CN107402149A - 一种溶血试剂、及盛装该试剂的微流控芯片 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种溶血试剂，包括使红细胞裂解的溶血剂，使白细胞着色的染色剂，及溶剂；所述溶血剂包括蛇毒溶液，季铵盐阳离子表面活性剂，十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠阴离子表面活性剂，皂角苷、聚乙二醇辛基苯基醚、吐温类、司盘类非离子表面活性剂中的一种或多种混合物；本发明还涉及一种微流控芯片，包括吸取样本的吸样嘴，滴加样本的加样槽，及用于盛装溶血剂并进行样本反应及测量的空腔；本发明的一种溶血试剂，可以有效并充分的裂解红细胞，并可以充分染色白细胞，提高了血样本中的白细胞数据测量的准确性；同时使用了较为特殊结构的微流控芯片，大大降低了外来因素导致的测得数据的误差，大大提高了数据测量的准确性。
Description
技术领域
本发明涉及一种试剂及使用该试剂的芯片，特别涉及一种溶血试剂、及盛装该试剂的微流控芯片。
背景技术
白细胞总数(WBC)是临床血液分析中一项非常重要的参数，可用于诊断白血病、感染性疾病或用于监测治疗。目前国内外普遍采用全自动血液细胞分析仪对全血样本进行自动检测。全自动血细胞分析仪测定白细胞总数的基本原理为使用溶血剂对全血样本中红细胞进行裂解，通过电阻抗法或流式激光散射法对白细胞进行计数；现有的溶血剂往往对红细胞的裂解不充分，容易获得较大的误差结果，同时，盛装溶血剂的装置较为复杂，而且会产生残余的溶血剂无法清洗，这样一来不仅浪费试剂，而且容易对结果产生较大的误差。
发明内容
本发明的目的在于为了解决上述问题，提供了一种溶血试剂、及盛装该试剂的微流控芯片。
其中本发明的一种溶血试剂，包括使红细胞裂解的溶血剂，使白细胞着色的染料剂，及溶剂；所述溶血剂包括蛇毒溶液，季铵盐阳离子表面活性剂，十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠阴离子表面活性剂，皂角苷、聚乙二醇辛基苯基醚、吐温类、司盘类非离子表面活性剂中的一种或多种混合物，其中蛇毒溶液的浓度为0.1-25g/L，季铵盐阳离子表面活性剂的浓度为0.5-25g/L，十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠阴离子表面活性剂的浓度为0.5-25g/L，皂角苷、聚乙二醇辛基苯基醚、吐温类、司盘类非离子表面活性剂的浓度为1-50g/L；所述染色剂为苏木精、亚甲基蓝、亚甲基绿、甲苯胺蓝、龙胆紫中的一种或多种的混合物；其浓度为0.5-5g/L。
一种溶血试剂，所述溶剂为水、醇类、酮类中的一种或几种混合物。
一种盛装如上所述的溶血试剂的微流控芯片，包括吸取样本的吸样嘴，与吸样嘴相连接的滴加样本的加样槽，及用于盛装溶血剂并进行样本反应及测量的空腔，所述空腔分别与吸样嘴和加样槽相连接。
一种微流控芯片，所述空腔为具备透光性，并厚度一致，且两面平整的腔体。
一种微流控芯片，所述空腔为内表面平整，且内表面之间的距离为50-250μm。
一种微流控芯片，所述空腔的内表面之间的距离为100-200μm。
本发明提供的一种溶血试剂，可以有效并充分的裂解红细胞，并可以充分染色白细胞，提高了血样本中的白细胞数据测量的准确性；同时使用了较为特殊结构的微流控芯片，大大降低了外来因素导致的测得数据的误差，大大提高了数据测量的准确性，而且因微流控芯片中不存在流路，不得不需要频繁维护，每人一人份使用一片，避免浪费。本发明的试剂及该微流控芯片可应用于医学实验室以外的场所，如基层医疗单位、急诊床旁检测、救灾防疫现场、野战医院，大大方便了医务人员的使用便捷度。
为让本发明的上述特征和优点能更明显易懂，下文特举实施例，并配合所附图式作详细说明如下，其中相同的标号指示同样或相似的单元或步骤。
附图说明
为了易于说明，本发明由下述的具体实施方式及附图作详细描述。
图1为本发明一种盛装溶血试剂的微流控芯片的结构示意图；
图2为本发明图1中A-A的剖面示意图；
图3为本发明一种溶血试剂的反应结果示意图；
图4为本发明一种溶血试剂的另一反应结果示意图；
图5为本发明一种溶血试剂的试剂的又一反应结果示意图；
图6为本发明一种溶血试剂的试剂的又一反应结果示意图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。
本发明提供一种溶血试剂，包括使红细胞裂解的溶血剂，使白细胞着色的染料剂，及溶剂，将三者混合在一起即成为溶解红细胞的试剂；所述溶血剂包括蛇毒溶液，季铵盐阳离子表面活性剂，十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠等阴离子表面活性剂，皂角苷、聚乙二醇辛基苯基醚、吐温类、司盘类非离子表面活性剂；其中蛇毒溶液的浓度为0.1-25g/L，季铵盐阳离子表面活性剂的浓度为0.5-25g/L，十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠等阴离子表面活性剂的浓度为0.5-25g/L，皂角苷、聚乙二醇辛基苯基醚、吐温类、司盘类非离子表面活性剂的浓度为1-50g/L；所述溶血剂的成分可以是上述成分中的一种或多种；所述染色剂可以为苏木精、亚甲基蓝、亚甲基绿、甲苯胺蓝、龙胆紫、苏丹类似物、品红素类似物中的一种或多种的混合物，其浓度为0.5-5g/L；所述溶剂可以是水、醇类、酮类之一或者其混合物。
请参照图1和图2，本发明提供一种盛装该溶血试剂的微流控芯片，所述微流控芯片包括一个用于吸取样本的吸样嘴1，一个用于滴加样本的加样槽3，以及一个用于盛装溶血剂并进行样本反应及测量的空腔2；所述空腔2为厚度一致，两面平整，并具备透光性；空腔的容积是固定的，故吸取的血样本时，充满空腔内的血样本的体积也是确定的；其中溶血试剂干燥分布于空腔2内。
本发明提供的一种溶血试剂，定量灌注于微流控芯片空腔中，通过干燥的方法去除溶剂，使得试剂以固态形式附着于空腔内表面；并且试剂将呈薄层均匀附着于芯片空腔内表面，不易受机械冲击而脱落，无大颗粒结晶，表面平滑无死角，当样本进入时不会容纳空气而形成气泡。其中干燥方法可以是常温干燥、加热干燥、冷冻干燥、真空干燥等。所述试剂具有良好的溶解性能。在样本进入微流控芯片空腔时，附着于试剂片内表面的试剂能迅速溶于样本中，并在微流动力的作用下与样本混合，试剂与样本混匀后反应充分。
本发明提供一种盛装该溶血试剂的微流控芯片，所述空腔2各表面平行平整，内表面之间的距离是为50-250μm，其中优选100-200μm。血液样本进入后呈确定厚度的薄层，一定面积内样本的体积是确定的。可通光学扫描或显微成像的方式对空腔中确定体积的样本进行检测。在对薄层样本显微成像时，对焦点选择于薄层的中心平面可使薄层空间内所有细胞均能足够清晰的成像。对确定面积的测量区域内所有白细胞进行计数，即可得出单位体积样本白细胞总含量。
以下根据不同的试剂成分，对裂解红细胞的效果进行试验；
使用本试剂10μL注入配套微流控芯片中中干燥。用含试剂的微流控芯片吸取新鲜血液样本，充分反应后于显微系统下拍摄图像，结果如图3；从图3可以看出，确定面积的测量区域内所有白细胞进行的数量情况，分布的较为均匀，测得的白细胞数据较为准确。
当试剂成分为以下成分时；
使用本试剂10μL注入配套微流控芯片中中干燥。用含试剂的微流控芯片吸取新鲜血液样本，充分反应后于显微系统下拍摄图像，结果如图4；从图4可以看出，确定面积的测量区域内所有白细胞进行的数量情况，分布的较为均匀，测得的白细胞数据较为准确。
当试剂成分为以下成分时；
使用本试剂10μL注入配套微流控芯片中中干燥。用含试剂的微流控芯片吸取新鲜血液样本，充分反应后于显微系统下拍摄图像，结果如图5；从图5可以看出，确定面积的测量区域内所有白细胞进行的数量情况，分布的较为均匀，测得的白细胞数据较为准确。
当试剂成分为以下成分时；
使用本试剂10μL注入配套微流控芯片中中干燥。用含试剂的微流控芯片吸取新鲜血液样本，充分反应后于显微系统下拍摄图像，结果如图6；从图6可以看出，确定面积的测量区域内所有白细胞进行的数量情况，分布的较为均匀，测得的白细胞数据较为准确。
本发明提供的一种溶血试剂，可以有效并充分的裂解红细胞，并可以充分染色白细胞，提高了血样本中的白细胞数据测量的准确性；同时使用了较为特殊结构的微流控芯片，大大降低了外来因素导致的测得数据的误差，大大提高了数据测量的准确性，而且因微流控芯片中不存在流路，不得不需要频繁维护，每人一人份使用一片，避免浪费。本发明的试剂及该微流控芯片可应用于医学实验室以外的场所，如基层医疗单位、急诊床旁检测、救灾防疫现场、野战医院，大大方便了医务人员的使用便捷度。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。
Claims (6)
1.一种溶血试剂，包括使红细胞裂解的溶血剂，使白细胞着色的染色剂，及溶剂；其特征在于，所述溶血剂包括蛇毒溶液，季铵盐阳离子表面活性剂，十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠阴离子表面活性剂，皂角苷、聚乙二醇辛基苯基醚、吐温类、司盘类非离子表面活性剂中的一种或多种混合物，其中蛇毒溶液的浓度为0.1-25g/L，季铵盐阳离子表面活性剂的浓度为0.5-25g/L，十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠阴离子表面活性剂的浓度为0.5-25g/L，皂角苷、聚乙二醇辛基苯基醚、吐温类、司盘类非离子表面活性剂的浓度为1-50g/L；所述染色剂为苏木精、亚甲基蓝、亚甲基绿、甲苯胺蓝、龙胆紫中的一种或多种的混合物；其浓度为0.5-5g/L。
2.如权利要求1所述的一种溶血试剂，其特征在于，所述溶剂为水、醇类、酮类中的一种或几种混合物。
3.一种盛装如权利要求1-2中任意一项所述的溶血试剂的微流控芯片，其特征在于，包括吸取样本的吸样嘴，与吸样嘴相连接的滴加样本的加样槽，及用于盛装溶血剂并进行样本反应及测量的空腔，所述空腔分别与吸样嘴和加样槽相连接。
4.如权利要求3所述的一种微流控芯片，其特征在于，所述空腔为具备透光性，并厚度一致，且两面平整的腔体。
5.如权利要求4所述的一种微流控芯片，其特征在于，所述空腔为内表面平整，且内表面之间的距离为50-250μm。
6.如权利要求5所述的一种微流控芯片，其特征在于，所述空腔的内表面之间的距离为100-200μm。
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