CN107712463A - 一种维生素预混合饲料及其制备和使用方法 - Google Patents

一种维生素预混合饲料及其制备和使用方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种维生素预混合饲料及其制备和使用方法。每千克所述维生素预混合饲料包括：维生素A 20～50万IU、维生素D3 10～30万IU、维生素E 10～50g、维生素K3 2～15g、维生素B1 3～15g、维生素B2 5～15g、维生素B6 5～15g、维生素B12 10～20g、烟酸10～20g、泛酸钙5～15g、叶酸0.2～3g、生物素50～100mg、肌醇20～30g、黄芪多糖1～5g、维生素C磷酸酯1～5g，其余为枯草芽孢杆菌粉，其中，枯草芽孢杆菌粉中活菌菌数不低于0.5亿个/g。本发明将枯草芽孢杆菌与多种维生素成分进行有机组合，充分发挥枯草芽孢杆菌的菌群优势，不仅能够预防消化道疾病，而且可以促进鱼、虾吸收维生素，具有复配增效的效果；有助于提高鱼、虾的存活率，降低了鱼、虾的养殖成本，经济效益好；本发明方法简单，工艺成熟，易于掌握控制，便于推广。

Description

一种维生素预混合饲料及其制备和使用方法
技术领域
本发明涉及水产养殖饲料技术领域，特别涉及一种维生素预混合饲料及其制备和使用方法。
背景技术
维生素是鱼、虾类生长、生存和对抗应激反应的最为关键的营养物质。同时因为维生素添加量小，价格昂贵，也是水产饲料配方的主要技术水平体现。维生素在动物体内以辅酶辅基的形式维持生命体正常生命活动。当某种维生素添加剂量不足或者各种维生素之间不平衡时，轻则鱼、虾类生长受阻，饵料系数增加，鱼、虾类对抗应激能力下降，重则影响生存，导致畸形或者直接死亡。而当某种维生素添加量高时，必然导致各维生素之间，或者维生素与其他营养物质之间拮抗作用发生，同样影响生长和生存。即使没有对生长产生明显的影响，也会使饲料成本增加，造成浪费。因此，无论从经济、健康、环保，还是从生存、生长的角度来看，平衡的维生素水平对鱼、虾类饲料的配制具有重大意义。
但是，目前，对维生素预混料的研究多集中在维生素的配方上，而这些维生素投入使用时，存在稳定性差，不易被鱼、虾吸收，起效慢等问题，而且微生物制剂应用于维生素预混料的研究较少。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种维生素预混合饲料及其制备和使用方法，该维生素预混合饲料稳定性好，能够满足鱼、虾生长发育所需的全部维生素需求，微生物可促进维生素等有效成分易被鱼、虾吸收，起效快。
为了解决上述技术问题，本发明的技术方案为：
第一方面，本发明提供了一种维生素预混合饲料，维生素预混合饲料包括：维生素A 20～50万IU、维生素D3 10～30万IU、维生素E 10～50g、维生素K3 2～15g、维生素B1 3～15g、维生素B2 5～15g、维生素B6 5～15g、维生素B12 10～20g、烟酸10～20g、泛酸钙5～15g、叶酸0.2～3g、生物素50～100mg、肌醇20～30g、黄芪多糖1～5g、维生素C磷酸酯1～5g，其余为枯草芽孢杆菌粉，其中，枯草芽孢杆菌粉中活菌菌数不低于0.5亿个/g。
优选的，所述枯草芽孢杆菌粉中活菌菌数不低于1亿个/克。
优选的，所述枯草芽孢杆菌粉为采用下述方法制得：
(1)斜面培养：按下述比例配制的斜面培养基：葡萄糖15～30g/L、蛋白胨10～20g/L、氯化钠0.5～2g/L、酵母膏3～10g/L、琼脂15～30g/L，pH 6.5～7.0；将枯草芽孢杆菌种接种至斜面培养基上，于温度25～37℃条件下，培养24～48h，得到枯草芽孢杆菌种；
(2)一级种子培养：按下述比例配制的一级种子培养基：葡萄糖10～30g/L、蛋白胨10～20g/L、氯化钠0.5～2g/L、酵母膏3～10g/L，pH 6.5～7.0；将步骤(1)所得的枯草芽孢杆菌种接种至所述一级种子培养基中，在温度25～37℃、转速150～300r/min条件下，培养24～36h，得到一级液体种子培养液；
(3)二级种子培养：按下述比例配制的二级种子培养基：蛋白胨10～30g/L、牛肉膏3～10g/L、氯化钠3～7g/L、磷酸氢二钾0.5～2g/L，pH 6.5～7.0；将步骤(2)所得的一级液体种子培养液接种至所述二级种子培养基中，在转速180～250r/min、通气量0.5～1.0vvm、温度25～37℃条件下，培养24～36h，得到二级液体种子培养液；
(4)发酵培养：按下述比例配制液体发酵培养基：蛋白胨10～30g/L、牛肉膏3～10g/L、酵母膏3～10g/L、磷酸二氢钾0.5～2g/L、硫酸镁0.1～1g/L，pH7.0～7.5；以液体发酵培养基重量计6～10％的接种量，将步骤(3)所得的二级液体种子培养液接种于所述液体发酵培养基中，在搅拌转速100～200r/min、通气量0.5～0.8vvm、发酵温度35～40℃条件下，发酵培养24～48h，得到枯草芽孢杆菌发酵培养液；
(5)菌粉制备：将步骤(4)所得的枯草芽孢杆菌发酵培养液离心分离并收集湿枯草芽孢杆菌体，将保护剂、稳定剂与湿枯草芽孢杆菌体混合后，加入载体进行吸附，再低温干燥后粉碎制得枯草芽孢杆菌粉；其中，所述保护剂与湿枯草芽孢杆菌体的重量比为0.15～0.5:1(g/Kg)；所述稳定剂与湿枯草芽孢杆菌体的重量比为5～20:1(g/Kg)；所述载体与湿枯草芽孢杆菌体的重量比为0.2～1:1(Kg/Kg)。
进一步优选的，所述保护剂选自甘露醇、葡萄糖中的一种或几种。
进一步优选的，所述稳定剂选自海藻糖、吐温80中的一种或几种。
进一步优选的，所述载体选自大孔淀粉、秸秆粉、玉米粉、米糠、沸石粉、麸皮、麦粉中的一种或几种。
第二方面，本发明还提供了一种制备如第一方面所述的维生素预混合饲料的方法，包括如下步骤：
在环境温度22～30℃、相对湿度≤65％时，将维生素A、维生素D3、维生素B12、叶酸、生物素和10％的枯草芽孢杆菌粉混合搅拌5～10分钟；再将维生素E、维生素D3、维生素B1、维生素B2、烟酸、泛酸钙、维生素B6、肌醇、黄芪多糖、维生素C磷酸酯和90％的枯草芽孢杆菌粉混合搅拌5～10分钟，制得维生素预混合饲料。
第三方面，本发明还提供了一种如第一方面所述的维生素预混合饲料的使用方法，包括如下步骤：
按照0.01～0.05Kg/亩的量，取如第一方面所述的维生素预混合饲料，将如第一方面所述的维生素预混合饲料与水、基础饲料混合，静置15～60分钟后，投喂至养殖水体中。
优选的，如第一方面所述的维生素预混合饲料与水、基础饲料的重量比为0.05～0.2:1～2:10～20。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
(1)本发明将枯草芽孢杆菌与多种维生素成分进行有机组合，使其形成最佳的复合比例，充分发挥枯草芽孢杆菌的菌群优势，为鱼、虾肠道内环境的形成创造了良好的条件，不仅能够预防消化道疾病，而且可以促进鱼、虾吸收维生素，达到复配增效的目的。
(2)本发明维生素预混合饲料配比精确，选料合理，制造成本低廉，满足了鱼、虾对维生素的需求，有助于提高鱼、虾的存活率，降低饲料系数，降低了鱼、虾的养殖成本，经济效益好。
(3)本发明方法简单，工艺成熟，易于掌握控制，便于推广。
附图说明
图1为本发明效果实施例1所养殖的南美白对虾的成活率的统计结果图；
图2为本发明效果实施例1所养殖的南美白对虾的饲料系数的统计结果图；
图3为本发明效果实施例2所养殖的罗非鱼成活率的统计结果图；
图4为本发明效果实施例2所养殖的罗非鱼的饲料系数的统计结果图。
具体实施方式
下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明，但并不构成对本发明的限定。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
实施例1枯草芽孢杆菌的制备
本发明实施例的枯草芽孢杆菌为采用下述方法制得：
(1)斜面培养：按下述比例配制的斜面培养基：葡萄糖20g/L、蛋白胨15g/L、氯化钠1g/L、酵母膏5g/L、琼脂20g/L，pH 6.5；将枯草芽孢杆菌种接种至斜面培养基上，于温度28℃条件下，培养30h，得到枯草芽孢杆菌种；
(2)一级种子培养：按下述比例配制的一级种子培养基：葡萄糖20g/L、蛋白胨15g/L、氯化钠1g/L、酵母膏5g/L，pH 6.5；将所得的枯草芽孢杆菌种接种至所述一级种子培养基中，在温度30℃、转速200r/min条件下，培养30h，得到一级液体种子培养液；
(3)二级种子培养：按下述比例配制的二级种子培养基：蛋白胨20g/L、牛肉膏5g/L、氯化钠5g/L、磷酸氢二钾1g/L，pH 7.0；将所得的一级液体种子培养液接种至所述二级种子培养基中，在转速200r/min、通气量0.8vvm、温度28℃条件下，培养32h，得到二级液体种子培养液；
(4)发酵培养：按下述比例配制液体发酵培养基：蛋白胨20g/L、牛肉膏5g/L、酵母膏5g/L、磷酸二氢钾1g/L、硫酸镁0.5g/L，pH 7.4；以液体发酵培养基重量8％的接种量，将所得的二级液体种子培养液接种于所述液体发酵培养基中，在搅拌转速150r/min、通气量0.7vvm、发酵温度38℃条件下，发酵培养36h，得到枯草芽孢杆菌发酵培养液；
(5)菌粉制备：将所得的枯草芽孢杆菌发酵培养液离心分离并收集湿枯草芽孢杆菌体，将甘露醇保护剂、吐温80与湿枯草芽孢杆菌体混合后，加入大孔淀粉载体进行吸附，再低温干燥后粉碎制得枯草芽孢杆菌粉(活菌菌数为1亿个/克)；其中，所述甘露醇保护剂与湿枯草芽孢杆菌体的重量比为0.2:1(g/Kg)；所述吐温80与湿枯草芽孢杆菌体的重量比为10:1(g/Kg)；所述大孔淀粉载体与湿枯草芽孢杆菌体的重量比为0.5:1(Kg/Kg)。
实施例2
本发明实施例提供了一种维生素预混合饲料的制备方法，包括如下步骤：
(1)每千克维生素预混合饲料由以下重量的原料组成：维生素A 20万IU、维生素D310万IU、维生素E 10g、维生素K3 2g、维生素B1 3g、维生素B2 5g、维生素B6 5g、维生素B1210g、烟酸10g、泛酸钙5g、叶酸0.2g、生物素50mg、肌醇20g、黄芪多糖1g、维生素C磷酸酯1g，其余为本发明实施例1所得的枯草芽孢杆菌粉。
(2)在环境温度35℃、相对湿度≤65％时，在不锈钢搅拌桶中加入维生素A、维生素D3、维生素B12、叶酸、生物素和10％的本发明实施例1所得的枯草芽孢菌粉搅拌5分钟使其混合均匀；将其它剩余维生素E、维生素D3、维生素B1、维生素B2、烟酸、泛酸钙、维生素B6、肌醇、维生素C和剩余的90％枯草芽孢菌粉加入不锈钢搅拌桶中，再次搅拌8分钟使其混合均匀，按1千克每袋定量包装即得维生素预混合饲料，其中，枯草芽孢杆菌粉中活菌菌数1.5亿个/克。
实施例3
(1)每千克维生素预混合饲料由以下重量的原料组成：维生素A 30万IU、维生素D310万IU、维生素E 20g、维生素K3 5g、维生素B1 5g、维生素B2 8g、维生素B6 10g、维生素B1215g、烟酸15g、泛酸钙10g、叶酸0.5g、生物素60mg、肌醇25g、黄芪多糖2g、维生素C磷酸酯2g，其余为本发明实施例1所得的枯草芽孢杆菌粉。
(2)在环境温度32℃、相对湿度≤65％时，在不锈钢搅拌桶中加入维生素A、维生素D3、维生素B12、叶酸、生物素和10％的本发明实施例1所得的枯草芽孢菌粉搅拌8分钟使其混合均匀；将其它剩余维生素E、维生素D3、维生素B1、维生素B2、烟酸、泛酸钙、维生素B6、肌醇、维生素C和剩余的90％枯草芽孢菌粉加入不锈钢搅拌桶中，再次搅拌10分钟使其混合均匀，按1千克每袋定量包装即得维生素预混合饲料，其中，枯草芽孢杆菌粉中活菌菌数1.6亿个/克。
实施例4
(1)每千克维生素预混合饲料由以下重量的原料组成：维生素A 40万IU、维生素D320万IU、维生素E 40g、维生素K3 10g、维生素B1 10g、维生素B2 10g、维生素B6 10g、维生素B12 15g、烟酸15g、泛酸钙10g、叶酸1g、生物素70mg、肌醇22g、黄芪多糖3g、维生素C磷酸酯3g，其余为本发明实施例1所得的枯草芽孢杆菌粉。
(2)在环境温度37℃、相对湿度≤65％时，在不锈钢搅拌桶中加入维生素A、维生素D3、维生素B12、叶酸、生物素和10％的本发明实施例1所得的枯草芽孢菌粉搅拌10分钟使其混合均匀；将其它剩余维生素E、维生素D3、维生素B1、维生素B2、烟酸、泛酸钙、维生素B6、肌醇、维生素C和剩余的90％枯草芽孢菌粉加入不锈钢搅拌桶中，再次搅拌10分钟使其混合均匀，按1千克每袋定量包装即得维生素预混合饲料，其中，枯草芽孢杆菌粉中活菌菌数1.6亿个/克。
实施例5
(1)每千克维生素预混合饲料由以下重量的原料组成：维生素A 50万IU、维生素D330万IU、维生素E 30g、维生素K3 12g、维生素B1 6g、维生素B2 6g、维生素B6 12g、维生素B1215g、烟酸15g、泛酸钙12g、叶酸0.5g、生物素80mg、肌醇24g、黄芪多糖3g、维生素C磷酸酯4g，其余为本发明实施例1所得的枯草芽孢杆菌粉。
(2)在环境温度38℃、相对湿度≤75％时，在不锈钢搅拌桶中加入维生素A、维生素D3、维生素B12、叶酸、生物素和10％的本发明实施例1所得的枯草芽孢菌粉搅拌8分钟使其混合均匀；将其它剩余维生素E、维生素D3、维生素B1、维生素B2、烟酸、泛酸钙、维生素B6、肌醇、维生素C和剩余的90％枯草芽孢菌粉加入不锈钢搅拌桶中，再次搅拌10分钟使其混合均匀，按1千克每袋定量包装即得维生素预混合饲料，其中，枯草芽孢杆菌粉中活菌菌数1.9亿个/克。
实施例6
(1)每千克维生素预混合饲料由以下重量的原料组成：维生素A 30万IU、维生素D315万IU、维生素E 50g、维生素K3 15g、维生素B1 15g、维生素B2 15g、维生素B6 15g、维生素B12 20g、烟酸10～20g、泛酸钙15g、叶酸3g、生物素100mg、肌醇30g、黄芪多糖5g、维生素C磷酸酯5g，其余为本发明实施例1所得的枯草芽孢杆菌粉。
(2)在环境温度35℃、相对湿度≤65％时，在不锈钢搅拌桶中加入维生素A、维生素D3、维生素B12、叶酸、生物素和10％的本发明实施例1所得的枯草芽孢菌粉搅拌5分钟使其混合均匀；将其它剩余维生素E、维生素D3、维生素B1、维生素B2、烟酸、泛酸钙、维生素B6、肌醇、维生素C和剩余的90％枯草芽孢菌粉加入不锈钢搅拌桶中，再次搅拌5分钟使其混合均匀，按1千克每袋定量包装即得维生素预混合饲料，其中，枯草芽孢杆菌粉中活菌菌数1.8亿个/克。
对比例1
(1)每千克维生素预混合饲料由以下重量的原料组成：维生素A 50万IU、维生素D330万IU、维生素E 30g、维生素K3 12g、维生素B1 6g、维生素B2 6g、维生素B6 12g、维生素B1215g、烟酸15g、泛酸钙12g、叶酸0.5g、生物素80mg、肌醇24g、黄芪多糖3g、维生素C磷酸酯4g，其余为本发明豆粕粉(50目大小)。
(2)在环境温度35℃、相对湿度≤65％时，在不锈钢搅拌桶中加入维生素A、维生素D3、维生素B12、叶酸、生物素和10％的豆粕粉搅拌5分钟使其混合均匀；将其它剩余维生素E、维生素D3、维生素B1、维生素B2、烟酸、泛酸钙、维生素B6、肌醇、维生素C和剩余的90％豆粕粉加入不锈钢搅拌桶中，再次搅拌8分钟使其混合均匀，按1千克每袋定量包装即得维生素预混合饲料。
下面结合具体数据说明本发明的维生素预混合饲料在养殖鱼、虾中的作用：
效果实施例1投喂南美白对虾试验
2016年4月份，在广州智龙生物水产养殖场，选用7口池塘，每口池塘面积约为2亩，分为7组，其中，五组为试验组，二组为对照组；按照5万尾/亩的投放密度，将约为3.0厘米体长规格的南美白对虾苗投放入7口池塘水体中，试验组和对照组均按照常规方法养殖南美白对虾，不同的是：试验组中，分别将本发明实施例1～5所提供的维生素预混合料分别与水、市售的正大虾饲料按照0.1:1:10的重量比混合搅拌均匀后，静置30分钟制得混合饲料，再投喂至试验组池塘水体中；对照组：将本发明对比例1所提供的维生素预混合料、市售虾用维生素预混合料分别与水、市售的正大虾饲料按照0.1:1:10的重量比混合搅拌均匀后，静置30分钟制得混合饲料后再投喂至试验组池塘水体中，具体分组如表1所示；试验期间(90天)观察南美白对虾的健康情况，每天从排污管套网中收集死虾，并统计南美白对虾的成活率、饲料系数，统计结果如图1～2所示。
表1南美白对虾养殖试验分组
分组 饲料
试验组1 市售的正大虾饲料+水+本发明实施例2所得的产品
试验组2 市售的正大虾饲料+水+本发明实施例3所得的产品
试验组3 市售的正大虾饲料+水+本发明实施例4所得的产品
试验组4 市售的正大虾饲料+水+本发明实施例5所得的产品
试验组5 市售的正大虾饲料+水+本发明实施例6所得的产品
对照组1 市售的正大虾饲料+水+本发明对比例1所得的产品
对照组2 市售的正大虾饲料+水+市售的维生素预混合饲料
从图1可以看出，本发明试验组1～5中南美白对虾的成活率均在81％以上，其中，试验组4的南美白对虾的成活率最高，达到85％以上，而对照组1～2中南美白对虾的成活率均低于72％，对照组2中南美白对虾的成活率仅为52.3％，这说明本发明实施例2～6所提供的维生素预混合饲料有利于提高南美白对虾的免疫力。
从图2可以看出，本发明试验组1～5中南美白对虾的饲料系数均低于1.2，其中，试验组4的南美白对虾饲料系数最低，仅为1.08，而对照组1～2中南美白对虾的饲料系数均高于1.25，这说明本发明实施例2～6所提供的维生素预混合饲料有利于改善南美白对虾的肠道功能，提高饲料转化率，改善南美白对虾的肠道微生态平衡。
效果实施例2投喂罗非鱼试验
2016年4月份，在广州智龙生物水产养殖场，选用12口池塘，每口池塘面积约为2亩，分为12组，其中，十一组为试验组，一组为对照组；按照1万尾/亩的投放密度，将100尾/Kg规格的罗非鱼苗投放入12口池塘水体中，试验组和对照组均按照常规方法养殖罗非鱼，试验组：分别将本发明实施例1～5所提供的维生素预混合料分别与水、市售的正大鱼饲料按照0.1:2:20的重量比混合搅拌均匀后，静置30分钟制得混合饲料后再投喂至试验组池塘水体中；对照组：将本发明对比例1所提供的维生素预混合料、市售鱼用维生素预混合料分别与水、市售的正大鱼饲料按照0.1:2:20的重量比混合搅拌均匀后，静置30分钟制得混合饲料后再投喂至试验组池塘水体中，具体分组如表2所示；试验期间(90天)观察罗非鱼的健康情况，每天从排污管套网中收集死鱼，并统计罗非鱼的成活率、饲料系数，统计结果如图3～4所示。
表2罗非鱼养殖试验分组
从图3可以看出，本发明试验组1～5中罗非鱼的成活率均在83％以上，其中，试验组4的罗非鱼的成活率最高，达到89％以上，而对照组1～2中罗非鱼均低于74％，对照组2中罗非鱼仅为62.5％，这说明本发明实施例2～6所提供的维生素预混合饲料有利于提高罗非鱼的免疫力。
从图4可以看出，本发明试验组1～5中罗非鱼的饲料系数均低于1.35，其中，试验组4的罗非鱼饲料系数最低，仅为1.22，而对照组1～2中罗非鱼的饲料系数均高于1.45，这说明本发明实施例2～6所提供的维生素预混合饲料有利于改善罗非鱼的肠道功能，提高饲料转化率，改善罗非鱼的肠道微生态平衡。
以上结合附图对本发明的实施方式作了详细说明，但本发明不限于所描述的实施方式。对于本领域的技术人员而言，在不脱离本发明原理和精神的情况下，对这些实施方式进行多种变化、修改、替换和变型，仍落入本发明的保护范围内。

Claims (9)

1.一种维生素预混合饲料，其特征在于：每千克所述维生素预混合饲料包括：维生素A20～50万IU、维生素D3 10～30万IU、维生素E 10～50g、维生素K3 2～15g、维生素B1 3～15g、维生素B2 5～15g、维生素B6 5～15g、维生素B12 10～20g、烟酸10～20g、泛酸钙5～15g、叶酸0.2～3g、生物素50～100mg、肌醇20～30g、黄芪多糖1～5g、维生素C磷酸酯1～5g，其余为枯草芽孢杆菌粉，其中，枯草芽孢杆菌粉中活菌菌数不低于0.5亿个/g。
2.根据权利要求1所述的维生素预混合饲料，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌粉中活菌菌数不低于1亿个/克。
3.根据权利要求1所述的维生素预混合饲料，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌粉为采用下述方法制得：
(1)斜面培养：按下述比例配制的斜面培养基：葡萄糖15～30g/L、蛋白胨10～20g/L、氯化钠0.5～2g/L、酵母膏3～10g/L、琼脂15～30g/L，pH 6.5～7.0；将枯草芽孢杆菌种接种至斜面培养基上，于温度25～37℃条件下，培养24～48h，得到枯草芽孢杆菌种；
(2)一级种子培养：按下述比例配制的一级种子培养基：葡萄糖10～30g/L、蛋白胨10～20g/L、氯化钠0.5～2g/L、酵母膏3～10g/L，pH 6.5～7.0；将步骤(1)所得的枯草芽孢杆菌种接种至所述一级种子培养基中，在温度25～37℃、转速150～300r/min条件下，培养24～36h，得到一级液体种子培养液；
(3)二级种子培养：按下述比例配制的二级种子培养基：蛋白胨10～30g/L、牛肉膏3～10g/L、氯化钠3～7g/L、磷酸氢二钾0.5～2g/L，pH 6.5～7.0；将步骤(2)所得的一级液体种子培养液接种至所述二级种子培养基中，在转速180～250r/min、通气量0.5～1.0vvm、温度25～37℃条件下，培养24～36h，得到二级液体种子培养液；
(4)发酵培养：按下述比例配制液体发酵培养基：蛋白胨10～30g/L、牛肉膏3～10g/L、酵母膏3～10g/L、磷酸二氢钾0.5～2g/L、硫酸镁0.1～1g/L，pH7.0～7.5；以液体发酵培养基重量计6～10％的接种量，将步骤(3)所得的二级液体种子培养液接种于所述液体发酵培养基中，在搅拌转速100～200r/min、通气量0.5～0.8vvm、发酵温度35～40℃条件下，发酵培养24～48h，得到枯草芽孢杆菌发酵培养液；
(5)菌粉制备：将步骤(4)所得的枯草芽孢杆菌发酵培养液离心分离并收集湿枯草芽孢杆菌体，将保护剂、稳定剂与湿枯草芽孢杆菌体混合后，加入载体进行吸附，再低温干燥后粉碎制得枯草芽孢杆菌粉；其中，所述保护剂与湿枯草芽孢杆菌体的重量比为0.15～0.5:1(g/Kg)；所述稳定剂与湿枯草芽孢杆菌体的重量比为5～20:1(g/Kg)；所述载体与湿枯草芽孢杆菌体的重量比为0.2～1:1(Kg/Kg)。
4.根据权利要求3所述的维生素预混合饲料，其特征在于：所述保护剂选自甘露醇、葡萄糖中的一种或几种。
5.根据权利要求3所述的维生素预混合饲料，其特征在于：所述稳定剂选自海藻糖、吐温80中的一种或几种。
6.根据权利要求3所述的维生素预混合饲料，其特征在于：所述载体选自大孔淀粉、秸秆粉、玉米粉、米糠、沸石粉、麸皮、麦粉中的一种或几种。
7.一种制备权利要求1～6任一项所述的维生素预混合饲料的方法，其特征在于：包括如下步骤：
在环境温度22～30℃、相对湿度≤65％时，首先将维生素A、维生素D3、维生素B12、叶酸、生物素和10％的枯草芽孢杆菌粉混合搅拌5～10分钟；再将维生素E、维生素D3、维生素B1、维生素B2、烟酸、泛酸钙、维生素B6、肌醇、黄芪多糖、维生素C磷酸酯和90％的枯草芽孢杆菌粉混合搅拌5～10分钟，制得维生素预混合饲料。
8.一种权利要求1～6任一项所述的维生素预混合饲料的使用方法，包括如下步骤：
按照0.01～0.05Kg/亩的量，取权利要求1～6任一项所述的维生素预混合饲料，将权利要求1～6任一项所述的维生素预混合饲料与水、基础饲料混合后，静置15～60分钟后，投喂至养殖水体中。
9.根据权利要求8所述的维生素预混合饲料的使用方法，其特征在于：所述维生素预混合饲料与水、基础饲料的重量比为0.05～0.2:1～2:10～20。
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