后剪除背部下方毛发，并用脱毛膏脱毛，使其皮肤裸露出来，用温 水拭擦小鼠去毛皮肤表面；将制备好的染色微针贴片垂直迅速的压入 小鼠裸露皮肤，并按压30S，微针贴片在小鼠皮肤上继续贴15min后， 取下微针贴片，观察微针是否可穿透小鼠皮肤。
其观测结果如图3-2所述，结果显示，小鼠皮肤表面出现清晰整 齐的微针孔，由此可证实，微针具有足够的机械强度，可以穿透皮肤。
实施例3，针对实施例1中制备的PPD微针贴片作用时间的测定， 具体如下：
取按照实施例1中的制备方法制PPD微针贴片5贴，同时压入志愿 者手臂前方皮肤，并分别于15min，30min，1h,2h，4h各取下一个 贴片，并将不同时间段取下的贴片上的微针分别置于显微镜下观察， 并拍照比较，已确定贴片刺入皮肤后最佳的作用时间。
所述PPD微针贴片在未压入皮肤之前，显微镜观察其微针的状态示 意图如图4-1所示，呈圆锥形；在压入志愿者前手臂皮肤15min后的 微针状态示意图如图4-2所示，其微针尖端开始慢慢溶解；在压入志 愿者前手臂皮肤30min后的微针状态示意图如图4-3所示，微针的大 部分开始溶解；在压入志愿者前手臂皮肤1h后的微针状态示意图如图 4-4所示，微针基本已经溶解。通过试验证明PPD微针贴片刺入手臂 皮肤后，1h即可完全溶于皮肤中。
实施例4，针对PPD微针贴片剂量进行测试，具体操作如下：
取实施例1中制备好的PPD微针(64针)贴片压入结核病感染者 志愿者手臂前皮肤，观察皮肤过敏反应，测量红肿硬块大小，并拍照； 另取一张贴片，剪去一半微针(32针)，按上述方法继续测定，记录 结果；按上述方法继续倍数递减微针数量直至(4针)，按上述方法测 定皮肤反应。
比较分析不同数量微针刺入皮肤后可引起的过敏反应，确定可激 发过敏反应的最小微针数量。通过试验照片对比可以看出，64根微针 阵列(64MN)贴片、32根微针阵列(32MN)、16根微针阵列(16MN)均能 检测出阳性反应，其中16根微针阵列(16MN)的反应面积最小，由于实 施例1中64根微针阵列(64MN)贴片中PPD含量为0.2IU，16根PPD 微针阵列的贴片中PPD含量为0.05IU，而常规注射PPD剂量 ＝20IU/ml×100ul＝2IU，相比传统针注射皮试而言，微针贴片所含PPD剂量 仅为为传统PPD皮试的1/40即可。
实施例5，针对PPD微针贴片有效期进行检测，其具体检测方法如下： 制备好10张PPD微针贴片，常温下密封避光保存，每个一个星期取出一张 贴片，贴于TST阳性志愿者皮肤上检测效果，直至无皮肤过敏反应出现为 止，记录每次实验结果。比较分析每次实验结果，其分析结果如图5所示， 确定常温下PPD微针贴片的最长有效保存期为7周。
实施例6，针对PPD微针贴片与常规注射皮试在人体皮肤试验进行比较：
(1)实验准备：征集志愿者112位，其中结核病患者(TB)28位， 潜伏感染者(LTBI)36位，其余48位为BCG免疫健康者；
(2)取按照实施例1中的方法制备的16针的PPD微针贴片，用大拇指 抵着贴片背面快速垂直压入每个志愿者左手左前臂掌侧前1/3处，使PPD 微针贴片刺入志愿者皮肤内，然后按压贴片1min左右松手，在贴片皮肤部 位用记号笔标记，1h后可撕下贴片(或待贴片自然脱离)，24h-72h观察 微针刺入部位皮试的变化；同时于每个志愿者的贴片处上方6cm处进行常 规TST皮试，注射100ul PPD注射液(正常接种量)。
在注入PPD注射液和PPD微针贴片48h后，用游标卡尺测量所形 成的红肿大小，并将测量的数据进行统计，其具体数据统计如下表所示：
Volunteers TB LTBI BCG
Number 28 36 48
MN(mm) 1～5 1～3 0
TST(mm) ≥15 6～18 ≤6
通过上表可以看出，28位结核病患者(TB)注入PPD注射液之后， 形成的红肿硬块面积都大于15mm，经过PPD微针贴片检测的结核感染者红 肿大小为1-5mm；36位潜伏感染者在注入PPD注射液之后，形成的红肿硬 块面积为6～18mm，而经过PPD微针贴片检测潜伏感染者红肿大小为1-3 mm；48位BCG免疫健康者注射皮试处有小于6mm的红肿形成，而PPD微针贴片处无红肿形成(MN)。
分析比较上述数据，PPD微针贴片极大地减少了皮肤过敏反应；虽然与 常规TST实验一样，PPD微针贴片不能完全区分活动性结核感染者和潜伏 感染者，但可清晰的区别开BCG免疫者与潜伏感染者。

Claims (5)

1.一种结核菌素微针贴片的制备方法，包括微针阵列和阵列基座，其特征在于：所述微针阵列的原料是由结核菌素、可降解材料和无菌水混合配制而成的微针原料溶液，其中结核菌素的浓度为20-200IU/ml，可降解材料的质量百分比为10～20％；所述阵列基座的原料是由粉末状可降解材料溶于无菌水配制而成的浓度为5％～10％的可降解材料溶液；该结核菌素微针贴片的具体制备步骤如下：
(1)使用无菌水将粉末状结核菌素溶解，构成结核菌素浓度为20-200IU/ml的无菌水溶液；
(2)在步骤(1)中的结核菌素浓度为20-200IU/ml的无菌水溶液中加入可降解材料，并使可降解材料的终浓度为10～20％，并将其置于0～4℃条件下颠倒混匀2～4天，配制成微针原料溶液；其中所述可降解材料为粉末状玻尿酸、壳聚糖、聚乙交酯-丙交酯中的任意一种；
(3)取步骤(2)中的可降解材料溶于无菌水中，配制成可降解材料浓度为5％-10％的基座原料溶液；
(4)取步骤(2)中混合好的微针原料溶液置于微针模板中，并置于离心机中旋转离心至微针原料溶液填满微针模板，然后将微针模板以上的部分的微针原料溶液移除，保留模板针孔部分的原料溶液，并向微针模板加入步骤(3)中配制好的可降解材料浓度为5％～10％的基座原料溶液，继续置入离心机中离心至阵列基座原料溶液平整覆盖微针表面；
(5)将步骤(4)中的模板取出放入20-25℃烘箱中烘干后脱模，便形成所述结核菌素微针贴片，其微针贴片中每根微针为圆锥形或类似圆锥形，其底面直径为200～500um，高500～1000um。
2.根据权利要求1所述的一种结核菌素微针贴片的制备方法，其特征在于，其特征在于：所述微针贴片还包括粘贴胶带，其粘贴胶带置于阵列基座的底部。
3.根据权利要求1所述的一种结核菌素微针贴片的制备方法，其特征在于：所述微针贴片的微针阵列是由16根微针组成，其微针阵列中的结核菌素的浓度为100IU/ml，每根微针为圆锥形或类似圆锥形，其高度为1000um，底部直径为350um，其每贴微针贴片的结核菌素总含量为 0.05IU。
4.根据权利要求1所述的一种结核菌素微针贴片的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中粉末状结核菌素是将浓度为20IU/ml商品化的结核菌素纯蛋白衍生物注射液置于-80℃条件下冷冻过夜，然后将其置于-40℃的真空冷冻干燥机内，抽干浓缩至其成为粉状。
5.根据权利要求1所述的一种结核菌素微针贴片的制备方法，其特征在于在步骤(4)中的微针模板为PDMS模板，具体是采用PDMS材质制成，每个微针针孔的高度为500～1000um，孔口直径为200～500um；在向微针模板中加入微针原料溶液后的第一次离心条件为：首先在3000～4000rpm/min的条件下离心8～15min，然后将模板水平旋转180度，再置于3000 ～4000rpm/min条件下水平离心8～15min，使微针原料溶液填满微针模板；加入基座原料溶液后的第二次离心条件为：先在1000～2000rpm/min的条件下离心8～15min，再将模板水平旋转180度，再在1000～2000rpm/min的条件下离心8～15min，使基座原料溶液平整覆盖微针表面。
CN201711084669.3A 2017-11-07 2017-11-07 一种结核菌素微针贴片及其制备方法和应用 Active CN107823122B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201711084669.3A CN107823122B (zh) 2017-11-07 2017-11-07 一种结核菌素微针贴片及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201711084669.3A CN107823122B (zh) 2017-11-07 2017-11-07 一种结核菌素微针贴片及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107823122A CN107823122A (zh) 2018-03-23
CN107823122B true CN107823122B (zh) 2020-07-31

Family

ID=61654711

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201711084669.3A Active CN107823122B (zh) 2017-11-07 2017-11-07 一种结核菌素微针贴片及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107823122B (zh)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108498941A (zh) * 2018-04-25 2018-09-07 武汉德丽福生物科技有限公司 微针美容贴片以及其制备方法
DE102019200561A1 (de) * 2019-01-17 2020-07-23 Lts Lohmann Therapie-Systeme Ag Träger
CN112023033B (zh) * 2020-04-29 2023-08-25 中山大学·深圳 一种同时实现卡介苗接种及其诊断的两段式微针阵列药贴及其制备方法
CN111760185A (zh) * 2020-06-15 2020-10-13 析芒(宁波)生物微系统有限公司 一种可降解微针阵列胶带

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101549086B1 (ko) * 2014-11-10 2015-09-02 주식회사 스몰랩 마이크로 니들 및 마이크로 니들 패치
CN106237318B (zh) * 2016-08-24 2020-02-18 湖北大学 一种卡介苗干粉微针疫苗及其制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Chitin Microneedles for an Easy-to-Use Tuberculosis Skin Test;Jungho Jin等;《ADVANCED HEALTHCARE MATERIALS》;20141231;第349-353页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN107823122A (zh) 2018-03-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN107823122B (zh) 一种结核菌素微针贴片及其制备方法和应用
Lee et al. A practical guide to the development of microneedle systems–In clinical trials or on the market
CN110090044B (zh) 一种用于采集皮肤间质液的水凝胶微针贴片及其制备方法和使用方法
US6706032B2 (en) Localized molecular and ionic transport to and from tissues
KR102122208B1 (ko) 마이크로니들 패치를 이용한 최소 침습적 아토피 피부염 검사 방법 및 마이크로니들 패치를 포함하는 최소 침습적 아토피 검사 키트
CN109715075B (zh) 微针贴片、制造微针贴片的方法和使用微针贴片诊断过敏性疾病的方法
US20100030100A1 (en) Microneedle Device For Diagnosis Of Allergy
US7597692B2 (en) Microscission processes and procedures
CN109701152A (zh) 一种装载药物的可溶性微针贴片及其制备方法
TWM427950U (en) Transdermal sensor
CN105492064A (zh) 无痛及无膜片的注射微型结构体
JP2004065775A (ja) 針状構造体を備えたデバイス
WO2015122838A1 (en) Rapidly dissolvable microneedles with drug-impregnated tips
CN107569447B (zh) 载有结核菌素纯蛋白衍化物的可溶性微针贴片及其制备方法
US20150265530A1 (en) Biodegradable microdepot delivery system for topical delivery
CN109106682A (zh) 一种生物可吸收无痛经皮给药微针贴及其制备方法
CN110680911B (zh) 一种乙脑疫苗可溶性微针贴及其制备方法
US20220022783A1 (en) Microneedle Device for Interstitial Fluid Extraction
JP5222512B2 (ja) マイクロニードルチップ
Ribet et al. Minimally invasive and volume-metered extraction of interstitial fluid: bloodless point-of-care sampling for bioanalyte detection
US20240049995A1 (en) Methods and Devices for Inducement of Sweat for Medical Diagnostics
JP7272711B2 (ja) マイクロニードルパッチを利用した最小浸湿的皮膚生体検査方法
CN108553751A (zh) 一种负载磁球药物载体的透明质酸微针及其制备方法
KR102211517B1 (ko) 마이크로니들 패치를 이용한 피부 간질액 내 글루코오스 추출을 위한 최소침습적 방법
CN209727836U (zh) 丝素蛋白微针电极及检测葡萄糖浓度的传感器

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant