CN107753419B - 他克莫司外用制剂 - Google Patents

Abstract

本发明揭示了含有他克莫司、三丙烯酸甘油酯和基质的外用制剂，其具有低皮肤刺激性和极佳的稳定性。发现当使用三丙烯酸甘油酯作为他克莫司的增溶剂时，他克莫司可充分溶解在软膏中，并且所述软膏具有低皮肤刺激性和极佳的稳定性。

Description

他克莫司外用制剂

技术领域

本发明涉及包含他克莫司作为活性成分的外用制剂。具体而言，本发明涉及含有他克莫司的外用制剂具有极好的稳定性及极低皮肤刺激性。

【背景技术】

他克莫司（tacrolimus，FK-506）是全球首个获批准的非皮质类固醇类外用免疫调节剂，其成分他克莫司最初是由日本从tsukubaensis链霉菌（一种类似真菌的细菌，由Tsukuba在土壤样本中发现）的发酵培养基中分离而得，属于大环内酯类，具有独特的免疫调节性。

其化学名称为：

[3S-[3R*[E(1S*,3S*,4S*)],4S*,5R*,8S*,9E,12R*,14R*,15S*,16R*,18S*,19S*,26aR*]]-5,6,8,11,12,13,14,15,16,17,18,19,24,25,26,26a-十六氢-5,19-二羟基-3-[2-(4-羟基-3-甲氧环己基)-1-甲乙烯基]-14,16-二甲氧基-4,10,12,18-四甲基-8-(2-丙烯基)-15,19-环氧-3H-吡啶并[2,1-c][1,4]氧杂氮杂环二十三碳烯-1,7,20,21(4H,23H)-四酮，一水合物。

其结构式表示为下式：

其已被普遍用作药物。已知他克莫司具有包括免疫抑制作用和抗微生物作用在内的有益药理作用，并因此可用于治疗和预防多种自身免疫疾病(如器官或组织移植排斥或者移植物抗宿主病)、感染性疾病等。

已知他克莫司外用可用于治疗皮肤病，如特应性皮炎。而且，已知皮肤的异常干燥或瘙痒是由于皮肤屏障功能的损坏而致。因此，需要含有他克莫司的外用制剂。

由于他克莫司在水和脂溶性溶剂中溶解不佳，因此含有其的制剂需要能溶解他克莫司的增溶剂。通常使用表面活性剂作为增溶剂。然而，由于其皮肤刺激性，表面活性剂不适用于治疗皮肤病(如特应性皮炎)的制剂。除表面活性剂以外的可用的增溶剂非常有限。或可能使活性成分如他克莫司在化学这些增溶剂可能如表面活性剂一样具有皮肤刺激性，上不稳定，因此不适宜采用具有所述不理想特性的增溶剂。此外，为了降低他克莫司软膏引起的皮肤刺激性，优选的是能够形成不与软膏基质混溶的稳定液滴分散体的增溶剂。而且，在治疗皮肤病(如特应性皮炎)的情况下，由于他克莫司为免疫抑制剂因此优选将其表面递送。如果全身施用他克莫司，则可引起不期望的副作用(例如肾功能障碍)以及导致感染正常情况下免疫系统可预防的疾病的风险。此外，优选的是药物产品具有足够的化学和物理稳定性。

已有含有他克莫司的外用制剂存在技术问题，即包含具有高皮肤刺激性的成分或者活性成分他克莫司在长期储存期间分解。因此，仍需要具有低皮肤刺激性和极佳稳定性的含有他克莫司的外用制剂。例如，已经上市销售的有商品名为Protopic(注册商标)软膏的他克莫司软膏，其含有碳酸丙烯酯(propylenecarbonate)。然而，碳酸丙烯酯具有皮肤刺激性，因此其对软膏不适用。再如CN 102176913 B中揭示的外用制剂存在活性成分他克莫司在长期储存期间分解。

【发明内容】

因此，本发明的目的是提供一种具有极低皮肤刺激性和极佳稳定性的含有他克莫司的外用制剂。

我们现在发现，含有三丙烯酸甘油酯作为他克莫司之增溶剂的外用制剂具有极低皮肤刺激性和极佳的稳定性。因此，本发明提供了含有他克莫司作为活性成分和三丙烯酸甘油酯作为其增溶剂的外用制剂。本发明的外用制剂不仅具有低皮肤刺激性和极佳的稳定性，而且还形成溶解他克莫司之三丙烯酸甘油酯的稳定液滴，因为基质不与三丙烯酸甘油酯混溶。这样的外用制剂可将他克莫司表面递送给对象。

发明详述

在第一个实施方案中，本发明提供了一种含有他克莫司、三丙烯酸甘油酯和基质的外用制剂。优选地，他克莫司与三丙烯酸甘油酯的量的百分比可为按重量计的0.01％至30％，更优选按重量计的0.1％至20％，更优选按重量计0.3％至10.0％，更优选按重量计0.3％至5.0％，最优选按重量计的0.3％至3％。

本文所用术语“他克莫司”是指如上所述的23元大环内酯系统内酯，其也被称为FK-506或藤霉素(Fujimycin)。他克莫司可以是游离的或可药用盐的形式，或者是溶剂化物(例如水合物或其类似物)。由于他克莫司的盐形式、溶剂化物或类似物(尤其是他克莫司一水合物)具有与游离形式的他克莫司类似的药理活性，因此本申请和权利要求中所用的术语“他克莫司”是指其任意或所有形式。术语“他克莫司”还包括采用结晶相、非结晶相或半结晶相的他克莫司。优选地，本发明的外用制剂包含占制剂总量按重量计0.01％至1.0％、更优选按重量计0.02％至0.5％、最优选按重量计0.03％至0.1％的他克莫司。

游离形式的他克莫司可在25℃以约18.5g/100g的比例溶解在三丙烯酸甘油酯中。优选地，本发明的外用制剂包含占制剂总量按重量计0.01％至30％、更优选按重量计0.1％至20％、还更优选按重量计0.3％至6.0％、最优选按重量计1.0％至5.0％的三丙烯酸甘油酯。

本文所用术语“外用制剂”是指施用到对象的皮肤或粘膜(例如皮肤、眼、鼻腔、耳、肛门、阴道、尿道、肛门内、气管、肺、舌下、口腔等)的制剂，通常包括软膏、液体、洗剂、搽剂、凝胶、气雾剂、硬膏剂、泥罨剂或乳膏。在本发明的一个优选实施方案中，术语“外用制剂”是指在如在中国药典2015年版制剂通则(其通过引用并入本文)中所定义的软膏或眼用软膏。

更优选地，本发明的软膏可为油性软膏。本文所用术语“油性软膏”是指任何这样的软膏，即其中活性成分分散和/或溶解在含油基质中，或者活性成分的溶液分散在油性基质中，主要包含乳液基质、水溶性基质或洗剂基质的软膏除外。在更优选的实施方案中，本发明的软膏是油包油型乳液形式的软膏，其中溶解他克莫司的三丙烯酸甘油酯液滴分散在基质中。

本文所用术语“乳液”是指一种液体混合物，其中细小液滴分散或悬浮在不与该液滴混溶的另一液体中。本文所用的乳液还包含微乳，其中分散有更小的液滴。尽管所述液滴和液体通常为水或油，但它们还可为油和油，只要它们基本上不互溶即可。通常，乳液液滴的体积平均粒径范围优选为通过例如激光衍射测得的约0.01μm至500μm，更优选0.1μm至50μm。

本发明的外用制剂除作为活性成分的他克莫司和作为他克莫司之增溶剂的三丙烯酸甘油酯外，还包含基质。所述基质可为适于外用制剂的任何一种基质或基质混合物。所述基质本身通常不发挥药效。所述基质的实例包括例如油性基质或疏水性基质、乳液基质、亲水性基质或水溶性基质、凝胶基质或常规组分，例如脂肪酸或其衍生物、多元羧酸与醇的酯、高级醇、粉末状无机物质、凝胶形成剂、水、醇、多元醇、烷醇胺、抛射剂等。在一些制剂中实际采用的基质可根据制剂而不同，同时所述基质可由本领域技术人员根据公知因素容易地选择，所述因素包括所期望的制剂、活性成分的效价、所期望的活性成分的释放率等。

在更具体的实施方案中，所述基质包括但不限于例如水、动物和植物油(例如橄榄油、玉米油、花生油、芝麻油、蓖麻油等)、低级醇(例如乙醇、丙醇、丙二醇、1，3-丁二醇、酚等)、高级脂肪酸及其酯、蜡、高级醇、多元醇、亲水性凡士林、纯化的羊毛脂、吸收性软膏、含水羊毛脂、亲水性软膏、淀粉、支链淀粉、阿拉伯胶、黄蓍胶、明胶、葡聚糖、纤维素衍生物(例如甲基纤维素、羧甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素等)、合成聚合物(例如羧乙烯基聚合物、聚丙烯酸钠、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮等)、丙二醇、聚乙二醇(例如聚乙二醇200至600等)以及以上的组合。

具体而言，软膏的基质包括高级脂肪酸及其酯(例如己二酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、油酸、己二酸酯、肉豆蔻酸酯、棕榈酸酯、癸二酸二乙酯、月桂酸己酯、异辛酸鲸蜡酯、羊毛脂和羊毛脂衍生物)、蜡(例如鲸蜡、蜂蜡、地蜡)、高级醇(例如鲸蜡醇、硬脂醇、鲸蜡硬脂醇)、烃类(例如亲水性凡士林、白凡士林、纯化羊毛脂、液体石蜡)、动物和植物油及其组合。尤其优选的是蜂蜡和凡士林的组合。除以上所述基质外，本发明的软膏可以任选地包含石蜡如液体石蜡、羊毛脂、动物和植物油、天然蜡、氢化大豆磷脂(卵磷脂)、高级醇。优选地，本发明的软膏基质在三丙烯酸甘油酯中不混溶。

硬膏剂的基质包括例如聚合物，如丙烯酸酯共聚物、硅酮树脂、聚异丁烯树脂、苯乙烯-异戊二烯-苯乙烯嵌段共聚物、苯乙烯-丁二烯-苯乙烯嵌段共聚物。所述硬膏剂还包含例如胶粘剂(如松香、松香酯或石油树脂)、增塑剂(如聚丁烯、橄榄油、液体石蜡或液体异戊二烯)或填充剂(如氧化钛、氧化锌或二氧化硅)。

泥罨剂的基质包括例如甘油、水、聚丙烯酸酯、聚丙烯酸钠、甲基乙烯基醚-马来酸酐共聚物、羧乙烯聚合物、阿拉伯胶、藻酸、甲基纤维素、羟丙基纤维素、明胶。所述泥罨剂还可包含例如润湿剂(如丙二醇或山梨醇)；填充剂(如高岭土、氧化钛或滑石)；或者吸收剂(如克罗米通或己二酸二异丙酯)。乳膏的基质包括例如烃，如白凡士林、蜡、液体石蜡或角鲨烷；高级醇如鲸蜡醇、硬脂醇或山嵛醇；脂肪酸酯如中链甘油三酯、肉豆蔻酸异丙酯或己二酸二异丙酯；聚合物如羧乙烯聚合物、羟丙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮或透明质酸钠；或者多元醇如甘油、丙二醇、1，3-丁二醇。所述乳膏还可包含例如表面活性剂(如聚氧乙烯乙二醇脂肪酸酯或聚氧乙烯乙二醇脂肪酸酯乙二醇烷基醚)，pH调节剂(如二异丙醇胺或氢氧化钠)，稳定剂(如磷酸氢钠、氯化纳或亚硫酸钠)，防腐剂(如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯)，或者吸收剂(如克罗米通或薄荷醇)。

蜂蜡是天然蜡的成员，包括白蜂蜡。优选地，蜂蜡是柱纯化蜂蜡，其中诸如色素、过氧化物等杂质被去除。优选地，本发明的软膏可包含的蜂蜡按重量计为所述软膏总量的1.0％至10％，更优选按重量计2％至9％，还更优选按重量计4％至8％，最优选按重量计5％至7％。

凡士林包括通常的凡士林如白凡士林或黄凡士林，优选柱纯化凡士林，其中诸如色素、过氧化物等杂质被去除。优选地，本发明的软膏可包含的凡士林按重量计占软膏总量的60％至99％，更优选按重量计70％至95％，最优选按重量计80％至90％。

本发明的外用制剂可包含常用的添加剂，如乳化剂、润湿剂、稳定剂、助稳剂、分散剂、增塑剂、pH调节剂、吸收剂、胶凝剂、防腐剂、填充剂、保存剂、抗菌剂、色素、调味剂、清新剂、增稠剂、抗氧化剂、美白剂、紫外吸收剂。还可以加入极少量(例如按重量计少于制剂总量的1％)的表面活性剂(例如Tween(注册商标)20、80等)。本领域技术人员可容易地理解制剂中所添加的实际添加剂及其目的。还应理解，某些化合物可发挥两种或更多种特性。

优选地，所述润湿剂包括但不限于例如甘油、丙二醇、二丙二醇、透明质酸钠、胆固醇、支链淀粉等。

优选地，所述稳定剂或助稳剂包括但不限于例如依地酸(EDTA)、柠檬酸、柠檬酸

钠、L-精氨酸、生育酚、硅酮、聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯等。

优选地，所述清新剂包括但不限于例如樟脑、薄荷醇、植物提取物调味剂等。

优选地，增稠剂包括但不限于例如阿拉伯胶、瓜尔胶、角叉菜胶、羧乙烯聚合物、纤维素、聚丙烯酸酯等。

在另一个实施方案中，本发明涉及制备含有他克莫司的外用制剂的方法，所述方法包括将他克莫司溶解在三丙烯酸甘油酯中的步骤。在更具体的实施方案中，所述制备含有他克莫司的外用制剂的方法包括以下步骤：

(1)将他克莫司溶解在三丙烯酸甘油酯中；以及

(2)将他克莫司的三丙烯酸甘油酯溶液与基质混合。

在步骤(1)之前或期间或者在步骤(2)之前、期间或之后向所述基质、三丙烯酸甘油酯、他克莫司的三丙烯酸甘油酯溶液或所述溶液与所述基质的混合物中独立地添加每种添加剂或任何添加剂的混合物。

以上步骤(1)优选用任何常规搅拌器在60℃至80℃下进行，所述搅拌器例如磁力搅拌器、匀浆器、真空乳化搅拌器、真空乳化器等。在低于60℃的情况下，可能会有他克莫司不会快速溶解于三丙烯酸甘油酯的风险。在高于80℃的情况下，还可能有他克莫司分解或三丙烯酸甘油酯蒸发的风险。因此这些条件不是优选的。上述步骤(2)优选通过在60℃至80℃进行分散来实施，例如在约70℃采用任何所述常规搅拌器进行合适的时间，边搅拌边逐渐冷却，并在混合物达到20至40℃(例如30至40℃，优选约35℃)时结束搅拌。本发明的软膏可例如通过采用任何常规的制备软膏的方法进行制备，例如按照在以下实施例中所述的方法。例如，本发明的软膏可按照以下制备：加热含油基质至熔化，混合并半冷却所述基质；将他克莫司溶解在少量的三丙烯酸甘油酯中；将溶解他克莫司的三丙烯酸甘油酯分散到所述基质中；混合直至获得匀质的分散体(液化法)。

由此获得的本发明外用制剂具有低的皮肤或粘膜刺激性和高稳定性。所述皮肤或粘膜刺激性可通过例如任何已知的动物试验或者皮肤或粘膜试验模型来确定，例如通过以下实施例中所述的皮肤刺激试验来确定。所述稳定性可通过例如任何已知的稳定性试验来确定，例如通过以下实施例中所述的稳定性试验来确定。

本发明的外用制剂可用于治疗皮肤病，例如炎性或自身免疫性皮肤病，尤其是接触性皮炎、特应性皮炎、湿疹性皮炎如药物相关的湿疹性皮炎、光感湿疹发作或原发性刺激皮炎、荨麻疹、红斑、银屑病、扁平苔癣、天疱疮、类天疱疮皮炎或湿疹性皮炎，尤其是特应性皮炎。本发明外用制剂治疗的对象包括但不限于包括人在内的温血动物，例如狗、猫、牛、猪、马、绵羊、山羊、猴、兔、大鼠或小鼠。

本发明外用制剂的剂量和用量可容易地根据待治疗的病症、制剂、施用途径、对象的年龄和体重、性别或一般健康状况以及基质等来确定。优选地，他克莫司以0.1至500mg/天、优选1至100mg/天、更优选5至10mg/天施用，一天一次或多次，例如每天1至6次。

【实施例】

实施例1

配方：

制备方法：

称取处方量的蜂蜡和白凡士林加入乳化罐中，于70℃下加热熔融后于65±5℃保温备用；

称取处方量的三丙烯酸甘油酯（碳酸丙烯酯/三乙酸甘油酯）置于配液容器中，加入处方量的他克莫司搅拌至完全溶解；

将原料溶液加入到乳化罐中，并用部分轻质液状石蜡冲洗配液容器，连同剩余轻质液状石蜡一并加入乳化罐中，搅拌均匀;

开启乳匀机，以3500rpm的转速进行乳匀60～90min，并缓慢降温，持续搅拌到温度降至30±2℃；

用复合软管进行灌装封尾，灌装温度控制30±5℃。

此外，使用碳酸丙烯酯（对照例1-1）、三乙酸甘油酯（对照例1-2）作为三丙烯酸甘油酯的替代物以提供另一种软膏(参比对照)。

稳定性测试

将实施例和对照例软膏在3℃或36℃储存10天。然后，观察外观变化并确定互变异构体(他克莫司的分解产物)和其他相关物质的量。

表1 稳定性测试结果

结果显示，与含有碳酸丙烯酯及三乙酸甘油酯的对照例相比，本发明的包含三丙烯酸甘油酯的软膏对他克莫司更稳定。

皮肤刺激试验

原发兔皮肤刺激试验

在施用的前一天用电动剪毛机将兔(日本白兔，雄性，体重2.0kg或更重)的背部去毛。利用动物实验膏贴 (具有用石蜡膜封闭的衬布(2.5×2.5cm))施用0.5g的实施例1制剂或去除活性成分的0.5g相同制剂。为了避免膏贴脱落，放置套环24小时。每组包含5只动物。

在施用24小时后，去除套环和膏贴，并用脱脂棉清洁施用部位。在施用24、48和72小时后，根据Draize方法的皮肤反应评价标准对红斑和结痂或水肿形成进行评分。

表2 皮肤反应评价标准(Draize)

将施用后24小时和72小时施用部位红斑/结痂和水肿形成的分数总和除以4以确定各刺激指数。计算所述指数的平均值以确定原发刺激指数(P.I.I.)。根据Draize的刺激性分级施用P.I.I.对刺激程度分级以评价对兔皮肤的刺激性。

表3 刺激性分级( Draize)

实施例1和对照例1-2在整个观察阶段中的每种情况下均未观察到红斑/结痂和水肿形成。在两种情况下P.I.I.均为0，所以它们被分级为“无刺激”； 对照例1-1原发刺激性指数为1.6，分级为“轻度刺激”。

实施例2 无水凝胶(水溶性凝胶)

加热下将1.02g他克莫司水合物溶解在3g三丙烯酸甘油酯中，并向其中加入聚乙二醇400(85.98g)和聚乙二醇4000(10g)。将混合物进一步加热混合，随后冷却以提供无水凝胶。(在此处和下文中，％是指按重量计的百分数)

此外，使用三乙酸甘油酯（对照例2）作为三丙烯酸甘油酯的替代物以提供另一种软膏(参比对照)。

稳定性测试

将实施例和对照例软膏在3℃或36℃储存10天。然后，观察外观变化并确定互变异构体(他克莫司的分解产物)和其他相关物质的量。

表4 稳定性测试结果

结果显示，与含有碳酸丙烯酯及三乙酸甘油酯的对照例相比，本发明的包含三丙烯酸甘油酯的软膏对他克莫司更稳定。

实施例3 水凝胶

加热下将0.15g对羟基苯甲酸甲酯和0.1g对羟基苯甲酸丙酯溶解在纯化水中，在冷却到40℃或更低后将10g甘油、0.5g柠檬酸(或乙酸（实施例3-2）或磷酸（实施例3-3）)和卡波普980(0.5g)溶解。加热下将1.02g他克莫司水合物溶解在20g三丙烯酸甘油酯中，并加入所述溶液中，用搅拌器分散。在搅拌下逐滴加入氢氧化钠水溶液，将pH调节至pH4至7以形成凝胶。加入纯化水以将总量调整至100g，以提供水凝胶。并且，可通过采用0.1g至0.2g的卡波普980制备洗剂。

此外，使用三乙酸甘油酯（对照例3）作为三丙烯酸甘油酯的替代物以提供另一种软膏(参比对照)。

稳定性测试

将实施例和对照例软膏在3℃或36℃储存10天。然后，观察外观变化并确定互变异构体(他克莫司的分解产物)和其他相关物质的量。

表5 稳定性测试结果

结果显示，与含有碳酸丙烯酯及三乙酸甘油酯的对照例相比，本发明的包含三丙烯酸甘油酯的软膏对他克莫司更稳定。

实施例4 软膏乳剂：乳膏(o/w)

在70℃下混合10g三丙烯酸甘油酯、3g鲸蜡醇、3g硬脂醇和Tween80(0.5g)，并向其中加入1.02g他克莫司水合物并加热溶解。向溶液中加入溶解在适量（加入纯化水以将总量调整至100g ，62.23g）纯化水中的0.15g对羟基苯甲酸甲酯和0.1g对羟基苯甲酸丙酯，并用搅拌器混合。将溶液在搅拌下冷却以提供乳膏。

此外，使用三乙酸甘油酯（对照例4）作为三丙烯酸甘油酯的替代物以提供另一种软膏(参比对照)。

稳定性测试

将实施例和对照例软膏在3℃或36℃储存10天。然后，观察外观变化并确定互变异构体(他克莫司的分解产物)和其他相关物质的量。

表6稳定性测试结果

结果显示，与含有碳酸丙烯酯及三乙酸甘油酯的对照例相比，本发明的包含三丙烯酸甘油酯的软膏对他克莫司更稳定。

Claims (7)

1.一种具有极低皮肤刺激性和极佳稳定性的含有他克莫司、三丙烯酸甘油酯和基质的外用制剂，其中他克莫司相对于三丙烯酸甘油酯的量的百分比为按重量计的 2％至 30％。

2.权利要求 1的外用制剂，其为软膏形式。

3.权利要求 2 的外用制剂，其包含蜂蜡和凡士林的混合物作为软膏基质。

4.权利要求 3 的外用制剂，其中所述蜂蜡是柱纯化蜂蜡。

5.权利要求3的外用制剂，其中所述凡士林是柱纯化凡士林。

6.权利要求 2 至 5 中任一项的外用制剂，其中溶解他克莫司的三丙烯酸甘油酯液滴分散在所述基质中。

7.一种制备如权利要求1所述的外用制剂的方法，包括以下步骤：(1)将他克莫司溶解在三丙烯酸甘油酯中；以及(2)将他克莫司的三丙烯酸甘油酯溶液与基质混合。