CN107501362A - 一种萘醌苷类化合物及其制备方法和用途 - Google Patents
一种萘醌苷类化合物及其制备方法和用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107501362A CN107501362A CN201710586330.7A CN201710586330A CN107501362A CN 107501362 A CN107501362 A CN 107501362A CN 201710586330 A CN201710586330 A CN 201710586330A CN 107501362 A CN107501362 A CN 107501362A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- compound
- naphthoquinones
- obtains
- extracted
- fraction
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/203—Monocyclic carbocyclic rings other than cyclohexane rings; Bicyclic carbocyclic ring systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
- C07H1/06—Separation; Purification
- C07H1/08—Separation; Purification from natural products
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明根据生物活性指导分离的方法,采用PTP1B抑制剂筛选方法从洋槐花中分离获得一种新的萘醌苷类化合物3‑(3‑甲基丁烯‑3‑基)‑6,7‑二甲氧基‑萘醌‑2‑O‑β‑D‑葡萄糖苷,其IC50值为1.126μM,可作为PTP1B抑制剂,用于开发抗糖尿病和抗肥胖症的药物。
Description
技术领域
本发明属于天然药物化学技术领域,具体涉及从洋槐花中分离得到的一种具有PTP1B抑制活性的萘醌苷类化合物、其制备方法和作为PTP1B抑制剂的用途。
背景技术
蛋白酪氨酸磷酸酶1B(ProteinTyrosine Phosphatase-1B,PTP-1B)属于蛋白质酪氨酸磷酸酶家族,专一水解芳香族磷酸,如磷酸化酪氨酸(phosphotyrosyl,pTyr)残基上磷酸根的酶,通过对胰岛素受体或其底物上的酪氨酸残基去磷酸化作用,对胰岛素信号转导进行负调节,组织细胞中PTP-1B过表达都会降低PTK的活性,使胰岛素受体无法与胰岛素结合,进而引起胰岛素抵抗,最终导致2型糖尿病。因此,PTP1B也是胰岛素信号通路和瘦素信号通路共同的负调控因子,被公认为胰岛素增敏剂潜在的分子靶点。通过抑制PTP1B可以改善胰岛素抵抗,有助于提高外周组织对胰岛素的敏感性,在糖尿病和肥胖症的治疗中有着广阔的前景。然而,目前已知的PTP1B抑制剂几乎全部是从合成化学品中普筛出来并加以结构改造获得的,其中较好的抑制剂的IC50值在20~50nM之间,但至今还没有一个候选化合物进入临床研究,相对于从合成品中发现的活性化合物,从植物中发现活性化合物,在药物后期的研究开发过程中有较高的成功机率。
洋槐花为蝶形花科槐树(Sophora japonica Linn.)的干燥花蕾,具有清热、凉血、止血等功效,常用于治疗便血、痔血、尿血、风热目赤等病症。现代药理研究表明,洋槐花具有清热解毒、舒张血管、改善血液循环、防止血管硬化、降低血压和抗氧化等作用。洋槐花资源丰富,在我国大部分地区均有分布,属于药食两用花卉。
发明内容
为了更好地开发和利用洋槐花资源,从中发现新的药理活性成分,本发明人考虑对洋槐花进行萃取分离,并采用生物活性指导分离的方法,利用PTP1B抑制剂模型对洋槐花活性部位进行分离、纯化,最终获得具有PTP1B抑制活性的化合物,并对该化合物结构进行鉴定,从而完成本发明。
具体而言,发明人首先对洋槐花的活性物质进行分离和萃取,即将干燥的洋槐花粉粹,用80%-95%乙醇回流萃取3次,每次2.5h,过滤后回收滤液,在45℃-55℃下干燥至无醇味,得到总酬膏;将总稠膏分为三部,分别获得石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物;根据生物活性指导分离的方法,采用PTP1B抑制剂筛选方法分别对石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物进行活性筛选,发现乙酸乙酯萃取物的活性最高;将乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析分离,采用石油醚-丙酮作为流动相进行梯度洗脱,洗脱液经低温减压干燥分别获得四个馏分:A、B、C、D(TLC显示各馏分依次排列),同样采用PTP1B抑制剂筛选方法分别对四个馏分进行筛选,发现馏分B活性较高;再将馏分B经硅胶柱层析分离,采用石油醚-乙酸乙酯作为流动相进行梯度洗脱,洗脱液经低温减压干燥分别获得三个亚馏分:B-1、B-2、B-3(TLC显示各馏分依次排列),同样采用PTP1B抑制剂筛选方法分别对三个亚馏分进行筛选,发现亚馏分B-2活性较高;再将亚馏分B-2经Sephadex LH-20柱分离,用95%甲醇作为流动相进行洗脱,得到单体化合物(纯度为97.8%,黄色固体)。具体分离过程参见图1
随后,发明人对上述化合物的结构进行鉴定,HR-ESI-MS m/z 487.1562 [M+Na]+提示其分子组成为C23H28O10(calcd. for C23H28O10Na,487.1528)。化合物I的UV (MeOH) λ max:220,265,330nm;IRν max: 3418.5,2918.6,1735.1,1630.7,1128.6 cm-1;1H NMR(CD3OCD3,400MHz)和13C NMR(CD3OCD3,100 MHz)数据如表1所示。根据所述化合物的波谱数据和HMBC、1H-1H COSY等偶联相关(图2),最终确定该化合物为萘醌苷类化合物。
表1
其中,所述PTP1B抑制剂筛选方法具体如下:实验用于筛选的蛋白质酪氨酸磷酸酯酶(PTP1B)是由BL21 E. coli大肠杆菌表达的GST融合蛋白;运用GST亲和色谱柱对PTP1B蛋白进行纯化;将待测样品溶解于DMSO(二甲基亚砜)中,加入PBS(磷酸盐缓冲溶液),配制为浓度为20 μM的待测溶液;采用硝基磷酸盐作为底物,将反应体系混匀后置于37℃静置30min,进行PTP1B蛋白的酶学反应,然后加入1 mol/L NaOH终止反应;PTP1B水解底物PNPP(对硝基苯磷酸二钠)的磷酸酯在410 nm处有很强的光吸收,通过测定410 nm波长处的吸收值(A),对酶活性进行计算;最后,利用软件Origin 7.0计算样品的IC50值。样品的IC50值越低,则表明该样品的PTP1B抑制活性越好。经测定,所分离获得的化合物的IC50值为1.126μM,具有一定的PTP1B抑制活性,可作为候选化合物进行开发。
因此,在一个方面,本发明提供了一种萘醌苷类化合物,所述化合物为3-(3-甲基丁烯-3-基)-6,7-二甲氧基-萘醌-2-O-β-D-葡萄糖苷,具有如下化学式I:
化学式I。
在另一个方面,本发明提供了上述化合物的制备方法,所述方法包括:
(1)将干燥的洋槐花粉碎,用乙醇回流萃取,过滤,将滤液干燥至无醇味,得到总稠膏;
(2)将总稠膏分散在水中,用乙酸乙酯进行萃取,减压浓缩后,获得乙酸乙酯萃取物;
(3)将乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析分离,减压浓缩后,获得包含所述化合物的馏分B,其中,以体积比计,采用石油醚-丙酮=15:1→8:1→5:1→3:1作为流动相进行梯度洗脱;
(4)将步骤(3)中的馏分B经硅胶柱层析分离,减压浓缩后,获得包含所述化合物的亚馏分B-2,其中,以体积比计,采用石油醚-乙酸乙酯=10:1→6:1→4:1作为流动相进行梯度洗脱;
(5)将步骤(4)中获得的亚馏分B-2经Sephadex LH-20柱分离,用90%甲醇水溶液作为流动相进行洗脱,洗脱液浓缩后经丙酮重结晶,得到所述化合物。
优选地,步骤(1)中,所使用的乙醇为80%-95%的乙醇水溶液,每kg干燥的洋槐花对应的乙醇的量为0.66L,可萃取3次,将滤液在45-55℃下干燥至无醇味。
优选地,步骤(2)中,将总稠膏以体积比1:1的比例分散在水中,再以体积比1:1的比例加入乙酸乙酯进行萃取。
在又一个方面,本发明还涉及所述化合物作为PTP1B抑制剂的用途,所述化合物在制备用于治疗糖尿病的药物中的用途,以及所述化合物在制备用于治疗肥胖症的药物中的用途。
本发明的优点在于:
(1)本发明分离获得的化合物为萘醌苷类化合物,化合物结构新颖,制备过程工艺简单,绿色环保、经济安全、产率高;过程易于控制,制备成本较低,适宜于批量化生产;
(2)本发明所述的萘醌苷类化合物,是以药食两用的洋槐花为原料,资源丰富、价廉易得;
(3)本发明的萘醌苷类化合物具有一定的PTP1B抑制活性,可作为候选化合物进行抗糖尿病和抗肥胖症药物的开发。
附图说明
图1为本发明所述化合物的制备流程图。
图2为本发明所述化合物的偶联相关图。
具体实施方式
下面结合实施例进一步对本发明的内容进行详细说明,但并不以此限定本发明保护范围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明,并不用于限定本发明。
实施例1
1. 化合物I的制备
(1)取干燥的洋槐花12.0千克为原料,用90%的乙醇水溶液进行回流萃取3次(3×8 L),每次2.5h,过滤,回收滤液,在45-55℃的低温条件下干燥至无醇味,得到1.1千克总稠膏;
(2)将总稠膏以体积比=1:1的比例分散在蒸馏水中,以体积比=1:1的比例加入乙酸乙酯萃取3次,萃取液经低温(45-55℃)减压浓缩,得到乙酸乙酯萃取物235.2 g;
(3)将步骤(2)得到的乙酸乙酯萃取物经硅胶柱(100-200目),用石油醚-丙酮作为流动相(体积比=15:1→8:1→5:1→3:1)进行梯度洗脱,洗脱液经低温(45-55℃)减压浓缩得到馏分B(74.6 g);
(4)将步骤(3)得到的馏分B再次上硅胶柱(200-300目),用石油醚-乙酸乙酯作为流动相(体积比=10:1→6:1→4:1)进行梯度洗脱,洗脱液经低温(45-55℃)减压浓缩得到亚馏分B-2(28.8 g);
(5)将步骤(4)得到的亚馏分B-2经Sephadex LH-20柱分离,用90%甲醇作为流动相进行洗脱,洗脱液浓缩后经丙酮重结晶,得到黄色固体粉末8.70 mg,即为本发明的化合物I。
Claims (7)
1.一种萘醌苷类化合物,所述化合物为3-(3-甲基丁烯-3-基)-6,7-二甲氧基-萘醌-2-O-β-D-葡萄糖苷,具有如下化学式I:
化学式I。
2.权利要求1所述的化合物的制备方法,所述方法包括:
(1)将干燥的洋槐花粉碎,用乙醇回流萃取,过滤,将滤液干燥至无醇味,得到总稠膏;
(2)将总稠膏分散在水中,用乙酸乙酯进行萃取,减压浓缩后,获得乙酸乙酯萃取物;
(3)将乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析分离,减压浓缩后,获得包含所述化合物的馏分B,其中,以体积比计,采用石油醚-丙酮=15:1→8:1→5:1→3:1作为流动相进行梯度洗脱;
(4)将步骤(3)中的馏分B经硅胶柱层析分离,减压浓缩后,获得包含所述化合物的亚馏分B-2,其中,以体积比计,采用石油醚-乙酸乙酯=10:1→6:1→4:1作为流动相进行梯度洗脱;
(5)将步骤(4)中获得的亚馏分B-2经Sephadex LH-20柱分离,用90%甲醇水溶液作为流动相进行洗脱,洗脱液浓缩后经丙酮重结晶,得到所述化合物。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤(1)中,所使用的乙醇为80%-95%的乙醇水溶液,每kg干燥的洋槐花对应的乙醇的量为0.66L,萃取3次,将滤液在45-55℃下干燥至无醇味。
4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,将总稠膏以体积比1:1的比例分散在水中,再以体积比1:1的比例加入乙酸乙酯进行萃取。
5.权利要求1所述的化合物作为PTP1B抑制剂的用途。
6.权利要求1所述的化合物在制备用于治疗糖尿病的药物中的用途。
7.权利要求1所述的化合物在制备用于治疗肥胖症的药物中的用途。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710586330.7A CN107501362B (zh) | 2017-07-18 | 2017-07-18 | 一种萘醌苷类化合物及其制备方法和用途 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710586330.7A CN107501362B (zh) | 2017-07-18 | 2017-07-18 | 一种萘醌苷类化合物及其制备方法和用途 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN107501362A true CN107501362A (zh) | 2017-12-22 |
CN107501362B CN107501362B (zh) | 2019-10-15 |
Family
ID=60679776
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201710586330.7A Expired - Fee Related CN107501362B (zh) | 2017-07-18 | 2017-07-18 | 一种萘醌苷类化合物及其制备方法和用途 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN107501362B (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110025624A (zh) * | 2019-05-29 | 2019-07-19 | 济宁医学院附属医院 | 萘醌苷类化合物在老年痴呆中的应用及其药物制备 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104163844A (zh) * | 2014-07-15 | 2014-11-26 | 南昌大学 | 甾体烯酮类化合物蕨藻烯酮及其制备和用途 |
-
2017
- 2017-07-18 CN CN201710586330.7A patent/CN107501362B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104163844A (zh) * | 2014-07-15 | 2014-11-26 | 南昌大学 | 甾体烯酮类化合物蕨藻烯酮及其制备和用途 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
NIZAM UDDIN ET AL.: "Bioassay-guided isolation of urease andα-chymotrypsin inhibitory constituents from the stems of Lawsonia alba Lam.(Henna)", 《FITOTERAPIA》 * |
徐秀琴: "洋槐花浸膏的化学组成与应用价值", 《安徽大学学报(自然科学版)》 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110025624A (zh) * | 2019-05-29 | 2019-07-19 | 济宁医学院附属医院 | 萘醌苷类化合物在老年痴呆中的应用及其药物制备 |
CN110025624B (zh) * | 2019-05-29 | 2021-04-02 | 济宁医学院附属医院 | 萘醌苷类化合物在老年痴呆中的应用及其药物制备 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN107501362B (zh) | 2019-10-15 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Zhang et al. | Screening, identification, and potential interaction of active compounds from Eucommia ulmodies leaves binding with bovine serum albumin | |
Qiu et al. | Kaempferol separated from Camellia oleifera meal by high-speed countercurrent chromatography for antibacterial application | |
CN103804443A (zh) | 黄酮苷类化合物及其制备方法 | |
TWI321052B (en) | Composition for treating cancer cells and preparation method thereof | |
CN110396074A (zh) | 一种苯丙素类化合物及其制备方法和用途 | |
CN108997296B (zh) | 几种异戊烯基二氢茋和异戊烯基黄酮的结构和用途 | |
Xiang et al. | Screening, characterization of trace α-glucosidase inhibitors from the root of Pueraria lobata and evaluation of their hypoglycemic activity | |
Li et al. | Unusual prenylated stilbene derivatives with PTP1B inhibitory activity from Artocarpus styracifolius | |
CN107501362A (zh) | 一种萘醌苷类化合物及其制备方法和用途 | |
CN108358921A (zh) | 一种新的吲哚生物碱类化合物及其制备方法和应用 | |
CN111018877B (zh) | 一种土木香中倍半萜类衍生物、其制备方法及应用 | |
CN109796511B (zh) | 一种新的环烯醚萜类化合物及其制备方法和医药用途 | |
KR101779391B1 (ko) | 짚신나물로부터 분리된 화합물을 포함하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물 | |
Chowdhury et al. | Oleanane triterpenoids from Akebiae Caulis exhibit inhibitory effects on Aβ42 induced fibrillogenesis | |
JP5462996B2 (ja) | 垂盆草から得られる肝保護剤、該肝保護剤を含有する医薬又は食品、及び垂盆草から得られる新規メガスチグマン化合物。 | |
JP6828883B2 (ja) | リグナン系化合物を含む食品組成物 | |
CN108948038A (zh) | 一种新紫檀烷型黄酮类化合物及其用途 | |
CN103113439A (zh) | 从对叶大戟中制备山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的方法 | |
de Almeida et al. | Flavonoids of Passiflora: isolation, structure elucidation, and biotechnological application | |
CN106589019A (zh) | 核桃青皮中一种异黄酮苷及其清洁高效制备工艺 | |
Hu et al. | Composition decipherment of Ficus pumila var. awkeotsang and its potential on COVID-19 symptom amelioration and in silico prediction of SARS-CoV-2 interference⋆ | |
CN105541932A (zh) | 从小蓟中提取的苯乙醇苷类化合物及其制备方法和用途 | |
CN111606801A (zh) | 一种裂环半日花烷型二萜类化合物及其分离方法和应用 | |
CN113354609B (zh) | 一种异戊烯基取代香豆素类化合物及其制备方法和应用 | |
Nguyen et al. | Phytochemical investigation on Vitex negundo leaves and their anti-inflammatory and analgesic activities |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20191015 Termination date: 20200718 |