CN107406428A - 新的fyn激酶抑制剂 - Google Patents

新的fyn激酶抑制剂 Download PDF

Info

Publication number
CN107406428A
CN107406428A CN201580077482.3A CN201580077482A CN107406428A CN 107406428 A CN107406428 A CN 107406428A CN 201580077482 A CN201580077482 A CN 201580077482A CN 107406428 A CN107406428 A CN 107406428A
Authority
CN
China
Prior art keywords
bases
methyl
base
amino
phenyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201580077482.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN107406428B (zh
Inventor
罗伯托·阿图西
G·卡塞利
卢乔·罗瓦蒂
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Rottapharm Biotech SRL
Original Assignee
Rottapharm Biotech SRL
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Rottapharm Biotech SRL filed Critical Rottapharm Biotech SRL
Publication of CN107406428A publication Critical patent/CN107406428A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107406428B publication Critical patent/CN107406428B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及新的式(I)的选择性FYN激酶抑制剂、包含其的药物组合物以及其用于药理学治疗疼痛和关节炎(包括骨关节炎和类风湿性关节炎)的用途。

Description

新的FYN激酶抑制剂
发明领域
本发明涉及抑制蛋白激酶的新的化学化合物以及制备其和使用其的方法。具体地，本发明涉及作为FYN激酶抑制剂的新的化学化合物。
发明背景
骨关节炎(OA)是一组重叠的不同的疾病，其可以具有不同的病因学，但具有类似的生物学的、形态学的和临床的结果。疾病过程不仅影响关节软骨，而且涉及整个关节，包括软骨下骨、韧带、关节囊(capsule)、滑膜以及关节周围的肌肉。最后，关节软骨随着关节表面的纤维化、裂隙、溃疡以及全厚度损失(full thickness loss)而退化。此状况的特征是与骨的肥大 (骨赘和软骨下骨硬化)和关节囊的增厚相关的、在滑膜关节中的关节软骨的损失的病灶区(focal area)。其可以被解释为滑膜关节对于损伤的反应。此现象可以在任何关节中发生，但最常见是在手、脊柱、膝盖、足以及髋 (hip)的选定的关节中。此病理学变化在严重时导致放射学变化(关节空间的损失和骨赘)，这已经被用于流行病学研究以估计在不同的关节部位处的 OA流行程度。目前，在OA的发病的基础上的分子和细胞机制是未知的；据推测，异常负载(abnormal load)以及创伤可能有作用，但似乎肯定的是，遗传学和可遗传因素也被涉及。当存在时，炎症对于主要事件仅是次要的。 OA是关节炎的最常见的形式。世界卫生组织(WHO)估计，在全世界，超过60岁的男性的9.6％和女性的18％具有症状性OA，其将OA分类为女性残疾的第4病因和男性残疾的第8病因。据认为，对于膝盖OA的残疾的风险与对于心脏疾病是相同的。最后，由于由软骨基质合成和分解的不平衡组成的潜在的过程导致关节软骨的破坏，OA导致受限制的关节运动、关节不稳定性、疼痛以及慢性残疾(chronic disability)。
尽管症状，特别是疼痛，可以通过一系列镇痛化合物(从扑热息痛到 NSAIDS，从阿片剂到NGF拮抗剂)来控制，但已知的是，这些药物中没有一种能够减缓疾病进展。相反地，强的镇痛化合物甚至可以使潜在的病理学恶化(Caso di NGF)。本领域所需的是能够改变最后将导致手术关节替换的软骨的进展性破坏的可选择的或补充疗法。
FYN是属于Src家族激酶的细胞质酪氨酸激酶，Src家族激酶在人类中由11个成员组成，包括Blk、Brk、Fgr、Frk、Hck、Lck、Lyn、c-Src、Srm 以及c-Yes(Manning，G.等人,Science,2002,298,1912)。FYN已经于1988年在正常的和转化的细胞两者中被确定和表征(Kypta,R.M.等人,EMBO J., 1988,7,3837-3844)。FYN主要位于质膜的细胞质侧，其中FYN使参与不同的信号传导通路的酶的酪氨酸残基磷酸化并且在若干细胞表面受体的下游起作用。
其中涉及FYN活性的许多生物学功能已经被报告，并且包括生长因子和细胞因子受体信号传导、离子通道功能、血小板活化、T细胞和B细胞受体信号传导、轴突导向、进入有丝分裂、自然杀伤细胞的分化，如在最近的且全面的综述中广泛地报告的(Saito,Y.等人,Cancer,2010,116,1629)。
FYN主要参与在中枢神经系统(CNS)中和在外周免疫系统中的若干转导通路，在此后者中在T细胞发育和活化的调节和功能方面起重要作用。
FYN过表达诱导形态转化、促有丝分裂信号的改变以及细胞生长和增殖的刺激。还已知FYN介导整合素粘合和细胞-细胞相互作用。由于所有这些原因，FYN参与癌症的发病(Kawakami T,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.,1988, 85,3870)。
对于FYN活性的概述和FYN特异性抑制剂的状态，综述已经被 Schenone S.公开在Current Medicinal Chemistry,2011,18,2921上。
在出版物Erin F Dimaro等人:“Structure-Guided Design of AminopyrimidineAmides as Potent,Selective Inhibitors of Lymphocyte Specific Kinase:Synthesis,Structure-Actvity Relationships,and Inhibition of in Vivo T CellActivation”Journal of Medicinal Chemistry,American Chemical Society，第51卷，第6期，2008年3月1日，第1681-1694页中，描述了具有氨基嘧啶酰胺的结构的Fyn激酶抑制剂。
于是，本发明的目的是，提供FYN激酶抑制剂。
发明概述
上文指示的目的已经通过式(I)的化合物或其盐特别是其药学上可接受的盐来实现：
其中：
A选自苯基、包含选自N、S和O的一个或更多个杂原子的5元-6元杂环以及(C5-C7)环烷基，
其中所述苯基任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基取代：卤素、三氟甲基、三氟甲氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C3)烷氧基、(C3-C6)环烷基、(C3-C6)环烷基氧基、硝基、氨基、羟基、氰基、甲酰胺、磺酰胺、甲烷磺酰基，
所述5元-6元杂环是5元-6元杂芳基或任选地被(C1-C3)烷基取代的5元杂环，所述5元-6元杂芳基任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基取代：卤素、三氟甲基、三氟甲氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C3)烷氧基、(C3-C6) 环烷基、(C3-C6)环烷基氧基、硝基、氨基、羟基、氰基、甲酰胺、磺酰胺、甲烷磺酰基；
所述(C5-C7)环烷基任选地独立地被一个或两个(C1-C4)烷基取代；
B独立地选自-CONH-、-NHCO-、-SO2NH-、-NHCONH-；
W是苯基基团或包含选自N、O和S的一个或两个杂原子的杂芳基基团，所述苯基或所述杂芳基任选地独立地被一个或两个(C1-C4)烷基、(C1-C3)烷氧基、(C3-C6)环烷基、(C3-C6)环烷基氧基取代；
R和R1独立地选自由以下组成的组：H、(C1-C3)烷基以及(C1-C3)烷氧基；
m是1或2；
n是1或2；
X是N或C；
Y独立地选自H、CH3、CH2-OH、CN；
G是5元-6元杂芳基基团，所述5元-6元杂芳基基团包含选自N、O和S 的一个或更多个杂原子并且任选地被独立地选自卤素、(C1-C4)烷基、(C3-C6) 环烷基的一个或更多个取代基取代。
本发明还涉及化合物或其盐特别是其药学上可接受的盐，或在抑制FYN激酶中的用途。本发明的化合物是FYN激酶的抑制剂，并且可以对于治疗FYN激酶介导的疾病和紊乱是有用的。因此，在另一个方面中，本发明涉及用于在治疗FYN激酶介导的疾病和紊乱中使用的本发明的化合物，所述FYN激酶介导的疾病和紊乱特别是关节炎，包括骨关节炎、类风湿性关节炎和银屑病关节炎；急性疼痛和慢性疼痛，例如：骨关节炎疼痛和类风湿性关节炎疼痛、术后疼痛、内脏疼痛、与癌症相关的疼痛、三叉神经痛、糖尿病性神经病变急性和慢性疼痛(diabetic neuropathy acute and chronic pain)、术后疼痛、肌肉疼痛。
因此，本发明还涉及治疗在患者中的FYN激酶介导的疾病或状况的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的根据式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”意图意指至少减轻在患者中的疾病状况。用于减轻疾病状况的治疗方法包括以任何常规地可接受的方式使用本发明中的化合物，例如用于介导的疾病的预防(prevention)、延缓、预防 (prophylaxis)、治疗(therapy)或治愈。
本发明还涉及包含本发明化合物或其盐和药学上可接受的载体的药物组合物。
如本文使用的，“药学上可接受的赋形剂”意指参与给予组合物形态 (form)或一致性(consistency)的材料、组合物或媒介物。
附图说明
图1报告用于制备式(I)的化合物的工艺的第一和第二实施方案，
图2报告用于制备式(I)的化合物的工艺的第三和第四实施方案，
图3报告制备图2中的式(XII)的某些中间体的方案。
发明详述
本发明涉及式(I)的化合物：
其中：
A选自苯基、包含选自N、S和O的一个或更多个杂原子的5元-6元杂环以及(C5-C7)环烷基，
其中所述苯基任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基取代：卤素、三氟甲基、三氟甲氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C3)烷氧基、(C3-C6)环烷基、(C3-C6)环烷基氧基、硝基、氨基、羟基、氰基、甲酰胺、磺酰胺、甲烷磺酰基，
所述5元-6元杂环是5元-6元杂芳基或任选地被(C1-C3)烷基取代的5元杂环，所述5元-6元杂芳基任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基取代：卤素、三氟甲基、三氟甲氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C3)烷氧基、(C3-C6) 环烷基、(C3-C6)环烷基氧基、硝基、氨基、羟基、氰基、甲酰胺、磺酰胺、甲烷磺酰基；
所述(C5-C7)环烷基任选地独立地被一个或两个(C1-C4)烷基取代；
B独立地选自-CONH-、-NHCO-、-SO2NH-、-NHCONH-；
W是苯基基团或包含选自N、O和S的一个或两个杂原子的杂芳基基团，所述苯基或所述杂芳基任选地独立地被一个或两个(C1-C4)烷基、(C1-C3)烷氧基、(C3-C6)环烷基、(C3-C6)环烷基氧基取代；
R和R1独立地选自由以下组成的组：H、(C1-C3)烷基以及(C1-C3)烷氧基；
m是1或2；
n是1或2；
X是N或C；
Y独立地选自H、CH3、CH2-OH、CN；
G是5元-6元杂芳基基团，所述5元-6元杂芳基基团包含选自N、O和S 的一个或更多个杂原子并且任选地被独立地选自卤素、(C1-C4)烷基、(C3-C6) 环烷基的一个或更多个取代基取代，
或其盐，特别是其药学上可接受的盐。
在整个说明书中提供的式(I)的各种基团和取代基基团的可选择的定义意图特定地描述本文中单独公开的每种化合物物质，以及一种或更多种化合物物质的基团。本发明的范围包括这些基团定义和取代基基团定义的任何组合。
根据式(I)的化合物可以包含一个或更多个不对称中心(还被称为手性中心)，并且因此可以作为单独的对映异构体、非对映异构体或其他立体异构形式或作为其混合物存在。手性中心例如手性碳还可以存在于本发明的化合物中。在存在于本发明的化合物或本文图示的任何化学结构中的手性中心的立体化学没有被指定的情况下，该结构意图涵盖所有的单独的立体异构体及其所有的混合物。因此，包含一个或更多个手性中心的根据式(I)的化合物可以作为外消旋混合物、对映异构体富集的混合物或作为对映异构体纯的单独的立体异构体被使用。
应理解，本发明的化合物的固体形式可以以结晶形式、非结晶形式或其混合物存在。这样的结晶形式还可以呈现多晶型(即，以不同的结晶形式存在的能力)。这些不同的结晶形式通常被称为“多晶型物(polymorph)”。多晶型物具有相同的化学组成，但在堆积(packing)、几何排列以及结晶固态的其他描述性质方面不同。多晶型物因此可以具有不同的物理性质，例如形状性质、密度性质、硬度性质、可变形性性质、稳定性性质以及溶解性质。多晶型物通常呈现不同的熔点、红外光谱以及X射线粉末衍射图，这些可以用于鉴定。本领域普通技术人员将理解，不同的多晶型物可以例如通过改变或调节在使化合物结晶/重结晶中使用的条件来产生。
此外，取决于另外的取代，本发明的化合物可以以其他互变异构形式存在。本文描述的化合物的所有的互变异构形式意图被涵盖在本发明的范围内。应理解，对本发明的命名的化合物的任何提及都意图涵盖该命名的化合物的所有互变异构体和该命名的化合物的互变异构体的任何混合物。
如本文使用的，术语“本发明的化合物(compound(s)of the invention)”或“本发明的化合物(compound(s)of this invention)”意指呈任何形式的、如上文定义的式(I)的化合物，所述任何形式即，其任何盐或非盐的形式(例如，作为游离的酸或碱的形式，或作为其盐特别是其药学上可接受的盐)和任何物理形式(例如，包括非固体形式(例如，液体或半固体的形式)和固体形式 (例如，无定形或结晶的形式、特定的多晶型形式、溶剂化物形式(包括水合物形式(例如，一水合物、二水合物以及半水合物)))、及各种形式的混合物。
如本文使用的，术语“任选地被取代的”意指未被取代的基团或环(例如，环烷基环、杂环烷基环以及杂芳基环)和被一个或更多个指定的取代基取代的基团或环。
因此，本发明的化合物包括式(I)的化合物或其盐特别是其药学上可接受的盐。
优选地，A是苯基。当A是苯基时，其可以优选地被卤素、(C1-C4)烷基、 (C1-C3)烷氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、甲烷磺酰基取代。
当A是5元-6元杂芳基基团时，其优选地是噁唑、吡啶基、咪唑、吡唑，并且其任选地被优选地三氟甲基、(C1-C3)烷基、三氟甲氧基取代，更优选地被三氟甲氧基取代。
当A是5元杂环时，其是任选地被优选地甲氧基取代的吡咯烷。
当A是(C5-C7)环烷基时，其优选地是任选地被(C1-C4)烷基取代的环戊基。
R和R1可以优选地且独立地选自H和CH3。
m优选地是2并且n优选地是1。
X优选地是N。
根据本发明，G优选地是1-H-吡唑，更优选地是被环丙基基团取代的 1-H-吡唑。
更优选地，本发明的化合物选自由以下组成的组：
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基) 苯基)苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-氟苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-甲基苯甲酰胺、
2-氯-N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基) 甲基)苯基)苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-异丙基苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-甲氧基苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-(三氟甲氧基)苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-3-(三氟甲基)苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2,4-二氟苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-3-氟-2-(三氟甲基)苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-氟-6-(三氟甲基)苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-4-氟-2-(三氟甲基)苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-甲氧基-4-甲基苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-3-(甲基磺酰基)苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)-2-甲基苯基)-2-氟苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)-6-甲基嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-2-乙基苯基)-2-氟苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)-6-甲基嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-3-乙基苯基)-2-氟苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-甲基噁唑-4-甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-甲基-5-(三氟甲基)噁唑-4-甲酰胺、
N-(6-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)吡啶-3-基)-2-甲基-5-(三氟甲基)噁唑-4-甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-3-甲基异噁唑-4-甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)吡啶酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-3-甲基吡啶酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-3-(三氟甲基)吡啶酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-(三氟甲基)烟酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-甲氧基烟酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-4-(三氟甲基)烟酰胺、
(R)-N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)-2-甲基-哌嗪 -1-基)甲基)苯基)-2-(三氟甲基)烟酰胺、
(S)-N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)-2-甲基-哌嗪 -1-基)甲基)苯基)-2-(三氟甲基)烟酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-3-(三氟甲基)异烟酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)吡嗪-2-甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-3-(三氟甲基)吡嗪-2-甲酰胺、
4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-N-(4-(三氟甲氧基)苯基)苯甲酰胺、
4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-N-(3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺、
4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-N-(4-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-氟苯磺酰胺、
N-(5-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)吡嗪-2-基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺、
N-(6-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)哒嗪-3-基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺、
N-(6-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)吡啶-3-基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1,3,4-噁二唑-2-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((3-环丙基-1H-吡唑-5-基)氨基)-6-甲基嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((3-甲基-1H-吡唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺、
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-甲基吡咯烷-1-甲酰胺、
1-环戊基-3-(4-((4-(4-((3-环丙基-1H-吡唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)-哌嗪 -1-基)甲基)苯基)脲。
另外更优选地，本发明的化合物选自
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺和
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-3-(三氟甲基)吡啶酰胺。
因为本发明的化合物包含碱性部分，所以期望的盐形式可以通过本领域已知的任何合适的方法来制备，包括用无机酸或用有机酸处理游离碱，所述无机酸选自由盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸及类似物组成的组，所述有机酸选自由马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、水杨酸、柠檬酸、酒石酸、对甲苯磺酸组成的组。
由于式(I)的化合物的盐在医学中的可能的用途，其优选地是药学上可接受的盐。涵盖在术语“药学上可接受的盐”中的盐指的是本发明的化合物的无毒的盐。
本发明还涉及包含本发明化合物或其盐和药学上可接受的载体的药物组合物。
本发明还涉及用作药物的式(I)的药物化合物或其盐。
本发明的化合物可以通过任何合适的施用途径被施用，包括全身性施用(systemic administration)和局部施用。
全身性施用包括口服施用、胃肠外施用、透皮施用、直肠施用以及通过吸入施用。
本发明的化合物可以被一次施用或根据其中许多剂量以不同的时间间隔施用持续给定的时间段的给药方案被施用。例如，剂量可以被施用一次每天、两次每天、三次每天或四次每天。剂量可以被施用直到实现期望的治疗效果或无限期地施用以保持期望的治疗效果。本发明的化合物的合适的给药方案取决于该化合物的药代动力学性质，例如可以由熟练的技术人员确定的吸收、分布以及半衰期。此外，本发明的化合物的合适的给药方案(包括施用此类方案的持续时间)取决于被治疗的状况、被治疗的状况的严重程度、被治疗的患者的年龄和身体状况、被治疗的患者的病史、同时疗法(concurrent therapy)的性质、期望的治疗效果以及在熟练的技术人员的知识和专长内的类似因素。
在施用至患者之前，本发明的化合物将通常但不一定被配制成药物组合物。使用对于本领域技术人员已知的技术和方法来制备本发明的药物组合物。
本发明的药物组合物可以以散装形式(bulk form)来制备和包装，其中有效量的本发明的化合物可以被提取并且然后例如以粉剂、糖浆剂以及用于注射的溶液被给予患者。可选择地，本发明的药物组合物可以以单位剂型来制备和包装。药物组合物的剂量包含至少治疗有效量的本发明的化合物(即，式(I)的化合物或其盐特别是其药学上可接受的盐)。当以单位剂型制备时，药物组合物可包含从1mg至1000mg的本发明的化合物。
本发明的化合物和药学上可接受的赋形剂(excipient)或赋形剂 (excipients)通常将被配制成适于通过期望的施用途径施用至患者的剂型。
常规剂型包括适于以下的剂型：(1)口服施用，例如片剂、胶囊、囊片、丸剂、锭剂、粉剂、糖浆剂、酏剂、悬浮液、溶液、乳剂、小袋(sachet) 以及扁囊剂；(2)肠胃外施用，例如无菌溶液、悬浮液以及用于重构的粉剂； (3)透皮施用，例如透皮贴剂；(4)直肠施用，例如栓剂；(5)吸入，例如气雾剂和溶液；以及(6)局部施用，例如乳霜、软膏、洗剂、糊剂、喷雾剂以及凝胶剂。
合适的药学上可接受的赋形剂包括以下类型的赋形剂：稀释剂、填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、成粒剂、包衣剂、润湿剂、悬浮剂、乳化剂、甜味剂、味道掩蔽剂(flavourmasking agent)、着色剂、抗结块剂、保湿剂、增塑剂、增粘剂(viscosity increasingagent)、抗氧化剂、防腐剂、稳定剂、表面活性剂以及缓冲剂。合适的稀释剂和填充剂包括乳糖、蔗糖、右旋糖、甘露醇、山梨醇、淀粉、纤维素、硫酸钙以及二碱式磷酸钙。口服固体剂型还可以包含粘合剂。合适的粘合剂包括淀粉、明胶、海藻酸钠、海藻酸、瓜尔胶、聚维酮以及纤维素和其衍生物(例如，微晶纤维素)。口服固体剂型还可以包含崩解剂。合适的崩解剂包括交聚维酮、羟基乙酸淀粉钠、海藻酸以及羧甲基纤维素钠。口服固体剂型还可以包含润滑剂。合适的润滑剂包括硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙以及滑石。用于口服剂型的合适的载体包括但不限于碳酸镁、硬脂酸镁、滑石、乳糖、果胶、糊精、淀粉、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠及类似物。用于制备口服制剂的技术是常规的混合、成粒以及压缩或胶囊填充。
本发明的化合物还可以被配制用于与合适的载体(包括媒介物水溶液 (即：盐水、右旋糖)和/或油性乳液))一起肠胃外施用。
在又另外的方面中，本发明涉及用于在抑制FYN激酶中使用的化合物或盐特别是药学上可接受的盐。
本发明的化合物是FYN激酶的抑制剂，并且可以对于治疗FYN激酶介导的疾病和紊乱是有用的。
因此，在另一个方面中，本发明涉及用于在治疗FYN激酶介导的疾病和紊乱中使用的本发明的化合物，所述FYN激酶介导的疾病和紊乱特别是关节炎，包括骨关节炎、类风湿性关节炎和银屑病关节炎；急性疼痛和慢性疼痛，例如：骨关节炎疼痛和类风湿性关节炎疼痛、术后疼痛、内脏疼痛、与癌症相关的疼痛、三叉神经痛、糖尿病性神经病变急性和慢性疼痛、术后疼痛、肌肉疼痛。
因此，本发明还涉及治疗在患者中的FYN激酶介导的疾病或状况的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的根据式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
治疗“有效量”意图意指当施用至需要这样的治疗的患者时足以产生如本文所定义的治疗的化合物的量。因此，例如，治疗有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐是当施用至需要其的人类时足以调节或抑制 FYN激酶的活性使得由该活性介导的疾病状况被减少、缓解或预防的本发明的剂的量。将对应于这样的量的给定的化合物的量将取决于诸如特定的化合物(例如，该特定的化合物的效能(IC50)、效力(EC50)和生物半衰期)、疾病状况及其严重程度、需要治疗的患者的特性(例如，年龄、尺寸(size) 和体重)的因素而变化，但仍然可以由本领域技术人员按惯例地确定。同样地，化合物的治疗持续时间和施用时间段(在剂量之间的时间段和剂量的时间选择，例如，在餐前/与餐一起/餐后)将根据需要治疗的人类的特性(例如，体重)、特定的化合物及其性质(例如，药物特性)、疾病或状况及其严重程度以及所使用的特定的组合物和方法而变化，但仍然可以由本领域技术人员来确定。
如上文所指示的，本发明的化合物可以以药理学有效量被口服地或肠胃外地施用。对于本文关于式(I)的化合物所讨论的所有的治疗方法，每日口服剂量方案将优选地是从约0.05mg/Kg的总体重至约20mg/Kg的总体重。本领域技术人员还将认识到，式(I)的化合物的最优的量和单独剂量的间隔将由被治疗的状况的性质和程度来确定。
因此，式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，任选地连同药学上可接受的载体的适当的药物组合物可以用于治疗涉及关节软骨的破坏的疾病，例如创伤性关节损伤；关节炎，包括骨关节炎、类风湿性关节炎以及银屑病关节炎。此外，式(I)的化合物和其药学上可接受的盐的适当的药物组合物可以用于治疗不同形式的癌症，特别是结肠癌、前列腺癌以及肺癌。
此外，式(I)的化合物和其药学上可接受的盐的适当的药物组合物可以用于治疗急性和慢性疼痛，包括但不限于炎症性疼痛和相关的痛觉过敏和异常性疼痛(allodynia)、骨关节炎疼痛、术后疼痛、内脏痛、与癌症相关的疼痛、三叉神经痛、急性疱疹神经痛和疱疹后神经痛、神经性疼痛、糖尿病性神经病变。
可以通过使用合成程序来获得式(I)的化合物。
在另外的方面中，本发明涉及用于制备式(I)的化合物的工艺。
用于制备式(I)的化合物的工艺包括以下步骤：
a)在碱的存在下，将化合物(ST)添加至式(II)的化合物，以获得式(III) 的化合物。
其中S是NO2或COOR2，所述R2是(C1-C3)烷基
b)从式(III)的化合物中除去保护基团，以获得式(IV)的化合物；
c)在碱的存在下，将式G-NH2的化合物添加至式(V)的化合物，以获得式(VI)的化合物；
d)在碱的存在下，将化合物(IV)添加至式(VI)的化合物，以获得式(VII) 的化合物；
e)将化合物(VII)转化成式(VIII)的化合物。
其中Z是NH2或COOH
g)任选地在缩合剂的存在下，使式(VIII)的化合物
-当Z是NH2时，与选自A-COCl、A-COOH、A-SO2Cl、A-NHCOX的化合物反应，其中X是合适的离去基团，或
-当S是COOR2时，当Z是COOH时，与A-NH2反应，
以获得式(I)的化合物
其中R、R1、X、Y、W、G和A具有与在式(I)中相同的含义，并且Pr 是保护基团。
在第一实施方案中，当在式(VII)中的S是NO2时，步骤e)是优选地用合适的试剂如铁还原成NH2基团，从而获得其中Z是NH2的化合物(VIII)。
在此第一实施方案中，步骤g)包括使其中Z是NH2的式(VIII)的化合物与
-A-COCl或A-COOH，优选地在缩合剂的存在下反应，以获得式(Ia) 的化合物
-A-SO2Cl，优选地在缩合剂的存在下反应，以获得式(Ib)的化合物
-A-NHCOX，其中X是合适的离去基团，优选地在缩合剂的存在下反应，以获得式(Ic)的化合物
在第二实施方案中，当在式(VII)中的S是COOR2时，步骤e)是式(VII) 的化合物的水解，以获得其中Z是COOH的化合物(VIII)。在此第二实施方案中，步骤g)包括在缩合剂的存在下，使其中Z是COOH的式(VIII)的化合物与A-NH2反应，以获得式(Id)的化合物
本发明的工艺的第一实施方案和第二实施方案的完整的一般方案在图1中被报告。
本发明的另外的方面涉及用于制备通式的化合物的另外的工艺，所述另外的工艺包括以下步骤：
a)在碱的存在下，将化合物(ST)添加至式(II)的化合物，以获得式(III) 的化合物。
其中S是NO2或COOR2，是COOR2，条件是所述R2是(C1-C3)烷基
I)将式(III)的化合物转化成式(X)的化合物。
其中Z是NH2或COOH
m)使式(X)的化合物，当Z是NH2时，与选自A-COCl、A-COOH、 A-SO2Cl、A-NHCOX的化合物反应，其中X是合适的离去基团，或
当Z是COOH时，与A-NH2反应，
以获得式(XII)的化合物。
n)除去保护基团，以获得式(XIII)的化合物。
r)在碱的存在下，使式(XIII)的化合物与式(VI)的化合物反应，以获得式(I)的化合物
其中R、R1、X、Y、W、G和A具有与在式(I)中相同的含义，并且Pr 是保护基团。
在第三实施方案中，当在式(III)中的S是NO2时，步骤I)是优选地用合适的试剂如铁还原成NH2基团，从而获得其中Z是NH2的化合物(X)。
在此第三实施方案中，步骤m)包括使其中Z是NH2的式(X)的化合物与
-A-COCl或A-COOH，优选地在缩合剂的存在下反应，以获得式(Ia) 的化合物
-A-SO2Cl，优选地在缩合剂的存在下反应，以获得式(Ib)的化合物
-A-NHCOX，其中X是合适的离去基团，优选地在缩合剂的存在下反应，以获得式(Ic)的化合物
在第四实施方案中，当在式(III)中的S是COOR2时，步骤I)是式(III)的化合物的水解，以获得其中Z是COOH的化合物(X)。在此第四实施方案中，步骤m)包括优选地在缩合剂的存在下，使其中Z是COOH的式(X)的化合物与A-NH2反应，以获得式(Id)的化合物
本发明的工艺的第一和第二实施方案在图1中被报告，并且第三和第四实施方案在图2中被报告。
现在将参照制备本发明的化合物的实施例和吸收的实施例来描述本发明。
实验部分
在以下实施例中使用的试剂可商购自各个供应商并且在没有另外的纯化下使用。溶剂以干燥形式使用。在无水环境中的反应在干燥的N2的正压下进行。
质子核磁共振(1H NMR)光谱在Bruker Avance 400MHz仪器上记录。使用残余溶剂线作为内标，以ppm(δ)报告化学位移。裂分模式被指定为：s，单峰；d，双峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰；b，宽信号。
质谱(MS)在以正ES(+)和负ES(-)离子化模式操作的离子阱Thermo LCQ经典光谱仪上进行。
在使用Acquity UPLC-BEH C18柱(1.7μM，50×2.1mm)的Waters Acquity UPLC-SQD仪器上进行UPLC光谱。
使用Waters Alliance 2965设备和紫外线-可见光检测器Waters 2996进行 HPLC光谱。色谱方法(使用Phenomenex Luna C18,150*4.6,5μ)如下：在30℃洗脱35min，流动相包括不同的乙腈/甲醇/KH2PO4(20mM,pH 2.5)混合物， 0.6ml/min的流量。
在使用Biotage SNAP HP二氧化硅筒或Biotage SNAP KP-NH筒的 Biotage自动快速色谱法系统(Sp1系统和Isolera系统)上进行快速硅胶色谱法。
在使用RediSep Gold C-18Aq筒的Biotage自动快速色谱法系统(Isolera 系统)上进行反相色谱法。
使用Phenomenex Strata SCX筒(55μm，70A)进行某些碱性化合物的纯化。
使用在紫外光下可视的Merck TLC板Kieselgel 60F-254、高锰酸盐水溶液、碘蒸气进行薄层色谱法。
本文使用以下缩写：DEAD：偶氮二羧酸二乙酯；Boc：叔丁氧基羰基； DCM：二氯甲烷；TFA：三氟乙酸；DMF：二甲基甲酰胺；THF：四氢呋喃；RT：室温；DMAP：二甲基氨基吡啶；AcOEt：乙酸乙酯；NaOH：氢氧化钠；KOH：氢氧化钾；DIPEA：N,N-二异丙基乙胺；TEA：三乙胺；NaHCO3：碳酸氢钠；Na2SO4：硫酸钠；Boc：叔丁氧基羰基；Et2O：乙醚； CCl4：四氯化碳；DCE：二氯乙烷；MeOH：甲醇。EDC HCl：N’-(3-二甲基氨基丙基)-N-乙基碳二亚胺盐酸盐；CDI：二-(1H-咪唑-1-基)甲酮；HOBt： 1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇；Pd2(dba)3：9,9-二甲基-4,5-双(二苯基膦基)呫吨；Xantphos：三(二亚苄基丙酮)二钯(0)；AIBN：偶氮二异丁腈；1-丙烷膦酸环酐(T3P)。
一般程序1
实施例1-实施例3
根据图1的程序制备式(III)的中间体
将1-(溴甲基)-4-硝基苯(1mmol)添加至哌嗪-1-羧酸叔丁酯衍生物(1.2 mmol)(具有合适取代的化合物(ST))和三乙胺(2mmol)在DCM中的溶液。反应是略微放热的。将产生的混合物留在RT搅拌持续3小时。反应用DCM稀释，用水和稀释的柠檬酸洗涤，干燥并且蒸发，以给出实施例1、实施例2、实施例3的化合物。
表1
一般程序2
实施例4-实施例6
根据图2的程序制备式(X)的中间体
向4-(4-硝基苄基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯衍生物(1mmol)(具有合适取代的化合物(ST))在乙酸乙酯(0.12M ml)中的溶液中添加氯化锡(ii)二水合物(5 mmol)，并且将产生的混合物留在RT搅拌过夜。然后，添加饱和的碳酸氢钠水溶液(20mL)并且剧烈搅拌持续1小时。将固体通过过滤通过硅藻土垫来除去，并且将滤液的有机层分离，并且用水(20mL)洗涤。将有机相经无水硫酸镁干燥并且浓缩，以给出以下的式(X)的化合物。
表2
一般程序3
实施例7-实施例14
根据图2的程序制备式(XII)的中间体
3a：在圆底烧瓶中在氮气气氛下，将可商购的苯甲酸(1.1mmol)或磺酰氯悬浮在75ml的无水DCM中。然后，添加HOBt(1.4mmol)和EDC HCl(1.1 mmol)并且使产生的混合物在室温搅拌持续2小时。然后，添加中间体(X) (表2中的实施例4-实施例6的化合物)(1.1mmol)在75ml的干燥的DCM中的溶液，并且在完成之后，将混合物在40℃搅拌。将反应混合物留下冷却至室温，用饱和的NH4Cl水溶液、然后是含水0.5M HCl、含水1M NaOH并且最后用饱和的NaHCO3水溶液洗涤。将有机层分离，经硫酸钠干燥，过滤并且在真空下蒸发。产生的粗产物通过用从环己烷/AcOEt 1/1至100％ AcOEt的梯度洗脱的在硅胶上的快速色谱法来纯化。将收集的级分蒸发，以给出实施例7-实施例10、实施例14的化合物。
3b：将可商购的苯甲酸(1.3mmol)悬浮在甲苯(0.01M)中，添加亚硫酰氯(12mmol)，并且将混合物在110℃加热持续1h。将挥发物蒸发，并且将残余物添加至式(X)的中间体(表2中的实施例4-实施例6的化合物)(1mmol) 在吡啶(40mmol)中的溶液，并且将产生的混合物在rt搅拌持续1h。将吡啶蒸发，然后添加NaOMe(2mmol)和MeOH。在30分钟之后，将溶剂蒸发，并且添加DCM和水。将分离的有机相浓缩，并且残余物通过用DCM/MeOH 洗脱的快速色谱法来纯化，以给出实施例11、实施例12、实施例13的化合物。
3c：将式(X)的中间体(表2中的实施例4-实施例6的化合物)(1mmol)和 CDI(1mmol)溶解在乙腈(比率：1.000,0.04M)和DCM(比率：0.5,0.04M)中。在rt的2小时之后，将溶剂蒸发，残余物溶解在DMF(比率：0.5,0.04M)中并且添加对应的胺(1mmol)，并且在完成之后，混合物留在60℃。然后，将反应物倾入水中并且用AcOEt(3x)萃取；将有机相收集，用水洗涤，干燥并且蒸发，以给出标题的脲(实施例15的化合物)。
表3
一般程序4
根据图3中报告的程序制备图2中的式(XII)的某些中间体
实施例16-实施例22
根据图3的程序制备式(1)的中间体
4a：将TEA(1.2mmol)和可商购的苯甲酰氯(1.1mmol)在0℃添加至对应的苯胺(1mmol)在DCM(0.16M)中的溶液。将反应混合物留在室温搅拌持续2h。添加饱和的NaHCO3的溶液(500ml)。将相分离并且水层用DCM(3 次)萃取。将合并的有机层蒸发并且通过用DCM/EtOAc洗脱的快速色谱法纯化，以获得在表4中报告的实施例16-实施例18、实施例20、实施例21的化合物。
4b:将对应的苯胺(1mmol)、可商购的羧酸(1mmol)、在DMF中的(T3P) (1.2mmol)、和DIPEA(2mmol)在DMF(0.5M)中的混合物在完成之后在 45℃搅拌。在那之后，混合物用AcOEt稀释并且用水洗涤两次。将有机层干燥并且蒸发，并且将残余物在乙醚中磨碎，以提供在表4中报告的实施例19、实施例22的化合物。
表4
一般程序5
实施例23-实施例28
根据图3的程序制备式(2)的中间体
向在表4中示出的酯(1mmol)在THF中的溶液(体积：0.5M)逐滴地添加在THF(2.5mmol)中的硼氢化锂4M。在完成之后，将反应混合物留在50℃搅拌。在那之后，添加HCl2N，并且将混合物留在80℃搅拌持续另外的一小时。将反应冷却至室温，并且添加饱和的NaHCO3溶液，直到pH达到8 的值。将有机相分离，并且水相用AcOEt萃取(3次)。将有机相合并，经 Na2SO4干燥并且蒸发，以获得粗品，所述粗品通过用DCM/MeOH洗脱的快速色谱法来纯化，从而获得实施例23-实施例28的化合物。
表5
一般程序6
实施例29-实施例35
根据图2的程序制备式(XII)的中间体
6a：将在表5中所代表的醇(1mmol)溶解在DCM(0.1M)中，并且将溶液冷却至℃之后，添加三溴化膦(1.1mmol)。在完成之后，将产生的混合物留在0℃搅拌。在那之后，将溶剂蒸发，并且将残余物溶解在小体积的 DMF中并且添加至可商购的哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1mmol)和DIPEA(2mmol) 在DMF(0.1M)中的搅拌且冷却的溶液。然后，将此混合物在0℃搅拌持续2 h并且然后在完成之后在RT搅拌。使反应在水和EtOAC之间分配，将有机相分离并且用水洗涤(3次)，干燥并且浓缩成粗品，所述粗品通过快速色谱法(洗脱剂：环己烷/AcOEt)来纯化。
6b：将AIBN(0.3mmol)添加至实施例20(1mmol)和N-溴代琥珀酰亚胺 (1.1mmol)在CCl4(0.7M)中的悬浮液。在完成之后，将反应混合物留在80℃搅拌。将反应混合物收集到DCM/水的混合物中。将相分离，并且水层用 DCM萃取(2次)。将合并的有机层蒸发，以获得油，将所述油溶解在小体积的DMF中，并且添加至可商购的哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1mmol)和DIPEA(2 mmol)在DMF(0.1M)中的搅拌的且冷却的溶液。然后，将此混合物在0℃搅拌持续2h并且然后在完成之后在RT搅拌。使反应在水和EtOAC之间分配，将有机相分离并且用水洗涤(3次)，干燥并且浓缩成粗品，所述粗品通过快速色谱法(洗脱剂：环己烷/AcOEt)来纯化。
根据上文程序6a和6b，获得在表6中报告的化合物。
表6
一般程序7
实施例36-实施例52
根据图1的程序制备式(IV)的中间体和根据图2的程序制备式(XIII)的中间体
向中间体(XII)(图2)和中间体(III)(图1)(1mmol)在DCM中的溶液(2M) 添加三氟乙酸(10mmol)，并且在完成之后，将产生的混合物在RT搅拌。将溶剂蒸发，并且残余物通过SPE-SCX来纯化，以给出在表7中报告的化合物。
表7
实施例53-实施例57
图1和图2-的式(VI)的中间体的制备
一般程序8
将GNH2衍生物(图1)(1mmol)溶解在DMSO(1ml/mmol)和DIPEA(2 mmol)中；将反应冷却至0℃，然后分批添加2,4-二氯嘧啶衍生物(0.98 mmol)。在RT的2小时之后，将反应倾入冷水中，并且将固体：
8a：过滤，用水(3×100ml)洗涤，并且在70℃在真空中干燥，以给出期望的化合物。
8b：溶解在EtOAc中；有机相用水洗涤，干燥并且蒸发。残余物通过用DCM/AcOEt洗脱的硅胶色谱法来纯化。
一般程序9
将2,4-二氯嘧啶衍生物(1mmol)、GNH2(1mmol)、Cs2CO3(4mmol)和可商购的Pd2(dba)3(0.02mmol)在氮气下悬浮在微波管中的DME(0.4M) 中。添加Xantphos(0.04mmol)，将管加盖，并且经历抽空-用氮气回填的3 次循环。将反应在105℃加热持续1h，然后冷却至RT，过滤并且用AcOEt 和DCM洗涤。将溶剂蒸发，并且残余物通过用环己烷/AcOEt洗脱的快速色谱法纯化。
实施例58
图1中的式(III)的中间体
4-(4-(甲氧基羰基)苄基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯的制备
(中间体(III)，当W＝苯基，S＝COOCH3，m＝2n＝1Pr＝羧酸叔丁酯R＝H，R1＝H时)。
在干燥的二颈圆底烧瓶中，向N-(t-Boc)哌嗪(1.561g，8.38mmol)和可商购的4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(1.6g，6.98mmol)在DCM(体积：20ml)中的溶液，添加N,N-二乙基乙胺(2.92ml，20.95mmol)，并且将产生的混合物留在RT搅拌持续2小时。在此时间之后，混合物用水并且随后饱和的NaCl 洗涤，并且产生的水层用DCM萃取一次。将合并的有机相在Na2SO4上干燥并且在减压下浓缩，以给出无色的油，所述无色的油通过用环己烷/EtOAc 的梯度洗脱的快速色谱来纯化。收集有关的级分并且在减压下浓缩，以提供标题化合物(1.3g；55.7％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 8.00(1H,s),7.96(1H,d),7.56(1H, d),7.42(1H,t),3.94(3H,s),3.57(2H,s),3.40-3.49(4H,m),2.41(4H,t), 1.48(9H,s)；ESI+m/z 335[M+H]+
实施例59
图1中的式(IV)的中间体
4-(哌嗪-1-基甲基)苯甲酸甲酯的制备(中间体(IV)，当S是COOCH3，R＝H，R1＝H，W ＝苯基，m＝2n＝1时)
在单颈圆底烧瓶中，向在-15℃冷却的4-(4-(甲氧基羰基)苄基)哌嗪-1- 羧酸叔丁酯(1.3g，3.89mmol)在DCM(体积：5ml)中的溶液，添加全氟乙酸(5ml，65.3mmol)，并且在-15℃搅拌15min之后，允许混合物达到室温。在RT的2小时搅拌之后，将溶剂在减压下蒸发，并且将残余物溶解在MeOH 中并且加载到SPE-SCX(10g)柱上。在用MeOH 2次洗涤柱体积之后，期望的化合物(847mg；93％收率)用在MeOH中的NH32M溶液洗脱。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 8.00(1H,s),7.95(1H,d),7.57(1H, d),7.41(1H,t),3.94(3H,s),3.55(2H,s),2.91(4H,t),2.43(4H,宽信号)； ESI+m/z 236[M+H]+。
实施例60
图1中的式(VII)的中间体
4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)苯甲酸 甲酯的制备(中间体(VII)，当S是COOCH3，R＝H，R1＝H，W＝苯基，m＝2n＝1，X是N，G是5-环丙 基-1H-吡唑，Y是H时)
向2-氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(1.26g；5.37mmol)和 4-(哌嗪-1-基甲基)苯甲酸甲酯(1.9g；8.59mmol)在DMSO(15ml)中的溶液添加DIPEA(2.81ml；16.1mmol)。将产生的混合物在80℃加热持续18小时。在此时间之后，将DIPEA蒸发并且产生的混合物用AcOH(1ml)酸化，并且通过用仅水+0.1％AcOH至仅乙腈+0.1％AcOH洗脱的反相色谱法来纯化。收集有关的级分并且充分地蒸发。将残余物干燥装载到正相柱上，并且用梯度环己烷/EtOAc洗脱，以给出标题化合物(VII)(2.1g；93％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 11.91(1H,宽信号),9.32(1H,宽信号),7.95(1H,s),7.82-7.91(2H,m),7.63(1H,d),7.51(1H,t),6.30(1H, 宽信号),6.03(1H,宽信号),3.87(3H,s),3.66-3.73(4H,m),3.59(2H,s), 2.43(3H,t),1.82-1.91(1H,m),0.86-0.93(2H,m),0.61-0.67(2H,m)； ESI+m/z 434[M+H]+
实施例61
图1中的式(VIII)的中间体
4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)苯甲酸 的制备(中间体(VIII)，当Z是COOH，R＝H，R1＝H，W＝苯基，m＝2n＝1，X是N，G是5-环丙基- 1H-吡唑，Y是H时)
向实施例60的化合物(331mg；0.761mmol)在1,4-二氧六环(3ml)和水(1 ml)中的溶液添加锂水合物(80mg；1.9mmol)，并且将产生的混合物在RT 搅拌持续6h。然后，将溶剂在减压下蒸发，并且将残余物溶解在DMSO(2ml) 中，用AcOH(1ml)酸化，并且通过用水\乙腈洗脱的反相色谱法纯化。收集有关的级分并且蒸发，以提供标题化合物。(44mg；76％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 12.34(1H,宽信号),9.31(1H,宽信号),7.92(2H,d),7.88(1H,d),7.48(2H,d),6.30(1H,宽信号),6.03(1H, 宽信号),3.70(4H,宽信号),3.59(2H,s),2.43(4H,t),1.81-1.90(1H,m), 0.86-0.93(2H,m),0.61-0.67(2H,m)；ESI+m/z 420[M+H]+
实施例62
图1中的式(VII)的中间体
N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-2-(4-(4-硝基苄基)哌嗪-1-基)嘧啶-4-胺的制备 (中间体(VII)，当S是NO2，R＝H，R1＝H，W＝苯基，m＝2n＝1，X是N，G是5-环丙基-1H-吡唑，Y 是H时)
将2-氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(7.5g，31.8mmol)、1-(4- 硝基苄基)-哌嗪(实施例36)(10.56g，47.7mmol)和DIPEA(16.7ml，95mmol) 在DMSO中的溶液在100℃加热过夜。
将反应混合物冷却，倾入水中并且过滤。固体用MeOH/水1/1洗涤两次，并且在真空下在60℃干燥，以给出14g(91％纯度，棕色固体，收率95％)的标题化合物。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 11.90(1H,s),8.21(2H,s),8.10 (1H,s),7.64(2H,d),6.69(1H,宽信号),5.83(1H,宽信号),3.67(2H,s), 3.51(4H,宽信号),2.47(4H,宽信号),1.85(1H,s),0.91(3H,宽信号),0.67 (2H,宽信号)；ESI+m/z 421[M+H]+
实施例63
图1中的式(VIII)的中间体
2-(4-(4-氨基苄基)哌嗪-1-基)-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺的制备 (中间体(VIII)，当Z是NH2，R＝H，R1＝H，W＝苯基，m＝2n＝1，X是N，G是5-环丙基-1H-吡唑，Y 是H时)
向氯化铵(15.8g，295mmol)在水和甲醇中的溶液添加铁(9.16g，164 mmol)，随后是实施例62(13.8g，32.8mmol)。将混合物在70℃加热持续1h。将热的悬浮液通过硅藻土的垫过滤并且浓缩。添加水和Et2O，分离的水相用NaOH 32％碱化，并且产物用DCM萃取两次。将有机层干燥并且浓缩，以给出9.64g(纯度96％，棕色固体，收率75％)的标题化合物。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 11.91(1H,宽信号,9.11(1H,宽信号),8.10(1H,s),6.86-7.00(2H,m),6.59-6.77(1H,m),6.52(2H,d),5.83 (1H,宽信号),4.94(2H,s),3.46(4H,宽信号),2.25-2.45(4H,m),1.78- 1.91(1H,m),0.90(2H,d),0.66(2H,q)；ESI+m/z391[M+H]+
实施例64
表8中的化合物2的制备
将2-(三氟甲基)苯甲酸(0.974g，5.12mmol)悬浮在甲苯(比率：1.000，体积：20ml)中，添加亚硫酰氯(1.869ml，25.6mmol)，并且将混合物在90℃加热持续1h。将溶剂蒸发，并且将残余物添加至2-(4-(4-氨基苄基)哌嗪-1- 基)-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(1g，2.56mmol)在吡啶(15ml，185 mmol)中的溶液，并且将产生的混合物搅拌持续3h。将吡啶蒸发，然后添加甲醇钠(2g，37.0mmol)和甲醇(比率：1.500，体积：30ml)。在2h之后，将溶剂蒸发，并且添加DCM和水。将分离的有机相浓缩，并且残余物通过快速色谱法(DCM至DCM/MeOH 9/1)来纯化，以给出标题化合物(0.9g； 62.5％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 11.91(1H,s),10.53(1H,s),9.31 (1H,宽信号),7.87(2H,s),7.80(1H,s),7.54-7.76(4H,m),7.32(2H,d), 6.31(1H,宽信号),6.04(1H,宽信号),3.69(4H,宽信号),3.48(2H,s),2.42(4 H,宽信号),1.87(1H,s),0.91(2H,d),0.65(2H,d)；ESI+m/z 563[M+H]+
实施例65
化合物2的HCl盐的制备
将化合物2的N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺(10g)悬浮在MeOH(200ml)中，并且添加HCl/MeOH3N(70ml)。将其搅拌持续15分钟(沉淀物被溶解)，然后将其浓缩，并且将残余物(50ml)逐滴地添加至丙酮(500ml)。将沉淀物过滤，用丙酮(2×100ml)洗涤，并且最后在高真空下在60℃干燥持续2h。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 11.59(1H,宽信号),11.12(1H, 宽信号),10.76(1H,s),7.93(1H,宽信号),7.77-7.90(4H,m),7.72(2H,t), 7.61(2H,d),6.47(1H,宽信号),6.23(1H,宽信号),4.60(2H,d),4.33(2H, 宽信号),3.59-3.76(2H,m),3.51(2H,d),3.08-3.27(2H,m),1.95(1H,t), 0.92-0.99(2H,m),0.69-0.76(2H,m)；ESI+m/z 563[M+H]+
实施例66
用于制备本发明的化合物(式Ia、式Ib、式Ic、式Id)的一般程序：
一般程序10(图1)
10a：将可商购的苯甲酸(1.3mmol)悬浮在甲苯(0.01M)中，添加亚硫酰氯(10mmol)，并且将混合物在110℃加热持续1h。将挥发物蒸发，并且将残余物添加至实施例63的中间体(VIII)(1mmol)在吡啶(40mmol)中的溶液，并且将产生的混合物在rt搅拌持续1h。将吡啶蒸发，然后添加 NaOMe(2mmol)和MeOH。在30分钟之后，将溶剂蒸发，并且添加DCM和水。将分离的有机相浓缩，并且残余物通过用梯度DCM/MeOH洗脱的快速色谱法来纯化，以给出在表8中报告的式(Ia)的化合物。
10b：将实施例63的中间体VIII(1mmol)、HOBt(1.1mmol)和EDCI (1.1mmol)溶解在DMF(0.1M)中，并且在RT搅拌持续30min。在此时间之后，添加对应的苯甲酸(可商购的)(1.1mmol)，并且将混合物留在RT 搅拌过夜。在过夜之后，将混合物倾入水中并且用EtOAc萃取若干次。合并的有机相用NaHCO3饱和溶液洗涤一次，在Na2SO4上干燥并且在减压下浓缩。残余物通过用梯度DCM:MeOH洗脱的快速色谱法来纯化，以提供在表8中报告的式(Ib)的化合物。
10c：将实施例63的中间体VIII(1mmol)和CDI(1mmol)溶解在乙腈(比率：1.000,0.04M)和DCM(比率：0.5,0.04M)中。在rt的2小时之后，将溶剂蒸发，残余物溶解在DMF(比率：0.5,0.04M)中并且添加对应的胺(1mmol)，并且在完成之后，混合物留在60℃。然后，将反应物倾入水中并且用AcOEt (3x)萃取；将有机相收集，用水洗涤，干燥并且蒸发，以给出在表8中报告的式(Ic)的脲化合物。
10d：将实施例61的中间体(VIII)(1mmol)、1-羟基苯并三唑一水合物 (1.1mmol)和N’-(3-二甲基氨基丙基)-N-乙基碳二亚胺盐酸盐(1.1mmol)溶解在DMF(0.1M)中，并且在完成之后在RT搅拌(约30min)。在此时间之后，添加对应的苯胺(1.1mmol)，并且将混合物留在RT搅拌过夜。在过夜之后，将混合物倾入水中并且用EtOAc萃取若干次。合并的有机相用NaHCO3饱和溶液洗涤一次，在Na2SO4上干燥并且在减压下浓缩。将残余物溶解在DCM 中并且通过用梯度DCM:MeOH洗脱的快速色谱法纯化，以提供在表8中报告的式(Id)的化合物。
实施例67
一般程序11(图2)
将中间体(VI)(1mmol)、中间体(XIII)(1.5mmol)和DIPEA(3mmol)在 DMSO中的溶液(0.2M)在100℃加热持续6h。将DIPEA蒸发，并且残余物通过用仅水+0.1％AcOH至仅乙腈+0.1％AcOH洗脱的反相色谱法纯化。收集有关的级分，并且将有机溶剂充分蒸发；添加NaOH1N，并且产物用DCM 萃取，用水洗涤，干燥并且蒸发，以给出在表8中报告的式的化合物。
表格因此报告所有制备的本发明的化合物与NMR数据。
表8
本发明的化合物的药理学评估
已经在体外研究了根据本发明的式(I)的化合物，以便确定其在用于测试激酶抑制的细胞模型中的潜在的FYN激酶抑制活性和效力，以及确定由在大鼠中的骨关节炎的模型中的诱发的痛觉过敏和疼痛行为的实验中体外筛选产生的最好的化合物的效力。
PP2，4-氨基-5-(4-氯苯基)-7-(二甲基乙基)吡唑并[3,4-d]嘧啶(能够选择性抑制SRC-家族激酶的成员的药理学工具)(Hanke等人，J.of Biological Chemistry 271(2):695-701)被用作比较药物。
在以下的表9-表12中总结了获得的结果。
实施例68
体外激酶测定法
使用自动液体处理装置(Microlab STAR Hamilton)和Z’-LYTETM激酶测定平台(与高通量筛选(HTS)应用兼容的基于荧光共振能量转移(FRET)的测定平台)进行确定化合物的激酶抑制活性的测定。该测定采用基于荧光的、酶偶联的格式，并且利用磷酸化肽和非磷酸化肽对于蛋白水解裂解的差异性灵敏度。
在针对活性FYN的筛选测试(人类重组体，62.7kDa)中评估测试化合物。将期望的酶在具有合成的肽底物、ATP以及在从10-10M至多达10-5M 最终浓度的范围内的不同的抑制剂浓度的384个小体积微板中温育。代表 0％抑制(或总的酶活性)的样品是在反应缓冲剂(50mM Hepes、10mM MgCl2、1mM EGTA、0.01％Brij-35，pH 7.5)中的化合物稀释剂(1％DMSO最终)的存在下。
选择激酶的接近Km的ATP浓度和在一小时温育内，使20％-40％的 Z’-LYTETM酪氨酸2肽磷酸化的最优的酶浓度。所有的试剂在反应缓冲剂中被稀释，并且激酶反应在10μl的总体积中在25℃进行持续60分钟。包括在每个板中的0％磷酸化(即，没有ATP)和100％磷酸化(即，供应的合成上磷酸化的肽)测定对照允许计算在特定的反应孔中实现的百分比磷酸化。0％抑制和0％磷酸化(即，100％抑制)对照定义在筛选中的动态范围。
在温育结束时，次级反应(展开反应(Development Reaction))通过添加包含识别非磷酸化的肽并且使非磷酸化的肽裂解的位点特异性蛋白酶的 5μl展开试剂(Development Reagent)来开始，并且在60分钟之后，用5μl/样品的停止试剂来中断。香豆素(激发400nm，发射460nm)和荧光素(激发400 nm，发射535nm)发射信号的测量通过荧光读板仪(Envision，PerkinElmer) 来进行。
测试在10-6M-10-9M的浓度范围内的化合物。
结果被表示为抑制百分比，并且使用GraphPadTM Prism软件通过非线性曲线拟合来计算IC50值。
在以下表中报告式(I)的化合物的代表性实施例的FYN激酶抑制活性。
表9：FYN激酶抑制
如表9示出，产生的更有力的式(I)的Fyn激酶抑制剂是化合物2、化合物11、化合物14、化合物26、化合物29、化合物36以及化合物41。有利的化合物因此是其中A是优选地在酰胺基团B的邻位被-CF3取代基取代的苯基基团或吡啶基基团或吡嗪基基团的化合物。
此外，产生的优选的化合物具有的G是更优选地在5-位中被环丙基基团取代的1-H-吡唑-3-基，如通过上文指示的相同化合物所呈现的。
如从表9中明显的是，PP2是不太有效的。
实施例69
用于测试激酶抑制的细胞模型：报告基因(GR)测定法(gene reporter assay)
为了确定本发明的化合物是否在细胞模型中也是有活性的，在已知经由炎症刺激(TNFα)活化Fyn激酶的细胞系(JB6Cl 41-5a(P+))中建立报告基因测定法。GR测定法测量位于Fyn活化通路的下游的核转录因子NF-kB的活化。在此分析中有活性的产物必须渗透到细胞中并且抑制NF-kB的活化通路。
报告基因测定法
鼠类上皮细胞系JB6Cl 41-5a(P+)(ATCC@货号CRL-2010)用 pGL4.32[luc2P/NFkB-RE/Hygro]载体(Promega)来稳定地转染。克隆选择通过在MEM(+Earle’s BSS+1.5g/l碳酸氢钠+0.1mM NEAA)+ GlutaMAXTM-I，+1mM丙酮酸钠，+5％FBS+80μg/ml潮霉素B中的限制性稀释来实现。克隆被测试其对于TNFα刺激的应答。
获得的转染的细胞(JB6(P+)NFkB-RE-luc2P T3-C10)包含在具有多个核因子-kB应答元件(NFkB-RE)的最小TATA启动子的控制下的萤火虫萤光素酶基因(luc2P)。这些NFkB-RE是NF-kB转录因子的DNA结合序列。
JB6(P+)NFkB-RE-luc2P T3-C10细胞被用于分析在TNFα刺激之后，通过Fyn-抑制剂的NF-kB活性调节(Hwang等人；Biochem.Pharmacol.2009,77 (7):1213-22)。
将6000个细胞/孔平铺在96×孔板中。在24h之后，给予没有抗生素的新的培养基。在另外的24h之后，细胞用不同的化合物预处理持续1h，并且然后用2ng/ml TNFα刺激持续4h。在每个实验中，总是使用两个阳性标准物，并且每个测试条件一式四份地分析。
荧光素酶分析用ONE-GloTM+毒性荧光素报告基因(ToxLuciferase Reporter)和细胞生存力测定试剂盒(Promega)进行。此测定法将荧光素酶测定化学与细胞生存力标记物组合，以更好地理解在细胞健康的上下文中的报告基因表达。该测定使用两步过程。测定的第一部分是测量在培养物群 (culture population)中的活细胞的相对数目的非裂解荧光测定(non-lytic fluorescence assay)(CellTiter-FluorTM细胞生存力测定)，因为其测量活细胞内的保守和构成性蛋白酶活性。活细胞蛋白酶活性限于完整的有生命力的细胞，并且使用荧光的、细胞渗透肽底物(甘氨酰基-苯丙氨酰基-氨基氟香豆素；GF-AFC)来测量。用使用400nm的激发波长和500nm的发射波长的 EnVision酶标仪(PerkinElmer)来测量与活细胞的数目成比例的产生的荧光信号。
测定的第二部分使用ONE-GloTM荧光素酶测定系统以定量萤火虫荧光素酶报告基因表达。ONE-GloTM测定包括比标准物荧光素酶测定试剂更耐受样品组分的氟荧光素底物。用EnVision酶标仪(PerkinElmer)测量发光。
式(I)的化合物被测试其渗透到细胞中并且抑制NF-kB的活化通路的能力。
在以下的表10中总结了获得的结果。
表10：报告基因(GR)抑制
如表10示出，某些本发明的化合物特别是实施例2和实施例26的化合物展示能够渗透到细胞中，并且经由TNF-α刺激以亚微摩尔浓度 (sub-μmolar concentration)抑制FYN激酶活化。另外，标准物比较物PP2展示能够进入到细胞中并且在此模型中是有效的。
实施例70
在JB6细胞中的毒性
在JB6CI 41-5a(P+)中的细胞毒性分析对于确定在GR测定中获得的结果是否是由于药理学作用或产物的毒性作用是重要的。
研究用以下方法进行：
鼠类上皮细胞系JB6Cl 41-5a(P+)(ATCC@货号CRL-2010)被用于通过 MTT法分析产物细胞毒性。将104个细胞/孔平铺在96×孔板MEM 5％中。在平铺之后48h，细胞用不同的化合物和阳性标准物预处理持续1h，并且然后用TNFα刺激(以模拟在报告基因测定中使用的相同的实验条件)持续4h 和24h。在温育时间结束时，将培养基除去，并且用10:1的MEM5％MTT(2 mg/ml)的混合物在37℃在细胞温育器中替代持续1h。MTT是特别可用于测定代谢活性的活细胞(living metabolically active cell)的定量的四唑鎓盐；其通过被线粒体脱氢酶代谢以形成甲臜染料(盐)起作用。在此温育之后，将上清液除去，并且将沉淀的盐用100μl的DMSO溶解。然后，板在540nm处读取。将单独的100μl的DMSO(没有细胞)用作空白，将其从每个样品的测量值中减去。
在24小时的温育之后，本发明的化合物在JB6细胞系中展示几乎没有细胞毒性。作为本发明的式(I)的代表性化合物的化合物2、化合物21和化合物26在3微摩尔浓度(μmolar)呈现高于50％的残余细胞活力百分比，而假定的标准物参考PP2是更有毒性的，在相同的浓度其呈现仅18％的残余细胞活力。
实施例71
激酶选择性
检查作为本发明的代表性化合物的化合物2的激酶选择性。
其潜在的激酶抑制活性在通过Cerep的约100种人类激酶测定的标准小组(standard panel)中被研究。如在表2中已经示出的，其呈现10-9M FYN激酶抑制。在检查的SRC家族的其他激酶中，化合物2以高于10-7M浓度的IC50和约100的平均效能比抑制它们中的全部。对于在10-7M浓度被抑制大于 50％的、检查的剩余的激酶的高于70％(RET、CDK2、FLT-3和FLT-4的部分)，化合物2几乎是无效的。相反地，PP2对于SRC家族的激酶是较少选择性的。事实上，其对于这些激酶的IC50抑制(10-9M)如下：
a)化合物2：FYN(9)、SRC(730)、LYN(1400)、YES(270)、BLK(480)、 LCK(450)以及HCK(3200)；
b)PP2：FYN(44)、SRC(70)、LYN(64)、YES(61)、BLK(132)、LCK(67) 以及HCK(61)；
实施例72
本发明的化合物的“体内”药理学活性的描述
在炎症性疼痛、慢性疼痛和神经性疼痛的若干模型中，式(I)的化合物已经被证明是有力的镇痛药。
因此，本发明的化合物可用于治疗急性和慢性疼痛两者，包括但不限于：术后疼痛、肌肉疼痛、由各种形式的创伤造成的疼痛，以及慢性疼痛、神经性疼痛、癌症疼痛、由关节炎引起的疼痛。
已经使用以下体内动物模型确定了式(I)的化合物用于治疗炎症性疼痛和神经性疼痛的效力。
大鼠中CFA诱发的炎症性疼痛
将在100μL的液体石蜡中的300μg的结核分枝杆菌(完全弗氏佐剂； CFA)注射到雄性Wistar大鼠的右后足垫(right hind footpad)中。72小时后，将化合物2和化合物26皮下地施用，并且在施用之后24h，对有害的机械刺激的响应通过用Randall-Selitto型的痛觉测量计测量缩足阈值(paw withdrawal threshold)(PWT)来评估。将动物轻轻地限制住，并且经由圆顶形塑料尖头(plastic tip)，将稳定增加的压力应用至身体同侧(CFA治疗的)和对侧两者的足的背面。
100％保护意味着用化合物和CFA治疗的动物可以耐受与未曾接受 CFA治疗的对照动物相同的刺激(体重)。
表11示出与PP2相比，两个代表性的式(I)的化合物在此CFA模型中获得的结果。
表11：％保护作用相对于CFA诱发的痛觉过敏
化合物 3微摩尔浓度 10微摩尔浓度
化合物2 100 -
化合物26 100 -
PP2 45 47
在表11中示出的结果证明，通过局部(皮内注射)施用给出的本发明的两个代表性化合物，化合物2和化合物26两者均是对CFA诱发的痛觉过敏非常有力的抑制剂，而两个比较物证明在此实验范例中是较不有力的。
实施例73
药代动力学
以1mg/kg口服给予大鼠的化合物2呈现51％的口服生物利用度和877 ng*h/ml的AUC(0h-24h)。
相比之下，在相同的实验条件下，PP2示出低得多的口服生物利用度： AUC 160ng*h/ml。
因此，实施例2的口服活性在下一个实验中描述的大鼠中的诱发的骨关节的模型中来检查。
实施例74
在大鼠中手术诱发的半月板撕裂性骨关节炎(MMT)
使用约350g体重的雄性Sprague Dawley大鼠(Charles River)。使用在氧气中的2.5％异氟烷以1l每分钟的流量将大鼠麻醉。将右后腿剃光并且手术准备。将内侧副韧带暴露并且横切。将半月板用止血钳抓住，并且朝向股骨近关节地反射(reflect proximally)。将半月板在最窄点处切割穿过其全厚度。将结缔组织层和皮肤分别用涂覆的Vicryl 8-0和4-0丝缝线闭合。使假手术操作的动物经历相同的程序，除了将内侧副韧带暴露但不横切。在2周的恢复时间段之后，评价机械痛觉过敏持续接下来的4周，一周一次，在药物施用之前和之后90分钟。从手术后14天开始，药理学口服治疗进行持续28天。在从手术6周之后，将大鼠处死(10只动物每组)，并且将身体同侧膝盖取出用于组织病理学分析。将以10mg/kg和30mg/kg给予的本发明的化合物2和以10mg/kg给予的PP2以5ml/kg溶解在盐水中，口服。
最大可能的作用(MPE％)通过下式来计算：
100*(化合物-媒介物)/(假手术-媒介物)
结果在以下表12中示出。
表12示出，化合物2，优选的本发明的式(I)的化合物，能够在手术 MMT之后两周开始的五周的全部治疗时间段期间，剂量依赖地降低在骨关节炎的大鼠模型中的疼痛行为。相反地，PP2，标准FYN激酶比较物，在10mg/kg是无效的，而其较高的剂量是不耐受的。还可能的是，PP2的此无活性是由于其差的口服吸收，如在上文药代动力学段落中所示出的。

Claims (16)

1.一种式(I)的化合物：
其中：
A选自苯基、包含选自N、S和O的一个或更多个杂原子的5元-6元杂环以及(C5-C7)环烷基，
其中所述苯基任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基取代：卤素、三氟甲基、三氟甲氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C3)烷氧基、(C3-C6)环烷基、(C3-C6)环烷基氧基、硝基、氨基、羟基、氰基、甲酰胺、磺酰胺、甲烷磺酰基，
所述5元-6元杂环是5元-6元杂芳基或任选地被(C1-C3)烷基取代的5元杂环，所述5元-6元杂芳基任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基取代：卤素、三氟甲基、三氟甲氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C3)烷氧基、(C3-C6)环烷基、(C3-C6)环烷基氧基、硝基、氨基、羟基、氰基、甲酰胺、磺酰胺、甲烷磺酰基；
所述(C5-C7)环烷基任选地独立地被一个或两个(C1-C4)烷基取代；
B独立地选自-CONH-、-NHCO-、-SO2NH-、-NHCONH-；
W是苯基基团或包含选自N、O和S的一个或两个杂原子的杂芳基基团，所述苯基或所述杂芳基任选地独立地被一个或两个(C1-C4)烷基、(C1-C3)烷氧基、(C3-C6)环烷基、(C3-C6)环烷基氧基取代；
R和R1独立地选自由以下组成的组：H、(C1-C3)烷基以及(C1-C3)烷氧基；
m是2；
n是1；
X是N；
Y独立地选自H、CH3、CH2-OH、CN；
G是5元-6元杂芳基基团，所述5元-6元杂芳基基团包含选自N、O和S的一个或更多个杂原子并且任选地被独立地选自卤素、(C1-C4)烷基、(C3-C6)环烷基的一个或更多个取代基取代，
或其盐，特别是其药学上可接受的盐。
2.如权利要求1所述的化合物，其中A是苯基。
3.如权利要求2所述的化合物，其中A是被选自以下的取代基取代的苯基：卤素、(C1-C4)烷基、(C1-C3)烷氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、甲烷磺酰基。
4.如权利要求3所述的化合物，其中A是被三氟甲基取代的苯基。
5.如权利要求1所述的化合物，其中A选自任选地被三氟甲基、(C1-C3)烷基、三氟甲氧基取代的噁唑、吡啶基、咪唑、吡唑和吡嗪基。
6.如权利要求1所述的化合物，其中A是任选地被甲氧基取代的吡咯烷。
7.如权利要求1所述的化合物，其中A是任选地被(C1-C4)烷基取代的环戊基。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的化合物，其中G是1-H-吡唑。
9.如权利要求8所述的化合物，其中G是被环丙基基团取代的1-H吡唑。
10.根据权利要求1所述的化合物，选自由以下组成的组：
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-氟苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-甲基苯甲酰胺
2-氯-N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-异丙基苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-甲氧基苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-(三氟甲氧基)苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-3-(三氟甲基)苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2,4-二氟苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-3-氟-2-(三氟甲基)苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-氟-6-(三氟甲基)苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-4-氟-2-(三氟甲基)苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-甲氧基-4-甲基苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-3-(甲基磺酰基)苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)-2-甲基苯基)-2-氟苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)-6-甲基嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-2-乙基苯基)-2-氟苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)-6-甲基嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-3-乙基苯基)-2-氟苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-甲基噁唑-4-甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-甲基-5-(三氟甲基)噁唑-4-甲酰胺
N-(6-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)吡啶-3-基)-2-甲基-5-(三氟甲基)噁唑-4-甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-3-甲基异噁唑-4-甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)吡啶酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-3-甲基吡啶酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-3-(三氟甲基)吡啶酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-(三氟甲基)烟酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-甲氧基烟酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-4-(三氟甲基)烟酰胺
(R)-N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)-2-甲基-哌嗪-1-基)甲基)苯基)-2-(三氟甲基)烟酰胺
(S)-N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)-2-甲基-哌嗪-1-基)甲基)苯基)-2-(三氟甲基)烟酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-3-(三氟甲基)异烟酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)吡嗪-2-甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-3-(三氟甲基)吡嗪-2-甲酰胺
4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-N-(4-(三氟甲氧基)苯基)苯甲酰胺
4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-N-(3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-N-(4-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-氟苯磺酰胺
N-(5-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)吡嗪-2-基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺
N-(6-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)哒嗪-3-基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺
N-(6-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)吡啶-3-基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1,3,4-噁二唑-2-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((3-环丙基-1H-吡唑-5-基)氨基)-6-甲基嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((3-甲基-1H-吡唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)-苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-甲基吡咯烷-1-甲酰胺
1-环戊基-3-(4-((4-(4-((3-环丙基-1H-吡唑-5-基)氨基)嘧啶-2-基)-哌嗪-1-基)甲基)苯基)脲。
11.根据权利要求10所述的化合物，选自由以下组成的组：
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺和
N-(4-((4-(4-((5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-甲基)苯基)-3-(三氟甲基)吡啶酰胺。
12.一种药物组合物，包含权利要求1-11中任一项的化合物或其盐和药学上可接受的载体。
13.根据权利要求1-11中任一项的式(I)的化合物或其盐，用作药物。
14.根据权利要求1-11中任一项的式(I)的化合物或其盐，用于在抑制FYN激酶中使用。
15.根据权利要求1-11中任一项的式(I)的化合物或其盐，用于在治疗FYN激酶介导的疾病或紊乱中使用。
16.如用于权利要求15的用途的所述化合物，其中所述FYN激酶介导的疾病或紊乱是关节炎、急性和慢性疼痛，所述关节炎包括骨关节炎、类风湿性关节炎和银屑病关节炎，所述急性和慢性疼痛例如骨关节炎和类风湿性关节炎疼痛、术后疼痛、内脏疼痛、与癌症相关的疼痛、三叉神经痛、糖尿病性神经病变急性和慢性疼痛、术后疼痛、肌肉疼痛。
CN201580077482.3A 2015-03-18 2015-12-23 Fyn激酶抑制剂 Active CN107406428B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP15159604.6A EP3070084A1 (en) 2015-03-18 2015-03-18 New fyn kinase inhibitors
EP15159604.6 2015-03-18
PCT/EP2015/081124 WO2016146220A1 (en) 2015-03-18 2015-12-23 New fyn kinase inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107406428A true CN107406428A (zh) 2017-11-28
CN107406428B CN107406428B (zh) 2021-06-04

Family

ID=52779492

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201580077482.3A Active CN107406428B (zh) 2015-03-18 2015-12-23 Fyn激酶抑制剂

Country Status (7)

Country Link
US (1) US10125121B2 (zh)
EP (2) EP3070084A1 (zh)
JP (1) JP6467059B2 (zh)
CN (1) CN107406428B (zh)
CA (1) CA2979758C (zh)
ES (1) ES2721280T3 (zh)
WO (1) WO2016146220A1 (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111171064A (zh) * 2020-01-09 2020-05-19 上海健康医学院 氮杂氟硼二吡咯类化合物及其制备方法和作为Fyn激酶抑制剂的应用
CN115279747A (zh) * 2019-12-09 2022-11-01 罗达制药生物技术有限责任公司 新型fyn和vegfr2激酶抑制剂

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017212018A1 (en) * 2016-06-10 2017-12-14 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment of autoimmune inflammatory diseases
JP7301958B2 (ja) 2018-05-25 2023-07-03 オンコキューブ セラピューティクス エルエルシー 新規な抗がん薬候補としての非常に強力なｔａｃｃ３阻害剤
AU2019279761A1 (en) 2018-05-29 2020-12-10 Cersci Therapeutics, Inc. Compounds for pain treatment, compositions comprising same, and methods of using same
CA3136102A1 (en) 2019-05-10 2020-11-19 Cersci Therapeutics, Inc. Manufacturing methods and polymorphs of a thiazoline anti-hyperalgesic agent
AU2022256380A1 (en) * 2021-04-12 2023-11-30 A2A Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for treating cancer
WO2023183520A1 (en) 2022-03-24 2023-09-28 A2A Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for treating cancer

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008157131A1 (en) * 2007-06-15 2008-12-24 Irm Llc Protein kinase inhibitors and methods for using thereof

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4105948B2 (ja) * 2000-09-15 2008-06-25 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド プロテインキナーゼインヒビターとして有用なピラゾール化合物
AU2003225800A1 (en) * 2002-03-15 2003-09-29 Hayley Binch Azolylaminoazine as inhibitors of protein kinases
WO2007023382A2 (en) * 2005-08-25 2007-03-01 Pfizer Inc. Pyrimidine amino pyrazole compounds, potent kinase inhibitors

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008157131A1 (en) * 2007-06-15 2008-12-24 Irm Llc Protein kinase inhibitors and methods for using thereof

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ERIN F. DIMAURO ET AL.: "Structure-Guided Design of Aminopyrimidine Amides as Potent, Selective Inhibitors of Lymphocyte Specific Kinase: Synthesis, Structure–Activity Relationships, and Inhibition of in Vivo T Cell Activation", 《JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY》 *
JEFFREY H. HANKE ET AL.: "Discovery of a Novel, Potent, and Src Family-selective Tyrosine Kinase Inhibitor", 《THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115279747A (zh) * 2019-12-09 2022-11-01 罗达制药生物技术有限责任公司 新型fyn和vegfr2激酶抑制剂
CN111171064A (zh) * 2020-01-09 2020-05-19 上海健康医学院 氮杂氟硼二吡咯类化合物及其制备方法和作为Fyn激酶抑制剂的应用
CN111171064B (zh) * 2020-01-09 2022-09-16 上海健康医学院 氮杂氟硼二吡咯类化合物及其制备方法和作为Fyn激酶抑制剂的应用

Also Published As

Publication number Publication date
CA2979758A1 (en) 2016-09-22
CN107406428B (zh) 2021-06-04
WO2016146220A1 (en) 2016-09-22
ES2721280T3 (es) 2019-07-30
EP3271348A1 (en) 2018-01-24
US20180111919A1 (en) 2018-04-26
EP3070084A1 (en) 2016-09-21
EP3271348B1 (en) 2019-01-30
CA2979758C (en) 2018-12-04
JP2018507857A (ja) 2018-03-22
US10125121B2 (en) 2018-11-13
JP6467059B2 (ja) 2019-02-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN107406428A (zh) 新的fyn激酶抑制剂
RU2743074C2 (ru) Соединения, активные по отношению к бромодоменам
JP6715357B2 (ja) イミダゾピリジンアミンフェニル誘導体およびその使用
Reynolds et al. A new 2-carbamoyl pteridine that inhibits mycobacterial FtsZ
KR101797046B1 (ko) 중수소화된 페닐 아미노 피리미딘 화합물 및 이 화합물을 함유하는 약물 조성물
JP5209486B2 (ja) ピラゾロピリミジノン誘導体、及びその調製方法と用途
CA2218033A1 (en) Acetamide derivative, process for preparing the same, and a pharmaceutical composition containing the same
CN1997640A (zh) 作为代谢调节剂的经取代芳基和杂芳基衍生物及其相关病症的预防和治疗
DK3194403T3 (en) PYRROLOPYRIMIDINE DERIVATIVES AS NR2B NMDA RECEPTOR ANTAGONISTS
Sahu et al. 5, 6-Dihydropyrimidine-1 (2H)-carbothioamides: Synthesis, in vitro GABA-AT screening, anticonvulsant activity and molecular modelling study
CA2902132C (en) Quinazolines as kinase inhibitors
CA2962917A1 (en) Novel pyridopyrimidinone compounds for modulating the catalytic activity of histone lysine demethylases (kdms)
JP2021513530A (ja) テトラヒドロイソキノリン化合物、その調製方法、そのような化合物を含む医薬組成物およびその使用
Gan et al. Discovery of novel 4-arylamino-quinazoline derivatives as EGFRL858R/T790M inhibitors with the potential to inhibit the non-small cell lung cancers
Sun et al. In situ click chemistry-based discovery of 1, 2, 3-triazole-derived diarylpyrimidines as novel HIV-1 NNRTIs by exploiting the tolerant region I in binding pocket
CN103189367B (zh) 色烯衍生物
CA3167381A1 (en) Crystal of pde3/pde4 dual inhibitor and use thereof
CN107793371A (zh) 一类溴结构域识别蛋白抑制剂及其制备方法和用途
CN114437113B (zh) 一种噻唑并吡啶环联三氮唑类化合物及其制备方法和应用
US20060173023A1 (en) 2-(Bicyclo)alkylamino-derivatives as mediators of chronic pain and inflammation
Wang et al. Design, synthesis and anti-tumor efficacy of novel phenyl thiazole/triazole derivatives as selective TrkA inhibitors
SK47598A3 (en) Novel piperazinylalkylthiopyrimidine derivatives, pharmaceutical compositions containing the same and a process for the preparation of the novel compounds
CN107743489A (zh) 用于治疗免疫疾病、炎性疾病或者癌症的7‑(吗啉‑4‑基)吡唑并[1,5‑a]嘧啶衍生物
CN114573567B (zh) 一种吲唑环联三氮唑类化合物及其制备方法和应用
AU769186B2 (en) Imidazolones and their use in treating benign prostatic hyperplasia and other disorders

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant