CN107669710A - 一种灵芝活性成分组合物及其制备方法与用途 - Google Patents

一种灵芝活性成分组合物及其制备方法与用途 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种灵芝活性成分组合物及其制备方法与用途，属于中药、保健食品技术领域。灵芝活性成分组合物包括多糖、糖肽、灵芝酸A、灵芝酸B和灵芝酸C2，其重量比为(5‑55)：(1.5‑15)：(1‑8)：(0.6‑6)：(0.5‑5)。其制备方法包括：在包括灵芝粉和灵芝破壁孢子粉的原料中加入相对于原料总重量5‑30倍的30‑95％乙醇，回流提取1‑3次，每次1‑8h，过滤，回收乙醇得醇提物；提取后的药渣中加入相对于原料总重量5‑30倍的水，提取1‑3次，每次1‑5h，过滤，适当浓缩，得水提物；合并醇提物和水提物，得灵芝活性成分组合物；其中灵芝和灵芝破壁孢子粉的重量比为(6‑12)：(1‑6)。本发明具有抑制化疗所致恶心、呕吐反应的作用。

Description

一种灵芝活性成分组合物及其制备方法与用途
技术领域
本发明涉及中药、保健食品技术领域，具体来说是一种灵芝活性成分组合物及其制备方法与用途。
背景技术
在我国悠久的传统中草药宝库中，灵芝以其具有的药用价值及其滋补强壮、扶正固本、延年益寿等独特功效驰名中外。灵芝别名瑞草、万年草等，是一种大型药用真菌，属于担子菌岗多孔菌科灵芝属真菌，包括赤芝Ganoderma lucidum(Levss.ex Fr.)Karst.和紫芝Ganoderma sinenseZhao.Xu et zhang.的干燥子实体。具有补中益气、滋阴强壮、扶正固本、延年益寿等功效，历代医书将其列为上品。
灵芝三萜类化合物是灵芝中重要的活性成分之一。到目前为止，己成功分离出三萜类化合物150余种，其中大部分是灵芝酸。三萜类化合物是灵芝中极为重要的具有明显生理活性的一类化合物，具有抑制肿瘤细胞和抗病毒活性等多种生理活性，除此之外还具有保肝作用、抗肿瘤作用、抗HIV-1及HIV-1蛋白酶活性、抑制胆固醇合成、镇痛作用、对血小板聚集的影响、对蛋白金合欢酯转移酶的抑制作用和抗氧化作用的十大药理作用。表现出明显的免疫抗肿瘤作用外，对一些体外培养的肿瘤细胞系如人的宫颈癌Hela细胞、肝癌细胞Hepq、白血病细胞HL60等有直接的毒害作用。
灵芝内含大量的多糖成分，多糖的三维螺旋结构参与其抗肿瘤活性，破坏此结构则影响活性。被认为是灵芝具有抗肿瘤、调节免疫、抗衰老、扶正固本的主要有效成分之一，它能增强细胞、体液的免疫调节作用，调节核酸和蛋白质的代谢平衡，清除氧自由基，延长体外传代细胞分裂代数的能力。
灵芝糖肽(Ganoderma lucidum polysaccharides peptide GLPP)由16种氨基酸构成，研究表明GLPP对体内、外氧自由基损伤均有明显保护作用，特别是激光共聚焦显微镜时间序列程序扫描实验结果显示，GLPP体外给药，在加药瞬间可迅速减少静息状态小鼠腹腔巨噬细胞氧自由基含量，表明GLPP能对己经存在的自由基有直接清除作用，使细胞内总的自由基水平迅速降低。在PMA引起的巨噬细胞“呼吸爆发”引起的氧自由基的含量增加时，GLPP也能使其含量迅速减少。
灵芝孢子粉是灵芝在生长成熟期，从灵芝菌褶中弹射出来的极其微小的卵形生殖细胞即灵芝的种子。它凝聚了灵芝的精华，富含灵芝多糖、三萜酸类、蛋白质、多肤、氨基酸、有机锗、微量元素和维生素等多种生物活性物质，具有增强免疫力、抗辐射、清除自由基等多种功能，且药性温和，无副作用，但灵芝孢子表面被坚硬的几丁质纤维素所包围，人体很难充分吸收。目前市面上破壁灵芝孢子粉中壁壳占比60％以上，是无效部分，壁壳难消化会加重肠胃负担，对消化系统有不良影响。另外，破壁灵芝孢子粉中含有大量的几丁质纤维素等，导致破壁灵芝孢子粉中真正的有效成分，如三萜酸、多糖和糖肽等有效成分在胃肠道系统中吸收难，利用率低。
研究证实：灵芝和灵芝孢子粉内含有的有效活性成分主要为三萜酸、多糖和糖肽。目前市场多以单一灵芝或以灵芝与灵芝孢子粉所组成的产品存在，产品成分标示物仅为单一成分多糖含量、单一成分三萜酸含量或三萜酸和多糖二成分作为控制指标，由于质量标准低，所以导致市场上灵芝与灵芝孢子粉类产品良莠不齐，质量难以保证，威胁着广大人民的切身利益。
目前癌症已成为人类面临的一大杀手，死亡率仅次于心血管疾病，而且呈逐年上升的趋势。我国每年有200万恶性肿瘤患者，其中2/3的病人接受化疗，虽然有一定的疗效，但化疗后大部分患者会出现不同程度的副作用，其中最常见的副作用是恶心、呕吐等胃肠道反应。频繁的呕吐可导致消化液大量丢失，水、电解质、酸碱平衡紊乱，使病人痛苦不堪，严重影响病人的生存质量，不仅会影响到疗效，甚至使病人难以忍受而中断治疗。目前，临床常用的止吐药主要有组胺(H2)、乙酰胆碱(M)及多巴胺(DA)受体拮抗药和大麻类药物等，但这些药物对化疗后呕吐的疗效差，而且毒副作用强，应用上受到很大限制。新型止吐药，如NK1受体拮抗剂和5-HT3受体拮抗类药物，虽然对化疗后呕吐止吐有效果，但价格昂贵，使用范围窄，而且毒副反应大，临床多需联合用药。
研发一种高效低毒、价格低廉，易于推广的可用于减轻癌症化疗呕吐副作用的产品成为临床亟待解决的问题。
发明内容
本发明实施例的目的在于提供一种灵芝活性成分组合物，此灵芝活性成分组合物以多糖、糖肽、灵芝酸A、灵芝酸B和灵芝酸C2等有效成分作为主要组分，保证了产品安全、有效、质量可控。
本发明实施例的另一目的在于提供一种灵芝活性成分组合物的制备方法，在保留灵芝与灵芝孢子粉精华的同时，有效去除了灵芝孢子粉中难以消化的壁壳，其制备工艺简单。
同时本发明所涉及的灵芝活性成分组合物具有抑制化疗所致恶心、呕吐反应的作用。
本发明实施例解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的：
按照一定的重量比称取灵芝粉和灵芝破壁孢子粉为原料，在包括灵芝粉和灵芝破壁孢子粉的原料中加入相对于原料总重量5-30倍的30-95％乙醇，回流提取1-3次，每次1-8h，过滤，回收乙醇得醇提物；提取后的药渣中加入相对于原料总重量5-30倍的水，提取1-3次，每次1-5h，过滤，适当浓缩，得水提物；合并醇提物和水提物，得灵芝活性成分组合物。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本发明所涉及的灵芝活性成分组合物、灵芝活性成分组合物的制备方法以及灵芝活性成分组合物抑制化疗所致恶心呕吐反应的作用效果进行具体说明。
一种灵芝活性成分组合物，其包括多糖、糖肽、灵芝酸A、灵芝酸B和灵芝酸C2，多糖、糖肽、灵芝酸A、灵芝酸B和灵芝酸C2的重量比为(5-55)：(1.5-15)：(1-8)：(0.6-6)：(0.5-5)；
优选地，所述多糖、糖肽、灵芝酸A、灵芝酸B和灵芝酸C2的重量比为(10-30)：(5-15)：(4-12)：(3-8)：(2-8)；
所述的灵芝活性成分组合物，其特征在于，所述多糖、糖肽、灵芝酸A、灵芝酸B和灵芝酸C2为灵芝和灵芝破壁孢子粉的提取物，所述灵芝和灵芝破壁孢子粉的重量比为(6-12)：(1-6)；
优选地，所述灵芝和灵芝破壁孢子粉的重量比为(6-12)：(2-5)；
进一步优选地，所述灵芝和灵芝破壁孢子粉的重量比为2：1。
本发明实施例提供的一种灵芝活性成分组合物的制备方法，其包括以下步骤：
在包括灵芝粉和灵芝破壁孢子粉的原料中加入相对于原料总重量5-30倍的30-95％乙醇，回流提取1-3次，每次1-8h，过滤，回收乙醇得醇提物；提取后的药渣中加入相对于原料总重量5-30倍的水，提取1-3次，每次1-5h，过滤，适当浓缩，得水提物；合并醇提物和水提物，得灵芝活性成分组合物；其中灵芝和灵芝破壁孢子粉的重量比为(6-12)：(1-6)。
优选地，按照重量比为2：1称取灵芝粉和灵芝破壁孢子粉为原料，然后在包括灵芝粉和灵芝破壁孢子粉的原料中加入相对于原料总重量10倍的75％乙醇，回流提取2次，每次5h，过滤，回收乙醇得醇提物；提取后的药渣中加入相对于原料总重量12倍的水，提取2次，每次2h，过滤，适当浓缩，得水提物；合并醇提物和水提物，得灵芝活性成分组合物。
所述灵芝活性成分组合物可以制备为颗粒剂或(软)胶囊；优选地，抑制化疗所致恶心、呕吐反应的产品剂型为软胶囊。
本发明实施例的制备方法，工艺简单、原料配比合理，使得灵芝和灵芝破壁孢子粉通过乙醇回流提取及水煎后能够发挥出最大的药效。
本发明实施例的灵芝活性成分组合物及其制备方法的有益效果是：
本发明实施例提供的前述有效成分来源于灵芝和灵芝破壁孢子粉，具有抑制化疗所致呕吐反应的作用，同时具有抗肿瘤、调节免疫、抗衰老、扶正固本等多种药理作用，无毒副作用，组方合理，并且通过合理的配比能够有效治疗上述等多种症状，疗效良好。
以下结合实施例对本发明实施例的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例的灵芝活性成分组合物包括多糖、糖肽、灵芝酸A、灵芝酸B和灵芝酸C2，其重量比为26：13：6：5：3。
本实施例的灵芝活性成分组合物是通过以下制备方法制备而成的。
按照重量比为2：1称取灵芝粉3000g和灵芝破壁孢子粉1500g为原料，然后在包括灵芝粉和灵芝破壁孢子粉的原料中加入相对于原料总重量10倍的75％乙醇，回流提取2次，每次5h，过滤，回收乙醇得醇提物；提取后的药渣中加入相对于原料总重量12倍的水，提取2次，每次2h，过滤，适当浓缩，得水提物；合并醇提物和水提物，得1000个制剂单位灵芝活性成分组合物。
实施例2
本实施例的灵芝活性成分组合物包括多糖、糖肽、灵芝酸A、灵芝酸B和灵芝酸C2，其重量比为25：11：6：4：3。
本实施例的灵芝活性成分组合物是通过以下制备方法制备而成的。
按照重量比为3：1称取灵芝粉3000g和灵芝破壁孢子粉1000g为原料，然后在包括灵芝粉和灵芝破壁孢子粉的原料中加入相对于原料总重量10倍的85％乙醇，回流提取2次，每次3h，过滤，回收乙醇得醇提物；提取后的药渣中加入相对于原料总重量10倍的水，提取2次，每次2h，过滤，适当浓缩，得水提物；合并醇提物和水提物，得1000个制剂单位灵芝活性成分组合物。
实施例3
本实施例的灵芝活性成分组合物包括多糖、糖肽、灵芝酸A、灵芝酸B和灵芝酸C2，其重量比为29：15：5：5：4。
本实施例的灵芝活性成分组合物是通过以下制备方法制备而成的。
按照重量比为3：2称取灵芝粉3000g和灵芝破壁孢子粉2000g为原料，然后在包括灵芝粉和灵芝破壁孢子粉的原料中加入相对于原料总重量8倍的65％乙醇，回流提取2次，每次5h，过滤，回收乙醇得醇提物；提取后的药渣中加入相对于原料总重量10倍的水，提取2次，每次2h，过滤，适当浓缩，得水提物；合并醇提物和水提物，得1000个制剂单位灵芝活性成分组合物。
实施例4
本实施例的灵芝活性成分组合物包括多糖、糖肽、灵芝酸A、灵芝酸B和灵芝酸C2，其重量比为5：1.5：8：6：5。
本实施例的灵芝活性成分组合物是通过以下制备方法制备而成的。
按照重量比为12：1称取灵芝粉3000g和灵芝破壁孢子粉250g为原料，然后在包括灵芝粉和灵芝破壁孢子粉的原料中加入相对于原料总重量30倍的95％乙醇，回流提取3次，每次8h，过滤，回收乙醇得醇提物；提取后的药渣中加入相对于原料总重量5倍的水，提取1次，时间1h，过滤，适当浓缩，得水提物；合并醇提物和水提物，得1000个制剂单位灵芝活性成分组合物。
实施例5
本实施例的灵芝活性成分组合物包括多糖、糖肽、灵芝酸A、灵芝酸B和灵芝酸C2，其重量比为55：15：1：0.6：0.5。
本实施例的灵芝活性成分组合物是通过以下制备方法制备而成的。
按照重量比为1：1称取灵芝粉3000g和灵芝破壁孢子粉3000g为原料，然后在包括灵芝粉和灵芝破壁孢子粉的原料中加入相对于原料总重量5倍的30％乙醇，回流提取1次，时间1h，过滤，回收乙醇得醇提物；提取后的药渣中加入相对于原料总重量30倍的水，提取3次，每次5h，过滤，适当浓缩，得水提物；合并醇提物和水提物，得1000个制剂单位灵芝活性成分组合物。
实施例6
本实施例的灵芝活性成分组合物包括多糖、糖肽、灵芝酸A、灵芝酸B和灵芝酸C2，其重量比为10：5：12：8：8。
本实施例的灵芝活性成分组合物是通过以下制备方法制备而成的。
按照重量比为6：1称取灵芝粉3000g和灵芝破壁孢子粉500g为原料，然后在包括灵芝粉和灵芝破壁孢子粉的原料中加入相对于原料总重量30倍的95％乙醇，回流提取3次，每次8h，过滤，回收乙醇得醇提物；提取后的药渣中加入相对于原料总重量5倍的水，提取1次，时间1h，过滤，适当浓缩，得水提物；合并醇提物和水提物，得1000个制剂单位灵芝活性成分组合物。
实施例7
本实施例的灵芝活性成分组合物包括多糖、糖肽、灵芝酸A、灵芝酸B和灵芝酸C2，其重量比为30：15：4：3：2。
本实施例的灵芝活性成分组合物是通过以下制备方法制备而成的。
按照重量比为6：5称取灵芝粉3000g和灵芝破壁孢子粉2500g为原料，然后在包括灵芝粉和灵芝破壁孢子粉的原料中加入相对于原料总重量5倍的30％乙醇，回流提取1次，时间1h，过滤，回收乙醇得醇提物；提取后的药渣中加入相对于原料总重量30倍的水，提取3次，每次5h，过滤，适当浓缩，得水提物；合并醇提物和水提物，得1000个制剂单位灵芝活性成分组合物。
试验例1
灵芝活性成分组合物治疗恶心、呕吐作用的药效学研究
1、试验方法：
大鼠，雄性，实验前自由进食饮水。将大鼠随机分为10组，每组6只，A组为空白组，B组为模型对照组，C组为昂丹司琼组，D-J组分别为实施例1-7组。A、B组先以给以生理盐水5ml/kg ig；C组给予给与恩丹西酮4mg/kg ip预处理；D-J组给相应的药物0.4个制剂单位/kg ig预处理，连续给药物三天，第二天给药后禁食。第三天给药30min后除A组外，均给予顺铂3mg/kg ip，观察各组在给药后6h内大鼠的异嗜高岭土行为，记录大鼠进食高岭土量。
2、实验结果
与对照组比较，模型组大鼠进食高岭土量明显增加(P<0.01)。昂丹司琼组及本发明的组合物能够显著减少大鼠进食高岭土量。结果见表1.
组别 高岭土量(mg)
A 39.8±12.5
B 1917.3±236.1
C 1652.7±61.9
D 1796.2±58.5
E 1733.8±86.4
F 1785.0±69.5
G 1519.2±57.1
H 1583.6±78.5
I 1609.4±91.2
J 1655.0±79.6
试验例2
灵芝活性成分组合物治疗恶心、呕吐作用的临床疗效总结
共观察治疗60例均经病理确诊为恶性肿瘤的化疗患者，其中男22例，女8例，年龄31-78岁，平均51.2岁。
1纳入标准
入选病例均符合下列条件：诊断明确需行联合化疗；无颅内压增高、肠梗阻或其它原因引起的顽固性呕吐24h内均无呕吐且未用过止吐药者；化疗前检查心电图、血常规、肝功、肾功、血糖结果均正常。
将入选病例随机分为治疗组和对照组各30例，两组一般资料差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。
2治疗方法
对照组化疗前30min用昂丹司琼8mg静脉推注，连续注射3天，治疗组在对照组的基础上口服本发明实施例1中灵芝活性成分组合物制得的软胶囊剂，化疗前1天服用，一天2次，每次口服2粒。
3治疗结果
疗效标准：参照世界卫生组织(WHO)标准(周际昌.实用肿瘤内科学.北京：人民卫生出版社，2000：22-24.)，按恶心呕吐次数多少分为一一显效：24小时内无恶心呕吐；有效：24小时内恶心或呕吐2-3次；无效：24小时内恶心或呕吐>4次。
结果：治疗组显效23例，有效5例，无效2例，总有效率93.3％；对照组显效8例，有效10例，无效12例，总有效率60.0％。两组总有效率相比，差异有统计学意义(P<0.05)。
综上所述，本发明实施例的灵芝活性成分组合物以及由此制备而成的抑制化疗所致恶心、呕吐反应中其疗效好、见效快。
以上所描述的实施例是本发明实施例一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明实施例的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明实施例的范围，而是仅仅表示本发明实施例的选定实施例。基于本发明实施例中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明实施例保护的范围。

Claims (9)

1.一种灵芝活性成分组合物，其特征在于，其包括多糖、糖肽和灵芝酸A，所述多糖、糖肽和灵芝酸A的重量比为(5-55)：(1.5-15)：(1-8)。
2.根据权利要求1所述的灵芝活性成分组合物，其特征在于，其还包括灵芝酸B和/或灵芝酸C2，所述多糖、糖肽、灵芝酸A、灵芝酸B和灵芝酸C2的重量比为(5-55)：(1.5-15)：(1-8)：(0.6-6)：(0.5-5)。
3.根据权利要求2所述的灵芝活性成分组合物，其特征在于，所述多糖、糖肽、灵芝酸A、灵芝酸B和灵芝酸C2的重量比为(10-30)：(5-15)：(4-12)：(3-8)：(2-8)。
4.根据权利要求2所述的灵芝活性成分组合物，其特征在于，所述多糖、糖肽、灵芝酸A、灵芝酸B和灵芝酸C2为灵芝和灵芝破壁孢子粉的提取物。
5.根据权利要求2所述的灵芝活性成分组合物，其特征在于，所述灵芝和灵芝破壁孢子粉的重量比为(6-12)：(1-6)。
6.根据权利要求3所述的灵芝活性成分组合物，其特征在于，所述灵芝和灵芝破壁孢子粉的重量比为(6-12)：(2-5)；
优选地，所述灵芝和灵芝破壁孢子粉的重量比为2：1。
7.一种权利要求2所述的灵芝活性成分组合物的制备方法，其特征在于，其包括以下步骤：
在包括灵芝粉和灵芝破壁孢子粉的原料中加入相对于原料总重量5-30倍的30-95％乙醇，回流提取1-3次，每次1-8h，过滤，回收乙醇得醇提物；提取后的药渣中加入相对于原料总重量5-30倍的水，提取1-3次，每次1-5h，过滤，适当浓缩，得水提物；合并醇提物和水提物，得灵芝活性成分组合物。
8.根据权利要求2所述的灵芝活性成分组合物，其特征在于，所述灵芝活性成分组合物可以制备为颗粒剂或(软)胶囊。
9.如权利要求2所述的灵芝活性成分组合物，在制备抑制化疗所致恶心、呕吐反应的药物中的应用。
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