CN107753521A - 一种蜈蚣提取物及有效部位在创面修复领域的应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种蜈蚣提取物及有效部位在创面修复领域的应用。主要包括蜈蚣粉末、蜈蚣提取物、蜈蚣酶解物及蜈蚣有效部位。通过建立有效地提取方法和限定使用范围，为蜈蚣的临床应用提供了有效的技术支持，获得的蜈蚣类药物具有较优的抗菌、镇痛抗炎、免疫调节、改善微循环、促进伤口愈合、减少瘢痕生成达到外用治疗疮疡溃后、外伤感染、难愈合创面等作用，产品安全、有效，皮肤适用性良好。

Description

一种蜈蚣提取物及有效部位在创面修复领域的应用

技术领域

本发明属于蜈蚣药物研究领域，特别涉及一种蜈蚣提取物及有效部位在创面修复领域的应用。

背景技术

蜈蚣为蜈蚣科动物少棘巨蜈蚣Scolopendra subspinipes mutilans L.Koch的干燥体，性温，味辛，有毒，具有息风镇痉，通络止痛，攻毒散结之功。《医学衷中参西录》中张锡纯谓其“走窜之力最速，内而脏腑，外而经络，凡气血凝聚之处皆能开之。性有微毒，而专善解毒，凡一切疮疡诸毒，皆能消之”。国医大师朱良春认为，虫类药如蜈蚣等为血肉有情之品，且性喜攻逐走窜，通经达络，搜剔疏利、无处不至；又与人的体质比较接近，容易吸收和利用，其疗效佳良而可靠，在某些方面是草木、矿石之类所不能比拟的。

在抗菌方面，蜈蚣水提取液抗菌活性较强，临床上常用于细菌性及真菌性皮肤感染，蜈蚣中抗菌肽在对抗细菌入侵的早期免疫防御中起重要作用，并且抗菌作用不会诱导耐药菌株的产生；其次，蜈蚣还发挥着促进伤口愈合、增强机体免疫的作用，其含有的多糖类及蛋白质、氨基酸类物质供给伤口愈合必须的营养物质；最后蜈蚣作为动物类药材，壳中含有甲壳素类物质，进一步脱乙酰基得到壳聚糖，具有止痛、促愈及减少瘢痕生成、抗炎、抑菌等作用，因此蜈蚣有效成分为多肽类、多糖类以及氨基酸类成分，主要发挥抗菌、抗炎镇痛等作用。

但蜈蚣辛温有毒、性善走窜。临床中使用不当，常导致中毒现象的发生，长时间过量服用，更是会危及生命；使其推广、应用受到了限制。

发明内容

为了克服上述不足，本发明提供一种蜈蚣提取物及有效部位在创面修复领域的应用。主要包括蜈蚣粉末、蜈蚣提取物、蜈蚣酶解物及蜈蚣有效部位。通过建立有效地提取方法和限定使用范围，为蜈蚣的临床应用提供了有效的技术支持，获得的蜈蚣类药物具有较优的抗菌、镇痛抗炎、免疫调节、改善微循环、促进伤口愈合、减少瘢痕生成达到外用治疗疮疡溃后、外伤感染、难愈合创面等作用，产品安全、有效，皮肤适用性良好。

蜈蚣是我国传统动物药材之一，中医药古籍中对其有详细记载，蜈蚣具有止痛、拔毒、活血等主要功效，主要用于治疗疔疮、小儿急慢性惊风、痈疽等疾病。现代药理还研究发现，其具有抗炎、镇痛、抑菌、抗衰老和抗肿瘤的作用；但由于蜈蚣的品种繁多、毒性不尽相同；又缺乏统一的蜈蚣质量标准、用药安全难以保证，导致蜈蚣原料药在临床应用中受到了极大的限制。为此，本发明在系统研究蜈蚣化学成分、药理作用的基础上，对现有的蜈蚣品种和其适应剂型进行了大量摸索和临床应用试验，偶然发现：蜈蚣类原料药还具有较优的促进伤口愈合、减少瘢痕生成效果，特别是在外用治疗疮疡溃后、外伤感染、难愈合创面中获得了独特功效、用药安全合理、有效，皮肤适用性良好。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明提供了：蜈蚣粉末、蜈蚣脂溶性成分、蜈蚣水提取物、蜈蚣醇提取物、蜈蚣醇水双提取物、蜈蚣酶解物、蜈蚣总蛋白提取物(蜈蚣有效部位)在创面修复药物制备中的应用，该类物质制备方法简单、疗效好、安全、高效、临床应用效果良好。

本发明中蜈蚣有效部位为蜈蚣的总蛋白提取物。

本发明还提供了一种创面修复药物，所述药物组分包括蜈蚣粉末、蜈蚣脂溶性成分、蜈蚣水提取物、蜈蚣醇提取物、蜈蚣醇水双提取物、蜈蚣酶解物或蜈蚣总蛋白提取物中的至少一种。

优选的，所述蜈蚣脂溶性成分的提取方法如下：

采用乙醚萃取蜈蚣中的总脂，无水乙醇溶解、过滤、干燥、溶于碘化油中，即得蜈蚣脂溶性成分；

优选的，所述蜈蚣水提取物的制备方法如下：

取蜈蚣，加水回流提取，减压浓缩；向浓缩物加入质量浓度为95％乙醇使含醇量达70～72％，静置，过滤、减压醇沉，得流浸膏；将流浸膏加水定容，冷藏静置，过滤，即得蜈蚣水提取物；

本发明中的百分比含量在未进行特殊说明的情况下皆为质量百分比。

优选的，所述蜈蚣醇提取物的制备方法如下：

称取蜈蚣，加醇溶液回流提取，减压浓缩；将浓缩物加水稀释、冷藏静置，过滤，即得蜈蚣醇提取物；

优选的，所述蜈蚣醇水双提取物的制备方法如下：

将蜈蚣进行醇提，得蜈蚣醇提液和药渣；

将上述的药渣进行水提，得水提液；

合并上述水提液和醇提液，即得蜈蚣醇水双提取物；

优选的，所述蜈蚣酶解物的制备方法如下：

取蜈蚣，加入人工胃液，密闭条件下水浴处理20～30min后，加入胃蛋白酶水解3～3.2h，调节pH值为6.8～6.9，再加入胰蛋白酶酶解4～4.5h，灭菌、离心、取上清液、干燥、称重，得蜈蚣酶解物；

优选的，所述蜈蚣总蛋白提取物的制备方法如下：

取蜈蚣，溶于乙醇中，加热至沸腾，微沸1.2～1.5h，过滤，得滤渣和滤液Ⅰ；

将滤渣加乙醇，回流提取，过滤，得滤液Ⅱ；

合并滤液Ⅰ和滤液Ⅱ，即得蜈蚣醇提液；

向上述蜈蚣醇提液中加水、静置、离心，取上清液；脱脂处理，待分层后，取水层、浓缩定容，即得蜈蚣总蛋白提取物。

本发明还提供了一种用于创面修复的蜈蚣脂溶性成分的提取方法，包括：

采用乙醚萃取蜈蚣中的总脂，无水乙醇溶解、过滤、干燥、溶于碘化油中，即得。

本发明还提供了一种用于创面修复的蜈蚣醇水双提取物的制备方法，包括：

将蜈蚣进行醇提，得蜈蚣醇提液和药渣；

将上述的药渣进行水提，得水提液；

合并上述水提液和醇提液，即得。

本发明还提供了一种用于创面修复的蜈蚣水提取物的制备方法，包括：

取蜈蚣，加水回流提取，减压浓缩；加醇使含醇量达70～72％，静止，过滤、减压浓缩，得流浸膏；加水定容，冷藏静置，过滤，即得。

本发明还提供了一种用于创面修复的蜈蚣醇提取物的制备方法，包括：

称取蜈蚣，加醇溶液回流提取，减压浓缩；加水稀释、冷藏静置，过滤，即得。

本发明还提供了一种用于创面修复的蜈蚣酶解物的制备方法，包括：

取蜈蚣，加入人工胃液，密闭条件下水浴处理20～30min后，加入胃蛋白酶水解3～3.2h，调节pH值为6.8～6.9，再加入胰蛋白酶酶解4～4.5h，灭菌、离心、取上清液、干燥、称重，得干燥复合酶解物。

本发明还提供了一种用于创面修复的蜈蚣有效部位的提取方法，包括：

取蜈蚣，溶于乙醇中，加热至沸腾，微沸1.2～1.5h，过滤，得滤渣和滤液Ⅰ；

将滤渣加乙醇，回流提取，过滤，得滤液Ⅱ；

合并滤液Ⅰ和滤液Ⅱ，即得蜈蚣醇提液；

向上述蜈蚣醇提液中加水、静置、离心，取上清液；脱脂处理，待分层后，取水层、浓缩定容，即得蜈蚣总蛋白提取物。

本发明上述的方法中，各原料和试剂用量，本领域技术人员根据本领域的常规用量和公知常识进行选择即可。

本发明的蜈蚣总蛋白提取物还能祛风通络，杀虫，使伤口愈合而不留瘀，愈后不易复发，防止风寒湿等邪乘虚而入，在治疗褥疮、糖尿病足、疮疡、外伤感染中获得了较优的效果。

本发明还提供了几种蜈蚣原料药及其较优的提取方法(括号中的用量为优选方案)，包括：

1.蜈蚣

1.1蜈蚣粉末直接用于伤口或浸泡于香油中涂抹伤口上。(蜈蚣油：蜈蚣4～6g，加入500ml香油中，浸泡)

1.2取蜈蚣加乙醚，水浴(36℃)，回流5h倒出乙醚，另加乙醚水浴回流3h，倒出乙醚，合并2次乙醚液，回收乙醚至尽，得总脂加无水醇溶解，过滤挥干乙醇加碘化油溶解。(蜈蚣8～10g，乙醚量每次50ml，最后采用100ml碘化油溶解)

2.蜈蚣提取物

2.1蜈蚣水提取物

(1)称取蜈蚣适量，加入纯化水回流提取3次；(蜈蚣2～5g)

(2)合并提取液，减压浓缩；

(3)加入95％乙醇使含醇量达70％，静置24小时，过滤，减压回收乙醇使无醇味，得醇沉后流浸膏；

(4)加纯化水定容，冷藏静置，过滤，即得。(定容至500ml)

2.2蜈蚣醇提

(1)称取蜈蚣适量，加入70％乙醇回流提取2次，每次1h；(蜈蚣2～5g)

(2)合并提取液，浓缩；

(3)加入1-2倍量纯化水，搅拌均匀，冷藏静置，过滤，即得。(定容至500ml)

2.3蜈蚣醇水双提

(1)称取蜈蚣适量，加入70％乙醇回流提取2次，每次1h；(蜈蚣2～3g)

(2)合并提取液，过滤，浓缩至1-2倍生药量，；

(3)醇提后药渣加入适量的水，煎煮提取2次，每次1h；

(4)合并水煎液，浓缩；

(5)加入乙醇使含醇量达到50％，搅匀，静置12h；

(6)过滤，滤液减压浓缩，即得水提液；

(7)合并醇提液、水提液，即得。定容至500ml

2.4蜈蚣酶解物

称取蜈蚣药材细粉2～5g，，加入20倍量人工胃液，密闭于37℃水浴锅30min后加入4.0％胃蛋白酶水解，3h后用1mol/L NaOH溶液调节酶解液的pH 6.8，加入50倍量胰蛋白酶酶解4h，于85℃水浴灭酶15min，4200r/min离心15min，取上清液，60℃真空干燥称重，得干燥复合酶解物。

2.5蜈蚣有效部位

称取干燥的蜈蚣药材粉末10g，置于500mL硬质圆底烧瓶中，加入6倍量65％乙醇，振摇混合后，连接冷凝装置。置电热套中缓缓加热沸腾，并保持微沸1.5h，停止加热，趁热布氏漏斗过滤。第二次再加入3倍量的乙醇，加热回流提取1h，趁热布氏漏斗过滤，合并两次滤液，得到绿色的蜈蚣醇提液。

向蜈蚣醇提液中缓慢加入等体积的蒸馏水，少量多次的加入。轻轻搅拌，静置，于离心机上离心(4000转/min)15min，取上清液。用石油醚萃取脱脂，待分层后，取水层。水层水浴(温度75℃)浓缩定容至100ml，为蜈蚣总蛋白提取物。

本发明还提供了一种创面修复药物，所述药物包括至少一种上述方法制备的产物。

本发明的上述的蜈蚣粉末、蜈蚣脂溶性成分、蜈蚣水提取物、蜈蚣醇提取物、蜈蚣醇水双提取物，蜈蚣酶解物或蜈蚣总蛋白提取物，及其制备的创面修复药物还可用于制备治疗褥疮、糖尿病足、疮疡、外伤感染的外用药物，临床应用表明：制备的外用药物安全、高效、皮肤适用性良好。

本发明的有益效果

(1)在本发明中制备蜈蚣类药物具有抑制TGF-β1分泌的作用，减少瘢痕的生成；促进成纤维细胞迁移的作用。临床应用表明：上述蜈蚣类药物可用于褥疮、糖尿病足等慢性难愈合伤口，还可用于疮疡、外伤感染及软组织感染，具有抗菌、促愈、为伤口提供营养物质的作用，疗效显著。

(2)本发明制备方法简单、安全、高效、实用性强，易于推广。

附图说明

图1是本发明促愈试验效果图。

图2是体外促愈实验效果图，其中，A.对照组，B.实验组。

具体实施方式

以下通过实施例对本发明特征及其它相关特征作进一步详细说明，以便于同行业技术人员的理解：

实施例1

一、蜈蚣的制备

蜈蚣应用于创面修复领域，主要包括蜈蚣粉末、蜈蚣提取物、蜈蚣酶解物及蜈蚣有效部位。

1、蜈蚣

1.1蜈蚣粉末直接用于伤口或浸泡于香油中涂抹伤口上。

1.2取蜈蚣加乙醚，水浴(36℃)，回流5h倒出乙醚，另加乙醚水浴回流3h，倒出乙醚，合并2次乙醚液，回收乙醚至尽，得总脂加无水醇溶解，过滤挥干乙醇加碘化油溶解。

2、蜈蚣提取物

2.1蜈蚣水提取物

(1)称取蜈蚣适量，加入纯化水回流提取3次；

(2)合并提取液，减压浓缩；

(3)加入95％乙醇使含醇量达70％，静置24小时，过滤，减压回收乙醇使无醇味，得醇沉后流浸膏；

(4)加纯化水定容，冷藏静置，过滤，即得。

2.2蜈蚣醇提

(1)称取蜈蚣适量，加入70％乙醇回流提取2次，每次1h；

(2)合并提取液，浓缩；

(3)加入1-2倍量纯化水，搅拌均匀，冷藏静置，过滤，即得。

2.3蜈蚣醇水双提

(1)称取蜈蚣适量，加入70％乙醇回流提取2次，每次1h；

(2)合并提取液，过滤，浓缩至1-2倍生药量，；

(3)醇提后药渣加入适量的水，煎煮提取2次，每次1h；

(4)合并水煎液，浓缩；

(5)加入乙醇使含醇量达到50％,搅匀，静置12h；

(6)过滤，滤液减压浓缩，即得水提液；

(7)合并醇提液、水提液，即得。

3、蜈蚣酶解物

称取蜈蚣药材细粉，加入人工胃液，密闭于37℃水浴锅30min后加入胃蛋白酶水解，3h后用1mol/L NaOH溶液调节酶解液的pH＝6.8，加入胰蛋白酶酶解4h，于85℃水浴灭酶15min，4200r/min离心15min，取上清液，60℃真空干燥称重，得干燥复合酶解物。

4、蜈蚣有效部位

称取干燥的蜈蚣药材粉末，置于500mL硬质圆底烧瓶中，加入65％乙醇，振摇混合后，连接冷凝装置。置电热套中缓缓加热沸腾，并保持微沸1.5h，停止加热，趁热布氏漏斗过滤。第二次再加入3倍量的乙醇，加热回流提取1h，趁热布氏漏斗过滤，合并两次滤液，得到绿色的蜈蚣醇提液。

向蜈蚣醇提液中缓慢加入等体积的蒸馏水，少量多次的加入。轻轻搅拌，静置，于离心机上离心(4000转/min)15min，取上清液。用石油醚萃取脱脂，待分层后，取水层。水层水浴(温度75℃)浓缩定容至100ml，为蜈蚣总蛋白提取物。

二、处方对比研究

1、处方1：蜈蚣

处方2：黄柏、连翘、金银花、蒲公英、蜈蚣

处方3：黄柏、连翘、金银花、蒲公英

处方4：黄柏、连翘、金银花、蒲公英、地龙

2、促愈试验研究

(1)试验方法

分组：SD大鼠20只，雌雄各10只，体重300-330g。随机分为7组：阴性对照组、样品1、样品2、样品3、样品4、样品5、样品6。

造模：SD大鼠，婴儿理发器物理背部剃毛，温水擦洗后归笼。术前一晚禁食禁水12h，手术当天10％水合氯醛(300mg/kg)腹腔注射麻醉，以大鼠背部脊柱为中线，设计一个左右对称面积约为2.5cm×2.5cm的正方形创面，按设计完整切除皮肤、浅筋膜。

给药：以注射器滴加的方式将药物缓缓浸没伤口，给药后创口均保持自然暴露状态，3分钟后归笼。各组每天9：00-10：00、15：00-16：00给药各一次，每次每只1ml。

观测指标：观察伤口愈合情况，拍照，见附图。

(2)试验结果

①用药2天时，处方1伤口较其他组略显严重。

②用药7天时，各用药组伤口明显好转，生理盐水组大鼠伤口也出现好转。

③用药14天，处方1、处方2较处方3、处方4愈合要好。

④用药21天时，处方1、处方2用药组已经完全愈合，生理盐水组、处方3、处方4还未完全愈合。

三、药理活性研究

1、抗菌

1.1菌株：金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003，大肠埃希菌CMCC(B)44102，痢疾志贺菌CMCC(B)51105，肺炎克雷伯菌CMCC(B)46117、变形杆菌CMCC(B)49027

1.2微量稀释法抑菌实验

参照NCCLS标准采用微量稀释法进行。在96孔板中每孔加入培养基100μl，然后在第1行中加入100μl药液，从第1行中吸取100μl混合液加入第2行，依次类推至第6行，得到2、4、8、16、32、64倍稀释药物梯度。第7行每孔加入庆大霉素10μl为阳性对照，第8行直接加入菌液作为阴性对照。同时设立药物稀释梯度和培养基空白作为对照。每个药物重复两次。分别加入各菌液10μl，37℃24h，观察结果。

1.3MIC测定

阴性对照中细菌生长良好，阳性对照孔无明显生长，培养基空白无污染。抑菌实验显示蜈蚣对不同细菌均有一定抑制作用。蜈蚣提取液初始浓度为48mg/ml，8倍稀释时对大肠埃希菌具有抑制作用，64倍稀释时对铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、变型杆菌以及肺炎克雷伯菌具有抑制作用。

2、促愈

2.1体外促愈实验

将细胞密度为1×10⁵个/mL的3T3细胞悬液接种在96孔板(弃四周孔)，每孔100μL，四周加入等体积的无菌蒸馏水。37℃培养箱静置培养18h后，弃去培养液用1000μL枪头在中央垂直划一均匀痕迹，PBS缓冲液洗涤划落的细胞碎片，实验分四组即正常细胞组(只划痕不加药)、高浓度药物组、中浓度药物组、低浓度药物组，正常对照含2％胎牛血清的1640培养基进行培养，每组均加样100μL，每组设6个复孔。分别在划痕后0h、10h、20h、30h、40h在倒置显微镜下观察并拍照。

2.2试验结果

对照组：上皮细胞在生理状态下，形成单层或者复层上皮，当病理状态下，比如创伤愈合，细胞迁移的时候，以侧向运动为主，细胞划痕试验很好的模拟了这种运动形式，是很好的模型。

蜈蚣浓度为1.2mg/ml作用于成纤维细胞，在培养10h、30h、40h观察，细胞迁移明显，表明蜈蚣提取物有促进成纤维细胞迁移的作用

3、对生长因子的影响

蜈蚣具有抑制TGF-β1分泌的作用，减少瘢痕的生成

四、临床应用

临床上，本发明的蜈蚣粉末、蜈蚣脂溶性成分、蜈蚣水提取物、蜈蚣醇提取物、蜈蚣醇水双提取物、蜈蚣酶解物、蜈蚣总蛋白提取物(蜈蚣有效部位)除用于褥疮、糖尿病足等慢性难愈合伤口外，还可用于疮疡、外伤感染及软组织感染，具有抗菌、促愈、为伤口提供营养物质的作用，疗效显著。

最后应该说明的是，以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。上述虽然结合附图对本发明的具体实施方式进行了描述，但并非对本发明保护范围的限制，所属领域技术人员应该明白，在本发明的技术方案的基础上，本领域技术人员不需要付出创造性劳动即可做出的各种修改或变形仍在本发明的保护范围以内。

Claims (10)

1.蜈蚣粉末、蜈蚣脂溶性成分、蜈蚣水提取物、蜈蚣醇提取物、蜈蚣醇水双提取物、蜈蚣酶解物、蜈蚣总蛋白提取物在创面修复药物制备中的应用。

2.一种创面修复药物，其特征在于，所述药物组分包括蜈蚣粉末、蜈蚣脂溶性成分、蜈蚣水提取物、蜈蚣醇提取物、蜈蚣醇水双提取物、蜈蚣酶解物、蜈蚣总蛋白提取物中的至少一种。

3.如权利要求2所述的药物，其特征在于，所述蜈蚣脂溶性成分的提取方法如下：

采用乙醚萃取蜈蚣中的总脂，无水乙醇溶解、过滤、干燥、溶于碘化油中，即得蜈蚣脂溶性成分；

或所述蜈蚣水提取物的制备方法如下：

取蜈蚣，加水回流提取，减压浓缩；向浓缩物加入质量浓度为95％乙醇使含醇量达70～72％，静置，过滤、减压醇沉，得流浸膏；将流浸膏加水定容，冷藏静置，过滤，即得蜈蚣水提取物；

或所述蜈蚣醇提取物的制备方法如下：

称取蜈蚣，加醇溶液回流提取，减压浓缩；加水稀释、冷藏静置，过滤，即得蜈蚣醇提取物；

或所述蜈蚣醇水双提取物的制备方法如下：

将蜈蚣进行醇提，得蜈蚣醇提液和药渣；

将上述的药渣进行水提，得水提液；

合并上述水提液和醇提液，即得蜈蚣醇水双提取物；

或所述蜈蚣酶解物的制备方法如下：

取蜈蚣，加入人工胃液，密闭条件下水浴处理20～30min后，加入胃蛋白酶水解3～3.2h，调节pH值为6.8～6.9，再加入胰蛋白酶酶解4～4.5h，灭菌、离心、取上清液、干燥、称重，得蜈蚣酶解物；

或所述蜈蚣总蛋白提取物的制备方法如下：

取蜈蚣，溶于乙醇中，加热至沸腾，微沸1.2～1.5h，过滤，得滤渣和滤液Ⅰ；

将滤渣加乙醇，回流提取，过滤，得滤液Ⅱ；

合并滤液Ⅰ和滤液Ⅱ，即得蜈蚣醇提液；

向上述蜈蚣醇提液中加水、静置、离心，取上清液；脱脂处理，待分层后，取水层、浓缩定容，即得蜈蚣总蛋白提取物。

4.一种用于创面修复的蜈蚣脂溶性成分的提取方法，其特征在于，包括：

采用乙醚萃取蜈蚣中的总脂，无水乙醇溶解、过滤、干燥、溶于碘化油中，即得。

5.一种用于创面修复的蜈蚣醇水双提取物的制备方法，其特征在于，包括：

将蜈蚣进行醇提，得蜈蚣醇提液和药渣；

将上述的药渣进行水提，得水提液；

合并上述水提液和醇提液，即得。

6.一种用于创面修复的蜈蚣水提取物的制备方法，其特征在于，包括：

取蜈蚣，加水回流提取，减压浓缩；向浓缩物加入质量浓度为95％乙醇使含醇量达70～72％，静置，过滤、减压醇沉，得流浸膏；加水定容，冷藏静置，过滤，即得。

7.一种用于创面修复的蜈蚣醇提取物的制备方法，其特征在于，包括：

称取蜈蚣，加醇溶液回流提取，减压浓缩；加水稀释、冷藏静置，过滤，即得。

8.一种用于创面修复的蜈蚣酶解物的制备方法，其特征在于，包括：

取蜈蚣，加入人工胃液，密闭条件下水浴处理20～30min后，加入胃蛋白酶水解3～3.2h，调节pH值为6.8～6.9，再加入胰蛋白酶酶解4～4.5h，灭菌、离心、取上清液、干燥、称重，得干燥复合酶解物。

9.一种用于创面修复的蜈蚣有效部位的提取方法，其特征在于，包括：

取蜈蚣，溶于乙醇中，加热至沸腾，微沸1.2～1.5h，过滤，得滤渣和滤液Ⅰ；

将滤渣加乙醇，回流提取，过滤，得滤液Ⅱ；

合并滤液Ⅰ和滤液Ⅱ，即得蜈蚣醇提液；

向上述蜈蚣醇提液中加水、静置、离心，取上清液；脱脂处理，待分层后，取水层、浓缩定容，即得蜈蚣总蛋白提取物。

10.权利要求2或3所述的创面修复药物在制备治疗褥疮、糖尿病足、疮疡、外伤感染的外用药物中的应用。