CN107404883A

CN107404883A - 具有植物生长促进或根伸长促进效果且附加值提高效果的酵母抽提物

Info

Publication number: CN107404883A
Application number: CN201680016292.5A
Authority: CN
Inventors: 中川智宽; 安松良惠; 梶直人; 阿孙健; 阿孙健一
Original assignee: Kohjin Holdings Co Ltd
Current assignee: Kohjin Holdings Co Ltd; Kohjin Life Sciences Co Ltd
Priority date: 2015-03-19
Filing date: 2016-03-16
Publication date: 2017-11-28
Also published as: JPWO2016148193A1; JP7148241B2; WO2016148193A1; US20180072634A1; US10766829B2

Abstract

本发明所要解决的问题是提供安全性高，并且有助于农作物提早收获或产量增加、附加值提高的植物用组合物。具体来说，提供通过叶面喷洒或添加到土壤或水中，来发挥出植物的生长促进效果、根伸长效果、口味改善效果、氨基酸含量提高效果的酵母抽提物。作为酵母抽提物，较佳的是由具有食用经验并确认了安全性的酵母来获得。为了解决上述问题，对植物喷洒或施肥肽含量为5重量％以上并且RNA含量为5重量％以上的酵母抽提物。酵母抽提物较佳来自具有食用经验并确认了安全性的产朊假丝酵母。

Description

具有植物生长促进或根伸长促进效果且附加值提高效果的酵母抽提物

技术领域

本发明涉及具有植物的生长促进效果、根伸长效果、口味改善效果、营养成分等含量提高效果的酵母抽提物。

背景技术

为了增加蔬菜、水果等农作物的产量或提高品质，提出了喷洒在蔬菜或果树的叶面或土壤中的各种生长促进剂或植物生长调节剂、生理活性促进剂、口味改良剂等。

另外，近年来，将番茄红素或钾等功能性成分标准化的蔬菜也受到关注。

例如已知：含有甲酸钙和硼化合物的葡萄用叶面喷洒剂(专利文献1)；或者以核苷酸类等核酸系成分为有效成分之一的、喷洒在土壤或叶面的生长促进剂或生理活性促进剂(专利文献2、专利文献3)。

在专利文献4中记载了：关于来自叶面的氮成分的补给，不仅使用尿素态氮而且也使用氨基酸态氮，还使用以酵母对蛋清或脱脂奶粉的蛋白质进行发酵而得的氮成分。另外已知来自啤酒酵母的细胞壁分解物会改善植物可食用部分的口味(专利文献5)。

需要一种植物用组合物，在具有广泛的上述农作物成长促进或品质提高的效果的同时，高效，更安全，并且操作容易。

专利文献1：日本特开平4-134007号公报

专利文献2：日本特开2004-196679号公报

专利文献3：日本特开平4-77381号公报

专利文献4：日本特开2006-265199号公报

专利文献5：日本特开2007-131562号公报

发明内容

本发明所要解决的问题是提供安全性高，并且有助于农作物提早收获或产量增加、附加值提高的植物用组合物。具体来说，提供通过叶面喷洒或添加到土壤或水中，来发挥出植物的生长促进效果、根伸长效果、口味改善效果、氨基酸含量提高效果的酵母抽提物。另外，从安全性的观点来看，作为酵母抽提物，较佳的是由具有食用经验并确认了安全性的酵母来获得。

本发明人等发现：由具有食用经验并确认了安全性的圆酵母(Candida utilis)获得的、含有RNA及肽的酵母抽提物，具有比单独RNA高的植物生长促进效果、根伸长效果。而且发现：该酵母抽提物具有氨基酸含量提高、口味改善等各种附加值提高效果。本发明的酵母抽提物可为了以下目的而使用：以蔬菜为代表的所有植物的生长促进或根伸长促进，以及口味改善、氨基酸含量提高等附加值提高。

即，本发明涉及如下方面。

(1)一种植物用组合物，含有肽含量为5重量％以上并且RNA含量为5重量％以上的酵母抽提物。

(2)根据(1)所述的植物用组合物，所述酵母抽提物中肽含量为15重量％以上，RNA含量为25重量％以上，并且游离氨基酸含量为4重量％以下。

(3)根据(1)或(2)所述的植物用组合物，所述酵母抽提物从产朊假丝酵母菌体抽提。

(4)一种植物的栽培方法，在植物的叶面喷洒或者在植物栽培用土壤或水培溶液中添加根据(1)～(3)中任一项所述的植物用组合物。

本发明的酵母抽提物通过植物的叶面喷洒或添加到土壤等中，在西红柿等果菜，小油菜、叶用萝卜等叶菜，其他根菜类，水果类中，不仅发挥出优异的生长促进效果、根伸长促进效果，而且表现出氨基酸等营养成分含量提高、以及口味改善等附加值提高效果。

另外，通过使用具有食用经验、确认了安全性的圆酵母作为酵母抽提物的原料，在操作上安全，且所得的农作物作为食品也安全。

附图说明

图1示出对西红柿的生长促进效果。

图2示出小油菜的生长促进效果。

图3示出小油菜的产量增加效果。

图4示出小油菜的生长促进效果的与RNA的比较试验。

图5示出小油菜的产量增加效果的与RNA的比较试验。

图6示出小油菜的根部比较。

图7示出对小油菜的游离氨基酸含量的效果。

图8示出对小油菜的叶绿素、β-胡萝卜素含量的效果。

图9示出对小油菜的新叶黄素、叶黄素含量的效果。

图10示出叶用萝卜的生长促进效果的与RNA的比较试验。

图11示出叶用萝卜的产量增加效果的与RNA的比较试验。

图12示出叶用萝卜的根部比较。

图13示出对叶用萝卜的游离氨基酸含量的效果。

具体实施方式

以下，详细地说明本发明。

本发明所用的酵母抽提物的制造中所使用的酵母并无特别限制，例如可列举：面包酵母、啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、圆酵母(Candida utilis)等，其中较佳的是使用RNA含量普遍高的圆酵母。

本发明所用的酵母抽提物从RNA含量较佳为6.5重量％以上、更佳为10重量％以上的酵母菌体抽提。提高酵母菌体中的RNA含量的方法是已知的，例如记载于日本特公昭54-46824号公报、日本特开平11-196859号公报、日本特开2009-207464号公报等。在日本特公昭54-46824号公报中具体记载了如下内容：对酵母使用紫外线、X射线、突变剂等后，选择在合成培养基中在常温下增殖不发生变化而在低温下增殖速度明显慢于母株的株；将酵母在添加了仅选择性地作用于酵母的增殖细胞的抗生素的培养基中进行低温培养后，将低温感受性变异株浓缩；从这些菌株中选择更低温度感受性的菌株，接着在其中分选出RNA含量高的变异株、且在常温下增殖速度几乎不变且产率也好的菌株，由此获得目标变异株。

将上述酵母菌体进行培养、集中、清洗来取得菌体。接着，对于该菌体，以不引起自我分解的方式，用热水使酵母菌体内的酶失活。对该菌体作用细胞壁溶解酶后，将固体成分分离，将所得的抽提物进行浓缩、杀菌、干燥，由此可制造本发明的酵母抽提物。在上述步骤中，当使核酸分解酶或蛋白分解酶作用时，RNA含量或肽含量难以变为规定的含量，因此不理想。

在酵母抽提物中的RNA含量或肽含量不满足规定的含量时，只要用已知的方法进行浓缩即可。

本发明中所谓的肽，是指2个以上氨基酸进行肽键合而成的肽，肽含量通过由全部氨基酸量减去游离氨基酸含量来计算。

本发明的酵母抽提物含有的肽为5重量％以上、较佳为10重量％以上、更佳为15重量％以上，且含有的RNA为5重量％以上、较佳为10重量％以上、更佳为25重量％以上。肽含量高较为理想，因此，将游离氨基酸含量抑制得低，较佳的是设为4重量％以下。

酵母抽提物为食品，特别是对环境或人体几乎无不良影响，因此适合植物的有机栽培。另外，在不使用一切合成化学物质的农业中也可应用。

本发明的酵母抽提物可按原样用于植物的栽培、培育，或者与其他成分一起形成植物用组合物用于植物的栽培、培育。使用本发明的植物栽培用组合物的植物的种类或目的并无特别限定，例如可为了蔬菜(西红柿、小油菜、叶用萝卜、菠菜、洋葱等)或果树(葡萄、苹果、梨、甜瓜、草莓等)的生长促进、根伸长促进、口味改善、氨基酸含量提高等目的而使用。通过促进根的伸长，营养成分的吸收率也变好，从而促进蔬菜或果树的生长，结果可实现产量增加或提早收获。另外，收获物的口味或营养价值也提高，附加值也提高。

本发明的植物用组合物的剂型并无限定，例如可制成片剂、颗粒、粉末或液状。在物流、保管时，可制成片剂、颗粒、粉末或浓缩液，在使用时可加水溶解，制成适当浓度后使用。在用作叶面喷洒剂或土壤喷洒剂时，本发明的植物用组合物在使用时的浓度，以酵母抽提物的干燥重量计，优选为1.0ppm～100000ppm、更优选为10ppm～1000ppm。通过叶面喷洒液等中的酵母抽提物的浓度为该范围内，使得农作物的产量或营养价值提高。

进行叶面喷洒时的最适合的浓度因植物的种类或目的而异。例如，在为了促进小油菜成长时，或者为了提高氨基酸含量、新叶黄素含量、叶黄素含量时，本发明的酵母抽提物浓度较佳为200mg/L以上。另一方面，在为了提高小油菜叶中的叶绿素含量、β-胡萝卜素含量时，本发明的酵母抽提物浓度为100mg/L即可。在为了促进叶用萝卜成长时，本发明的酵母抽提物浓度较佳为200mg/L以下。另一方面，在为了提高叶用萝卜叶中的游离氨基酸、特别是苏氨酸含量、脯氨酸含量时，本发明的酵母抽提物浓度较佳为200mg/L以上。在本发明的酵母抽提物的实际使用中，根据目的，又要考虑多种目的的平衡，来决定认为是最适合的浓度。

喷洒本发明的植物用组合物的频次并无特别限定，优选每1天～100天喷洒1次，更优选每7天～10天喷洒1次。

而且，本植物用组合物可单独使用，又可和肥料、园艺用培养土组合而使用。肥料有：含有氮、磷酸、钾的化学合成肥料，或植物油渣、鱼粉、海藻粉末等有机肥料等。植物用组合物的施用方法可为通常的方法。例如可列举：在植物叶面喷洒或铺展、在土壤或水培溶液中添加等。

另外，在本发明中，各成分的测定法如以下所述。

(RNA的测定法)

利用高效液相色谱法(HPLC)，测定试样中的RNA含量。

HPLC的条件如下。

·分离管柱：Asahipak HPLCcolumn GS-320(30℃、7.5mm×300mm、昭和电工制)

·流动相：0.1M磷酸钠缓冲液(pH值为7.0)

·流速：1.0mL/min

·检测：紫外线检测器(260nm)

(肽的测定法)

试样中的肽含量使用氨基酸分析计(日立高速氨基酸分析计L-8900)测定全部氨基酸和游离氨基酸，将全部氨基酸减去游离氨基酸得到的值设为肽含量。

(游离氨基酸的测定法)

试样中的游离氨基酸含量使用氨基酸分析计(日立高速氨基酸分析计L-8900)进行测定。

(食物纤维的测定法)

试样中的食物纤维的含量使用利用蛋白酶或淀粉葡萄糖苷酶的酶-重量法。

(叶绿素、β-胡萝卜素的测定法)

用丙酮-己烷(体积比4∶6)溶液20mL将试样的叶1g均质化后，测定上清液的吸光度(663nm、645nm、505nm、453nm)，使用下述计算式，由此进行各成分的浓度计算。

·叶绿素a的浓度(mg/100mL)＝0.999A₆₆₅-0.0989A₆₄₅

·叶绿素b的浓度(mg/100mL)＝-0.328A₆₆₅+1.77A₆₄₅

·β-胡萝卜素的浓度(mg/100mL)＝0.216A₆₆₅-1.22A₆₄₅-0.304A₅₀₅+0.452A₄₅₃

(其中，A₆₆₃、A₆₄₅、A₅₀₅、A₄₅₃分别为663nm、645nm、505nm、453nm的吸光度)

(新叶黄素、叶黄素的测定法)

用丙酮将试样的冷冻干燥物抽提一晚后，除去固体成分，用蒸发器将所得的抽提液干燥凝固。将其溶解在甲醇∶乙腈＝7∶3溶剂中，用过滤器过滤后，利用HPLC测定新叶黄素、叶黄素。

HPLC条件如下。

·机种名：HITACHI LaChrom

·管柱：TSK gel ODS-80TM

·流动相：乙腈(Acetnitril)∶水(9∶1)(A)、乙酸乙酯(B)

·流速：1.5ml/min

·检测吸光度：450nm

·梯度条件：0分钟～20分钟A∶B＝100∶0→50∶50、20分钟～30分钟A∶B＝50∶50、30分钟～35分钟A∶B＝50∶50→100∶0

实施例

以下，列举实施例对本发明进行详细地说明，但本发明并不限于这些实施例。

<制造例1>酵母抽提物的取得

用10N-硫酸将产朊假丝酵母Cs7529株(FERM BP-1656株)的10％菌体悬浮液1000ml的pH值调整为3.5，在60℃加热处理30分钟后，通过离心分离回收菌体，用水清洗菌体除去硫酸和多余的抽提物。用水将本菌体调整为菌体浓度10％进行悬浮后，在90℃加热30分钟，使菌体内酶完全失活，在40℃将pH值调整为7.0，添加细胞壁溶解酶(“ツニカ一ぜ”大和化成制)0.5g反应4小时，进行抽提。通过离心分离除去菌体残渣，将所得的上清液进行浓缩、喷雾干燥，获得酵母抽提物粉末30g。所得的酵母抽提物中，肽含量为18.7重量％、RNA含量为30.4重量％、游离氨基酸含量为0.5重量％、食物纤维含量为22.7重量％。

<实施例1>对西红柿的生长促进效果

使用市售的“花与蔬菜的土壤”作为土壤在罐中播下西红柿(桃太郎)的种子，自播种起15天后，使用“花与蔬菜的土壤”作为土壤在花盆(80cm×30cm)中定植3株。将制造例1中所得的酵母抽提物溶解于水中达到300mg/L，作为叶面喷洒液，从定植1周后起每10天进行叶面喷洒。喷洒直到叶的背面完全湿润为止。2个月后确认植物的成长状态。并未特别进行温度控制。

作为对照，代替酵母抽提物水溶液，也制作喷洒水的对照例。

图1表示实施例1的结果。1为对照，2为将本发明的酵母抽提物溶液进行叶面喷洒的试验区。如图1所示，将酵母抽提物300mg/L水溶液进行叶面喷洒的试验区，与对照比较，表现出更明确的生长促进作用。

<实施例2>对小油菜的生长促进效果

小油菜(Brassica rapa var.perviridis)是油菜科植物，是主要食用叶和茎的部分、营养价值高的蔬菜。

使用市售的“花与蔬菜的土壤”作为土壤，在花钵(16cm×16cm×17cm)中播下小油菜的种子。真叶长出后每10天进行叶面喷洒在制造例1中所得的酵母抽提物的300mg/L水溶液，在播种后90天后收获小油菜。叶面喷洒是喷雾直到叶的背面完全湿润为止。并未特别进行温度控制。

关于对照，在实施例3以后也同样进行。

图2、图3表示实施例2的结果。1为对照，2为将本发明的酵母抽提物溶液进行叶面喷洒的试验区。如图2所示，将酵母抽提物300mg/L水溶液进行叶面喷洒的试验区，与对照比较，表现出更明确的生长促进效果。另外，如图3所示，实施例2的每一株的重量相对于对照显著增加。

这样，本发明的酵母抽提物通过对植物的喷洒，表现出明确的植物生长促进效果，可期待农作物的产量增加或提早收获。

另外，一般而言，RNA有生长促进效果，因而也推测如实施例1、实施例2所示的生长促进效果仅由酵母抽提物中的RNA引起。

因此，为了验证本发明的酵母抽提物所表现出的生长促进效果是否是仅因酵母抽提物中的RNA引起的效果，进行本发明的酵母抽提物与相当于其的量的单独RNA的比较试验。

<实施例3>酵母抽提物与RNA对小油菜的效果的比较

使用市售的“花与蔬菜的土壤”作为土壤，在花盆(80cm×30cm)中播下小油菜的种子。发芽后，定植于地中，真叶长出后以10天1次的间隔，将叶面喷洒液进行喷雾直到叶的背面湿润为止。未进行温度控制而进行栽培，在定植后90天收获。

上述叶面喷洒液如下所述。

1：制造例1中所得的酵母抽提物的100mg/L水溶液。

2：RNA(OMTEK公司制)的30mg/L水溶液。相当于上述1的酵母抽提物100mg/L水溶液的RNA浓度。

3：制造例1中所得的酵母抽提物的300mg/L水溶液。

4：RNA(OMTEK公司制)的90mg/L水溶液。相当于上述3的酵母抽提物300mg/L水溶液的RNA浓度。

5：水(对照)

评价是根据所收获的可食用部分或根的外观大小、可食用部分的平均重量、氨基酸含量、叶绿素a+叶绿素b含量、β-胡萝卜素含量、新叶黄素含量、叶黄素含量、及口味来进行。另外，口味评价是6名熟练的专家在不知道试验区的情况下吃可食用部分，对味道的差异获得评判。

图4～图8表示实施例3的结果。

图4是所收获的小油菜的可食用部分的照片。1～4分别表示上述叶面喷洒剂的种类。

图5是所收获的小油菜的可食用部分的重量。1～4分别表示上述叶面喷洒剂的种类。

在图4、图5中，将3与4比较后，大小、产量均有显著差异，本发明的酵母抽提物与等量的单独RNA相比，表现出生长促进效果明显高的结果。

该结果表示，作为酵母抽提物中的RNA以外的成分的肽等也有助于生长促进。

另外，将1与3、即酵母抽提物100mg/L水溶液与300mg/L水溶液进行比较，3相对于对照而显著大，产量也提高，因此暗示，如果目的是为了提高产量，则叶面喷洒液中的本发明的酵母抽提物的浓度是300mg/L比100mg/L理想。

图6是所收获的小油菜的根部的照片，1～4分别表示上述叶面喷洒剂的种类。除了可食用部分的生长促进效果以外，在根部分(侧根及根毛)也见到根伸长促进效果，喷洒了本发明的酵母抽提物水溶液的1、3与单独RNA的2、4相比，效果提高。

图7是所收获的小油菜叶的游离氨基酸含量的测定结果。

喷洒了RNA的小油菜叶，游离氨基酸含量相比对照反而降低。相对于此，喷洒了本发明的酵母抽提物300mg/L水溶液的小油菜叶，总氨基酸含量高，其中特征性的苏氨酸(Thr)与脯氨酸(Pro)与对照相比，分别表现出2倍、3倍高的值。因此认为，酵母抽提物中的RNA以外的成分有助于氨基酸含量提高。

图8是所收获的小油菜叶的叶绿素a+b含量、β-胡萝卜素含量的测定结果。

将酵母抽提物水溶液进行了叶面喷洒的1、3，与对照和喷洒了单独RNA的2、4相比，叶绿素a+叶绿素b含量、β-胡萝卜素含量明显增加。在1的酵母抽提物100mg/L水溶液中与对照相比，叶绿素a+叶绿素b含量、β-胡萝卜素含量也显著增加，因此暗示，如果目的是为了提高植物体中的这些色素或营养成分，则叶面喷洒液中的酵母抽提物的浓度即便是100mg/L左右也足够。

图9是所收获的小油菜叶的新叶黄素含量、叶黄素含量的测定结果。

将酵母抽提物水溶液进行了叶面喷洒的1、3，与对照和喷洒了单独RNA的2、4相比，新叶黄素含量与叶黄素含量增加。另外，将1与3进行比较，3中新叶黄素含量与叶黄素含量明显高，因此暗示，如果目的是为了提高植物体中的新叶黄素或叶黄素的含量，则叶面喷洒液中的本发明的酵母抽提物的浓度是300mg/L比100mg/L理想。

在口味评价中，将3的酵母抽提物300mg/L叶面喷洒与4的RNA90mg/L叶面喷洒进行比较，结果是，3的酵母抽提物试验区有甜味、口中余味佳、美味的评判多，本发明的酵母抽提物获得了口味改善效果也高的结果。

小油菜的口味评价的主要评判(与对照的比较)如下。

3：酵母抽提物水溶液：有甜味、口中余味佳、美味

4：RNA水溶液：风味佳

根据以上结果确认，本发明的酵母抽提物当然有生长促进效果，除此以外，也见到根伸长促进、或氨基酸含量的提高、色素或营养成分的含量增加、及口味改善等效果，也有助于附加值提高。另外，该效果高于单独RNA的结果。

因此，接下来，在其他植物中也进行了获得相同效果的确认试验。

<实施例4>对叶用萝卜的酵母抽提物与RNA的比较试验

叶用萝卜(Raphanus sativus var.longipinnatus)是油菜科萝卜属的一年生草，是主要食用叶和茎的部分的蔬菜。

使用市售的“花与蔬菜的土壤”作为土壤，在花盆(80cm×30cm)中播下叶用萝卜的种子。发芽后，定植于地中，真叶长出后以10天1次的间隔，将叶面喷洒液进行喷雾直到叶的背面湿润为止。未进行温度控制而进行栽培，在定植后90天收获。

上述叶面喷洒液如下所述。

1：制造例1中所得的酵母抽提物的100mg/L水溶液。

3：制造例1中所得的酵母抽提物的300mg/L水溶液。

5：水(对照)

评价根据所收获的叶用萝卜的叶部或根部的外观大小、叶的平均重量、叶的游离氨基酸含量、及口味来进行。另外，口味评价是6名熟练的专家在不知道试验区的情况下吃可食用部分，对味道的差异获得评判。

图10～图13表示实施例4的结果。

图10是所收获的叶用萝卜的整体的照片。1～4分别表示上述叶面喷洒剂的种类。

图11是所收获的叶用萝卜的可食用部分的重量。1～4分别表示上述叶面喷洒剂的种类。

如图10、图11所示，即便是叶用萝卜也和小油菜同样，本发明的酵母抽提物表现出生长促进效果，与RNA相比为高的结果。但是，将1与3、即酵母抽提物100mg/L水溶液与300mg/L水溶液进行比较后，1中相对于对照产量显著提高，相对于此，3中与对照的差反而变小，因此暗示，如果目的是为了提高叶用萝卜的产量，则叶面喷洒液中的本发明的酵母抽提物的浓度是100mg/L比300mg/L理想。

图12是所收获的叶用萝卜的根部的照片。1～4分别表示上述叶面喷洒剂的种类。

在叶用萝卜中，本发明的酵母抽提物表现出根伸长促进效果，但其效果在100mg/L水溶液中显著，比300mg/L水溶液高。

图13是测定了所收获的叶用萝卜叶的游离氨基酸含量的结果。1～4分别表示上述叶面喷洒剂的种类。

其结果是，2、4的RNA试验区与对照几乎未变化，但在1、3的本发明的酵母抽提物试验区，苏氨酸和脯氨酸含量比对照高，特别是在3的300mg/L水溶液中，分别是1.3倍、5.0倍高的结果。

在口味评价中，对于1的酵母抽提物100mg/L叶面喷洒、和2的RNA30mg/L叶面喷洒，分别与对照进行比较，结果是，1的酵母抽提物试验区有甜味、涩味少的评判多，获得了口味改善效果也高的结果。

叶用萝卜的口味评价的主要评判(与对照的比较)如下。

1：酵母抽提物水溶液：有甜味、涩味少

2：RNA水溶液：与对照未变化

根据以上结果知晓，通过将本发明中所得的酵母抽提物施用于栽培植物，可在所有植物中获得单独RNA以上的优异的生长促进效果，预料会提早收获或产量增加。另外，可实现根伸长促进效果或收获物的苏氨酸、脯氨酸含量的提高、进而口味改善等各种附加值提高。

Claims

1.一种植物用组合物，含有肽含量为5重量％以上并且RNA含量为5重量％以上的酵母抽提物。

2.根据权利要求1所述的植物用组合物，其特征在于，所述酵母抽提物中肽含量为15重量％以上，RNA含量为25重量％以上，并且游离氨基酸含量为4重量％以下。

3.根据权利要求1或2所述的植物用组合物，其特征在于，所述酵母抽提物从产朊假丝酵母菌体抽提。

4.一种植物的栽培方法，在植物的叶面喷洒或者在植物栽培用土壤或水培溶液中添加根据权利要求1～3中任一项所述的植物用组合物。