CN107510700A - 一种靶向治疗膀胱癌的药物及其应用 - Google Patents
一种靶向治疗膀胱癌的药物及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107510700A CN107510700A CN201710829300.4A CN201710829300A CN107510700A CN 107510700 A CN107510700 A CN 107510700A CN 201710829300 A CN201710829300 A CN 201710829300A CN 107510700 A CN107510700 A CN 107510700A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- aluminum sulfate
- cell
- carcinoma
- medicine
- bladder
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
- A61K33/06—Aluminium, calcium or magnesium; Compounds thereof, e.g. clay
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明公开了一种靶向治疗膀胱癌的药物及其应用。发明人通过长期研究,首次发现硫酸铝能分辨识别人体正常组织与癌组织,改变癌细胞生理特征、抑制癌细胞分泌多种蛋白质水解酶、抑制癌细胞线粒体的代谢功能,从而实现抗肿瘤作用、该药物能结合到癌细胞的DNA中,促进其裂解、能快速强收敛凝聚细胞表面糖蛋白、有效改变细胞表面的蛋白结构、阻断信号通路、改变细胞微结构、并与细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶结合,有效控制癌细胞增殖和转移,对癌细胞的抑制率高达99.8~99.9%甚至100%。硫酸铝副作用小,安全性高,治疗膀胱癌具有剂量微、起效快、疗程短等优点,能迅速缩小瘤体、诱导凋亡、抑制增殖,最终碎片化脱落,对人类攻克膀胱癌具有重要的意义。
Description
技术领域
本发明涉及一种化合物的新应用,特别涉及一种靶向治疗膀胱癌的药物及其应用。
背景技术
膀胱癌是指发生在膀胱黏膜上的恶性肿瘤。是泌尿系统最常见的恶性肿瘤,也是全身十大常见肿瘤之一。占我国泌尿生殖系肿瘤发病率的第一位,而在西方其发病率仅次于前列腺癌,居第2位。2012年全国肿瘤登记地区膀胱癌的发病率为6.61/10万,列恶性肿瘤发病率的第9位。膀胱癌可发生于任何年龄,甚至于儿童。其发病率随年龄增长而增加,高发年龄50~70岁。男性膀胱癌发病率为女性的3~4倍。既往将膀胱黏膜上皮称为移行细胞,1998年WHO与国际泌尿病理学会联合建议用尿路上皮一词代替移行细胞一词,以区别于在鼻腔以及卵巢内的移行上皮,使尿路上皮成为尿路系统的专有名词。2004年WHO《泌尿系统及男性生殖器官肿瘤病理学和遗传学》中尿路系统肿瘤组织学分类中膀胱癌的病理类型包括膀胱尿路上皮癌、膀胱鳞状细胞癌、膀胱腺癌,其他罕见的还有膀胱透明细胞癌、膀胱小细胞癌、膀胱类癌。其中最常见的是膀胱尿路上皮癌,约占膀胱癌患者总数的90%以上,通常所说的膀胱癌就是指膀胱尿路上皮癌,既往被称为膀胱移行细胞癌。
膀胱尿路上皮癌分为非肌层浸润性尿路上皮癌和肌层浸润性尿路上皮癌。非肌层浸润性尿路上皮癌患者多采用经尿道膀胱肿瘤电切术,术后用膀胱灌注治疗预防复发。肌层浸润性尿路上皮癌和膀胱鳞癌、腺癌患者多采用全膀胱切除术治疗,有些患者可以采用膀胱部分切除术治疗。肌层浸润性尿路上皮癌患者也可先进行新辅助化疗+手术治疗的方法。转移性膀胱癌以化疗为主,常用的化疗方案有M-VAP(甲氨蝶呤+长春花碱+阿霉素+顺铂)和GC(吉西他滨+顺铂)及MVP(甲氨蝶呤+长春花碱+顺铂)方案,化疗的有效率为40%~65%。
现有的治疗方法成本高昂、疗程长,效果欠佳。因此,目前急需一种治疗膀胱癌的药物以解癌症患者的燃眉之急。
硫酸铝是一种常见的硫酸盐,在造纸工业中作为松香胶、蜡乳液等胶料的沉淀剂,水处理中作絮凝剂,还可作泡沫灭火器的内留剂,制造明矾、铝白的原料,石油脱色、脱臭剂、某些药物的辅料等。大约占总产量50%的硫酸铝第一大用途是用于造纸,第二大用途是在饮用水、工业用水和工业废水处理中做絮凝剂,大约占硫酸铝总产量40%。当向这类水中加入硫酸铝后,可以生成胶状的、能吸附和沉淀出细菌、胶体和其他悬浮物的氢氧化铝絮片,用在饮用水处理中可控制水的颜色和味道。
在医药方面,硫酸铝也有少量的应用,如周国燎,吴树荣,陈缙云,等.复方硫酸铝溶液的组方研究[J].解放军医学院学报,1981(2).公开了瘤内注射治疗膀胱肿瘤取得了较好的疗效,对早期膀胱肿瘤的治愈率达91.1%。后期进一步的研究表明复方硫酸铝注射液对早期膀胱肿瘤具有一定的治疗作用,但是随后30年多年以来,未见硫酸铝可以用于治疗其他肿瘤。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足,提供一种靶向治疗膀胱癌,特别是中晚期膀胱癌的药物及其应用。
本发明所采取的技术方案是:
一种治疗膀胱癌的药物,其活性成分包括硫酸铝。
作为上述药物的进一步改进,硫酸铝为注射级以上的硫酸铝,或使用如下方法纯化得到:
1)将硫酸铝与超纯水混合溶解,得到硫酸铝溶液;
2)对硫酸铝溶液进行精滤,冷冻干燥得到硫酸铝。
作为上述药物的进一步改进,药物为注射制剂。进一步的,注射制剂选自注射粉针剂、注射液。
作为上述药物的进一步改进,硫酸铝与超纯水的质量混合比为1:(2~5),溶解后使用的超纯水纯化。进一步的,硫酸铝与超纯水的质量混合比为1:3,溶解后使用等质量的超纯水纯化。
作为上述药物的进一步改进,使用孔径为0.22μm的滤膜对硫酸铝溶液进行精滤。
作为上述药物的进一步改进,硫酸铝选自硫酸铝的水合物。
本发明历经数十年的研究攻克,并首次发现“硫酸铝”,能分辨识别人体正常组织与癌组织,使其癌组织自行从正常组织分离脱落,同时能分辨识别正常细胞与癌细胞并选择性饿死癌细胞的首次突破。是目前为止对恶性肿瘤的治疗疗效最快最确切且低毒高效,对正常细胞基本没有抑制作用,能迅速杀灭癌细胞缩小瘤体一代领先性化药,其疗效远优目前传统抗癌药,它的诞生能挽救数以万计的患者生命,尤其适用于恶性肿瘤实体癌的治疗。
发明人历经数十年并投入巨资进行研究,研发成功具世界最前沿领先性系列抗癌特效新药,其疗效是百年至今人类对于恶性肿瘤实体癌的治疗、放化疗、手术及现代任何治疗手段所无法实现的,在给药后能使恶性肿瘤实体癌逐渐从人体正常组织自行分离脱落。
药理:细胞凋亡的关键途径如下:⑴、可改变癌细胞生理特征。⑵、抑制癌细胞分泌多种蛋白质水解酶。⑶、抑制癌细胞线粒体的代谢功能,从而实现抗肿瘤作用。⑷、该药物能结合到癌细胞的DNA中,促进其裂解。⑸、能快速强收敛凝聚细胞表面糖蛋白。(6)、有效控制癌细胞增殖和转移。⑺、该药物能有效改变细胞表面的蛋白结构。⑻、阻断信号通路。⑼、改变细胞微结构。⑽、并与细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶结合从而改变其生物效应。⑾、因正常细胞吸食有规律反之癌细胞无规律这一特性。⑿、该化合物能识别分辨正常组织与非正常组织,正常细胞与非正常细胞并选择性饿死及杀灭癌细胞不抑制正常细胞,使得恶性肿瘤实体癌组织逐渐呈现碎片脱落的人类医学重大突破,对肿瘤抑制率高达99.8~99.9%,甚至达到100%。
毒理:大剂量经数十年研究及测验未见明显毒副作用。
药效:具有剂量微、起效快、疗程短、副作用小等特点,治疗上述恶性肿瘤能迅速缩小瘤体、诱导凋亡、抑制增殖。
用法用量:如下表:
序号 | 肿瘤体积(cm3) | 药剂量×0.9%氯化钠注射液 | 注射方法 |
1 | 实体癌2×2×2 | 1000mg×3mL | 局部注射 |
2 | 实体癌4×4×4 | 2000mg×6mL | 局部注射 |
3 | 实体癌6×6×6 | 3000mg×9mL | 局部注射 |
4 | 实体癌8×8×8 | 4000mg×12mL | 局部注射 |
5 | 实体癌10×10×10 | 5000mg×15mL | 局部注射 |
6 | 实体癌12×12×12 | 6000mg×18mL | 局部注射 |
注:药物起效时间为3~5分钟,癌细胞开始出现调亡,注射完毕后25~30分钟内禁止走动,避免药效损失。
功能与主治:膀胱癌,特别是中晚期膀胱癌。
细胞实验数据表明硫酸铝对人膀胱移行细胞癌细胞T24的增殖均有明显的抑制作用,其IC50为8.018mg/ml;对人膀胱癌细胞均有明显促凋亡作用,且具有浓度-效应关系;能将人膀胱癌细胞的细胞周期阻滞于G0/G1期,且具有浓度-效应关系。
通过注射硫酸铝制剂治疗膀胱癌,具有剂量微、起效快、疗程短、副作用小等特点,能迅速缩小瘤体、诱导凋亡、抑制增殖,如早期发现其恶性肿瘤体积在2cm×2cm×2cm到3cm×3cm×3cm,可实现只需进一针,36h至72h肿瘤细胞活性全部消失,对人类攻克膀胱癌具有重要的现实意义。
附图说明
图1是纯化后硫酸铝的HPLC色谱图;
图2是急性毒性实验的动物照片;
图3是硫酸铝对膀胱癌细胞的浓度-抑制率曲线;
图4是硫酸铝对膀胱癌细胞增殖的影响,箭头表示坏死细胞;
图5是硫酸铝对人膀胱癌细胞T24凋亡的影响;图中,A为溶媒对照组,B为硫酸铝10mg/ml组,C为硫酸铝30mg/ml组,D为硫酸铝100mg/ml组;
图6是硫酸铝对膀胱癌细胞凋亡的影响,箭头表示细胞核皱缩,提示为凋亡细胞;
图7是硫酸铝对人膀胱癌细胞T24凋亡周期的影响;图中,A为溶媒对照组,B为硫酸铝10mg/ml组,C为硫酸铝30mg/ml组,D为硫酸铝100mg/ml组。
具体实施方式
确证化学结构的试验资料
实验委托湖南省实验动物中心(湖南省药物安全评价研究中心进行)。
一、新药名称、分子式及分子量
中文名:硫酸铝
分子式:Al2(SO4)3·18H2O,分子量:666.4。
二、确证化学结构的方法
1、水分测定
1.1测试条件:
仪器:V-30卡式水分测定仪
方法:《中国药典》2015年版四部通则0832水分测定法第一法。
1.2测定结果
表1、硫酸铝中水分测定结果
1.3、解析
根据硫酸铝结构及水分含量计算,结构中含有结晶水的个数为18。
铝元素的测定
2.1、测试条件
仪器:Agilent 240-DUO原吸收光谱仪
方法:采用石墨炉原子吸收法,测定硫酸铝样品中铝元素含量。
2.2、测试结果
表2、硫酸铝样品中铝元素测试结果
结果表明:硫酸铝样品中铝元素的平均百分含量为8.15%。
2.3、解析
根据上述水分测定,按18个结晶水计算,铝元素占分子量的比例为8.11%,与上述原子吸收测定的铝元素含量一致,进一步表明样品中含有铝元素和18个结晶水。
硫酸根离子的测定
3.1、测试条件
仪器:ICS900离子色谱仪
方法:以25mM氢氧化钠作为淋洗液,色谱柱为Dionex IonpacTM As18(4×250mm),流速为1.0ml/min,进样量为25ul;采用无水硫酸钠作为对照品,按峰面积以外标法计算含量。
3.2、测试结果
表3、硫酸铝中硫酸根含量测定结果
*为实际浓度。
经测定,样品中含有硫酸根离子为45.5%。
3.3、解析
样品色谱图与对照品色谱图保留时间一致,表明样品中含有高浓度的硫酸根;根据水分及铝元素含量测定结果,采用离子色谱法测定硫酸根离子含量为43.4%,与分子结构中硫酸根离子分子量占比为43.2%基本一致。
4、结论
根据水分测定、铝元素含量测定、硫酸根含量测定结果综合分析,本品分子式为Al2(SO4)3·18H2O。
为了彻底杜绝无三废排放以避免纯化,可直接采用厂家生产的高纯硫酸铝(分析纯或药用级),但必须要从生产厂家源头进行严格的质量控制。
硫酸铝的纯化
1)将硫酸铝按1:3的质量比溶解于纯水中;
2)用等质量的纯水清洗,精滤除杂;
3)将精滤后的纯化液进行冷冻干燥得到纯白色粉末的硫酸铝纯化物。
纯化后硫酸铝的HPLC色谱图如图1所示,可见纯化后的硫酸铝的纯度较提纯前有了较大的提高。冷冻干燥得到的硫酸铝具有更好的溶解性。
下面结合实验,进一步说明本发明的技术方案。
安全性实验:
安全性实验委托中山大学实验动物中心实验部进行,实验设计参考:
1.徐叔云,药理实验方法学第三版
2.2014版药物安全药理学研究技术指导原则。
具体实验方法如下:
实验材料
硫酸铝,分子式:Al2(SO4)3·18H2O,分子量:666.4。
一、急性毒性试验
1.试验目的:
观察硫酸铝在单次给予后一定时间内是否产生的毒性反应,为初步了解药物的毒性作用和其毒性靶器官,为后续的临床试验提供依据。
2、试验动物和饲养条件
SPF级昆明小鼠40只,20±2g,雌雄各半。动物生产供应单位:中山大学实验动物中心生产部,实验动物生产许可证号为:SCXK(粤)2011-0029,动物质量合格证明:No.440085000购入日期:2016年08月15日;动物标识方法:用饱和苦味酸将动物不同部位的皮毛涂染代表不同动物号,不同的动物饲养笼以动物饲养信息卡片标记进行区分。饲养温度20~26℃;湿度40RH%~70RH%;换气次数:饲养室大于15次/小时;饲养密度:群养,每笼不多于6只。使用饲料:SPF级大、小鼠颗粒饲料,由北京科澳有限公司提供。对照组和给药组动物照片如图2所示。
3、实验方法:将小鼠随机分为对照组和给药组,具体如下:
表4、急性毒性试验分组和给药剂量
组别 | 药物 | 给药剂量(mg/kg) | 给药容量 | 动物数量 |
对照组 | 生理盐水 | / | 0.2ml/10g bw | 10只雌10只雄 |
给药组 | 硫酸铝溶液 | 2000 | 0.2ml/10g bw | 10只雌10只雄 |
硫酸铝溶液的配制方法为:用注射器准确抽取生理盐水5ml,注入装有硫酸铝的安剖内,混匀静置10~20min充分溶解得到。
给药途径:灌胃给药。
给药频率和观察时间:灌胃给药1次,药后观察14天。
检测指标:临床观察:每天观察动物的一般症状;体重测量:于给药D0、D3、D7、D14称量动物体重;脏器系数测定:于第15天处死动物,解剖观察主要脏器异常情况,取心、肝、脾、肺、肾5个脏器称重。
结果处理和分析:用统计软件SPSS 24处理,计算两组动物的平均体重和脏器系数并作比较。
实验结果:
实验期间,对照组、给药组未见小鼠死亡及未见明显异常。
给药组动物体重与对照组比较,无显著性差异,详见表5。
表5、急性毒性小鼠体重的比较
脏器系数统计结果详见表6。
表6、急性毒性小鼠脏器系数的比较
*与对照组比较无明显差异(P<0.05)小鼠全部存活无一死亡。
结论:
硫酸铝具有较好的安全性,给药剂量2000mg/kg、0.2ml/10g bw0,2ml/10gbw生理盐水,未见明显毒副作用。
膀胱癌细胞生长抑制对照试验
实验委托湖南省实验动物中心(湖南省药物安全评价研究中心)进行。
1、实验材料
1.1受试物:化合物配制:称取硫酸铝9g,加入0.9%氯化钠注射液15ml,并振荡至全部溶解,即得600mg/ml硫酸铝溶液,此为最高浓度工作液,将母液进行除菌处理后备用。用0.9%氯化钠注射液将母液依次配制成200、60、20、6、2、0.6mg/ml的工作液。
1.2阳性对照药:顺铂(DDP),批号:SJJMI-IE,东京化成工业株式会社;5-氟尿嘧啶(5-FU),批号:HFBM160120325008,Amresco公司。阳性对照药配制:称取DDP或5-FU2mg,用新鲜完全培养基配制成100mM的母液,再用新鲜完全培养基将母液依次配制成200、60、20、6、2、0.6μM的工作液。
1.3主要材料:
1.4主要仪器:
2、试验方法
2.1细胞培养
取已长满的T24细胞,采用含10%FBS的高糖DMEM完全培养基,于37℃、5%CO2培养箱中培养,根据细胞生长情况,1~2d传代或换液,至对数生长期备用。
2.2CCK-8法检测细胞增殖试验
取对数期生长的T24细胞以每孔5×103个细胞接种于96孔细胞培养板中,待12h细胞贴壁后,设置溶媒对照组、阳性对照药(DDP)组、阳性对照药(5-FU)组、硫酸铝组(0.3-300mg/ml),每组5个复孔。溶媒对照组以新鲜完全DMEM培养基孵育细胞,硫酸铝组分别以含终浓度为0.3-300mg/ml硫酸铝的新鲜完全DMEM孵育细胞,DDP和5-FU组分别以含终浓度为100、30、10、3、1、0.3μM化合物的新鲜完全DMEM孵育细胞。按上述处理方式孵育细胞72h后在每孔中加入CCK-8 10μl,继续培养1h后使用酶标仪在450nm处测量各孔的吸光度。以溶媒对照组OD值为100%细胞活力,其余各组OD值与溶媒对照组OD值的比值为相对活力。以细胞增殖抑制率评价化合物对T24细胞的毒性,若出现有细胞增殖抑制率>100%时,判为仪器的系统误差,按100%计。
2.3细胞凋亡的检测
2.3.1Annexin V-FITC和PI双染法检测细胞凋亡
取处于对数生长期的T24细胞,常规消化收集细胞,以5×105/孔的密度接种至6孔板中,待12h细胞贴壁后,设置溶媒对照组、硫酸铝组(10、30、100mg/ml),每组5个复孔。溶媒对照组以新鲜完全DMEM培养基孵育细胞,硫酸铝组分别以含终浓度为10、30、100mg/ml硫酸铝的新鲜完全DMEM孵育细胞。6h后,常规消化收集细胞,加入500μl Binding Buffer缓冲液重悬细胞,将细胞转入1.5ml EP管中,加入5μl的Annexin V-FITC、5μl的PI,在室温避光条件下孵育15min,用流式细胞仪检测凋亡情况。
2.3.2荧光染色法检测细胞凋亡
按照2.3.1方法处理细胞,在化合物处理6h后,在6孔板中每孔加入Hoechst 33342染色液1ml,充分覆盖住细胞,置于37℃培养20-30min。弃去染色液,用PBS洗涤2-3次后在荧光显微镜下进行荧光检测。
2.4流式细胞术检测化合物对膀胱癌细胞周期的影响
取处于对数生长期的T24细胞,常规消化收集细胞,以5×105/孔的密度接种至6孔板中,待12h细胞贴壁后,设置溶媒对照组、硫酸铝组(100、30、10mg/ml),每组5个复孔。溶媒对照组以新鲜完全DMEM培养基孵育细胞,硫酸铝组分别以含终浓度为10、30、100mg/ml硫酸铝的新鲜完全DMEM孵育细胞。6h后,常规消化收集细胞,用70%冷乙醇固定过夜,加5μl的PI,室温避光孵育30min,用流式细胞仪检测细胞周期。
2.5统计学分析
采用SPSS 16.0统计软件对数据进行处理,计量资料以表示,两样本均数的比较采用Student T-Test检验,多样本组间均数的比较采用One-way ANOVA检验,P<0.05表示有统计学意义,P<0.01表示所检验的差别有非常显著性意义。
3、结果评价
3.1硫酸铝对膀胱癌细胞增殖的影响
显微镜下观察不同浓度的化合物处理细胞后,出现细胞增殖速度减慢,细胞碎片增多、细胞间隙增大、细胞出现沙粒状空泡等现象。细胞状态与共培养时间有明确相关性,约在共培养12h后,细胞出现变圆、皱缩的现象;在共培养24h后,出现部分细胞胀大,细胞透光性变差,细胞间间隙增大;在共培养48h后,细胞出现沙粒状空泡,出现细胞破裂等情形;在共培养72h后,沙粒状空泡样细胞基本完全破裂,在300、100、30mg/ml浓度条件下无完整细胞形态的细胞,只见少量浓缩成黑点状。细胞与供试品或阳性对照药DDP和5-FU共培养72h后,细胞增殖受到明显抑制,且具有浓度-效应关系,与溶媒对照组比较具有显著性差异(P<0.01)。细胞增殖抑制结果详见表7。
表7、不同化合物对膀胱癌细胞增殖的影响
注:*表示与溶媒对照组比较,P<0.05,**表示与溶媒对照组比较,P<0.01。IC50表示抑制50%肿瘤细胞的浓度,Emax表示对肿瘤细胞的最大抑制率。
硫酸铝对膀胱癌细胞的浓度-抑制率曲线如图3所示。
硫酸铝对膀胱癌细胞增殖的影响如图4所示,箭头表示坏死细胞。从图中可以清楚地看出,硫酸铝可以促进膀胱癌细胞坏死。
3.2硫酸铝对膀胱癌细胞凋亡的影响
采用浓度为10、30、100mg/ml的硫酸铝干预膀胱癌细胞6h后,收集细胞,AnnexinV-FITC/PI双染后检测细胞凋亡。流式细胞仪可将双染后的细胞分成4组:Q1-UL代表机械损伤细胞(Annexin V-/PI+);Q1-UR晚期凋亡细胞(Annexin V+/PI+);Q1-LL存活细胞(Annexin V-/PI-);Q1-LR早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-)。实验结果如表8所示:
表8、硫酸铝对人膀胱癌细胞凋亡的影响
注:*表示与溶媒对照组比较,P<0.05,**表示与溶媒对照组比较,P<0.01。
结果表明:经硫酸铝处理的T24细胞晚期凋亡及坏死细胞数明显高于溶媒对照组(P<0.05),并具有浓度-效应关系;经硫酸铝处理的T24细胞晚期凋亡及坏死细胞数明显高于溶媒对照组(P<0.05),并具有浓度-效应关系;经硫酸铝处理的MHCC-97H细胞晚期凋亡及坏死细胞数明显高于溶媒对照组(P<0.05),并具有浓度-效应关系。
硫酸铝对人膀胱癌细胞T24凋亡的影响如图5所示;图中,A为溶媒对照组,B为硫酸铝10mg/ml组,C为硫酸铝30mg/ml组,D为硫酸铝100mg/ml组;
硫酸铝对膀胱癌细胞凋亡的影响如图6所示,箭头表示细胞核皱缩,提示为凋亡细胞。
3.3硫酸铝对膀胱癌细胞周期的影响
采用浓度为10、30、100mg/ml的硫酸铝干预膀胱癌细胞6h后,收集细胞,用70%冷乙醇固定后,PI染色后,流式细胞仪分析细胞周期,实验结果如表9所示。
表9、硫酸铝对人膀胱癌细胞细胞周期的影响
注:*表示与溶媒对照组比较,P<0.05,**表示与溶媒对照组比较,P<0.01。
结果表明:硫酸铝处理后,G0/G1细胞比例明显增加,G2/M期比例明显减少,表明其对膀胱癌细胞增殖抑制作用主要是将膀胱癌细胞阻滞在G0/G1期,阻止其进入S期。
硫酸铝对人膀胱癌细胞T24凋亡周期的影响如图7所示;图中,A为溶媒对照组,B为硫酸铝10mg/ml组,C为硫酸铝30mg/ml组,D为硫酸铝100mg/ml组。
综上所述,在本实验条件下,硫酸铝可显著抑制膀胱癌细胞增殖,并且具有浓度-效应关系,在高浓度条件下,随着时间的延长,可将癌细胞完全杀死,其可将细胞周期阻滞在G0/G1期,诱导细胞凋亡。本化合物发挥抑制癌细胞浓度较高,为mg/ml级,可能与其特有的作用机制相关。该化合物可能直接作用于肿瘤细胞表面,可改变癌细胞的生理特征,在细胞表面聚集后,能够有效改变细胞表面的蛋白结构,引起细胞表面和细胞间质的蛋白沉淀,导致细胞通透性严重下降,细胞间隙收缩,降低肿瘤细胞的分裂能力,有效控制细胞的增殖以及转移。化合物进入细胞内后,可抑制癌细胞分泌多种蛋白质水解酶,能够直接结合到癌细胞的DNA中,引起DNA的裂解,并且有效抑制癌细胞线粒体的代谢功能,结合线粒体中的琥珀酸脱氢酶,改变其生物效应,引起细胞微结构发生改变,阻断信号通路,干扰肿瘤细胞的生长代谢,诱发肿瘤细胞凋亡,实现杀灭癌细胞的效果。
建议:
如动物实验小鼠肿瘤移植成熟注射进针给药完毕,应栓塞进针通道或者封闭进针通道,同时必须单只隔离喂养,因药物注射完毕或多或少有一定气味及出现小鼓包,小鼠如果群体喂养会出现相互撕咬而导致药水流出影响药效。如人体肿瘤进针不需要栓塞进针通道或者封闭进针通道。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出的是,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.硫酸铝在制备靶向治疗膀胱癌药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:药物的剂型为注射制剂。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:注射制剂选自注射粉针剂、注射液。
4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:硫酸铝选自硫酸铝的水合物。
5.一种治疗膀胱癌的靶向药物,其特征在于:其活性成分包括硫酸铝。
6.根据权利要求5所述的靶向药物,其特征在于:硫酸铝为注射级以上的硫酸铝,或使用如下方法纯化得到:
1)将硫酸铝与超纯水混合溶解,得到硫酸铝溶液;
2)对硫酸铝溶液进行精滤,冷冻干燥得到硫酸铝冻干粉。
7.根据权利要求5所述的靶向药物,其特征在于:药物为注射制剂。
8.根据权利要求7所述的靶向药物,其特征在于:注射制剂选自注射粉针剂、注射液。
9.根据权利要求6所述的靶向药物,其特征在于:硫酸铝与超纯水的质量混合比为1:(2~5),溶解后使用的超纯水纯化。
10.根据权利要求6或9所述的靶向药物,其特征在于:使用孔径为0.22μm的滤膜对硫酸铝溶液进行精滤。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710829300.4A CN107510700A (zh) | 2017-09-14 | 2017-09-14 | 一种靶向治疗膀胱癌的药物及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710829300.4A CN107510700A (zh) | 2017-09-14 | 2017-09-14 | 一种靶向治疗膀胱癌的药物及其应用 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN107510700A true CN107510700A (zh) | 2017-12-26 |
Family
ID=60723988
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201710829300.4A Pending CN107510700A (zh) | 2017-09-14 | 2017-09-14 | 一种靶向治疗膀胱癌的药物及其应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN107510700A (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113893264A (zh) * | 2021-11-22 | 2022-01-07 | 中国人民解放军总医院 | 治疗肿瘤的方法和组合物 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101756891A (zh) * | 2008-11-25 | 2010-06-30 | 天津太平洋制药有限公司 | 一种克拉屈滨经注射给药的制剂及其制备方法 |
CN103656666A (zh) * | 2012-09-14 | 2014-03-26 | 深圳市奥尼克斯基因技术有限公司 | 一种特异抑制肿瘤细胞转移的新型靶向肽tmtp1-kla的制备与应用 |
CN106955292A (zh) * | 2017-03-08 | 2017-07-18 | 暨南大学 | 一种治疗食管癌的药物组合物及用途 |
-
2017
- 2017-09-14 CN CN201710829300.4A patent/CN107510700A/zh active Pending
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101756891A (zh) * | 2008-11-25 | 2010-06-30 | 天津太平洋制药有限公司 | 一种克拉屈滨经注射给药的制剂及其制备方法 |
CN103656666A (zh) * | 2012-09-14 | 2014-03-26 | 深圳市奥尼克斯基因技术有限公司 | 一种特异抑制肿瘤细胞转移的新型靶向肽tmtp1-kla的制备与应用 |
CN106955292A (zh) * | 2017-03-08 | 2017-07-18 | 暨南大学 | 一种治疗食管癌的药物组合物及用途 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
徐风华,等: "复方硫酸铝注射液体外及小鼠瘤体注射抗肿瘤作用的研究", 《解放军药学学报》 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113893264A (zh) * | 2021-11-22 | 2022-01-07 | 中国人民解放军总医院 | 治疗肿瘤的方法和组合物 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Zhu et al. | Gallic acid improved inflammation via NF-κB pathway in TNBS-induced ulcerative colitis | |
Deng et al. | Cordyceps cicadae mycelia ameliorate cisplatin‐induced acute kidney injury by suppressing the TLR4/NF‐κB/MAPK and activating the HO‐1/Nrf2 and Sirt‐1/AMPK pathways in mice | |
Zhou et al. | Verbascoside promotes apoptosis by regulating HIPK2–p53 signaling in human colorectal cancer | |
CN101455736B (zh) | 一种酸枣仁提取物的应用 | |
Zhang et al. | Toosendanin and isotoosendanin suppress triple-negative breast cancer growth via inducing necrosis, apoptosis and autophagy | |
Yang et al. | Antrodia salmonea induces apoptosis and enhances cytoprotective autophagy in colon cancer cells | |
Wang et al. | Pulchinenoside B4 exerts the protective effects against cisplatin-induced nephrotoxicity through NF-κB and MAPK mediated apoptosis signaling pathways in mice | |
Zhao et al. | The induction of apoptosis and autophagy in human hepatoma SMMC-7721 cells by combined treatment with vitamin C and polysaccharides extracted from Grifola frondosa | |
CN101816653A (zh) | 黄连素作为制备肿瘤放射治疗增敏药物中的应用 | |
CN107510700A (zh) | 一种靶向治疗膀胱癌的药物及其应用 | |
CN115590914B (zh) | 一种红大戟提取物及其在制备抗乳腺癌药物中的应用 | |
CN107582565A (zh) | 一种靶向治疗肺癌的药物及其应用 | |
CN107616979A (zh) | 一种靶向治疗乳腺癌的药物及其应用 | |
CN107582564A (zh) | 一种靶向治疗甲状腺癌的药物及其制备方法 | |
Dung et al. | Zanthoxylum avicennae extracts induce cell apoptosis through protein phosphatase 2A activation in HA22T human hepatocellular carcinoma cells and block tumor growth in xenografted nude mice | |
CN107550930A (zh) | 一种靶向治疗卵巢癌的药物及其制备方法 | |
Li et al. | Xiangshao Granules reduce the aggressive behavior and hippocampal injury of premenstrual irritability in rats by regulating JIK/JNK/p38 signal pathway | |
CN107669699A (zh) | 一种治疗结肠癌的药物及其应用 | |
CN107616980A (zh) | 一种治疗胃癌的药物及其应用 | |
CN102688300B (zh) | 药物组合物及其用途 | |
CN103830288B (zh) | 赛葵总黄酮提取物及其制备方法和用途 | |
CN102652773B (zh) | 药物组合物及其制备方法 | |
CN107648260A (zh) | 一种靶向治疗肝癌的药物及其应用 | |
CN107693537A (zh) | 一种靶向治疗前列腺癌的药物及其制备方法 | |
CN107648261A (zh) | 一种治疗贲门癌的药物及其应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20171226 |