CN107438366B - 使用脂氧素、消退素及其类似物稳定动脉粥状硬化斑块的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供使用LXA4，消退素E1或其类似物增加斑块稳定性的方法。还提供了使用LXA4，消退素E1或其类似物治疗或预防从增加的斑块稳定中受益的动脉疾病的方法。

Description

使用脂氧素、消退素及其类似物稳定动脉粥状硬化斑块的 方法

相关申请的交叉引用

本申请要求2015年3月18日递交的美国临时申请第62/134,894号的优先权，该申请的全部内容通过引证在此全部并入本文。

背景技术

动脉粥样硬化是一种慢性的、脂蛋白驱动的炎症性疾病，由于病变或者粥样硬化斑块的发展而导致管腔狭窄(Ross(1999)N Engl.J.Med.340:115-126)。这种疾病导致的斑块通常分为稳定斑块和不稳定斑块两大类，每一类都有明显的生物学和形态学特征。稳定的动脉粥样硬化斑块的特征是大量的细胞外基质(ECM)和平滑肌细胞，而不稳定的或所谓的易损斑块主要由巨噬细胞和泡沫细胞组成，由少量的ECM覆盖。当这种薄薄的ECM层(通常称为纤维帽)破裂时，动脉管腔内形成血栓(即血凝块)，可导致动脉完全闭塞，或导致下游血管的闭塞(Finn et al.(2010)Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.30(7):1282-92；Bentzon et al.(2014)Circ.Res.6:1852-1866)。这种斑块的发展和破裂可能突然导致危及生命的冠状动脉血栓形成，表现为急性心肌梗死或心脏病发作。动脉粥样硬化斑块常常导致血栓的沉淀，沉淀的血栓阻碍血液流向心脏、大脑或下肢，从而分别导致冠心病、缺血性中风或外周血管疾病。

参与斑块侵蚀过程的机制虽然仍是未知的，但是有动物研究和人类遗传学研究的证据表明，白三烯和脂氧合酶(白三烯合成所需的酶)促炎症性通路在动脉粥样硬化中起重要作用，并可能在易损斑块的发展中也起到重要作用(Dwyer et al.(2004)N.Engl.J.Med.350:29-37；Zhou et al.(2010)Cardiology 115:221-228)。在存在炎症的生物过程中，宿主炎症性反应的早期作用随后被更特异的炎症分解机制所取代。对于抗炎症性脂类介质(例如脂氧素和消退素)对粥状动脉硬化症的影响的了解很少。近年来牙周病发病样式强调这些逆调节分子(“关闭信号”)在控制炎症反应的幅度和持续时间方面的重要性(Van Dyke(2011)J.Clin.Periodontol.38(Suppl.11)119:125)。ω-3和ω-6多不饱和脂肪酸(n-3和n-6PUFA)是日常饮食来源提供的必需脂肪酸，并且发挥抗炎症性反应来限制由于其降血脂性能造成的炎症性级联反应。消退素(Resolvins)来自ω-3脂肪酸，EPA和DHA(分别是消退素E1和消退素D1)，而脂氧素来自ω-6脂肪酸花生四烯酸(AA)。消退素和保护素(也来源于DHA)的抗炎症性作用和前消散作用已经记载在一些炎症性疾病和包括牙周疾病的组织损伤的动物模型中(Serhan et al.(2003)J.Immunol.171:6856-6865；Hasturket al.(2006)FASEB J.20:401-403；Hasturk et al.(2007)J.Immunol.179:7021-7029)。

但是除了这些结果之外，很少内源性的拮抗剂(与炎症性过程或者免疫抑制的抑制剂不同)是已知的。与治疗或者预防动脉疾病的根源起因并增加斑块稳定作用的方法不同，现有的治疗方法主要局限于手术过程(如，支架)来治疗。预防性策略和相关的治疗方案通常旨在降低胆固醇水平(即，使用他汀类药物)，因此，很有必要去识别能够增加易损动脉粥样硬化斑块稳定的药物和用于治疗并预防动脉疾病的方法，使用这种试剂增加斑块稳定性之后对所述动脉疾病有利。

发明内容

本发明基于，至少部分基于一个发现，即脂氧素A4(LXA4)、脂氧素类似物、消退素类化合物成员(例如消退素D1和消退素E1)及其类似物可以稳定动脉粥状硬化斑块。因此，在本发明的一个方面，脂氧素A4(LXA4)、消退素或其类似物可以被用于治疗或者预防动脉疾病。在某些实施方案中，动脉疾病是一种斑块稳定对患者有利的疾病。

在一个方面，本发明提供了一种治疗或者预防需要的患者所患的能够从增加的斑块稳定性中获利的动脉疾病的方法，该方法包括对患者施用治疗有效量的脂氧素A4(LXA4)、消退素或其类似物，从而治疗或者预防所述能够从增加的斑块稳定性中获利的动脉疾病。在另一个实施方案中，脂氧素A4(LXA4)、消退素或其类似物可以被配置在一种药学上可接受的载体中，例如，在口腔冲洗液中、在口香糖中，在食品添加剂中、在糖果锭剂中、在片剂中、在可咀嚼的胶囊中、在口腔传递装置中或者被包覆在生物或者合成来源的可吸收的载体纳米颗粒中。在另一个实施方案中，有效量的脂氧素A4(LXA4)、消退素或其类似物是一种能够增加易损斑块稳定性的量。在另一个实施方案中，本方法进一步包括施用至少一种额外的试剂，例如治疗所述能够从增加的斑块稳定性中获利的动脉疾病的抗炎症性试剂。在另一个实施方案中，LXA4类似物是9,12-苯并-LXA4。在另一个实施方案中，消退素是消退素E1。在另一个实施方案中，所述施用是局部施用。

在另一个方面，本发明提供了用于治疗需要的患者所患的动脉疾病的方法，该方法包括：a)对患者的至少一个易损动脉斑块进行手术；b)手术时向手术伤口处施用一种治疗有效量的脂氧素A4(LXA4)、消退素或其类似物；从而治疗患者的动脉疾病。在另一个实施方案中，脂氧素A4(LXA4)、消退素或其类似物可以被配置在一种药学上可接受的载体(生物或者合成来源的纳米颗粒)中。在另一个实施方案中，药学上可接受的载体选自由口腔冲洗液、口香糖，食品添加剂、糖果锭剂、片剂、可咀嚼的胶囊和口腔传递装置所组成的组中。在另一个实施方案中，有效量的脂氧素A4(LXA4)、消退素或其类似物是一种能够增加斑块稳定性的量。在另一个实施方案中，本方法进一步包括施用至少一种额外的试剂，例如治疗所述动脉疾病的抗炎症性试剂。在另一个实施方案中，LXA4类似物是9,12-苯并-LXA4。在另一个实施方案中，消退素是消退素E1。在另一个实施方案中，所述施用是局部施用。

另外，这里具体实施方案部分公开了本发明的其他方面。

附图说明

图1显示了施用LXA4(1mg/ml)治疗易损动脉粥状斑块的实验方案的示意图。

图2显示了动物模型研究中消退素E1治疗组和参照组中每只实验兔被破坏的斑块百分比。

具体实施方案

本发明基于，至少部分基于一个发现，即在动脉粥状硬化兔模型中，9,12-LXA4和消退素E1可以增加动脉粥状硬化斑块的稳定性并且将易损斑块保持在一种更为稳定的表型。每隔一天对兔下颌骨两侧牙龈使用9,12-LXA4或消退素E1出乎意料的足够稳定由于高胆固醇饮食和球囊对下行胸腹主动脉段损伤引起的动脉粥状硬化斑块。因此，这里提供了使用脂氧素A4(LXA4)、消退素或其类似物治疗能够从增加的斑块稳定性中获利的动脉疾病的方法。这里还提供了监控治疗这种疾病过程以及预计对这种治疗的反应的方法。

A.定义

为了使本发明可以被更好的理解，首先定义了一些术语。其他的定义在具体描述过程中有所阐述。

本文中使用的“一个”和“一种”指的是一个或者一个以上(即，至少一个)文章的语法对象。举例来说，“一个元素”指的是一个元素或者一个以上元素。

术语“类似物”指的是任何具有母体化合物基本结构成分的分子。脂氧素和消退素的类似物包括羧基成分、二醇成分，一个四烯成分，和醇成分。这些成分可以是任意尺寸的并且可以以任意方式彼此相连。另外，这些成分可以包括多种取代基或者具有一些碳原子取代，例如，被环或者杂原子取代。这种类似物还保留至少一个脂氧素活性但不发生母体脂氧素化合物典型的代谢失活作用，因此这种化合物在体内的半衰期显著大于母体化合物在体内的半衰期。在一些实施方案中，脂氧素类似物有“活跃区”，起到类似“天然脂氧素”的活性区域的功能，但不同于天然脂氧素，它有一个“代谢转化区”。这种脂氧素类似物包括在结构与天然脂氧素类似的化合物，具有相同的受体识别位点的化合物，具有与脂氧素相同或相似的脂氧素代谢转化区的化合物以及本领域内已知术语脂氧素类似物的化合物。也包括脂氧素的模拟代谢产物。本文公开的化合物可以包含一个或多个不对称中心。在存在不对称碳原子的位置，可能存在多个立体异构体，并且所有可能的异构体形式被包含在显示的结构表现中。光学活性(R)和(S)异构体可以用本领域普通技术人员所知道的常规技术来解决。本发明包括可能的非对应异构体以及外消旋和光学异构体。在本文中，“相应的脂氧素”和“天然脂氧素”指的是一种自然产生的脂氧素和脂氧素代谢物。“活性区域”指的是一个天然脂氧素或脂氧素类似物的一个区域，该区域与体内细胞相互作用有关。活性区域可以结合细胞脂氧素受体或大分子或复杂的大分子的“识别位点”，包括酶和辅因子。脂氧素A4类似物有一个活性区域，该活性区域包括天然脂氧素A4是的C5-C15。术语“代谢转化区”通常是指脂氧素，脂氧素的代谢产物，或脂氧素类似物(包括脂氧素类似物代谢物)的一部分，在该部分上，酶或酶及其辅酶试图执行一个或多个代谢转换，所述转化后所述酶或酶和辅因子通常变换成脂氧素。代谢转化区域可能或不可能易被转化。脂氧素代谢转化区的一个非限制性的例子是LXA4包括c-13,14双键或C-15羟基的部分，或同时包括两者的部分。术语“抑制代谢”指的是阻断或减少能够代谢天然脂氧素的酶的活性。所述阻断或减少可以通过通过共价键合，通过不可逆结合，通过具有不可逆结合实际效果的可逆结合，或以任何其他能够防止酶以其通常的方式在其他脂氧素类似物(包括脂氧素类似物代谢物、脂氧素或者脂氧素代谢物)上运行的方式实现。术语“抗代谢”是指包括没有经历至少一个能够代谢脂氧素的酶的一个或一个以上的代谢衍生物转换。具有抗代谢作用的LXA4类似物的两个非限制性实施例是：1)一种不能被氧化为15氧化形成的结构，和2)一种可以被氧化为15-氧化形式，但不易被酶还原到13,14-二氢形式的结构。术语“更为缓慢地进行新陈代谢”是指具有较慢的反应动力学，或需要更多的时间来完成由一个或者一个以上能够代谢脂氧素的酶催化的一系列代谢转化。更为缓慢地进行新陈代谢的LXA4的一个非限制性的实施例是一种比LXA4具有更高C-15脱氢转化状态能量的结构，这是由于该类似物在C-16空间上协同位阻。

术语“结合”或者“相互作用”指的是一种关联，这种关联可以是两个分子间的稳定的关联，例如，在本发明的多肽和结合体之间的由，例如静电作用、疏水作用、离子和/或氢键作用，在生理条件下。示例性的相互作用包括蛋白-蛋白相互作用、蛋白-核酸相互作用、蛋白-小分子相互作用和小分子-核酸相互作用。

当用于指诊断实验时，术语“生物样品”包括从患者中分离出来的组织、细胞和生物体液，以及患者体内存在的组织、细胞和体液。

术语“体液”指的是从身体提取或者分泌的液体以及通常不会从身体中分泌的液体(如羊水、眼房水、胆汁、血液和血浆、脑脊液、脊髓液(ceriman)和耳垢，考珀液或射精前液、辣椒、磬、大便、女性射精液，组织间液、细胞内液、淋巴、月经、乳汁、粘液、胸液、脓液、唾液、皮脂、精液，血清，汗，滑膜液，眼泪，尿液、阴道润滑、玻璃体液、呕吐物)

B.主体

术语“主体”和“患者”可互换使用。如这里所使用的，术语“主体”和“主体们”指的是一种动物，例如，哺乳动物，包括非灵长类动物(如牛、猪、马、驴、山羊、骆驼、猫、狗、豚鼠、大鼠、小鼠、绵羊)和灵长类动物(如猴子，如食蟹猴，大猩猩，黑猩猩和人类)。在一个实施方案中，被治疗或者预防能够从增加的斑块稳定性中获利的动脉疾病的主体是哺乳动物(例如，大鼠、小鼠、灵长类动物、非人类哺乳动物，家畜，例如狗、猫、牛、马等)，并且优选是人类。在一些实施方案中，所述人类患有或怀疑有能够从增加的斑块稳定性中获利的动脉疾病。

术语“动脉疾病”和“能够从增加的斑块稳定性中获利的动脉疾病”包括由动脉斑块造成的或者特点在于动脉斑块的紊乱、疾病或者病况，所述动脉斑块具有异常高的巨噬细胞和泡沫细胞组成。

C.LXA4、LXA4类似物及其口腔制剂

脂氧素是来源于脂肪酸、花生酸的天然脂质介质(Bazan(2006)in BasicNeurochemistry:Molecular,Cellular and Medical Aspects,7th edition,G.Siegel etal.(eds.),Chapter 33:575-591；Mattson and Bazan(2006)in Basic Neurochemistry:Molecular,Cellular and Medical Aspects,7th edition,G.Siegel et al.(eds.),Chapter 35:603-615.脂氧素是炎症反应的消退期和免疫功能失调的主要调节因子(Serhan et al.(1999)Adv.Exp.Med.Biol.469:287-293；Fiorucci et al.(2004)Proc.Natl.Acad.Sci.USA.101:15736-15741).在20世纪80年代最初发现脂氧素一来，已经发现/合成了脂氧素的几个种类，例如LXA4和LXB4，以及他们的类似物。具体的说，脂氧素A₄及其类似物，包括脂氧素A₄异构体15(或者15-epi-脂氧素A₄),是本领域内已知的(美国专利第6,831,186；6,645,978；和8,093,417号；美国专利公开号第2012/0149771号；Fierro etal.(2003)J.Immunol.170:2688-2694；Bannenberg et al.(2004)Brit.J.Pharma.143:43-52；and Scalia et al.(1997)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 94:9967-9972).

LXA₄类似物也是本领域内已知的。已经发现，苯并脂氧素与任意一种内源性脂氧素(LXA₄和LXB₄)相比具有更好的温度稳定性和代谢稳定性。用苯并融合环取代LXA4的四烯单元可以有效合成这些类似物。9，12-LXA4是苯并-脂氧素种类中的一员，并且已经在急性炎症鼠模型中显示具有有效的抗炎症性性质，能够显著降低中性粒细胞(PMN)在体内的浸润和炎性细胞因子水平(Sun et al.(2009)Prost.Leuokt.Essent.Fatty Acids 81:357-366；Petasis et al.(2008)Bioorg.Med.Chem.Lett.18:1382-1387)。

在一些实施方案中，LXA₄类似物具有以下结构中的一种：

这些可以被扩展从而包括其他的LXA₄类似物，包括制定立体化学的下列结构中的一种：

在这些结构中，R-基团独立的选自以下：

R是氢或直链烷基、支链烷基、环状烷基、饱和烷基或不饱和烷基；

R¹,R²,R¹²,R¹³分别独立的选自：氢；具有1至20个碳原子的直链烷基、支链烷基、环烷基、饱和烷基或不饱和烷基；具有1至20个碳原子的取代的烷基，其中，所述烷基被一个或者一个以上选自卤素、羟基、低级烷氧基、芳氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰胺基、芳基氨基、羟基氨基，烷氧基氨基，烷基硫，芳基硫、羧基、酰胺基、酰烷氧基的取代基所取代；芳基和杂芳基、取代的芳基或杂芳基，其中所述取代的芳基或者杂芳基被一个或一个以上选自烷基、环烷基、烷氧基、卤素、芳基，杂芳基，羧基和酰胺基的取代基所取代；以及基团Z-Y，其中，Z是具有1至20个碳原子的直链烷基、支链烷基、环烷基、饱和烷基或不饱和烷基；取代的低级烷基，其中所述烷基被一个或者一个以上选自卤素、羟基、低级烷氧基、芳氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰胺基、芳基氨基、羟基氨基，烷氧基氨基，烷基硫，芳基硫、羧基、酰胺基、酰烷氧基的取代基所取代；芳基和杂芳基、取代的芳基或杂芳基，其中所述取代的芳基或者杂芳基被一个或一个以上选自烷基、环烷基、烷氧基、卤素、芳基，杂芳基，羧基和酰胺基的取代基所取代；以及，Y选自氢；烷基；环烷基；羧基；酰胺基；芳基；杂芳基；取代的芳基或者杂芳基，其中，所述芳基或者杂芳基被一个或一个以上选自烷基、环烷基、烷氧基、卤素、芳基，杂芳基，羧基和酰胺基的取代基所取代；

R³选自氢；具有1至20个碳原子的直链烷基、支链烷基、环状烷基、饱和烷基或不饱和烷基；具有1至20个碳原子的取代的烷基，其中，所述烷基被一个或者一个以上选自卤素、羟基、低级烷氧基、芳氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰胺基、芳基氨基、羟基氨基，烷氧基氨基，烷基硫，芳基硫、羧基、酰胺基、酰烷氧基的取代基所取代；芳基和杂芳基、取代的芳基或杂芳基，其中所述取代的芳基或者杂芳基被一个或一个以上选自烷基、环烷基、烷氧基、卤素、芳基，杂芳基，羧基和酰胺基的取代基所取代；以及

R⁴-R¹¹选自由以下基团所组成的组中：氢；卤素；具有1至20个碳原子的直链烷基、支链烷基、环状烷基、饱和烷基或不饱和烷基；具有1至20个碳原子的取代的烷基，其中，所述烷基被一个或者一个以上选自卤素、羟基、低级烷氧基、芳氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰胺基、芳基氨基、羟基氨基，烷氧基氨基，烷基硫，芳基硫、羧基、酰胺基、酰烷氧基、芳基和杂芳基的取代基所取代；芳基和杂芳基、取代的芳基或杂芳基，其中所述取代的芳基或者杂芳基被一个或一个以上选自烷基、环烷基、烷氧基、卤素、芳基，杂芳基，羧基和酰胺基的取代基所取代；

R,R¹-R¹³还可以相连形成一个或者一个以上的含有3-20个碳原子、1到6个氧原子或者1到6个氮原子的环。

R¹-R¹³中选择的一对还可以被产生碳-碳双键或者三键或者环的键所取代。

方案1中显示了示例性、代表性的LXA4类似物的实施例。提供这些实施例仅仅起到解释的作用，不应以任何方式限制本发明的范围。同样应该被理解为优选化合物的是方案1中显示的化合物，其中，结构中显示的碳链和环额外包括取代，所述取代选自卤素、羟基、低级烷氧基、芳氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰胺基、芳基氨基、羟基氨基，烷氧基氨基，烷基硫，芳基硫、羧基、酰胺基、酰烷氧基、芳基和杂芳基。

方案1

方案1

在一些实施方案中，LXA4或其类似物可以与一种生理学上可兼容的载体介质一起配制。这些介质可以是任意简单的种类，例如，药学上可接受的载体，例如果糖-低聚-糖(FOS)介质，或者其他可溶纤维、糖、养料或者用于组合物的基础材料，与这些材料一起，LXA4或其类似物可以被配制成，例如，口服给药形式。其他非限制性的、示例性载体介质包括甘露醇、菊粉(多糖)，聚右旋糖苷，阿拉伯半乳聚糖，多元醇乳糖，乳糖醇等。在本发明公开内容的实际操作中，多种材料可以被用作载体材料，根据这里的公开，本领域普通技术人员对这些材料是已知的。

当存在这些载体介质时，这些载体介质可以与LXA4和/或其类似物以任何合适的量相混合，例如，载体介质的量为LXA4和/或其类似物以及载体基质的总量或者总体积的5％-95％。在一些实施方案中，载体介质的量可以是一个范围，范围的下限为5％,10％,12％,15％,20％,25％,28％,30％,40％,50％,60％,70％或75％中的任意值，范围的上限高于所述下限，可以是20％,22％,25％,28％,30％,40％,50％,60％,70％,75％,80％,85％,90％和95％的中的任意值。在具体实施方案中，载体介质的量可以根据具体的剂量形式来考虑，相对应于LXA4和/或其类似物的量来考虑、相对于包括载体介质和细菌菌种的组合物总量来考虑，以及相对于所述载体介质的物理和化学性质来考虑，或者从LXA4制剂所属技术领域的普通技术人员已知的其他方面来考虑。

这里公开的LXA4和/或其类似物可以被配制成口服给药的形式。在一些实施方案中，所述口服给药针对的是口腔应用，例如，通过将组合物和其中包含的活性成分使用到口腔表面来给药，包括，但是不局限于唾液腺，唾液，牙龈，牙齿，舌头，脸颊组织等等。术语“口服可接受的载体”指的是一种或者一种以上安全的固体或者液体稀释剂或者能够与LXA4和/或其类似物相容的并适合于局部口腔给药的包裹物质。术语“相容”指的是所述底物能够与LXA4和/或其类似物相混合且不会发生能够减低试剂稳定性和/或功效的相互反应。这种口服可接受的载体的非限制性实施例包括蒸馏水或者去离子水、碳酸钙、柠檬酸钙、膨润土和蒙脱石。

术语“口服治疗组合物”指的是任意适用于通过人类或者动物患者口腔诶吆用于提高患者健康的组合物，优选能够提供以下优点：预防或者治疗能够从增加的斑块稳定性中获益的动脉疾病。本发明的口服组合物可以以胶囊、扁囊剂，丸剂，锭剂，颗粒剂，龈下凝胶，洁齿剂，口腔冲洗剂，口腔喷雾剂，口服片剂，口服装置，口香糖，水包油乳剂，油包水乳剂，酏剂，糖浆或糊剂形式存在，使用惰性基质，例如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯树胶；或者被包裹在生物或者合成来源的可吸收载体纳米颗粒中。所述颗粒包括至少一个细胞衍生的微颗粒，如L.Norling et al.,Journal of Immunology,Cutting Edge:Humanized Nano-Proresolving Medicines Mimic Inflammation-Resolution and Enhance WoundHealing(2011年4月1日在线公开)和WO2012/135032，这两篇文献通过引证全部并入本文。所述口服组合物还可以被整合在贴片或者薄膜上用于或者粘附于口腔表面。

在用于口服给药的固体制剂(胶囊剂、片剂、丸剂、糖锭、粉末、颗粒剂等等)中，活性成分与一种或者一种以上药学上可接受的载体相混合，所述载体例如柠檬酸钠或者磷酸氢二钠，和/或以下任意一种：(1)填充剂或者延展剂，例如淀粉、乳糖、蔗糖、果糖、甘露糖和/或硅酸；(2)粘结剂，例如，比方说，羧甲基纤维素、藻酸盐，明胶，聚乙烯吡咯烷酮，蔗糖和/或阿拉伯胶；(3)保湿剂，例如甘油；(4)崩解剂，例如琼脂，碳酸钙，马铃薯或木薯淀粉，海藻酸，某些硅酸盐和碳酸钠；(5)溶液阻滞剂，如石蜡；(6)吸收促进剂，如季铵化合物；(7)润湿剂，例如，比方说，乙酰醇和甘油单硬脂酸酯；(8)吸收剂，如高岭土和膨润土；(9)润滑剂，如滑石，硬脂酸钙，硬脂酸镁，固体聚乙二醇，月桂基硫酸钠及其混合物；和(10)着色剂。在胶囊剂、片剂和丸剂中，药物组合物还包括缓冲剂。相似类型的固体组合物还可以被用作填充剂填充在软和硬-填充明胶胶囊中，使用赋形剂例如乳糖或者奶糖，以及高分子量聚乙二醇等。

片剂可以通过压制或者铸模成型，选择性的加入一种或者一种以上附加成分。压制的片剂可以使用粘结剂(例如，明胶或者羟丙甲纤维素)、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、崩解剂(例如，淀粉羟乙酸钠或交联羧甲基纤维素钠)、表面活性剂或者分散剂。铸模成型的片剂可以通过在合适的机器中铸模被惰性液态稀释剂润湿的粉末状肽或者肽类似物。

片剂和其他固体剂量形式，例如，糖衣丸、胶囊、丸剂和颗粒剂可以选择性的存储或者制备在包衣或者壳中，例如肠溶衣和其他药物制剂领域普通技术人员已知的包衣中。他们还可以被配制成一种可以缓释或者控制释放其中的活性成分的剂型，例如，使用不同比例的羟丙甲纤维素以实现理想的释放曲线，或者使用其他的聚合基质、脂质体和/或微球。他们可以通过，例如，通过阻拦细菌的滤膜过滤或者通过向灭菌的固体组合物中加入灭菌剂来灭菌，所述灭菌剂可以溶解在无菌水中，或者在使用前马上溶解在其他无菌可注射介质中来使用。这些组合物还可以选择性的包括不透明试剂，并且可以是那种可以只在或者优选在胃肠道特定位置释放(选择性的，以一种延迟的方式释放)其活性成分的组合物。这里可以使用的包埋组合物的实施例包括聚合性物质和蜡。如果适合的话，这些活性成分还可以是微包覆形式，含有上述一种或者一种以上赋形剂。

用于口服给药的液体剂量形式包括药学上可接受的乳化剂、微乳化剂、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除了活性成分之外，液体剂量形式还可以包括本领域普通技术人员惯常使用的惰性稀释剂，例如，比方说，水或其它溶剂，增溶剂和乳化剂，例如乙醇，异丙醇，碳酸乙酯，乙酸乙酯，苯甲醇，苯甲酸苄酯，丙二醇，1,3-丁二醇，油类(特别是棉籽油，花生油，玉米油，胚芽油，橄榄油，蓖麻油和芝麻油)，甘油，四氢呋喃醇，聚乙二醇和脱水山梨醇的脂肪酸酯及其混合物。

悬浮液除了活性制剂之外还可以包含悬浮剂，例如，乙氧基化异硬脂醇，聚氧乙烯山梨糖醇和脱水山梨糖醇酯，微晶纤维素，偏氢氧化铝，膨润土，琼脂和黄蓍胶，及其混合物。

在一些实施方案中，纳米颗粒传递载体可以用于口服给药。

本发明中使用的口服组合物可以与药学上可接受的载体和/或稀释剂一起配制。在本文中的术语“药学上可接受的”用于指在合理的医学判断的范围内适合用于与人类和动物的组织接触而没有过量的毒性，刺激，过敏反应或其他问题或并发症，与合理的利益/风险比相称的那些试剂，材料，组合物和/或剂型。

本文所用的术语“药学上可接受的载体”是指药学上可接受的材料，组合物或载体，例如液体或固体填充剂，稀释剂，赋形剂，溶剂或包封材料，其涉及从一个器官或身体的一部分携带或运输受试化学物质到另一个器官或身体的另一部分。每种载体必须是“可接受的”，即与制剂的其他成分相容并不对受试者有害。可用作药学上可接受的载体的材料的一些实例包括：(1)糖，如乳糖，葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；(3)纤维素及其衍生物，例如羧甲基纤维素钠，乙基纤维素和乙酸纤维素；(4)粉末状黄蓍胶；(5)麦芽(6)明胶；(7)滑石；(8)赋形剂，例如可可脂和栓剂蜡；(9)油，如花生油，棉籽油，红花油，芝麻油，橄榄油，玉米油和大豆油；(10)二醇，如丙二醇；(11)多元醇，如甘油，山梨糖醇，甘露醇和聚乙二醇；(12)酯，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；(13)琼脂；(14)缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；(15)海藻酸；(16)无热原水；(17)等渗盐水；(18)林格氏溶液；(19)乙醇；(20)磷酸缓冲溶液；和(21)药物制剂中使用的其他无毒相容物质。

术语“药学上可接受的盐”是指调节(例如，增强)Fndc5表达和/或活性，或调节(例如，增强)本发明包括的复合物的表达和/或活性的试剂的相对无毒的无机和有机酸加成盐。这些盐可以在呼吸解偶联剂的最终分离和纯化期间原位制备，或通过将其游离碱形式的纯化呼吸解偶联剂与合适的有机或无机酸单独反应，并分离由此形成的盐而制备。代表性的盐包括氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、重硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐，醋酸盐，戊酸酯，油酸盐，棕榈酸酯，硬脂酸盐，月桂酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、磷酸盐、对甲苯磺酸酯、柠檬酸盐，马来酸盐，富马酸盐，琥珀酸盐，酒石酸盐，萘酸盐，甲磺酸盐，甲磺酸盐，葡庚糖酸盐，乳糖酸盐和月桂基磺酸盐等(参见，例如，Berge et al.(1977)“Pharmaceutical Salts”,J.Pharm.Sci.66:1-19)。

此外，可用于本发明的口服组合物可以包含可用于多于简单口服制剂结合的成分。这些任选的成分通常以组合物重量的约0.0005％至约10.0％，优选约0.005％至约1.0％的含量单独使用。

合适的任选成分的实例包括但不限于氟离子源，碱金属碳酸氢盐源，保湿剂，防牙垢剂，研磨抛光材料，增稠材料，表面活性剂，二氧化钛，调味剂和甜味剂，木糖醇，着色剂，牙齿增白剂，膨润土，蒙脱石，其它活性成分及其混合物。

合适的氟离子源的实例包括但不限于氟化钠，氟化钾，单氟磷酸钠。

合适的碱金属碳酸氢盐源的实例包括但不限于碳酸氢钠和碳酸氢钾。

合适的保湿剂的实例包括但不限于水溶性液体多元醇，所述水溶性液体多元醇选自由甘油，丙二醇，山梨醇，木糖醇，丁二醇，聚乙二醇及其混合物所组成的组中。

合适的增稠材料的实例包括但不限于羧乙烯基聚合物，角叉菜胶，羟乙基纤维素，纤维素醚的水溶性盐，例如羧甲基纤维素钠和羧甲基羟乙基纤维素钠，天然树胶，例如刺梧桐树胶，黄原胶，阿拉伯树胶，和黄蓍胶，及其混合物。

合适的表面活性剂的实例包括但不限于以下的钠盐和钾盐：月桂酰肌氨酸盐，肉豆蔻酰肌氨酸盐，棕榈酰肌氨酸盐，硬脂酰肌氨酸盐和油酰肌氨酸盐。

合适的调味剂的实例包括但不限于冬青油，薄荷油，留兰香油，丁香芽油，薄荷醇，茴香脑，水杨酸甲酯，桉树脑，决明子，乙酸1-薄荷酯，鼠尾草，丁香酚，荷兰芹油，氧杂酮，α-可乐松，马郁兰，柠檬，橙味剂，丙烯基愈伤菊，肉桂，香草醛，百里酚，芳樟醇，称为CGA的肉桂醛甘油缩醛及其混合物。

合适的甜味剂的实例包括但不限于蔗糖，葡萄糖，糖精，右旋糖，左旋糖，乳糖，甘露糖醇，山梨糖醇，果糖，麦芽糖，木糖醇，糖精盐，甜蛋白，阿斯巴甜，D-色氨酸，二氢查耳酮，环己烷氨基磺酸盐，特别是环己烷氨基磺酸钠和糖精钠，及其混合物。

合适的抗微生物剂的实例包括但不限于苯酚及其同系物，单和多烷基和芳族卤代酚，间苯二酚及其衍生物，双酚化合物和卤代水杨酰苯胺，苯甲酸酯和卤代酚，季铵化合物，铜双甘氨酸，甘氨酸铜，柠檬酸锌，乳酸锌，氯己定，三氯生，三氯生单磷酸，以及诸如百里香酚的风味油。

合适的酶的实例包括但不限于蛋白酶，包括木瓜蛋白酶，胃蛋白酶，胰蛋白酶，蓖麻毒素，菠萝蛋白酶；细胞壁裂解酶包括溶菌酶；斑块基质抑制剂，包括葡聚糖酶，齿斑葡聚糖酶；和氧化酶，包括葡萄糖氧化酶，乳酸氧化酶，半乳糖氧化酶，尿酸氧化酶，过氧化物酶，包括辣根过氧化物酶，髓过氧化物酶，乳过氧化物酶和氯过氧化物酶。

抗氧化剂的实例包括：(1)水溶性抗氧化剂，例如抗坏血酸，半胱氨酸盐酸盐，硫酸氢钠，偏亚硫酸氢钠，亚硫酸钠等；(2)油溶性抗氧化剂，如抗坏血酸棕榈酸酯，丁基化羟基苯甲醚(BHA)，丁基化羟基甲苯(BHT)，卵磷脂，没食子酸丙酯，α-生育酚等；和(3)金属螯合剂，例如柠檬酸，乙二胺四乙酸(EDTA)，山梨糖醇，酒石酸，磷酸等。

在一些实施方案中，口服组合物可以进一步包含一种或多种试剂或者方案，所述试剂或者方案可以进一步治疗将受益于增加的斑块稳定性的动脉疾病。

例如，可以加入抗-炎症性物质。抗炎症性物质是一类已知的药物试剂种类，他们可以降低身体机能中发挥作用的炎症性反应(Stedman's Medical Dictionary 26ed.,Williams and Wilkins,(1995)；Physicians Desk Reference 51ed.,MedicalEconomics,(1997))。可用于本发明方法的抗炎症性试剂包括但不限于非甾体抗炎症性试剂(NSAIDS)。非甾体抗炎症性试剂(NSAIDS)通常抑制身体合成前列腺素的能力。前列腺素是一类激素样化学物质，其中一些是针对细胞损伤而制成的。批准用于人类给药的特定NSAIDS包括萘普生钠，双氯芬酸，舒林酸，奥沙普秦，二氟尼柳，阿司匹林，吡罗昔康，吲哚美辛，依托度酸，布洛芬，非诺洛芬，酮洛芬，甲芬那酸，萘丁美酮，甲苯咪唑钠和酮咯酸氨丁三醇。可用于本发明方法的其它抗炎症性试剂包括水杨酸盐，例如，比方说水杨酸，乙酰水杨酸，水杨酸胆碱，水杨酸镁，水杨酸钠，奥沙拉嗪和莎莎晚期。可用于本发明方法的其它抗炎症性试剂包括环氧合酶(COX)抑制剂。COX催化花生四烯酸向前列腺素H2(PGH2)转化；COX抑制剂抑制该反应。COX也称为前列腺素H合酶或PGH合成酶。已经在几种物种中分离出两种Cox基因Cox-1和Cox-2。COX-2在大多数组织中受到严格调控，通常仅在一些异常性疾病，例如炎症，风湿和骨关节炎，肾脏疾病和骨质疏松等异常性疾病中诱导。COX-1被认为是组成型表达的，以便维持血小板和肾功能和整体的体内平衡。可用于本发明方法的典型COX抑制剂包括依托度酸，头孢曲松，美洛昔康，吡罗昔康，尼美舒利，萘丁美酮和罗非昔布。

在一些实施方案中，可掺入用于本发明方法给药的聚合物基质中的抗炎症性剂包括，但不限于：3-氨基-4-羟基丁酸，醋氯芬酸，艾美卡因，乙酰氨基三环醇，阿氯芬酸，阿利洛洛，苯丙酸，双氯芬酸，双氯芬酸钠，间苯二酚，双唑芬酸，苯丙酸，间苯丙氨酸，苯唑酸，苯丙酸，苯丙酸，苯丙酸，苯丙酸，苯丙酸，苯丙酸，苯丙酸，苯丙酸，，依托度酸，依托芬酸，芬比诺，芬布芬，芬卡洛芬，芬多芬，芬诺芬，芬太尼，氟哌洛芬，氟芬那酸，氟尼泊洛芬，氟比洛芬，龙胆酸，葡萄糖曲安奈德，水杨酸二乙酯，伊布芬酸，布洛芬，布洛康，吲哚美辛，吲哚洛芬，异屈唑酸，，酮洛芬，科托拉酸，洛莫西康，洛那佐拉，洛他佐克，洛索丙芬，甲氯芬那酸，甲芬那酸，美洛昔康，美沙胺，异恶唑酸，钼百倍舒酮，莫唑唑胺，萘普生，尼氟沙星，奥沙拉嗪，奥克西林，奥卡西林，奥沙拉津，奥卡西林，奥克西汀，奥替拉嗪，奥沙康定，奥克西丁，帕拉尼林，帕沙赛米，哌立索唑(Perisoxal)，水杨酸苯酯，吡唑烷酮，吡罗昔康，吡丙酸，双吡苯丙酸，普鲁普辛酸，脯氨酸，盐酸乙酰胺，邻苯二甲酸，磺胺酸，硫酸盐，柳氮磺吡啶，山梨酸，替诺昔康，三非烟酸，替萘唑胺，噻吗拉酸，噻咯烷酸，托美丁，托吡线，联苯丁酸(Xenbucin)，西莫司芬，扎洛芬，积璐琛(Zileuton)和氯苯酰二甲基吡咯乙酸(Zomepirac)。

对于本文中以商品名称提及的任何消炎剂，可以理解，可以使用商品名产品或具有产品抗消炎活性的活性成分。

可与LXA4和/或其类似物组合使用的所述药剂可以作为口服组合物同时，同次或依次施用，或者与口服组合物一起配制。

D.消退素

如本文所使用的术语“消退素”包括消退，消退素衍生物和类似物，以及其生理学上可接受的盐和前体药物。在某些实施方案中，向受试者施用单一的消退素。在其它实施方案中，将两种或更多种消退素被施用于受试者。在这样的实施方案中，消退素的施用可以是同时的(即，基本上相同的时间，例如以消退素的混合物的形式施用)或顺序(即在不同时间施用不同的消退素)。

消退素是由膳食ω-3-多不饱和脂肪酸(PUFA)，例如，二十碳五烯酸(EPA)或二十二碳六烯酸(DHA)，环氧合酶II(COX-2)和镇痛药，例如阿司匹林ASA之间的相互作用产生的化合物。最近证明，鼠体内的ASA治疗和体外携带COX-2的人类组织通过先前未被描述的促炎症反应(即细胞因子产生，腹膜炎)开始产生新的17R-羟基系列的二十二烷酸。在应激期间，这些细胞途径使用ω-3脂肪酸来生物合成用于抗炎信号传导的内源性化合物。衍生自ω-3脂肪酸的这些新的含二羟基和三羟基的化合物被称为“消退素”，因为它们(a)在急性炎症反应的消退期内形成，至少部分地作为细胞-细胞相互作用产品，(b)“阻止”中性粒细胞进入炎症部位，和(c)减少渗出物(C.N.Serhan et al.,J.Exp.Med.,2002,196:1025-1037)。

衍生自二十碳五烯酸的化合物被认为属于E系列，鉴于其EPA前体，并表示为E系列的消退素(例如消退素E1或RvE1)。衍生自二十二碳六烯酸的化合物表示为D系列的消退素(例如，消退素D1或RvD1)。

适用于本发明方法的消退素可以是已知为消退素的化合物家族中的任何成员，例如，在一下专利中的描述：美国专利第6,949,664号、美国专利申请第2005-0238589号、第2005-0228047号、第2005-0075398号、第2004-0116408号和第2003-0191184号；PCT申请WO2005/089744,WO 2005/013908,WO 2004/014835,WO 2003/084305,和WO 2003/053423；和欧洲专利申请第EP 1 537 067号(上述所有专利及申请通过引证在此全部并入本文)。其他合适的消退素包括以下文献中公开的，例如，C.N.Serhan et al.,J.Exp.Med.,2002,196:1025-1037；S.Hong et al.,J.Biol.Chem.,2003,278:14677-14687；V.L.Marcheselli etal.,J.Biol.Chem.,2003,278:43807-43817；C.N.Serhan and N.Chiang,Rheum.Dis.Clin.North Am.,2004,30:69-95；C.N.Serhan et al.,Prostaglandins OtherLipid Mediat.,2004,73:155-172；C.N.Serhan et al.,Histochem.Cell Biol.,2004,122:305-321；C.N.Serhan et al.,Lipid,2004,39:1125-1132；C.N.Serhan,Pharmacol.Ther.,2005,105:7-21；C.N.Serhan,Curr.Opin.Clin.Nutr.Metab.Care,2005,8:115-121；G.L.Bannenberg et al.,J.Immunol.,2005,174:4345-4355；U.N.Das,Med.Sci.Monit.,2005,11:RA233-237；和U.N.Das,J.Assoc.Physicians India,2005,53:623-527；上述所有文献通过引证在此全部并入本文。

在某些实施方案中，消退素E1用于增强或促进斑块稳定。消退素E1属于天然生物活性脂质阵列，由ω-3多不饱和脂肪酸通过阿司匹林改性的COX-2在体内产生(C.N.Serhanet al,J.Exp.Med.,2000,192:1197；C.N.Serhan et al.,J.Exp.Med.,2002,196:1025)。下面的实施例部分描述了其中使用消退素E1的实施例。

在本发明的方法和组合物中使用的消退素可以在体内或体外制备，然后通过本领域已知的技术完成基本的纯化和分离(参见，例如美国专利第6,670,396号，其通过引证全部并入本文)。不限于此，化合物的纯度通常为至少约90％，优选至少约95％，最优选至少约99％。在本发明方法中使用的某些消退素可以通过化学改性一种或多种纯化的化合物来制备。例如，纯化的化合物可以化学修饰成药学上可接受的盐或前体药物。另外或选择性地，分子的一个或多个羟基，硫醇或氨基可以使用本领域熟知的方法进行保护。还可以使用常规的合成方法独立地制备消退素。

E.方法

本发明的方法至少部分地涉及治疗或预防可以从增加的斑块稳定性中受益的动脉疾病，包括例如动脉粥样硬化或与动脉粥样硬化相关的疾病。本文已经描述了可以使用脂氧素A4(LXA4)，消退素E1或其类似物来增加斑块稳定性。因此，脂氧素A4(LXA4)，消退素E1或其类似物可用于增加斑块稳定性的方法，从而治疗或预防可以从增加的斑块稳定性(例如动脉粥样硬化或与动脉粥样硬化相关的疾病)中受益的动脉状况。这样的方法包括向需要增加斑块稳定化的受试者施用LXA4和/或LXA4类似物。

如这里所使用的，术语“试剂”和“治疗性试剂”可以被广泛的定义为任何产品，比如细胞、组织、或患有动脉疾病(可以从增加的斑块稳定性中获益的动脉疾病)的患者的其他方面，并且可以与治疗方案相接触。

术语“施用”旨在包括给药途径，所述给药途径能够允许试剂执行其预期功能。口服给药途径是优选的，并且在一些实施方案中，口服给药被应用于口腔，例如通过将包含在其中的组合物和活性成分施用到口腔的表面，包括但不限于唾液腺，唾液，牙龈，舌头，脸颊组织等等。口服给药的试剂可以被单独施用，或与药学上可接受的载体和/或其它活性成分、试剂在给药口服组合物之前、之后或者同时一起施用，以预防或治疗受益于增加的斑块稳定剂的动脉疾病。

治疗或预防可能受益于增加的斑块稳定性的动脉疾病的试剂的“有效量”是改善动脉疾病症状所必需或足够的量。所述有效量可以根据所使用的治疗剂的类型，受试者的体重或病症的严重程度等因素而变化。

“治疗”，“预防”或“改善”能够从增加的斑块稳定性中获益的动脉疾病意味着延迟或预防这种疾病或病症的发作，逆转，缓解，改善，抑制，减缓或停止与这种疾病或病症相关的病症的进展，恶化，恶化或严重程度。术语“治疗”旨在包括预防、治疗和治愈。一个特定治疗的疗效可以由熟练的临床医生来决定。然而，如果在这里使用的治疗能够使可以从增加的斑块稳定性中获益的所关心的动脉疾病的一个或者全部现象或者症状向着更好的方向变化，或者在使用试剂治疗后所述疾病其他临床上可接受的症状或者标志被改善或者缓解，例如，至少10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，90％，95％，则所述治疗被认为是“有效的治疗”。疗效也可以通过个体情况不在恶化来衡量，例如因住院治疗或者医疗干预的需要而不再恶化(即疾病进展停止或至少减慢)。测量这些指标的方法对于本领域普通技术来讲是已知的，和/或使用本文中描述的方法。治疗包括治疗个体或动物的任何疾病(非限制的例子包括人类或哺乳动物)，包括：(1)抑制疾病，例如防止斑块破裂；或(2)缓解疾病，例如，增加斑块的稳定性；和(3)防止或减少从能从增加的斑块稳定性中获益的动脉疾病产生发症的可能性。

在本发明的一些实施方案的实践过程中，安全、有效量的本发明组合物可以局部应用于口腔骨表面，口腔黏膜组织、口腔内的牙龈组织，应用于舌头，于唾液腺的唾液，和/或对软组织，上皮组织，结缔组织，例如骨胶原和血管，上述应用可以治疗或者预防上述动脉疾病或者病况，优选的，在几种常规方法中，应用至少持续大约0.1至10分钟左右，更优选的持续大约0.5到1分钟。例如，牙龈或粘膜组织可以用本文所述的口服溶液组合物(例如，口腔冲洗液，口腔喷雾)来清洗。其它非限制性实施例包括将本文描述的口腔组合物的非研磨性凝胶或糊剂制剂直接施用于牙龈/粘膜组织，唾液腺，唾液，舌头或具有或不具有口腔护理器具的牙齿。咀嚼口香糖口服制剂可以咀嚼，可以吸入锭剂或片剂。可以将给药方法重新施用或重复1至约5次，优选每天1至3次。作为选择或者另外，口服传递可以以每天一次至几次的频率进行1,2,3,4,5,6或7天；或1，2，3或4周；或1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11或12个月或更长(或之间的任何范围)。通常，组合物的有效量为约0.5至约10克，优选约1克。

更常见的，应当理解，个体剂量可以根据主治临床医生判断的受试者的需要、正在治疗的病症的严重程度和正在使用的具体化合物而变化。在确定治疗有效量或剂量时，主要临床医生可以考虑许多其它因素，包括但不限于：特定活性成分的药效学特征及其给药方式；治疗所需的时间过程；哺乳动物的种类；其大小，年龄和一般健康状况；涉及的具体疾病；疾病的程度或参与程度或严重程度；各个主体的反应；施用的具体化合物；施用方式；给药制剂的生物利用度特征；选择剂量方案；同时治疗的种类；和其他相关情况。

可以以小于化合物的有效剂量的较小剂量开始治疗。此后，在一个实施方案中，应小幅度增加给药剂量，直到达到在这种情况下的最佳效果。为了方便起见，如果需要的话，总日剂量可以在一天内分成几部分并分别给药。

可以通过比较经历治疗的受试者获得的两种或更多种样品来监测本文所述的任意组合物治疗能够从增加的斑块稳定性中获益的动脉疾病的有效性。通常，优选在开始治疗前从受试者获得第一样品，在治疗期间获得一个或多个样品。在这样的用途中，确定在治疗之前患有动脉疾病的受试者的细胞表达的基线，然后在治疗期间监测患有可能从增加的斑块稳定性中获益的动脉疾病的受试者的细胞表达基线状态的变化。作为选择，在治疗期间获得的两个或更多个连续样品，可以使用这些连续样品而不需要预处理基线样品。

在一些实施方案中，测定可以包括受试样品。术语“样本”，“组织样本”，“受试者样本”，“受试细胞或组织样本”或“样本”各自指的是从受试者组织获得的相似细胞的集合。组织样品的来源可以是来自新鲜的，冷冻的和/或保存的器官，组织样品或活检的固体组织。组织样品可能含有本来不与天然组织混合的化合物，例如防腐剂，抗凝剂，缓冲剂，固定剂，营养物质，抗生素等。

在一些实施方案中，将来自受试者的样品中所需分析物(例如血液蛋白质，基因表达水平，动脉组织等)的量和/或活性测量值与预定对照(标准)样品相比较。来自受试者的样品通常来自动脉来源，例如唾液，牙菌斑，牙龈等。对照样品可以来自相同的患者或来自不同的受试者。对照样品通常是正常的，无病变的样品。然而，在一些实施方案中，例如用于疾病进展或用于评估治疗的功效，对照样品可以来自在不同时间点的受试者或来自患病组织。对照样品可以是来自几个不同受试者的样品的组合。在一些实施方案中，将来自受试者的分析物量和/或活性测量值与预定水平进行比较。所述预定水平通常来自正常样品。如本文所述，“预先确定的”分析物的量和/或活性测量值可以是用于(仅作为实施例)评估可被选择进行治疗或评估对斑块稳定促进疗法的反应的分析物的量和/或活性测量值。可以在患有或不患有疾病的患者的群体中确定预定的分析物量和/或活性测量。预定的分析物量和/或活性测量可以是单个数字，同样适用于各个患者，或者预先确定的分析物量和/或活性测量可以根据患者的特定亚群而变化。受试者的年龄，体重，身高和其他因素可能会影响个人的预先确定的分析物量和/或活动测量值。此外，可以单独确定每个受试者的预定分析物的量和/或活性，例如基于相关组中的平均或中位数分析物水平(例如，具有相似动脉疾病度量的类似年龄的人群的受试者或受试者们)。预定分析物量和/或活性测量值可以是任何合适的标准。例如，可以从正在评估患者选择的相同或不同的人获得预定的分析物量和/或活性测量值。在一个实施方案中，预先确定的分析物量和/或活性测量值可以从先前对同一患者的评估获得。以这种方式，可以随时间监视所选择的患者疾病进程。此外，如果受试者是人，则可以从另一人或多个人，例如所选择的人群的评估中获得对照。以这种方式，可以将正在评估选择的人的选择范围与适合的其他人(例如与感兴趣的人处于类似情况的其他人，例如患有相似或相同的疾病的人和/或相同的族裔或年龄的人)进行比较。

在本发明的一些实施方案中，分析物的量和/或活性测量值从预定水平的变化为约0.5倍，约1.0倍，约1.5倍，约2.0倍，约2.5倍，约3.0倍，约3.5倍，约4.0倍，约4.5倍或约5.0倍或更大。在一些实施方案中，所述变化倍数小于约1，小于约5，小于约10，小于约20，小于约30，小于约40，或小于约50。在其他实施方案中，与预定水平相比，分析物量和/或活性测量值的倍数变化大于约1，大于约5，超过约10，超过约20，超过约30，更多大于约40，或大于约50。

术语“抑制”包括减少，限制或阻塞(例如，)特定的作用、功能或者相互作用。在一些实施方案中，如果缓解，终止，减缓或预防该病症的至少一种症状，则可以“抑制”能够从增加的斑块稳定性中受益的动脉疾病。在一些实施方案中，该术语是指改善能够从增加的斑块稳定性中获益的动脉疾病的所关心的指示度量统计学上显著性降低。这种统计学上显着的降低可以是相对于对照至少10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，90％或更多的降低。例如，根据本文所述的方法施用和分析测试化合物可以包括相对于无药物给药或者在一个给定的时间范围内，斑块稳定性增加至少10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，90％或更多，以实现善意的斑块稳定性增速。

可以在纵向时间内(例如，按照天，周，月，年，两年等顺序进行一次或者多次)重复地从个体收集样品。在一段时间内从个体获取许多样品可以用于验证早期检测的结果和/或鉴定作为例如疾病进展，药物治疗等的结果的生物学模式的改变。例如，根据本发明受试者样品可以每月，每两个月或每间隔一个，两个或三个月的组合被采集和监测。此外，随着时间的推移获得的受试者的分析物量和/或活性测量值可以方便地彼此比较，以及在监测期间与正常对照的分析物量和/或活性测量值进行比较，从而将受试者自身的值作为内部或个人参照进行长期监测。

实施例

本发明通过以下实施例被进一步说明，以下实施例不应被认为是本发明的限制。

实施例1:在动脉粥状硬化疾病模型中使用9,12苯并LXA₄增加斑块稳定性

A.方法

新西兰白(NZW)兔(n＝10)接受富含胆固醇的饮食(1％)8周，以引发动脉粥样硬化症。此外，在2周时进行球囊损伤，以推动胸廓和腹主动脉下段的动脉粥样硬化。6周的胆固醇喂养之后，在实验结束时进行4周的正常食物饮食。一半的兔子在实验(9,12苯并LXA4治疗)组中随机分组，一半在对照组中随机分组。

在实验期间，每隔一天将局部LXA4(1mg/ml)施用于龈下两侧的下颌骨两侧。在触发前后12周采集体内MRI图像。在安乐死后，切除主动脉用于离体MRI和组织学分析。

为了确定被破坏的斑块，比较斑块触发之前和之后包含感兴趣区域(球囊损伤)的斑块段的MR图像，如果触发后图像显示管腔血栓，则将其标记为破坏斑块。在对治疗组分析的104个部分中，只有2/104显示破裂，这只是一只兔子中的一个部位。

C.结果

在对治疗组分析的104个部分中，只有2/104显示破裂，这只是一只兔子中的一个部位。对于对照兔，由于体内成像的工具问题，未获得5只兔子中的4只的完整数据集。然而，唯一一只具有完整体内数据的兔子在21例分析中有6例中存在破裂。主动脉段的40/50已经在11.7T离体扫描。

参考文献的整合

在本申请中引用的所有参考文献，专利申请，专利和公开的专利申请以及附图和序列表的内容在此通过引证全部并入本文。

等同物

本领域普通技术人员将认识到或不使用任何非常规实验就可以确定本文所述的本发明的具体实施方案的许多等同物。这样的等同物旨在被所附权利要求所涵盖。

Claims (7)

1.一种包括治疗有效量的9,12-苯并-LXA4或消退素E1的组合物在制备用于治疗通过稳定动脉粥样硬化斑块或者减少有需要的患者的不稳定/易损斑块的动脉疾病的药物中的应用，其中所述动脉疾病为动脉粥样硬化或与动脉粥样硬化相关的疾病，以及其中所述药物局部施用于患者口腔的牙龈或粘膜组织。

2.根据权利要求1所述的应用，其中，所述动脉疾病的特征在于存在不稳定的/易损的动脉粥状硬化斑块。

3.根据权利要求1所述的应用，其中，所述9,12-苯并-LXA4或消退素E1被配制在药学上可接受的载体中。

4.根据权利要求1所述的应用，其中，所述9,12-苯并-LXA4或消退素E1被配置在药学上可接受的载体中，所述药学上可接受的载体选自由口腔冲洗液、口香糖，食品添加剂、糖果锭剂、片剂、可咀嚼的胶囊、口腔传递装置和被包覆在生物或者合成来源的可吸收的载体纳米颗粒所组成的组中。

5.根据权利要求1所述的应用，其中，治疗有效量的9,12-苯并-LXA4或消退素E1是能够增加斑块稳定性和/或减少不稳定/易损斑块数量的量。

6.根据权利要求1所述的应用，进一步包括施用至少一种额外的试剂，所述额外的试剂治疗能够从增加的斑块稳定性中获利的动脉疾病。

7.根据权利要求6所述的应用，其中，所述额外的试剂为抗-炎症性试剂。

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