CN107531803B - 环状甘丙肽类似物及其用途 - Google Patents

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Abstract

本发明总体涉及医学和药学领域。更具体地，其涉及新的甘丙肽类似物及其在治疗中的用途。本发明提供甘丙肽的环肽类似物，其中甘丙肽类似物包括(甲基)羊毛硫氨酸桥，并且其中该类似物具有通式“X1‑X2‑X3‑X4‑X5‑X6‑X7‑X8‑X9‑X10‑X11‑X12‑X13‑X14‑X15‑X16‑X17‑X18‑X19‑X20‑X21‑X22‑”、或者其缺少X1和/或至多11个C‑末端残基的截短的变体，其中选自X3、X4、X6、X7、X10和X13‑X19的两个残基一起形成结构Ala‑S‑Ala的羊毛硫氨酸桥或者结构Abu‑S‑Ala或Ala‑S‑Abu的甲基羊毛硫氨酸桥。

Description

环状甘丙肽类似物及其用途
技术领域
本发明总体涉及医学和药学领域。更具体地，其涉及新的甘丙肽类似物、其制备方法及其在治疗中的用途。
背景技术
甘丙肽是由29-30个氨基酸的链组成的神经肽，其由GAL基因编码的称作前体甘丙肽原(preprogalanin)的123个氨基酸的蛋白质的切割产生。甘丙肽在人和其他哺乳动物的大脑、脊髓和肠中得以广泛表达。甘丙肽涉及到许多生物学上的不同功能，其包括：伤害感受、清醒和睡眠调节、认知、摄食调节、情绪调节、血压调节，其还在发育中发挥作用，以及起到营养因子作用。甘丙肽与许多种疾病有关，包括阿尔茨海默氏症、癫痫以及抑郁、进食障碍和癌症。
甘丙肽刺激三种受体亚型GalR1、GalR2和GalR3[Mitsukawa K,2010Galanin,galanin receptors,and drug targets.EXS 102,7-23].这些亚型之间在分布和通路方面存在差异。
GalR1在基底前脑、下丘脑、脊髓和结肠上皮细胞中表达，其中其在炎症性肠病(IBD)的情况下上调。关于刺激GalR1之后的效果知之不多。刺激GalR1似乎与摄食有关[Saar I,2011Novel galanin receptor subtype specific ligands in feedingregulation.Neurochemistry Int 58,714-20]。
GalR2广泛分布在大脑中，但也在脑下垂体和周围组织中发现。已经报道，刺激GalR2在MS[Wraith DC,2009A role for galanin in human and experimentalinflammatory demyelination PNAS 106,15466-71；Zhang L,2012Galanin transgenicmice with elevated circulating galanin levels alleviate demyelination in acuprizone-induced MS mouse model.PLoS One.7(3):e33901]和阿尔茨海默氏症的情形中具有神经保护性，并具有抗焦虑、抗抑郁和抗惊厥效果。
GalR3以低丰度广泛分布[Lu X,2005Distribution and differentialregulation of galanin receptor subtypes in rat brain:effects of seizureactivity.Neuropeptides 39,147-52；Mitsukawa K,2010Galanin,galanin receptors,and drug targets.EXS 102,7-23；Hokfelt T,2008Galanin-25years with amultitalented neuropeptide.Cell Mol Life Sci 65,1793-5；Hokfelt T 2005Galaninand its receptors:Introduction to the Third International Symposium,SanDiego,California,USA,21-22 2004-10.Neuropeptides 39,125；Kuteeva E,2008Galanin,galanin receptor subtypes and depression-like behavior.Cell MolLife Sci 65,1854-63Mol Life Sci 65,1842-53]。配体受体Gal3相互作用方面仅有极少信息可提供[Sollenberg UE,2010Binding of Chimeric Peptides M617and M871toGalanin Receptor Type 3Reveals Characteristics of Galanin Receptor-LigandInteraction.Int J Pept Res Ther 16,17]。
总之，尽管刺激GalR1和GalR3的效果似乎未知或无益，GalR2的激动刺激似乎在MS的情形中起作用[Wraith DC,2009A role for galanin in human and experimentalinflammatory demyelination.PNAS106,15466-71；Zhang L,2012Galanin transgenicmice with elevated circulating galanin levels alleviate demyelination in acuprizone-induced MS mouse model.PLoS One.7(3):e33901]。
GalR2刺激导致神经保护[Elliott-Hunt CR,2007Activation of the galaninreceptor 2(GalR2)protects the hippocampus from neuronal damage.J Neurochem100,780-9]和抗惊厥活性[Lu X,2010GalR2-positive allosteric modulator exhibitsanticonvulsant effects in animal models.PNAS 107,15229-34]。甘丙肽似乎通过1型和2型受体二者发挥这些抗惊厥作用，下游的信号传导级联反应不同[Lerner JT,2008Galanin and epilepsy.Cell Mol Life Sci 65,1864-71Neurochem 100,780-9]。与G(o)2连接的GalR2在小鼠中通过调控K(ATP)和Ca(2+)通道通过甘丙肽介导胰岛素释放的抑制[Tang G,2012Go2G protein mediates galanin inhibitory effects on insulinrelease from pancreaticβcells.PNAS 109,2636-41]。在安全性方面，似乎对于GalR2的激动特异性和对于GalR3的激动特异性降低可能相关。GALR2的主要信号传导是通过磷脂酶C/蛋白激酶C通路经由Gq，其不经由GalR1或GalR3刺激。然而，已经表明，像GalR1和GalR3一样，GalR2还能够与Gi蛋白质偶联以抑制腺苷酸环化酶；并且GalR2还可以刺激MAPK。
本发明的发明人认识到对于表现出不同通路激活、使得能够(根据需求)选择性地刺激治疗相关通路的甘丙肽类似物的需求。因此，他们着手于设计新的受体亚型选择性的、全身活性的、甘丙肽受体配体。更具体地，就其治疗利益而言，他们致力于提供经由GalR2和/或GalR1激动性发挥作用、同时经由GalR3拮抗性而不是或弱激动性发挥作用的甘丙肽。此外，显示出诱导受体内化的能力降低、从而增强其(体内)效力的甘丙肽将会是合意的。
出人意料地发现，通过在甘丙肽中引入羊毛硫氨酸环，可以满足至少这些目标中的一些。无意拘泥于理论，据信通过(甲基)羊毛硫氨酸结构的环化导致构象限制，其调节甘丙肽受体亚型的相互作用。不仅可以通过在内源性肽序列中取代现有残基，还可以通过插入氨基酸来引入(甲基)羊毛硫氨酸。
发明内容
因此，本发明提供一种甘丙肽的环肽类似物，其中甘丙肽类似物包括(甲基)羊毛硫氨酸桥，并且其中类似物具有通式“X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13-X14-X15-X16-X17-X18-X19-X20-X21-X22”、或者其缺少X1和/或至多11个C-末端残基的截短的变体，
其中选自X3、X4、X6、X7、X10和X13-X19的两个残基一起形成结构Ala-S-Ala的羊毛硫氨酸桥或者结构Abu-S-Ala或Ala-S-Abu的甲基羊毛硫氨酸桥，其中：
X1是pE、G、N、RGRG、RGRGN或RGRGG
X2是WN或WT
X3是L、(me)lan、A、D、V、K、Q或N
X4是N、T、Q或(me)lan
X5是S或A
X6是A或(me)lan
X7是G、(me)lan、A或K
X8是Y
X9是L
X10是L、(me)lan或A
X11是G、A或(me)lan
X12是P或A或(me)lan
X13是H、(me)lan、V、Q、P、Q、E、K或A
X14是A、(me)lan、L、Q、P、H、K或I
X15是V、(me)lan、P、F、G、K或A
X16是(me)lan、P、F、L、N或G
X17是N、(me)lan、P、G、S、A或H
X18是H、(me)lan、A、L、P、A或R
X19是R、(me)lan、L、M、F或A
X20是R、A，
X21是L，并且
X22是A，
其中
pE表示焦谷氨酸；
(me)lan表示Lan或meLan，其中Lan代表N-或C-末端半个羊毛硫氨酸(Ala-S-Ala)，并且meLan代表N-或C-末端半个甲基羊毛硫氨酸(Abu-S-Ala或Ala-S-Abu)；
其条件是，X3、X4、X6、X7、X10、X11和X13-X19中不多于2个是一起形成(甲基)羊毛硫氨酸桥的(me)lan，并且其中所述(甲基)羊毛硫氨酸桥的大小为i,i+3或i,i+4或i,i+5。
在另一个实施方式中，本发明提供一种甘丙肽的环肽类似物，其中甘丙肽类似物包括(甲基)羊毛硫氨酸桥，并且其中类似物具有通式“X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13-X14-X15-X16-X17-X18-X19-X20-X21-X22”，其中选自X3、X4、X6、X7、X10和X13-X19的两个残基一起形成结构Ala-S-Ala的羊毛硫氨酸桥或者结构Abu-S-Ala或Ala-S-Abu的甲基羊毛硫氨酸桥，并且其中：
X1是pE、G、N、RGRG、RGRGN或RGRGG
X2是WN或WT
X3是L、(me)lan、A、D、V、K或Q
X4是N、T或(me)lan
X5是S或A
X6是A或(me)lan
X7是G、(me)lan、A或K
X8是Y
X9是L
X10是L、(me)lan或A
X11是G、A或(me)lan，
X12是P或A
X13是H、(me)lan、V、Q、P、Q、E、K或A
X14是A、(me)lan、L、Q、P、H、K或I
X15是V、(me)lan、P、F、G、K或A
X16是(me)lan、P、F、L或G
X17是N、(me)lan、P、G、S或A
X18是H、(me)lan、A、L、P或A
X19是R、(me)lan、L、M、F或A
X20是R或A，
X21是L
X22是A
或者其缺少X1和/或至多10个C-末端残基的截短的变体，
其中pE表示焦谷氨酸(pGlu)；(me)lan表示Lan或meLan，其中Lan代表N-或C-末端半个羊毛硫氨酸(Ala-S-Ala)，并且meLan代表N-或C-末端半个甲基羊毛硫氨酸(Abu-S-Ala或Ala-S-Abu)；
其条件是，X3、X4、X6、X7、X10、X11和X13-X19中不多于2个是一起形成(甲基)羊毛硫氨酸桥的(me)lan，并且其中所述(甲基)羊毛硫氨酸桥的大小为i,i+3；i,i+4或i,i+5。
甘丙肽的环肽类似物是本领域已知的。Carpenter等人(Biochem.1999,38,15295)构建了一种环状类似物Gal(1-6)，其在Asp4和Lys8的侧链之间具有内酰胺桥。这产生了对于GalR2受体亚型表现出低纳摩尔受体结合亲合力和低纳摩尔EC50的类似物。
WO03/099863公开了一种修饰的甘丙肽的肽序列，其可以用作在Ser6和Cys10位置处引入翻译后羊毛硫氨酸环的示例性前体。没有提及产生的环状类似物的特性。
Green等人(Bioorg Med Chem.2013-1-1；21(1):303-10)使用烃纤维包扎(stapling)作为使生物活性肽的螺旋构象稳定化的策略。公开了一种纤维包扎的甘丙肽类似物，其中将全长甘丙肽的Ala-7和Leu-11用(S)-2-(4-)戊烯基)丙氨酸替换。该类似物保留了对GalR1和GalR2的激动剂活性，并抑制了癫痫小鼠模型中的癫痫发作。没有观察受体特异性的变化。
本发明的环状甘丙肽类似物在本文中也称作“羊毛硫-甘丙肽(lanthi-galanin)”，其特征在于通过一起形成(甲基)羊毛硫氨酸桥的X3、X4、X6、X7、X10、X11和X13-X19中的不多于2个形成的(甲基)羊毛硫氨酸结构，并且其中所述(甲基)羊毛硫氨酸桥的大小为i,i+3或i,i+4或i,i+5。
在一个实施方式中，甘丙肽类似物为式X1-X22，即，其含有本文如上定义的所有X1到X22。在另一个实施方式中，其为缺少至多10个C-末端残基的C-末端截短的变体。例如，其为式X1-X12，缺少X13到X22的所有10个残基。其他截短的变体包括X1-X13、X1-X14、X1-X15、X1-X16、X1-X17、X1-X18、X1-X19、X1-X20和X1-X21。如本领域技术人员将会理解，上述注释是指包括一段连续的残基的类似物，例如，X1-X13是指由X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13组成的类似物。优选缺少残基X20-X22的变体。
X1能够选自pE、G、N、RGRG、RGRGN和RGRGG。在优选的方面，X1是pE或G，更优选是pE。在1位上引入焦谷氨酸能够保护类似物不受N-末端水解。此外，出人意料地发现，这使类似物的生物活性朝向经由Gal2R的信号传导的倾向迁移。焦谷氨酸(也称作PCA、5-羟脯氨酸、氧脯氨酸、或焦谷氨酸盐作为其碱性形式)是不常见的氨基酸衍生物，其中谷氨酸或谷氨酰胺的游离氨基环化形成内酰胺。在谷胱甘肽循环中它是通过5-羟脯氨酸酶转化成谷氨酸的代谢物。焦谷氨酸发现于包括细菌视紫红质的许多蛋白质中。N-末端谷氨酸和谷氨酰胺残基能够自发地环化成为焦谷氨酸。
在另一个实施方式中，羊毛硫-甘丙肽缺少N-末端X1，任选地与至多10个残基的C-末端截短组合。因此，另外提供式X2-X22的甘丙肽类似物。在另一方面，本发明提供包括X2-X12、X2-X13、X2-X14、X2-X15、X2-X16、X2-X17、X2-X18、X2-X19、X2-X20、X2-X21的变体，即，含有通式X1-X22的N-末端和C-末端截短两者。
X2是WN或WT。
优选地，X2是WN。
X3是L、(me)lan、A、D、V、K、Q
X4是N、T或(me)lan
X5是S或A
X6是A或(me)lan
X7是G、(me)lan、A或K
一方面，X3是L，X4是N，X5是A，X6是A，且/或X7是G。
X8始终是Y，并且X9始终是L
X10是L、(me)lan或A
X11是G、A、(me)lan，
X12是P或A
X13是H、(me)lan、V、Q、P、Q、E、K、A
X14是A、(me)lan、L、Q、P、H、K、I
例如，X10是L，X11是G，X12是P，X13是H，且/或X14是A。
X15是V、(me)lan、P、F、G、K、A
X16是(me)lan、P、F、L或G，
X17是N、(me)lan、P、G、S、A，
X18是H、(me)lan、A、L、P、A，
X19是R、(me)lan、L、M、F、A
X20是R、A，
X21是L，
X22是A，
本发明的羊毛硫-甘丙肽含有大小为i,i+3或i,i+4或i,i+5的(甲基)羊毛硫氨酸桥。因此，环大小限于其中参与环形成的残基由2、3或4个残基隔开的那些。发现环的大小更大会不利于活性。在一个实施方式中，(甲基)羊毛硫氨酸桥的大小为i,i+3或i,i+4。在一个具体方面，(甲基)羊毛硫氨酸桥的大小为i,i+3。例如，在残基X3和X6、X4和X7、X5和X8、X6和X9、X7和X10或者X8和X11之间形成环。
而且，出人意料地发现，从13位上向前引入环能够在不显著损失活性的情况下进行，同时使得与野生型甘丙肽相比较受体特异性改变。更具体地，发现在C-末端半个肽中引入(甲基)羊毛硫氨酸使得朝向GalR2倾向迁移。因此，在一个实施方式中，选自X13-X19的两个残基一起形成(甲基)羊毛硫氨酸桥。合适的形成环结构的残基对包括X13和X16、X13和X17、X14和X17、X14和X18、X15和X18、以及X15和X19。示例性的类似物为GalM50、GalM51、GalM52和GalM75。在优选的实施方式中，残基X20-X22不存在，并且选自X13-X19的两个残基一起形成(甲基)羊毛硫氨酸桥。
根据本发明的甘丙肽类似物的C-末端羧基能够是游离(COOH)或酰胺(CONH2)形式。在一个实施方式中，类似物通过C-末端酰胺化保护。
取决于其结构，本发明的甘丙肽类似物能够具有一种或多种特定生物学活性。在一个实施方式中，本发明提供能够在表达甘丙肽R1受体(GalR1)的细胞中抑制cAMP产生的类似物。优选地，cAMP产生以小于200nM的EC50被抑制。
另外可选地，甘丙肽类似物能够在表达GalR1的细胞中以小于400nM的EC50诱导β抑制蛋白(arrestin)募集。
甘丙肽类似物能够在表达甘丙肽R2受体的细胞中以小于100nM的EC50诱导钙流出，并能够以小于5μM的EC50诱导β抑制蛋白募集。
在优选的实施方式中，本发明提供一种环状甘丙肽类似物，其相比较于GalR1刺激GalR2的能力增强。术语“GALR2-特异性激动剂”是指由于GALR2被物质激活而能够在细胞中触发应答的类似物，但其不激活(或者以较小的效力激活)GALR1和/或GALR3。识别化合物是否是甘丙肽受体激动剂的方法是本领域已知的，例如，Botella等人(1995)Gastroenterology 108 3-11和Barblivien等人(1995)Neuroreport 61849-1852。示例性的GalR2-特异性类似物包括GalM54和GalM54tr。类似物可以0至100μΜ的结合亲合力与GalR2结合，并且/或者其对于GalR2的特异性比对于GalR1高30倍。优选地，其对于GalR2的特异性比对于GalRl高50倍，更优选地，对于GalR2的特异性比对于GalR1高100倍。
在具体实施方式中，甘丙肽类似物选自：
GWNmelanNAmelanGYLLGPHAVGNHR
GWNmelanNAmelanGYLLGPHAVGNH
GWNLNAAmelanYLmelanGPHAVGNHR
GWNLNAAmelanYLmelanGPHAVGNH
GWNLNAAlanYLLlanGPHAVGNHR
GWNLNAAlanYLLlanGPHAVGNH
GWNLNAAGYLLGAmelanAVmelanNHR
GWNLNAAGYLLGAmelanAVmelanNH
GWNLNAAGYLLGAlanAVlan
GWNLNAAGYLLGAlanAVlanNHR
GWNLNAAGYLLGAlanAVlanNH
GWNLNAAGYLLGAmelanAVGmelanHR
GWNLNAAGYLLGAlanAVGlan
GWNLNAAGYLLGAlanAVGlanHR
GWNLNAAGYLLGAlanAVGNlanR
GWNLNAAGYLLGAlanAVGNlan
GWNLNAAGYLLGAlanAVGNHlan
GWNLNAAGYLLGPHmelanVGmelanHR
GWNLNAAGYLLGPHlanVGlan
GWNLNAAGYLLGPHAmelanGNmelanR
GWNLNAAGYLLGPHAlanGNlan
GWNLNAAGYLLGASlanVGNHlan
pEWNLNAAGYLLGAmelanAVmelanNHR
pEWNLNAAGYLLGAmelanAVGmelanHR
pEWNLNAAGYLLGAmelanAVmelanNH
pEWNLNAAGYLLGAlanAVlan
pEWNLNAAlanYLLlan
pEWNLNAAGYLLGPHmelanVGmelanHR
GWNLNAAGYLLGmelanHAmelanG
GWNLNAAGYLLGPmelanAVmelan
GWNLNAAGYLLAmelanHAmelanG
GWNLNAAGYLLGAmelanAVmelan
pEWNLNAAGYLLAmelanHAmelanG
pEWNLNAAGYLLGAmelanAVmelan
pEWNLNAAGYLLAlanHAlanG
pEWNLNAAGYLLAmelanHAmelanGNHR
GWNLNAAmelanYLmelanGPHAVGNHR
pEWNLNAAGYLLGPHAmelanGNmelanR
GWNLNAAGYLLAmelanHAmelanG
pEWNLNAAGYLLAmelanHAmelanG
GWNLNAAGYLLGAmelanAVmelan
pEWNLNAAGYLLGAmelanAVmelan
GWNVNAAGYLLGAmelanAVmelanNHR
GWNDNAAGYLLGAmelanAVmelanNHR
GWNNNAAGYLLGAmelanAVmelanNHR
GWNLVAAGYLLGAmelanAVmelanNHR
GWNLKAAGYLLGAmelanAVmelanNHR
GWNLDAAGYLLGAmelanAVmelanNHR
GWNLQAAGYLLGAmelanAVmelanNHR
pEWNLNAAGYLLGPlanAVlan
pEWTLNAAlanYLLlan
pEWNLNAAGYLLGPmelanAVmelan
pEWTLNAAmelanYLLmelan
特别优选的类似物包括：
pEWNLNAAGYLLAmelanHAmelanGNHR(GalM50b)，
GWNLNAAGYLLAmelanHAmelanG(GalM89)，
pEWNLNAAGYLLAmelanHAmelanG(GalM89b)，
pEWNLNAAGYLLGAmelanAVmelanNHR(GalM54)，
pEWNLNAAGYLLGAmelanAVmelanNH(GalM54tr)
pEWNLNAAGYLLGPHAmelanGNmelanR(GalM74b)
pEWNLNAAGYLLGPHmelanVGmelanHR(GalM82)
pEWNLNAAGYLLGPlanAVlan(4178B异构体B)和
pEWTLNAAlanYLLlan(4179B异构体B)
pEWNLNAAGYLLGPmelanAVmelan
pEWTLNAAmelanYLLmelan
在具体实施方式中，甘丙肽类似物选自：
pEWNLNAAGYLLAmelanHAmelanGNHR(GalM50b)，
GWNLNAAGYLLAmelanHAmelanG(GalM89)，
pEWNLNAAGYLLAmelanHAmelanG(GalM89b)，
pEWNLNAAGYLLGAmelanAVmelanNHR(GalM54)，
pEWNLNAAGYLLGAmelanAVmelanNH(GalM54tr)
pEWNLNAAGYLLGPHAmelanGNmelanR(GalM74b)
pEWNLNAAGYLLGPHmelanVGmelanHR(GalM82)
pEWNLNAAGYLLGPlanAVlan(4178B异构体B)和
pEWTLNAAlanYLLlan(4179B异构体B)
pEWNLNAAGYLLGPmelanAVmelan
pEWTLNAAmelanYLLmelan
另外提供一种药物组合物，其包括至少一种根据本发明的羊毛硫-甘丙肽。另一个实施方式涉及根据本发明的甘丙肽类似物用作药物。另一个实施方式涉及选自以下的甘丙肽类似物：
pEWNLNAAGYLLAmelanHAmelanGNHR(GalM50b)，
GWNLNAAGYLLAmelanHAmelanG(GalM89)，
pEWNLNAAGYLLAmelanHAmelanG(GalM89b)，
pEWNLNAAGYLLGAmelanAVmelanNHR(GalM54)，
pEWNLNAAGYLLGAmelanAVmelanNH(GalM54tr)
pEWNLNAAGYLLGPHAmelanGNmelanR(GalM74b)
pEWNLNAAGYLLGPHmelanVGmelanHR(GalM82)
pEWNLNAAGYLLGPlanAVlan(4178B异构体B)和
pEWTLNAAlanYLLlan(4179B异构体B)，其用作药物。
pEWNLNAAGYLLGPmelanAVmelan
pEWTLNAAmelanYLLmelan
另外提供一种药物组合物，其包括选自以下的甘丙肽类似物：
pEWNLNAAGYLLAmelanHAmelanGNHR(GalM50b)，
GWNLNAAGYLLAmelanHAmelanG(GalM89)，
pEWNLNAAGYLLAmelanHAmelanG(GalM89b)，
pEWNLNAAGYLLGAmelanAVmelanNHR(GalM54)，
pEWNLNAAGYLLGAmelanAVmelanNH(GalM54tr)
pEWNLNAAGYLLGPHAmelanGNmelanR(GalM74b)
pEWNLNAAGYLLGPHmelanVGmelanHR(GalM82)
p EWNLNAAGYLLGPlanAVlan(4178B异构体B)和
pEWTLNAAlanYLLlan(4179B异构体B)。
pEWNLNAAGYLLGPmelanAVmelan
pEWTLNAAmelanYLLmelan
药物有利地用于预防或治疗脑损伤(injury，damage)或疾病。脑损伤由以下之一导致：栓塞性、血栓性或出血性中风；直接或间接创伤或脑或脊髓手术；心肺旁路手术或肾透析过程中对大脑的缺血性或栓塞性损伤；心肌梗死之后的再灌注脑损伤；脑疾病；免疫损伤、化学损伤或辐射损伤。
脑疾病可以是阿尔茨海默氏症、帕金森氏症、多发性硬化或不同的变种克雅二氏病(variant Creutzfeld Jacob Disease)之一。
例如，发现甘丙肽类似物作为抗焦虑药、抗抑郁药、抗惊厥药或者用于神经保护的用途。待治疗的特别优选的病症为多发性硬化、阿尔茨海默氏症和炎症性肠病。
本文另外提供用于提供根据本发明的环状甘丙肽类似物的方法。在一个实施方式中，通过含有环状二硫桥的“母体”类似物(特别是二硫键桥接的D-Cys-L-Cys类似物)的碱辅助的硫挤出(extrusion)，能够得到羊毛硫氨酸甘丙肽类似物。例如，母体类似物是pEWNLNAAdCYLLC、pEWNLNAAGYLLGAdCAVC、pEWNLNAAGYLLGPHdCVGC或pEWNLNAAGYLLGPHAdCGNC。其中二硫桥通过dC和C-末端C形成。
在另一个实施方式中，该方法包括以下步骤：
(i)提供选自以下的肽(即线性前体肽)：
GWNTNACGYLLGPHAVGNHR，GWNTNACGYLLGPHAVGNH，
GWNLNAATYLCGPHAVGNHR，GWNLNAATYLCGPHAVGNH
GWNLNAASYLLCGPHAVGNHR，GWNLNAASYLLCGPHAVGNH
GWNLNAAGYLLGATAVCNHR，GWNLNAAGYLLGATAVCNH，
GWNLNAAGYLLGASAVC，GWNLNAAGYLLGASAVCNHR，
GWNLNAAGYLLGASAVCNH，GWNLNAAGYLLGATAVGCHR，
GWNLNAAGYLLGASAVGC，GWNLNAAGYLLGASAVGCHR，
GWNLNAAGYLLGASAVGNCR，GWNLNAAGYLLGASAVGNC，
GWNLNAAGYLLGASAVGNHC，GWNLNAAGYLLGPHTVGCHR，
GWNLNAAGYLLGPHSVGC，GWNLNAAGYLLGPHATGNCR，
GWNLNAAGYLLGPHASGNC，GWNLNAAGYLLGASAVGNHC，
QWNLNAAGYLLGATAVCNHR，QWNLNAAGYLLGATAVCNH，
QWNLNAAGYLLGASAVC，QWNLNAASYLLC，
QWNLNAAGYLLGPHTVGCHR，GWNLNAAGYLLGTHACG，
GWNLNAAGYLLGPTAVC，GWNLNAAGYLLATHACG，GWNLNAAGYLLGATAVC，QWNLNAAGYLLATHACG，pEWNLNAAGYLLGATAVC，
QWNLNAAGYLLASHACG，QWNLNAAGYLLATHACGNHR，
GWNLNAATYLCGPHAVGNHR，QWNLNAAGYLLGPHATGNCR，
GWNLNAAGYLLATHACG，QWNLNAAGYLLATHACG，
GWNLNAAGYLLGATAVC，QWNLNAAGYLLGATAVC，
GWNVNAAGYLLGATAVCNHR，GWNDNAAGYLLGATAVCNHR，
GWNNNAAGYLLGATAVCNHR，GWNLVAAGYLLGATAVCNHR，
GWNLKAAGYLLGATAVCNHR，GWNLDAAGYLLGATAVCNHR，
GWNLQAAGYLLGATAVCNHR，QWNLNAAGYLLGPTAVC，
QWTLNAATYLLC，QWNLNAAGYLLGPSAVC，QWTLNAASYLLC
(ii)诱导所述肽的Ser或Thr残基的脱水；和
(iii)通过将脱水的Ser或Thr偶联至所述肽的Cys残基的巯基，诱导环闭合；
步骤(iii)可包括通过化学或酶促手段诱导环闭合。优选地，其包括酶促环闭合。例如，通过根据本领域已知的方法利用(细菌)宿主细胞的羊毛硫肽酶机制。
在肽的N-末端残基是谷氨酰胺(Q)的情形中，该方法优选地还包括根据本领域已知的方法将Q转化成pE，例如，如Rink等人(Journal of Pharmacological andToxicological Methods 61(2010)210-218)所述。
特别优选的用于提供羊毛硫-甘丙肽的线性肽序列包括：
QWNLNAAGYLLATHACGNHR(例如，产生GalM50b)，
GWNLNAAGYLLATHACG(例如，产生GalM89)，
QWNLNAAGYLLATHACG(例如，产生GalM89b)，
QWNLNAAGYLLGATAVCNHR(例如，产生GalM54)，
QWNLNAAGYLLGPHATGNCR(例如，产生GalM74b)QWNLNAAGYLLGPHTVGCHR(例如，产生GalM82)，
QWNLNAAGYLLGPSAVC(例如，产生4178B异构体B)和
QWTLNAASYLLC(例如，产生4179B异构体B)。
QWNLNAAGYLLGPTAVC(产生4178)
QWTLNAATYLLC(产生4179)
另外提供编码上述前体肽的分离的核酸序列，以及包括所述核酸序列的载体，该核酸与编码羊毛硫肽-前导序列的核酸序列在基因方面融合。
优选的核酸序列是编码以下肽序列之一者：
GWNTNACGYLLGPHAVGNHR，GWNTNACGYLLGPHAVGNH，
GWNLNAATYLCGPHAVGNHR，GWNLNAATYLCGPHAVGNH
GWNLNAASYLLCGPHAVGNHR，GWNLNAASYLLCGPHAVGNH
GWNLNAAGYLLGATAVCNHR，GWNLNAAGYLLGATAVCNH，
GWNLNAAGYLLGASAVC，GWNLNAAGYLLGASAVCNHR，
GWNLNAAGYLLGASAVCNH，GWNLNAAGYLLGATAVGCHR，
GWNLNAAGYLLGASAVGC，GWNLNAAGYLLGASAVGCHR，
GWNLNAAGYLLGASAVGNCR，GWNLNAAGYLLGASAVGNC，
GWNLNAAGYLLGASAVGNHC，GWNLNAAGYLLGPHTVGCHR，
GWNLNAAGYLLGPHSVGC，GWNLNAAGYLLGPHATGNCR，
GWNLNAAGYLLGPHASGNC，GWNLNAAGYLLGASAVGNHC，
QWNLNAAGYLLGATAVCNHR，QWNLNAAGYLLGATAVCNH，
QWNLNAAGYLLGASAVC，QWNLNAASYLLC，
QWNLNAAGYLLGPHTVGCHR，GWNLNAAGYLLGTHACG，
GWNLNAAGYLLGPTAVC，GWNLNAAGYLLATHACG，GWNLNAAGYLLGATAVC，QWNLNAAGYLLATHACG，pEWNLNAAGYLLGATAVC，
QWNLNAAGYLLASHACG，QWNLNAAGYLLATHACGNHR，
GWNLNAATYLCGPHAVGNHR，QWNLNAAGYLLGPHATGNCR，
GWNLNAAGYLLATHACG，QWNLNAAGYLLATHACG，
GWNLNAAGYLLGATAVC，QWNLNAAGYLLGATAVC，
GWNVNAAGYLLGATAVCNHR，GWNDNAAGYLLGATAVCNHR，
GWNNNAAGYLLGATAVCNHR，GWNLVAAGYLLGATAVCNHR，
GWNLKAAGYLLGATAVCNHR，GWNLDAAGYLLGATAVCNHR，
GWNLQAAGYLLGATAVCNHR，QWNLNAAGYLLGPTAVC，
QWTLNAATYLLC，QWNLNAAGYLLGPSAVC，QWTLNAASYLLC。
特别优选的编码用于提供羊毛硫-甘丙肽的线性肽序列的核酸包括：
QWNLNAAGYLLATHACGNHR(例如，产生GalM50b)，
GWNLNAAGYLLATHACG(例如，产生GalM89)，
QWNLNAAGYLLATHACG(例如，产生GalM89b)，
QWNLNAAGYLLGATAVCNHR(例如，产生GalM54)，
QWNLNAAGYLLGPHATGNCR(例如，产生GalM74b)
QWNLNAAGYLLGPHTVGCHR(例如，产生GalM82)
QWNLNAAGYLLGPSAVC(例如，产生4178B异构体B)
QWTLNAASYLLC(例如，产生4179B异构体B)。
QWNLNAAGYLLGPTAVC(产生4178)和
QWTLNAATYLLC(产生4179)。
另一个实施方式涉及食品级细菌宿主细胞，优选乳酸乳球菌(L.lactis)宿主细胞，其包括根据本发明的载体，额外包括羊毛硫氨酸引入酶。例如，宿主细胞内源性地含有羊毛硫氨酸抗生素(lantibiotic)酶机制，或者其以编码成熟酶NisB和NisC和易位酶NisT的质粒提供。这些宿主细胞有利地用作用于在肠中在体(in situ)产生羊毛硫-甘丙肽的口服递送系统。
因此，本发明还涉及一种药物组合物，其包括有包括编码上述前体肽的核酸序列的活的宿主细胞以及药学上可接受的载体、稀释剂或运载体。优选地，该组合物经配制用于口服给药。
能够在体产生羊毛硫-甘丙肽的宿主细胞适用于治疗或减轻炎症性肠病相关症状的方法，例如，肠病是克罗恩氏病或溃疡性结肠炎(UC)。
本发明的GalR1和GalR3拮抗剂的治疗用途如下。甘丙肽被视作在IBD中发挥潜在的关键作用。Gal1R是结肠组织中发现的唯一gal受体。Gal1R基因的克隆已经显示了炎症相关转录因子NFκB的多个识别位点。GalR1特异性拮抗剂可以产生新的用于治疗炎症引起的腹泻的药物疗法[Gross 2007 Role of Inflammatory Bowel Disease.Inflamm BowelDisease 13，918-32]。
已经报道，GalR3的拮抗作用减轻胰腺炎[Barreto SG，2011 Galanin receptor 3a potential target for acute pancreatitis therapy.Neurogastroenterol Motil23(3)：e141-51]。而且GalR3拮抗剂似乎起到抗抑郁药的作用[Swanson CJ，2005Anxiolytic-and antidepressant-like profiles of the galanin-3 receptor(Gal3)antagonists SNAP 37889 and SNAP 398299.PNAS 102，17489-94]。
附图说明
图1：示例性类似物GalM51诱导的经由GalR1的β-抑制蛋白募集。
图2：示例性类似物GalM54优先经由GalR2刺激β-抑制蛋白募集。
图3：示例性类似物GalM51和GalM52经由GalR1抑制cAMP产生。
具体实施方式
实验部分
实施例1：合成羊毛硫氨酸-稳定化的甘丙肽类似物(羊毛硫-甘丙肽)
根据已确立的方法制备含有羊毛硫氨酸的甘丙肽变体，例如，如以下文献中所述：Kluskens 2005Post-translational Modification of Therapeutic Peptides by NisB,the Dehydratase of the Lantibiotic Nisin.Biochemistry 44,12827-12834；Kluskens2009Angiotensin-(1-7)with thioether-bridge:an ACE-resistant,potent Ang-(l-7)analogue.J.Pharmacol.Exper.Ther.328,849-854；Rink 2007c NisC,the cyclase ofthe lantibiotic nisin,can catalyze cyclization of designed non-lantibioticpeptides.Biochemistry 46,13179-13189。
简言之，使用包括两个质粒系统的乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)。第一质粒编码羊毛硫氨酸抗生素尼生素(nisin)的前导肽MSTKDFNLDLVSVSKKDSGASPR，其在其C-末端处与目标在于(甲基)羊毛硫氨酸-甘丙肽的前体肽在基因方面融合，上述肽在位置[i]处含有丝氨酸/苏氨酸，并且在位置[i+3]、[i+4]或[i+5]处含有半胱氨酸。将编码包括尼生素前导序列和(甲基)羊毛硫氨酸甘丙肽前体的融合肽的质粒在具有编码成熟酶NisB和NisC以及易位酶NisT的第二质粒pIL3BTC质粒的乳酸乳球菌(L.lactis)中共表达。NisB使丝氨酸或苏氨酸脱水，分别产生脱氢丙氨酸和脱氢丁氨酸。随后，环化酶NisC将脱氢氨基酸与半胱氨酸共价偶联，分别产生羊毛硫氨酸(lan)或甲基羊毛硫氨酸(melan)。第二质粒编码尼生素修饰并输出酶NisBTC。
用于修饰甘丙肽变体的制备(Kluskens 2005Post-translational modificationof therapeutic peptides by NisB,the dehydratase of the lantibioticnisin.Biochemistry 44,12827-34；Rink 2005Lantibiotic structures as guidelinesfor the design of peptides that can be modified by lantibiotic enzymes.44,8873-82)、分离和纯化的实际方法如下：
将培养物乳酸乳球菌NZ9000pIL3BTC pNZ-GalM’X’在补充有0.5％葡萄糖和抗生素氯霉素(5μg/ml)和红霉素(5μg/ml)的M17培养基(Difco)中生长过夜。第二天，将1ml培养物在100ml补充有尼生素(lμg/ml)的最低限度培养基中稀释(Jensen PR,HammerK.1993Minimal Requirements for Exponential Growth of Lactococcus lactis.ApplEnviron Microbiol 59,4363-6；Rink 2005Lantibiotic structures as guidelines forthe design of peptides that can be modified by lantibiotic enzymes.44,8873-82)。培养物进一步生长24-48小时。来自不含细胞的上清液的肽在10％三氯乙酸(TCA)中沉淀。随后，通过将溶解在具有蛋白酶因子Xa(5μg)的40mM Tris(pH＝8)、100mM NaCl、2mMCaCl2中的融合肽在30℃下消化18h，从前导肽释放出甘丙肽。使用HP1050HPLC系统或JASCOPU-1580HPLC系统，将消化混合物应用于Phenomenex C12 250x 4.6mm x 4微米的柱子。将肽使用缓冲液A(milliQ中0.1％三氟乙酸(TFA))和缓冲液B(乙腈中0.1％TFA)以梯度洗脱。使用的梯度为10％至50％缓冲液B，斜率为1.14％/min。收集峰，并使用高速-真空装置干燥。在有或没有l-氰基-4-二甲基氨基吡啶鎓四氟硼酸盐(CDAP)的情况下孵育之后，对肽进行质谱分析。加入CDAP导致+25D的迁移，并且当没有环闭合时存在(Rink.2007c NisC,thecyclase of the lantibiotic nisin,can catalyze cyclization of designed non-lantibiotic peptides.Biochemistry 46,13179-13189)。当需要时，通过将提纯的含有N-末端谷氨酰胺的甘丙肽在50℃下在50mM磷酸盐缓冲液(pH＝7.6)中孵育18h，引入N-末端焦谷氨酸(pE)。进行第二次HPLC运行，用于分离具有N-末端焦谷氨酸的甘丙肽变体。通过将280nm下检测到的HPLC谱中化合物的峰面积与已知量的参照甘丙肽-(1-15)的面积进行比较，对提纯的甘丙肽变体进行定量。通过NisC对具有甲基羊毛硫氨酸的肽进行酶促D,L立体特异性环化。在肽中引入羊毛硫氨酸(lan)的立体特异性在此并未建立，因为高度反应性的脱氢丙氨酸的偶联反应性不仅可以经由NisC催化发生，还可以自发地发生。
实施例2：羊毛硫氨酸-稳定化的甘丙肽类似物(羊毛硫-甘丙肽)的活性
(羊毛硫)甘丙肽的生物学活性在表达GalR1或GalR2受体的CHO-K1细胞系中测定。活性测量使用来自DiscoverX的用于测定抑制蛋白募集(GalR1、GalR2)和cAMP合成抑制(GalR1)的商业化试剂盒进行。此外，表达GalR2受体的HEK293细胞系已经用于来自Molecular Probes的方法，以测量钙流出(GalR2)。
Figure BDA0001406338900000191
Figure BDA0001406338900000201
Figure BDA0001406338900000211
结果
结果总结于表1。数值是指相对于设为值1.0的线性甘丙肽(1-15)观察到的表达的类似物的EC50。ND是指“未测定”。
出人意料地发现，在甘丙肽的C-末端引入(甲基)羊毛硫氨酸使得朝向GalR2倾向轻微迁移。具体地，GalM50b、GalM89b、GalM54、GalM87、GalM74b具有刺激GalR2的倾向。存在N-末端pE似乎有助于一些类似物的GalR2倾向(例如，GalM50b、GalM89b、GalM74b)，但其他则没有(例如，GalM76b)。
而且，对于活性，优选的环位置似乎是C-末端部分。优选地，环位于X12之后。GalM73尽管环更加居中，也保留一些活性。GalM82特别值得关注，因为尽管其活性低，但它小，并呈疏水性，最有可能有利于通过血脑屏障(BBB)。而且，N-末端和C-末端均受保护，可以很容易地经化学合成。
此外，分别具有L4V和L4N替换的GalM92和GalM94经由GalR2具有类似GalWtb的相当的效力。
实施例3
通过二硫桥变体的碱辅助硫挤出得到甘丙肽的化学合成羊毛硫氨酸类似物：
在Pepscan订购两种肽作为原料：
1)Sym-4178：H-QWNLNAAGYLLGPcAVC-OH
该肽与GalM87有关。然而，尽管生物合成的GalM87可能含有D,L羊毛硫氨酸，但化学合成导致一种以上异构体。有趣的是，含有羊毛硫氨酸的异构体之一4178B(表2)具有高活性。
2)Sym-4179：H-QWTLNAAcYLLC-OH
该肽与GalM82有关(表1)。然而，尽管生物合成的GalM82可能含有D,L羊毛硫氨酸，但化学合成导致一种以上异构体。更有趣的是，这些之一4179B(表2)似乎具有高活性。
将肽溶解于0.3％氨水中。将肽在37℃下孵育过夜(o/n)，用于二硫键桥接的肽经由碱辅助的硫挤出引入羊毛硫氨酸。不同的异构体可以通过应用与生物产生的肽所使用的相同的方法经HPLC分离。将不同的异构体提纯，并冻干。将干燥的肽溶于100mM磷酸盐缓冲液pH＝7.6中，将肽在50℃下孵育过夜。HPLC提纯之后，选择形成有pE的肽，并用于不同的甘丙肽受体激活试验。
结果：
Figure BDA0001406338900000231
序列表
<110> 兰硫代佩普有限公司（LANTHIOPEP B.V.）
<120>环状甘丙肽类似物及其用途（CYCLIC GALANIN-ANALOGS 和 USES THEREOF）
<130> MS237/PCT
<140> PCT/EP2016/055266
<141> 2016-03-11
<150> EP 15159102.1
<151> 2015-03-13
<160> 128
<170> PatentIn 版本3.5
<210> 1
<211> 27
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> 变体
<222> (1)..(5)
<223> /取代="pyroGlu" 或 "Gly" 或 "Asn" 或 "Arg-Gly-Arg-Gly"
或 "Arg-Gly-Arg-Gly-Gly"
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (1)..(5)
<223> /注释="该区域可包括1-5个残基"
<220>
<221> 变体
<222> (7)..(7)
<223> /取代"Thr"
<220>
<221> 变体
<222> (8)..(8)
<223> /取代="Abu" 或 "Ala" 或 "Asp" 或 "Val" 或
"Lys" 或 "Gln" 或 "Asn"
<220>
<221> 变体
<222> (9)..(9)
<223> /取代="Thr" 或 "Gln" 或 "Abu" 或 "Ala"
<220>
<221> 变体
<222> (10)..(10)
<223> /取代="Ala"
<220>
<221> 变体
<222> (11)..(11)
<223> /取代="Abu"
<220>
<221> 变体
<222> (12)..(12)
<223> /取代="Abu" 或 "Ala" 或 "Lys"
<220>
<221> 变体
<222> (15)..(15)
<223> /取代="Abu" 或 "Ala"
<220>
<221> 变体
<222> (16)..(16)
<223> /取代="Ala" 或 "Abu"
<220>
<221> 变体
<222> (17)..(17)
<223> /取代="Ala" 或 "Abu"
<220>
<221> 变体
<222> (18)..(18)
<223> /取代="Abu" 或 "Val" 或 "Gln" 或 "Pro" 或 "Glu"
或 "Lys" 或 "Ala"
<220>
<221> 变体
<222> (19)..(19)
<223> /取代="Abu" 或 "Leu" 或 "Gln" 或 "Pro" 或 "His"
或 "Lys" 或 "Ile"
<220>
<221> 变体
<222> (20)..(20)
<223> /取代="Abu" 或 "Pro" 或 "Phe" 或 "Gly" 或 "Lys"
或 "Ala"
<220>
<221> 变体
<222> (21)..(21)
<223> /取代="Abu" 或 "Phe" 或 "Leu" 或 "Asn" 或 "Gly"
或 "Ala"
<220>
<221> 变体
<222> (22)..(22)
<223> /取代="Abu" 或 "Pro" 或 "Gly" 或 "Ser" 或 "Ala"
或 "His"
<220>
<221> 变体
<222> (23)..(23)
<223> /取代="Abu" 或 "Ala" 或 "Leu" 或 "Pro" 或 "Arg"
<220>
<221> 变体
<222> (24)..(24)
<223> /取代="Abu" 或 "Leu" 或 "Met" 或 "Phe" 或 "Ala"
<220>
<221> 变体
<222> (25)..(25)
<223> /取代="Ala"
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (1)..(27)
<223> /注释=" 8、 9、11、12和15-24位可包括单个甲基羊毛硫氨酸或结构Abu-S-Ala、Ala-S-Abu或Ala-S-Ala的羊毛硫氨酸桥 "
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (1)..(27)
<223> /注释="序列中给出的变体残基对于变体位置注释中的那些没有偏好"
<220>
<221> 来源
<223> /注释="取代和优选实施方式的详细说明参见所提交的说明书"
<400> 1
Arg Gly Arg Gly Asn Trp Asn Leu Asn Ser Ala Gly Tyr Leu Leu Gly
1 5 10 15
Pro His Ala Val Pro Asn His Arg Arg Leu Ala
20 25
<210> 2
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 2
Arg Gly Arg Gly
1
<210> 3
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 3
Arg Gly Arg Gly Asn
1 5
<210> 4
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 4
Arg Gly Arg Gly Gly
1 5
<210> 5
<211> 27
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> 变体
<222> (1)..(5)
<223> /取代="pyroGlu" 或 "Gly" 或 "Asn" 或 "Arg-Gly-Arg-Gly"
或 "Arg-Gly-Arg-Gly-Gly"
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (1)..(5)
<223> /注释="该区域可包括1-5个残基"
<220>
<221> 变体
<222> (7)..(7)
<223> /取代"Thr"
<220>
<221> 变体
<222> (8)..(8)
<223> /取代="Abu" 或 "Ala" 或 "Asp" 或 "Val" 或
"Lys" 或 "Gln"
<220>
<221> 变体
<222> (9)..(9)
<223> /取代="Thr" 或 "Abu" 或 "Ala"
<220>
<221> 变体
<222> (10)..(10)
<223> /取代="Ala"
<220>
<221> 变体
<222> (11)..(11)
<223> /取代="Abu"
<220>
<221> 变体
<222> (12)..(12)
<223> /取代="Abu" 或 "Ala" 或 "Lys"
<220>
<221> 变体
<222> (15)..(15)
<223> /取代="Abu" 或 "Ala"
<220>
<221> 变体
<222> (16)..(16)
<223> /取代="Ala" 或 "Abu"
<220>
<221> 变体
<222> (17)..(17)
<223> /取代="Ala"
<220>
<221> 变体
<222> (18)..(18)
<223> /取代="Abu" 或 "Val" 或 "Gln" 或 "Pro" 或 "Glu"
或 "Lys" 或 "Ala"
<220>
<221> 变体
<222> (19)..(19)
<223> /取代="Abu" 或 "Leu" 或 "Gln" 或 "Pro" 或 "His"
或 "Lys" 或 "Ile"
<220>
<221> 变体
<222> (20)..(20)
<223> /取代="Abu" 或 "Pro" 或 "Phe" 或 "Gly" 或 "Lys"
或 "Ala"
<220>
<221> 变体
<222> (21)..(21)
<223> /取代="Abu" 或 "Phe" 或 "Leu" 或 "Gly" 或 "Ala"
<220>
<221> 变体
<222> (22)..(22)
<223> /取代="Abu" 或 "Pro" 或 "Gly" 或 "Ser" 或 "Ala"
<220>
<221> 变体
<222> (23)..(23)
<223> /取代="Abu" 或 "Ala" 或 "Leu" 或 "Pro"
<220>
<221> 变体
<222> (24)..(24)
<223> /取代="Abu" 或 "Leu" 或 "Met" 或 "Phe" 或 "Ala"
<220>
<221> 变体
<222> (25)..(25)
<223> /取代="Ala"
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (1)..(27)
<223> /注释=" 8、 9、11、12、15、16和18-24位可包括单个甲基羊毛硫氨酸或结构Abu-S-Ala、Ala-S-Abu 或 Ala-S-Ala的羊毛硫氨酸桥"
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (1)..(27)
<223> /注释="序列中给出的变体残基对于变体位置注释中的那些没有偏好"
<220>
<221> 来源
<223> /注释="取代和优选实施方式的详细说明参见所提交的说明书"
<400> 5
Arg Gly Arg Gly Asn Trp Asn Leu Asn Ser Ala Gly Tyr Leu Leu Gly
1 5 10 15
Pro His Ala Val Pro Asn His Arg Arg Leu Ala
20 25
<210> 6
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (4),(7)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala 或Ala-S-Abu，并且在4和7位并入肽链
<400> 6
Gly Trp Asn Xaa Asn Ala Xaa Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn His Arg
20
<210> 7
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (4),(7)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala 或Ala-S-Abu，并且在4和7位并入肽链
<400> 7
Gly Trp Asn Xaa Asn Ala Xaa Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn His
<210> 8
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (8),(11)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在8和11位并入肽链
<400> 8
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Xaa Tyr Leu Xaa Gly Pro His Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn His Arg
20
<210> 9
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (8),(11)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在8和11位并入肽链
<400> 9
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Xaa Tyr Leu Xaa Gly Pro His Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn His
<210> 10
<211> 21
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (8),(12)
<223> Xaa = 羊毛硫氨酸。单个羊毛硫氨酸残基代表Ala-S-Ala，并且在8和12位并入肽链
<400> 10
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Xaa Tyr Leu Leu Xaa Gly Pro His Ala
1 5 10 15
Val Gly Asn His Arg
20
<210> 11
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (8),(12)
<223> Xaa = 羊毛硫氨酸。单个羊毛硫氨酸残基代表Ala-S-Ala，并且在8和12位并入肽链
<400> 11
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Xaa Tyr Leu Leu Xaa Gly Pro His Ala
1 5 10 15
Val Gly Asn His
20
<210> 12
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(17)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在14和17位并入肽链
<400> 12
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Xaa Asn His Arg
20
<210> 13
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(17)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在14和17位并入肽链
<400> 13
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Xaa Asn His
<210> 14
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(17)
<223> Xaa =羊毛硫氨酸。单个羊毛硫氨酸残基代表Ala-S-Ala，并且在14和17位并入肽链
<400> 14
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Xaa
<210> 15
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(17)
<223> Xaa =羊毛硫氨酸。单个羊毛硫氨酸残基代表Ala-S-Ala，并且在14和17位并入肽链
<400> 15
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Xaa Asn His Arg
20
<210> 16
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(17)
<223> Xaa =羊毛硫氨酸。单个羊毛硫氨酸残基代表Ala-S-Ala，并且在14和17位并入肽链
<400> 16
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Xaa Asn His
<210> 17
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(18)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在14和18位并入肽链
<400> 17
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Gly Xaa His Arg
20
<210> 18
<211> 18
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(18)
<223> Xaa =羊毛硫氨酸。单个羊毛硫氨酸残基代表Ala-S-Ala，并且在14和18位并入肽链
<400> 18
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Gly Xaa
<210> 19
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(18)
<223> Xaa =羊毛硫氨酸。单个羊毛硫氨酸残基代表Ala-S-Ala，并且在14和18位并入肽链
<400> 19
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Gly Xaa His Arg
20
<210> 20
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(19)
<223> Xaa =羊毛硫氨酸。单个羊毛硫氨酸残基代表Ala-S-Ala，并且在14和19位并入肽链
<400> 20
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn Xaa Arg
20
<210> 21
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(19)
<223> Xaa =羊毛硫氨酸。单个羊毛硫氨酸残基代表Ala-S-Ala，并且在14和19位并入肽链
<400> 21
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn Xaa
<210> 22
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(20)
<223> Xaa =羊毛硫氨酸。单个羊毛硫氨酸残基代表Ala-S-Ala，并且在14和20位并入肽链
<400> 22
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn His Xaa
20
<210> 23
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (15),(18)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在 15和18位并入肽链
<400> 23
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Xaa Val
1 5 10 15
Gly Xaa His Arg
20
<210> 24
<211> 18
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (15),(18)
<223> Xaa =羊毛硫氨酸。单个羊毛硫氨酸残基代表Ala-S-Ala，并且在15和18位并入肽链
<400> 24
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Xaa Val
1 5 10 15
Gly Xaa
<210> 25
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (16),(19)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala 或Ala-S-Abu，并且在16和19位并入肽链
<400> 25
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala Xaa
1 5 10 15
Gly Asn Xaa Arg
20
<210> 26
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (16),(19)
<223> Xaa = 羊毛硫氨酸。单个羊毛硫氨酸残基代表Ala-S-Ala，并且在16和19位并入肽链
<400> 26
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala Xaa
1 5 10 15
Gly Asn Xaa
<210> 27
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成
肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (15),(20)
<223> Xaa =羊毛硫氨酸。单个羊毛硫氨酸残基代表Ala-S-Ala，并且在15和20位并入肽链
<400> 27
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Ser Xaa Val
1 5 10 15
Gly Asn His Xaa
20
<210> 28
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(17)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在14和17位并入肽链
<400> 28
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Xaa Asn His Arg
20
<210> 29
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(18)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在14和18位并入肽链
<400> 29
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Gly Xaa His Arg
20
<210> 30
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(17)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在14和17位并入肽链
<400> 30
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Xaa Asn His
<210> 31
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(17)
<223> Xaa =羊毛硫氨酸。单个羊毛硫氨酸残基代表Ala-S-Ala，并且在14和17位并入肽链
<400> 31
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Xaa
<210> 32
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (8),(12)
<223> Xaa =羊毛硫氨酸。单个羊毛硫氨酸残基代表Ala-S-Ala，并且在8和12位并入肽链
<400> 32
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Xaa Tyr Leu Leu Xaa
1 5 10
<210> 33
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (15),(18)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基 代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在15和18位并入肽链
<400> 33
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Xaa Val
1 5 10 15
Gly Xaa His Arg
20
<210> 34
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (13),(16)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在13和16位并入肽链
<400> 34
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Xaa His Ala Xaa
1 5 10 15
Gly
<210> 35
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(17)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在14和17位并入肽链
<400> 35
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro Xaa Ala Val
1 5 10 15
Xaa
<210> 36
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (13),(16)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在13和16位并入肽链
<400> 36
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Ala Xaa His Ala Xaa
1 5 10 15
Gly
<210> 37
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(17)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在14和17位并入肽链
<400> 37
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Xaa
<210> 38
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (13),(16)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在13和16位并入肽链
<400> 38
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Ala Xaa His Ala Xaa
1 5 10 15
Gly
<210> 39
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(17)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在14和17位并入肽链
<400> 39
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Xaa
<210> 40
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (13),(16)
<223> Xaa =羊毛硫氨酸。单个羊毛硫氨酸残基代表Ala-S-Ala，并且在13和16位并入肽链
<400> 40
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Ala Xaa His Ala Xaa
1 5 10 15
Gly
<210> 41
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (13),(16)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在13和16位并入肽链
<400> 41
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Ala Xaa His Ala Xaa
1 5 10 15
Gly Asn His Arg
20
<210> 42
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (16),(19)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在16和19位并入肽链
<400> 42
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala Xaa
1 5 10 15
Gly Asn Xaa Arg
20
<210> 43
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(17)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在14和17位并入肽链
<400> 43
Gly Trp Asn Val Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Xaa Asn His Arg
20
<210> 44
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(17)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在14和17位并入肽链
<400> 44
Gly Trp Asn Asp Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Xaa Asn His Arg
20
<210> 45
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(17)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在14和17位并入肽链
<400> 45
Gly Trp Asn Asn Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Xaa Asn His Arg
20
<210> 46
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(17)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在14和17位并入肽链
<400> 46
Gly Trp Asn Leu Val Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Xaa Asn His Arg
20
<210> 47
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(17)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在14和17位并入肽链
<400> 47
Gly Trp Asn Leu Lys Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Xaa Asn His Arg
20
<210> 48
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(17)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在14和17位并入肽链
<400> 48
Gly Trp Asn Leu Asp Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Xaa Asn His Arg
20
<210> 49
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(17)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在14和17位并入肽链
<400> 49
Gly Trp Asn Leu Gln Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Xaa Ala Val
1 5 10 15
Xaa Asn His Arg
20
<210> 50
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(17)
<223> Xaa =羊毛硫氨酸。单个羊毛硫氨酸残基代表Ala-S-Ala，并且在14和17位并入肽链
<400> 50
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro Xaa Ala Val
1 5 10 15
Xaa
<210> 51
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (8),(12)
<223> Xaa = 羊毛硫氨酸。单个羊毛硫氨酸残基代表Ala-S-Ala，并且在8和12位并入肽链
<400> 51
Glu Trp Thr Leu Asn Ala Ala Xaa Tyr Leu Leu Xaa
1 5 10
<210> 52
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14),(17)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在14和17位并入肽链
<400> 52
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro Xaa Ala Val
1 5 10 15
Xaa
<210> 53
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (8),(12)
<223> Xaa = 甲基羊毛硫氨酸。单个甲基羊毛硫氨酸残基代表Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且在8和12位并入肽链
<400> 53
Glu Trp Thr Leu Asn Ala Ala Xaa Tyr Leu Leu Xaa
1 5 10
<210> 54
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (8)..(8)
<223> D-Cys
<400> 54
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Cys Tyr Leu Leu Cys
1 5 10
<210> 55
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14)..(14)
<223> D-Cys
<400> 55
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Cys Ala Val
1 5 10 15
Cys
<210> 56
<211> 18
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (15)..(15)
<223> D-Cys
<400> 56
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Cys Val
1 5 10 15
Gly Cys
<210> 57
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (16)..(16)
<223> D-Cys
<400> 57
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala Cys
1 5 10 15
Gly Asn Cys
<210> 58
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 58
Gly Trp Asn Thr Asn Ala Cys Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn His Arg
20
<210> 59
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 59
Gly Trp Asn Thr Asn Ala Cys Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn His
<210> 60
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 60
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Thr Tyr Leu Cys Gly Pro His Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn His Arg
20
<210> 61
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 61
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Thr Tyr Leu Cys Gly Pro His Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn His
<210> 62
<211> 21
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 62
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Ser Tyr Leu Leu Cys Gly Pro His Ala
1 5 10 15
Val Gly Asn His Arg
20
<210> 63
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 63
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Ser Tyr Leu Leu Cys Gly Pro His Ala
1 5 10 15
Val Gly Asn His
20
<210> 64
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 64
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Thr Ala Val
1 5 10 15
Cys Asn His Arg
20
<210> 65
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 65
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Thr Ala Val
1 5 10 15
Cys Asn His
<210> 66
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 66
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Ser Ala Val
1 5 10 15
Cys
<210> 67
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 67
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Ser Ala Val
1 5 10 15
Cys Asn His Arg
20
<210> 68
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 68
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Ser Ala Val
1 5 10 15
Cys Asn His
<210> 69
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 69
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Thr Ala Val
1 5 10 15
Gly Cys His Arg
20
<210> 70
<211> 18
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 70
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Ser Ala Val
1 5 10 15
Gly Cys
<210> 71
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 71
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Ser Ala Val
1 5 10 15
Gly Cys His Arg
20
<210> 72
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 72
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Ser Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn Cys Arg
20
<210> 73
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 73
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Ser Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn Cys
<210> 74
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 74
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Ser Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn His Cys
20
<210> 75
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 75
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Thr Val
1 5 10 15
Gly Cys His Arg
20
<210> 76
<211> 18
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 76
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Ser Val
1 5 10 15
Gly Cys
<210> 77
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 77
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala Thr
1 5 10 15
Gly Asn Cys Arg
20
<210> 78
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 78
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala Ser
1 5 10 15
Gly Asn Cys
<210> 79
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 79
Gln Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Thr Ala Val
1 5 10 15
Cys Asn His Arg
20
<210> 80
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 80
Gln Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Thr Ala Val
1 5 10 15
Cys Asn His
<210> 81
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 81
Gln Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Ser Ala Val
1 5 10 15
Cys
<210> 82
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 82
Gln Trp Asn Leu Asn Ala Ala Ser Tyr Leu Leu Cys
1 5 10
<210> 83
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 83
Gln Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Thr Val
1 5 10 15
Gly Cys His Arg
20
<210> 84
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 84
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Thr His Ala Cys
1 5 10 15
Gly
<210> 85
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 85
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro Thr Ala Val
1 5 10 15
Cys
<210> 86
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 86
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Ala Thr His Ala Cys
1 5 10 15
Gly
<210> 87
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 87
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Thr Ala Val
1 5 10 15
Cys
<210> 88
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 88
Gln Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Ala Thr His Ala Cys
1 5 10 15
Gly
<210> 89
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<400> 89
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Thr Ala Val
1 5 10 15
Cys
<210> 90
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 90
Gln Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Ala Ser His Ala Cys
1 5 10 15
Gly
<210> 91
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 91
Gln Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Ala Thr His Ala Cys
1 5 10 15
Gly Asn His Arg
20
<210> 92
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 92
Gln Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala Thr
1 5 10 15
Gly Asn Cys Arg
20
<210> 93
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 93
Gln Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Thr Ala Val
1 5 10 15
Cys
<210> 94
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 94
Gly Trp Asn Val Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Thr Ala Val
1 5 10 15
Cys Asn His Arg
20
<210> 95
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 95
Gly Trp Asn Asp Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Thr Ala Val
1 5 10 15
Cys Asn His Arg
20
<210> 96
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 96
Gly Trp Asn Asn Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Thr Ala Val
1 5 10 15
Cys Asn His Arg
20
<210> 97
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 97
Gly Trp Asn Leu Val Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Thr Ala Val
1 5 10 15
Cys Asn His Arg
20
<210> 98
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 98
Gly Trp Asn Leu Lys Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Thr Ala Val
1 5 10 15
Cys Asn His Arg
20
<210> 99
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 99
Gly Trp Asn Leu Asp Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Thr Ala Val
1 5 10 15
Cys Asn His Arg
20
<210> 100
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 100
Gly Trp Asn Leu Gln Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Thr Ala Val
1 5 10 15
Cys Asn His Arg
20
<210> 101
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 101
Gln Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro Thr Ala Val
1 5 10 15
Cys
<210> 102
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 102
Gln Trp Thr Leu Asn Ala Ala Thr Tyr Leu Leu Cys
1 5 10
<210> 103
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 103
Gln Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro Ser Ala Val
1 5 10 15
Cys
<210> 104
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 104
Gln Trp Thr Leu Asn Ala Ala Ser Tyr Leu Leu Cys
1 5 10
<210> 105
<211> 23
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 105
Met Ser Thr Lys Asp Phe Asn Leu Asp Leu Val Ser Val Ser Lys Lys
1 5 10 15
Asp Ser Gly Ala Ser Pro Arg
20
<210> 106
<211> 30
<212> PRT
<213> 未知
<220>
<221> 来源
<223> /注释="未知的说明：甘丙肽多肽"
<400> 106
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn His Arg Ser Phe Ser Asp Lys Asn Gly Leu Thr Ser
20 25 30
<210> 107
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 107
Gly Trp Thr Leu Asn Ser Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala
1 5 10 15
<210> 108
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 108
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn His Arg
20
<210> 109
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 109
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Ala Thr His Ala Cys
1 5 10 15
Gly Asn His Arg
20
<210> 110
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<400> 110
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Ala Thr His Ala Cys
1 5 10 15
Gly Asn His Arg
20
<210> 111
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<400> 111
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Thr Ala Val
1 5 10 15
Cys Asn His Arg
20
<210> 112
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<400> 112
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Thr Ala Val
1 5 10 15
Cys Asn His
<210> 113
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<400> 113
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala Thr
1 5 10 15
Gly Asn Cys Arg
20
<210> 114
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<400> 114
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Ala Thr Ala Val
1 5 10 15
Gly Cys His Arg
20
<210> 115
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<400> 115
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Ser Tyr Leu Leu Cys
1 5 10
<210> 116
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<400> 116
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Thr Val
1 5 10 15
Gly Cys His Arg
20
<210> 117
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<400> 117
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro Thr Ala Val
1 5 10 15
Cys
<210> 118
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> pyro-Glu
<400> 118
Glu Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Ala Thr His Ala Cys
1 5 10 15
Gly
<210> 119
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 119
Gly Trp Asn Leu Asn Lys Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn His Arg
20
<210> 120
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 120
Gly Trp Asn Leu Asn Asp Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn His Arg
20
<210> 121
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 121
Gly Trp Asn Leu Asn Leu Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn His Arg
20
<210> 122
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 122
Gly Trp Asn Leu Asn Trp Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn His Arg
20
<210> 123
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 123
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Lys Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn His Arg
20
<210> 124
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 124
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Asp Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn His Arg
20
<210> 125
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 125
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gln Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn His Arg
20
<210> 126
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<400> 126
Gly Trp Asn Leu Asn Ala Ala Pro Tyr Leu Leu Gly Pro His Ala Val
1 5 10 15
Gly Asn His Arg
20
<210> 127
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14)..(14)
<223> D-Cys
<400> 127
Gln Trp Asn Leu Asn Ala Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Pro Cys Ala Val
1 5 10 15
Cys
<210> 128
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> 来源
<223> /注释="人工序列的说明：合成肽"
<220>
<221> MOD_RES
<222> (8)..(8)
<223> D-Cys
<400> 128
Gln Trp Thr Leu Asn Ala Ala Cys Tyr Leu Leu Cys
1 5 10

Claims (15)

1.一种甘丙肽的环状类似物，其中所述甘丙肽类似物选自：
pEWNLNAAGYLLGAmelanAVmelanNHR
pEWNLNAAGYLLGAmelanAVmelanNH
pEWNLNAAGYLLAmelanHAmelanGNHR
pEWNLNAAGYLLGPHAmelanGNmelanR
GWNLNAAGYLLAmelanHAmelanG
pEWNLNAAGYLLAmelanHAmelanG和
pEWNLNAAGYLLGPmelanAVmelan,
pE表示焦谷氨酸，
melan代表N-或C-末端半个甲基羊毛硫氨酸，其中甲基羊毛硫氨酸是Abu-S-Ala或Ala-S-Abu，并且两个melan一起形成甲基羊毛硫氨酸桥。
2.一种药物组合物，其包括至少一种根据权利要求1所述的甘丙肽类似物。
3.根据权利要求1所述的甘丙肽类似物在制备用于治疗多发性硬化、治疗阿尔茨海默氏症、抗焦虑、抗抑郁、抗惊厥、用于神经保护的药物中的用途。
4.一种用于提供根据权利要求1所述的环状甘丙肽类似物的方法，其包括以下步骤：
（i）提供选自以下的肽
QWNLNAAGYLLGATAVCNHR
QWNLNAAGYLLGATAVCNH
QWNLNAAGYLLATHACGNHR
QWNLNAAGYLLGPHATGNCR
GWNLNAAGYLLATHACG
QWNLNAAGYLLATHACG和
QWNLNAAGYLLGPTAVC；
（ii）诱导所述肽的Ser或Thr残基的脱水；
（iii）通过将脱水的Ser或Thr偶联至所述肽的Cys残基的巯基，诱导环闭合；
（iv）任选地将N-末端Q转化成pE。
5.根据权利要求4所述的方法，其中步骤（iii）包括通过化学或酶促手段诱导环闭合。
6.一种分离的核酸，其编码根据权利要求4所述的肽。
7.一种载体，其包括根据权利要求6所述的分离的核酸序列，其中所述核酸与编码羊毛硫肽前导序列的核酸序列在基因方面融合。
8.一种食品级细菌宿主细胞，其包括根据权利要求7所述的载体。
9.根据权利要求8所述的食品级细菌宿主细胞，其为乳酸乳球菌（L. lactis）宿主细胞。
10.根据权利要求8或9所述的食品级细菌宿主细胞，其还包括羊毛硫氨酸引入酶。
11.根据权利要求8-10中任一项所述的宿主细胞在制备作为用于在肠中产生羊毛硫-甘丙肽的口服递送系统的药物中的用途。
12.一种药物组合物，其包括活的根据权利要求8-10中任一项所述的宿主细胞和药学上可接受的载体、稀释剂。
13.根据权利要求12所述的药物组合物，其中所述组合物经配制用于口服给药。
14.根据权利要求12或13所述的组合物在制备用于治疗或减轻炎症性肠病相关症状的药物中的用途。
15.根据权利要求14所述的用途，其中所述肠病是克罗恩氏病或溃疡性结肠炎。
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