CN107389416A - 一种he染色及调整方法 - Google Patents
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Abstract
本申请的目的是公开一种HE染色及调整方法，包括：步骤一：将切好的石蜡切片在60‑70℃的烤箱中烘烤至少10分钟；步骤二：将步骤一中得到的切片进行脱蜡；步骤三：将步骤二中得到的切片使用苏木素染液染色5‑8分钟后用水清洗1分钟，然后使用0.5‑1％盐酸酒精分化片刻，在切片颜色由蓝变红后，使用饱和碳酸锂反蓝片刻，所述切片颜色由蓝变红，之后使用1％伊红酒精浸染50‑100秒；步骤四：将步骤三中得到的切片经过脱水操作，然后使用二甲苯I进行透明，时间为50‑100秒；步骤五：将步骤四中得到的切片取出后用中性树胶封固；操作简单便利并且灵活、不仅具有常规染色方法操作简单等优点，还能根据不同的实际情况完善操作方法，对不同染色问题进行调整，染色效果好。
Description
技术领域
本发明属于切片染色方法领域，具体是指一种HE染色及调整方法。
背景技术
苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosin staining)，简称HE染色法， 石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内 的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细 胞外基质中的成分着红色。
现有技术中虽然存在HE染色方法，但效果并不佳，实际实施的效果也 不尽如人意，尤其是在操作出现问题，标本效果不达标时，缺少配套的调整 方法。
因此，如何研发一种HE染色及调整方法，能够解决上述问题，便成为 亟待解决的技术问题。
发明内容
本申请解决的主要问题是提供一种HE染色及调整方法，不仅具有常规 染色方法操作简单等优点，还能完善操作方法，对不同染色问题进行调整的 HE染色及调整方法，以解决一种HE染色及调整方法成本高、维护和运行费 用高、操作难度高、难以复制操作的技术问题。
为了解决上述技术问题，本发明公开了一种HE染色及调整方法，其技 术方案如下：
一种HE染色及调整方法，其特征在于，包括：
步骤一：将切好的石蜡切片在60-70℃的烤箱中烘烤至少10分钟；
步骤二：将步骤一中得到的切片进行脱蜡；
步骤三：将步骤二中得到的切片使用苏木素染液染色5-8分钟后用水清 洗1分钟，然后使用0.5-1％盐酸酒精分化片刻，在切片颜色由蓝变红后，使 用饱和碳酸锂反蓝片刻，所述切片颜色由蓝变红，之后使用1％伊红酒精浸 染50-100秒；
步骤四：将步骤三中得到的切片经过脱水操作，然后使用二甲苯I进行 透明，时间为50-100秒；
步骤五：将步骤四中得到的切片取出后用中性树胶封固。
优选的，所述步骤一中的脱蜡包括：
步骤1：使用二甲苯I AR浸泡5-7分钟；
步骤2：使用二甲苯IIAR浸泡5-7分钟；
步骤3：使用100％酒精I浸泡50-100秒；
步骤4：使用100％酒精II浸泡50-100秒；
步骤5：使用95％酒精浸泡50-100秒；
步骤6：使用80％酒精浸泡50-100秒；
步骤7：用水清洗。
优选的，所述步骤四还包括使用二甲苯II再次透明，时间为50-100秒。
优选的，所述步骤三中，使用1％伊红酒精浸染之前使用温水或者95％ 酒精浸泡10-80秒。
优选的，所述步骤四中的脱水操作包括：
步骤a：使用95％酒精浸泡50-100秒；
步骤b：使用95％酒精浸泡50-100秒；
步骤c：使用100％酒精I浸泡50-100秒；
步骤d：使用100％酒精II浸泡50-100秒。
优选的，所述步骤五中使用的中性树胶，预先用二甲苯溶解。
优选的，还包括观察染色结果及染色问题，根据染色问题进行调整。
优选的，所述染色问题及对应的调整方法包括：
如染色切片发白，判定为二甲苯脱蜡时间不够，延长脱蜡时间或者更换 二甲苯；
如染色切片发灰，判定为组织固定脱水不佳或者染液配置PH不符，应改 进组织固定脱水程序或者改进染液配方；
如染色切片着色不均匀，判定为染液太少或者分布不均，应增加染液量或 在染液中加入甘油等增强液体亲和力；
如染色切片染色偏蓝，判定为苏木素染色时间过久或者分化不足，应减少 苏木素染色时间或者延长分化时间；
如染色切片染色偏红，判定为伊红染色时间过久或者染色不足，应改进苏 木素染色时间或者减少伊红染色时间；
如核着色欠佳，判定为组织脱水不佳，应加强组织固定脱水，将切片用生 物穿透剂进行处理以利于苏木素着色。
本申请提供的HE染色及调整方法操作简单便利并且灵活、不仅具有常规 染色方法操作简单等优点，还能根据不同的实际情况完善操作方法，对不同染 色问题进行调整，染色效果好。
具体实施方式
如在说明书及权利要求当中使用了某些词汇来指称特定组件。本领域技 术人员应可理解，硬件制造商可能会用不同名词来称呼同一个组件。本说明 书及权利要求并不以名称的差异来作为区分组件的方式，而是以组件在功能 上的差异来作为区分的准则。说明书后续描述为实施本申请的较佳实施方式， 然所述描述乃以说明本申请的一般原则为目的，并非用以限定本申请的范围。 本申请的保护范围当视所附权利要求所界定者为准。
实施例一：
一种HE染色及调整方法，其特征在于，包括：
步骤一：将切好的石蜡切片在60-70℃的烤箱中烘烤至少10分钟；
步骤二：将步骤一中得到的切片进行脱蜡；
步骤三：将步骤二中得到的切片使用苏木素染液染色5-8分钟后用水清 洗1分钟，然后使用0.5-1％盐酸酒精分化片刻，在切片颜色由蓝变红后，使 用饱和碳酸锂反蓝片刻，所述切片颜色由蓝变红，之后使用1％伊红酒精浸 染50-100秒；
步骤四：将步骤三中得到的切片经过脱水操作，然后使用二甲苯I进行 透明，时间为50-100秒；
步骤五：将步骤四中得到的切片取出后用中性树胶封固。
所述步骤一中的脱蜡包括：
步骤1：使用二甲苯I AR浸泡5-7分钟；
步骤2：使用二甲苯IIAR浸泡5-7分钟；
步骤3：使用100％酒精I浸泡50-100秒；
步骤4：使用100％酒精II浸泡50-100秒；
步骤5：使用95％酒精浸泡50-100秒；
步骤6：使用80％酒精浸泡50-100秒；
步骤7：用水清洗。
所述步骤四还包括使用二甲苯II再次透明，时间为50-100秒。
所述步骤三中，使用1％伊红酒精浸染之前使用温水或者95％酒精浸泡 10-80秒。
所述步骤四中的脱水操作包括：
步骤a：使用95％酒精浸泡50-100秒；
步骤b：使用95％酒精浸泡50-100秒；
步骤c：使用100％酒精I浸泡50-100秒；
步骤d：使用100％酒精II浸泡50-100秒。
所述步骤五中使用的中性树胶，预先用二甲苯溶解。
还包括观察染色结果及染色问题，根据染色问题进行调整。
所述染色问题及对应的调整方法包括：
如染色切片发白，判定为二甲苯脱蜡时间不够，延长脱蜡时间或者更换 二甲苯；
如染色切片发灰，判定为组织固定脱水不佳或者染液配置PH不符，应改 进组织固定脱水程序或者改进染液配方；
如染色切片着色不均匀，判定为染液太少或者分布不均，应增加染液量或 在染液中加入甘油等增强液体亲和力；
如染色切片染色偏蓝，判定为苏木素染色时间过久或者分化不足，应减少 苏木素染色时间或者延长分化时间；
如染色切片染色偏红，判定为伊红染色时间过久或者染色不足，应改进苏 木素染色时间或者减少伊红染色时间；
如核着色欠佳，判定为组织脱水不佳，应加强组织固定脱水，将切片用生 物穿透剂进行处理以利于苏木素着色。
本申请提供的HE染色及调整方法操作简单便利并且灵活、不仅具有常规 染色方法操作简单等优点，还能根据不同的实际情况完善操作方法，对不同染 色问题进行调整，染色效果好。
上述说明示出并描述了本申请的若干优选实施例，但如前所述，应当理 解本申请并非局限于本文所披露的形式，不应看作是对其他实施例的排除， 而可用于各种其他组合、修改和环境，并能够在本文所述申请构想范围内， 通过上述教导或相关领域的技术或知识进行改动。而本领域人员所进行的改 动和变化不脱离本申请的精神和范围，则都应在本申请所附权利要求的保护 范围内。
Claims (8)
1.一种243241670HE染色及调整方法，其特征在于，包括：
步骤一：将切好的石蜡切片在60-70℃的烤箱中烘烤至少10分钟；
步骤二：将步骤一中得到的切片进行脱蜡；
步骤三：将步骤二中得到的切片使用苏木素染液染色5-8分钟后用水清洗1分钟，然后使用0.5-1％盐酸酒精分化片刻，在切片颜色由蓝变红后，使用饱和碳酸锂反蓝片刻，所述切片颜色由蓝变红，之后使用1％伊红酒精浸染50-100秒；
步骤四：将步骤三中得到的切片经过脱水操作，然后使用二甲苯I进行透明，时间为50-100秒；
步骤五：将步骤四中得到的切片取出后用中性树胶封固。
2.根据权利要求1所述的HE染色及调整方法，其特征在于，所述步骤一中的脱蜡包括：
步骤1：使用二甲苯IAR浸泡5-7分钟；
步骤2：使用二甲苯IIAR浸泡5-7分钟；
步骤3：使用100％酒精I浸泡50-100秒；
步骤4：使用100％酒精II浸泡50-100秒；
步骤5：使用95％酒精浸泡50-100秒；
步骤6：使用80％酒精浸泡50-100秒；
步骤7：用水清洗。
3.根据权利要求2所述的HE染色及调整方法，其特征在于，所述步骤四还包括使用二甲苯II再次透明，时间为50-100秒。
4.根据权利要求3所述的HE染色及调整方法，其特征在于，所述步骤三中，使用1％伊红酒精浸染之前使用温水或者95％酒精浸泡10-80秒。
5.根据权利要求4所述的HE染色及调整方法，其特征在于，所述步骤四中的脱水操作包括：
步骤a：使用95％酒精浸泡50-100秒；
步骤b：使用95％酒精浸泡50-100秒；
步骤c：使用100％酒精I浸泡50-100秒；
步骤d：使用100％酒精II浸泡50-100秒。
6.根据权利要求5所述的HE染色及调整方法，其特征在于，所述步骤五中使用的中性树胶，预先用二甲苯溶解。
7.根据权利要求6所述的HE染色及调整方法，其特征在于，还包括观察染色结果及染色问题，根据染色问题进行调整。
8.根据权利要求7所述的HE染色及调整方法，其特征在于，所述染色问题及对应的调整方法包括：
如染色切片发白，判定为二甲苯脱蜡时间不够，延长脱蜡时间或者更换二甲苯；
如染色切片发灰，判定为组织固定脱水不佳或者染液配置PH不符，应改进组织固定脱水程序或者改进染液配方；
如染色切片着色不均匀，判定为染液太少或者分布不均，应增加染液量或在染液中加入甘油等增强液体亲和力；
如染色切片染色偏蓝，判定为苏木素染色时间过久或者分化不足，应减少苏木素染色时间或者延长分化时间；
如染色切片染色偏红，判定为伊红染色时间过久或者染色不足，应改进苏木素染色时间或者减少伊红染色时间；
如核着色欠佳，判定为组织脱水不佳，应加强组织固定脱水，将切片用生物穿透剂进行处理以利于苏木素着色。
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Legal Events
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|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20171124 |
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