CN107693488B

CN107693488B - 一种脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液及其制备方法

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Publication number: CN107693488B
Application number: CN201711064649.XA
Authority: CN
Inventors: 王富平; 杨金兰; 陈忠敏; 庞亚妮; 龙海霞
Original assignee: Chongqing University of Technology
Current assignee: Chongqing University of Technology
Priority date: 2017-11-02
Filing date: 2017-11-02
Publication date: 2020-01-03
Anticipated expiration: 2037-11-02
Also published as: CN107693488A

Abstract

本发明公开一种脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液及其制备方法，其创新在于囊材包括如下重量份的组份：海藻酸钠15～45份、泊洛沙姆1882.5～9份、丝素蛋白1.5～5份、聚乙烯醇0.5～3份、聚乙二醇0.2～3份。其制备方法包括：在搅拌条件下向海藻酸钠水溶液中依次间隔加入泊洛沙姆、丝素蛋白水溶液、聚乙烯醇水溶液、聚乙二醇和葡萄糖，最后滴加相应的脂溶性药物；采用超声、剪切进行处理方式；最后450nm膜过滤、湿热灭菌即得亚微囊葡萄糖注射液。本发明制备过程简便经济，亚微囊粒径大小可控、均一，生物安全性高。

Description

一种脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液及其制备方法

技术领域

本发明属于脂溶性药物制剂的医药技术领域，具体涉及一种脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液及其制备方法。

背景技术

脂溶性药物药理活性显著，有效成分容易发生氧化变质影响药性，而且在人体内环境中溶解度低，难以达到药物的有效浓度。因此，临床常用增溶剂提高脂溶性药物的稳定性和溶解度，同时实现靶向，提高药物的生物利用度，降低毒副作用。

当双层膜的脂质体作为水溶性药物传递系统时,尚存在热力学不稳定问题，但其应用到脂溶性药物包括时，呈单层膜，稳定性变得极差。泊洛沙姆生物相容性好，但稳定性差，而在临床脂溶性药物注射液应用中以吐温-80为主，但其存在较高的溶血风险，限制了药物的使用范围及药物浓度。目前市场缺少高安全、高稳定性、高载药量的注射液制剂，因此寻找一种更安全、稳定、高载药量的脂溶性药物注射液制剂制备方法显得尤为重要。

发明内容

针对现有技术存在的上述不足，本发明的目的是提供一种脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液及其制备方法，解决了现有脂溶性药物亚微囊安全低、稳定性差、载药量低的技术问题。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液，包括脂溶性药物和囊材；其特征在于，囊材组份由如下重量份的材料组成：海藻酸钠15～45份、泊洛沙姆1882.5～9份、丝素蛋白1.5～5份、聚乙烯醇0.5～3份、聚乙二醇0.2～3份；

所述脂溶性药物和囊材质量比1:1.5～1:5；

还包括占总体积5％的质量的葡萄糖。

进一步，本发明还提供一种脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液的制备方法，包括如下步骤：

1)配制海藻酸钠水溶液、丝素蛋白水溶液和聚乙烯醇水溶液；

海藻酸钠水溶液质量分数为0.5％～2.0％、丝素蛋白水溶液质量分数为0.5％～2％、聚乙烯醇水溶液质量分数为0.5％～2％；

2)根据权利要求1所述配比，在搅拌条件下向海藻酸钠水溶液中依次加入涉及1)所述泊洛沙姆、丝素蛋白水溶液、聚乙烯醇水溶液、聚乙二醇，均匀混合后，再添加适量葡萄糖，最后滴加脂溶性药物；

3)采用超声、剪切进行处理，450nm膜过滤、湿热灭菌即得脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液。

所述海藻酸钠水溶液、泊洛沙姆、丝素蛋白水溶液、聚乙烯醇水溶液、聚乙二醇用量体积比为30:6:4:1:1～50:10:10:3:1。

其中，在机械搅拌过程中逐步添加各组分，搅拌速度为100～500转/分，间隔时间为5～20分钟。所述脂溶性药物的加入采用逐滴滴加的方式。超声处理时，采用90～1000W，保持10～30分钟；剪切处理时，采用5000～10000转/分，保持10～30分钟。

相比现有技术，本发明具有如下有益效果：

1、本发明脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液为稳定体系，离心后溶液澄清透明，无分层无悬浮液，亚微囊体系包裹均匀，亚微囊粒径大小均一。

2、本发明添加了亚微囊材泊洛沙姆，安全无毒，可有效改善微囊的均一度、稳定性。

3、本发明制备的脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液从溶血实验结果显示4h内未发生溶血现象，且制备的脂溶性药物亚微囊溶血率远低于5％，血液相容性良好。

4、本发明脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液制备方法简单、易于控制，并且原材料来源广泛成本低廉，易于实现放大化生产。

5、本制备方法载药量较高，可应用于莪术油、维生素E、辅酶Q10、挥发油等多种脂溶性药物。

本发明充分研究药用生物材料领域的主要材料的性质，并经过创造性的配伍解决了现有脂溶性药物亚微囊安全低、稳定性差、载药量低的技术问题。其中，泊洛沙姆(Poloxamer)为聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物，是一类新型的高分子非离子表面活性剂。其中，Poloxamer188(Pluronic F68)作为一种水包油乳化剂是目前用于静脉乳剂极少数合成乳化剂之一，同时也是一种重要的药用生物材料。F68无生理活性，无溶血性，物理性质稳定，能够耐受热压灭菌和低温冰冻。

丝素蛋白(Silk Fibroin,SF)作为一种生物相容性良好，生物降解性可控且降解产物无毒的天然高分子材料，已作为药物载体被研究和应用，如粒径约150～170nm纳米微粒，超过三周时，仍具有显著的稳定缓释行为，并具有较好的热稳定性。

海藻酸钠主要由海藻酸的钠盐组成，由β-D-甘露糖醛酸(M单元)与α-L-古洛糖醛酸(G单元)依靠β-1,4-糖苷键连接并由不同比例的GM、MM和GG片段组成的共聚物，是一种天然多糖，具有药物制剂辅料所需的稳定性、溶解性、粘性和安全性。与其他天然高分子相比，两种二价阳离子钙两价离子的结合会影响离子键的形成和微胶囊化，是一种很好的微囊膜材料。

聚乙二醇(PEG)为环氧乙烷水解产物的聚合物，无毒、无刺激性，广泛应用于各种药物制剂中，如注射剂、局部用制剂、眼用制剂、口服和直肠用制剂。PEG有增强药物缓释作用，表面进行一定的结构修饰，有研究用聚乙二醇链修饰，可增强亚微囊表面亲水性，降低被MPS吞噬的可能性，降低静注后的消除率，延长体循环的时间。

医用聚乙烯醇(PVA)具有良好的生物相容性和抗凝血性。聚乙烯醇具有良好的水溶性、成膜性、粘结力、乳化性，以及卓越的耐油脂和耐溶剂等性能，且无毒无味，对皮肤无刺激性，不会引起皮肤过敏。PVA可以用来做优良药用囊壳材料，在微囊制剂上，可用来修饰微囊的膜的稳定性。

附图说明

图1为本发明脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液的制备流程图。

图2为本发明实施例3得到的脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液经离心后的稳定性观察示意图。

图3为实施例1～5制备得到的脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液4h的溶血结果照片图。

图4为实施例2制备得到的脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液4小时后不同浓度下的溶血率结果。

具体实施方式

下面结合具体的实施例(仅以莪术油脂溶性药物)和附图对本发明的实施方案作进一步的详细阐述，实施案例在以本发明技术为前提下进行实施，现给出详细的实施方式和具体的操作过程，来说明本发明具有创造性，但本发明的保护范围不限于以下的实施例。

本发明实施例中所用的仪器：剪切乳化机(JRJ300-S，上海索映仪器设备有限公司)；机械电动搅拌器(OS20-PRO，北京科博赛尔科技有限公司)；电子分析天平(METTLERAE240，梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司)；台式高速微量离心机(D3024R，北京科博赛尔科技有限公司)；正置生物显微镜(SWG-W2705，深圳市威冠光学仪器)；本发明实施例中所用的原料：泊洛沙姆188为医用级；海藻酸钠为医药级；丝素蛋白，纯度高于99％；聚乙烯醇为医用级，包括PVA05-88，PVA17-88，PVA-124中至少一种；聚乙二醇为药用级，包括400，600中至少一种。其他如无特殊说明，即为普通市售产品。

一、一种脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液

一种脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液，包括脂溶性药物和囊材；其创新在于囊材组份由如下重量份的材料组成：海藻酸钠15～45份、泊洛沙姆1882.5～9份、丝素蛋白1.5～5份、聚乙烯醇0.5～3份、聚乙二醇0.2～3份；

所述脂溶性药物和囊材质量比1:1.5～1:5；还包括占总体积5％的质量的葡萄糖。

二、一种脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液的制备方法

参见图1，其制备过程为：

1)配制海藻酸钠水溶液、丝素蛋白水溶液和聚乙烯醇水溶液；海藻酸钠水溶液质量分数为0.5％～2％、丝素蛋白水溶液质量分数为0.5％～2％、聚乙烯醇水溶液质量分数为0.5％～2％；

2)根据上述注射用脂溶性药物亚微囊配比，在搅拌条件下向海藻酸钠水溶液中依次加入涉及1)所述泊洛沙姆、丝素蛋白水溶液、聚乙烯醇水溶液、聚乙二醇，均匀混合后，再添加适量葡萄糖，最后滴加脂溶性药物；

3)采用超声、剪切进行处理，450nm膜过滤、湿热灭菌即得脂溶性药物亚微囊。

其中，所述海藻酸钠水溶液、泊洛沙姆、丝素蛋白水溶液、聚乙烯醇水溶液、聚乙二醇用量体积比为30:6:4:1:1～50:10:10:3:1；

3)采用剪切、超声进行处理，450nm膜过滤、湿热灭菌即得到脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液。

三、具体实施方式

表1为实施例1～5提供的脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液各原料配方浓度

表2为在表1所示各种原料不同浓度下的加入体积份数

	配方比例
		实施例1	30:6:4:1:1
实施例2	35:6:6:2:1
		实施例3	40:8:8:3:1
实施例4	45:8:8:2:1
		实施例5	50:10:10:3:1

表3为脂溶性药物与亚微囊材的质量比

	实施例1	实施例2	实施例3	实施例4	实施例5
						配方比例	1:1.5	1:2	1:3.5	1:4	1:5

表4为各实施例的具体实施工艺条件

四、脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液性能评价

1、稳定性的评价

采用离心法进行加速分层，以分光光度法测定乳剂离心前后的吸光值Ao和A，按照公式K＝A₀/A₀×100％计算稳定性参数K。K值越大，说明分散脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液在离心力的作用下上浮或下沉的越少，此注射液越稳定，故以K值来评价注射液的物理稳定性。

将制备得到的含有亚微囊注射液经4000r·min^-1离心15min后取下层液体，测定520±2nm波长处的吸光值，计算稳定性参数K，同时观察亚微囊注射液的稳定性。表5的结果表明按照本发明方法制备得到的脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液稳定性良好。

表5为实施例1～5制备得到的脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液的稳定性参数结果

实施例	稳定性参数K
		1	95.97％
2	96.36％
		3	89.93％
4	98.15％
		5	95.49％

图2为本发明实施例3得到的脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液经离心后的稳定型示意图，离心为4000r/min 15min,考察其药物的稳定性。从图2可以看出离心后溶液澄清透明，无分层无悬浮液，这说明采用本发明实施例3得到的脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液为稳定体系。

2、脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液质量浓度

以香草醛硫酸溶液显色，于(520±2)nm波长处测定其与莪术醇的吸收度，并通过公式计算出莪术油的含量，可见，载药量较高。

表6为实施例1～5制备得到的脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液的载药量

3、脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液的血液相容性评价

将制备得到的脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液作为实验样品，加入到含有10ml0.9％的NaCl溶液试管中作为试验组；不加样品只含有10ml 0.9％NaCl溶液的试管作为阴性对照组；不加样品只含有10ml蒸馏水的试管作为阳性对照组。每组设置三个平行实验，将试管置于37℃的恒温水浴中保持4h，其间每隔半小时观察记录溶血情况，然后1000r·min^-1分钟离心5min，用酶标仪测定上清液在540nm波长的吸光度值，计算溶血率。

溶血程度按照公式：溶血率＝(X₁-X₃)/(X₂-X₃)×100％进行计算；其中X₁为样品组的溶液吸光度，X₂为阳性对照组的溶液吸光度，X₃为阴性对照组的溶液吸光度。

按照美国材料试验协会(ASTM)以及我国相关国家标准及文献，对脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液溶血程度进行试验评价，溶血率小5％符合生物材料溶血方面的要求，大于5％就预示材料有溶血作用。

图3为实施例1～5制备得到的脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液4h的溶血结果照片图；可以看出本发明脂溶性药物亚微囊4h之内没有发生溶血现象。

图4为实施例2制备得到的脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液不同浓度下的溶血率结果；图中数据显示溶血率均低于1.5％，溶血率远低于国家标准要求的5％，表明本发明脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液血液相容性良好。

最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims

1.一种脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液，包括脂溶性药物和囊材；其特征在于，囊材组份由如下重量份的材料组成：海藻酸钠15～45份、泊洛沙姆188 2.5～9份、丝素蛋白1.5～5份、聚乙烯醇0.5～3份、聚乙二醇0.2～3份；

所述脂溶性药物和囊材质量比1:1.5～1:5，所述脂溶性药物为莪术油；

还包括占总体积5%的质量的葡萄糖。

2.根据权利要求1所述的脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液，其特征在于，所述泊洛沙姆188为医用级；所述海藻酸钠为医药级；所述丝素蛋白，纯度高于99%；所述聚乙烯醇为医用级，为PVA05-88，PVA17-88，PVA-124中至少一种；所述聚乙二醇为药用级，为400，600中至少一种。

3.一种脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液的制备方法，包括如下步骤：

1）配制海藻酸钠水溶液、丝素蛋白水溶液和聚乙烯醇水溶液；

海藻酸钠水溶液质量分数为0.5%～2.0%、丝素蛋白水溶液质量分数为0.5%～2%、聚乙烯醇水溶液质量分数为0.5%～2%；

2）根据权利要求1所述配比，在搅拌条件下向海藻酸钠水溶液中依次加入权利要求1中所述泊洛沙姆、丝素蛋白水溶液、聚乙烯醇水溶液、聚乙二醇，均匀混合后，再添加适量葡萄糖，最后滴加脂溶性药物；

3）采用超声、剪切进行处理，450nm膜过滤、湿热灭菌即得脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液。

4.根据权利要求3所述脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液的制备方法，其特征在于：所述海藻酸钠水溶液、泊洛沙姆、丝素蛋白水溶液、聚乙烯醇水溶液、聚乙二醇用量体积比为（30~50）：（6~10）：（4~10）：（1~3）：1。

5.根据权利要求3所述脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液的制备方法，其特征在于：在机械搅拌过程中逐步添加各组分，搅拌速度为100～500转/分，间隔时间为5～20分钟。

6.根据权利要求3所述脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液的制备方法，其特征在于：所述脂溶性药物的加入采用逐滴滴加的方式。

7.根据权利要求3所述脂溶性药物亚微囊葡萄糖注射液的制备方法，其特征在于：超声处理时，采用90～1000W，保持10～30分钟；剪切处理时，采用5000～10000转/分，保持10～30分钟。