CN107375319B - 一种宠物用无色碘消毒剂及其制备和使用方法 - Google Patents

一种宠物用无色碘消毒剂及其制备和使用方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于医药卫生技术领域，特别公开了一种宠物用无色碘消毒剂及其制备和使用方法。该宠物用无色碘消毒剂，由以下重量份数的原料制成：碘1g，二甲基乙酰胺2‑4ml，浓氨水0.5‑0.8ml。该宠物用无色碘消毒剂的制备方法包括如下步骤：(1)将碘溶解在二甲基乙酰胺中，得到均匀的混合溶液；(2)将步骤(1)制得的混合溶液以一定的比例倒入浓氨水中，混合均匀，在阴凉条件下密封储存，即得该宠物用无色碘消毒剂。该宠物用无色碘消毒剂的使用方法为：摇匀宠物用无色碘消毒剂后，按照1:10000的体积比与水稀释使用。本发明的无色碘消毒剂无黄染性、制备方法简单、具备同时杀灭细菌与寄生虫的特殊消毒优势。

Description

一种宠物用无色碘消毒剂及其制备和使用方法
(一)技术领域
本发明属于医药卫生技术领域，特别涉及一种宠物用无色碘消毒剂及其制备和使用方法。
(二)背景技术
宠物作为产业正在逐渐形成良种繁育、科学饲养、品质改良、犬只的训练、展示比赛、犬粮、犬具、犬药、医疗的产业结构链。随着宠物新品种的不断更新改良，宠物品质的不断提高，宠物相关产业链得到了较快的发展。与此同时，宠物的健康也日益受到宠物饲养主的重视，尤其是宠物皮毛所沾染携带的多种致病菌更直接威胁着宠物饲养主的健康。
目前市场上的宠物用消毒剂主要有次氯酸钠、过氧化氢、乙醇、二氧化氯、碘制剂等，次氯酸钠杀菌谱广、易获得、价格便宜、实用性强，但是稳定性差、作用时间长、易与其他有机物质产生剧毒物质，安全性较差；过氧化氢常用于清洗创面、溃疡，75％的乙醇作用机制是凝固菌体及病毒的蛋白质，但是过氧化氢和乙醇二者均存在氧化性强，对皮肤及黏膜刺激性大的问题；二氧化氯具有广谱性和高效性杀菌效果，其稳定性好、安全性高，但是由于该制剂难获得，成本较高，所以难以大规模推广。碘酊、碘伏、碘溶液等碘制剂以其消毒效果好、毒副作用低、刺激性小、无残留以及无生态毒性等优点而被广泛应用。其中碘酊和碘伏可杀灭细菌繁殖体、真菌和部分病毒宠物临床术前或伤口处理时皮肤、黏膜的消毒，碘伏含醇量低，对皮肤及黏膜的刺激性小，对于大多数细菌甚至霉菌都有较强的杀灭作用；碘溶液主要通过碘与细菌的蛋白质起碘化反应杀死细胞，具有较强的穿透力，甚至可以杀死细菌的芽孢，主要在人类临床治疗中应用于皮肤或粘膜消毒，但碘溶液制剂的成本比较高，使用后产生的黄染性影响美观，严重制约了其大规模推广。
(三)发明内容
本发明提供了一种无黄染性、制备方法简单、能够同时杀灭细菌与寄生虫的的宠物用无色碘消毒剂及其制备和使用方法，解决了现有技术存在的不足。
本发明为解决上述技术问题所采用的技术方案是：
一种宠物用无色碘消毒剂，由以下重量份数的原料制成：碘1g，二甲基乙酰胺2-4ml，浓氨水0.5-0.8ml。
所述浓氨水的质量浓度为25％～28％。
所述宠物用无色碘消毒剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)将碘溶解在二甲基乙酰胺中，得到均匀的混合溶液；
(2)将步骤(1)制得的混合溶液以一定的比例倒入浓氨水中，混合均匀，在阴凉条件下密封储存，即得该宠物用无色碘消毒剂。
步骤(1)中碘与二甲基乙酰胺的混合温度为0～4℃；步骤(2)混合溶液在0～4℃环境下倒入浓氨水中。
所述宠物用无色碘消毒的储存温度为0～4℃。
所述宠物用无色碘消毒剂的使用方法为：摇匀所述宠物用无色碘消毒剂后，按照1:10000的体积比与水稀释使用。
所述宠物用无色碘消毒剂在5～40℃温度下使用。
本发明宠物用无色碘消毒剂及其制备和使用方法的有益效果是：寻找了一种价格适中、溶解度高、安全无害的有机试剂二甲基乙酰胺，其碘溶液溶解度高，而无需碘化钾的助溶，减少了成本；其可以代替常见的乙醇试剂，既能与水无限混溶又能溶解碘单质；而且制备工艺简单、无黄染性、无刺激性、无毒性，扩大了其使用范围；产品应用后能够分解成碘单质和氨水，能够分别起到杀灭作用，同时杀灭细菌和寄生虫，达到了和一般只能杀灭细菌或寄生虫消毒剂同样的杀菌效果，对大肠杆菌和巴氏杆菌的杀灭率达到99.9％以上，阻止寄生虫孢子化后繁殖达90％以上。当温度较高时(5℃及以上)，本发明宠物用无色碘消毒剂会发生分解反应，此时分子碘杀灭细菌，氨水杀灭寄生虫，氮气作为无公害气体排放，无污染问题。
(四)具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于此，实施例中的制备方法均为常规制备方法，不再详述。
实施例1：该宠物用无色碘消毒剂，由以下重量的原料制成：碘1g，二甲基乙酰胺2ml，质量浓度为25％的浓氨水0.5ml。
该宠物用无色碘消毒剂的制备方法，采用如下步骤：
(1)在0℃温度下，将碘溶解在二甲基乙酰胺中，得到均匀的混合溶液；
(2)将步骤(1)制得的混合溶液在0℃环境下倒入浓氨水中，混合均匀，在0～4℃的阴凉条件下密封储存，即得该宠物用无色碘消毒剂。
该宠物用无色碘消毒剂的使用方法：摇匀该宠物用无色碘消毒剂后，按照1:10000的体积比与水混合稀释，在5℃温度下使用。
该宠物用无色碘消毒剂在制备时，发生的反应为3I2+7NH3＝NI3(6NH3)+3HI，使用时(5℃及以上)，发生分解反应：2NI3(6NH3)＝N2↑+3I2+12NH3，此时分子碘杀灭细菌，氨水杀灭寄生虫，氮气作为无公害气体排放，无污染问题。
实施例2：该宠物用无色碘消毒剂，由以下重量的原料制成：碘1g，二甲基乙酰胺2.5ml，质量浓度为26％的浓氨水0.6ml。
该宠物用无色碘消毒剂的制备方法，采用如下步骤：
(1)在1℃温度下，将碘溶解在二甲基乙酰胺中，得到均匀的混合溶液；
(2)将步骤(1)制得的混合溶液在1℃环境下倒入浓氨水中，混合均匀，在0～4℃的阴凉条件下密封储存，即得该宠物用无色碘消毒剂。
该宠物用无色碘消毒剂的使用方法：摇匀该宠物用无色碘消毒剂后，按照1:10000的体积比与水混合稀释，在20℃温度下使用。
实施例3：该宠物用无色碘消毒剂，由以下重量的原料制成：碘1g，二甲基乙酰胺3ml，质量浓度为27％的浓氨水0.73ml。
该宠物用无色碘消毒剂的制备方法，采用如下步骤：
(1)在3℃温度下，将碘溶解在二甲基乙酰胺中，得到均匀的混合溶液；
(2)将步骤(1)制得的混合溶液在3℃环境下倒入浓氨水中，混合均匀，在0～4℃的阴凉条件下密封储存，即得该宠物用无色碘消毒剂。
该宠物用无色碘消毒剂的使用方法：摇匀该宠物用无色碘消毒剂后，按照1:10000的体积比与水混合稀释，在30℃温度下使用。
实施例4：该宠物用无色碘消毒剂，由以下重量的原料制成：碘1g，二甲基乙酰胺4ml，质量浓度为28％的浓氨水0.8ml。
该宠物用无色碘消毒剂的制备方法，采用如下步骤：
(1)在4℃温度下，将碘溶解在二甲基乙酰胺中，得到均匀的混合溶液；
(2)将步骤(1)制得的混合溶液在4℃环境下倒入浓氨水中，混合均匀，在0～4℃的阴凉条件下密封储存，即得该宠物用无色碘消毒剂。
该宠物用无色碘消毒剂的使用方法：摇匀该宠物用无色碘消毒剂后，按照1:10000的体积比与水混合稀释，在40℃温度下使用。
对比试验：
为了验证本发明宠物用无色碘消毒剂的使用效果，本发明申请人进行了药物杀菌效果测试、寄生虫杀灭测试以及药物刺激性和毒性的试验测试，具体如下：
1、杀菌效果测试
1.1材料：
供试药品：本发明实施例1-4制备得到的宠物用无色碘消毒剂；聚维酮碘溶液：购自山东省健牧生物药业有限公司，规格1％，批号20161102。
试验菌株：大肠杆菌(ATCC 8099)，购自中国工业微生物菌种保藏管理中心；巴氏杆菌(禽株CAU0760)，购自中国兽药监察所。
试验培养基：LB培养基、营养琼脂培养基、含6％小牛血清营养琼脂培养基、马丁肉汤。
中和剂和稀释液：中和剂为0.5％硫代硫酸钠-0.2％卵磷脂-3％吐温80磷酸盐缓冲液；稀释液为胰蛋白胨生理盐水。
1.2方法：
1.2.1制备菌悬液：
大肠杆菌、巴氏杆菌：开封冻干菌种后，以LB培养基溶化悬浮菌体，接种到营养琼脂培养基平皿上划线培养，37℃培养至细菌达到生长平衡期时选择典型的单体菌落在合适的固体培养基斜面上传代。
1.2.2悬液定量杀菌试验程序：
取5μL大肠杆菌接种于4mL的LB培养基中，取5μL巴氏杆菌接种于含6％小牛血清的LB培养基上，分别恒温培养18小时，细菌浓度比浊测定法测定菌种，用胰蛋白胨生理盐水稀释至106～107个/mL的试验菌悬液备用。
吸取0.5mL试验菌菌悬液与4.5mL供试药品混合均匀，作用时间为5min、10min、15min、30min、60min。
吸取0.5mL作用后的混合液与4.5mL中和剂混合均匀，中和作用时间为10min。
将该样液用稀释液胰蛋白胨生理盐水稀释三个梯度(10-1、10-2、10-3)，吸取每个梯度的稀释液1.0mL与普通营养培养基混合均匀，37℃培养24h活菌计数，计算平均杀灭率。
1.2.3结果与分析
表1供试药品对大肠杆菌的杀灭效果(配比1:10000)
Figure BDA0001395869930000061
注：阴性对照无菌生长
从表1中数据可以看出，本发明宠物用无色碘消毒剂对大肠杆菌的杀灭效果优异，相同浓度下较常见碘消毒剂聚维酮碘杀灭效果较好。
表2供试药品对巴氏杆菌的杀灭效果
Figure BDA0001395869930000062
Figure BDA0001395869930000071
注：阴性对照无菌生长
从表2中数据可以看出，本发明宠物用无色碘消毒剂的杀灭效果优异，相同浓度下较常见碘消毒剂聚维酮碘杀灭效果较好。
2、寄生虫杀灭效果测试
2.1材料
供试药品：本发明实施例1-4制备得到的宠物用无色碘消毒剂。
试剂：0.9％生理盐水，3％福尔马林，饱和盐水，蒸馏水。
虫卵的采集与纯化：
犬蛔虫成虫由山东农业大学动物医学院馈赠，于生理盐水保存，带回实验室后对虫体进行解剖，收集其消化系统和生殖系统内容物置于碾磨内，捣碎。捣碎后的内容物置于烧杯中，加入0.9％生理盐水和3％福尔马林混合物，静置10min后纱布过滤。用离心机将滤液以1 500r/min离心10min，去上清液，加入适量的饱和盐水1 500r/min离心10min，用打环的方法将漂浮于离心管上层的虫卵转移到另一离心管，再次以1 500r/min离心10min，去上清液，得到纯净虫卵，将纯净虫卵保存于盛有20mL0.9％生理盐水和3％福尔马林混合液的烧杯中，置于4℃冰箱。计数：将20mL虫卵液摇匀，取40μL于玻片上，在显微镜下观察，将虫卵数完，数的10个虫卵。根据麦克马斯特计数法，此次实验虫卵总数约5000个。
2.2试验方法
2.2.1分组
将收集的虫卵液以400μL/份分成41份，其中1份为对照。其他的48份按每组4份分成6组，每组按作用时间分为5min，10min，15min，30min，60min。
2.2.2药物的作用与洗药
按上述分组分别添加每个实施例的药物(按照1:10000稀释)，于37℃恒温箱培养，作用相应的时间后，离心机1 500r/min离心10min，弃去上层药液，达到洗药的目的。将洗去药物的虫卵转移到盛有0.9％生理盐水与3％福尔马林混合液的培养皿中，与对照组置37℃的恒温箱中培养。
2.2.3镜检
培养10到15天后，将培养液滴于载玻片，在显微镜下鉴定其形态，判断虫卵死活。
2.2.4判定
高倍镜下拍照，单细胞的判断为死亡，二细胞或者二细胞以后的判断为成活。计算出虫卵的死亡率。
2.3实验结果
表3供试药品对蛔虫卵的杀灭情况
Figure BDA0001395869930000081
从表2中数据可以看出，本发明宠物用无色碘消毒剂释放的氨能较好杀灭典型宠物寄生虫蛔虫，大大减少人畜共患病的传播几率。
3、刺激性实验
3.1皮肤刺激性实验
3.1.1供试药品：本发明制备得到的宠物用无色碘消毒剂。
3.1.2实验对象：皮肤完好的健康家兔3只。
3.1.3试验方法：
在试验前24h，用脱毛剂将家兔背部脊柱两侧的毛去掉，不得损伤皮肤，然后再将实施例1供试药品直接涂布在面积为2.5cm×2.5cm的一侧去毛完整皮肤上。
观察家兔无色碘皮肤刺激反应症状，并根据皮肤刺激反应的评分标准进行评分。
3.1.4试验结果：
试验结果表明，本发明宠物用无色碘消毒剂经家兔皮肤涂抹后的刺激反应症状主要包括：给药后24h，3只家兔均未出现皮肤刺激反应的症状；给药后48h时，发现有1只家兔出现勉强可见的红斑；而给药后72h时，3只家兔均未出现皮肤刺激反应的症状。根据皮肤刺激反应的评分标准，计算所得无色碘皮肤刺激反应积分均值最大值为0.33，属于无刺激性产品。
3.2眼刺激性实验
3.2.1供试药品：本发明制备得到的宠物用无色碘消毒剂。
3.2.2实验对象：双眼正常的健康家兔4只。
3.2.3试验方法：
将供试药品滴加入家兔的一只眼睛，另一只眼睛不滴加，作为阴性对照，隔1h、24h、48h、72h观察家兔双眼是否产生损伤。根据眼损伤程度的评分标准进行评分，计算并评定眼刺激强度。
3.2.4实验结果：
试验结果表明，本发明宠物用无色碘消毒剂眼刺激反应积分均值最大值为2.5，属于无刺激性产品。
4、毒性试验
4.1对斑马鱼的急性毒性试验
4.1.1供试药品：本发明制备得到的宠物用无色碘消毒剂实施例1。
4.1.2试验对象：随机选取30条斑马鱼(Brachydanio rerio)测量体重、体长，经测定体重、体长满足试验要求。
4.1.3试验方法：
以99.8％重铬酸钾为参比物质；统一试验条件：水温21℃～25℃，单次试验温度控制在±2℃；光照/黑暗：16h:8h；溶解氧浓度不低于空气饱和值的60％；水质硬度10～250mg/L之间(以CaCO3计)；最大承载量为每升水1克斑马鱼；试验期间不喂食；pH值为6.0～8.5。
用本发明宠物用无色碘消毒剂配制7个不同有效碘(I)浓度：4mg/L、4.48mg/L、5.018mg/L、5.620mg/L、6.294mg/L、7.049mg/L、7.895mg/L进行试验，计算斑马鱼的LC50值。
4.1.4试验结果：
试验结果发现，本发明宠物用无色碘消毒剂对斑马鱼96h的LC50值为5.541mg/L；95％置信限为5.291mg/L～5.842mg/L。消毒完后的水如果直接排放到水体，经水体稀释，本发明宠物用无色碘消毒剂更不会对斑马鱼等造成环境毒性。
4.2对蚯蚓的急性毒性试验
4.2.1供试药品：本发明制备得到的宠物用无色碘消毒剂。
4.2.2试验对象：试验选取赤子爱胜蚯蚓(Eisenia foetida)为试验动物，引入后在蚯蚓实验室进行保种繁殖，试验前置于人工气候箱中进行驯养。
4.2.3试验方法：
以氯乙酰胺作为参比物质，开展蚯蚓急性毒性试验。统一饲养条件：温度20±2℃；湿度70％～90％，光强400lx～800lx，连续光照；试验浓度为100mg/kg干土，计算蚯蚓的LC50值。
4.2.4试验结果：
试验结果发现，本发明宠物用无色碘消毒剂对蚯蚓的急性毒性试验中，以100mg/kg干土处理，染毒后第14天死亡数为0，LC50＞100mg/kg干土。消毒完后的水如果直接排放到土壤，稀释后本发明宠物用无色碘消毒剂更不会对蚯蚓造成环境毒性。
5、对织物损坏试验
5.1材料
试验设备：100KN万能材料试验机，型号HT-2402，购自宏达检测仪器(上海)有限公司。
消毒剂的配制：称样品溶于水配置成消毒浓度1:10000。
5.2试验方法
将织物包括棉、毛、丝、化纤布等经向和纬向剪成5×20cm2的布条，试验组为50mg/L浓度的无色碘消毒粉溶液，浸泡10min和24h，然后漂净晾干。每次经向与纬向各测5条。对照组取试验组邻近部位的织物，以水代替消毒液作同样处理。
观察并与对照组比较，判断有无褪色或着色。
试验中的前处理及后续测定由山东省农业科学院家禽研究所完成，万能材料试验机以100-110mm/min的速度对拉，检测织物的断裂强度(kg/(5×20cm2))。
计算断裂强度降低率(％)＝100％×(对照断裂强度-消毒后断裂强度)/对照断裂强度。
5.3试验结果
表4-4对织物损坏试验结果
Figure BDA0001395869930000121
无色碘消毒粉在常用消毒浓度下，长时间浸泡(24h)会在一定程度上降低其断裂强度，但是在10min消毒时间内几乎不影响其性能。考察黄染性发现，在所试浓度下对棉、麻、毛、化纤均可维持原来的颜色，无黄染性，充分体现了本品的优点。

Claims (4)

1.一种宠物用无色碘消毒剂，其特征在于，由以下重量份数的原料制成：碘1g，二甲基乙酰胺2-4ml，浓氨水0.5-0.8ml；
所述宠物用无色碘消毒剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)将碘溶解在二甲基乙酰胺中，得到均匀的混合溶液；
(2)将步骤(1)制得的混合溶液以一定的比例倒入浓氨水中，混合均匀，在阴凉条件下密封存储，即得该宠物用无色碘消毒剂；
所述浓氨水的质量浓度为25％～28％；
步骤(1)中碘与二甲基乙酰胺的混合温度为0～4℃；步骤(2)混合液在0～4℃环境下倒入浓氨水中。
2.根据权利要求1所述的一种宠物用无色碘消毒剂，其特征在于，所述宠物用无色碘消毒的存储温度为0～4℃。
3.根据权利要求1或2任一所述的一种宠物用无色碘消毒剂，其特征在于，摇匀所述宠物用无色碘消毒剂后，按照1:10000的体积比与水混合稀释使用。
4.根据权利要求1所述的一种宠物用无色碘消毒剂的使用方法，其特征在于，所述宠物用无色碘消毒剂在5～40℃温度下使用。
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