CN100537750C - 组织石蜡切片脱蜡方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种组织石蜡切片脱蜡方法。该方法将蒸馏水与Triton X-100(聚乙醇辛基苯基醚)以体积比99∶1混合，充分搅拌制备脱蜡液。使用此种溶液脱蜡时，将组织石蜡切片放入第一缸脱蜡液中，于60-70℃温度下恒温浸泡10-20分钟；取出切片后再直接放入第二缸脱蜡液中以相同条件重复上一步操作；然后用水冲洗即完成。如需抗原热修复，将用抗原热修复液配制含1%Triton X-100的脱蜡修复液。本发明不同于以往的石蜡切片脱蜡法，所用脱蜡剂TritonX-100对人体无不良影响、环保、价格低廉，操作步骤简单易行。
Description
【技术领域】
本发明涉及病理学组织切片技术领域，特别是一种具有简易、环保、费用低廉特点的组织石蜡切片脱蜡方法。
【背景技术】
组织石蜡切片是在观察组织形态和免疫组化等定性分析中最常用的一种切片技术，广泛应用于临床病理诊断和实验研究。为了观察组织首先要去除石蜡切片的石蜡，即脱石蜡。组织石蜡切片的常规脱蜡方法是使用有机溶剂，例如使用二甲苯为常用脱蜡剂。在该脱蜡方法中不仅操作烦琐，需要多个步骤，而且二甲苯污染环境、对人体有害。然而为改善这种情况，到目前为止，改良的脱蜡方法仍多以有机溶剂为脱蜡剂，或使用洗洁精溶液脱蜡，但对人体和环境也仍有不良影响。
【发明内容】
本发明的目的旨在为克服现有技术的不足，而提供一种组织石蜡切片脱蜡方法，该方法操作简单，环保、安全。
本发明为解决上述问题公开了一种组织石蜡切片脱蜡方法。其特征在于所说的脱蜡步骤是：将石蜡组织切片放入第一缸脱蜡液中，于60-70℃温度下恒温浸泡10-20分钟；取出切片后再直接放入第二缸脱蜡液中以相同条件重复上一步操作；然后用水冲洗即完成；所说的脱蜡液是用水配制的含按体积1％—1.5％的聚乙醇辛基苯基醚水溶液。
本发明还公开了一种组织石蜡切片作免疫组化需要抗原热修复的组织石蜡切片脱蜡方法。其特征在于所说的脱蜡步骤是：先将脱蜡液预热到95℃至100℃，5-10分钟，再把组织切片放入脱蜡液中浸泡10-20分钟，然后用自来水冲洗即完成；所说的脱蜡液是用抗原修复液配制的含按体积1％-1.5％的聚乙醇辛基苯基醚溶液。
本发明的有益效果是：聚乙醇辛基苯基醚(Triton X-100)对人体无不良影响，操作过程简单易行，不产生环境污染物，且费用低廉，脱蜡效果明确。当用组织石蜡切片作免疫组化需要抗原热修复时，可直接用脱蜡修复液同时进行脱蜡和抗原修复，不需要另行脱蜡。克服了常规脱蜡法操作烦琐、污染环境、有害身体健康的问题。此外本发明的脱蜡液可重复使用2-3次。
【具体实施方式】
本发明的组织石蜡切片脱蜡方法其步骤是：将组织石蜡切片放入第一缸脱蜡液中，于60-65℃温度下恒温浸泡10-15分钟；取出切片后再直接放入第二缸脱蜡液中，于60-65℃温度下恒温再浸泡10-15分钟；然后用自来水冲洗即完成。
当用组织石蜡切片作免疫组化需要抗原热修复时，可直接用用于抗原修复的脱蜡液同时进行脱蜡和抗原修复，不需要另行脱蜡。脱蜡修复时，将用于抗原修复的脱蜡液放入抗原修复盒内预热到所需温度一般95℃以上，5-10分钟，再把组织切片放入抗原修复盒进行脱蜡和抗原修复，时间同一般抗原修复液。此时只用一个缸即可。
其中：
1)脱蜡液的配制
将蒸馏水与Triton X-100(化学名：聚乙醇辛基苯基醚(分析纯))以体积比99:1混合，充分搅拌。
2)用于抗原修复的脱蜡液配制
将抗原修复液，如枸椽酸盐缓冲液或EDTA溶液与Triton X-100以体积比99:1混合，充分搅拌。
实施例：
将按上述方法制备的脱蜡液，倒入两个玻璃染色缸，并放入水浴锅中预热。组织石蜡切片浸泡于其中一缸中，于60℃恒温浸泡10分钟。将组织切片直接取出后，再放入另一缸中，于60℃恒温浸泡10分钟。然后将组织切片从溶液中取出，用自来水冲洗。即可按常规方法再进行苏木素-伊红染色，常规脱水，中性树胶封固等步骤。
将脱蜡液配成用于抗原修复的脱蜡液，用抗原热修复盒修复，方法同一般组织石蜡切片脱蜡后的抗原热修复，组织切片从溶液中取出后，用自来水冲洗，即可行免疫组化染色，常规脱水，中性树胶封固。
本发明采取双盲法阅片，与常规二甲苯脱蜡方法比较，染色结果均无差异，脱蜡液和用于抗原修复的脱蜡液脱蜡效果确切。
Claims (7)
1、一种组织石蜡切片脱蜡方法，其特征在于所说的脱蜡步骤是：将组织石蜡切片放入第一缸脱蜡液中，于60-70℃温度下恒温浸泡10-20分钟；取出切片后再直接放入第二缸脱蜡液中以相同条件重复上一步操作；然后用水冲洗即完成；所说的脱蜡液是用水配制的含按体积1％—1.5％的聚乙醇辛基苯基醚水溶液。
2、根据权利要求1所述的组织石蜡切片脱蜡方法，其特征在于所说的脱蜡液用蒸馏水与聚乙醇辛基苯基醚以体积比99:1充分搅拌混合制备而成。
3、根据权利要求1或2所述的组织石蜡切片脱蜡方法，其特征在于所说的脱蜡液的恒温温度为60-65℃。
4、根据权利要求1或2所述的组织石蜡切片脱蜡方法，其特征在于所说的在脱蜡液中浸泡时间为10-15分钟。
5、根据权利要求1或2所述的组织石蜡切片脱蜡方法，其特征在于所说的冲洗用水是自来水。
6、一种组织石蜡切片脱蜡方法，其特征在于所说的脱蜡步骤是：先将脱蜡液预热到95℃至100℃，5-10分钟，再把组织切片放入脱蜡液中浸泡10-20分钟，然后用自来水冲洗即完成；所说的脱蜡液是用抗原修复液配制的含按体积1％-1.5％的聚乙醇辛基苯基醚溶液。
7、根据权利要求6所述的组织石蜡切片脱蜡方法，其特征在于所说的抗原修复液是枸椽酸盐缓冲液或EDTA溶液。
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