CN107494838A

CN107494838A - 深海鱼鱼鳞制备的蛋白多肽的复配物

Info

Publication number: CN107494838A
Application number: CN201710764770.7A
Authority: CN
Inventors: 李健
Original assignee: Lanxi Goth Biological Technology Co Ltd
Current assignee: Lanxi Goth Biological Technology Co Ltd
Priority date: 2017-08-30
Filing date: 2017-08-30
Publication date: 2017-12-22

Abstract

本发明公开一种深海鱼鱼鳞制备的蛋白多肽的复配物，复配物的制备方法包括：深海鱼鱼鳞制备的蛋白多肽的制备，复配物的制备，复配物的配方为：茶叶、北刘寄奴、党参、黄芪、大枣、山药、深海鱼鳞蛋白多肽、沙棘、猴枣、桔子皮内层白色内皮，本发明运用超声波辅助溶解提高材料中的有益物质溶出率提升了制备的复配物功效，制备的复配物营养丰富，具有促进免疫力和抗衰老的效果，口感佳，老少皆宜。

Description

深海鱼鱼鳞制备的蛋白多肽的复配物

技术领域

本发明属于饮料技术领域，具体涉及深海鱼鱼鳞制备的蛋白多肽的复配物。

背景技术

鱼鳞是鱼真皮层的变形物,占鱼体重量的1%～5%,由结缔组织构成,起到保护鱼体免遭损害的作用。通常鱼鳞分三种:一种是板鳃鱼(如鲨鱼等)所特有的鳞;另一种是斜方型、边缘相联的硬鳞;第三种是骨鳞,这在硬骨鱼类中最多,每个鳞片可分为上下两层,上层由骨质组成,坚固脆薄,下层由纤维结缔组织相互交错而成,显得柔软以便鱼体活动,然而鱼鳞的真正构造还不太清楚,但通过X射线研究,推测与动物的骨相似,而且研究发现,鱼鳞成分和骨骼也相似,但是鱼鳞中的无机盐类含量较动物骨骼中无机盐类的含量要少得多。显微镜下,鱼鳞表面能看到规则的隆起线形成的鳞相,鱼鳞的纹样可以作为鱼的种类、年龄等的标记,并且鱼鳞也可被作为重金属的污染监视指标而利用。我国每年鱼的废弃物总量就达到200万以上,其中鱼鳞约占15%,即30万。近年来,营养学家发现,鱼鳞含有丰富的蛋白质和多种矿物质,其中有机物占41%～55%,磷酸钙38%～46%,还含少量碳酸钙、磷酸镁、磷酸钠等无机盐鱼鳞的有机物组成中除生胶质外,大部分为鱼类特有的鱼鳞硬蛋白(Ichthylepidin)、脂肪、色素、粘液质等。如果能充分利用这些成分,不仅可以提高鱼类加工的附加值,同时可减少环境污染,创造良好的经济与社会效益。

发明内容

本发明的目的在于提供一种深海鱼鱼鳞制备的蛋白多肽的复配物，通过添加活性多肽显著提高鱼鳞蛋白多肽的酶解的效果，制备的复配物营养丰富，具有促进免疫力和抗衰老的效果，口感佳，老少皆宜。

本发明为实现上述目的所采取的方案为：深海鱼鱼鳞制备的蛋白多肽的复配物由以下成分及重量份组成：，茶叶75-100份、党参10-25份、黄芪18-24份、大枣90-100份、猴枣0.4-0.6份、北刘寄奴0.2-0.5份、深海鱼鳞蛋白多肽10-20份，采用上述方法和配方成分制备份复配物具有优异的促进免疫力，而且在复配物中添加猴枣和鱼鳞蛋白多肽后的复配物无苦涩感或酸感，同时本发明的复配物饮用口感香醇，浓厚。

作为优选，复配物的制备步骤为：预处理、分步酶解、等电点沉淀、二次超滤并纳滤和复配物的制备。通过上述方法提取的复配物具有促进免疫力的效果，还具有非常浓厚的香味和口感，风味独特，老少皆宜。

作为优选，原料的预处理包括取鱼鳞，用0.4-0.5%的碱水按1-8:15的料液比进行清洗，除杂质，搅拌，12-15h后再除杂，脱脂，过滤，将鱼鳞搅碎，得到鱼鳞浆，鱼鳞含水量约为60%-70%，鱼鳞经过多道工序的加工可以得到纯度较高的鱼鳞浆，其含水量也比较高。

作为优选，分步酶解步骤为在鱼鳞浆中加入条斑紫菜蛋白酶10-20重量份，调节pH至6.0~7.0后加入活性多肽酶解2-4重量份，酶解温度为35~50℃，酶解时间为20~35min；调节pH至6.0~7.0后加入1~3wt﹪的风味蛋白酶，酶解，酶解温度为52~60℃，酶解时间为15~25min，灭酶，过滤，得到酶解液，上述酶解条件下，条斑紫菜蛋白酶的酶解效率高又不会造成资源浪费。

作为优选，活性多肽的加入量为条斑紫菜蛋白酶质量的10~20﹪，氨基酸序列为SCASVCKAHCRARRCGYYVSIFYRGYRRCYCRCLRC，上述活性多肽可通过范德华力和静电作用来改变条斑紫菜蛋白酶的三级结构，使条斑紫菜蛋白酶的酶解活力得到明显提高。

作为优选，等电点沉淀步骤为将酶解液过滤，调节滤液的pH值为4.5~4.8，静置后离心取沉淀。在上述pH环境下，深海鱼鳞蛋白多肽呈电中性，微溶于水，大部分以沉淀形式从水溶液中分离出来。

作为优选，二次超滤并纳滤步骤为先采用截留相对分子质量30~40kD的膜超滤，再采用截留相对分子质量4~8kD的膜超滤，最后将滤过液进行纳滤除盐，冷冻干燥得到深海鱼鳞蛋白多肽。为了防止膜孔堵塞或膜损害，先采用大孔超滤膜进行超滤，再采用小孔超滤膜超滤，有效去除分子量大于4~8kD的杂质。纳滤可较彻底的去除溶液中的无机盐及分子量小于200Da的杂质，对深海鱼鳞蛋白多肽进一步进行纯化。

作为优选，复配物的制备步骤：按重量份计取茶叶、北刘寄奴、党参、黄芪、大枣、沙棘、猴枣，粉碎至10-14目，加水浸泡3-5h，固液比为1-2:10，超声波助溶，超声波功率为300~500w，时间为5-8min，每小时助溶一次，文火煎煮2~3次，过滤，合并滤液干燥，加入深海鱼鳞蛋白多肽搅拌，冷藏，得复配物。上述步骤中运用超声波辅助溶解提高材料中的有益物质溶出率提升了制备的复配物功效，并且使用的材料通过合理组合和重量配比，使制备得到的复配物具有非常浓厚的香味和口感，风味独特，老少皆宜。

与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明深海鱼鱼鳞制备蛋白多肽过程中添加的活性多肽可通过范德华力和静电作用来改变条斑紫菜蛋白酶的三级结构，使条斑紫菜蛋白酶的酶解活力得到明显提高；提取的深海鱼鱼鳞蛋白多肽可用于促进免疫力饮料中即本发明的复配物，同时在复配物的制备过程中本发明运用超声波辅助溶解提高材料中的有益物质溶出率提升了制备的复配物功效，制备的复配物营养丰富，具有促进免疫力和抗衰老的效果，口感佳，老少皆宜。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明的技术方案作进一步详细描述：

实施例1：

深海鱼鱼鳞制备的蛋白多肽的复配物，包括预处理、分步酶解、等电点沉淀、二次超滤并纳滤和复配物的制备。

1）预处理:取鱼鳞，鱼鳞的水分含量应为15%，鱼鳍木屑以及碎鱼肉的含量低于总重的9%，粗蛋白含量不得低于60%,原料的前处理包括鱼鳞的清理、脱杂蛋白、脱脂肪等操作。剔除不合格的原料后，将鱼鳞放入清洗池，用0.45%的碱水按1:17的料液比进行清洗，剔除大块杂质，充分搅动，10h后用捞网撇去漂浮碎鱼皮、木块、线头等杂质。处理结束后将鱼鳞甲水至少清洗2遍，以去除碱残留。脱灰前，对罐体进行清洗消毒，将清理除杂后的鱼鳞投入反应罐，按超声波功率100w，酸浓度50%，脱灰时间2h，按干鱼鳞25倍水的条件加入柠檬酸和水进行脱灰操作，反应过程中开启搅动泵和超声设备，控制温度在250℃，将上一步操作中过滤的滤液加碱调节pH至中性，用板框过滤机过滤后，用少量的水清洗柠檬酸钙滤渣，再过滤一遍，进入气流干燥机进行干燥。经过过滤的脱灰后鱼鳞含水量约为70%，将其用绞碎机绞碎后转到酶解罐，绞碎过程控制温度不宜超过23℃；

2) 分步酶解：在鱼鳞浆中加入条斑紫菜蛋白酶15重量份，调节pH至8.0后加入活性多肽2重量份，酶解，酶解温度为35℃，酶解时间为33min；酶解结束后调节pH至7.0后加入3wt﹪的风味蛋白酶，酶解，酶解温度为60℃，酶解时间为17min，灭酶，过滤，得到酶解液；

3) 活性多肽的加入量为条斑紫菜蛋白酶质量的15﹪，氨基酸序列为SCASVCKAHCRARRCGYYVSIFYRGYRRCYCRCLRC；

4) 等电点沉淀：将酶解液过滤，调节滤液的pH值为4.6，静置后离心取沉淀。在上述pH环境下，深海鱼鳞蛋白多肽呈电中性，微溶于水，大部分以沉淀形式从水溶液中分离出来；

5) 二次超滤并纳滤：先采用截留相对分子质量40kD的膜超滤，再采用截留相对分子质量8kD的膜超滤，最后将滤过液进行纳滤除盐，冷冻干燥得到深海鱼鳞蛋白多肽；

6) 复配物：按重量份计取茶叶、北刘寄奴、党参、黄芪、大枣、猴枣，粉碎至14目，加水浸泡3h，固液比为1:10，超声波助溶，超声波功率为300w，时间为7min，每小时助溶一次，文火煎煮3次，过滤，合并滤液干燥，加入蛋白多肽片剂，得复配物。

实施例2；

1）预处理:取鱼鳞，鱼鳞的水分含量应为10%，鱼鳍木屑以及碎鱼肉的含量低于总重的5%，粗蛋白含量不得低于50%,原料的前处理包括鱼鳞的清理、脱杂蛋白、脱脂肪等操作。剔除不合格的原料后，将鱼鳞放入清洗池，用0.4%的碱水按1:15的料液比进行清洗，剔除大块杂质，充分搅动，12h后用捞网撇去漂浮碎鱼皮、木块、线头等杂质。处理结束后将鱼鳞甲水至少清洗2遍，以去除碱残留。脱灰前，对罐体进行清洗消毒，将清理除杂后的鱼鳞投入反应罐，按超声波功率120w，酸浓度60%，脱灰时间3h，按干鱼鳞20倍水的条件加入柠檬酸和水进行脱灰操作，反应过程中开启搅动泵和超声设备，控制温度在200℃，将上一步操作中过滤的滤液加碱调节pH至中性，用板框过滤机过滤后，用少量的水清洗柠檬酸钙滤渣，再过滤一遍，进入气流干燥机进行干燥。经过过滤的脱灰后鱼鳞含水量约为60%，将其用绞碎机绞碎后转到酶解罐，绞碎过程控制温度不宜超过20℃；

2) 分步酶解：在鱼鳞浆中加入条斑紫菜蛋白酶16重量份，调节pH至6.5后加入活性多肽3重量份，酶解，酶解温度为40℃，酶解时间为30min；酶解结束后调节pH至7.0后加入3wt﹪的风味蛋白酶，酶解，酶解温度为50℃，酶解时间为18min，灭酶，过滤，得到酶解液；

3) 活性多肽的加入量为条斑紫菜蛋白酶质量的10﹪，氨基酸序列为SCASVCKAHCRARRCGYYVSIFYRGYRRCYCRCLRC；

4) 等电点沉淀：将酶解液过滤，调节滤液的pH值为4.5，静置后离心取沉淀。在上述pH环境下，深海鱼鳞蛋白多肽呈电中性，微溶于水，大部分以沉淀形式从水溶液中分离出来；

5) 二次超滤并纳滤：先采用截留相对分子质量38kD的膜超滤，再采用截留相对分子质量6kD的膜超滤，最后将滤过液进行纳滤除盐，冷冻干燥得到深海鱼鳞蛋白多肽；

6) 复配物：按重量份计取茶叶、北刘寄奴、党参、黄芪、大枣、猴枣，粉碎至14目，加水浸泡3h，固液比为1:10，超声波助溶，超声波功率为300w，时间为8min，每小时助溶一次，文火煎煮2次，过滤，合并滤液干燥，加入蛋白多肽片剂，得复配物。

本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。

以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。

序列表

<110> 兰溪市哥特生物技术有限公司

<120> 深海鱼鱼鳞制备的蛋白多肽的复配物

<160> 1

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 36

<212> PRT

<213> 厚壳贻贝(Mytilus coruscus)

<400> 1

Ser Cys Ala Ser Val Cys Lys Ala His Cys Arg Ala Arg Arg Cys Gly

1 5 10 15

Tyr Tyr Val Ser Ile Phe Tyr Arg Gly Tyr Arg Arg Cys Tyr Cys Arg

20 25 30

Cys Leu Arg Cys

35

Claims

1.深海鱼鱼鳞制备的蛋白多肽的复配物，其特征在于：所述复配物由以下成分及重量份组成：茶叶75-100份、党参10-25份、黄芪18-24份、大枣90-100份、猴枣0.4-0.6份、北刘寄奴0.2-0.5份、深海鱼鳞蛋白多肽10-20份。

2.根据权利要求1所述的深海鱼鱼鳞制备的蛋白多肽的复配物，其特征在于：所述复配物的制备步骤为：预处理、分步酶解、等电点沉淀、二次超滤并纳滤和复配物的制备。

3.根据权利要求2所述的深海鱼鱼鳞制备的蛋白多肽的复配物，其特征在于：所述原料的预处理包括取鱼鳞，用0.4-0.5%的碱水按1-8:15的料液比进行清洗，除杂质，搅拌，12-15h后再除杂，再清洗2-3遍，脱脂，过滤，将鱼鳞搅碎，得到鱼鳞浆，鱼鳞含水量约为60%-70%。

4.根据权利要求2所述的深海鱼鱼鳞制备的蛋白多肽的复配物，其特征在于：所述分步酶解步骤为在鱼鳞浆中加入条斑紫菜蛋白酶10-20重量份，调节pH至7.0~8.0后加入活性多肽2-4重量份，酶解，酶解温度为35~50℃，酶解时间为20~35min；酶解结束后调节pH至6.0~7.0后加入1~3wt﹪的风味蛋白酶，酶解，酶解温度为52~60℃，酶解时间为15~25min，灭酶，过滤，得到酶解液。

5.根据权利要求4所述的深海鱼鱼鳞制备的蛋白多肽的复配物，其特征在于：所述活性多肽的加入量为条斑紫菜蛋白酶质量的10~20﹪，氨基酸序列为SCASVCKAHCRARRCGYYVSIFYRGYRRCYCRCLRC。

6.根据权利要求2所述的深海鱼鱼鳞制备的蛋白多肽的复配物，其特征在于：所述等电点沉淀步骤为将酶解液过滤，调节滤液的pH值为4.5~4.8，静置后离心取沉淀。

7.根据权利要求2所述的深海鱼鱼鳞制备的蛋白多肽的复配物，其特征在于：所述二次超滤并纳滤步骤为先采用截留相对分子质量30~40kD的膜超滤，再采用截留相对分子质量4~8kD的膜超滤，最后将滤过液进行纳滤除盐，冷冻干燥得到深海鱼鳞蛋白多肽。

8.根据权利要求2所述的深海鱼鱼鳞制备的蛋白多肽的复配物，其特征在于：所述复配物的制备步骤：按重量份计取茶叶、北刘寄奴、党参、黄芪、大枣、猴枣，粉碎至10-14目，加水浸泡3-5h，固液比为1-2:10，超声波助溶，超声波功率为300~500w，时间为5-8min，每小时助溶一次，文火煎煮2~3次，过滤，合并滤液，加入深海鱼鳞蛋白多肽搅拌，冷藏，得复配物。