CN107515237B - 用于测量土霉素的光电化学传感器及其制备方法和应用 - Google Patents
用于测量土霉素的光电化学传感器及其制备方法和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107515237B CN107515237B CN201710563906.8A CN201710563906A CN107515237B CN 107515237 B CN107515237 B CN 107515237B CN 201710563906 A CN201710563906 A CN 201710563906A CN 107515237 B CN107515237 B CN 107515237B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- oxytetracycline
- tio
- aptamer
- fto
- electrode
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- IWVCMVBTMGNXQD-PXOLEDIWSA-N oxytetracycline Chemical compound C1=CC=C2[C@](O)(C)[C@H]3[C@H](O)[C@H]4[C@H](N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)[C@@]4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O IWVCMVBTMGNXQD-PXOLEDIWSA-N 0.000 title claims abstract description 78
- 239000004100 Oxytetracycline Substances 0.000 title claims abstract description 75
- 229960000625 oxytetracycline Drugs 0.000 title claims abstract description 75
- 235000019366 oxytetracycline Nutrition 0.000 title claims abstract description 75
- IWVCMVBTMGNXQD-UHFFFAOYSA-N terramycin dehydrate Natural products C1=CC=C2C(O)(C)C3C(O)C4C(N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)C4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O IWVCMVBTMGNXQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 75
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 12
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 claims abstract description 74
- GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N titanium dioxide Inorganic materials O=[Ti]=O GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 47
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims abstract description 36
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 31
- 229910021389 graphene Inorganic materials 0.000 claims abstract description 31
- OGIDPMRJRNCKJF-UHFFFAOYSA-N titanium oxide Inorganic materials [Ti]=O OGIDPMRJRNCKJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 27
- 238000000151 deposition Methods 0.000 claims abstract description 12
- 238000002848 electrochemical method Methods 0.000 claims abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 22
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 20
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 claims description 18
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 11
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 11
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 10
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 claims description 10
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 8
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 7
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 230000008021 deposition Effects 0.000 claims description 7
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000001027 hydrothermal synthesis Methods 0.000 claims description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 6
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 5
- 238000007664 blowing Methods 0.000 claims description 4
- 238000002484 cyclic voltammetry Methods 0.000 claims description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 4
- 229910052724 xenon Inorganic materials 0.000 claims description 4
- FHNFHKCVQCLJFQ-UHFFFAOYSA-N xenon atom Chemical compound [Xe] FHNFHKCVQCLJFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- ZOMNIUBKTOKEHS-UHFFFAOYSA-L dimercury dichloride Chemical class Cl[Hg][Hg]Cl ZOMNIUBKTOKEHS-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- SOQBVABWOPYFQZ-UHFFFAOYSA-N oxygen(2-);titanium(4+) Chemical compound [O-2].[O-2].[Ti+4] SOQBVABWOPYFQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- FPCJKVGGYOAWIZ-UHFFFAOYSA-N butan-1-ol;titanium Chemical compound [Ti].CCCCO.CCCCO.CCCCO.CCCCO FPCJKVGGYOAWIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 claims description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 13
- 230000005518 electrochemistry Effects 0.000 abstract description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 230000004044 response Effects 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 5
- 238000004070 electrodeposition Methods 0.000 description 5
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 5
- KIPLYOUQVMMOHB-MXWBXKMOSA-L [Ca++].CN(C)[C@H]1[C@@H]2[C@@H](O)[C@H]3C(=C([O-])[C@]2(O)C(=O)C(C(N)=O)=C1O)C(=O)c1c(O)cccc1[C@@]3(C)O.CN(C)[C@H]1[C@@H]2[C@@H](O)[C@H]3C(=C([O-])[C@]2(O)C(=O)C(C(N)=O)=C1O)C(=O)c1c(O)cccc1[C@@]3(C)O Chemical compound [Ca++].CN(C)[C@H]1[C@@H]2[C@@H](O)[C@H]3C(=C([O-])[C@]2(O)C(=O)C(C(N)=O)=C1O)C(=O)c1c(O)cccc1[C@@]3(C)O.CN(C)[C@H]1[C@@H]2[C@@H](O)[C@H]3C(=C([O-])[C@]2(O)C(=O)C(C(N)=O)=C1O)C(=O)c1c(O)cccc1[C@@]3(C)O KIPLYOUQVMMOHB-MXWBXKMOSA-L 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 238000001548 drop coating Methods 0.000 description 3
- 229910021397 glassy carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002114 nanocomposite Substances 0.000 description 3
- 229940063650 terramycin Drugs 0.000 description 3
- 238000004506 ultrasonic cleaning Methods 0.000 description 3
- RBTBFTRPCNLSDE-UHFFFAOYSA-N 3,7-bis(dimethylamino)phenothiazin-5-ium Chemical group C1=CC(N(C)C)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 RBTBFTRPCNLSDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 2
- 239000008151 electrolyte solution Substances 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 2
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 229960000907 methylthioninium chloride Drugs 0.000 description 2
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 238000004626 scanning electron microscopy Methods 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091081406 G-quadruplex Proteins 0.000 description 1
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 238000000861 blow drying Methods 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 238000004502 linear sweep voltammetry Methods 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L magnesium chloride Substances [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000008239 natural water Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000767 polyaniline Polymers 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 238000011896 sensitive detection Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 229940072172 tetracycline antibiotic Drugs 0.000 description 1
- 239000000273 veterinary drug Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/28—Electrolytic cell components
- G01N27/30—Electrodes, e.g. test electrodes; Half-cells
- G01N27/305—Electrodes, e.g. test electrodes; Half-cells optically transparent or photoresponsive electrodes
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/28—Electrolytic cell components
- G01N27/30—Electrodes, e.g. test electrodes; Half-cells
- G01N27/327—Biochemical electrodes, e.g. electrical or mechanical details for in vitro measurements
- G01N27/3275—Sensing specific biomolecules, e.g. nucleic acid strands, based on an electrode surface reaction
- G01N27/3278—Sensing specific biomolecules, e.g. nucleic acid strands, based on an electrode surface reaction involving nanosized elements, e.g. nanogaps or nanoparticles
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Electrochemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
- Investigating Or Analyzing Materials By The Use Of Electric Means (AREA)
- Investigating Or Analyzing Materials By The Use Of Fluid Adsorption Or Reactions (AREA)
Abstract
本发明涉及电化学技术领域、环境检测技术领域，特别涉及一种用于检测土霉素的光电化学传感器。该传感器为土霉素适配体/TiO2‑rgo/FTO电极；所述土霉素适配体的序列如SEQ ID NO:1所示。其制备方法是先在FTO导电玻璃上沉积纳米TiO2，得到TiO2/FTO导电玻璃电极，再将氧化石墨烯溶液采用电化学方法进行还原并沉积在TiO2/FTO导电玻璃电极上，得到TiO2‑rgo/FTO电极，然后将土霉素适配体附着在TiO2‑rgo/FTO电极上，得到适配体/TiO2‑rgo/FTO电极。该测量土霉素的光电化学传感器性能优良、稳定性可靠、低成本以及选择性很强，实现了对溶液中微量土霉素的检测。
Description
技术领域
本发明涉及电化学技术领域、环境检测技术领域，特别涉及一种用于检测土霉素的光电化学传感器。
背景技术
土霉素是一种四环素类抗生素，由于抗菌性好且价格便宜，被滥用于兽药和饲料添加剂中, 从而导致在食品和自然水体中大量残留，对人类的健康和环境的安全造成严重的威胁。因此，开发出灵敏、特异性强、快速、低成本的测定土霉素的残留方法是十分必要的。
中国专利公开号CN 105259231公开了一种用于土霉素检测的电化学适体电极及其制备方法，该适体电极包括玻碳电极，所述玻碳电极外表面从里到外依次附有还原石墨烯-金纳米复合材料层，土霉素抗体层和牛血清白蛋白封闭层，该适体电极制备方法简单，性能稳定，电极的重复性好，适用于食品安全中土霉素的检测和生物传感器产业化的实际应用。中国专利公开号CN 104777206公开了一种检测土霉素的适体电极及其制备方法，该适体电极在玻碳电极上自下而上依次修饰有石墨烯- 金纳米复合物、BSA-OTC 复合物。信号层为亚甲基蓝修饰的在RCA 链扩增反应下折叠成G 四连体结构的核酸适配体，通过亚甲基蓝的量反映目标物的含量，该适体电极制备方法简单，性能稳定，电极的重复性好，适用于药品安全中土霉素的检测和生物传感器产业化的实际应用。中国专利公开号CN103616423公开了一种检测食品中土霉素（OTC）的适配体传感器，利用氧化石墨烯- 聚苯胺（GO-PANI）和辣根过氧化物酶（HRP）作为放大策略，构建了竞争型适配体传感器用于土霉素（OTC）的超灵敏检测，该发明制备的竞争型适配体传感器选择性强、灵敏度高、操作简单快速，适合食品中土霉素（OTC）的检测。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种新的土霉素适配体光电化学生物传感器，并提供其制备方法和应用。
本发明解决上述技术问题的方案是：
一种土霉素适配体光电化学生物传感器，为土霉素适配体/TiO2-rgo/FTO电极；所述土霉素适配体的序列如SEQ ID NO:1所示。
上述土霉素适配体光电化学生物传感器的制备方法是，先在FTO导电玻璃上采用水热法制备纳米TiO2，得到TiO2/FTO导电玻璃电极，再将氧化石墨烯溶液采用电化学方法进行还原并沉积在TiO2/FTO导电玻璃电极上，得到TiO2-rgo/FTO电极，然后将土霉素适配体修饰在TiO2-rgo/FTO电极上，得到适配体/TiO2-rgo/FTO电极(Aptamer//TiO2-rgo/FTO)。
进一步的，具体方法是：
（1）清洗FTO导电玻璃并烘干；
（2）FTO导电玻璃上用水热法制备纳米二氧化钛：在容器中按20~80:和20~80的体积份数依次加入超纯水、浓盐酸，然后在搅拌的条件下缓慢的加入0.5-2体积份数的钛酸正丁酯，搅拌均匀，得到混合液；将烘干的FTO导电玻璃放入清洗干净并且干燥过的高压反应釜的内衬中，并且量取适量的混合液倒入其中；反应温度为80℃-200℃，时间为4-12h；样品自然冷却后，用超纯水清洗玻璃，晾干；然后放入300-600℃马弗炉中恒温2-5h后，即得到TiO2/FTO导电玻璃电极；
（3）rGO 修 饰 TiO2/FTO导电玻璃电极的制备：制备浓度为0.1-2mg/mL的氧化石墨烯水溶液；将TiO2/FTO导电玻璃的面积剪切成0.25-1cm2，以这种面积的TiO2/FTO导电玻璃作为工作电极，铂丝作为对电极，饱和甘汞电极作为参比电极，采用循环伏安法进行还原，扫描范围为－2.5～2.5 V，扫描速率为 50-200 m V·s－1；待 GO 沉积完全，取出工作电极，去离子水冲洗并用吹干，得到TiO2-rgo/FTO电极；
（4）修饰OTC适配体：在TiO2-rgo/FTO电极的表面上滴涂30-100μL的0.01%~0.2%的壳聚糖溶液，待其干燥后，用去离子水清洗，再吹干，然后将30-100μL 1%-5%戊二醛溶液滴涂到修饰好的电极表面，在室温黑暗放置1h，清洗并干燥后，然后在上面滴涂20-50μL的OTC适配体，在4-30℃中放置2-12h，之后用PBS缓冲液洗去未反应的OTC适配体，得到适配体/TiO2-rgo/FTO电极(Aptamer//TiO2-rgo/FTO)。
优选的，步骤（4）所述壳聚糖溶液浓度优选0.1%，滴涂量优选为90μL。
优选的，步骤（3）在 150 W 氙灯辐照和加偏压为0.1V条件下，氧化石墨烯沉积时间优选为300s。
一种上述土霉素适配体光电化学生物传感器的应用，是用于水样中土霉素含量的检测。
一种上述土霉素适配体光电化学生物传感器检测溶液中土霉素含量的方法是，将土霉素适配体光电化学生物传感器放入用PBS缓冲溶液稀释的待测水样中， 30-60℃反应1h，用超纯水清洗，然后用电化学工作站进行信号检测；采用安培电流时间曲线法，初始电位为-0.2V- 0.2V，运行时间为30-100s，来检测传感器与土霉素反应前后的光电流值。本发明具有如下有益效果：
本发明是在FTO上用水热法合成TiO2再利用电化学沉积石墨烯，并将其作为光电传感的基底，然后在这个基础上固定OTC适配体，得到土霉素适配体光电传感器。利用土霉素适配体对土霉素检测的专一性与光电化学方法的快速、经济、简单、灵敏的优点相结合，成功的构建了一种性能优良、稳定可靠、低成本以及选择性强的测量土霉素光电化学传感器，实现了对水样中微量土霉素的检测。选择壳聚糖滴涂量的浓度为0.1%，电化学沉积石墨烯的时间为300s的最优条件，该传感器的线性范围是5.0×10-6～5.0×10-9mol/L，检测下限为1.0×10-9mol/L，可以用于实际生活中对土霉素残留量的测定。
附图说明
图1为氧化石墨烯的红外光谱图。
图2为纳米TiO2和复合材料TiO2-rgo的扫描电子显微镜图。
图3为不同修饰电极在PBS缓冲液中光电流的大小图。
图4为不同修饰电极的阻抗图。
图5为光电流与滴涂的壳聚糖浓度的关系图。
图6为TiO2/FTO电极浸入GO电解液中扫描不同时间对其光电流的影响图。
图7为不同浓度的土霉素对Aptamer/TiO2-rgo/FTO光电流响应上的影响图。
图8为Aptamer/TiO2-rgo/FTO电极在PBS缓冲溶液中测定300s的光电流数据图。
具体实施方式
下面结合具体实验对本发明做详细的说明。
实验方法
1.1试剂的配制
1、OTC-aptamer的反应液：各组分浓度为：100mM NaCl ,20mM Tris-HCl,5mM KCl,1mM CaCl2,2mM MgCl2,pH=7.6，121℃灭菌15min，4℃保存。
2、OTC-aptamer溶液：OTC-aptamer的链序列是：5’-NH2-（CH2）6-GGA ATT CGC TAGCAG GTT GAC GTT GAC GCT GGTGCC CGG TTG TGG TGC GAG TGT TGT GTG GAT CCG AGCTCC ACG TG-3’，每只管内装有1 OD的DNA干粉，先将其在12000r下离心1min，使粉末离心至底部，加入适当体积缓冲液配成浓度为100μM的贮存液，于-20℃冰箱保存。实验过程中所需浓度为1.5μM，用缓冲液(pH=7.4)稀释贮存液得到所需的浓度，并再95℃加热5min进行淬火，自然冷却至室温后于4℃冰箱保存。
3、OTC溶液（0.01M）：称取0.046g的土霉素用PBS缓冲液溶解，定容到10ml，置于4℃避光保存。所需不同浓度的OTC以此逐级稀释。
4、PBS缓冲液：由0.1M磷酸二氢钾和0.1M磷酸氢二钠配制。
氧化石墨烯（GO）制备
本论文采用常规的Hummers法来制备实验所需的氧化石墨烯。具体方法为现有技术，在此不详细阐述。
传感器的构建和检测
本文的实验步骤有以下两个大的部分构成：第一：传感器的构建。第二：光电信号的检测。
一、传感器的构建。
1.导电玻璃（FTO）的清洗：先用丙酮超声清洗15min，然后在无水乙醇中超声清洗15min，接着在超纯水中超声清洗15min，最后在烘箱中烘干。
2.导电玻璃（FTO）上制备纳米TiO2：用水热法制备纳米二氧化钛，先在100mL的烧杯中加入30mL的超纯水，再往里面加入30mL的浓盐酸，搅拌的条件下缓慢的加入1mL的钛酸正丁酯，搅拌30min，得到混合液。将烘干的导电玻璃（FTO）放入清洗干净并且干燥过的高压反应釜的内衬中，并且量取适量的混合液倒入其中。反应温度为160℃，时间为6h。样品自然冷却后，用超纯水清洗玻璃，晾干。然后放入450℃马弗炉中恒温3h后，即得到TiO2/FTO导电玻璃电极。
3.rGO 修 饰 TiO2/FTO导电玻璃电极的制备：将100 mg氧化石墨烯分散于300 mL去离子水中，超声条件下分散2 h，得到氧化石墨烯（GO）。将TiO2/FTO导电玻璃的面积剪切成1cm2，以这种面积的TiO2/FTO导电玻璃作为工作电极，铂丝作为对电极，饱和甘汞电极(SEC) 作为参比电极，采用循环伏安法( 扫描范围为－2.5～2.5 V，扫描速率为 50 m V·s－1) 进行还原。待 GO 沉积完全，取出工作电极，去离子水冲洗并用吹干。得到TiO2-rgo/FTO电极。
4.修饰OTC适配体：在TiO2-rgo/FTO电极的表面上滴涂90μL的0.1%的壳聚糖溶液，待其干燥后，用去离子水清洗，再吹干。然后将50μL稀释好的戊二醛溶液（2.5%）滴涂到修饰好的电极表面，在室温黑暗放置1h。清洗并干燥后，然后在上面滴涂50μL的OTC适配体，在4℃的冰箱中放置12h。之后拿用PBS缓冲液洗去未反应的OTC适配体，得到适配体/TiO2-rgo/FTO电极（Aptamer//TiO2-rgo/FTO）。
二、光电信号的检测过程。
将制备好的传感器（适配体/TiO2-rgo/FTO）与50μL的0.1M PBS（pH=7.4）含有不同的浓度的OTC在60℃反应1h，然后用超纯水清洗，进行信号检测。实验中利用氙灯作为本实验的激发光源，电化学工作站的型号是CHI600D，采用安培电流时间曲线法（初始电位为-0.1V，运行时间为100s）来检测传感器与OTC反应之前和之后的光电流值。
实验结果及分析
2.1 TiO2-rgo纳米复合材料的表征
一、氧化石墨烯的红外光谱图
图1为氧化石墨烯的红外光谱图，在图中我们可以清晰的找到主要官能团的特征峰：在1710 cm-1处对应的是C=O的伸缩振动吸收峰，在1390 cm-1处对应的是O-H的变形振动吸收峰，在1630 cm-1处对应的是C=C伸缩振动峰，在1060 cm-1处对应的是C-O-C的伸缩振动吸收峰，在3410cm-1处对应的是O-H伸缩振动峰。说明氧化石墨烯具有较多的含氧官能团。
二、纳米TiO2和复合材料TiO2-rgo的扫描电子显微镜图
图2为纳米TiO2和复合材料TiO2-rgo的扫描电子显微镜图。如图2所示，图2的图A是纳米TiO2的扫描电子显微镜图，图B是复合材料TiO2-rgo的扫描电子显微镜图。如图A可知，纳米TiO2排列整齐，呈现棒状; 如图B可知，纳米TiO2表面均匀的覆盖着还原氧化石墨烯，可以说明还原氧化石墨与纳米TiO2很好的结合在一起。
传感器的表征
2.2.1 不同材料对光电流的影响
图3为不同修饰电极在PBS缓冲液中光电流的大小图（（a）TiO2-rgo/FTO，（b）Aptamer/TiO2-rgo/FTO，（c）TiO2/FTO，（d）与100nM的OTC反应的Aptamer/TiO2-rgo/FTO），图3是在0.1M PBS（pH=7.4）缓冲液以及偏执电压为0.1V的条件下的光电流响应，曲线a反应了TiO2-rgo/FTO电极产生的光电流的大小，而曲线c反应了TiO2/FTO电极产生的光电流的大小，可以明显的看到TiO2-rgo/FTO电极产生的光电流比TiO2/FTO电极产生的光电流大，是因为石墨烯具有二维的π–π 共轭结构和较大的表面积，因此可以接收TiO2产生的光生电子并且迅速地传递到导电基底上，从而实现了电荷空穴的分离，并且能够降低光生电子与空穴的复合，最终加速光电子的转移从而使光电流增大。曲线b反应了Aptamer/TiO2-rgo/FTO电极产生光电流的大小，可以看出明显比TiO2-rgo/FTO电极产生的光电流小，是因为修饰上的碱基增大了电极的阻抗，阻碍了光电子的转移，最终导致光电流变小。曲线d是和100nMOTC反应后产生的光电流大小，由图可以看出光电流在减小。因为土霉素可以和OTC适配体特异性结合，阻碍光电子的转移，导致光电流的变小，从而说明OTC适配体是和土霉素有结合。
不同修饰电极阻抗分析
本文探究了在电解质溶液（5mM K3Fe(CN)6-K4Fe(CN)6-0.2M KCl）中不同电极的交流阻抗。图4为不同修饰电极的阻抗图（a- TiO2-rgo/FTO， b-TiO2/FTO，c-FTO， d-Aptamer/TiO2-rgo/FTO， e-OTC/ Aptamer/TiO2-rgo/FTO 电解质溶液是由5 mM K3Fe(CN)6/ K4Fe(CN)6-0.2 M KCl组成)
。如图4所示，曲线a为TiO2-rgo/FTO、曲线b为TiO2/FTO、曲线c为FTO导电玻璃、曲线d为Aptamer/TiO2-rgo/FTO、曲线e为OTC/ Aptamer/TiO2-rgo/FTO的交流阻抗(IMP)。我们比较电极阻抗的大小是通过观察谱图中半圆的直径的大小，半圆直径越小，电极阻抗就越小。从图中看出到它们阻抗的大小，其顺序为：e>d>c>b>a， TiO2-rgo/FTO电极中由于石墨烯的存在大大减小了电子在电极中的传输阻力，增强电子的传递速度，因此TiO2-rgo/FTO电极能够具有更好的光电转换性能。因为适配体对电子的传递具有较大的阻碍作用，从而导致修饰上适配体的电极阻抗变大。
优化实验条件
2.3.1 滴涂壳聚糖的浓度
图5为光电流与滴涂的壳聚糖浓度的关系图，是保持其他实验条件不变，分别向TiO2/FTO电极表面滴涂0.01%，0.05%，0.1%，0.15%,0.2%的壳聚糖溶液，得到的修饰电极再修饰相同浓度的OTC适配体，然后在0.1MPBS缓冲溶液中的光电流响应。从图可以得到的信息是：当滴涂壳聚糖的浓度的不断增大时，其对应的光电流信号也在不断地增大；其滴涂壳聚糖的浓度为0.1%时其光电流达到最大值，但当滴涂壳聚糖的浓度大于0.1%时，其对应的光电流信号就会减小。其原因是壳聚糖对电子的传递有一定的阻碍作用，壳聚糖溶液是提供氨基与适配体进行结合的，因此选择滴涂壳聚糖溶液的浓度为0.1% 。
电化学沉积氧化石墨烯的时间
图6为TiO2/FTO电极浸入GO电解液中扫描不同时间对其光电流的影响图（a沉积时间300s，b沉积时间400s，c沉积时间200s ，d沉积时间500s，e沉积时间100s），是将TiO2/FTO电极放入GO溶液中用循环伏安法还原不同时间（圈数）并在 150 W 氙灯辐照和加偏压为0.1V条件下的光电流响应结果。由图可知，在电化学沉积时间为300s时，GO 修饰的TiO2/FTO的电极得到的光电流值最大。当电化学沉积时间越来越少时，TiO2/FTO电极表面的石墨烯负载量也越来越少，其强化分离电荷能力就会降低，从而就会使其光电流响应能力减弱;随着电沉积时间越来越长，TiO2/FTO电极表面负载的石墨烯量就会越来越多，当石墨烯的量太多时就会遮挡辐照于TiO2表面的紫外光，从而降低了光电流响应。因此实验选择300s为还原氧化石墨烯的电化学沉积时间。
传感器的线性曲线
图7为不同浓度的土霉素对Aptamer/TiO2-rgo/FTO光电流响应上的影响图（从a到g浓度分别为：(a)5nM，(b)10nM，(c)50nM，(d)100nM，(e)500nM，(f)1000nM，(g)5000nM。插图为相对应的标准曲线图），为在上述优化条件下，在0.1MPBS（pH=7.4）缓冲溶液中，Aptamer/TiO2-rgo/FTO电极在不同浓度的土霉素溶液中的安培电流时间（i-t）图以及线性图。由图中可见，在5.0×10-6～5.0×10-9mol/L浓度范围内，呈现较宽的线性关系，对应的线性回归方程：△I=-1.9806C+17.637，（Ｒ＝0.9951，△I为峰电流前后的差值，以uA为单位，C为土霉素浓度的负对数，以uM为单位。），依据3倍标准偏差计算（S/N=3）此条件下土霉素的检出限可达1.0×10-9mol/L。
传感器重现性、重复性、稳定性的探究
2.5.1 传感器的重现性
制备一支Aptamer/TiO2-rgo/FTO电极，在上述优化条件下，和1.0×10-7mol/ L的土霉素反应60min后，在0.1MPBS（pH=7.4）缓冲溶液中平行测定5次，其光电流基本稳定，算出其相对标准偏差是3.51%，通过这个数据可以说明这个体系重现性良好。
传感器的重复性
制备出5支Aptamer/TiO2-rgo/FTO电极，使其和1.0×10-7mol/ L的土霉素反应60min后，在0.1MPBS（pH=7.4）缓冲溶液中测定光电响应结果，光电流基本稳定，算出其相对标准偏差是3.44%，通过数据可以说明这个体系的重复性良好。
传感器的稳定性
图8为Aptamer/TiO2-rgo/FTO电极在PBS缓冲溶液中测定300s的光电流数据图。制备一支 Aptamer/TiO2-rgo/FTO电极，在0.1MPBS（pH=7.4）缓冲溶液中测定300s，如图8所示，可以看出其光电流基本稳定。再制备了Aptamer/TiO2-rgo/FTO电极，先测定在0.1M PBS（pH=7.4）缓冲溶液中的光电流，放入冰箱中一个星期，再次测定其光电流，得到的光电流是先前测定光电流的82.7%，说明Aptamer/TiO2-rgo/FTO电极稳定性良好。
实际样品的检测
通过空白加标回收法在自来水中加入三组不同浓度的 OTC，平行测三次。检测结果显示，回收率在 93.0-107.5%的范围内，表明具有较高的准确度。
以上仅表达了本发明的优选实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
SEQ ID NO:1
5’-NH2-（CH2）6-GGA ATT CGC TAG CAG GTT GAC GTT GAC GCT GGTGCC CGG TTGTGG TGC
GAG TGT TGT GTG GAT CCG AGC TCC ACG TG-3’
Claims (5)
1.一种土霉素适配体光电化学生物传感器，其特征在于：为土霉素适配体/TiO2-rGO/FTO电极；
所述土霉素适配体的序列如SEQ ID NO:1所示；
所述土霉素适配体光电化学生物传感器的制备方法为：
先在FTO导电玻璃上采用水热法制备纳米TiO2，得到TiO2/FTO导电玻璃电极，再将氧化石墨烯溶液采用电化学方法进行还原并沉积在TiO2/FTO导电玻璃电极上，得到TiO2-rGO/FTO电极，然后将土霉素适配体修饰在TiO2-rGO/FTO电极上，得到适配体/TiO2-rGO/FTO电极；
具体方法是：
（1）清洗FTO导电玻璃并烘干；
（2）FTO导电玻璃上用水热法制备纳米二氧化钛：在容器中按20~80和20~80的体积份数依次加入超纯水、浓盐酸，然后在搅拌的条件下缓慢的加入0.5-2体积份数的钛酸正丁酯，搅拌均匀，得到混合液；将烘干的FTO导电玻璃放入清洗干净并且干燥过的高压反应釜的内衬中，并且量取适量的混合液倒入其中；反应温度为80℃-200℃，时间为4-12h；样品自然冷却后，用超纯水清洗玻璃，晾干；然后放入300-600℃马弗炉中恒温2-5h后，即得到TiO2/FTO导电玻璃电极；
（3）rGO 修 饰 TiO2/FTO导电玻璃电极的制备：制备浓度为0.1-2mg/mL的氧化石墨烯水溶液；将TiO2/FTO导电玻璃的面积剪切成0.25-1cm2，以这种面积的TiO2/FTO导电玻璃作为工作电极，铂丝作为对电极，饱和甘汞电极作为参比电极，采用循环伏安法进行还原，扫描范围为－2.5～2.5 V，扫描速率为 50-200 m V·s－1；待氧化石墨烯沉积完全，取出工作电极，去离子水冲洗并用吹干，得到TiO2-rGO/FTO电极；
（4）修饰土霉素适配体：在TiO2-rGO/FTO电极的表面上滴涂30-100μL的0.01%~0.2%的壳聚糖溶液，待其干燥后，用去离子水清洗，再吹干，然后将30-100μL 1%-5%戊二醛溶液滴涂到修饰好的电极表面，在室温黑暗放置1h，清洗并干燥后，然后在上面滴涂20-50μL的土霉素适配体，在4-30℃中放置2-12h，之后用PBS缓冲液洗去未反应的土霉素适配体，得到适配体/TiO2-rGO/FTO电极。
2.根据权利要求1所述的土霉素适配体光电化学生物传感器，其特征在于：步骤（4）所述壳聚糖溶液浓度为0.1%，滴涂量为90μL。
3.根据权利要求1所述的土霉素适配体光电化学生物传感器，其特征在于：步骤（3）在150 W 氙灯辐照和加偏压为0.1V条件下，氧化石墨烯沉积时间为300s。
4.一种权利要求1所述土霉素适配体光电化学生物传感器的应用，其特征在于：用于水样中土霉素含量的检测。
5.一种权利要求1所述土霉素适配体光电化学生物传感器检测溶液中土霉素含量的方法，其特征在于：
将土霉素适配体光电化学生物传感器放入用PBS缓冲溶液稀释的待测水样中， 30-60℃反应1h，用超纯水清洗，然后用电化学工作站进行信号检测；采用安培电流时间曲线法，初始电位为-0.2V- 0.2V，运行时间为30-100s，来检测传感器与土霉素反应前后的光电流值。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710563906.8A CN107515237B (zh) | 2017-07-12 | 2017-07-12 | 用于测量土霉素的光电化学传感器及其制备方法和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710563906.8A CN107515237B (zh) | 2017-07-12 | 2017-07-12 | 用于测量土霉素的光电化学传感器及其制备方法和应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN107515237A CN107515237A (zh) | 2017-12-26 |
| CN107515237B true CN107515237B (zh) | 2019-12-13 |
Family
ID=60722504
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201710563906.8A Active CN107515237B (zh) | 2017-07-12 | 2017-07-12 | 用于测量土霉素的光电化学传感器及其制备方法和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN107515237B (zh) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108845009B (zh) * | 2018-06-22 | 2019-08-16 | 湖南大学 | 一种光电化学适配体传感器及其制备方法和应用 |
| CN110514716B (zh) * | 2019-09-09 | 2022-06-28 | 山东省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 | 用于检测农药残留的电流型适配体传感器的制备方法 |
| CN113463150A (zh) * | 2021-07-09 | 2021-10-01 | 合肥师范学院 | 还原氧化石墨烯负载二氧化钛薄膜的制备方法及应用 |
| CN117571982B (zh) * | 2024-01-09 | 2024-04-09 | 德州学院 | 低背景检测卡那霉素的免标记荧光适配体传感器及其应用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104634754A (zh) * | 2015-01-30 | 2015-05-20 | 新疆农垦科学院 | 一种功能化磁珠分离-酶联适配体检测食品中土霉素的方法 |
| CN104911629A (zh) * | 2015-06-29 | 2015-09-16 | 江苏大学 | 一种复合电极的合成方法 |
-
2017
- 2017-07-12 CN CN201710563906.8A patent/CN107515237B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104634754A (zh) * | 2015-01-30 | 2015-05-20 | 新疆农垦科学院 | 一种功能化磁珠分离-酶联适配体检测食品中土霉素的方法 |
| CN104911629A (zh) * | 2015-06-29 | 2015-09-16 | 江苏大学 | 一种复合电极的合成方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| A Cathodic "Signal-off" Photoelectrochemical Aptasensor for Ultrasensitive and Selective Detection of Oxytetracycline;Kai Yan 等;《Analytical Chemistry》;20151109;第87卷;第12215-12218页 * |
| Specific detection of oxytetracycline using DNA aptamer-immobilized interdigitated array electrode chip;Yeon Seok Kim 等;《Analytica Chimica Acta》;20081225;第634卷;第250-251页 * |
| ssDNA aptamers that selectively bind oxytetracycline;Javed H. Niazi 等;《Bioorganic & Medicinal Chemistry》;20071107;第16卷;第1254–1261页 * |
| 硫化镉/石墨烯/TiO2纳米棒阵列的光电化学性能;张亚萍 等;《中国石油大学学报( 自然科学版)》;20160630;第40卷(第3期);第178页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN107515237A (zh) | 2017-12-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107515237B (zh) | 用于测量土霉素的光电化学传感器及其制备方法和应用 | |
| Medetalibeyoglu et al. | Validated electrochemical immunosensor for ultra-sensitive procalcitonin detection: carbon electrode modified with gold nanoparticles functionalized sulfur doped MXene as sensor platform and carboxylated graphitic carbon nitride as signal amplification | |
| Wang et al. | Label-free photoelectrochemical immunoassay for α-fetoprotein detection based on TiO2/CdS hybrid | |
| Sadeghi et al. | Optical and electrochemical aptasensors for the detection of amphenicols | |
| Pan et al. | Engineering of CdTe/SiO2 nanocomposites: Enhanced signal amplification and biocompatibility for electrochemiluminescent immunoassay of alpha-fetoprotein | |
| Zhang et al. | An enzyme immobilization platform for biosensor designs of direct electrochemistry using flower-like ZnO crystals and nano-sized gold particles | |
| Sharma et al. | Electrochemical impedance immunosensor for the detection of cardiac biomarker Myogobin (Mb) in aqueous solution | |
| Li et al. | A sensitive electrochemical aptasensor based on water soluble CdSe quantum dots (QDs) for thrombin determination | |
| Fei et al. | A sandwich electrochemical immunoassay for Salmonella pullorum and Salmonella gallinarum based on a AuNPs/SiO 2/Fe 3 O 4 adsorbing antibody and 4 channel screen printed carbon electrode electrodeposited gold nanoparticles | |
| Zhang et al. | A label-free electrochemiluminescence cytosensors for specific detection of early apoptosis | |
| CN107085019B (zh) | 赭曲酶毒素a光电化学适配体传感电极的制备方法和应用 | |
| Duque-Ossa et al. | Troponin I as a biomarker for early detection of acute myocardial infarction | |
| Wang et al. | Highly efficient quenching of electrochemiluminescence from CdS nanocrystal film based on biocatalytic deposition | |
| Khan et al. | Application of amine and copper doped magnesium oxide nanoparticles in electrochemical immunosensors for detecting brucella abortus | |
| CN113155917B (zh) | 一种用于检测赭曲霉毒素a或黄曲霉毒素b1的光助双极自供能传感器的构建方法 | |
| Wang et al. | A “signal-off” type photoelectrochemical immunosensor for detecting carcinoembryonic antigen based on TiO2 NRs/BiOI heterojunction and SiO2/PDA-Au inhibitor | |
| Tian et al. | A separated type cathode photoelectrochemical aptasensor for thrombin detection based on novel organic polymer heterojunction photoelectric material | |
| CN112305053B (zh) | 一种硫化铟纳米微球修饰的标记电化学免疫传感器及其电化学免疫分析方法 | |
| Li et al. | A novel photoelectrochemical sensor based on SiNWs@ PDA for efficient detection of myocardial infarction | |
| CN104865240B (zh) | 一次性纳米电致化学发光双组份免疫传感器及其制备方法 | |
| Gandhi et al. | An efficient electrochemical sandwich ELISA for urinary human serum albumin-biomarker based on highly redox-active thionine surface-confined MWCNT/PEDOT. PSS platform | |
| Deng et al. | A novel potentiometric immunoassay for carcinoma antigen 15-3 by coupling enzymatic biocatalytic precipitation with a nanogold labelling strategy | |
| Chen et al. | One-step electrochemical immunoassay of biomarker based on nanogold-functionalized graphene sensing platform | |
| CN111537584A (zh) | 一种亚甲基蓝-纳米花、电化学适配体生物传感器体系及其制备方法和应用 | |
| Chen et al. | A TiO2 mesocrystals triggered signal amplification strategy of photoelectrochemical immunoassay for α-fetoprotein detection based on indirect competitive reaction |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20230112 Address after: 518000 room 4b, building A6, Guangming Science Park, China Merchants Group, No. 3009, sightseeing Road, Fenghuang community, Fenghuang street, Guangming District, Shenzhen, Guangdong Province Patentee after: SHENZHEN AONELAB TESTING LABORATORY Address before: 516007 Da Dao Da Avenue, Huicheng District, Huizhou City, Guangdong Province, No. 46 Patentee before: HUIZHOU University |
|
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20240513 Address after: Building 1-101, Building 23, Phase C, Xuzhou Jiahai Intelligent Manufacturing Industrial Park, No. 8 Xingquan Road, Quanshan District, Xuzhou City, Jiangsu Province, 221000 Patentee after: Xuzhou Aiwan Medical Laboratory Co.,Ltd. Country or region after: China Address before: 518000 room 4b, building A6, Guangming Science Park, China Merchants Group, No. 3009, sightseeing Road, Fenghuang community, Fenghuang street, Guangming District, Shenzhen, Guangdong Province Patentee before: SHENZHEN AONELAB TESTING LABORATORY Country or region before: China |
|
| TR01 | Transfer of patent right |