CN107648326B - 一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法,以铁苋菜、黄连、甘草为主要配方,再添加苯甲酸钠、维生素E、甜味剂、胶浆剂、明胶为辅料,在治疗疾病的同时还可以增强禽畜的食欲,配合本发明研发的超声波辅助超高压提取工艺使其细胞破壁率提高、大分子物质溶出少、有效提取率高、在常温下处理可以避免热效应引起有效成分的破坏,再结合特定的大孔树脂吸附可以去除提取液中的无机盐,可以增强产品的稳定性。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药口服液的制备领域,尤其涉及一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法。
背景技术
腹泻普遍发生在世界各地,常常引起大批畜禽生长不良或死亡,己成为现代养殖业的一大障碍。抗生素用于促进动物生长、生产、预防动物疾病,对畜牧业的发展起到了积极的推动作用,使畜禽的数量及其产品产量得到了很大的提高,获得了可观的经济效益。然而,抗生素的添加给人们带来巨大经济效益的同时,也带来不少的负面作用,特别是在畜禽产品中药物的残留问题,中药具有改善动物生产性能的功效以及无低残留、不易产生耐药性等诸多优点,将在畜牧养殖中发挥重要的作用。铁苋菜、黄连和甘草是我国传统医药中常用药味,疗效确切,本发明以三味传统中药为主药,并结合研发的全新预处理技术对三味中药的有效成分提取,结合维生素E、苯甲酸钠、甜蜜素、海藻酸钠配方为辅料,在治疗疾病的同时还可以增强禽畜食欲,将本产品研制成口服溶液剂,满足了动物发病后,食欲减退、但喜饮水的要求,并且口服溶液剂具有吸收快、适口性好、服用方便,本发明研制出的苋黄止痢口服液,用于防治大肠杆菌感染性疾病及预防,可以满足广大养殖用户的需求。
发明内容
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法由下述重量配比的原料组成:铁苋菜提取物100-120份、黄连提取物30-45份、提取物甘草20-30份。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:由下述重量配比的原料组成:铁苋菜提取物100-120份、黄连提取物30-45份、甘草提取物20-30份、苯甲酸钠1-3份、维生素E5-10份、甜味剂2-5份、胶浆剂3-5份、明胶2-5份。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:所述甜味剂是甜蜜素,所述胶浆剂是海藻酸钠。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:
铁苋菜提取物的制备:
(1)取铁苋菜除去杂质,摘取叶片,喷淋清水,水浸润10-12小时,用滤网将浸润后的中药原料取出,再将中药原料放进竹篓中在35-40℃,在相对湿度为70-85%的环境中放置10-12小时,取出洗净,切片,取出先切丝,置于温度为60℃的恒温干燥箱中干燥24h,粉碎后过0.5mm筛。
(2)超声辅助处理:向超声仪中加入步骤(1)的粗粉,再加入5-7倍重量当量的浓度为65%乙醇,控制超声功率为400-500W、超声时间为60min。
(3)超高压处理:将步骤(2)得到的药液转入间歇式超高压提取机中,排空容器,升压至300-400MPa,保持3-7min。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:
黄连提取物的制备:
(1)取黄连洗净泥砂杂质,洗净,水浸润6-8小时,用滤网将浸润后的黄连原料取出,再将黄连原料放进竹篓中,在20—25℃、相对湿度为80-90%的环境中放置10-12小时,取出洗净,切片,晾干。
(2)超声辅助处理:向超声仪中加入步骤(1)的切片,再加入5-7倍重量当量的浓度为65%乙醇,控制超声功率为100-200W、超声时间为50min。
(3)超高压处理:将步骤(2)得到的药液转入间歇式超高压提取机中,排空容器,升压至200-280MPa,保持2-6min。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:
甘草提取物的制备:
(1)将甘草放入高压釜中,向高压釜中通入热蒸气至压力为1.1-1.2个大气压,保压30分钟,再卸载高压,取出甘草待用、破碎,干燥。
(2)超声辅助处理:向超声仪中加入步骤(1)的粗粉,再加入5-7倍重量当量的浓度为65%乙醇,控制超声功率为250-350W、超声时间为80min。
(3)超高压处理:将步骤(2)得到的药液转入间歇式超高压提取机中,排空容器,升压至400-600MPa,保持5-15min。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:三种提取物提纯:大孔树脂分离提纯:将步骤3中的得到的提取物混合,置于规格为1000mm×100mm,DL16型号强酸性阳离子-D301型号弱碱性阴离子DL16型号强酸性阳离子树脂进行提纯,控制温度为40-50℃,流速控制0.1-0.3ml/min,得到混合提纯后的提取液。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:其制备方法为:
取提纯后的铁苋菜提取物、黄连提取物、甘草提取物,浓缩至相对密度为1.0-1.2,加水至1000mL,滤过,滤液加苯甲酸钠、甜蜜素、海藻酸钠、明胶、混匀、混匀、灌装、灭菌,既得一种禽畜用苋黄止痢口服液。
本发明所述的苋黄止痢口服液的配制主要根据:组方中以铁苋菜为君药,铁苋菜俗称野麻草,具有清热解毒,利湿收敛之功,是民间治疗湿热痢疾的首选药物;配以黄连,具有抑菌消炎功能,为臣药;甘草缓急止痛,调和诸药,为佐使,全方三味相互配伍,具清热燥湿止泻之功效,再苯甲酸钠、维生素E、甜味剂、胶浆剂、明胶为辅料,在治疗疾病的同时还可以增强本口服液的口感,提升禽畜的食欲,采用超声波辅助超高压提取工艺使其细胞破壁率提高、大分子物质溶出少、有效提取率高、在常温下处理可以避免热效应引起有效成分的破坏,再结合特定的大孔树脂吸附可以去除提取液中的无机盐,增强产品的稳定性。
为了证明一种禽畜用苋黄止痢口服液的安全性和有效性,我们进行了各方面系统的研究,如下:
1、药效学研究
体外抑菌试验:通过平皿法,观察苋黄止痢口服液对大肠杆菌、痢疾志贺氏菌、链球菌的影响。试验结果表明,苋黄止痢口服液对大肠杆菌、痢疾志贺氏菌、链球菌均有不同程度的抑制作用,说明苋黄止痢口服液具有体外抑菌作用。
体内抑菌试验:通过观察苋黄止痢口服液对腹腔注射大肠杆菌引起小鼠死亡的作用的影响,来研究苋黄止痢口服液体内抑菌作用。试验结果表明,苋黄止痢口服液对大肠杆菌引起小鼠死亡有一定的保护作用,说明苋黄止痢口服液具有体内抑菌作用。
对生大黄所致小鼠腹泻的影响:小鼠灌服生大黄煎液导致小鼠腹泻,灌胃给予苋黄止痢口服液,观察对小鼠排便影响,研究其止泻作用。结果表明苋黄止痢口服液有抑制腹泻作用。
抗炎试验:通过观察苋黄止痢口服液对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响,来研究苋黄止痢口服液的抗炎作用。结果苋黄止痢口服液能显著抑制二甲苯所致的炎证。
2、安全药理研究
通过小鼠口服苋黄止痢口服液,观察小鼠的行为变化及自主活动的变化和对异戊巴比妥钠阈剂量小鼠的睡眠时间、异戊巴比妥钠阈下催眠剂量小鼠的睡眠个数的影响。麻醉犬给予苋黄止痢口服液,观察麻醉犬的血压、心率、心电图、心律和呼吸的变化,来研究苋黄止痢口服液对中枢神经系统、心血管系统及呼吸系统的影响,为动物用药提供依据。试验结果表明,小鼠口服苋黄止痢口服液后,小鼠的行为及自主活动无明显变化,苋黄止痢口服液对异戊巴比妥钠阈剂量小鼠的睡眠时间及对异戊巴比妥钠阈下催眠剂量小鼠的睡眠个数无明显影响。麻醉犬给予苋黄止痢口服液后,麻醉犬的血压、心率、心电图、心律和呼吸无明显变化。说明苋黄止痢口服液在药效剂量下对中枢神经系统、心血管系统及呼吸系统无明显影响。
3、急性毒性研究
苋黄止痢口服小鼠灌胃给药急性毒性试验,因限于药物浓度和给药剂量无法增加,未能测出灌胃给药的LD50。测得小鼠最大耐受量为240g药材/kg体重,相当于临床日用量(0.3g生药/kg)的800倍。给药14天后仍健康活泼,无一死亡,14天后处死,尸检肉眼未见内脏器官有异常改变。说明本品动物临床用量安全。
4、长期毒性研究
苋黄止痢口服液灌胃给药3周后与停药2周后,小剂量组(9g药材/kg体重,相当于鸡临床用量的30倍),中剂量组(12药材/kg体重,相当于鸡临床用量的40倍),大剂量组(18药材/kg体重,相当于鸡临床用量的60倍),均未见明显的毒性反应。一般情况和行为表现均无异常变化;大鼠的体重及生长情况良好,未见明显异常情况发生;血液学、血液生化学、主要脏器器官系数等指标测定,与正常对照组比较无显著性变化;系统尸检和病理组织学检查未见明显病理性损害。故认为苋黄止痢口服液长期给药是安全的。
5、靶动物安全试验
选取14日龄罗曼蛋雏鸡80只随机分为4组,每组20羽,3个药物剂量组分别在饮水中添加5倍(10mL / L水)、3倍(6mL / L水)、1倍(2mL / L水)剂量的苋黄止痢口服液,连用3天;对照组不添加任何药物。每天观察记录各组鸡的精神、饮食、粪便和死亡情况,连续观察至停药后第14天;分别停药后第1、7、14天称重,计算平均体重,采血检测血液学和血液生化指标的变化。结果显示,试验期间各组无死亡,各剂量组对鸡的精神、饮食、粪便和生长均无影响,体重、血液学指标、血液生化指标与对照组相比均无明显差异。表明苋黄止痢口服液的安全剂量在5倍以上,按推荐的剂量应用绝对安全。
本发明的有益效果:
1、本发明以三味传统中药为主药,结合苯甲酸钠、维生素、甜味剂、胶浆剂、明胶为辅料,在治疗疾病的同时还可以增强禽畜食欲,增加口服液的澄清程度。
2、本发明研发的研发的超声波辅助超高压提取工艺使其细胞破壁率提高、大分子物质溶出少、有效提取率高、在常温下处理可以避免热效应引起有效成分的破坏,再结合特定的大孔树脂吸附可以去除提取液中的无机盐,增强产品的稳定性。
3、研制成口服溶液剂,满足了动物发病后,食欲减退、但喜饮水的要求,并且口服溶液剂具有吸收快、适口性好、服用方便。
具体实施方式:
实施例1:一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:由下述重量配比的原料组成:铁苋菜提取物110份、黄连提取物37份、甘草提取物25份、苯甲酸钠2份、维生素E7份、甜蜜素3份、海藻酸钠4份、明胶4份。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:
(1)取铁苋菜除去杂质,摘取叶片,喷淋清水,水浸润11小时,用滤网将浸润后的中药原料取出,再将中药原料放进竹篓中在37℃,在相对湿度为78%的环境中放置11小时,取出洗净,切片,取出先切丝,置于温度为60℃的恒温干燥箱中干燥24h,粉碎后过0.5mm筛。
(2)超声辅助处理:向超声仪中加入步骤(1)的粗粉,再加入6倍重量当量的浓度为65%乙醇,控制超声功率为450W、超声时间为60min。
(3)超高压处理:将步骤(2)得到的药液转入间歇式超高压提取机中,排空容器,升压至350MPa,保持5min。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:
黄连提取物的制备:
(1)取黄连洗净泥砂杂质,洗净,水浸润7小时,用滤网将浸润后的黄连原料取出,再将黄连原料放进竹篓中,在23℃、相对湿度为85%的环境中放置11小时,取出洗净,切片,晾干。
(2)超声辅助处理:向超声仪中加入步骤(1)的切片,再加入6倍重量当量的浓度为65%乙醇,控制超声功率为150W、超声时间为50min。
(3)超高压处理:将步骤(2)得到的药液转入间歇式超高压提取机中,排空容器,升压至240MPa,保持4min。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:
甘草提取物的制备:
(1)将甘草放入高压釜中,向高压釜中通入热蒸气至压力为1.15个大气压,保压30分钟,再卸载高压,取出甘草待用、破碎,干燥。
(2)超声辅助处理:向超声仪中加入步骤(1)的粗粉,再加入5-7倍重量当量的浓度为65%乙醇,控制超声功率为300W、超声时间为80min。
(3)超高压处理:将步骤(2)得到的药液转入间歇式超高压提取机中,排空容器,升压至500MPa,保持10min。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:三种提取物提纯:大孔树脂分离提纯:将步骤3中的得到的提取物混合,置于规格为1000mm×100mm,DL16型号强酸性阳离子-D301型号弱碱性阴离子DL16型号强酸性阳离子树脂进行提纯,控制温度为45℃,流速控制0.2ml/min,得到混合提纯后的提取液。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:其制备方法为:
取提纯后的铁苋菜提取物、黄连提取物、甘草提取物,浓缩至相对密度为1.1,加水至1000mL,滤过,滤液加苯甲酸钠、甜蜜素、海藻酸钠、明胶、混匀、混匀、灌装、灭菌,既得一种禽畜用苋黄止痢口服液。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:
取前处理后的铁苋菜、黄连、甘草加10倍量水煎煮1.5小时,再加8倍量水煎煮1.0小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩至相对密度为1.1,加水至1000mL,滤过,滤液加苯甲酸钠、甜味剂、胶浆剂、明胶、混匀、灌装、灭菌,既得一种禽畜用苋黄止痢口服液。
实施例2:
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:由下述重量配比的原料组成:铁苋菜提取物100份、黄连提取物30份、甘草提取物20份、苯甲酸钠1份、维生素E5份、甜蜜素2份、海藻酸钠2份、明胶2份。
铁苋菜提取物的制备:
(1)取铁苋菜除去杂质,摘取叶片,喷淋清水,水浸润10小时,用滤网将浸润后的中药原料取出,再将中药原料放进竹篓中在35℃,在相对湿度为70%的环境中放置10小时,取出洗净,切片,取出先切丝,置于温度为60℃的恒温干燥箱中干燥24h,粉碎后过0.5mm筛。
(2)超声辅助处理:向超声仪中加入步骤(1)的粗粉,再加入5倍重量当量的浓度为65%乙醇,控制超声功率为400超声时间为60min。
(3)超高压处理:将步骤(2)得到的药液转入间歇式超高压提取机中,排空容器,升压至300MPa,保持3min。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:
黄连提取物的制备:
(1)取黄连洗净泥砂杂质,洗净,水浸润6小时,用滤网将浸润后的黄连原料取出,再将黄连原料放进竹篓中,在20℃、相对湿度为80%的环境中放置10小时,取出洗净,切片,晾干。
(2)超声辅助处理:向超声仪中加入步骤(1)的切片,再加入5倍重量当量的浓度为65%乙醇,控制超声功率为100W、超声时间为50min。
(3)超高压处理:将步骤(2)得到的药液转入间歇式超高压提取机中,排空容器,升压至200MPa,保持2min。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:
甘草提取物的制备:
(1)将甘草放入高压釜中,向高压釜中通入热蒸气至压力为1.1个大气压,保压30分钟,再卸载高压,取出甘草待用、破碎,干燥。
(2)超声辅助处理:向超声仪中加入步骤(1)的粗粉,再加入5倍重量当量的浓度为65%乙醇,控制超声功率为250W、超声时间为80min。
(3)超高压处理:将步骤(2)得到的药液转入间歇式超高压提取机中,排空容器,升压至400MPa,保持5min。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:三种提取物提纯:大孔树脂分离提纯:将步骤3中的得到的提取物混合,置于规格为1000mm×100mm,DL16型号强酸性阳离子-D301型号弱碱性阴离子DL16型号强酸性阳离子树脂进行提纯,控制温度为40℃,流速控制0.1ml/min,得到混合提纯后的提取液。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:其制备方法为:
取提纯后的铁苋菜提取物、黄连提取物、甘草提取物,浓缩至相对密度为1.0,加水至1000mL,滤过,滤液加苯甲酸钠、甜蜜素、海藻酸钠、明胶、混匀、混匀、灌装、灭菌,既得一种禽畜用苋黄止痢口服液。
实施例3:
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:由下述重量配比的原料组成:铁苋菜提取物120份、黄连提取物45份、甘草提取物30份、苯甲酸钠3份、维生素E10份、甜蜜素5份、海藻酸钠5份、明胶5份。
(1)取铁苋菜除去杂质,摘取叶片,喷淋清水,水浸润12小时,用滤网将浸润后的中药原料取出,再将中药原料放进竹篓中在40℃,在相对湿度为85%的环境中放置12小时,取出洗净,切片,取出先切丝,置于温度为60℃的恒温干燥箱中干燥24h,粉碎后过0.5mm筛。
(2)超声辅助处理:向超声仪中加入步骤(1)的粗粉,再加入5-7倍重量当量的浓度为65%乙醇,控制超声功率为500W、超声时间为60min。
(3)超高压处理:将步骤(2)得到的药液转入间歇式超高压提取机中,排空容器,升压至400MPa,保持7min。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:
黄连提取物的制备:
(1)取黄连洗净泥砂杂质,洗净,水浸润8小时,用滤网将浸润后的黄连原料取出,再将黄连原料放进竹篓中,在25℃、相对湿度为90%的环境中放置12小时,取出洗净,切片,晾干。
(2)超声辅助处理:向超声仪中加入步骤(1)的切片,再加入7倍重量当量的浓度为65%乙醇,控制超声功率为200W、超声时间为50min。
(3)超高压处理:将步骤(2)得到的药液转入间歇式超高压提取机中,排空容器,升压至280MPa,保持6min。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:
甘草提取物的制备:
(1)将甘草放入高压釜中,向高压釜中通入热蒸气至压力为1.2个大气压,保压30分钟,再卸载高压,取出甘草待用。
(2)超声辅助处理:向超声仪中加入步骤(1)的粗粉,再加入7倍重量当量的浓度为65%乙醇,控制超声功率为350W、超声时间为80min。
(3)超高压处理:将步骤(2)得到的药液转入间歇式超高压提取机中,排空容器,升压至600MPa,保持15min。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:三种提取物提纯:大孔树脂分离提纯:将步骤3中的得到的提取物混合,置于规格为1000mm×100mm,DL16型号强酸性阳离子-D301型号弱碱性阴离子DL16型号强酸性阳离子树脂进行提纯,控制温度为50℃,流速控制0.3ml/min,得到混合提纯后的提取液。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:其制备方法为:
取提纯后的铁苋菜提取物、黄连提取物、甘草提取物,浓缩至相对密度为1.2,加水至1000mL,滤过,滤液加苯甲酸钠、甜蜜素、海藻酸钠、明胶、混匀、混匀、灌装、灭菌,既得一种禽畜用苋黄止痢口服液。
实施例4:
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:由下述重量配比的原料组成:铁苋菜提取物80份、黄连提取物10份、甘草提取物15份、苯甲酸钠0.5份、维生素E2份、甜蜜素1份、海藻酸钠1份、明胶6份。
(1)取铁苋菜除去杂质,摘取叶片,喷淋清水,水浸润8小时,用滤网将浸润后的中药原料取出,再将中药原料放进竹篓中在30℃,在相对湿度为65%的环境中放置8小时,取出洗净,切片,取出先切丝,置于温度为60℃的恒温干燥箱中干燥24h,粉碎后过0.5mm筛。
(2)超声辅助处理:向超声仪中加入步骤(1)的粗粉,再加入4倍重量当量的浓度为65%乙醇,控制超声功率为300W、超声时间为60min。
(3)超高压处理:将步骤(2)得到的药液转入间歇式超高压提取机中,排空容器,升压至200MPa,保持8min。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:
黄连提取物的制备:
(1)取黄连洗净泥砂杂质,洗净,水浸润6小时,用滤网将浸润后的黄连原料取出,再将黄连原料放进竹篓中,在15℃、相对湿度为70%的环境中放置9小时,取出洗净,切片,晾干。
(2)超声辅助处理:向超声仪中加入步骤(1)的切片,再加入4倍重量当量的浓度为65%乙醇,控制超声功率为60W、超声时间为50min。
(3)超高压处理:将步骤(2)得到的药液转入间歇式超高压提取机中,排空容器,升压至150MPa,保持7min。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:
甘草提取物的制备:
(1)将甘草放入高压釜中,向高压釜中通入热蒸气至压力为1.0个大气压,保压30分钟,再卸载高压,取出甘草待用。
(2)超声辅助处理:向超声仪中加入步骤(1)的粗粉,再加入4倍重量当量的浓度为65%乙醇,控制超声功率为200W、超声时间为80min。
(3)超高压处理:将步骤(2)得到的药液转入间歇式超高压提取机中,排空容器,升压至300MPa,保持20min。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:三种提取物提纯:大孔树脂分离提纯:将步骤3中的得到的提取物混合,置于规格为1000mm×100mm,DL16型号强酸性阳离子-D301型号弱碱性阴离子DL16型号强酸性阳离子树脂进行提纯,控制温度为35℃,流速控制0.4ml/min,得到混合提纯后的提取液。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:其制备方法为:
取提纯后的铁苋菜提取物、黄连提取物、甘草提取物,浓缩至相对密度为0.8,加水至1000mL,滤过,滤液加苯甲酸钠、甜蜜素、海藻酸钠、明胶、混匀、混匀、灌装、灭菌,既得一种禽畜用苋黄止痢口服液。
实施例5:
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:由下述重量配比的原料组成:铁苋菜提取物140份、黄连提取物50份、甘草提取物40份、苯甲酸钠4份、维生素E7份、甜蜜素6份、海藻酸钠1份、明胶1份。
其余同实施例1
对比例1:
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:由下述重量配比的原料组成:铁苋菜110份、黄连37份、甘草25份、苯甲酸钠2份、维生素E7份、甜蜜素3份、海藻酸钠3份、明胶4份。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:
取铁苋菜、黄连、甘草加10倍量水煎煮1.5小时,再加8倍量水煎煮1.0小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩至相对密度为1.10(60℃),加水至1000mL,滤过,滤液加苯甲酸钠、甜味剂、胶浆剂、明胶、混匀、灌装、灭菌,既得一种禽畜用苋黄止痢口服液。
对比例2:
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:由下述重量配比的原料组成:铁苋菜110份、黄连37份、甘草25份。
一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法:
取铁苋菜、黄连、甘草加10倍量水煎煮1.5小时,再加8倍量水煎煮1.0小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩至相对密度为1.10(60℃),加水至1000mL,滤过,滤液加苯甲酸钠,调整总量至1000ml,混匀,灌装,灭菌既得一种禽畜用苋黄止痢口服液。
苋黄止痢口服液体外抑菌结果:
(1)临床分离细菌(大肠杆菌、痢疾志贺氏菌、链球菌)由江西中医学院附属医院检验科提供,由该院住院和门诊患者临床标本分离培养所得。
(2)药物平板培养基的制备:取灭菌试管9支,依次编号,排列于试管架上。按无菌操作法,用移液管吸取无菌生理盐水加入各试管,每管2 ml,第1管不加生理盐水。然后吸取苋黄止痢口服液水溶液(1000 mg生药/ml)各2 ml加入第1、2管,吹匀;接着从第2管吸出2ml放入第3管,吹匀;又从第3管吸出2 ml放入第4管,依次法逐管按二倍稀释至第9管,第1管至第9管药液按1:1、1:2、1:4、1:8、1:16、1:32、1:64、1:128、1:256依次被稀释,即分别为1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125,3.9062mg生药/ml。取9个无菌平皿,在盖上作编号1~9号,将1~9号试管中的药液2 ml加入到相应的1~9号平皿中。然后向平皿内加入已熔化并冷却至40℃左右的培养基(大肠杆菌、痢疾志贺氏菌、大肠杆菌ATCC29213用M—H琼脂,链球菌用5%去纤维羊血的M—H琼脂)18 ml,立即摇动平皿,使培养基与药液充分混匀。其含苋黄止痢口服液的浓度分别为100、50、25、12.5、6.25、3.125、1.5625、0.78125、0.39062mg生药/ml。
(3)将实施例1-5和对比例1、2所得苋黄止痢口服液体分别按步骤(2)进行处理。
所得结果见下表:
苋黄止痢口服液体内抑菌结果:
苋黄止痢口服液对小鼠体内感染大肠杆菌的作用:取18~22g小鼠160只,雌雄各半,随机分为8组,每组20只,设置生理盐水组为空白组,小鼠的使用剂量分别灌胃给予1.2药材/kg体重,各组小鼠腹腔注射10-5大肠杆菌造成感染,每只0.5 ml,观察小鼠的死亡情况,连续7天,统计各组的死亡率,卡方统计结果见下表:
表2
苋黄止痢口服液对生大黄所致小鼠腹泻的影响
小鼠160只,18~22g,雌雄各半,适应性喂养3d,随机分为8组,即正常生理盐水组,其他各实施例、对比例组,试验前禁食18 h,试验过程中禁食水,灌胃给予苋黄止痢口服液0.5 h后,灌服生大黄煎液,0.5 h后,各鼠置鼠盒内观察,并且及时取出小鼠排出的粪便点数。记录灌大黄后6h湿粪点数。
表3 苋黄止痢口服液对小鼠生大黄致泻排粪便的影响
苋黄止痢口服液对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响
小鼠160只,18~22g,雌雄各半分为8组,由南昌大学医学院实验动物中心提供,合格证号:医动字第021-9602号,各组分别灌胃连续给药3天,每天1次,每次0.2ml/10g,模型组给等容量的生理盐水。于末次给药30分钟后,各组用二甲苯棉球两面均匀涂抹接触小鼠左耳约5秒钟,15分钟后脱颈椎处死,以打孔器将小鼠双耳相同部位等面积切下,用电子天平精确称准,以左耳重减右耳重为小鼠的耳肿胀度,并求出抑制率。
表4
由上述实验分析可知:苋黄止痢口服液对大肠杆菌、痢疾杆菌、链球菌、大肠杆菌ATCC29213有抑制作用,其中本发明范围内的实施例1-3的效果较优,本发明研究表明,苋黄止痢口服液具有体外、体内抑菌作用,抑制炎症、抑制泻下作用,且可以增强禽畜的食欲,本发明范围内的实施例1-3的效果较优 ,实施例1效果最佳,实施例4、5在本发明的限定的范围之外其效果降低,对比例1、2效果均较差。
Claims (3)
1.一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法,其特征在于:由下述重量配比的原料组成:铁苋菜提取物100-120份、黄连提取物30-45份、甘草提取物20-30份、苯甲酸钠1-3份、维生素E5-10份、甜味剂2-5份、胶浆剂3-5份、明胶2-5份;
其中,铁苋菜提取物的制备:
(1)取铁苋菜除去杂质,摘取叶片,喷淋清水,水浸润10-12小时,用滤网将浸润后的中药原料取出,再将中药原料放进竹篓中在35-40℃,在相对湿度为70-85%的环境中放置10-12小时,取出洗净,切片,取出先切丝,置于温度为60℃的恒温干燥箱中干燥24h,粉碎后过0.5mm筛;
(2)超声辅助处理:向超声仪中加入步骤(1)的粗粉,再加入5-7倍重量当量的浓度为65%乙醇,控制超声功率为400-500W、超声时间为60min;
(3)超高压处理:将步骤(2)得到的药液转入间歇式超高压提取机中,排空容器,升压至300-400MPa,保持3-7min;
黄连提取物的制备:
(1)取黄连洗净泥砂杂质,洗净,水浸润6-8小时,用滤网将浸润后的黄连原料取出,再将黄连原料放进竹篓中,在20—25℃、相对湿度为80-90%的环境中放置10-12小时,取出洗净,切片,晾干;
(2)超声辅助处理:向超声仪中加入步骤(1)的切片,再加入5-7倍重量当量的浓度为65%乙醇,控制超声功率为100-200W、超声时间为50min;
(3)超高压处理:将步骤(2)得到的药液转入间歇式超高压提取机中,排空容器,升压至200-280MPa,保持2-6min;
甘草提取物的制备:
(1)将甘草放入高压釜中,向高压釜中通入热蒸气至压力为1.1-1.2个大气压,保压30分钟,再卸载高压,取出甘草待用、破碎,干燥;
(2)超声辅助处理:向超声仪中加入步骤(1)的粗粉,再加入5-7倍重量当量的浓度为65%乙醇,控制超声功率为250-350W、超声时间为80min;
(3)超高压处理:将步骤(2)得到的药液转入间歇式超高压提取机中,排空容器,升压至400-600MPa,保持5-15min;
上述三种提取物进行提纯:大孔树脂分离提纯:将步骤(3)中的得到的提取物混合,置于规格为1000mm×100mm,DL16型号强酸性阳离子-D301型号弱碱性阴离子-DL16型号强酸性阳离子树脂进行提纯,控制温度为40-50℃,流速控制0.1-0.3ml/min,得到混合提纯后的提取液。
2.如权利要求1所述的一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法,其特征在于:所述甜味剂是甜蜜素,所述胶浆剂是海藻酸钠。
3.如权利要求1所述的一种禽畜用苋黄止痢口服液的制备方法,其特征在于:其制备方法为:
取提纯后的铁苋菜提取物、黄连提取物、甘草提取物,浓缩至相对密度为1.0-1.2,加水至1000mL,滤过,滤液加苯甲酸钠、维生素E、甜蜜素、海藻酸钠、明胶,混匀、灌装、灭菌,既得一种禽畜用苋黄止痢口服液。
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